N，N-二乙基-2-[-4-(苯基甲基)-苯氧基] 乙胺一盐酸盐(DPPE)在癌症治疗中的应用 发明领域
本发明涉及通常称为替米利芬的N，N-二乙基-2-[-4-(苯基甲基)-苯氧基]乙胺(ethanamine)一盐酸盐(DPPE)在癌症治疗中的应用。
发明背景
很多癌症的基本疗法是用以除去癌性组织的某些类型手术。基本治疗之后，有复发危险的患者经常接受辅助治疗，辅助治疗在基本治疗之后很快开始实施以延迟复发和/或延长存活时间。一种类型的全身辅助治疗是辅助化疗，其中包括施用一种或多种化疗剂。
以前已经描述过N，N-二烷基-2-[(4-苯基甲基)-苯氧基]乙胺和N-吗啉代-2-[(4-苯基甲基)-苯氧基]乙胺化合物及其盐作为抗癌剂的应用。已经发现，组合物，包括这些乙胺化合物与治疗活性抗癌化合物例如多柔比星的混合物是特别有益的，并且以前有人描述过它们可用于治疗乳腺癌和结肠癌。
据表明，N，N-二乙基-2-[-4-(苯基甲基)-苯氧基]乙胺一盐酸盐(DPPE)可抑制是雌激素受体阴性(ER-)/AEBS+或ER+/AEBS+的MCF-7乳腺癌细胞的体外生长(U.S.专利4,803,227)。
还据表明，在动物模型中，DPPE可在体内抑制正常细胞增殖，同时促进恶性细胞增殖。当以足以抑制细胞内组胺与正常和恶性细胞中的受体结合的量施用时，DPPE是对于细胞内组胺受体有选择性的有效拮抗剂。同一实验表明，在并行用DPPE治疗的携带肿瘤的动物中，DPPE可以与多柔比星(AdriamycinTM)协同作用(国际专利申请WO92/11035；U.S.专利5,859,065)。有人提出这种作用是通过使用一定剂量的DPPE而实现的，在这样地剂量下，DPPE抑制正常细胞生长，但是促进肿瘤细胞生长，由此使得肿瘤细胞对化疗剂的细胞毒害作用更敏感(U.S.专利5,859,065)。
最近，基于竞争测定，已表明化合物例如N，N-二乙基-2-[4-(4′-氟苯甲酰基(phenone))-苯氧基]乙胺(DFPE)以类似于DPPE的方式起作用，但是具有更大效力。这些实验表明，以适当的量，DFPE也抑制正常细胞增殖和促进恶性细胞增殖。有人提出这样的化合物可用于提高常规化疗药物的治疗指数(U.S.专利6,284,799)。
迅速生长的、侵占性或转移性癌特别难以治疗，并且这类癌症患者的存活率显著降低。通常联合使用化疗剂来治疗这样的患者，以减缓癌症的生长。
最近证实DPPE可用于提高化疗剂在非激素反应性转移性前列腺癌治疗中的疗效。据表明，在环磷酰胺治疗之前，首先静脉内输注DPPE约1小时可提高抗癌活性和改善与使用环磷酰胺或对该类癌症通常无效的其它化疗剂有关的毒性(U.S.专利5,863,912)。
尽管在用来测试与另一种化疗剂联合使用的DPPE对于不同癌症疗效的小规模临床研究试验中取得了令人鼓舞的结果(U.S.专利5,859,065)，但是最近对乳腺癌的III期临床试验没有揭示在治疗期间或者在治疗后不久与多柔比星的显著协同作用或提高多柔比星效力的作用。因此，仍然需要治疗迅速生长的、侵占性或转移性癌的有效方法。
提供该背景信息是为了给出本申请人据信可能与本发明有关的已知信息。无需承认也不应当解释为任何上述信息构成了本发明的现有技术。本说明书中提及的出版物都全文引入本申请以供参考。
发明概述
本发明的一个目的是提供N，N-二乙基-2-[-4-(苯基甲基)-苯氧基]乙胺一盐酸盐(DPPE)在癌症治疗中的应用。依据一个方面，本发明提供了DPPE在治疗患有或者被怀疑患有侵袭性癌症的癌症患者，并由此延长患者存活时间中的应用。
依据另一个方面，本发明提供了DPPE在治疗被怀疑患有已存在癌症的患者，并由此延长患者存活时间中的应用，其中所述应用是在作为雌激素受体阴性癌症的原发性癌症的手术治疗之后进行。
依据另一个方面，本发明提供了DPPE在制备药物中的应用，其中所述药物是用于治疗患有或者被怀疑患有侵袭性癌症的患者，并由此延长患者存活时间。
依据另一个方面，本发明提供了DPPE在制备药物中的应用，其中所述药物是用于治疗患有已存在癌症的癌症患者，并由此延长患者存活时间，并且其中所述应用是在作为雌激素受体阴性癌症的原发性癌症的手术治疗之后使用。
附图简述
附图1提供了接受DPPE与多柔比星(DPPE/DOX)或仅接受多柔比星(DOX)的ER阴性患者的存活时间的图示。
附图2提供了接受DPPE与多柔比星(DPPE/DOX)或仅接受多柔比星(DOX)的ER阳性患者的存活时间的图示。
附图3提供了与ER阴性和ER阳性患者相比，仅接受多柔比星的患者的存活时间的图示。
附图4提供了与ER阴性和ER阳性患者相比，接受DPPE与多柔比星的患者的存活时间的图示。
附图5提供了接受DPPE与多柔比星(DPPE/DOX)或仅接受多柔比星(DOX)的患病持续时间≤6个月的患者的存活时间的图示。
附图6提供了接受DPPE与多柔比星(DPPE/DOX)或仅接受多柔比星(DOX)的患病持续时间＞6个月至≤36个月的患者的存活时间的图示。
附图7提供了接受DPPE与多柔比星(DPPE/DOX)或仅接受多柔比星(DOX)的患病持续时间＞36个月的患者的存活时间的图示。
附图8提供了接受DPPE与多柔比星(DPPE/DOX)或仅接受多柔比星(DOX)的患病持续时间≤36个月的ER阳性患者的存活时间的图示。
附图9提供了接受DPPE与多柔比星(DPPE/DOX)或仅接受多柔比星(DOX)的患病持续时间≤36个月的ER阴性患者的存活时间的图示。
附图10提供了接受DPPE与多柔比星(DPPE/DOX)或仅接受多柔比星(DOX)的患病持续时间＞36个月的ER阳性患者的存活时间的图示。
附图11提供了接受DPPE与多柔比星(DPPE/DOX)或仅接受多柔比星(DOX)的患病持续时间＞36个月的ER阴性患者的存活时间的图示。
附图12提供了接受DPPE与多柔比星(DPPE/DOX)或仅接受多柔比星(DOX)的ER阴性患者的至疾病进展的时间的图示。
附图13提供了接受DPPE与多柔比星(DPPE/DOX)或仅接受多柔比星(DOX)的ER阳性患者的至疾病进展的时间的图示。
附图14提供了接受DPPE与多柔比星(DPPE/DOX)或仅接受多柔比星(DOX)的患病持续时间≤6个月的患者的至疾病进展的时间的图示。
附图15提供了接受DPPE与多柔比星(DPPE/DOX)或仅接受多柔比星(DOX)的患病持续时间＞6个月至≤36个月的患者的至疾病进展的时间的图示。
附图16提供了接受DPPE与多柔比星(DPPE/DOX)或仅接受多柔比星(DOX)的患病持续时间＞36个月的患者的至疾病进展的时间的图示。
