用于治疗眼压过高和青光眼的方法和组合物 【技术领域】
本发明涉及治疗眼压过高和青光眼的方法，所述治疗导致眼睛刺激例如结膜充血减轻或基本上没有。本发明也提供可用于本发明治疗的组合物。
背景技术
前列腺素(在下文称之为PG)是有机羧酸类的成员，它们被包含于人或其它哺乳动物的组织或器官中，且显示出各式各样的生理学活性。在自然界中发现的前列腺素(原始前列腺素)通常具有如同式(A)所表示的前列腺烷酸骨架；所述式(A)如下：
(α链)
(ω链)
另一方面，原始前列腺素的某些合成类似物具有修饰的骨架。按照五元环部分的结构，把原始前列腺素分成前列腺素A类、前列腺素B类、前列腺素C类、前列腺素D类、前列腺素E类、前列腺素F类、前列腺素G类、前列腺素H类、前列腺素I类和前列腺素J类；且根据碳链部分不饱和键的数目和位置，将它们进一步分类到下列三种类型中，所述三种类型即：
下标1：13，14-不饱和-15-OH
下标2：5，6-以及13，14-双不饱和-15-OH
下标3：5，6-、13，14-以及17，18-三不饱和-15-OH。
此外，根据9位的羟基的构型，前列腺素F分为α型(该羟基呈α-构型)和β型(该羟基呈β-构型)。
已经知道前列腺素E1、前列腺素E2和前列腺素E3具有血管舒张、低血压、胃分泌减少、肠道蠕动增加、子宫收缩、利尿、支气管扩张以及抗溃疡方面的活性。已知道前列腺素F1α、前列腺素F2α和前列腺素F3α具有高血压、血管收缩、肠道蠕动增加、子宫收缩、黄体素体萎缩以及支气管缩小方面的活性。
某些15-酮(即在15位有代替羟基的氧代)-前列腺素和13，14-二氢-15-酮基-前列腺素被认为是在原始前列腺素的代谢期间由酶促作用天然产生的物质。此外还知道了某些15-酮基-前列腺素化合物具有降低眼内压的作用且对治疗眼压过高和青光眼有效(美国专利第5,001,153号、5,151,444号、5,166,178号和5,212,200号，所有所述专利通过引用结合到本文中)。
同时，在眼压过高和青光眼方面已作为滴眼剂施以的″Xalatan″包含其有效成分拉坦前列素，即13，14-二氢-17-苯基-18，19，20-三去甲-前列腺素F2α异丙酯；它是一种在ω链的末端具有环状结构且在15-位具有羟基地前列腺素衍生物。″Xalatan″滴眼剂中的拉坦前列素的临床浓度为0.005％，且估计″Xalatan″滴眼剂的一次点滴体积为大约30-35μl；拉坦前列素的临床剂量是每眼每次给药约1.5μg-1.75μg。已报道了这种滴眼剂在临床使用剂量方面的成问题的副作用，包括虹膜色素沉着、眼睛刺激例如结膜充血和结膜的结膜水肿(AmericanJournal of Ophthalmology 2001；131：631-635，Survey of Ophthalmology1997；41：S105-S110，所引用的参考文献通过引用结合到本文中)。
已知在ω链的末端具有环状结构的15-酮基-前列腺素化合物具有降低眼内压的作用。美国专利第5,321,128号描述了分别以5μg和3μg的剂量将13，14-二氢-15-酮基-17-苯基-18，19，20-三去甲-前列腺素F2α异丙酯给予健康人的眼和猴子的眼而显示出降低眼内压的作用，且显示无诸如结膜充血、眼睛刺激和人的异样物体感觉之类的副作用。有另一个文献报道：将13，14-二氢-15-酮基-17-苯基-18，19，20-三去甲-前列腺素F2α异丙酯给予猴子的眼(每眼50μg)则显示出降低眼内压的作用(Clinical Report第28卷，第11期，第3505-3509页，1994)。
但是在治疗眼压过高和青光眼方面，没人知道将ω链的末端具有环状结构的15-酮基-前列腺素化合物以高剂量给予哺乳动物之眼而显示出的眼睛刺激例如结膜充血的程度。
