强制换羽防伤害剂以及强制换羽的方法 【技术领域】
本发明涉及一种防伤害剂，其能防止蛋鸡(layer)等在强制换羽过程中因饥饿而受到伤害。本发明也涉及使用上述防伤害剂对家禽进行强制换羽的方法。
背景技术
产蛋的蛋鸡随着变老会逐渐失去产蛋能力。而这样的鸡产下的蛋往往变得既重又易破损，这就降低了其商业价值。在一段时间内停止喂料、或者停止喂料和饮用水从而使鸡停止下蛋，等其羽毛脱掉后再恢复喂食，通过这种方法可使鸡得以恢复。这种方法叫做强制换羽，并在产蛋行业得到广泛应用，以提高蛋生产的经济效益。
在一群经强制换羽处理的蛋鸡中，许多个体表现出了产蛋能力和蛋质量的提高，然而，也有一些个体由于喂食停止而受到了伤害，并可能死去或丧失产蛋能力。这种伤害也可导致对有害细菌的防护减弱，从而致使鸡蛋受污染的可能性增大。因此，需要找到一种既能进行有效的强制换羽、又不会对诸如蛋鸡等家禽造成伤害的办法。
已知乳酸菌，如罗氏乳酸杆菌(Lactobacillus reuteri)，可被施用于鸡而使沙门氏菌的增殖受到抑制(JP-10-265395-A，JP-10-330274)。但是，迄今为止人们并不知道乳酸菌也可为减少强制换羽所造成伤害的目的而施用于成年鸡。
发明公开
本发明的目的是提供一种强制换羽防伤害剂，其能在进行有效强制换羽的过程中，不会对家禽造成伤害，以及提供一种使用上述防伤害剂进行强制换羽的方法。
为实现上述目的，本发明人做了大量研究，发现经强制换羽处理后家禽的肠道遭受了由饥饿而引起的严重细胞损伤，而上述在强制换羽中由饥饿引起的损伤可以通过服用一种含有乳酸菌的防伤害剂而得到显著改善，从而完成了本发明。
根据本发明，提供了强制换羽防伤害剂，所述防伤害剂含有作为活性成分的乳酸菌。
根据本发明，也提供了一种强制换羽的方法，所述方法包括下述步骤：停止对家禽喂食，让所述家禽服用上面提到的强制换羽防伤害剂。
本发明的优选实施方案
本发明所述地强制换羽防伤害剂含有作为活性成分的乳酸菌。所述乳酸菌优选以服用时为活菌的形态存在。
乳酸菌优选来自于成年蛋鸡，因为这样的乳酸菌会比较容易附着于家禽的肠道壁，即使当其悬浮于供服用的自来水中时，也容易成活。由于自来水通常是作为饮用水提供给成年鸡，因此，那些即使悬浮于自来水也能成活的乳酸菌，在其被混入饮用水进行施用时特别有优势。
乳酸菌可优选同型(homo)乳酸菌和异型(hetero)乳酸菌的结合物，所述同型乳酸菌指的是只将葡萄糖转变为乳酸的菌种，而异型乳酸菌指的是将葡萄糖转变为乳酸和其它物质如醋酸的菌种，这可使乳酸菌在肠内得到广泛分布，而又不会对肠道造成伤害。
同型乳酸菌可包括干酪乳酸杆菌(Lactobacillus casei)，植物乳酸杆菌(L.plantarum)，嗜酸乳酸杆菌(L.acidophilus)和唾液乳酸杆菌(L.salivarius)，尤其优选唾液乳酸杆菌。
异型乳酸杆菌可包括罗氏乳酸杆菌(L.reuteri)和发酵乳酸杆菌(L.fermentum)，尤其优选罗氏乳酸杆菌。
唾液乳酸杆菌优选为唾液乳酸杆菌LH8菌株【保藏于国际专利生物保藏单位—独立行政法人产业技术综合研究所，保藏编号为FERM BP-08617，2004年2月13日(与2003年1月8日保藏编号为FERM P-19181的细菌相同)】。罗氏乳酸杆菌优选为罗氏乳酸杆菌NHL2菌株【保藏于国际专利生物保藏单位—独立行政法人产业技术综合研究所，保藏编号为FERM BP-08618，2004年2月13日(与2003年1月8日保藏编号为FERMP-19182的细菌相同)】。