附图17提供了与患病持续时间≤6个月、＞6个月至≤36个月或＞36个月的患者相比，接受DPPE与多柔比星(DPPE/DOX)的患者的至疾病进展的时间的图示。
附图18提供了与患病持续时间≤6个月、＞6个月至≤36个月或＞36个月的患者相比，仅接受多柔比星(DOX)的患者的至疾病进展的时间的图示。
附图19提供了与患病持续时间≤6个月、＞6个月至≤36个月或＞36个月的患者相比，仅接受多柔比星(DOX)的患者的存活时间的图示。
附图20提供了与患病持续时间≤6个月、＞6个月至≤36个月或＞36个月的患者相比，接受DPPE与多柔比星(DPPE/DOX)的患者的存活时间的图示。
附图21提供了接受DPPE与多柔比星(DPPE/DOX)或仅接受多柔比星(DOX)的患病持续时间≤36个月的患者的存活时间的图示。在DOX臂中，n＝100，且中值是12.1973。在DPPE/DOX臂中，n＝91，且中值是29.6548。p＝0.0016。
附图22提供了接受DPPE与多柔比星(DPPE/DOX)或仅接受多柔比星(DOX)的患病持续时间＞36个月的患者的存活时间的图示。在DOX臂中，n＝50，且中值是28.6356。在DPPE/DOX臂中，n＝62，且中值是19.8247。p＝0.7485。
附图23提供了接受DPPE与多柔比星(DPPE/DOX)的患病持续时间≤36个月或＞36个月的患者的存活时间的图示。
附图24提供了仅接受多柔比星(DOX)的患病持续时间≤36个月或＞36个月的患者的存活时间的图示。
附图25提供了接受DPPE与多柔比星(DPPE/DOX)或仅接受多柔比星(DOX)的患病持续时间＜6个月的患者的存活时间的图示，其中所述患者在试验之前已经接受过化疗。
附图26提供了接受DPPE与多柔比星(DPPE/DOX)或仅接受多柔比星(DOX)的患病持续时间＜6个月的患者的存活时间的图示，其中所述患者在试验之前没有接受过化疗。
附图27提供了接受DPPE与多柔比星(DPPE/DOX)或仅接受多柔比星(DOX)的患病持续时间＞6个月至≤36个月的患者的存活时间的图示，其中所述患者在试验之前已经接受过化疗。
附图28提供了接受DPPE与多柔比星(DPPE/DOX)或仅接受多柔比星(DOX)的患病持续时间＞6个月至≤36个月的患者的存活时间的图示，其中所述患者在试验之前没有接受过化疗。
附图29提供了接受DPPE与多柔比星(DPPE/DOX)或仅接受多柔比星(DOX)的患病持续时间＞36个月的患者的存活时间的图示，其中所述患者在试验之前已经接受过化疗。
附图30提供了接受DPPE与多柔比星(DPPE/DOX)或仅接受多柔比星(DOX)的患病持续时间＞36个月的患者的存活时间的图示，其中所述患者在试验之前没有接受过化疗。
附图31提供了接受DPPE与多柔比星(DPPE/DOX)或仅接受多柔比星(DOX)的患病持续时间≤36个月的患者的存活时间的图示，其中所述患者在试验之前已经接受过化疗。
附图32提供了接受DPPE与多柔比星(DPPE/DOX)或仅接受多柔比星(DOX)的患病持续时间≤36个月的患者的存活时间的图示，其中所述患者在试验之前没有接受过化疗。
发明详述
本发明是基于下述发现：在III期临床试验研究中，对于用DPPE与另一种化疗剂治疗的癌症患者，其存活时间得到了令人惊奇且意料不到的延长。这种存活时间方面的优点是在之前通过期中分析没有显示进展前存活时间(PFS)或客观反应比例有统计学显著增加的情况下观察到的。通常情况下，本领域技术人员应该预计会出现客观反应的显著不同、PFS的中度程度的不同以及存活时间的很小程度的延长(如果有的话)，尤其在随后可采用二线或甚至三线治疗的情况下更是如此。
此外，本发明首次证实了特定子群体的癌症患者从DPPE带来的存活时间方面的优点得到了令人惊奇的益处。特别是，在一个试验中表明，在初次乳腺手术/诊断之后36个月或更短时间内疾病复发的乳腺癌患者从DPPE带来的存活时间方面的优点得到了益处，而36个月后初次复发的患者不能受益于用DPPE进行的治疗。还首次将其它因素例如雌激素受体状态(即表明激素反应性乳腺癌或激素抗性乳腺癌)与在乳腺癌患者中观察到的DPPE带来的存活时间方面的优点联系起来。
鉴定这样的子群体使得能获得更有效的癌症治疗设计和递送。本发明提供了鉴定可从DPPE治疗获得最大有益效果的患者子群体的方法。这些子群体是在用以测定DPPE对特定癌症的作用的临床试验中在患者当中确定的。该方法包括根据癌症的持续时间或者根据存在或不存在癌症侵袭性的预测标志将试验的每个臂(即DPPE治疗臂和对照臂)分成亚组，和分析每一亚组的存活时间。DPPE臂中的亚组与对照臂中的相应亚组之间的统计学显著差异指示出从DPPE治疗获得有益效果的子群体。
在由此鉴定的癌症患者子群体的晚期疾病的治疗以及辅助治疗中，本发明给化疗、内分泌治疗和放疗提供了替代或补充治疗方案。此外，对于患有雌激素受体阴性乳腺癌的患者，本发明给化疗或他莫昔芬治疗提供了替代或补充治疗方案。
定义
除非另有说明，本文中使用的所有技术和科学术语具有本发明所属领域普通技术人员所通常理解的含义。
本文所用的“至疾病进展的时间”或“进展前存活时间”是指从开始治疗(或视情况而定随机选取的时间)到疾病进展时间或者—对于在没有疾病进展的情况下已经死亡的患者(无论什么原因)—到死亡时间的时间。
本文所用的“疾病进展”是指与最低点(即最佳反应)相比，可检测到的损害总数增加至少25％和/或出现新的损害。
本文所用的“反应状态”是指在化疗下肿瘤或损害特性的量度，即任何所观测的生长(疾病进展)、稳定性或皱缩(完全或部分反应)。
本文所用的“晚期疾病”是指患者中的明显疾病，其中这样的明显疾病不能通过局部治疗方式例如手术或放疗治愈。
本文所用的“患病持续时间”是指从开始病理学诊断出原发性癌症到出现可能需要施以化疗(例如蒽环类药物化疗)的晚期、转移性或局部晚期疾病的时间。
本文所用的“复发”是指患有晚期疾病的患者的复发。本文所用的“复发时间”是指从开始出现原发性癌症到出现需要化疗的晚期疾病的时间。
本文所用的“生长缓慢性癌症”是指在给定癌症的复发时间范围的大约后三分之一时间内复发的癌症。对于乳腺癌，本文所用的关于乳腺癌的“生长缓慢性”是指在初次诊断后36-40个月之后复发的癌症，其中患者具有晚期疾病，并且首次成为化疗(例如蒽环类药物化疗)的候选对象。
本文所用术语“侵袭性癌症”是指迅速生长的癌症。本领域技术人员理解，对于某些癌症例如乳腺癌或前列腺癌，术语“侵袭性癌症”是指在给定癌症的复发时间范围的大约前三分之二时间内复发的晚期癌症，而对于其它类型的癌症例如小细胞肺癌(SCLC)，几乎所有病例都呈现为迅速生长的癌症—视为侵袭性的。因此，该术语可包括一些癌症类型当中的一小部分，或者其可以包括所有其它癌症类型。