【发明内容】
对于ω链末端具有环状结构的15-酮基-前列腺素化合物的生物学活性，本发明人已进行了深入细致的研究；且发现将所述化合物局部地给予哺乳动物之眼则有效降低眼内压，导致基本上没有或有减轻的眼睛刺激例如结膜充血，甚至在这样高的剂量下也是如此。
换句话说，本发明涉及治疗眼压过高和青光眼的方法，所述方法包括将ω链末端具有环状结构的15-酮基-前列腺素化合物以每眼每次给药多于5μg而少于50μg局部地给予需要这种治疗的哺乳动物受治疗者之眼。按照本发明，尽管剂量高，却观测到所述受治疗者的眼内压被有效地降低而眼睛刺激例如结膜充血却基本上没有或是减轻的。
另外，本发明涉及治疗哺乳动物受治疗者的眼压过高和青光眼的眼用组合物，所述组合物包括一定量的、ω链末端具有环状结构的15-酮基-前列腺素化合物，以提供多于5μg而少于50μg的每眼每次给予剂量。
此外，本发明涉及ω链末端具有环状结构的15-酮基-前列腺素化合物在生产用于治疗哺乳动物受治疗者的眼压过高和青光眼的眼用组合物中的应用，其中所述组合物包含一定量的15-酮基-前列腺素化合物，以提供多于5μg而少于50μg的每眼每次给予剂量。
在本发明中，所述“15-酮基-前列腺素化合物”(在下文称之为“15-酮基-PG化合物”)可包括在前列腺烷酸骨架15-位有一个代替羟基的桥氧基的化合物之衍生物或类似物(包括取代的衍生物)中的任一种；而不考虑该五元环的构型、双键的数目、取代基的存在与否、或者α链或ω链中的其它任何修饰。
用于本文的15-酮基-PG化合物的命名则基于用上面式(A)表示的前列腺烷酸的编号系统。
用式(I)表示用于本发明的优选化合物，式(I)如下：
[其中W1、W2和W3是碳原子或氧原子，
L、M和N是氢、羟基、卤素、低级烷基、羟基(低级)烷基或氧代基(其中L和M中的至少一个为非氢的基团，且五元环可以有至少一个双键)；
A是-CH2OH、-COCH2OH、-COOH或其官能衍生物；
B是-CH2-CH2-、-CH＝CH-或-C≡C-；
R1是一个饱和或不饱和的二价低级或中级的脂族烃残基，它是未取代的或是被卤素、烷基、羟基、氧代基、芳基或杂环基取代的；且
Ra是一个饱和或不饱和的、低级或中级的脂族烃残基，它是末端被环(低级)烷基、环(低级)烷氧基、芳基、芳氧基、杂环基或杂环氧基取代的。]
用式(II)表示上面描述的化合物中的一组特别优选的化合物，式(II)如下：
[其中L和M是氢、羟基、卤素、低级烷基、羟基(低级)烷基或氧代基(其中L和M中的至少一个为非氢的基团，且五元环可以有至少一个双键)；
A是-CH2OH、-COCH2OH、-COOH或其官能衍生物；
B是-CH2-CH2-、-CH＝CH-或-C≡C-；
X1和X2是氢、低级烷基或卤素；
R1是一个饱和或不饱和的二价低级或中级脂族烃残基，它是未取代的或是用卤素、烷基、羟基、氧代基、芳基或杂环基取代的；
R2是一个单键或低级亚烷基；且
R3是环(低级)烷基、环(低级)烷氧基、芳基、芳氧基、杂环基或杂环氧基。]
在上述式中，R1和Ra定义中的术语“不饱和的”是指包含在主链和/或支链碳原子之间孤立地、分开地或连续地存在的至少一个或更多个双键和/或三键。按照通常的命名，用指示两个位置的较小的数字来表示在两个连续位置之间的一个不饱和键，且用指示位置的两个数字来表示在远侧两个位置之间的一个不饱和键。
术语“低级或中级脂族烃”是指具有1-14个碳原子(对于侧链，优选1-3个碳原子)的直链烃基或支链烃基；且对于R1，优选1-10个碳原子，尤其优选6-10个碳原子；对于Ra，则具有1-10个碳原子，特别是1-8个碳原子。
术语“卤素原子”包括氟、氯、溴和碘。
