一种胰岛素口服制剂的制备方法.pdf

一种胰岛素口服制剂的制备方法；解决了注射和静脉给药给糖尿病患者带来了极大痛苦的问题；其制备方法如下1.将丙烯酸树脂III溶解在无水乙醇溶液中制成溶液A；2.将胰岛素加入溶液A中制成溶液B，3.将牛磺胆酸钠溶解在液体石蜡中，后加入溶液B中制成溶液C；4.将明胶溶解在蒸馏水中，后加入溶液C中制成第一次包封的胰岛素微球称为溶液D；5.取与溶液C中等量的液体石蜡加入溶液D中制成溶液E；6.将乙酰水杨酸溶解在蒸馏水中形成混合液，再取与上步4等量的明胶与蒸馏水的混合液加入到另取一份溶液A中，后加入溶液E中，最后制成第二次包封的胰岛素微球溶液；上述方法制成的口服制剂给糖尿病大鼠及糖尿病患者应用取得了良好的降血糖效果。

1、  一种生物利用度高，符合餐后血糖变化规律的胰岛素口服制剂的制备方法；其特征在于，按如下步骤制备：
(1)将丙烯酸树脂III溶解在无水乙醇溶液中制成溶液A；其中丙烯酸树脂III的含量为30-50mg/ml；
(2)将胰岛素在搅拌状态下缓慢加入溶液A中制成溶液B，其中胰岛素含量为15-20u/ml；
(3)将牛磺胆酸钠溶解在液体石蜡中，每毫升液体石蜡，放入牛磺胆酸钠20-50mg，充分溶解后所得的混合液在搅拌状态下缓慢加入溶液B中，使之充分分散在溶液B中制成溶液C；其中牛磺胆酸钠含量为3-6mg/ml，液体石蜡含量为0.1-0.2mg/ml；
(4)将明胶溶解在蒸馏水中，每毫升蒸馏水放入明胶5-20mg，充分溶解后所得的混合液在搅拌状态下缓慢加入溶液C中，制成第一次包封的胰岛素微球称为溶液D；其中明胶含量为1-4mg/ml，蒸馏水含量为0.5-1ml/ml；
(5)取与溶液C中等量的液体石蜡在搅拌状态下缓慢加入溶液D中，制成溶液E，其中液体石蜡含量为0.2-0.4ml/ml；
(6)将乙酰水杨酸溶解在蒸馏水中，每毫升蒸馏水放入乙酰水杨酸5-20mg，充分溶解后形成混合液；再取与步骤(4)等量的明胶与蒸馏水的混合液加入乙酰水杨酸与蒸馏水的混合溶液中，充分溶解后缓慢加入到另取一份溶液A中，充分溶解后在搅拌状态下缓慢加入溶液E中，最后制成第二次包封的胰岛素微球溶液；其中明胶含量为2-5mg/ml，乙酰水杨酸含量为2-5mg/ml，蒸馏水含量为0.1-0.3ml/ml，胰岛素含量为10-15u/ml；
上述制备过程中，搅拌速度为500-1500转/分，搅拌时间1-2小时，整个操作在25℃以下室温进行；

2、  根据权利要求1所述的一种胰岛素口服制剂的制备方法，其特征在于，按如下步骤制备：
其特征在于，按如下步骤制备：
(1)将丙烯酸树脂III溶解在无水乙醇溶液中制成溶液A；其中丙烯酸树脂III的含量为30mg/ml；
(2)将胰岛素在搅拌状态下缓慢加入溶液A中制成溶液B，其中胰岛素含量为15u/ml；
(3)将牛磺胆酸钠溶解在液体石蜡中，每毫升液体石蜡，放入牛磺胆酸钠20mg，充分溶解后所得的混合液在搅拌状态下缓慢加入溶液B中，使之充分分散在溶液B中制成溶液C；其中牛磺胆酸钠含量为3mg/ml，液体石蜡含量为0.1mg/ml；
(4)将明胶溶解在蒸馏水中，每毫升蒸馏水放入明胶5mg，充分溶解后所得的混合液在搅拌状态下缓慢加入溶液C中，制成第一次包封的胰岛素微球称为溶液D；其中明胶含量为1mg/ml，蒸馏水含量为0.5ml/ml；
(5)取与溶液C中等量的液体石蜡在搅拌状态下缓慢加入溶液D中，制成溶液E，其中液体石蜡含量为0.2ml/ml；