本文所用短语“被怀疑患有侵袭性癌症”是指这样的情境，其中患者已具有肿瘤或损害，这样的肿瘤或损害具有与晚期疾病的发展有关的特征，例如侵袭性疾病的预测标志。在一个具体实例中，侵袭性乳腺癌的指征是呈雌激素受体阴性(ER-)的肿瘤。或者，肿瘤可以是ER阳性，但是患者可表现出其它侵袭性疾病的预测标志例如节点阳性。在这些情境下，可施以辅助治疗。
本文所用术语“辅助治疗”是指用以提高主要治疗的疗效而施加的治疗。对于癌症，辅助治疗通常是指在手术(主要治疗)后进行的用以提高杀死所有癌细胞的可能性的化疗、激素治疗或放疗。
本文所用术语“新辅助治疗”是指在主要治疗之前施加的治疗。新辅助治疗的实例包括化疗、放疗和激素治疗。
本文所用术语“激素治疗”是指这样的治疗，其中给患者施用激素或抗激素药物以通过阻断身体的天然激素来减缓或停止某些癌症(例如前列腺癌和乳腺癌)的生长。
本文所用术语“激素抗性癌症”是指对激素治疗没有反应的癌症，而术语“激素反应性癌症”是指对激素治疗确有反应的癌症。
DPPE的治疗应用
本发明提供了DPPE与一种或多种其它化疗剂在治疗患有癌症的患者以延长存活时间中的应用。
在本发明的一个实施方案中，患者患有迅速生长的或侵袭性癌症。癌症可以是局部晚期癌症，或者可以是转移性癌症。本领域技术人员应当理解，当使用复发时间来定义侵袭性癌症时，该时间将随癌症类型而改变，并且可能在患有同一类型癌症的患者子群体内进一步改变。例如，当乳腺癌在初次诊断后40个月或更短时间内复发时，该乳腺癌可视为侵袭性的。
在本发明的一个实施方案中，使用DPPE来治疗已在初次诊断时间后40个月或更短时间内复发的侵袭性癌症。在另一个实施方案中，使用DPPE来治疗已在初次诊断时间后38个月或更短时间内复发的侵袭性癌症。在另一个实施方案中，使用DPPE来治疗已在初次诊断后36个月或更短时间内复发的侵袭性癌症。在其他实施方案中，使用DPPE来治疗已在初次诊断时间后34个月或更短时间内或者32个月或更短时间内复发的侵袭性癌症。
可受益于DPPE治疗的患者包括但不限于患有白血病、淋巴瘤、肉瘤和癌的患者。具体的实例包括但不限于乳腺癌、前列腺癌、结肠直肠癌、肺癌、胃癌、胰腺癌、食管癌、头颈癌、霍奇金病和非霍奇金淋巴瘤。
术语“白血病”在广义上是指造血器官的进行性、恶性疾病。白血病的典型特征是血液和骨髓中的白细胞及其前体的不正常增殖和发育，但是也可以指其它血细胞的恶性疾病，例如影响未成熟红细胞的红白血病。白血病包括例如急性非淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、急性粒细胞白血病、慢性粒细胞白血病、患性早幼粒细胞白血病、成人T细胞白血病、白细胞不增多白血病、非白血性白血病、嗜碱细胞白血病、母细胞白血病、牛白血病、慢性髓细胞白血病、皮肤白血病、胚胎性白血病、嗜酸细胞白血病、格罗斯白血病、毛细胞白血病、成血细胞白血病、成血细胞白血病、组织细胞白血病、干细胞白血病、急性单核细胞白血病、白细胞减少性白血病、淋巴白血病、成淋巴细胞白血病、淋巴细胞白血病、淋巴源性白血病、淋巴样白血病、淋巴肉瘤细胞白血病、肥大细胞白血病、巨核细胞型白血病、小原粒型白血病、单核细胞白血病、成髓细胞白血病、髓细胞白血病、髓性粒细胞白血病、髓细胞单核细胞白血病、内格利白血病、浆细胞白血病、浆细胞白血病、前髓细胞白血病、里德尔细胞白血病、希林白血病、干细胞白血病、亚白血性白血病和未分化细胞白血病。
术语“肉瘤”一般是指这样的肿瘤，其源自结缔组织例如肌肉、骨、软骨或脂肪，由胚胎结缔组织样物质构成，并且通常由嵌入在丝状或同质物质中的紧密堆积的细胞组成。肉瘤包括骨癌、软组织肉瘤、软骨肉瘤、纤维肉瘤、淋巴肉瘤、黑素肉瘤、粘液肉瘤、骨肉瘤、骨原性肉瘤、Abemethy′s肉瘤、脂肉瘤、脂肉瘤、腺泡状软组织肉瘤、成釉细胞肉瘤、葡萄状肉瘤、绿色肉瘤、绒膜癌、胚胎性肉瘤、维尔姆斯瘤、子宫内膜肉瘤、基质肉瘤、尤因肉瘤、筋膜肉瘤、成纤维细胞肉瘤、巨细胞肉瘤、粒细胞性肉瘤、霍奇金肉瘤、特发性多发性色素沉着性出血性肉瘤、成免疫细胞性B细胞肉瘤、淋巴瘤、成免疫细胞性T细胞肉瘤、延森肉瘤、卡波西肉瘤、库普弗细胞肉瘤、血管肉瘤、白血病性肉瘤、恶性间充质瘤肉瘤、骨膜外肉瘤、网状细胞肉瘤、劳斯肉瘤、浆液性囊肿肉瘤、滑膜肉瘤、梭形细胞肉瘤和毛细管扩张性肉瘤。
术语“癌”是指由上皮细胞构成的恶性新生长物，其往往浸润周围组织和引起转移。癌的实例包括例如膀胱癌、乳腺癌、颈癌、结肠癌、肾癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、直肠癌、皮癌、胃癌、甲状腺癌、子宫癌、外阴癌、腺泡癌、腺泡癌、腺囊性癌、腺性囊性癌、腺癌、肾上腺皮质癌、蜂窝状癌、肺泡细胞癌、基底细胞癌、基底细胞癌(carcinoma basocellulare)、类基底细胞癌、基底鳞状细胞癌、细支气管肺泡癌、细支气管癌、支气管癌、髓样癌、胆管细胞癌、绒膜癌、结肠直肠癌、胶样癌、粉刺癌、子宫体癌、筛状癌、铠甲状癌、皮肤癌、柱状癌、柱状细胞癌、管癌、硬癌、胚胎癌、髓样癌、表皮样癌、腺样上皮癌、外生型癌、溃疡性癌、纤维癌、胶样癌、胶样癌、巨细胞癌、巨细胞癌、腺癌、粒层细胞癌、毛母质癌、血癌、肝细胞癌、胡尔特尔细胞癌、玻璃样癌、肾上腺样癌、幼稚性胚胎性癌、原位癌、表皮内癌、上皮内癌、侵蚀性溃疡、库尔奇茨基细胞癌、大细胞癌、豆状癌、豆状癌(carcinoma lenticulare)、脂瘤癌、淋巴上皮癌、髓样癌、髓样癌、黑素癌、软癌、粘液癌、粘液癌、粘液细胞癌、粘液表皮样癌、粘液癌、粘液癌、粘液瘤样癌、鼻咽癌、燕麦细胞癌、非小细胞癌、骨样癌、骨样癌、乳头状癌、门脉周癌、浸润前癌、棘细胞癌、髓样癌、肾细胞癌、贮备细胞癌、肉瘤样癌、施奈德癌、硬癌、阴囊癌、印戒细胞癌、单纯癌、小细胞癌、马铃薯状癌(solanoid carcinoma)、球形细胞癌、梭形细胞癌、海绵样癌、鳞状癌、鳞状细胞癌、绳捆癌、毛细管扩张性癌(carcinomatelangiectaticum)、毛细管扩张性癌(carcinoma telangiectodes)、移行细胞癌、结节性癌(carcinoma tuberosum)、结节性皮癌、疣状癌和绒毛状癌。
本发明包括的其它癌症包括例如多发性骨髓瘤、成神经细胞瘤、横纹肌肉瘤、原发性凝血细胞增多、原发性巨球蛋白血症、小细胞肺肿瘤、原发性脑肿瘤、恶性胰腺胰岛瘤、恶性类癌、胶质瘤、睾丸癌、生殖泌尿道癌、恶性高钙血症、子宫内膜癌和肾上腺皮质癌。