除了乳酸菌外，本发明所述的防伤害剂还可包含能促进肠内乳酸菌生长的低聚糖。所述低聚糖可以是那些不会被消化酶所消化、但可被乳酸菌利用、从而能促进乳酸菌增殖的低聚糖。尤其是，所述低聚糖为半乳糖低聚糖、果糖低聚糖、木糖低聚糖或其混合物。
本发明所述的防伤害剂中每1 CFU的总乳酸菌可含有0-150mg低聚糖。这样，上述防伤害剂中的低聚糖有助于提高已粘附并定居在小肠壁上的乳酸菌的生存能力，从而增强中和碱性肠液和胰液的效力，并促进乳酸菌的增殖，进而抑制大肠内的有害细菌。
本发明所述防伤害剂中乳酸菌的含量没有限制，可适宜地调节至以较合适剂量进行服用的程度，这将在下面进行说明。
本发明所述防伤害剂的服用剂量可为相对于所用家禽每千克体重每天105CFU-5×108CFU的总乳酸菌数。当所述乳酸菌同时含有同型和异型乳酸菌时，优选每一种的含量为相对于家禽每千克体重每天105-108CFU。同型乳酸菌和异型乳酸菌的比例并不局限于1∶1。
本防伤害剂的处理对象为家禽如蛋鸡，尤其是鸡龄在400天或更高、产蛋能力下降的鸡。
可通过服用本发明所述的防伤害剂而避免的由强制换羽引起的伤害包括，在强制换羽期间由于饥饿而引起的肠道壁细胞的损伤。不局限于现有理论，确信防护作用的机理如下所述。
家禽的肠液和胰液是碱性的，其中所含的主要蛋白酶为胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶，这两种蛋白酶有最适的碱性pH值。当家禽处于饥饿状态时，肠液和胰液中的蛋白酶消化了肠道壁上的绒毛细胞的蛋白，从而导致肠道壁上的细胞坏死而脱落。
在这种情况下，当容易附着并定居在小肠和大肠壁上的异型和同型乳酸菌被服用后，这些细菌可附于肠道壁并分泌乳酸，从而中和了肠液和胰液的碱性，以便防止蛋白酶消化肠细胞。这样也就防止在饥饿时期肠道壁细胞的坏死和脱落，从而防止了在强制换羽期间由于喂食减少或停止而造成伤害。
本发明所述的强制换羽方法包括下述步骤：停止对诸如蛋鸡等家禽喂食，再给家禽服用本发明所述的防伤害剂。
停止喂食的时间长短没有特别的限制，可适宜地调节至适合强制换羽后能进行良好恢复，通常可为6-14天。优选地，禁食以停止喂食同时继续供给饮用水的方式进行，但也可选择以供给不含营养成分的饲料的方式进行。在后面的例子中，本发明所述的防伤害剂可被添加入到饮用水中，或者添加入没有营养的饲料中。
服用防伤害剂的持续时间也没有特别的限制，可在禁食之前，之中和之后的任何一段或多段时间进行服用。优选地是，在禁食前开始服用，并持续服用直到禁食期结束后。例如，在禁食开始前三天就服用，直到禁食期结束后三天。在停止喂食期间本防伤害剂的服用量可与停止喂食前的服用量不同。是否含有低聚糖及其类似成分以及它们的含量，都可以改变。
本发明所述的强制换羽防伤害剂和强制换羽方法，使在不对家禽造成伤害的前提下进行有效的强制换羽变为现实。而且，对家禽肠内有害细菌的生长抑制作用也可以是预期的，从而使蛋生产的数量、质量和安全性都得到了提高。
实施例
现用实施例对本发明作出更详细的说明，但本发明并不限于所述实施例。实施例1和对比实施例1
60000只蛋鸡(品种：Highline Laura)被关在一个没有窗的禽舍里，每个禽舍能容纳60000只鸡、并装备有两根独立的水供应管，每根水管供30000只鸡。J115-3(由SHOWA SANGYO有限公司生产)被作为饲料来供应。从鸡龄达到447天的那天起，鸡被停止喂食9天以进行强制换羽。
