一种从桑树中提取高纯氧化白藜芦醇的工艺.pdf

本发明提供一种从桑树中提取高纯氧化白藜芦醇的工艺，包括：将干燥粉碎的桑树用乙醇溶剂重复提取2-3次，合并滤液，浓缩滤液至固形物在10%-15%，加入乙酸乙酯萃取2-3次，合并乙酸乙酯溶液；将乙酸乙酯溶液浓缩至膏状，加入乙醇充分溶解膏状物质，加入25-30倍的脱色剂脱色，再次加入乙醇，充分搅拌后过滤得到滤液，浓缩至无醇状态，低温环境下静止20-30h，过滤得到滤渣；加入石油醚，充分搅拌后低温静止20-30h，过滤得到滤渣；加入乙醇溶液，充分搅拌后，低温静置20-30h，过滤得到滤渣，即为氧化白藜芦醇提取物。本发明分离纯化后的氧化白藜芦醇纯度达到90%以上，回收率达到85%以上，且其工艺简单，操作简便，成本低，能实现大规模生产。

权利要求书
1.   一种从桑树中提取高纯氧化白藜芦醇的工艺，其特征在于，包括以下步骤：
（1）将干燥粉碎的桑树原料加入乙醇溶剂，料液质量体积比为1：6-8，在50℃-80℃下提取时间1-2.5h，重复提取2-3次，合并滤液；
 （2）将滤液浓缩至固形物含量10%-15%，加入乙酸乙酯萃取，充分搅拌后，静止至分层，分离出乙酸乙酯层，重复2-3次乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯溶液；
 （3）将乙酸乙酯容易浓缩至膏状，加入乙醇溶液充分溶解膏状物质；加入脱色剂，充分搅拌后过滤；
 （4）将滤液浓缩至无醇状态，低温环境下静止20-30h，过滤得到滤渣；
 （5）在步骤（4）所得滤渣中加入石油醚，充分搅拌后低温静止20-30h，过滤得到滤渣；
 （6）在步骤（5）所得滤渣中加入乙醇溶液，充分搅拌后，低温静置20-30h，过滤得到滤渣，即为氧化白藜芦醇提取物。

2.  根据权利要求1所述的从桑树中提取高纯氧化白藜芦醇的工艺，其特征在于，步骤（1）中，所述桑树原料为除桑树叶以外的桑树任何部位，包括树根皮和树根芯、树干皮和树干芯、树枝皮和树枝芯。

3.  根据权利要求1或2所述的所述的从桑树中提取高纯氧化白藜芦醇的工艺，其特征在于，步骤（1）中，所述干燥后的桑树原料的水分含量为10-15%，粉碎后过5-10目筛。

4.  根据权利要求1所述的所述的从桑树中提取高纯氧化白藜芦醇的工艺，其特征在于，步骤（1）中，提取条件为：料液重量比1：7，乙醇溶剂纯度80%，提取温度60℃，提取时间1.5h，重复搅拌提取3次。

5.  根据权利要求1所述的所述的从桑树中提取高纯氧化白藜芦醇的工艺，其特征在于，步骤（2）中，用乙酸乙酯萃取氧化白藜芦醇时，浓缩液与乙酸乙酯的体积比为1:2-5。

6.  根据权利要求1所述的所述的从桑树中提取高纯氧化白藜芦醇的工艺，其特征在于，步骤（3）中，所述乙醇溶液的浓度为75%-95%，膏状物和乙醇溶液的质量体积比为1:15-30。

7.  根据权利要求1所述的所述的从桑树中提取高纯氧化白藜芦醇的工艺，其特征在于，步骤（3），所述脱色剂为活性炭、氧化铝、硅藻土、活性白土中的一种。

8.  根据权利要求1或7所述的所述的从桑树中提取高纯氧化白藜芦醇的工艺，其特征在于，步骤（3），所述脱色剂的加入量为膏状物质量的25-30倍。

9.  根据权利要求1所述的所述的从桑树中提取高纯氧化白藜芦醇的工艺，其特征在于，步骤（4）中，所述滤渣和石油醚的质量体积比为1：15-25。

10.  根据权利要求1所述的所述的从桑树中提取高纯氧化白藜芦醇的工艺，其特征在于，步骤（5）中，所述乙醇溶液的纯度为10%-20%，滤渣与乙醇溶液的质量体积比为1：15-25。