除非另有说明，在本说明书中的术语“低级”是用来包括具有1-6个碳原子的基团。
术语“低级烷基”是指包含1-6个碳原子的直链或支链饱和烃基，且包括例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基和己基。
术语“低级烷氧基”是指低级烷基-O-的基团，其中低级烷基是如上所定义的。
术语“羟基(低级)烷基”是指用至少一个羟基取代的如上定义的低级烷基，例如羟甲基、1-羟乙基、2-羟乙基和1-甲基-1-羟乙基。
术语“低级链烷酰氧基”是指用式RCO-O-表示的基团，其中RCO-为通过氧化如上定义的低级烷基而形成的酰基，例如乙酰基。
术语“环(低级)烷基”是指通过环化如上定义的、但包含三个或更多个碳原子的低级烷基而形成的环状基团，且它们包括例如环丙基、环丁基、环戊基和环己基。
术语“环(低级)烷氧基”是指环(低级)烷基-O-的基团，其中环(低级)烷基是如上所定义的。
术语“芳基”可以包括未取代的或取代的芳烃环(最好是单环基团)，例如苯基、甲苯基、二甲苯基。取代基的实例包括卤素原子和卤素代取代的(低级)烷基，其中卤素原子和低级烷基是如上所定义的。
术语“芳氧基”是指用式ArO-表示的基团，其中Ar为如上定义的芳基。
术语“杂环基”可包括单环至三环的杂环基，且优选单环杂环基；
所述杂环基是具有任选取代的碳原子以及1种或2种的1至4个杂原子、最好是1至3个杂原予的5-14元环且优选5-10元环，所述杂原子即选自氮原子、氧原子和硫原子。杂环基的实例包括呋喃基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、咪唑基、吡唑基、呋咱基、吡喃基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、2-吡咯啉基、吡咯烷基、2-咪唑啉基、咪唑烷基、2-吡唑啉基、吡唑烷基、哌啶子基、哌嗪基、吗啉代、吲哚基、苯并噻吩基、喹啉基、异喹啉基、嘌呤基、喹唑啉基、咔唑基、吖啶基、菲啶基、苯并咪唑基、苯并咪唑啉基、苯并噻唑基、吩噻嗪基。在这种情况下所述取代基的实例包括卤素和卤素取代的低级烷基，其中卤素原子和低级烷基是如上所描述的。
术语“杂环氧基”是指用式HcO-表示的基团，其中Hc是如上所述杂环基。
术语A的“官能衍生物”包括盐(最好是药学上可接受的盐)、醚、酯和酰胺。
合适的“药学上可接受的盐”包括按常规使用的无毒盐；例如与无机碱形成的盐，例如碱金属盐(例如钠盐和钾盐)、碱土金属盐(例如钙盐和镁盐)、铵盐；或与有机碱形成的盐，例如胺盐(例如甲胺盐、二甲胺盐、环己胺盐、苄胺盐、哌啶盐、乙二胺盐、乙醇胺盐、二乙醇胺盐、三乙醇胺盐、三(羟甲基氨基)乙烷盐、一甲基一乙醇胺盐、赖氨酸盐、普鲁卡因盐和咖啡因盐)、碱性氨基酸盐(例如精氨酸盐和赖氨酸盐)、四烷基铵盐等。可以用常规的方法，例如由相应的酸和碱或通过盐交换，来制备这些盐。
醚的实例包括烷基醚；例如低级烷基醚，例如甲醚、乙醚、丙醚、异丙醚、二丁醚、异丁基醚、叔丁基醚、戊基醚和1-环丙基乙基醚；以及中级或较高级的烷基醚，例如辛基醚、二乙基己基醚、月桂基醚和十六烷基醚；不饱和醚例如油基醚和亚麻基(linolenyl)醚；低级链烯基醚例如乙烯基醚、烯丙醚；低级链炔基醚例如乙炔基醚和丙炔基醚；羟基(低级)烷基醚例如羟乙基醚和羟基异丙基醚；低级烷氧基(低级)烷基醚例如甲氧基甲基醚和1-甲氧基乙基醚；任选取代的芳基醚例如苯基醚、甲苯磺酰基醚、叔丁基苯基醚、水杨基醚、3，4-二-甲氧基苯基醚和苯甲酰氨基苯基醚；以及芳基(低级)烷基醚例如二苄醚、三苯甲基醚和二苯甲基醚。