腺癌是源自构成具有腺(分泌)性质的器官的细胞的癌或源自构成空内脏例如胃肠道或支气管上皮的衬里的细胞的癌。例如，乳腺癌、胰腺癌等是腺癌。在本发明的一个实施方案中，DPPE与一种或多种其它化疗剂联合用于治疗腺癌患者。在另一个实施方案中，腺癌是乳腺癌。在另一个实施方案中，乳腺癌是侵袭性癌症。在另一个实施方案中，乳腺癌是局部晚期癌症。在另一个实施方案中，乳腺癌是转移性乳腺癌。
在本发明的另一个实施方案中，将DPPE单独用于或者与一种或多种其它化疗剂联合用于治疗患有在诊断时间后40个月或更短时间内发作的晚期疾病的乳腺癌患者。在另一个实施方案中，使用DPPE来治疗在诊断后36个月或更短时间内发作的乳腺癌患者。
如本领域已知，源自内分泌腺的癌症例如乳腺癌和前列腺癌可能对激素治疗有抗性或有反应。激素抗性癌症通常比其相应的激素反应性癌症更具侵袭性。本发明包括DPPE与一种或多种其它化疗剂在治疗激素抗性和激素反应性癌症中的应用。
已知激素抗性乳腺癌缺乏功能性雌激素受体(ER)。因此，在本发明的一个实施方案中，使用DPPE来治疗ER-阴性(ER-)乳腺癌。在另一个实施方案中，使用DPPE来治疗ER-阳性(ER+)乳腺癌。本文所用术语“雌激素受体阴性(ER-)乳腺癌”是指在初次治疗之前具有ER-乳腺癌肿瘤的患者的病症，本文所用术语“雌激素受体阳性(ER+)乳腺癌”是指在初次治疗之前具有ER+乳腺癌肿瘤的患者的病症、确定肿瘤是ER+还是ER-的方法是本领域技术人员众所周知的，包括但不限于通过类固醇结合分析或通过免疫化学分析来测定细胞内受体蛋白，或者使用Northern印迹分析来测定与受体蛋白相对应的mRNA。
在本发明中，DPPE可以与一种或多种化疗剂联合用作新辅助治疗部分或者用作辅助治疗部分来治疗被怀疑患有侵袭性癌症的患者。或者，DPPE可以与一种或多种化疗剂联合用于治疗复发的和/或侵袭性癌症、转移性或晚期疾病。DPPE可用于治疗之前已进行过化疗的患者，或者可用于治疗没有进行过化疗的患者。因此，在本发明的一个实施方案中，DPPE用作辅助治疗部分。在另一个实施方案中，DPPE用作二线治疗。在另一个实施方案中，DPPE用于治疗之前已进行过一个或多个疗程化疗的患者。
在辅助或新辅助治疗中，患者是否患有侵袭性癌症或晚期疾病并不明显。有多种标志是本领域已知的，与肿瘤有关的标志的存在是侵袭性或晚期疾病的预测标记。一种或多种这些标志适于评估被怀疑患有侵袭性癌症的患者，以确定癌症是否是侵袭性的，以及由此确定患者是否可受益于用作新辅助治疗或辅助治疗部分的DPPE。例如，是雌激素受体阴性(ER-)的乳腺癌高度可能是侵袭性乳腺癌。然而，还已知ER+乳腺癌有可能是侵袭性的。因此，可通过确定存在还是不存在其他标志，例如节点阳性来进一步评估ER+癌症患者，其中节点阳性的存在是广为接受的侵袭性癌症的指征。
在本发明的一个实施方案中，DPPE在患有是ER-的乳腺癌的患者的治疗中用作新辅助治疗或辅助治疗部分。在另一个实施方案中，DPPE在患有是ER+的乳腺癌，并且表现出节点阳性的患者的治疗中用作新辅助治疗或辅助治疗部分。
如上所述，将DPPE与一种或多种化疗剂联合使用。有多种癌症化疗剂是本领域已知的，并包括对于特定类型癌症的治疗有特效的化疗剂以及可适用于多种癌症的化疗剂，例如多柔比星、米托蒽醌、伊立替康(CPT-11)。本发明包括这两种类型的化疗剂与DPPE的联合应用。使用标准癌症化疗剂的联合治疗也是本领域众所周知的，并且可以与DPPE联合使用。适于治疗乳腺癌的化疗剂的实例包括但不限于环磷酰胺、异环磷酰胺、顺铂、卡铂、5-氟尿嘧啶(5-FU)，紫杉烷类例如紫杉醇和多西他赛，以及各种蒽环类药物例如多柔比星和表多柔比星(还称为表柔比星)。使用标准癌症化疗剂的联合治疗也可以与DPPE联合使用，并且也是本领域众所周知的，例如可用于治疗乳腺癌的表柔比星与紫杉醇或多西他赛的联合用药物，或者多柔比星或表柔比星与环磷酰胺的联合用药物。多化疗剂方案也是有用的，并且由例如多柔比星/环磷酰胺/5-氟尿嘧啶或环磷酰胺/表柔比星/5-氟尿嘧啶组成。
已知环磷酰胺、米托蒽醌和雌莫司汀适于治疗前列腺癌。环磷酰胺、长春新碱、多柔比星和依托泊苷以及依托泊苷与顺铂或卡铂的联合用药物可用于治疗小细胞肺癌。在胃癌或食管癌的治疗中，多柔比星或表柔比星与顺铂和5-氟尿嘧啶的联合用药物是有用的。对于结肠直肠癌，可使用单独或者与基于5-氟尿嘧啶的药物联合使用的CPT-11，或与基于5-氟尿嘧啶的药物联合使用的奥沙利铂。其它实例包括用于治疗非霍奇金淋巴瘤的环磷酰胺、多柔比星、长春新碱与泼尼松的联合用药物；用于治疗霍奇金病的多柔比星、博来霉素、长春碱与DTIC的联合用药物，和用于治疗非小细胞肺癌的卡铂或顺铂与任一种或任一组合的下列药物的联合用药物：吉西他滨、紫杉醇、多西他赛、长春瑞滨或依托泊苷。
在本发明的一个实施方案中，将DPPE与蒽环类药物例如多柔比星或表柔比星以及与或不与其它化疗剂联合使用。在另一个实施方案中，将DPPE与紫杉烷类药物以及与或不与其它化疗剂联合使用。
药物组合物
本领域中已描述了DPPE及其盐的合成，例如参见U.S.专利4,803,227。该药物活性化合物或其盐可作为含有适当药学生理学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂或载体的药物组合物给药。还可以配制含有用于同时对患者给药的DPPE与一种或多种其它化疗剂的药物组合物。
本发明药物组合物可在含有常规无毒可药用载体、辅助剂和赋形剂的单位剂量制剂中口服给药、局部给药、非胃肠道给药、通过吸入给药或喷雾给药或直肠给药。本文所用术语非胃肠道给药包括皮下注射、静脉内注射、肌内注射、胸骨内注射或输注技术。
药物组合物可呈适于口服使用的形式，例如是片剂、糖锭剂、锭剂、水或油悬浮液、可分散的粉剂或粒剂、乳剂、硬或软胶囊、或糖浆剂或酏剂。口服使用的组合物可依据生产药物组合物领域已知的方法制得，并且可含有一种或多种选自甜味剂、矫味剂、着色剂和防腐剂的物质来提供在外观和口感方面适于药用的制剂。片剂含有活性组分以及与其混和的适宜的无毒可药用赋形剂，包括例如情性稀释剂如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；制粒剂和崩解剂例如玉米淀粉或藻酸；粘合剂例如淀粉、明胶或阿拉伯胶，和润滑剂例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。片剂可以是未包衣的，或者可通过已知技术给片剂包衣以延迟在胃肠道中的崩解和吸收，并由此在较长时间内提供持续作用。例如，可采用延时材料例如一硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。