说明书一种从桑树中提取高纯氧化白藜芦醇的工艺
技术领域
本发明涉及植物有效成分的提取领域，特别是提供一种从桑树中提取氧化白藜芦醇的工艺。
技术背景
桑树（Morus alba L.）为荨麻目桑科植物，原产中国中部，现南北各地广泛栽培，尤以长江中下游各地为多，叶、果和根皮可入药。近年研究证实，氧化白藜芦醇具备多种有益的生物活性，如具有抑制酪氨酸酶活性和黑色素生成果蔬防腐抗菌活性、抗单纯疱疹病毒活性、抗水痘带状疱疹病毒活性及抗艾滋病病毒等活性，同时还具有抗炎消肿、抗氧化、抗细胞凋亡及神经保护等作用。氧化白藜芦醇可用于制备抑制α－葡萄糖苷酶活性的药物、食品或保健品；可用于制备降血糖药物、食品或保健品；还可用于制备治疗或预防糖尿病及其并发症的药物、食品或保健品，为糖尿病患者带来福音。因此，随着研究开发的不断深入，氧化白藜芦醇有望在医学、保健护肤及果蔬保鲜等领域获得广泛应用，因而引起越来越多的关注。
文章《桑枝中氧化白藜芦醇的分离与鉴定》（蚕业科学,2011,37(5):0948-0951）中描述一种从桑枝中有效提取氧化白藜芦醇活性物的方法，具体是采用乙醇提取法获得桑枝粗提液，通过硅胶柱、葡萄糖柱柱层析法分离制备桑枝氧化白藜芦醇样品。该方法存在问题主要是原料的单一，仅限于桑枝，且利用柱层析方法制备氧化白藜芦醇，存在成本高、难大规模生产、操作复杂的问题。
专利《氧化白藜芦醇的提取方法》（ZL101591680）描述一种氧化白藜芦醇的提取方法，其原料是桑皮（桑枝皮或桑根皮），而文中描述的提取方法原料是桑树根茎，即除了叶子，都可以作为氧化白藜芦醇的提取原料。该方法存在问题主要是原料的单一，仅限于桑皮，且利用柱层析方法制备氧化白藜芦醇，存在成本高、难大规模生产、操作复杂的问题。
专利《氧化白藜芦醇在制备抗卵巢衰老药物中的应用》（ZL103070849A）是与氧化白藜芦醇有关的有效专利之一，专利中主要公开了氧化白藜芦醇在制备抗卵巢衰老药物中的应用，表明氧化白藜芦醇可治疗多种卵巢衰退疾病，如多囊卵巢综合症、功能失调性子宫出血等。与文中描述的氧化白藜芦醇提取分离方法有较大不同。
以上可知，现有的提取氧化白藜芦醇的工艺方法较多，但总的来说，现有工艺均技术相对陈旧，生产周期长，成本高，产品得率和质量不高。
发明内容
为克服上述缺点，本发明的目的在于提供一种从桑树中提取氧化白藜芦醇的新工艺，具有提取原料多元化、工艺简单，成本低，产品得率和纯度高等特点。
为实现上述目的，本发明的实施方案为: 一种从桑树中提取高纯氧化白藜芦醇的工艺，包括以下步骤：
（1）将干燥粉碎的桑树原料加入乙醇溶剂，料液质量体积比为1：6-8，在50℃-80℃下提取时间1-2.5h，重复提取2-3次，合并滤液；
 （2）将滤液浓缩至固形物含量10%-15%，加入乙酸乙酯萃取，充分搅拌后，静止至分层，分离出乙酸乙酯层，重复2-3次乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯溶液；
 （3）将乙酸乙酯容易浓缩至膏状，加入乙醇溶液充分溶解膏状物质；加入脱色剂，充分搅拌后过滤；
 （4）将滤液浓缩至无醇状态，低温环境下静止20-30h，过滤得到滤渣；
 （5）在步骤（4）所得滤渣中加入石油醚，充分搅拌后低温静止20-30h，过滤得到滤渣；
 （6）在步骤（5）所得滤渣中加入乙醇溶液，充分搅拌后，低温静置20-30h，过滤得到滤渣，即为氧化白藜芦醇提取物。
     步骤（1）中，所述桑树原料为除桑树叶以外的桑树任何部位，包括树根皮和树根芯、树干皮和树干芯、树枝皮和树枝芯。干燥后的桑树原料的水分含量为10-15%，粉碎后过5-10目筛。