(6)将乙酰水杨酸溶解在蒸馏水中，每毫升蒸馏水放入乙酰水杨酸5mg，充分溶解后形成混合液；再取与步骤(4)等量的明胶与蒸馏水的混合液加入乙酰水杨酸与蒸馏水的混合溶液中，充分溶解后缓慢加入到另取一份溶液A中，充分溶解后在搅拌状态下缓慢加入溶液E中，最后制成第二次包封的胰岛素微球溶液；其中明胶含量为2mg/ml，乙酰水杨酸含量为2mg/ml，蒸馏水含量为0.1ml/ml，胰岛素含量为10u/ml；
上述制备过程中，搅拌速度为500转/分，搅拌时间1小时，整个操作在25℃以下室温进行；

3、  根据权利要求1所述的一种胰岛素口服制剂的制备方法，其特征在于，按如下步骤制备：
(1)将丙烯酸树脂III溶解在无水乙醇溶液中制成溶液A；其中丙烯酸树脂III的含量为40mg/ml；
(2)将胰岛素在搅拌状态下缓慢加入溶液A中制成溶液B，其中胰岛素含量为18u/ml；
(3)将牛磺胆酸钠溶解在液体石蜡中，每毫升液体石蜡，放入牛磺胆酸钠35mg，充分溶解后所得的混合液在搅拌状态下缓慢加入溶液B中，使之充分分散在溶液B中制成溶液C；其中牛磺胆酸钠含量为4.5mg/ml，液体石蜡含量为0.15mg/ml；
(4)将明胶溶解在蒸馏水中，每毫升蒸馏水放入明胶12.5mg，充分溶解后所得的混合液在搅拌状态下缓慢加入溶液C中，制成第一次包封的胰岛素微球称为溶液D；其中明胶含量为2.5mg/ml，蒸馏水含量为0.75ml/ml；
(5)取与溶液C中等量的液体石蜡在搅拌状态下缓慢加入溶液D中，制成溶液E，其中液体石蜡含量为0.3ml/ml；
(6)将乙酰水杨酸溶解在蒸馏水中，每毫升蒸馏水放入乙酰水杨酸12.5mg，充分溶解后形成混合液；再取与步骤(4)等量的明胶与蒸馏水的混合液加入乙酰水杨酸与蒸馏水的混合溶液中，充分溶解后缓慢加入到另取一份溶液A中，充分溶解后在搅拌状态下缓慢加入溶液E中，最后制成第二次包封的胰岛素微球溶液；其中明胶含量为3.5mg/ml，乙酰水杨酸含量为3.5mg/ml，蒸馏水含量为0.2ml/ml，胰岛素含量为12u/ml；
上述制备过程中，搅拌速度为1000转/分，搅拌时间1.5小时，整个操作在25℃以下室温进行；

4、  根据权利要求1所述的一种胰岛素口服制剂的制备方法，其特征在于，按如下步骤制备：
(1)将丙烯酸树脂III溶解在无水乙醇溶液中制成溶液A；其中丙烯酸树脂III的含量为50mg/ml；
(2)将胰岛素在搅拌状态下缓慢加入溶液A中制成溶液B，其中胰岛素含量为20u/ml；
(3)将牛磺胆酸钠溶解在液体石蜡中，每毫升液体石蜡，放入牛磺胆酸钠50mg，充分溶解后所得的混合液在搅拌状态下缓慢加入溶液B中，使之充分分散在溶液B中制成溶液C；其中牛磺胆酸钠含量为6mg/ml，液体石蜡含量为0.2mg/ml；
(4)将明胶溶解在蒸馏水中，每毫升蒸馏水放入明胶20mg，充分溶解后所得的混合液在搅拌状态下缓慢加入溶液C中，制成第一次包封的胰岛素微球称为溶液D；其中明胶含量为4mg/ml，蒸馏水含量为1ml/ml；
(5)取与溶液C中等量的液体石蜡在搅拌状态下缓慢加入溶液D中，制成溶液E，其中液体石蜡含量为0.4ml/ml；
(6)将乙酰水杨酸溶解在蒸馏水中，每毫升蒸馏水放入乙酰水杨酸20mg，充分溶解后形成混合液；再取与步骤(4)等量的明胶与蒸馏水的混合液加入乙酰水杨酸与蒸馏水的混合溶液中，充分溶解后缓慢加入到另取一份溶液A中，充分溶解后在搅拌状态下缓慢加入溶液E中，最后制成第二次包封的胰岛素微球溶液；其中明胶含量为5mg/ml，乙酰水杨酸含量为5mg/ml，蒸馏水含量为0.3ml/ml，胰岛素含量为15u/ml；
上述制备过程中，搅拌速度为1500转/分，搅拌时间2小时，整个操作在25℃以下室温进行。