酯的实例包括脂族酯；例如低级烷基酯，例如甲酯、乙酯、丙酯、异丙酯、丁酯、异丁酯、叔丁酯、戊酯和1-环丙基乙酯；低级链烯基酯例如乙烯基酯和烯丙酯；低级链炔基酯例如乙炔基酯和丙炔基酯；羟基(低级)烷基酯例如羟乙基酯；低级烷氧基(低级)烷基酯例如甲氧基甲酯和1-甲氧基乙酯；以及任选取代的芳基酯例如苯酯、甲苯基酯、叔丁基苯酯、水杨基酯、3，4-二-甲氧基苯酯和苯甲酰氨基苯酯；及芳基(低级)烷基酯例如苄酯、三苯甲酯和二苯甲酯。
A的酰胺是指用式-CONR’R”表示的基团，其中R’和R”中的每个是氢原子、低级烷基、芳基、烷基磺酰基或芳基磺酰基、低级链烯基以及低级链炔基；且A的酰胺包括例如低级烷基酰胺，例如甲基酰胺、乙基酰胺、二甲基酰胺和二乙基酰胺；芳基酰胺，例如N-某酰基苯胺和N-某酰基甲苯胺；以及烷基磺酰胺或芳基磺酰胺，例如甲磺酰胺、乙磺酰胺和甲苯磺酰胺。
L和M的优选实例包括构成一个所谓PGF型五元环结构的羟基。
优选的A为：-COOH，它的药学上可接受的盐、酯，或其酰胺。
优选的B为-CH2-CH2-，它构成所谓的13，14-二氢型结构。
X1和X2的优选实例是它们中的至少一个为卤素，更优选地是它们两个都是卤素；尤其是构成一种所谓16，16-二氟型结构的氟。
优选的R1是包含1-10个碳原子的烃，最好是包含6-10个碳原子的烃。
R1的实例包括例如下列基团：
-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-，
-CH2-CH＝CH-CH2-CH2-CH2-，
-CH2-CH2-CH2-CH2-CH＝CH-，
-CH2-C≡C-CH2-CH2-CH2-，
-CH2-CH2-CH2-CH2-CH(CH3)-CH2-
-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-，
-CH2-CH＝CH-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-，
-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH＝CH-，
-CH2-C≡C-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-，
-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2(CH3)-CH2-
优选的Ra是包含1-10个碳原子、更优选1-8个碳原子的在末端被芳基或芳氧基取代的烃。
所述环以及上面式(I)和式(II)中的α链和/或ω链的构型，则可以与原始前列腺素的构型相同，或可以不同于原始前列腺素的构型。然而，本发明也包括具有一种原始型构型的化合物与一种非原始型构型化合物的混合物。
用于本发明中的化合物的代表性实例是13，14-二氢-15-酮基-17-苯基-18，19，20-三去甲-前列腺素F化合物及其衍生物或类似物。
本发明的15-酮基-前列腺素化合物可通过在11位的羟基和15位的羰基之间形成半缩醛而产生酮基-半缩醛平衡。
如果存在如上所述的互变异构体，则这两种互变异构体的比例随该分子其余部分的结构而变化、或随存在的取代基的种类而变化。有时，一种异构体与另一种异构体相比可以占优势存在。然而，应该意识到用于本发明的15-酮基-前列腺素化合物包含这两种异构体。此外，虽然可以用结构式或基于酮基-类型的名称来表示用于本发明的化合物，而不管是否存在所述异构体，但应该注意到，这样的结构或名称并不是要排除所述半缩醛型的化合物。
在本发明中，可以为了同样的目的而使用异构体中的任一种；例如单独的互变异构体，其混合物；或旋光异构体，其混合物；外消旋混合物和其它立体异构体。