     步骤（1）中，最佳提取条件为：料液重量比1：7，乙醇溶剂纯度80%，提取温度60℃，提取时间1.5h，重复搅拌提取3次。
     步骤（2）中，用乙酸乙酯萃取氧化白藜芦醇时，浓缩液与乙酸乙酯的体积比为1:2-5。
     步骤（3）中，所述乙醇溶液的纯度为75%-95%，膏状物和乙醇溶液的质量体积比为1:15-30。所述脱色剂为活性炭、氧化铝、硅藻土、活性白土中的一种。所述脱色剂的加入量为膏状物质量的25-30倍。
步骤（4）中，所述滤渣和石油醚的质量体积比为1：15-25。
步骤（5）中，所述乙醇溶液的纯度为10%-20%，滤渣与乙醇溶液的质量体积比为1：15-25。
    与现有技术相比，本发明得到高纯氧化白藜芦醇的制备方法有以下优点：
1、 提取原料多元化，除了桑树叶，其他部位都可以提取氧化白藜芦醇，包括桑树的根与茎，即包括树根皮和树根芯、树干皮和树干芯、树枝皮和树枝芯，能够将最大化利用桑树的部位。
2、 工艺简单，操作简便，成本低，能实现大规模生产。
3、 分离纯化后的氧化白藜芦醇纯度达到90%以上，高纯的提取物具备安全，更容易吸收的特点，且制备工艺的回收率达到85%以上。
4、 得到的氧化白藜芦醇颜色呈现淡黄色至白色，制备工艺的脱色效果很好。
5、 分离纯化得到的氧化白藜芦醇为天然产物，对比合成的氧化白藜芦醇在安全问题上具有保障性。
附图说明
图1 氧化白藜芦醇标准品液相图；
图2 本发明方法第（2）步中氧化白藜芦醇提取液液相图；
图3 本发明最终制备得到的氧化白藜芦醇样品的液相。
具体实施方式
实施例1：
一种桑树中提取高纯氧化白藜芦醇工艺，包括以下步骤：
（1）先将干燥的桑树根茎粉碎，过10目筛；
（2）按桑树根茎和乙醇溶液质量体积比1:8的比例加入60%纯度的乙醇溶剂，在80℃对粉碎后的桑树根茎进行搅拌提取，提取时间为2.5h，过滤得到滤液；重复搅拌提取4次，合并滤液；
（3）将乙醇滤液浓缩至原体积的十分之一，测定固形物，将固形物控制在10%-15%，加入浓缩液体积5倍的乙酸乙酯萃取氧化白藜芦醇，充分搅拌后，静止至分层，分离出乙酸乙酯层；重复3次乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯溶液；
（4）将乙酸乙酯容易浓缩至膏状，按膏状物和乙醇质量体积比1:30的比例加入75%纯度的乙醇，充分溶解膏状物质；
（5）加入膏状物质重量25倍的氧化铝。充分搅拌后过滤得到滤液；再次加入滤液体积30倍的75%纯度的乙醇，充分搅拌后过滤得到滤液，合并滤液，重复此操作3次；
（6）将乙醇滤液浓缩至无醇状态，低温环境下静止24h，过滤得到滤渣；
（7）按滤渣和石油醚质量体积比1:15的比例加入石油醚，充分搅拌后低温静止24h，过滤得到滤渣；
（8）按滤渣和乙醇溶液质量体积比1:25的比例加入20%纯度的乙醇溶液，充分搅拌后，低温静置24h，过滤得到滤渣，即为氧化白藜芦醇提取物，纯度达到90.1%，回收率达到87.3%。
 本发明上述实施例所述乙醇溶液为乙醇水溶液。下同。
实施例2：
一种桑树中提取高纯氧化白藜芦醇工艺，包括以下步骤：
（1）先将干燥的桑树根茎粉碎，过10目筛；
（2）按桑树根茎和乙醇溶液质量体积比1：7的比例加入70%纯度的乙醇溶剂，在70℃对粉碎后的桑树根茎进行搅拌提取，提取时间为2h，过滤得到滤液；重复搅拌提取3次，合并滤液；
（3）将乙醇滤液浓缩至原体积的十分之一，测定固形物，将固形物控制在10%-15%，加入4倍乙酸乙酯萃取氧化白藜芦醇，充分搅拌后，静止至分层，分离出乙酸乙酯层；重复3次乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯溶液；