口服使用的药物组合物还可以作为硬明胶胶囊呈现，其中活性组分与惰性固体稀释剂例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土混和，或作为软明胶胶囊呈现，其中活性组分与水或油介质例如花生油、液体石蜡或橄榄油混和。
水悬浮液含有活性化合物以及与其混和的合适的赋形剂，包括例如悬浮剂如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄著胶和阿拉伯胶；分散剂或润湿剂例如天然磷脂如卵磷脂，或烯化氧与脂肪酸的缩合产物例如聚氧化乙烯硬脂酸酯，或氧化乙烯与长链脂族醇的缩合产物例如十七氧化乙烯鲸蜡醇，或氧化乙烯与衍生自脂肪酸和己糖醇的部分酯的缩合产物例如聚氧化乙烯山梨醇一油酸酯，或氧化乙烯与衍生自脂肪酸和己糖醇酐的部分酯的缩合产物例如聚氧化乙烯脱水山梨醇一油酸酯。水悬浮液还可以含有一种或多种防腐剂例如对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯，一种或多种着色剂、一种或多种矫味剂或一种或多种甜味剂例如蔗糖或糖精。
油悬浮液可通过将活性组分悬浮在植物油例如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油或矿物油例如液体石蜡中来制得。油悬浮剂可含有增稠剂例如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。可加入甜味剂例如上述甜味剂和/或矫味剂来提供适口的口服制剂。可通过加入抗氧化剂例如抗坏血酸来保存这些组合物。
适于通过加入水来制备水悬浮液的适宜的可分散的粉剂或粒剂提供了与分散剂或润湿剂、悬浮剂和一种或多种防腐剂混和的活性化合物。合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂的实例是上述那些。还可以使用另外的赋形剂例如甜味剂、矫味剂和着色剂。
本发明药物组合物还可以呈水包油乳剂的形式。油相可以是植物油例如橄榄油或花生油，或矿物油例如液体石蜡，或者其可以是这些油的混合物。合适的乳化剂可以是天然树胶例如阿拉伯胶或黄著胶；天然磷脂例如大豆、卵磷脂；或衍生自脂肪酸和己糖醇、酐的酯或部分酯例如脱水山梨醇一油酸酯，和所述部分酯与氧化乙烯的缩合产物，例如聚氧化乙烯脱水山梨醇一油酸酯。乳液还可以含有甜味剂和矫味剂。
可用甜味剂例如甘油、丙二醇、山梨醇或蔗糖配制糖浆剂和酏剂。这样的制剂还可以含有缓和剂、防腐剂和/或矫味剂以及着色剂。
药物组合物可呈无菌可注射水或油悬浮液的形式。该悬浮液可依据已知技术使用合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂例如上述那些制得。无菌注射制剂还可以是在无毒非胃肠道给药可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或悬浮液，例如在1，3-丁二醇中的溶液。可使用的可接受的载体和溶剂包括但不限于水、林格溶液、乳酸林格溶液和等渗氯化钠溶液。其它实例是通常用作溶剂或悬浮介质的无菌固定油，和多种温和(bland)的固定油包括例如合成甘油单酯或甘油二酯。此外，脂肪酸例如油酸可用于制备注射剂。
其它药物组合物和制备药物组合物的方法是本领域已知的，并描述在例如“Remington：The Science and Practice of Pharmacy，”Gennaro，A.，Lippincott，Williams & Wilkins，Philidelphia，PA(2000)(以前是“Remingtons Pharmaceutical Sciences”)中。
给药和剂量方案
依据本发明，给患者施用DPPE或含有DPPE的药物组合物来治疗侵袭性癌症。DPPE或含有DPPE的药物组合物可以在常规化疗操作之后，以与其标准给药方式一致的方式给药。DPPE一般是以溶液的形式通过静脉内输注给药。
在本发明的一个实施方案中，将DPPE与一种或多种化疗剂联合给药于患者。DPPE可在施用一种或多种其他化疗剂之前或之后给药，或者它们可并行给药。
当DPPE在一种或多种其它化疗剂之前给药时，施用DPPE与其它化合物之间的时间长度将取决于给药方式和患者大小。一般情况下，将DPPE在施用其它化疗剂之前约30分钟-约90分钟之间对患者给药。在一个实施方案中，将DPPE在施用其它化疗剂之前约60分钟对患者给药。
当DPPE与一种或多种其它化疗剂并行给药时，化合物的给药可同时开始，或者其它化疗剂的给药可在开始施用DPPE之后的合适时间开始进行。一般情况下，其它化疗剂的给药可在开始施用DPPE后约30分钟-约90分钟开始进行。在本发明的一个实施方案中，其它化疗剂的给药在施用DPPE后约60分钟开始进行。
DPPE的给药剂量将取决于预治疗的癌症类型和患者大小，并且可由本领域技术人员容易地确定。据表明，在1小时内施用(静脉内)4mg/kg(160mg/M2)剂量的DPPE没有毒性，在24-72小时内仅施用8mg/M2的剂量不产生临床副作用，而在1小时内施用240mg/M2的剂量可产生CNS毒性(参见例如U.S.专利5,859,065)。DPPE的剂量范围通常为约8mg/M2-约320mg/M2。然而，在某些情况下，每天最高达1200mg/M2的剂量可能是合适的。
在本发明的一个实施方案中，在30分钟-90分钟的时间内给患者施用8mg/M2-240mg/M2剂量的DPPE。在另一个实施方案中，在80分钟的时间内给患者施用4mg/kg-8mg/kg剂量的DPPE。在其它实施方案中，在80分钟的时间内给患者施用约6mg/kg(或240mg/M2)或约5.3mg/kg剂量的DPPE。在另一个实施方案中，在最后20分钟内将DPPE与一种或多种其它化疗剂并行给药。在另一个实施方案中，其它化疗剂是多柔比星。在相关实施方案中，多柔比星以60-90mg/M2的剂量给药。
治疗方案通常设计成DPPE周期给药于患者的形式。依据本发明用DPPE治疗可以是包括一个给药周期的治疗方案部分，或者治疗方案可包括一个以上的周期。治疗方案一般包括约2-为10个用期。在本发明的一个实施方案中，治疗方案包括约2-约8个周期。在另一个实施方案中，治疗方案包括约4个周期。一个周期通常为约1-约4周。在一个实施方案中，周期为约3周。
在这样的治疗方案中，如果环磷酰胺作为化疗剂与DPPE包括在内，其剂量为约600mg/M2。然而应当理解，可根据本领域已知惯例来调整给药剂量和频率以适应具体情况来治疗不同癌症。
