一种欧李红色素的提取纯化方法 【技术领域】
本发明涉及一种欧李(Prunus humilis Bunge)，又名钙果的红色素提取及其纯化方法。
背景技术
欧李是蔷薇科樱桃属多年生落叶小灌木，它是我国特有的世界上最矮小的木本果树，其果树根冠比达9∶1，具有耐干旱、耐低温、耐盐碱、耐瘠薄、能固沙和蓄水分等六大特点。欧李色素是成熟欧李的主要色素，主要以红色为主，色泽鲜艳且香气浓郁，不仅为鲜食之佳品，也可用于提取天然食用色素或香料。
近年来，我国对于天然色素的研究开发逐渐成熟，但在色素提取方面仍存在一定难点。采用传统得浸提方法，存在溶剂残留、纯度低、有异味、质量差等弊端，由于欧李色素属于花色苷，在中性及弱碱性条件下不稳定，为提取过程带来了很大的困扰。色素纯化不够，着色能力不强，稳定性差。超声提取法就是利用超声波产生的强烈振动，很高的加速度、强烈的空化效应、搅拌等特殊作用，可以破坏植物的细胞，使溶媒渗透到被提取物的细胞中，超声波的振动作用提高了细胞的破碎速度，缩短了破碎时间，使被提取物的化学成分溶于液体之中，再通过化学分离提纯以得到所需要的成分。同时，超声波产生的振动作用加强了细胞内物质的释放、扩散及溶解，大大的缩短提取时间，提高提取率，得到的化学成分的结构和性质也不会改变。
采用超滤与大孔树脂吸附相结合的方法是提高色素纯度的有效方法。其纯化过程易于控制，并且在纯化中不仅整个过程能耗少，成本低，而且所得天然色素产品较传统的提取工艺质量明显提高，色素产品杂质少，色价高。并且树脂吸附洗脱后可以反复使用，符合发展低碳经济社会的要求。
【发明内容】
本发明的目的是发明一种欧李红色素的提取及纯化方法，提高色素提取率，欧李红色素经纯化后能保证色素的质量。
下面是本发明关于欧李红色素的提取纯化的方法：
(1)欧李原料挑选、打浆：精选新鲜8-9成熟、无腐烂、无农药污染的欧李鲜果实清洗干净去核、打浆。
(2)恒温超声提取：将欧李浆液与80％醇(v/v)按照质量比1∶(4-6)混合，柠檬酸调节混合液pH值在2.0-3.5，在超声功率为100-1000w，温度25-50℃，超声时间10-60min的条件下提取，提取液使用150目滤网过滤，pH值为2.0-3.5的酸性乙醇溶液洗涤残渣，滤液在3000r/min离心20min，取上清液。
(3)超滤纯化：上清液采用0.1-0.2μm的超滤膜，在进料温度为30-50℃、进料压力为0.1-0.3MPa的条件下超滤，旋转蒸发仪浓缩得欧李红色素浓缩液。
(4)大孔树脂吸附：采用Amberlite XAD-7HP大孔树脂对上述浓缩的欧李红色素溶液进行吸附，用70％的乙醇(v/v)洗脱，流速为2.0-4.0mL/min。
(5)洗脱液干燥：将大孔树脂吸附后的溶液浓缩，冰箱中冷冻6小时，真空冷冻干燥10小时得欧李红色素。
本工艺的突出特点是：采用超声提取法，确定了欧李红色素超声提取工艺及其参数，超声波产生的振动作用加强了欧李果实细胞内物质的释放、扩散及溶解，缩短欧李红色素提取时间，提高了欧李红色素的得率；本发明采用了超滤和大孔树脂吸附相结合的方法纯化欧李红素，有效去除大量杂质，得到纯度高、色泽好的欧李红色素。
具体实施方案
实施例1
(1)欧李原料挑选、打浆：精选新鲜8-9成熟、无腐烂、无农药污染的欧李鲜果实清洗干净去核、打浆。
(2)恒温超声提取：将欧李浆液与80％乙醇(v/v)按照质量比1∶5混合，柠檬酸调节混合液pH值在3.0，在超声功率为500w，温度40℃，超声时间20min的条件下提取，提取液使用150目滤网过滤，pH值为3.0的酸性乙醇溶液洗涤残渣，滤液在3000r/min离心20min，取上清液。
(3)超滤纯化：上清液采用0.1μm的超滤膜，在进料温度为30℃、进料压力为0.3MPa的条件下超滤，旋转蒸发仪浓缩得欧李红色素浓缩液。
(4)大孔树脂吸附：采用Amberlite XAD-7HP大孔树脂(市售型号)对上述浓缩的欧李红色素溶液进行吸附，用70％的乙醇(v/v)洗脱，流速为3.0mL/min。
(5)洗脱液干燥：将大孔树脂吸附后的溶液浓缩，冰箱中冷冻6小时，真空冷冻干燥10小时得欧李红色素。
实施例2
(1)欧李原料挑选、打浆：精选新鲜8-9成熟、无腐烂、无农药污染的欧李鲜果实清洗干净去核、打浆。
(2)恒温超声提取：将欧李浆液与80％乙醇(v/v)按照质量比1∶4混合，柠檬酸调节混合液pH值在2.0，在超声功率为100w，温度25℃，超声时间60min的条件下提取，提取液使用150目滤网过滤，pH值为2.0的酸性乙醇溶液洗涤残渣，滤液在3000r/min离心20min，取上清液。
(3)超滤纯化：上清液采用0.15μm的超滤膜，在进料温度为40℃、进料压力为0.2MPa的条件下超滤，旋转蒸发仪浓缩得欧李红色素浓缩液。
(4)大孔树脂吸附：采用Amberlite XAD-7HP大孔树脂对上述浓缩的欧李红色素溶液进行吸附，用70％的乙醇(v/v)洗脱，流速为2.0mL/min。
(5)洗脱液干燥：将大孔树脂吸附后的溶液浓缩，冰箱中冷冻6小时，真空冷冻干燥10小时得欧李红色素。
实施例3
(1)欧李原料挑选、打浆：精选新鲜8-9成熟、无腐烂、无农药污染的欧李鲜果实清洗干净去核、打浆。
(2)恒温超声提取：将欧李浆液与80％乙醇(v/v)按照质量比1∶6混合，柠檬酸调节混合液pH值在3.5，在超声功率为1000w，温度50℃，超声时间10min的条件下提取，提取液使用150目滤网过滤，pH值为3.5的酸性乙醇溶液洗涤残渣，滤液在3000r/min离心20min，取上清液。
(3)超滤纯化：上清液采用0.2μm的超滤膜，在进料温度为50℃、进料压力为0.1MPa的条件下超滤，旋转蒸发仪浓缩得欧李红色素浓缩液。
(4)大孔树脂吸附：采用Amberlite XAD-7HP大孔树脂对上述浓缩的欧李红色素溶液进行吸附，用70％的乙醇(v/v)洗脱，流速为4.0mL/min。
(5)洗脱液干燥：将大孔树脂吸附后地溶液浓缩，冰箱中冷冻6小时，真空冷冻干燥10小时得欧李红色素。