维生素D的类似物 本发明涉及作为有用的新工业产品的维生素D双芳族类似物。
本发明还涉及它们的制备方法，以及它们在作为人药或兽药使用的药物组合物中或在化妆品组合物中的应用。
本发明的化合物在细胞增生和分化方面具有显著的活性，更具体在局部与系统治疗与角质化紊乱相关的皮肤病(或其它)、炎症和/或免疫变态反应成分的疾病和外胚层源组织(皮肤、上皮等)的过度增生，这种过度增生是良性的或恶性的，方面找到应用。这些化合物还可以用于抗皮肤衰老，这种衰老是光诱发的或年龄导致的，以及用于治疗伤口愈合障碍。
还可以将本发明的化合物用于人体和毛发卫生的化妆组合物中。
维生素D是一种预防和治疗软骨矿化不足(佝偻病)和骨矿化不足(软骨病)，甚至老年人某些骨质疏松症的主要维生素。但是，现在人们已接受，维生素D的功能扩展超过调节骨新陈代谢和钙体内平衡的范围。在这些作用中，可以列举它在细胞增生和分化方面的作用以及控制免疫预防的作用。它们的发现开辟了皮肤病学、癌症学以及在自体免疫疾病领域和器官或组织移植领域中新的治疗途径。
提供有效的治疗长期与这种维生素地毒性问题相抵触(有时致死的高钙血症)。实际上，合成出这种维生素D的结构类似物，其中某些类似物只保留了分化性质，没有钙新陈代谢方面的作用。
本申请人已经在申请WO 00/26167(D1)中提出与维生素D类似的新化合物，这种化合物表明在增生和细胞分化方面的选择性活性，没有高钙血症的特性。这些与维生素D类似的化合物特别易于合成，因此与现有已知的那些化合物相比更经济一些。
本申请人惊奇地发现，在申请WO 00/26167(D1)中未具体描述，但证实其描述的通式的某些化合物表明，生物学活性大大高于具体描述化合物的生物活性。这种活性如此强到使它接近天然维生素D的活性。
因此，本发明涉及至少一种选自下述化合物的化合物：
-(4E，6E)-7-{3-[2-(3，4-双-羟基甲基-苯基)-乙基]-苯基}-3-乙基-壬-4，6-二烯-3-醇，
-(E)-6-[3-(3，4-双-羟基甲基-苄氧基)-苯基]-1，1，1-三氟-2-三氟甲基-辛-5-烯-3-炔-2-醇，
-(3E，5E)-6-[3-(3，4-双-羟基甲基-苄氧基)-苯基]-1，1，1-三氟-2-三氟甲基-辛-3，5-二烯-2-醇，
-(E)-6-{3-[2-(3，4-双-羟基甲基-苯基)-乙基]-苯基}-1，1，1-三氟-2-三氟甲基-辛-5-烯-3-炔-2-醇，
-(3E，5E)-6-{3-[2-(3，4-双-羟基甲基-苯基)-乙基]-苯基}-1，1，1-三氟-2-三氟甲基-辛-3，5-二烯-2-醇，
以及它们的几何异构体，一个或多个羟基官能团被-(C＝O)-R类保护基团保护的化合物，其中R代表具有1-6个碳原子的直链或支链烷基，或具有6-10个碳原子的芳基，或具有7-11个碳原子的芳烷基，芳基或芳烷基可以被羟基、有1-3个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基或氨基单取代或双取代，及其混合基团。
关于具有1-6个碳原子的直链或支链烷基，是指甲基、乙基、异丙基、叔丁基或己基。
关于具有6-10个碳原子的芳基，是指苯基或萘基。
关于具有7-11个碳原子的芳烷基，是指苄基或甲基萘基。
关于卤素原子，是指氟、溴或氯原子。
本发明还有一个目的是前面指出的化合物的制备方法。
图1-4表示可以用于制备本发明化合物的反应简图。
因此，使用衍生物(6)，在例如THF的溶剂中，在-78℃下通过与乙基锂反应，然后在四丁基氟化铵(fluor-w-e de tétrabutytammonium)存在下使羟基去保护，这样可以得到实施例1的化合物(图1)。
使用3-溴丙苯基酮(1)，通过下述反应可以得到化合物(6)：
-通过以二氧戊环形式保护酮官能团，然后在DMF存在下用相应的lithien生成醛官能团，这样生成衍生物(2)，
-通过膦酸酯衍生物(化合物A)与苯甲醛(2)之间的Homer-Emmons类反应，然后在炭载钯存在下氢化生成衍生物(3)，
-在铝和锂双氢化物存在下还原酯官能团，在对甲苯磺酸存在下酮去保护，和以叔丁基二甲基甲硅烷基形式保护醇官能团，这样生成衍生物(4)，
-通过与膦酰基乙酸三乙酯的Homer-Emmons类反应，然后在铝和锂双氢化物存在下还原酯官能团，以及在二氧化锰存在下氧化醇官能团，这样生成衍生物(5)，
-通过膦酰基乙酸三乙酯与醛衍生物(5)之间的Homer-Emmons类反应，或直接地通过膦酰基乙酸三乙酯与酮衍生物(4)之间的Homer-Emmons类反应生成衍生物(6)。
化合物A可以按照图4表示的反应简图用苯偏三酸酐制备得到。
分别用衍生物(13)和衍生物(15)，通过在四丁基氟化铵存在下醇官能团去保护，这样可以制备得到实施例2和4的化合物(图2和3)。
分别用衍生物(13)和衍生物(15)，在例如THF的溶剂中，在甲醇钠存在下，用铝和锂双氢化物将三键还原成反式构型的双键，然后在四丁基氟化铵存在下醇官能团去保护，这样制备得到实施例3和5的化合物(图2和3)。
化合物(13)可以用3-羟基丙苯基酮通过一组包括下述反应的反应制备得到：
-通过以叔丁基二甲基甲硅烷基形式保护酚基团生成衍生物(8)，
-通过与膦酰基乙酸三乙酯的Homer-Emmons类反应，然后在铝和锂双氢化物存在下还原酯官能团，以及在二氧化锰存在下氧化醇官能团，这样生成衍生物(9)，
-通过Corey-Fuchs类反应生成衍生物(10)，
-通过苯酚官能团去保护，然后在例如DMF溶剂中，在氢化钠存在下，与溴衍生物(化合物B)偶合反应，这样生成衍生物(11)，
-通过苯甲酸酯基去保护，然后再以叔丁基二甲基甲硅烷氧基形式保护，这样生成衍生物(12)，
-通过与丁基锂反应，然后与六氟丙酮反应，这样生成衍生物(13)。
按照图4表示的反应简图，使用苯偏三酸酐可以制备化合物B。
使用衍生物(5)，按照Corey-Fuchs类反应，将醛官能团转化成乙酰基官能团(14)，然后用丁基锂锂化(lithiation)，和与六氟丙酮反应，这样可以得到化合物(15)。
采用如在文献中所描述的通常方法，例如在像吡啶或三乙胺的碱存在下，在像THF或二氯甲烷的溶剂中，通过相应的RCOCl类酰基氯的反应，进行保护羟基官能团。
本发明的化合物具有与维生素D类似的生物性质，特别是对维生素D的应答元素转移活化性质(VDRE)，例如对维生素D受体或其衍生物的兴奋活性(agoniste)。关于维生素D或它们的衍生物，是指例如维生素D2或D3衍生物，特别是1，25-二羟基维生素D3(钙三醇)。