可以按USP第5,073,569号、第5,166,174号、第5,221,763号、第5,212,324号、第5,739,161号和第6,242,485号(这些所引用的参考文献通过引用结合到本文中)的公开方法，来制备用于本发明的某些化合物。
用于本文的术语“治疗”包括例如预防、治愈、缓解病症、减轻病症以及阻止病症进程的任一控制手段。
在本发明中，术语“需要这样治疗的受治疗者”是指正患有例如青光眼和眼压过高之疾病的受治疗者、或易患如同上面讨论的这种疾病的受治疗者；在所述正患有疾病的受治疗者方面，降低他的/她的眼内压是所希望的。所述受治疗者可以是包括人类的任一哺乳动物受治疗者。
按照本发明，可以将上述15-酮基-前列腺素化合物配制成一种眼用组合物并局部应用于哺乳动物受治疗者之眼。本发明的眼用组合物可以是眼科领域中使用的、适合于眼之局部给药的任一形式例如滴眼剂和眼膏剂。可以用本领域已知的常规方法来制备所述眼用组合物。可通过将所述有效成分溶于无菌水溶液例如盐水和缓冲溶液中来制备滴眼剂；或者可提供作为一种包含所述有效成分的混合粉剂组合物的、在使用前用所述水溶液溶解的滴眼剂组合物。
在本发明中，优选使用诸如EP-A-0406791中描述的滴眼剂之类的滴眼剂(所引用的参考文献通过引用结合到本文中)。必要时，可以添加通常用于普通滴眼剂中的添加剂。这样的添加剂可包括等渗剂(例如氯化钠)、缓冲剂(例如硼酸、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠)、防腐剂(例如苯扎氯铵、苄索氯铵和三氯叔丁醇)、增稠剂(例如，糖类，例如乳糖、甘露醇和麦芽糖；透明质酸或其盐，例如透明质酸钠、透明质酸钾；粘多糖，例如硫酸软骨素；聚丙烯酸钠，羧乙烯基聚合物，交联聚丙烯酸酯)。
可以将所述滴眼剂配制为不含防腐剂的无菌单位剂型滴眼剂。
也可以用本领域已知的常规方法来制备眼膏剂。例如，可通过在无菌条件下将所述有效成分混合到通常供已知眼膏剂用的基本组分中，来制备眼膏剂。用于眼膏剂的基本组分的实例包括凡士林、selen50、Plastibase和聚乙二醇，但不限于此。另外，为了增加亲水性，可向所述组合物中添加一种表面活性剂。必要时，该眼膏剂也可包含上述添加剂例如防腐剂等。
按照本发明，每次给药将多于5μg/眼而少于50μg/眼的以上限定的15-酮基-化合物局部给予所述受治疗者。每眼每次给予所述15-酮基-化合物的剂量则优选为少于30μg，更优选少于20μg，再更优选少于15μg且再更优选少于12μg。每眼每次给药的剂量下限可以是多于7μg或多于10μg。
以上限定的15-酮基-化合物的剂量可以在如上限定的范围内变化，而且取决于待用的化合物，受治疗者的类型(例如动物或人)、年龄、体重，待治疗的症状，所希望的治疗效果、治疗周期等等。
按照本发明，以上限定的15-酮基-前列腺素化合物的给药频率可视下述因素而变化：待用的化合物，受治疗者的类型(例如动物或人)、年龄、体重，待治疗的症状，所希望的治疗效果，治疗周期等等。给药频率可以每天至少一次，优选每天1-6次，更优选每天1-4次。
因为用于本发明的15-酮基-前列腺素化合物即使用高剂量也基本上不引起眼睛刺激或引起减少了的眼睛刺激，所以可以长期进行本发明的治疗。
本发明的眼用组合物可包含一种有效成分或者两种或更多种有效成分的组合。在多种有效成分的组合方面，考虑到它们的治疗效果和安全性，可适当地增加或减少它们各自的含量。
调节本发明眼用组合物中的15-酮基-前列腺素化合物的浓度，使得每眼每次给予的所述待给予化合物之量在多于5μg而少于50μg的范围内，优选在多于5μg而少于30μg的范围内，更优选在多于5μg而少于20μg的范围内，再更优选在多于5μg而少于15μg的范围内且再更优选在多于5μg而少于12μg的范围内。每眼每次给药的量的下限可以是多于7μg或多于10μg。