其中一根供30000只鸡的水供应管作为实施例1。在停止喂食开始前两天，罗氏乳酸杆菌NHL2菌株(FERM BP-08618)(以下称为NHL2)和唾液乳酸杆菌LH8菌株(FERM BP-08617)(以下称为LH8)以含于饮用水中的方式供给鸡，每种菌的浓度为1×108CFU/每只鸡每两小时供应的水。在9天的禁食期间，所供饮用水中NHL2和LH8每种菌的浓度为3.5×105CFU/ml。在禁食结束后的第一天，每两小时所供应饮用水中NHL2和LH8每种菌的浓度为1×108CFU/ml。两根水管中的另一根供其它30000只鸡的水管作为对比实施例1，通过这根水管的饮用水只是水。
在禁食期的最后一天，从实施例1和对比实施例1中各宰杀5只鸡。检测回肠中的成分，从而来测定片状剥落的肠胃组织的数量，同时对菌群和回肠末端绒毛细胞的状态进行组织化学测定。结果见表1
表1
肠道 肠道绒毛 样本编号 含量 菌群 坏死 剥落嗜曙红细胞中性粒细胞 巨噬细胞 淋巴细胞 实施例1 1 ++ - + ++ + + + + 2 + - + + + ++ + ++ 3 ++ + + ++ + + + + 4 + + + + + + + + 5 + - + + + + + +对比实施例 1 1 ++ - ++ ++ + ++ + + 2 +++ - +++ +++ + + + + 3 ++ - ++ +++ + + + + 4 ++ - ++ ++ + + + ++ 5 +++ - +++ +++ + + + ++
-：未测到；+：痕量；++：大量；+++：非常大量
试验中从强制换羽开始起的两个星期时间内，由于死亡或不具有能恢复成产蛋鸡的可能性而被宰杀的鸡的数目，在试验组和对照组中分别为201只和282只(p＜0.001)，这些数字不包括为检测目的而宰杀的鸡。在接下去五个星期中死亡或被宰杀的鸡的数目，在试验组中是105只，而在对照组中为290只(P＜0.001)。
从开始禁食前到恢复喂食后，对粪便，回肠壁和盲肠壁中各个菌群的数目进行了测定。结果分别见表2、3、4。在这些表中，除另有说明外，取样日期这一栏中日期的数值指的是从开始禁食起计算的天数。
表2：粪便中菌群数目(log CFU/g)
对比实施例1(6个样本) 实施例1(6个样本)取样日期(M/D) 3/29 (在恢复喂食前) 4/17 (恢复喂食2天后) 4/24 (恢复喂食9天后) 3/29 (在恢复喂食前) 4/17 (恢复喂食2天后) 4/24 (恢复喂食9天后)肠杆菌 5.61±0.88 7.99±0.51 6.06±0.57 5.39±0.74 7.79±0.38 5.99±0.92产气荚膜梭菌 2.32(1/6) 626±1.10(6/6) 4.84±0.72(6/6) 2.32(1/6) 5.65±0.84(6/6) 4.55±1.17(6/6)沙门氏菌 ND ND ND ND ND ND乳酸杆菌 8.67±0.37 6.74±0.80 8.72±0.34 8.80±0.19 8.65±0.19** 8.53±0.67**细菌总量 9.00±0.30 9.44±0.17 9.35±0.46 8.95±0.19 9.27±0.17 9.04±0.33乳酸杆菌/细菌总量(厌氧性的)(％) 50.1±17.8 0.5±0.5 31.5±29.1 71.0±15.0 27.5±14.3 51.4±42.5
**p＜0.01
(/)：被检出细菌的样本数目/共被检查样本的总数目
表3：回肠壁上菌群的数目(log CFU/g)