一种胰岛素口服制剂的制备方法
技术领域
本发明为一种治疗糖尿病的药物的制备方法，特别涉及一种胰岛素口服制剂的制备方法。
背景技术
糖尿病是当代世界三大疾病之一，我国近年发病率逐渐增多。目前保守估计世界有1.2亿，我国有一千多万糖尿病患者。胰岛素是目前治疗该病的王牌药物，由于胰岛素在胃肠道内易被消化道蛋白水解酶类破坏，且分子量大，易于聚合及胃肠道粘膜的低通透性，所以口服无效，至今只能注射和静脉给药。由于糖尿病是终身疾病，特别是胰岛素依赖型糖尿病及重症糖尿病需终生使用胰岛素，每日1-4次的胰岛素注射给患者带来了极大的不便和痛苦，长期的注射用药还会产生局部红肿，皮下结节，皮下脂肪萎缩等，致使许多糖尿病患者拒绝应用胰岛素而使血糖控制不佳，产生各种各样并发症，如脑血管病、肾病、肾功能不全、视网膜病变等。
国内外研究证实口服游离型胰岛素无效；多年来国外学者对胰岛素口服制剂的研究较多，大多围绕在寻找胰岛素的稳定剂、吸收促进剂以及高分子作为载体并加入蛋白酶抑制剂的纳米粒、微囊、脂质体复乳等。随着研究的进展，人们发现用脂质体作为载体不够稳定，易于聚集融合使被包裹药物的吸收变得困难。有研究表明用胶原、壳聚糖包覆的小单室脂质体、聚合膜脂质体及一些物质如海藻糖等使载药脂质稳定性提高，但很多研究人员认为脂质体包裹后并不能使口服吸收变得容易，且对吸收的影响也不可预测和重现。纳米粒用做胰岛素的载体，由于粒径小，通常认为它很容易通过人体最小的毛细血管而吸收良好。1997年Kim报道了用聚脂等含氮聚合物包裹的胰岛素纳米粒是结肠靶向系统，大鼠服用后6小时血糖开始下降，可持续12小时以上，法国Damge制备了胰岛素聚α-氰基丙烯酸纳米粒，具有一次服用可持续20天左右降糖作用。很明显纳米粒由于缓释不符合进餐时胰岛素快速分泌规律，出现餐后血糖控制差，长期服用药效叠加，产生空腹时严重低血糖问题，不如作用周期短的药物在临床上更易控制。潘研等研究显示粒径为120、350和1000nm的胰岛素生物粘附微球，给四氧嘧啶糖尿病大鼠口服后相对生物利用度分别为10.2％±0.5％、14.9％±1.3％、7.3％±0.8％，与以往认为胰岛素载体粒径越小，吸收越好，大于500nm的颗粒肠道无法吸收，大于300nm的颗粒不能进入血液循环的观点不一致。目前口服胰岛素制剂的研究现状是至今尚未见到实际应用在糖尿病治疗的临床报告。主要原因是口服制剂中胰岛素的生物利用度低，药效不稳定，重复性差。
发明内容
本发明的目的在于解决上述所存在的问题；提供一种易于被患者接受，给药方式在药动学上模仿生理性胰岛素的分泌，安全可靠的胰岛素新剂型的一种胰岛素口服制剂的制备方法。
本发明为一种生物利用度高，符合餐后血糖变化规律的胰岛素口服制剂的制备方法。
按如下步骤制备：
(1)将丙烯酸树脂III溶解在无水乙醇溶液中制成溶液A；其中丙烯酸树脂III的含量为30-50mg/ml；
(2)将胰岛素在搅拌状态下缓慢加入溶液A中制成溶液B，其中胰岛素含量为15-20u/ml；
(3)将牛磺胆酸钠溶解在液体石蜡中，每毫升液体石蜡放入牛磺胆酸钠20-50mg，充分溶解后所得的混合液在搅拌状态下缓慢加入溶液B中，使之充分分散在溶液B中制成溶液C；其中牛磺胆酸钠含量为3-6mg/ml，液体石蜡含量为0.1-0.2mg/ml；
(4)将明胶溶解在蒸馏水中，每毫升蒸馏水放入明胶5-20mg，充分溶解后所得的混合液在搅拌状态下缓慢加入溶液C中，制成第一次包封的胰岛素微球称为溶液D；其中明胶含量为1-4mg/ml，蒸馏水含量为0.5-1ml/ml；