可以采用在基因转录研究领域中熟知的方法在活体外证明这种对维生素D或其衍生物受体的兴奋活性(Hansen等人，《皮肤病学学会》(The Society For Investigative Dermatologie)，第1卷，第1期，1996年4月)。
作为实例，可以通过共转染人VDR受体表达载体和质粒报道分子p240Hase-CAT，用HeLa细胞系可以检测VDR兴奋活性。在这种共转染系统中，通过测定达到50％最大产物活性所需要的剂量(AC50)可以表征该兴奋活性。这种检测方案细节以及采用本发明化合物所得到的结果在本申请实施例7中作了说明。
通过产品抑制正常人的角质化细胞增生(在KHN中培养)的能力也可以测量与维生素D类似物的生物性质。在有利于增生状态的条件下，往培养的KHN添加该产品。任其产品与细胞接触五天。在DNA中加入溴脱氧尿苷(BRdU)可测量增生细胞数。这个试验方案以及使用本发明的化合物得到的结果在本申请实施例8中作了说明。
通过产品诱导前髓细胞白血病细胞HL60分化的能力也可以测量维生素D类似物的生物性质。这个试验方案以及使用本发明的化合物得到的结果在本申请实施例9中作了说明。
“在活体内”通过诱导SKH鼠的24-羟基酶也可以评价本发明化合物对维生素D受体的兴奋活性(Voorhees等人，1997，108：513-518)。采用的试验方案以及使用本发明的化合物得到的结果在本申请实施例10中作了说明。
本发明还有一个目的是上述化合物作为药物。
本发明化合物特别适合于下述治疗领域：
-与分化和增生时出现角质化混乱相关的皮肤病学疾病，例如寻常痤疮、黑头粉刺痤疮、多形体痤疮、红斑痤疮，结节性(nodulokystique)痤疮、聚集性痤疮、老年性痤疮、继发性痤疮，例如太阳性的、药物性的或职业性的痤疮；
-鱼鳞病、鱼鳞病样的病态、毛囊角化(Damier)疾病、棕榈跖皮肤角化病(palmoplantaires keratodennies)、白色体和白色体病样的病态、皮肤或粘膜苔癣(口腔)；
-有炎症免疫-变应性成分，有或没有细胞增生障碍的皮肤病学疾病，例如所有的银屑病病样，是皮肤的、粘膜的或指甲银屑病，甚至银屑病风湿症，或皮肤特异性变态，例如湿疹，或呼吸特性态变态或齿龈肥大；
-真皮或表皮增生，这些增生是良性的或恶性的，它们是或不是病毒源的，例如平疣和疣病样的表皮发育异常，口乳头状瘤或鲜红乳头状瘤，T淋巴瘤，和可以由紫外光诱发的增生，在嗜碱上皮瘤和脊髓细胞瘤的情况下尤其如此，以及皮肤癌前期病变，例如角质棘皮瘤；
-免疫皮肤病，例如.红斑狼疮，泡状免疫疾病(immunesbulleuses)或胶原质疾病，例如硬皮病；
-皮肤学疾病或有免疫成分的寻常皮肤学疾病；
-脂肪分泌功能紊乱，例如痤疮溢脂性皮炎或单一性溢脂性皮炎；
-由于暴露于紫外光，光诱发或年龄导致的皮肤老化所引起的皮肤病，色素沉着和光化学角化症，或与年龄导致和或光化学老化相关的疾病；
-伤愈合障碍或萎缩纹，
-炎症疾病，例如关节炎，皮肤病毒源疾病或一般病毒源疾病，例如Kaposis综合症；
-眼科障碍，特别是角膜病；
-维生素D受体具有的或可能由维生素D受体诱发的癌病状态或癌的癌前期病状，例如乳房癌、白血病、脊髓发育不良综合症和淋巴瘤、马尔皮基氏上皮细胞癌和胃肠道内癌、黑色素瘤和骨肉瘤；
-不同病源的脱发病，特别地由于化疗或射线诱发的脱发病；
-免疫疾病，例如自免疫疾病、1型糖尿病、板状硬化症、狼疮或狼疮型疾病、哮喘、肾小球肾炎、免疫系统的选择性功能紊乱，例如后天性免疫缺陷综合症(SIDA)，免疫排斥的选择性功能紊乱；
-内分泌疾病；
-用细胞内钙非正常代谢表征的疾病，涉及钙新陈代谢的疾病，例如肌肉萎缩；
-维生素D癌和在血浆和骨中矿物质体内平衡的其它疾病，例如佝偻病、软骨病、骨质疏松，特别在绝经妇女，肾的骨营养不良或副甲状腺功能障碍的情况下；
-心血管系统疾病，例如动脉硬化或高血压以及非胰岛素依赖型糖尿病。
在上述治疗领域里，有利地，本发明的化合物可以与类维生素A，与皮质类固醇或雌激素结合使用，与抗氧化剂、α-羟基酸、β-羟基酸或α-酮基酸或其衍生物、离子通道阻断剂配合，或与已知的用于干扰免疫系统的其它药物配合使用(例如环孢霉素，FK 506，糖皮质激素，单克隆抗体，细胞分裂素或生长因子......)。
关于类维生素A，是指天然或合成RAR或RXR受体的配位体。
关于抗氧化剂，例如是指α-生育酚、超氧化物岐化酶、泛醌醇(ubiquinol)或某些金属螯合剂。
关于α-羟基酸或α-酮基酸或其衍生物，例如是指乳酸、苹果酸、柠檬酸、乙醇酸、扁桃酸、酒石酸、甘油酸、抗坏血酸以及它们的盐、酰胺或酯。
关于β-羟基酸或其衍生物，例如应当理解是水杨酸及其盐，酰胺或酯。
关于离子通道阻断剂，例如是指钾离子通道阻断剂，特别地长压定(2，4-二氨基-6-哌啶子基-嘧啶-3-氧化物)及其衍生物。
本发明还有一个目的是含有至少一种如前面定义的化合物的药物组合物。
本发明化合物可以采用肠道、肠道外、局部或眼部用药途径用药。
关于经肠用药方式，这些药物组合物可以呈片剂、胶囊、糖衣丸剂、糖浆、悬剂、溶液、粉剂、颗粒剂、乳剂、微球或纳米球、或能够控制释放的微球或纳球或脂囊或聚合物囊的形式。关于肠道外用药方式，这些组合物可以呈灌注或注射用溶液或悬剂形式。本发明化合物一般用药剂量是每天1-3次用药约0.001-1000微克/千克体重，优选地约0.01-100微克/千克体重。
关于局部用药方式，以本发明化合物为基的药物组合物用于治疗皮肤或粘膜，呈油膏、乳脂、乳状液、软膏、粉剂、浸渍棉、溶液、凝胶、喷雾剂、洗液或悬液形式。它们还可以呈能够控制释放的微球或纳球、或脂囊或聚合物囊、或聚合物药贴或水凝胶片形式。根据临床适应症，采用局部用药的这些组合物可以为无水形式或含水形式。
关于眼部用药，原则上这是眼药。
这些局部或眼部用药组合物含有至少一种本发明的化合物，其浓度优选地是以该组合物总重量计为0.0001-5％，更优选地0.001-1％。
本发明的化合物在化妆领域也有应用，特别在身体和毛发保健中的应用，特别用于治疗有痤疮趋势的皮肤，生发，抗脱发，抗皮肤或头发油腻的外观，在防止太阳有害作用或治疗生理性干性皮肤中的应用，用于防止和/或抗光诱发的或时间生物学的老化。
在化妆领域，本发明的化合物有利地与类维生素A，皮质类固醇结合使用，与抗氧化剂、α-羟基酸或α-酮基酸或其衍生物，或与离子通道阻断剂联合使用。
与本发明的化合物联合使用的不同产品是如前面定义的产品。
本发明因此还有一个目的是化妆组合物，该组合物在化妆可接受的载体中含有至少一种如前面定义的化合物。这种化妆组合物特别地可以呈乳脂、乳状液、洗液、凝胶、脂囊或微球或纳米球或聚合物囊，皂或香波的形式。