（4）将乙酸乙酯容易浓缩至膏状物，按膏状物和乙醇质量体积比1：25的比例加入80%纯度的乙醇，充分溶解膏状物质；
（5）加入膏状物质量26倍的硅藻土。充分搅拌后过滤得到滤液；再次加入滤液体积25倍的80%纯度的乙醇，充分搅拌后过滤得到滤液，合并滤液，重复此操作4次；
（6）将乙醇滤液浓缩至无醇状态，低温环境下静止24h，过滤得到滤渣；
（7）按滤渣和石油醚质量体积比1:20的比例加入石油醚，充分搅拌后低温静止24h，过滤得到滤渣；
（8）按滤渣和乙醇溶液质量体积比1:20的比例加入20%纯度的乙醇溶液，充分搅拌后，低温静置24h，过滤得到滤渣，即为氧化白藜芦醇提取物，纯度达到93.5%，回收率达到76.4%。
实施例3：
一种桑树中提取高纯氧化白藜芦醇工艺，包括以下步骤：
（1）先将干燥的桑树根茎粉碎，过10目筛；
（2）按桑树根茎和乙醇溶液质量体积比1:7的比例加入80%纯度的乙醇溶剂，在60℃对粉碎后的桑树根茎进行搅拌提取，提取时间为1.5h，过滤得到滤液；重复搅拌提取3次，合并滤液；
（3）将乙醇滤液浓缩至原体积的十分之一，测定固形物，将固形物控制在10%-15%，加入3倍乙酸乙酯萃取氧化白藜芦醇，充分搅拌后，静止至分层，分离出乙酸乙酯层；重复2次乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯溶液；
（4）将乙酸乙酯容易浓缩至膏状物，按膏状物和乙醇质量体积比1:20的比例加入85%纯度的乙醇，充分溶解膏状物质；
（5）加入膏状物质量28倍的活性炭。充分搅拌后过滤得到滤液；再次加入滤液体积20倍的85%纯度的乙醇，充分搅拌后过滤得到滤液，合并滤液，重复此操作4次；
（6）将乙醇滤液浓缩至无醇状态，低温环境下静止24h，过滤得到滤渣；
（7）按滤渣和石油醚质量体积比1:20的比例加入石油醚，充分搅拌后低温静止24h，过滤得到滤渣；
（8）按滤渣和乙醇溶液质量体积比1:20的比例加入15%纯度的乙醇溶液，充分搅拌后，低温静置24h，过滤得到滤渣，即为氧化白藜芦醇提取物，纯度达到94.2%，回收率达到87.7%。
实施例4：
一种桑树中提取高纯氧化白藜芦醇工艺，包括以下步骤：
（1）先将干燥的桑树根茎粉碎，过10目筛；
（2）按桑树根茎和乙醇溶液质量体积比1：6的比例加入55%-95%纯度的乙醇溶剂，在50℃-80℃对粉碎后的桑树根茎进行搅拌提取，提取时间为1h，过滤得到滤液；重复搅拌提取2次，合并滤液；
（3）将乙醇滤液浓缩至原体积的十分之一，测定固形物，将固形物控制在10%-15%，加入2倍乙酸乙酯萃取氧化白藜芦醇，充分搅拌后，静止至分层，分离出乙酸乙酯层；重复2次乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯溶液；
（4）将乙酸乙酯容易浓缩至膏状，按膏状物和乙醇质量体积比1:20的比例加入95%纯度的乙醇，充分溶解膏状物质；
（5）加入膏状物质量30倍的脱色剂，脱色剂包括活性炭、氧化铝、硅藻土、活性白土。充分搅拌后过滤得到滤液；再次加入滤液体积15倍的95%纯度的乙醇，充分搅拌后过滤得到滤液，合并滤液，重复此操作5次；
（6）将乙醇滤液浓缩至无醇状态，低温环境下静止24h，过滤得到滤渣；
（7）按滤渣和石油醚质量体积比1:25的比例加入石油醚，充分搅拌后低温静止24h，过滤得到滤渣；
（8）按滤渣和乙醇溶液质量体积比1:15的比例加入10%纯度的乙醇，充分搅拌后，低温静置24h，过滤得到滤渣，即为氧化白藜芦醇提取物，纯度达到91.7%，回收率达到75.9%。