(5)取与溶液C中等量的液体石蜡在搅拌状态下缓慢加入溶液D中，制成溶液E，其中液体石蜡含量为0.2-0.4ml/ml；
(6)将乙酰水杨酸溶解在蒸馏水中，每毫升蒸馏水放入乙酰水杨酸5-20mg，充分溶解后形成混合液；再取与步骤(4)等量的明胶与蒸馏水的混合液加入乙酰水杨酸与蒸馏水的混合溶液中，充分溶解后缓慢加入到另取一份溶液A中，充分溶解后在搅拌状态下缓慢加入溶液E中，最后制成第二次包封的胰岛素微球溶液；其中明胶含量为2-5mg/ml，乙酰水杨酸含量为2-5mg/ml，蒸馏水含量为0.1-0.3ml/ml，胰岛素含量为10-15u/ml。
上述制备过程中，搅拌速度为500-1500转/分，搅拌时间1-2小时，整个操作在25℃以下室温进行。
本发明的优点在于，所采用的丙烯酸树脂III是制药中常用的辅料，口服后不参与人体的生理代谢，以不变的分子结构形式很快从人体内排出体外，无毒，具有成膜性能好，在消化液中稳定，不受消化酶的破坏，在PH≥7的环境中才能溶解的特点。而消化道中胃、十二指肠、小肠上部的PH均小于6.5；故丙烯酸树脂III在上述部位不能溶解破坏，如果用该物质包裹胰岛素可避免胰岛素在胃、十二指肠、小肠上部被消化酶类破坏，而在小肠下部吸收发挥生理作用。用丙烯酸树脂III包裹胰岛素，由于其在小肠下部迅速溶解，胰岛素很快大量被释放出来，结果使口服胰岛素后发挥作用快，作用时间短，符合生理状态下进餐时胰岛素快速分泌，餐后高血糖的需要，不易产生低血糖。在吸收促进剂中选择牛磺胆酸钠与胰岛素溶解在一起；牛磺胆酸钠具有较高的溶解性，亲脂性和Ga⁺⁺络合能力，其促进吸收作用有三，(1)、降低溶液中胰岛素聚合度，增加胰岛素以单体存在，分子量小，易于吸收。(2)、抑制蛋白水解作用，抑制药物的水解，使其以具有生物活性的形式存在于体内发挥药理作用。(3)、减少粘液表面粘层的粘度，并通过与Ga⁺⁺络合使Ga⁺⁺浓度降低，粘膜通过细胞结合分子系统使细胞间隙增大，使药物扩散更容易进行，有利于药物吸收。为防止胰岛素与牛磺胆酸钠溶解不完全，及使肠道吸收胰岛素的膜屏障作用降低，加入了第二种吸收促进剂乙酰水杨酸。乙酰水杨酸具有如下作用，(1)、增加生物膜的流动性，使药物容易穿过肠粘膜；(2)、增加药物的热力学运动，使药物不易聚集，易于吸收。二种药物促进剂的作用相加，使胰岛素更易于吸收，为防止丙烯酸树脂III对胰岛素包封不完全，用丙烯酸树脂III对胰岛素二次包封，以增加胰岛素包封率。液体石蜡和明胶具有促进药物分散及形成由丙烯酸树脂III包裹胰岛素微球的作用，通过上述制备方法制成的口服制剂给糖尿病大鼠及糖尿病患者应用取得了良好的降血糖效果。
具体实施方式
下面给出具体的实施例：
实例1
其制备方法按如下步骤制备：
(1)将丙烯酸树脂III溶解在无水乙醇溶液中制成溶液A；其中丙烯酸树脂III的含量为30mg/ml；
(2)将胰岛素在搅拌状态下缓慢加入溶液A中制成溶液B，其中胰岛素含量为15u/ml；
(3)将牛磺胆酸钠溶解在液体石蜡中，每毫升液体石蜡，放入牛磺胆酸钠20mg，充分溶解后所得的混合液在搅拌状态下缓慢加入溶液B中，使之充分分散在溶液B中制成溶液C；其中牛磺胆酸钠含量为3mg/ml，液体石蜡含量为0.1mg/ml；
(4)将明胶溶解在蒸馏水中，每毫升蒸馏水放入明胶5mg，充分溶解后所得地混合液在搅拌状态下缓慢加入溶液C中，制成第一次包封的胰岛素微球称为溶液D；其中明胶含量为1mg/ml，蒸馏水含量为0.5ml/ml；
(5)取与溶液C中等量的液体石蜡在搅拌状态下缓慢加入溶液D中，制成溶液E，其中液体石蜡含量为0.2ml/ml；