在这些化妆组合物中本发明化合物的浓度可以是以该组合物总重量计为0.001-3重量％。
本发明的药物组合物和化妆组合物还可以含有惰性添加剂，或在药物动力学上或化妆上同样活性的添加剂，或这些添加剂的组合，具体地：润湿剂、脱色剂，例如氢醌、壬二酸、咖啡酸或曲酸；软化剂、水合剂，如甘油、PEG 400、硫代吗啉酮及其衍生物或尿素；抗皮脂溢出剂或抗痤疮剂，例如S-羧基甲基半胱氨酸、S-苄基-半胱胺，它们的盐及其衍生物，或过氧化苯甲酰基；抗生素，例如红霉素及其酯、新霉素、氯洁霉素及其酯、四环素；抗菌剂，例如酮康唑或聚亚甲基-4，5-异噻唑啉酮-3；有利头发再生的药剂，例如长压定(2，4-二氨基-6-哌啶子基-嘧啶-3-氧化物)及其衍生物，二氮嗪(7-氯-3-甲基-1，2，4-苯丙噻二嗪)和苯妥英(5，4-二苯基-咪唑烷-2，4-二酮)；非类固醇消炎剂；类胡罗卜素，特别是p-胡罗卜素；抗银屑病剂，例如蒽林及其衍生物，最后二十烷-5，8，11，14-四炔酸和二十烷-5，8，11-三炔酸，它们的酯与酰胺。
本发明的组合物还可以含有调味剂、防腐剂，例如对羟基苯甲酸酯、稳定剂、湿度调节剂、pH调节剂、渗透压改善剂、乳化剂、UV-A和UV-B防晒剂，抗氧化剂，例如α-生育酚，丁基羟基苯甲醚或丁基羟基甲苯。
现在说明性地无任何限制性地给出本发明化合物的制备实施例，以及以这样化合物为基的各种不同的具体配方，以及评价本发明化合物生物学活性的实施例。
实施例1
(4E，6E)-7-{3-[2-(3，4-双-羟基甲基-苯基)-乙基]-苯基}-3-乙基-壬-4，6-二烯-3-醇
a)2-(3-溴-苯基)-2-乙基-[1，3]二氧戊环
15克(70毫摩尔)3-溴-苯丙酮溶解于250毫升甲苯中，再添加20毫升(350毫摩尔)乙二醇，以及660毫克(3.5毫摩尔)对甲苯磺酸。该装置配置Dean-Stark型水提取器，反应介质升温回流20小时。在冷却后，用碳酸氢钾溶液处理与用乙醚提取后，未经纯化，所希望的产物是纯的，为淡黄色油状(m＝17.8克，R＝99％)。
b)3-(2-乙基-[1，3]二氧戊环-2-基)-苯甲醛
17.8克(70毫摩尔)2-(3-溴-苯基)-2-乙基-[1，3]二氧戊环溶于300毫升THF中，该混合物冷却到-78℃。缓慢加入34毫升(85毫摩尔)2.5M丁基锂溶液，该混合物搅拌30分钟。这时添加8.1毫升(105毫摩尔)DMF，该介质再回升到0℃，然后用饱和氯化铵溶液处理。在用乙醚提取后，得到所希望的醛，为黄色油状(m＝14克，R＝97％)。
c)4-{(E)-2-[3-(2-乙基-[1，3]二氧戊环-2-基)-苯基]-乙烯基}-邻苯二甲酸二甲酯
10.3克(30毫摩尔)4-(二乙氧基-磷酰基甲基)-邻苯二甲酸二甲酯溶于100毫升无水THF中，该混合物冷却到0℃。分份加入3.4克(30毫摩尔)叔丁醇钾，该介质搅拌30分钟。这时滴加5.6克(27.3毫摩尔)3-(2-乙基-[1，3]二氧戊环-2-基)-苯甲醛在50毫升THF中的溶液，介质在0℃搅拌2小时。在一般处理后，残留物采用硅胶柱色谱法纯化(洗脱剂庚烷80-醋酸乙酯20)。得到黄色的油(m＝9.6克，R＝89％)。
d)4-{2-[3-(2-乙基-[1，3]二氧戊环-2-基)-苯基]-乙基}-邻苯二甲酸二甲酯
9.5克(24毫摩尔)4-{(E)-2-[3-(2-乙基-[1，3]二氧戊环-2-基)-苯基]-乙烯基}-邻苯二甲酸二甲酯溶于120毫升醋酸乙酯和5毫升三乙胺的混合物中。反应介质用氮气流脱气10分钟，然后添加1克炭载钯。这时反应介质加热到80℃，而施加4巴氢气压力达4小时。这时过滤介质，减压浓缩。残留物采用硅胶柱色谱法纯化。得到无色油(m＝7.5克，R＝80％)。
e)(4-{2-[3-(2-乙基-[1，3]二氧戊环-2-基)-苯基]-乙基}-2-羟基甲基-苯基)甲醇
2.9克(75毫摩尔)氢化铝锂悬浮于20毫升乙醚中。滴加7.5克(19毫摩尔)4-{2-[3-(2-乙基-[1，3]二氧戊环-2-基)-苯基]-乙基}-邻苯二甲酸二甲酯在100毫升乙醚中的溶液中。在室温下搅拌20分钟后，添加15毫升水、1.5毫升15％氢氧化钠和4.5毫升水处理反应介质，然后过滤与减压浓缩。得到无色油(m＝6.4克，R＝99％)。
f)1-{3-[2-(3，4-双羟基甲基-苯基)-乙基]-苯基}-丙-1-酮
6.4克(18.7毫摩尔)(4-{2-[3-(2-乙基-[1，3]二氧戊环-2-基)-苯基]-乙基}-2-羟基甲基-苯基)甲醇溶于40毫升水和40毫升丙酮的混合物中。添加650毫克对甲苯磺酸，介质搅拌5小时。在一般处理后，所希望的产物无须纯化便是纯的，为无色油状(m＝5.57克，R＝100％)。
g)1-(3-{2-[3，4-双-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基甲基)-苯基]-乙基}-苯基)-丙-1-酮
5.5克(18.5亳摩尔)1-{3-[2-(3，4-双羟基甲基-苯基)-乙基]-苯基}-丙-1-酮溶于50毫升无水DMF中，该混合物冷却到0℃。添加6.7克(45毫摩尔)叔丁基二甲基氯硅烷和3.5克(52毫摩尔)咪唑。介质升至室温并搅拌2小时。在用饱和氯化铵溶液处理后，再用醋酸乙酯提取，收集有机相，用水洗，干燥与减压浓缩。得到无色油(m-9.6克，R＝99％)。
h)(E)-3-(3-{2-[3，4-双-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基甲基)-苯基]-乙基}-苯基)-戊-2-烯酸乙酯
11.1毫升(56毫摩尔)膦酰基乙酸三乙酯溶于100毫升THF中。这时添加2.2克(55毫摩尔)60％氢化钠，该介质在室温下搅拌30分钟。这时滴加9.5克(18毫摩尔)1-(3-{2-[3，4-双-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基甲基)-苯基]-乙基}-苯基)-丙-1-酮在100毫升THF中的溶液。介质搅拌6小时，然后用水处理，用醋酸乙酯提取。得到的残留物采用硅胶柱色谱法纯化(洗脱剂醋酸乙酯10-庚烷90)。得到黄色油(m＝5.8克，R＝56％)。
i)(E)-3-(3-{2-[3，4-双-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基甲基)-苯基]-乙基}-苯基)-戊-2-烯-1-醇