另外，本发明的眼用组合物可包含任何其它的药物有效成分到它们不与本发明目的相反的程度。
尽管15-酮基-前列腺素化合物的高剂量，但是按照本发明，可进行长期安全而舒适地进行眼压过高和青光眼的治疗。除此之外，可以将本发明的眼用组合物安全地给予同时患有某些疾病的眼压过高和青光眼受治疗者；所述患有某些疾病即在受治疗者的角膜或结膜上有某些疾病例如变应性疾病和眼睛干燥。
参考下面的实施例，将更详细地描述本发明，所述实施例并不是用来限制本发明的。
实施例1
比较与本发明化合物13，14-二氢-15-酮基-17-苯基-18，19，20-三去甲-前列腺素F2α异丙酯和13，14-二氢-17-苯基-18，19，20-三去甲-前列腺素F2α异丙酯之间的结膜充血发生率。
1)方法
将13，14-二氢-15-酮基-17-苯基-18，19，20-三去甲-前列腺素F2α异丙酯或13，14-二氢-17-苯基-18，19，20-三去甲-前列腺素F2α异丙酯以1.75μg或50μg的剂量眼部给予白兔(每组三只，总共12只)的一只眼，给予一次。
2)评价方法
在给药后2小时，检查结膜充血的出现，并用每组的百分率来评价表现结膜充血的白兔的比率。
3)结果
表1显示了结果。
表1 组别 结膜充血发生率 1.75μg滴眼剂 50μg滴眼剂13，14-二氢-15-酮基-17-苯基-18，19，20-三去甲-前列腺素F2α异丙酯 0％ 33％13，14-二氢-17-苯基-18，19，20-三去甲-前列腺素F2α异丙酯 67％ 100％
在给予13，14-二氢-17-苯基-18，19，20-三去甲-前列腺素F2α异丙酯方面，接受了1.75μg临床剂量的受治疗者的67％和接受了50μg临床剂量的受治疗者的100％表现出结膜充血。
另一方面，在给予本发明化合物13，14-二氢-15-酮基-17-苯基-18，19，20-三去甲-前列腺素F2α异丙酯方面，接受了1.75μg剂量的受治疗者中没有一个表现出结膜充血。甚至在给予50μg的高剂量的情况下，表现出结膜充血的受治疗者百分率仅仅大约是接受了1.75μg13，14-二氢-17-苯基-18，19，20-三去甲-前列腺素F2α异丙酯的受治疗者的所述百分率的一半。
实施例2
方法
将13，14-二氢-15-酮基-17-苯基-18，19，20-三去甲-前列腺素F2α异丙酯以30μg的剂量眼部给予荷兰兔(4只雄性、4只雌性，总共8只)的一只眼。以2小时的间隔，每天进行4次给药达13周。在开始给药之前以及在开始给药后4周、8周和13周，观察角膜、结膜和虹膜发生过敏反应的情况。在最后那天的最后给药后0.5小时至2小时的时间内，进行观察。观察角膜的浊度存在及其在角膜中的面积。观察结膜出现充血、发红和肿胀的情况。观察虹膜出现充血(hyperemia)、充血(congestion)、肿胀和出血的情况。用该组的百分率来评价在角膜、结膜或虹膜中表现过敏反应的荷兰兔比率。
结果
正如在表2中所显示的，将13，14-二氢-15-酮基-17-苯基-18，19，20-三去甲-前列腺素F2α异丙酯以每眼30μg的剂量每天各4次眼部给予13周，对角膜、结膜和虹膜都没有影响。
表2 试验化合物 剂量 n 眼睛刺激的发生率 眼部给药开始后时间 给药前 4周 8周 13周 13，14-二氢-15-酮 基-17-苯基- 18，19，20-三去甲- 前列腺素F2α异丙 酯 30μg/眼 4次/天 达13周 8 0％ 0％ 0％ 0％
这些结果证明：本发明的化合物甚至在高剂量下也基本上不引起眼睛刺激或引起减少了的眼睛刺激。
实施例3
方法