药盒
本发明还提供了治疗药盒，其中在用于治疗癌症的药物组合物中包含DPPE。药盒的各个组分可包装在独立的容器内，并且这样的容器可伴有公告，所述公告是由管理药品或生物制品的生产、使用或销售的政府管理机构规定的，并且反映了生产、使用或销售管理机构批准可用于对人给药。
当药盒的组分在一种或多种液体溶液中提供时，液体溶液可以是水溶液例如无菌水溶液。在这种情况下，容器装置自身可以是吸入器、注射器、吸移管、眼用滴管或其它这样的类似装置，可从所述装置中将组合物施用给患者。
药盒的组分还可以以干燥或冻干的形式提供，并且药盒还可以含有用以重新配制冻干组分的适当溶剂。不论容器的数目或类型如何，本发明药盒还可以包括用于帮助将组合物施用给患者的装置。这样的装置可以是吸入器、注射器、吸移管、镊子、带度量单位的匙子、眼用滴管或任何被批准医用的递送装置。
药盒还可以包括用以与DPPE对患者联合给药的一种或多种其它化疗剂。
为了更好地理解本文所述本发明，提供下列实施例。应当理解，这些实施例仅是为了举例说明。因此，它们不应当以任何方式限制本发明的范围。
【具体实施方式】
实施例
进行III期临床试验研究(在下列实施例中分析试验结果)，该试验涉及手术后复发的需要蒽环类化疗剂的乳腺癌患者。在手术之后和加入该试验之前，患者可以接受过或没接受过治疗例如放疗、激素治疗或其它化疗，但是没有用蒽环类药物治疗过。
在该试验中包括两个治疗臂。随机选择患者以参与任一个臂。在一个臂中，用DPPE和多柔比星治疗患者，在另一个臂中，仅用多柔比星治疗患者。
在试验中，先用多柔比星将患者治疗最多约7个周期(5个月)。很多患者在停止多柔比星之前停止DPPE，因此DPPE周期的中值数是4(即3个月，1-8个周期)，而在DPPE臂上的多柔比星周期的中值数是6(即4 1/2个月，1-至少8个周期)。在80分钟内将DPPE以6mg/kg(或240mg/M2)的量给药患者，在最后20分钟内将多柔比星以60-90mg/M2的剂量同时给药。
实施例I：证实DPPE带来的存活方面的优点
在开始对患者进行治疗之后的3-8个月之间，在DPPE存活与对照曲线之间仅观察到了小的未变宽的差异。然而，在约8个月时，DPPE曲线轨道不再与对照曲线平行，并且其轨道很明显开始变平。在8个月时曲线的突然弯曲表明由于乳腺癌所导致的死亡速度减小了，这表示了与DPPE有关的存活方面的优点。简言之，进行标准化疗的乳腺癌患者平均活了15个月，而接受DPPE与标准化疗的患者平均活了接近23个月。此外，DPPE臂中的很多患者仍然活着，而对照组中仍然活着的患者较少。因此，预计存活差异的真实程度将增加。
实施例II：DPPE对患有雌激素受体阴性癌症的患者的影响
亚组的存活分析(参见附图1、2、3和4)表明了由于DPPE带来的在已知ER-患者中的有益效果。在ER+患者中也观察到了有益效果，其中有益效果较小并且出现得较晚(在约11个月出现)。ER分析表明对照ER+/-差异被DPPE变模糊，因此ER-显著提高，而ER+仅提高了一点。总体上，很多患有生长缓慢性癌症(患病持续时间＞36个月)的患者实际上是ER+，DPPE似乎主要对患有ER-乳腺癌—一种进展更迅速的疾病的患者有益。
仅在约一半样本中确定了ER状态(参见表2)。通过分析在试验前是否接受了内分泌治疗，可给未知样本赋予ER状态，这样接受激素治疗的患者视为ER+，没接受激素治疗的患者视为ER-。
ER-差异非常大(p＝0.003)，该p值在任一亚组中都是最深刻的，仅用一半样本达到了更显著的效果。附图3和4表明，对于DOX臂，在ER+(长)与ER-(短)存活时间之间有大的差异(p＝0.0021)，在DPPE的影响下该差异显著缩小(p＝0.1121)，这是由于在ER-患者中的相对改善所致。
表1表明，在每一组中，ER+患者比ER-患者表现得好，但是该差异在对照组中很大，在DPPE组中很不明显。此外，ER+/-存活时间差异变模糊的原因是由于在DPPE臂中ER-存活时间得到显著延长。对于ER状态，这种非常不对称的影响表明了机理性生物事实，这是在不同的乳腺癌子群体中DPPE带来的存活时间方面的优点的进一步证据。
包括已知和赋予的ER(即整个样本)都不显著改变结果：关于ER-存活时间的p值是0.0054(在DOX臂中的81名ER-患者和在DPPE/DOX臂中的85名患者)；关于ER+存活时间的p值是0.3934(在DOX中的69名患者和DOX/DPPE中的68名患者)。有趣的是，对于至疾病进展的时间(TTP)，ER+图达到了显著性(p＝0.0445)。这些数据表明ER+肿瘤可受益于DPPE。
实施例III：DPPE对在手术后3年或更短时间诊断出患有癌症的患者的影响
根据患病持续时间，即从开始诊断出乳腺癌到出现晚期疾病时的时间长度将参加试验的患者分成亚组。亚组是：(i)小于或等于6个月，(ii)6个月到36个月，和(iii)36个月以上。
对持续时间亚组的存活时间分析表明，对于＜或＝6个月以及6-36个月亚组，有由于DPPE带来的大的差异，但是在患病持续时间＞36个月的患者中似乎没有任何差异(分别参见附图5、6和7)。结果如表3所示。
这些数据在统计学上表明，患有复发更迅速疾病的患者得到了很大受益，而患有生长更缓慢疾病的患者没有受益。注意到191/303患者(63％)是在＜36个月复发，因此，在该试验中，受益于DPPE带来的存活时间方面的优点的子群体占患者的约三分之二，以此类推，约三分之二可能的乳腺癌患者患有晚期疾病。
在仅施用多柔比星的臂(DOX)中，对于3个持续时间亚组，在存活时间当中有散布，患有生长缓慢性癌症(36个月)的患者所得到的有益效果大于两个较短持续时间组(类似)，这种差异有统计学显著性(p＝0.0163；参见附图19)。然而，在DPPE/DOX组中，这3个持续时间亚组表现出类似的存活时间，并且p值丧失(0.9903；参见附图20)，这是因为两个较短持续时间组的表现与较长持续时间(生长缓慢)组非常类似。在这方面，生长缓慢患者与具有短的持续时间并且似乎不能受益于DPPE治疗的患者不同。
对于在诊断后＜6个月与6-36个月疾病复发的患者，没有观察到DPPE影响的显著差异。因此，这两个子群体可视为一个组。
重要的是注意到，对于不同的癌症或者在特定组的癌症患者的子群体内，在侵袭性癌症与生长缓慢性癌症之间，持续时间的最佳分裂可能会不同。例如，在乳腺癌患者中，关于DPPE效力的最佳截止点是32个月、40个月、在中间的某个其它月，或者在32-40个月的范围内。此外，对于ER-和ER+患者，最佳截止点或范围可能会不同。在给定实例中，最佳分裂可通过将临床试验中的患者沿着不同时间点例如＜32m vs.≥32m；＜33m vs.≥33m等对分来找到。