0.75克(19毫摩尔)氢化铝锂悬浮于10毫升乙醚中。滴加5.6克(9.6毫摩尔)(E)-3-(3-{2-[3，4-双-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基甲基)-苯基]-乙基}-苯基)-戊-2-烯酸乙酯在50毫升乙醚中的溶液。在室温下搅拌20分钟后，反应介质加0.75毫升水、0.75毫升15％氢氧化钠和1.5毫升水处理，然后过滤与减压浓缩。得到无色油(m＝5.26克，R＝99％)。
j)(E)-3-(3-{2-[3，4-双-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基甲基)-苯基]-乙基}-苯基)-戊-2-烯醛
2.8克(5毫摩尔)(E)-3-(3-{2-[3，4-双-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基甲基)-苯基]-乙基}-苯基)-戊-2-烯-1-醇溶于50毫升二氯甲烷中。再加入4.3克(50毫摩尔)二氧化锰，反应介质搅拌12小时，然后过滤与减压浓缩。得到所希望的产物，黄色油状(m＝2.8克，R＝100％)。
k)(2E，4E)-5-(3-{2-[3，4-双-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基甲基)-苯基]-乙基}-苯基)-庚-2，4-二烯酸乙酯
1.3毫升(6.5毫摩尔)膦酰基乙酸三乙酯溶于20毫升THF中。这时添加260克(6.5毫摩尔)60％氢化钠，介质在室温下搅拌30分钟。这时滴加2.8克(5毫摩尔)(E)-3-(3-{2-[3，4-双-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基甲基)-苯基]-乙基}-苯基)-戊-2-烯醛在30毫升THF中的溶液。该介质搅拌6小时，然后用水处理，用醋酸乙酯提取。得到的残留物采用硅胶柱色谱法纯化(洗脱剂醋酸乙酯10-庚烷90)。得到黄色油(m＝2.52克，R＝81％)。
l)(4E，6E)-7-{3-[2-(3，4-双-羟基甲基-苯基)-乙基]-苯基}-3-乙基-壬-4，6-二烯-3-醇
1.7克(2.7毫摩尔)(2E，4E)-5-(3-{2-[3，4-双-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基甲基)-苯基]-乙基}-苯基)-庚-2，4-二烯酸乙酯溶于120毫升无水THF中，该混合物冷却到-78℃。加入13.5毫升(13.5毫摩尔)乙基锂溶液(1.0-1.5M)，介质在这个温度下搅拌1小时，然后回升到0℃，再用饱和氯化铵溶液处理。得到的残留物溶于50毫升THF中，然后加入6.5毫升(6.5毫摩尔)四丁基氟化铵溶液。在搅拌30分钟与一般处理后，得到的残留物采用硅胶柱色谱法纯化。得到所希望的产物，为无色油状(m＝200毫克，R＝18％)。
RMN 1H(DMSO)：0.82(t，6H，J＝7.5Hz)；0.89(t，3H，J＝7.4Hz)；1.41-1.53(m，4H)；2.41(q，2H，J＝7.4Hz)；2.83(s，4H)；4.01(s，1H)；4.41(t，2H，J＝8Hz)；4.45(t，2H，J＝8Hz)；4.94-4.98(m，2H)；6.31(d，1H，J＝15.0Hz)；6.46(d，1H，J＝11.0Hz)；7.08-7.29(m，7H)；7.42-7.45(m，1H).
实施例2
(E)-6-[3-(3，4-双-羟基甲基-苯氧基)-苯基]-1，1，1-三氟-2-三氟甲基-辛-5-烯-3-炔-2-醇
a)3-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基)-苯甲醛
以与实施例1g类似的方式，通过42.7克(0.275摩尔)叔丁基二甲基氯硅烷与30.5克(0.2摩尔)3-羟基苯甲醛和20.4克(0.3摩尔)咪唑的反应。在采用硅胶柱纯化(二氯甲烷20-庚烷80)后，得到黄色油(m＝55.9克，R＝95％)。
b)1-[3-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基)-苯基]-丙-1-醇
50克(0.21摩尔)3-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基)-苯甲醛溶于500毫升乙醚中，该混合物冷却到0℃。缓慢加入80毫升(0.24摩尔)3.0M乙基溴化镁溶液，该混合物搅拌5小时。在一般处理后，得到的残留物采用硅胶柱色谱法纯化(洗脱剂醋酸乙酯20/庚烷80)。得到无色油(m＝45.8克，R＝82％)。
c)1-[3-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基)-苯基]-丙-1-酮
以与实施例1j类似的方式，通过45克(0.17摩尔)1-[3-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基)-苯基]-丙-1-醇与148克(1.7摩尔)二氧化锰反应。得到黄色油(m＝45克，R＝100％)。
d)(E)-3-[3-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基)-苯基]-戊-2-烯酸乙酯
22.5毫升(113毫摩尔)膦酰基乙酸三乙酯溶于100毫升THF中。这时添加4.5克(113毫摩尔)60％氢化钠，该介质在室温下搅拌30分钟。这时滴加20克(75.6毫摩尔)3-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基)-丙-1-酮在100毫升THF中的溶液。介质搅拌6小时，然后用水处理，再用醋酸乙酯提取。得到的残留物采用硅胶柱色谱法纯化(洗脱剂庚烷90-醋酸乙酯10)。得到黄色油(m＝7.6克，R＝30％)。
e)(E)-3-[3-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基)-苯基]-戊-2-烯-1-醇
以与实施例1e类似的方式，通过7.6克(23毫摩尔)(E)-3-[3-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基)-苯基]-戊-2-烯酸乙酯与1.05克(25毫摩尔)氢化铝锂反应。得到无色油(m＝6.7克，R＝100％)。
f)(E)-3-[3-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基)-苯基]-戊-2-烯-1-醛