对比实施例1(5个样本) 实施例1(5个样本) 取样日期 (M/D) 3/29 (以前) 4/9 (3天) 4/12 (6天) 4/15 (9天) 3/29 (以前) 4/9 (3天) 4/12 (6天) 4/15 (9天) 肠杆菌 2.82±0.16 (3/5) 4.01±0.88 (4/5) 4.07±1.67 3.58±1.48 4.12±0.62 (4/5) 4.40±0.69 (4/5) 4.67±1.54 (4/5) 6.17±1.03* 产气荚膜梭菌 ND ND ND ND ND ND ND ND 沙门氏菌 ND ND ND ND ND ND ND ND 乳酸杆菌 6.94±0.41 (5/5) 2.30(1/5) ND ND 6.70±0.46 (5/5) 3.78±1.38 (2/5) ND ND 细菌总量 7.21±0.44 6.94±0.30 (3/5) 5.81±0.95 6.07±0.56 6.93±0.56 6.88±0.52 (3/5) 6.12±1.01 6.30±0.94乳酸杆菌/细菌总量(厌氧性 的)(％) 65.3±39.3 (5/5) 0.00 (1/5) (0/5) (0/5) 71.1±40.1 (5/5) 1.5 (1/5) (0/5) (0/5)
*p＜0.05
(/)：被检出细菌的样本数目/共被检查样本的总数目
表4：盲肠壁上菌群的数目(log CFU/g)
对比实施例1(5个样本) 实施例1(5个样本) 取样日期 (M/D) 3/29 (以前) 4/9 (3天) 4/12 (6天) 4/15 (9天) 3/29 (以前) 4/9 (3天) 4/12 (6天) 4/15 (9天) 肠杆菌 4.63±1.67 7.51±1.47 7.24±0.86 7.88±0.31 5.16±1.25 6.58±1.54 7.80±0.44 7.66±0.75 产气荚膜梭菌 ND 3.24(1/5) 2.73(1/5) 3.35±0.45 (3/5) ND 3.03(1/5) ND 3.67(1/5) 沙门氏菌 ND ND ND ND ND ND ND ND 乳酸杆菌 8.28±0.60 5.12±0.87 4.02±1.18 (3/5) 4.06±1.50 (2/5) 8.59±0.5 5.85±0.53 (3/4) 4.83±1.38 (3/5) 5.86(1/5) 细菌总量 9.01±0.71 9.09±0.27 9.07±0.39 9.07±0.23 9.41±0.25 9.45±0.12 9.09±0.19 9.52±0.18 乳酸杆菌/细菌 总量(厌氧性 的)(％) 23.7±15.8 0.04±0.05 0.01±0.02 (3/5) 0.01±0.01 (2/5) 21.4±21.09 (5/5) 0.05±0.04 (3/4) 0.26±0.43 (3/5) 0.02 (1/5)
(/)：被检出细菌的样本数目/共被检查样本的总数目
实施例2
60000只蛋鸡(品种：Highline Julia)被关在一个没有窗的禽舍里，每个禽舍能容纳60000只鸡。J115-3(由SHOWA SANGYO有限公司生产)被作为饲料供给。从鸡龄达到435天的那天起，鸡被停止喂食7天以进行强制换羽。
在禁食开始前两天，NHL2菌株和LH8菌株以含于饮用水中的方式供给鸡，每种菌的浓度为1×108CFU/每只鸡每两小时供应的水，在这7天的禁食期间，3.5×105CFU/ml的NHL2和3.5×105CFU/ml的LH8以及56微克/ml的低聚糖以饮用水的方式供给，所述低聚糖为一种组合物，其组成见表5。
表5