持续时间与至疾病进展的时间(TTP)的关系
关于持续时间的TTP的p值表明了与持续时间亚组存活时间的相关性结果。通过检查发现，＜6个月和6-36个月亚组的曲线在约8-9个月表现出分裂(参见附图14、15和16)。对于生长缓慢的＞36个月亚组，没有任何分裂。这种与持续时间组的存活时间的相关模式和p值表明，引起存活时间延长的机制在DOX与DPPE联合给药期间发挥了作用。附图17和18的图给该结论提供了进一步的确证，附图17和18表明，在DOX臂(p＝0.0215；附图17)中，这3个亚组(持续时间)有统计学显著的TTP散布，而在DOX/DPPE臂(p＝0.9232；附图18)中则没有这种散布。同样，这也是由于在这两个较短复发亚组中的改善所致，这样在DPPE的影响下，这两个组的TTP过程与生长缓慢组非常类似。
应当理解，用于举例说明本发明实施方案的36个月的时间点仅是将DPPE对癌症患者有效地给药的一个具体持续时间标志。如上所述，决定哪个癌症是侵袭性癌症以及哪个癌症是生长缓慢性癌症的截止可早于或晚于对该试验所选的值。
实施例IV：反应状态与存活时间和至疾病进展的时间的关系
在本发明试验中，存活时间与TTP数据首次作为与对化疗的反应的函数提供。表4中提供的数据表明，对多柔比星起反应的患者可能受益于加入DPPE(p＝0.1201)，并且其疾病稳定的患者表现出明确的有益效果(p＝0.0075)(还参见附图5、6和7)。相反，经历了迅速疾病进展的患者没有表现出有益效果(p＝0.9232)。
因此，总体来说，在其疾病对多柔比星起反应或被多柔比星稳定的患者—ER-患者和在36个月内复发的患者中，DPPE的有益效果很集中。而在ER+患者中也观察到有益效果。
实施例V：持续时间和雌激素受体状态与存活时间的关系
表5和6表明，在两个较短复发亚组(≤6个月和6-36个月患者)中，ER-患者的比例相对恒定，分别为67.9％和60.7％，但是在≥36个月的生长缓慢亚组中，ER-患者的比例降至29.2％。这种模式与ER状态一致，ER状态是DPPE带来的存活时间方面的优点的显著且有用的标志。
更深入地检测短持续时间(即＜36个月)ER+患者和长持续时间(即≥36个月)ER-患者(表7，注意两个短复发组(即≤6个月和6-36个月)已合成一个＜36个月组)，结果表明DPPE带来的有益效果的关键驱使因素是患病持续时间而不是ER。就象预期的那样，＜36个月的ER-亚组表现出大的差异。同样象预期的那样，＞36个月的ER+亚组没有表现出任何差异。＞36个月的ER-亚组的数目太少而没有意义。当用赋予的值观察该亚组时，p值是0.9008，这表明有很小的差异。该分析表明，患病持续时间可能是大于ER状态的因素，并且持续时间＜36个月的ER+患者似乎也受益于DPPE治疗。TTP数据也与表明ER+患者获得某些有益效果的结论一致(参见附图12和13)。
实施例VI：持续时间和治疗类型与存活时间的关系
附图23和24表示的是，当分成亚组(i)小于或等于36个月的持续时间和(ii)大于36的持续时间时，DPPE臂(附图23)或DOX臂(附图24)中的患者的存活时间的比较。
这些数据表明，在DOX臂中，＞36个月持续时间的患者的存活时间比＜36个月的组长。这是众所周知的，并且是较晚复发患者中的固有生长缓慢癌症的结果。在接受DPPE治疗的患者中，＜36个月组中的患者表现得就象是较晚复发患者，即它们类似于其中癌症是生长缓慢的而不是侵袭性的＞36个月组。
实施例VII：先前治疗与存活时间的关系
对于该亚组分析，将3个持续时间亚组(＜6个月，6-36个月和＞36个月)进一步细分成(i)先前进行过化疗的患者组和(ii)先前没有进行过化疗的组。表8中给出了试验中已进行过化疗的患者数目的整个细目。该分析的结果如附图25-32所示。
表现出大有益效果的＜6个月组几乎完全由没有进行过化疗的患者组成，因此对于该分析是没有信息价值的(参见附图25和26)。然而，6-36个月组在“先前化疗组”中表现出更大的有益效果，这样加入DPPE将该组的中值存活时间(MST)从10.7个月延长至“尚未达到”但是＞17.5个月，存活1年的比例从40％提高至接近70％(p＝0.0335；参见附图27)。“先前没有化疗组”(6-36个月)表现出没有什么的—如果有的话—有益效果(p＝0.4403)。就象从上面的实施例中预计的那样，在＞36个月组中，这两个亚组都没有表现出受益于加入DPPE(参见附图29和30)任何益处。
这些数据与上述结论完全一致：DPPE治疗的有益效果在于36个月内复发的患者，即患有侵袭性疾病的患者中最大。
这种关于先前化疗与先前没有化疗的比较的统计学发现最可能涉及肿瘤侵袭性以及辅助治疗对复发时间的影响。因此，没有(也许)接受辅助化疗的患有高侵袭性肿瘤的患者将在＜6个月内复发。另一方面，如果采用辅助治疗，则这些相同的高侵袭性肿瘤将在较晚复发，例如在6-36个月复发。因此，在＜6个月组(几乎完全由高侵袭性肿瘤组成)中有DPPE治疗的巨大有益效果，以及在“先前化疗”组(6-36个月)中有巨大有益效果，其中“先前化疗”组还包括由于辅助化疗(频繁进行最长达6个月至完成)而被延迟6个月或更长时间的高侵袭性肿瘤。
在6-36个月的“先前没有化疗”组中没有DPPE治疗的有益效果，这是由于该亚组包含侵袭性较弱的癌症(即在＜6个月内不复发的癌症)所致。在任一亚组的＞36个月患者中也没有有益效果，也是一致的这是因为这些亚组包括在36个月之前没有复发的生长缓慢性癌症所致。
实施例VIII：ECOG性能状态与存活时间的关系
对于该分析，根据Eastern Cooperative Oncology Group(ECOG)性能状态(PS)将试验中的患者分成亚组。ECOG PS是广为接受的评价患者疾病进展的标准，是通过患者的功能损害来测量的，其中ECOG PS1是指没有功能损害，ECOG PS 1和2是指患者具有逐渐增大的功能损害，但是仍然能够走动。
表9中提供了该分析的结果(注意PS 2亚组中的样本尺寸太小而没有意义)。该分析表明，尽管在DPPE/DOX臂中有少数几个PSO患者(69对60)，但是在该亚组中统计学显著差异(p＝0.0459)的保持，排除了这种较小的不均匀分布是整个试验中受益于DPPE的整个存活时间的原因。在ECOG PS1亚组中，有受益于DPPE的趋势，由于样本尺寸太小的缘故，PS2患者中的大MST差异没有达到显著性。
实施例IX：地理分布与存活时间的关系