以与实施例1j类似的方式，通过6.7克(23毫摩尔)(E)-3-[3-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基)-苯基]-戊-2-烯-1-醇与10克(115毫摩尔)二氧化锰反应。得到黄色油(m＝4.7克，R＝71％)。
g)叔-丁基-[3-((E)-4，4-二溴-1-乙基-丁-1，3-二烯基)-苯氧基]-二甲基-硅烷
1.17克(18毫摩尔)锌粉、4.7克(18毫摩尔)三苯基膦和5.9克(18毫摩尔)四溴化碳在150毫升二氯甲烷中搅拌45分钟。滴加2.6克(9毫摩尔)(E)-3-[3-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基)-苯基]-戊-2-烯-1-醛在10毫升二氯甲烷中的溶液。反应介质搅拌1小时，然后用水和二氯甲烷混合物提取。残留物采用硅胶柱过滤(洗脱剂二氯甲烷)。得到黄色油(m＝3.3克，R＝83％)。
h)叔-丁基-[3-((E)-1-乙基-丁-1-烯-3-炔基)-苯氧基]-二甲基硅烷
3.2克(7.2毫摩尔)叔-丁基-[3-((E)-4，4-二溴-1-乙基-丁-1，3-二烯基)-苯氧基]-二甲基-硅烷溶于50毫升，该混合物冷却到-78℃。加入5.7毫升(14.4毫摩尔)2.5M丁基锂溶液，介质搅拌2小时，然后用饱和氯化铵溶液处理。残留物采用硅胶柱色谱法纯化。得到黄色油(m＝1.0克，R＝49％)。
i)3-((E)-1-乙基-丁-1-烯-3-炔基)-苯酚
1克(3.5毫摩尔)叔-丁基-[3-((E)-1-乙基-丁-1-烯-3-炔基)-苯氧基]-二甲基硅烷溶于50毫升THF中，滴加3.8毫升(38毫摩尔)1.0M四丁基氟化铵溶液。介质搅拌30分钟，然后用饱和氯化铵溶液处理，用醋酸乙酯提取。得到黄色油(m＝690毫克，R＝100％)。
j)2-苯甲酸基甲基-5-[3-((E)-1-乙基-丁-1-烯-3-炔基)-苯氧基甲基]-苄基苯甲酸酯
610毫克(3.5毫摩尔)3-((E)-1-乙基-丁-1-烯-3-炔基)-苯酚溶于80毫升DMF中。添加150毫克(3.7毫摩尔)氢化钠，介质在室温下搅拌。这时添加1.5克(6.2毫摩尔)2-苯甲酸基甲基5-溴甲基苄基苯甲酸酯，介质搅拌2小时。在一般处理和用硅胶柱色谱法纯化后，得到无色油(m＝1.66克，R＝88％)。
k)1-(3，4-双-叔-丁基二甲基硅氧烷基甲基-苄氧基)-3-((E)-1-乙基-丁-1-烯-3-炔基)-苯
1.6克(3毫摩尔)2-苯甲酸基甲基-5-[3-((E)-1-乙基-丁-1-烯-3-炔基)-苯氧基甲基]-苄基苯甲酸酯溶于15毫升2％碳酸钾甲醇溶液中。反应介质搅拌2小时，然后用饱和氯化铵溶液处理，用醋酸乙酯提取。得到的残留物溶于20毫升无水DMF中，添加900毫克(6毫摩尔)四丁基二甲基氯硅烷和450毫克(6.6毫摩尔)咪唑。介质在室温下搅拌10小时。在一般处理后，得到的残留物采用硅胶柱色谱法纯化(洗脱剂庚烷85-醋酸乙酯85)。得到橙色油(m＝1.16克，R＝70％)。
l)(E)-6-{3-[3，4-双-(叔-丁基二甲基硅氧烷基甲基)-苄氧基]-苯基}-1，1，1-三氟-2-三氟甲基-辛-5-烯-3-炔-2-醇
1.16克(2.1毫摩尔)1-(3，4-双-叔-丁基二甲基硅氧烷基甲基-苄氧基)-3-((E)-1-乙基-丁-1-烯-3-炔基)-苯溶于30毫升无水THF中，该混合物冷却到-78℃。滴加930微升(2.3毫摩尔)2.5M丁基锂溶液，介质搅拌15分钟。六氟丙酮气流通过该溶液10分钟，反应介质用饱和氯化铵溶液处理。得到的残留物采用硅胶柱色谱法纯化(洗脱剂庚烷80-醋酸乙酯20)。得到黄色油(m＝1.35克，R＝89％)。
m)(E)-6-[3-(3，4-双-羟基甲基-苯氧基)-苯基]-1，1，1-三氟-2-三氟甲基-辛-5-烯-3-炔-2-醇
以与实施例2i类似的方式，通过350毫克(0.5毫摩尔)(E)-6-{3-[3，4-双-(叔-丁基二甲基硅氧烷基甲基)-苄氧基]-苯基}-1，1，1-三氟-2-三氟甲基-辛-5-烯-3-炔-2-醇与1.2毫升(1.2毫摩尔)1.0M四丁基氟化铵溶液反应。得到无色油(m＝210毫克，R＝80％)。RMN‘H(CDCl，)：1.05(t，3H，J＝7.4Hz)；2.72(q，2H，J＝7.4Hz)；4.74(s，4H)；5.05(s，2H)；5.69(s，1H)；6.91-7.01(m，3H)；7.24(m，1H)；7.37(s，2H)；7.42(s，1H).
实施例3
(3E，5E)-6-[3-(3，4-双-羟基甲基-苄氧基)-苯基]-1，1，1-三氟-2-三氟甲基-辛-3，5-二烯-2-醇
a)(3E，5E)-6-{3-[3，4-双-(叔-丁基-二甲基-硅氧烷基甲基)-苄氧基]-苯基}-1，1，1-三氟-2-三氟甲基-辛-3，5-二烯-2-醇
135毫克(3.55毫摩尔)氢化铝锂溶于10毫升无水THF中。添加385毫克(7.1毫摩尔)甲醇钠，该混合物在室温下搅拌10分钟。滴加860毫克(1.2毫摩尔)(E)-6-{3-[3，4-双-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基甲基)-苄氧基]-苯基}-1，1，1-三氟-2-三氟甲基-辛-5-烯-3-炔-2-醇(实施例21中描述的)在7毫升THF中的溶液。反应介质加热回流2小时，然后相继加120微升水、120微升15％NaOH和35微升水处理。过滤后，得到淡黄色稠油(m＝650毫克，R＝76％)。
b)(3E，5E)-6-[3-(3，4-双-羟基甲基-苄氧基)-苯基]-1，1，1-三氟-2-三氟甲基-辛-3，5-二烯-2-醇
以与实施例2m类似方式，通过640毫克(0.89毫摩尔)(3E，5E)-6-{3-[3，4-双-(叔-丁基-二甲基-硅氧烷基甲基)-苄氧基]-苯基}-1，1，1-三氟-2-三氟甲基-辛-3，5-二烯-2-醇与2.1毫升(2.1毫摩尔)1.0M四丁基氟化铵溶液反应。得到无色油(m＝260毫克，R＝60％)。RMN‘H(DMSO)：1.10(t，3H，J＝7.5Hz)；2.65(q，2H，J＝7.4Hz)；4.55(t，4H，J＝5.2Hz)；20 5.08-5.17(m，4H)；6.05(d，1H，J＝15.1Hz)；6.64(d，1H，J＝11.2Hz)；6.96(dd，1H)，J1＝11.2Hz，52＝2Hz)；7.08-7.51(m，6H)；8.27(s，1H).