(6)将乙酰水杨酸溶解在蒸馏水中，每毫升蒸馏水放入乙酰水杨酸5mg，充分溶解后形成混合液；再取与步骤(4)等量的明胶与蒸馏水的混合液加入乙酰水杨酸与蒸馏水的混合溶液中，充分溶解后缓慢加入到另取一份溶液A中，充分溶解后在搅拌状态下缓慢加入溶液E中，最后制成第二次包封的胰岛素微球溶液；其中明胶含量为2mg/ml，乙酰水杨酸含量为2mg/ml，蒸馏水含量为0.1ml/ml，胰岛素含量为10u/ml。
上述制备过程中，搅拌速度为500转/分，搅拌时间1小时，整个操作在25℃以下室温进行。
实例2
其制备方法按如下步骤制备：
(1)将丙烯酸树脂III溶解在无水乙醇溶液中制成溶液A；其中丙烯酸树脂III的含量为40mg/ml；
(2)将胰岛素在搅拌状态下缓慢加入溶液A中制成溶液B，其中胰岛素含量为18u/ml；
(3)将牛磺胆酸钠溶解在液体石蜡中，每毫升液体石蜡，放入牛磺胆酸钠35mg，充分溶解后所得的混合液在搅拌状态下缓慢加入溶液B中，使之充分分散在溶液B中制成溶液C；其中牛磺胆酸钠含量为4.5mg/ml，液体石蜡含量为0.15mg/ml；
(4)将明胶溶解在蒸馏水中，每毫升蒸馏水放入明胶12.5mg，充分溶解后所得的混合液在搅拌状态下缓慢加入溶液C中，制成第一次包封的胰岛素微球称为溶液D；其中明胶含量为2.5mg/ml，蒸馏水含量为0.75ml/ml；
(5)取与溶液C中等量的液体石蜡在搅拌状态下缓慢加入溶液D中，制成溶液E，其中液体石蜡含量为0.3ml/ml；
(6)将乙酰水杨酸溶解在蒸馏水中，每毫升蒸馏水放入乙酰水杨酸12.5mg，充分溶解后形成混合液；再取与步骤(4)等量的明胶与蒸馏水的混合液加入乙酰水杨酸与蒸馏水的混合溶液中，充分溶解后缓慢加入到另取一份溶液A中，充分溶解后在搅拌状态下缓慢加入溶液E中，最后制成第二次包封的胰岛素微球溶液；其中明胶含量为3.5mg/ml，乙酰水杨酸含量为3.5mg/ml，蒸馏水含量为0.2ml/ml，胰岛素含量为12u/ml。
上述制备过程中，搅拌速度为1000转/分，搅拌时间1.5小时，整个操作在25℃以下室温进行。
实例3，
其制备方法按如下步骤制备：
(1)将丙烯酸树脂III溶解在无水乙醇溶液中制成溶液A；其中丙烯酸树脂III的含量为50mg/ml；
(2)将胰岛素在搅拌状态下缓慢加入溶液A中制成溶液B，其中胰岛素含量为20u/ml；
(3)将牛磺胆酸钠溶解在液体石蜡中，每毫升液体石蜡，放入牛磺胆酸钠50mg，充分溶解后所得的混合液在搅拌状态下缓慢加入溶液B中，使之充分分散在溶液B中制成溶液C；其中牛磺胆酸钠含量为6mg/ml，液体石蜡含量为0.2mg/ml；
(4)将明胶溶解在蒸馏水中，每毫升蒸馏水放入明胶20mg，充分溶解后所得的混合液在搅拌状态下缓慢加入溶液C中，制成第一次包封的胰岛素微球称为溶液D；其中明胶含量为4mg/ml，蒸馏水含量为1ml/ml；
(5)取与溶液C中等量的液体石蜡在搅拌状态下缓慢加入溶液D中，制成溶液E，其中液体石蜡含量为0.4ml/ml；
(6)将乙酰水杨酸溶解在蒸馏水中，每毫升蒸馏水放入乙酰水杨酸20mg，充分溶解后形成混合液；再取与步骤(4)等量的明胶与蒸馏水的混合液加入乙酰水杨酸与蒸馏水的混合溶液中，充分溶解后缓慢加入到另取一份溶液A中，充分溶解后在搅拌状态下缓慢加入溶液E中，最后制成第二次包封的胰岛素微球溶液。其中明胶含量为5mg/ml，乙酰水杨酸含量为5mg/ml，蒸馏水含量为0.3ml/ml，胰岛素含量为15u/ml。
上述制备过程中，搅拌速度为1500转/分，搅拌时间2小时，整个操作在25℃以下室温进行。