组分 标准含量(wt％) 水 1.1 水苏糖 12.0 棉子糖 4.0 麦芽糖 3.5 麦芽三糖 4.5 麦芽四糖 25.0 蔗糖 20.0 其它糖 29.7
从开始禁食前到恢复喂食后，对粪便，回肠壁和盲肠壁中各个菌群的数目进行了测定。结果分别见表6、7。在这些表中，除另有说明外，取样日期这一栏中的日期的数值指的是从禁食起计算的天数。
表6：粪便中菌群的数目(log CFU/g)
取样日期(M/D) (5个样本) 9/26 (以前) 10/8 (喂食3天后) 肠杆菌 5.08±0.61 6.08±0.76 产气荚膜梭菌 3.39±1.28(4/5) 3.13±0.71(3/5) 沙门氏菌 ND ND 乳酸杆菌 罗氏乳酸杆菌NHL2 唾液乳酸杆菌LH8 8.79±0.42 ND ND 9.00±0.13 8.09±0.29 8.11±0.31 细菌总量 9.12±0.42 9.24±0.10乳酸杆菌/细菌总量(厌氧 性的)(％)NHL2/乳酸杆菌总量(％)LH8/乳酸杆菌总量(％) 47.8±6.5 - - 58.9±16.1 14.6±8.3 14.4±7.4
表7：回肠和盲肠中菌群的数目(log CFU/g)
回肠 盲肠 取样日期(M/D)(5个样本) 9/26(以前) 10/4(6天) 9/26(以前) 10/4(6天) 肠杆菌 ND 5.15±0.64(2/5) 3.60±0.05(4/5) 6.40±1.14 产气荚膜梭菌 ND ND ND 2.84(1/5) 沙门氏菌 ND ND ND ND 乳酸杆菌 罗氏乳酸杆菌NHL2 唾液乳酸杆菌LH8 6.42±0.55 ND ND 4.12(1/5) ND 4.03(1/5) 8.79±0.42 ND ND 3.77±0.64(3/5) ND 4.23(1/5) 细菌总量 6.96±0.42(4/5) 6.39±1.54 9.41±0.20 9.59±0.10 乳酸杆菌/细菌总量(厌氧 性的)(％) NHL2/乳酸杆菌总量(％) LH8/乳酸杆菌总量(％) 36.5±18.4(4/5) - - 46.9(1/5) - 82.0(1/5) 27.4±11.9 - - 0.0±0.0(3/5) - 64.5(1/5)
(/)：被检出细菌的样本数目/总共被检查样本的数目
参照实施例1
表8中的乳酸杆菌属中的每一个乳酸菌菌株都被悬浮于自来水中(每种悬浮液的浓度为0小时的浓度)。悬浮液保持于室温状态下，并用常规方法不时测定悬浮液中活菌的数目。结果见表8。在被测定的五个菌株中，两个是罗氏乳酸杆菌(L.reuteri)，其中一个是约翰逊乳酸杆菌(L.johnsonii)，这些菌株都来源于鸡，并已在JP-10-265395-A和JP-10-330274-A中公开，剩下的两个菌株为各实施例中所用的来源于成年鸡的NHL2和LH8乳酸菌菌株。
表8
菌数(细胞/毫升) 小时 来源于鸡的罗 氏乳酸杆菌 来源于鸡的罗 氏乳酸杆菌 来源于鸡的约 翰逊乳酸杆菌 来源于成年鸡的 罗氏乳酸杆菌 来源于鸡的唾 液乳酸杆菌 0 6.4×105 6.0×105 1.0×105 9.5×1010 6.0×1010 1 4.2×105 1.0×105 4.0×104 - - 2 5.2×104 2.2×104 3.2×104 - - 3 - - - 4.4×1010 2.2×1010 4 6.8×103 8.0×102 7.8×103 - - 8 2.0×102 0.0 1.0×103 - - 24 0.0 0.0 0.0 3.0×1010 2.0×1010