实施例4
(E)-6-{3-[2-(3，4-双-羟基甲基-苯基)-乙基]-苯基}-1，1，1-三氟-2-三氟甲基-辛-5-烯-3-炔-2-醇
a)(E)-1-(3-{2-[3，4-双-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基甲基)-苯基]-乙基}-苯基)-4，4-二溴-1-乙基-丁-1，3-二烯
以与实施例2g类似的方式，通过9克(16.3毫摩尔)(E)-3-(3-{2-[3，4-双-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基甲基)-苯基]-乙基}-苯基)-戊-2-烯醛(实施例1j制备的)与2.1克(32.5毫摩尔)锌粉、8.5克(32.5毫摩尔)三苯基膦和108克(32.5毫摩尔)四溴化碳反应。得到黄色油(m＝11.3克，R＝98％)。
b)(E)-1-(3-{2-[3，4-双-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基甲基)-苯基]-乙基}-苯基)-1-乙基-丁-1-烯-3-炔
以与实施例2h类似的方式，通过11.3克(15.9毫摩尔)(E)-1-(3-{2-[3，4-双-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基甲基)-苯基]-乙基}-苯基)-4，4-二溴-1-乙基-丁-1，3-二烯与128毫升(32毫摩尔)2.5M丁基锂溶液反应。得到黄色油(m＝85克，R＝97％)。
c)(E)-6-(3-{2-[3，4-双-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基甲基)-苯基]-乙基}-苯基)-1，1，1-三氟-2-三氟甲基-辛-5-烯-3-炔-2-醇
以与实施例21类似的方式，通过5克(9.1毫摩尔)(E)-1-(3-{2-[3，4-双-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基甲基)-苯基]-乙基}-苯基)-1-乙基-丁-1-烯-3-炔与4毫升(10毫摩尔)2.5M丁基锂溶液与六氟丙酮流反应。得到所希望的产物，为黄色油状(m＝3.7克，R＝57％)。
d)(E)-6-(3-[2-(3，4-双-羟基甲基-苯基)-乙基]-苯基)-1，1，1-三氟-2-三氟甲基-辛-5-烯-3-炔-2-醇
以与实施例2m类似的方式，通过1克(1.4毫摩尔)(E)-6-(3-{2-[3，4-双-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基甲基)-苯基]-乙基}-苯基)-1，1，1-三氟-2-三氟甲基-辛-5-烯-3-炔-2-醇与3.3毫升(3.3毫摩尔)1.0M四丁基氟化铵溶液反应。得到淡黄色固体(熔点＝123℃，m＝570毫克，R＝84％)。RMN‘H(CDC&)：1.05(t，3H，J＝7.5Hz)；2.75(q，2H，J＝7.5Hz)；2.92(s，4H)；4.69(s，4H)；5.67(s，1H)；7.05-7.31(m，7H).
实施例5
(3E，5E)-6-{3-[2-(3，4-双-羟基甲基-苯基)-乙基]-苯基}-1，1，1-三氟-2-三氟甲基-辛-3，5-二烯-2-醇
a)(3E，5E)-6-(3-{2-[3，4-双-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基甲基)-苯基]-乙基}-苯基}-1，1，1-三氟-2-三氟甲基-辛-3，5-二烯-2-醇
以与实施例3a类似的方式，通过2.5克(3.5毫摩尔)(E)-6-(3-{2-[3，4-双-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基甲基)-苯基]-乙基}-苯基)-1，1，1-三氟-2-三氟甲基-辛-5-烯-3-炔-2-醇(实施例4c中描述的)与400毫克(10.4毫摩尔)氢化铝锂和1.13克(21毫摩尔)甲醇钠反应。得到黄色油(m＝1.27克，R＝51％)。
b)(3E，5E)-6-{3-[2-(3，4-双-羟基甲基-苯基)-乙基]-苯基}-1，1，1-三氟-2-三氟甲基-辛-3，5-二烯-2-醇
以与实施例2m类似的方式，通过1.2克(1.67毫摩尔)(3E，5E)-6-(3-{2-[3，4-双-(叔丁基-二甲基-硅氧烷基甲基)-苯基]-乙基}-苯基)-1，1，1-三氟-2-三氟甲基-辛-3，5-二烯-2-醇与4毫升(4毫摩尔)1.0M四丁基氟化铵溶液反应。得到白色固体(熔点＝104℃，m＝715毫克，R＝87％)。RMN‘H(DMSO)：1.02(t，3H，J＝7.5Hz)；2.66(q，2H，J＝7.5Hz)；2.93(s，4H)；4.71(s，2H)；4.72(s，2H)；5.79(d，1H，J＝15.0Hz)；6.24(d，1H，J＝11.0Hz)；7.08-7.30(m，SH).