将13，14-二氢-15-酮基-17-苯基-18，19，20-三去甲-前列腺素F2α异丙酯以12μg的剂量眼部给予6位健康志愿者的一只眼(试验眼)。将溶媒溶液眼部给予他们的对侧眼(对照眼)。在给药前以及在给药后4小时、6小时和12小时，用压平眼压计测量眼内压(IOP)。根据测量眼内压的每个时间点的试验眼和对照眼之间的IOP差异，来评价试验化合物降低眼内压的效应。
结果
正如在表3中所显示的，将13，14-二氢-15-酮基-17-苯基-18，19，20-三去甲-前列腺素F2α异丙酯以每眼12μg的剂量眼部给予，与对照眼相比，在给药后4小时、6小时和12小时分别降低IOP达1.0mmHg、0.8mmHg、1.1mmHg。
表3 试验化合物剂量n 降低眼内压的效应 给药后时间(小时) 4 6 1213，14-二氢-15-酮基-17-苯基-18，19，20-三去甲-前列腺素F2α异丙酯12μg/眼6 -1.0mmHg -0.8mmHg -1.1mmHg
实施例4
方法
采用先前眼的部分没有异常的9只雄性猕猴(动物的体重范围在3.2千克至5.4千克之间)。
将13，14-二氢-15-酮基-17-苯基-18，19，20-三去甲-前列腺素F2α异丙酯以15μg/眼的剂量且以30μl/眼的给药体积局部给予所述动物的右眼。左眼则接受等体积的所述溶媒。
在马上要给药时(0小时)以及在给药后2小时、4小时、8小时、12小时、24小时、28小时和32小时，用一台气动压平眼压计(applanation pneumatonometer)(Model 30 ClassicTM，Mentor O & O，Inc.，USA)，进行眼内压(IOP)的测量。
按照表4中给出的标准，在与测量眼内压一样的时间点，对眼睛刺激进行评分。这些标准基于Draize试验的那些标准。
表4：眼睛损害的评分标准
1.角膜
A.浊度-致密程度(记录下密度读数最高的区)
无浑浊----------------------------------------------------------------- 0
分散或弥散浑浊—虹膜细节清楚可见-------------------------- 1
容易区分的半透明区，虹膜细节稍微模糊--------------------- 2
乳白色区，不能见虹膜细节，瞳孔大小几乎不可辨别------- 3
不透明，虹膜看不见---------------------------------------------- 4
B.受影响的角膜区
四分之一(或更少)但不为零--------------------------------------- 1
大于四分之一——小于二分之一----------------------------- 2
大于二分之一而小于四分之三----------------------------------- 3
大于四分之三直到全部角膜区----------------------------------- 4
得分等于A×B×5 总计最大值＝80
2.虹膜
A.值
正常------------------------------------------------------------------- 0
异常皱褶、充血、肿胀、角膜周围充血
(存在其中一种或全都存在或任意组合)------------------------ 1
出血，严重破坏(任何一种或两者都存在)--------------------- 2
得分等于A×5 总计最大值＝80
3.结膜
A.发红(仅指睑结膜)
正常------------------------------------------------------------------- 0