在该实施例中，将患者分成出生在东欧的患者亚组和主要出生在西欧和北美洲的患者亚组。将出生在东欧的患者排除在外，用第二个亚组进行上述分析(实施例II-V和VIII)。结果总结在表10中，并且与加入该试验的所有患者进行比较。
当与整个试验比较时，发现地理限制亚组具有类似存活比例。因为东欧亚组被排斥而使得分析了较少数目的患者，所以p值非常小。主要参数，包括尤其是存活时间，在西欧患者(表10中的“地理限制亚组”)与整个试验患者之间没有改变。这是一个重要的结论，因为其排除了试验结果可能受到在加入试验之前或停止DPPE治疗之后患者可能采用的治疗类型和/或护理的影响这种可能性。
由此描述了本发明，很明显，这些描述可以以很多方式改变。这样的改变不视为背离本发明实质和范围，对于本领域技术人员来说显而易见的是，所有这样的改变都包括在所附权利要求书的范围内。
表1*：DPPE对ER-和ER+患者(仅ER已知患者)的影响ER状态(已知)nER+nER-MST11yrMST1yrDOX/DPPE4020+m70％4315m65％DOX3316.5m62％419.5m36％p值0.1985(NS)0.003附图21
*不包括赋予的数据
1以月(m)为单位的中值存活时间
表2：ER值在157名患者中是已知的，在146名患者中是未知的阴性阳性未知DPPE/DOX434070DOX413376
表3：以表1中‘持续时间’数据表示的中值存活时间(MST)和1年存活率(1yr)以及插入的p值和n值如下再现。持续时间 n ≤6mn ＞6但＜36mn ≥36m MST 1yr MST1yr MST 1yrDOX/DPPE 48 23.5m 71％43 17.9m+65％62 19.9m 77％DOX 50 15m 56％50 11.5m45％50 20.3m 77％p值 0.0192 0.0337 0.7485(NS)附图 5 8 7
表4：存活信息反应n CR/PR1n SD2n PD3 MST 1yr MST1yr MST 1yrDOX/DPPE44 29.5m 87％67 19m+80％29 10m 38％DOX44 28.5m 74％68 17m59％23 10.5m 34％p值 0.1201 0.0075 0.9232(NS)
1CR/PR＝完全反应和/或部分反应
2SD＝稳定疾病
3PD＝进行性疾病
表5：依据所有患者的患病持续时间的ER分布持续时间 ≤6m 6-36m ≥36m 所有ERn(％)n％n％n％阴性36(36.7)34(36.6)14(12.5)84(27.7)阳性17(17.3)22(23.7)34(30.4)73(24.1)未知45(45.9)37(39.8)64(57.1)146(48.2)总计98(100.0)93(100.0)112(100.0)303(100.0)
表6：仅依据具有已知ER状态的患者的患病持续时间的ER分布持续时间 ≤6m 6-36m ≥36m 所有ERn(％)n％n％n％阴性36(67.9)34(60.7)14(29.2)84(53.5)阳性17(32.1)22(39.3)34(70.8)73(46.5)总计53(100.0)56(100.0)48(100.0)157(100.0)
表7：具有已知ER状态的患者 n ＜36m，ER+n ＜36m，ER-n ＞36m，ER+N ＞36m，ER- MST 1yr MST 1yr MST 1yr MST1yrDPPE/DOX 17 20+m 77％22 13.5m 60％23 19.5m 68％11 15m81％DOX 22 15.5m 52％38 9.5m 36％11 18m 82％3 12m66％p值 0.0953 0.0034 0.9074 0.7827附图 8 9 10 11
表8：先前化疗状态 先前化疗 没有先前化疗 辅助性 转移性 总计DPPE/DOX 57 9 66(43％) 87(57％)DOX 50 11 61(41％) 91(59％)
表9：ECOG状态与存活时间的关系 ECOG PS n PS 0 n PS 1 n PS 2 MST 1yr MST 1yr MST 1yr DOX/DPPE 6 9 29.5m 85％ 7 3 15.3m 63％ 11 10.9m 27％ DOX 6 0 20.3m 75％ 7 8 11.7m 48％ 12 5.9m 33％ p值 0.0459 0.1250 0.5974
表10：地理分布分析和总结参数整个试验地理限制亚组解释总存活MST 23.6m vs 15.6m p＝0.008(未分层) p＝0.021(分层)1yr 72％ vs 60％MST 17.5m vs 12m p＝0.07231yr 70％ vs 50％ (附图1)与该非常重要的终点一致，类似的由DPPE带来的存活时间的按比例增加以患病持续时间的存活：6-36mMST 18+m vs 11.5m P＝0.0337MST 17m vs 9m p＝0.18一致且类似＜6m N/A＞36m N/A以ER状态ER-的存活MST 15m vs 9.5m1yr 65％ vs 36％ p＝0.003MST 15m vs 9m1yr 68％ vs 39％ p＝0.0674在DPPE有益效果方面非常一致以ER+的存活MST 20+m vs 16m1yr 70％ vs 62％ p＝0.1985MST 19m vs 15.5m1yr 65％ vs 55％ p＝0.3821非常类似的图DPPE/DOX，关于ER+vs ER-ER+稍微好于ER- p＝0.1121ER+稍微好于ER- p＝0.2510非常类似的图DOX，关于ER+vs ER-ER+显著好于ER- p＝0.0021ER+显著好于ER- p＝0.0687非常类似的图反应的存活：CR/PR1yr 86％ vs 74％ p＝0.12011yr 88％ vs 62％ p＝0.2650在DPPE有益效果方面非常类似的图反应的存活：SDMST 19+m vs 17m1yr 80％ vs 59％ p＝0.0075MST 17.5m vs 12m1yr 73％ vs 53％ p＝0.2650对于整个试验，在DPPE有益效果方面有较大不同反应的存活：PD可重叠的 p＝0.9232在开始时DPPE好一点 p＝0.7664相当类似ECOG＝0的存活MST 29.5m vs 20.3m1yr 85％ vs 75％ p＝0.0459MST 29.5m vs 16.5m1yr 85％ vs 63％ p未给出看上去非常类似EC0G＝1的存活MST 15.2m vs 11.7m1yr 63％ vs 48％ p＝0.1250MST 13.5m vs 11.5m1yr 59％ vs 42％ p未给出看上去类似