实施例6：配方实施例
1) 口服
(a)制备下述0.2克片剂组合物
实施例1化合物 0.005克
预凝胶化淀粉 0.065克
微晶纤维素 0.075克
乳糖 0.050克
硬脂酸镁 0.005克
对于治疗鱼鳞病，根据治疗病例严重程度，成人每天服1-3片，服1-12个月。
b)制备5毫升安瓿瓶装的可口服悬浮液
实施例2化合物 0.050克
甘油 0.500克
70％山梨糖醇 0.500克
糖酸钠 0.010克
对羟基苯甲酸甲酯 0.040克
香料适量
纯化水适量至 5毫升
对于治疗痤疮，根据治疗病例严重程度，成人每天服1安瓿，服1-12个月。
c)制备胶囊包装下述配方：
实施例4化合物 0.0001毫克
玉米淀粉 0.060克
乳糖适量至 0.300克
使用的胶囊是由明胶、二氧化钛和防腐剂构成。
在治疗银屑病时，成人每天服1粒胶囊，服1-12个月。
d)制备胶囊包装的下述配方：
实施例5化合物 0.02毫克
环孢霉素 0.050克
玉米淀粉 0.060克
乳糖适量至 0.300克
使用的胶囊是由明胶、二氧化钛和防腐剂构成。
在治疗银屑病时，成人每天服1粒胶囊，服1-12个月。
2)局部用药
a)制备下述非离子油包水乳剂：
实施例3的化合物 0.100克
由BDF公司以商品名“Eucerine anhydre”销售的乳化羊毛酯醇、精制蜡和石蜡油的混合物 39.900克
对羟基苯甲酸甲酯 0.075克
对羟基苯甲酸丙酯 0.075克
无菌软化水适量至 100.000克
这种乳剂每天在牛皮癣皮肤上涂1-2次，涂1-12个月。
b)通过制造下述配方制备凝胶：
实施例1的化合物 0.001克
碱性红霉素 4.000克
丁基羟基甲苯 0.050克
Hercules公司以商品名“KLUCEL HF”销售的羟基丙基纤维素
2.000克
乙醇(95″)适量至 100.000克
这种凝胶每天在感染皮肤病的皮肤或患痤疮皮肤上涂1-3次，根据治疗病例严重情况涂6-12月。
c)将下述活性组分混合制备抗皮脂溢出洗剂：
实施例2化合物 0.030克
丙二醇 5.000克
丁基羟基甲苯 0.100克
乙醇(95″)适量至 100.000克
这种洗剂每天在皮脂溢出的头皮上涂两次，在2-6星期内观察到显著改善。
d)将下述活性组分混合制备防止太阳有害影响的化妆组合物：
实施例2化合物 1.000克
亚苄基樟脑 4.000克
脂肪酸三甘油酯 31.000克
单硬脂酸甘油酯 6.000克
硬脂酸 2.000克
鲸蜡醇 1.200克
羊毛脂 4.000克
防腐剂 0.300克
丙二醇 2.000克
三乙醇胺 0.500克
香料 0.400克
软化水适量至 100.000克
这种组合物每天都涂，它能够抗光诱发的老化。
e)制备下述非离子水包油软膏
实施例3化合物 0.500克
视黄酸 0.020克
鲸蜡醇 4.000克
单硬脂酸甘油酯 2.500克
对羟基苯甲酸丙酯 0.075克
硬脂酸PEG50酯 2.500克
Karité黄油 9.200克
丙二醇 2.000克
对羟基苯甲酸甲酯 0.075克
无菌软化水适量至 100.000克
这种膏每天在牛皮癣皮肤上涂1-2次，感染治疗涂30天，保养则无期限。
f)下述活性组分混合制备局部用凝胶：
实施例4化合物 0.050克
乙醇 43.000克
α-生育酚 0.050克
″Goodrich”公司以商品名″Carbopol 941″
聚合物 0.500克
20重量％三乙醇胺水溶液 3.800克
水 9.300克
丙二醇适量至 100.000克
这种凝胶每天在治疗痤疮时涂1-3次，根据治疗病况严重程度涂6-12星期。
g)下述活性组分混合制备抗脱发和头发再生的毛发洗液
实施例3化合物 0.05克
以商品名″Minoxidil″ 1.00克
丙二醇 20.00克
乙醇 34.92克
聚乙二醇(分子量＝400) 40.00克
丁基羟基苯甲醚 0.01克
丁基羟基甲苯 0.02克
水适量至 100.00克
在头发脱落的头皮上每天涂这种洗液1-2次，涂3个月，保养则无期限。
h)下述活性组分混合制备抗痤疮膏：
实施例5化合物 0.050克
视黄酸 0.010克
“GATTEFOSSE”公司以商品名“Gelot 64”销售的硬脂酸甘油酯和
聚乙二醇混合物(75摩尔) 15.000克
“GATTEFOSSE”公司以商品名“Labrafil M2 130 CS”销售的具有
6摩尔环氧乙烷的聚氧乙烯化环核油 8.000克
全氢角鲨烯 10.000克
防腐剂 适量
聚乙二醇(分子量＝400) 8.000克
乙二胺四乙酸二钠盐 0.050克
纯化水适量至 100.000克
这种膏每天在感染皮肤病或痤疮皮肤处涂1-3次，涂6-12星期。
i)制备下述配方的水包油软膏
实施例4化合物 0.020克
倍他米松17-戊酸酯 0.050克
S-羧基甲基半胱氨酸 3.000克
“ATLAS”公司以商品名“Myrj 52”销售的硬脂酸聚氧乙烯酯(40
摩尔环氧乙烷) 4.000克
“ATLAS”公司以商品名“Tween 20”销售的具有20摩尔环氧乙烷的聚氧乙烯失水山梨糖醇单硬脂酸酯 1.800克
“GATTEFOSSE”公司以商品名“Géléol”销售的单和双硬脂酸甘油
酯混合物 4.200克
丙二醇 10.000克
丁基羟基苯甲醚 0.010克
丁基羟基甲苯 0.020克
鲸蜡硬脂醇 6.200克
防腐剂 18.000克
全氢角鲨烯 4.000克
“DYNAMIT NOBEL”公司以商品名“Miglyo18 12”销售的辛酸-癸酸三甘油酯，三乙醇胺(99重量％)混合物 2.500克
水适量至 100.000克
这种膏每天在感染炎症皮肤病的皮肤上涂2次，涂30天。
i)制备下述水包油类膏：
乳酸 5.000克
实施例1化合物 0.020克
“ATLAS”公司以商品名“Myrj 52”销售的硬脂酸聚氧乙烯酯(40摩尔环氧乙烷) 4.000克
“ATLAS”公司以商品名“Tween 20”销售的具有20摩尔环氧乙烷的聚氧乙烯失水山梨糖醇单硬脂酸酯 1.800克
“GATTEFOSSE”公司以商品名“Géléol”销售的单和双硬脂酸甘油
酯混合物 4.200克
丙二醇 10.000克
丁基羟基苯甲醚 0.010克
丁基羟基甲苯 0.020克
鲸蜡硬脂醇 6.200克
防腐剂 适量
全氢角鲨烯 18.000克
DYNAMIT NOBEL”公司以商品名“Miglyo18 12”销售的辛酸-癸酸
三甘油酯混合物 4.000克
水适量至 100.000克
这种膏每天涂1次，它有助于抗光诱发或时间生物学老化。
k)制备下述无水软膏：
实施例1化合物 5.000克
凡士林油 50.00克
丁基氢化甲苯 0.050克
白色凡士林 适量至 100克
这种软膏每天在患有鳞屑皮肤病的皮肤上涂2次，涂30天。
3)病变外的途径
a)制备下述组合物：
实施例2化合物 0.002克
油酸乙酯 适量10克
在治疗恶性黑色素瘤时，成人每星期注射这种组合物1-7次，注射1-12个月。
b)制备下述组合物：
实施例1化合物 0.050克
橄榄油 适量 2克
在治疗嗜碱细胞癌时，成人每星期注射该组合物1-7次，注射1-12个月。
c)制备下述组合物：
实施例3化合物 0.1毫克
芝麻油 适量 2克
在治疗脊髓细胞癌时，成人每星期注射该组合物1-7次，注射1-12个月。
d)制备下述组合物：
实施例4化合物 0.001毫克
苯甲酸甲酯 适量 10克
在治疗结肠癌时，成人每星期注射该组合物1-7次，注射1-12个月。
4)静脉内途径
a)制备下述可注射脂类乳剂：
实施例4化合物 0.001毫克