肯定异常充血的血管------------------------------------------------ 1
更弥散，更深的深红色，单个血管不易看得清--------------- 2
弥散的牛肉样红色-------------------------------------------------- 3
B.结膜水肿
无肿胀----------------------------------------------------------------- 0
任何异常肿胀(包括瞬膜)---------------------------------------- 1
明显肿胀伴有眼睑部分外翻-------------------------------------- 2
肿胀伴有眼睑半闭合----------------------------------------------- 3
肿胀伴有眼睑半闭合至完全闭合---------------------------------- 4
C.排出物
无排出物--------------------------------------------------------------- 0
不同于常态的任何量(不包括在正常动物
内眼角中观察到的少量排出物)-------------------------------- 1
弄湿的眼睑和紧邻眼睑的眼睫的排出物----------------------- 2
弄湿的眼睑和眼周围重要区域在一起的排出物--------------- 3
得分(A+B+C)×2 总计最大值＝20
最大的总得分是关于角膜、虹膜和结膜而获得的所有得分之和。
结果
正如在表5中所显示的，以每眼15μg的剂量局部给予13，14-二氢-15-酮基-17-苯基-18，19，20-三去甲-前列腺素F2α异丙酯，则导致IOP的显著下降。
正如在表6中所显示的，在局部给予13，14-二氢-15-酮基-17-苯基-18，19，20-三去甲-前列腺素F2α异丙酯后，没观察到眼睛刺激的体征或症状。
这些结果表明：本发明所用的化合物显示出降低IOP的效应，同时却基本上不引起或引起减少了的眼睛刺激，甚至在高剂量下也是如此。
表5.
13，14-二氢-15-酮基-17-苯基-18，19，20-三去甲-前列腺素F2α异丙酯对猴眼中IOP的影响处理 IOP(mmHg) 给药后时间(小时) 0 2 4 8 12 24 28 32左眼：溶媒 19.3 19.8 20.1 20.1 18.2 19.4 19.4 18.7 ±0.4 ±0.3 ±0.3 ±0.4 ±0.5 ±0.6 ±0.4 ±0.4右眼：13，14-二氢-15-酮基-17-苯基-18，19，20-三去甲-前列腺素F2α异丙酯(15μg/眼) 19.7 17.7** 7.0** 16.6** 14.4** 16.6## 16.7** 17.2* ±0.6 ±0.5 ±0.5 ±0.6 ±0.8 ±0.6 ±0.5 ±0.4
n＝9，平均值±SE；与溶媒处理的对侧眼相比，**p＜0.01，*p＜0.05(配对Student氏t-检验)；与溶媒处理的对侧眼相比，##p＜0.01，#p＜0.05(配对Wilcoxon氏检验)
表6.对眼睛刺激的评价处理 给药后时间 眼睛刺激(评分) 角膜 虹膜 结膜 浊度 值 发红 结膜水肿 排出物13，14-二氢-15-酮基-17-苯基-18，19，20-三去甲-前列腺素F2α异丙酯(15μg/眼) 之前 2小时 4小时 8小时 12小时 24小时 28小时 32小时 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
按照表4中给出的标准对眼睛刺激进行评分。