大豆油 10.000克
卵磷脂 1.200克
甘油 2.500克
注射用水 适量至 100.000克
在治疗银屑病时，成人每星期注射该组合物1-7次，注射1-12个月。
b)制备下述可注射脂类乳剂：
实施例1化合物 0.010克
棉籽油 10.000克
大豆卵磷脂 0.750克
山梨糖醇 5.000克
DL，α生育酚 0.100克
可注射用水 适量至 100.000克
在治疗鱼鳞病时，成人每星期注射该组合物1-7次，注射1-12个月。
c)制备下述可注射脂类乳剂：
实施例2化合物 0.001克
大豆油 15.000克
乙酰基化单甘油酯 10.000克
聚丙二醇与环氧乙烷的加聚物F-108 1.000克
甘油 2.500克
注射用水 适量至 100.000克
在治疗白血病时，成人每星期注射该组合物1-7次，注射1-12个月。
d)制备下述混合胶束组合物：
实施例2化合物 0.001克
卵磷脂 16.930克
甘胆酸 8.850克
注射用水 适量至 100.000克
在治疗恶性黑色素瘤时，成人每星期注射该组合物1-7次，注射1-12个月。
e)制备下述环糊精组合物：
实施例3化合物 0.1毫克
p环糊精 0.100克
注射用水 适量至 100.000克
在治疗移植排斥反应时，成人每星期注射该组合物1-7次，注射1-12个月。
f)制备下述环糊精组合物：
实施例化合物 0.010克
2-羟基丙基环糊精 0.100克
注射用水 适量至 100.000克
在治疗肾癌时，成人每星期注射该组合物1-7次，注射1-12个月。
实施例7：本发明化合物的生物活性评价试验实施例：可能的转活化作用
通过人的VDR受体表达载体和p240Hase-CAT质粒报道分子，可以用HeLa细胞系检测VDR兴奋活性，它们含有在氯霉素-乙酰基-转移酶(CAT)基因编码变型上游克隆的，鼠的24-羟基酶启动子-1399至+76区。在共转染后18小时，在介质中添加试验产物。在处理18小时后，采用Elisa试验(连接酶的免疫吸附剂检测，RocheMolecular Biochemicals销售的检测盒)测定细胞溶胞产物的CAT活性。通过测定达到50％最大产物活性所必需的剂量(AC50)，可以表征在这个共转染系统中兴奋活性。
表1 化合物 AC50纳摩尔 实施例1 39 D1的实施例59 124 实施例2 77 D1的实施例80 746 实施例3 7 D1的实施例92 79 实施例4 16 D1的实施例80 746 实施例5 3 D1的实施例60 319
本发明的每个化合物与在专利申请WO 00/26167(D1)中要求保护的结构最接近的化合物进行了比较。为了便于比较，本发明化合物与D1对比实施例的结构汇集在图5和6中。这些结果表明本发明化合物的活性远强于D1化合物。如果两个AC50值之差是至少因子3，优选地因子5，更优选地因子10，这种差被认为是显著的。
实施例8：本发明化合物的生物活性评价试验实施例：人的角质化细胞增生活性
人们知道，称之钙三醇的1，25-二羟基维生素D3，它相应于天然维生素D，在介质中可抑制人的角质化细胞增生。使用的方法如下：正常人的角质化细胞以低密度接种在24井板中。4小时后，把待测试化合物添加到培养介质中。在培养5天后，通过在DNA中加入5-溴-2′-脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)测定角质化细胞增生。然后采用Elisa试验(连接酶的免疫吸附剂检测，Roche Molecular Biochemicals销售的检测盒)，定量测定加入BrdU的量。
本发明化合物与作为参比化合物的钙三醇对角质化细胞增生的抑制作用汇集于下表II中。Ic50值表示测试化合物抑制50％角质化细胞增生时该化合物的浓度。
这些结果能够证明，本发明化合物对角质化细胞增生的抑制活性与钙三醇(天然维生素D)抑制活性处于同一范围。另外，这些结果表明，本发明化合物与D1结构最接近的化合物之间的差是显著的。如果两个AC50值之差是至少因子3，优选地因子5，更优选地因子10，这种差被认为是显著的。
表II 化合物 抑制增生 IC50*(纳摩尔) 钙三醇 14 实施例1 45 D1的实施例59 1029 实施例2 153 D1的实施例80 ＞1000(非活性) 实施例3 35 D1的实施例92 99 实施例4 29 D1的实施例80 ＞10000(非活性) 实施例5 8 D1的实施例60 1506
*达到50％抑制角质化细胞增生时的浓度
实施例9：本发明化合物的生物活性评价试验实施例：HL60细胞分化活性
钙三醇诱发前髓细胞白血病的细胞(HL60)分化成单核细胞/巨噬细胞。这种诱发分化作用可用细胞的维生素D活性表征。其中一种最重要巨噬细胞的抗微生物产品是过氧化氢，它可以通过NBT(Nitroblue Tetrazolium)还原作用采用实验方法分析出来。
采用的方法如下：细胞HL60接种在6井板中，然后立刻用待测试化合物处理。在培养4天后，这些细胞用佛波醇和NBT的TPA酯培养很短的时间，计数这些细胞分化，即与NBT为阳性。
在下表III中解释了本发明化合物对诱发HL60细胞分化作用以及参比化合物钙三醇的诱发作用。
表III 化合物 分化活化作用 AC50″(纳摩尔) 钙三醇 7 (n＝5) 实施例1 56 (n＝3) D1的实施例59 310 实施例3 7 (n＝2) 实施例5 5 (n＝2)
*达到50％最大分化活化反应时的浓度
这些结果表明，本发明实施例3和5化合物的诱发HL60细胞分化活性与钙三醇类似。
实施例10：本发明化合物的生物活性评价试验实施例：在SKH鼠中24-羟基酶“活体内”诱发作用
24-羟基酶是P450细胞色素酶，它使1，25-二羟基维生素D3(钙三醇)在24位羟基化，得到代谢物24，25-三羟基维生素D3。Voorhees等人(JID 1997，108：513-518)证明，在人的皮肤上，钙三醇诱发24-羟基酶基因表达。
因此，可以通过诱发SKH鼠的24-羟基酶“活体内”评价本发明化合物对维生素D受体的兴奋活性。
采用的方法如下：XII鼠只是局部涂敷不断增加浓度的待测试化合物的乙醇溶液。
使用滴管在鼠背上涂敷体积50微升待测试产物或只是赋形剂。
其它的SKH鼠只是局部涂敷不断增加浓度的钙三醇乙醇溶液。使用滴管在鼠背上涂敷体积50微升待测试产物或只是赋形剂。
局部涂敷后8小时，这些鼠实施安乐死，取下处理的皮肤，将表皮与真皮分离。采用半定量的PCR定量测定24-羟基酶的RNAm。这些结果以相对于GAPDH的RNAm表达归一化，所试验钙三醇的不同浓度和所试验本发明化合物的不同浓度的值以与钙三醇相比的诱导因子表示。
这些结果汇集于下表IV。
表IV 24-羟基酶的RNAm表达 试验化合物 浓度 ％(重量/体积) 诱导因子 与乙醇比较 钙三醇 0.0001 6.7 钙三醇 0.001 10.3 钙三醇 0.01 20.1 钙三醇 0.1 26
这些结果表明，只是局部涂钙三醇可在鼠的表皮中以与剂量相关的方式诱导24-羟基酶的RNAm表达。
将本发明化合物所得到的诱导因子与钙三醇所得到的诱导因子进行比较可评价本发明化合物的生物学活性。这些结果列于下面表V：
表V 试验化合物 浓度 ％(重量/体积)与0.01％所试验钙三醇诱发相比的诱发，％ 钙三醇 0.01 100 实施例1 0.1 108 实施例2 0.01 58 实施例3 0.001 59 实施例4 0.01 89 实施例5 0.0003 106
因此，这些结果表明，本发明实施例具有可与钙三醇活性相比或高得多的活性(实施例3和5)。