一种生物红硒的制备工艺.pdf

本发明属生物药领域，特别涉及一种生物红硒的制备工艺，其特征在于：按如下顺序依次进行：(A)菌液制备；将嗜硒ZM菌接种于1.5％蛋白胨液体培养基中，于37℃培养24小时，备用。(B)生物红硒的制备；按下列顺序依次进行：1)于1～5％蛋白胨液体培养基50ml～l000ml中，分别加入上述菌液、4～5％的亚硒酸钠溶液lml～10ml，在24℃～40℃环境下培养，发酵液由浅黄色变为红色，显微镜下可见红色ZM菌滑动；2)经浓缩处理可得到(20mg～50mg)/ml(以Na2SeO3 5H2O计)的红色菌硒。

1、  一种生物红硒的制备工艺，其特征在于：按如下顺序依次进行：
(A)菌液制备；
将嗜硒ZM菌接种于1.5％蛋白胨液体培养基中，于37℃培养24小时，备用。
(B)生物红硒的制备；
按下列顺序依次进行：
1)于1～5％蛋白胨液体培养基50ml～1000ml中，分别加入上述菌液、4～5％的亚硒酸钠溶液1ml～10ml，在24℃～40℃环境下培养，发酵液由浅黄色变为红色，显微镜下可见红色ZM菌滑动；
2)经浓缩处理可得到(20mg～50mg)/ml(以Na₂SeO₃5H₂O计)的红色菌硒。

2、  根据权利要求1所述的生物红硒的制备工艺，其特征在于：所述A项菌液制备中蛋白胨液体培养基中含有：0.1％磷酸氢二钾K₂HPO₄ 3H₂O。

一种生物红硒的制备工艺
所属技术领域
本发明属生物药领域，特别涉及一种生物红硒的制备工艺。
背景技术
硒元素是瑞典化学家Bezeliu1817年发现并予以命名。1957年Schwarz和Foltz首先证明硒是动物和人体必需微量元素。80年代我国医学家最早应用补硒防治克山病，大骨节病取得举世瞩目的成果。大量的工作证实硒具有广泛生物学作用，缺硒会引起一系列疾病：癌症、艾滋病、心血管疾病、肝脏和胰脏疾病、高血压、糖尿病、贫血、克山病等。
硒所呈现出的一系列生化效应与其浓度密切相关，在硒的抗癌作用中需要较高浓度，硒化物毒性使得有效作用浓度范围极窄。从而使硒的利用受到较大局限，致力开发高效、低毒的硒源是研究中的一个课题。
发明内容
本发明所要解决的技术方案在于提供一种具有很高药理活性，又不具有硒的毒性，能治疗多种疾病，安全有效的生物红硒制备工艺。
本发明的技术方案可依如下方式实现：
在哺乳动物体内硒功能主要是通过各种硒酶和硒蛋白(Selenoproteins)实现。体内的硒主要以硒代半胱氨酸(Se-Cys)与蛋白组成。金属硫蛋白的排列CYS-X-CYS，半胱氨酸-其他氨基酸-半胱氨酸，令人惊奇的是半胱氨酸的位置以及近旁的丝氨酸和碱性氨基酸位置，从微生物到人的进化过程中全无改变的保存下来。这种相似性提示：由微生物产出菌硒地生物利用度和安全性，要优于其他人工合成的硒化合物。
通过大量自然选择及纯培养，分离得到可以利用化学能的噬纤维菌(噬胞)属(Cytophaga)的短杆菌，对硒元素具有特殊选择吸收、利用能力，称为嗜硒的ZM短杆菌。对硒承受力为耐受硒量较大的酵母菌的两千倍以上。
嗜硒的ZM短杆菌，菌体长1～2μm，运动方式滑动，菌落平薄有光泽，边缘不整齐，半透明，格兰氏染色阴性，对抗菌素敏感性差别很大，无抑菌作用，能分解琼脂及利用纤维素。吸收硒后菌体变红、缩小，视为变异的菌种。
本发明的制备工艺可按如下顺序依次进行：
(A)菌液制备；
将嗜硒ZM菌接种于1.5％蛋白胨液体培养基中，于37℃培养24小时，备用。
(B)生物红硒的制备；
按下列顺序依次进行：
1)于1～5％蛋白胨液体培养基50ml～1000ml中，分别加入上述菌液、4～5％的亚硒酸钠溶液1ml～10ml，在24℃～40℃环境下培养，发酵液由浅黄色变为红色，显微镜下可见红色ZM菌滑动；
2)经浓缩处理可得到(20mg～50mg)/ml(以Na₂SeO₃5H₂O计)的红色菌硒。
所述A项菌液制备中蛋白胨液体培养基中含有：0.1％磷酸氢二钾K₂HPO₄ 3H₂O。
生物硒作为主药用于抗肿瘤的剂量，具有很高的药理活性，而不具有硒的毒性。该药在配以某些生命成份调整多种酶活性，改变肌体内环境，用生物化学或植物化学方法制成复方制剂，口服给药，用于多种癌症治疗、并将在预防及保健事业发挥重要作用。该药可显著提高肌体免疫力，增加食欲，改善睡眠，增强体力，调节精神，消除抑郁，提高生活质量。对癌细胞作用：逆转为正常细胞，阻断复发转移，加速其凋亡。
美国科学院FNB提出成人硒的需要量为50～200μg/d，硒摄入量超过0.1～0.2mg/kg/d始有中毒现象。硒抗癌作用需要较高硒浓度，才能充分发挥疗效。市售硒制剂用于癌症预防和治疗剂量(以Se计)：
硒酵母片       200μg/d，900～1200μg/d(0.9～1.2mg/d)
硒卡拉胶       4000μg/d(4mg/d)
生物红硒       2000～2500μg/d(2～2.5mg/d)
附图说明
图1为本发明生物红硒红外光谱图
具体实施方式
实施例1
一种生物红硒的制备工艺可按如下顺序依次进行：
(A)菌液制备；
将嗜硒ZM菌接种于1.5％蛋白胨液体培养基中，于37℃培养24小时，备用。
(B)硒的制备；
按下列顺序依次进行：
1)于1％蛋白胨液体培养基50ml中，分别加入上述菌液、4％的亚硒酸钠溶液1ml，在24℃环境下培养，发酵液由浅黄色变为红色，显微镜下可见红色ZM菌滑动；
2)经浓缩处理可得到20mg/ml(以Na₂SeO₃ 5H₂O计)的红色菌硒。
所述A项菌液制备中蛋白胨液体培养基中含有：0.1％磷酸氢二钾K₂HPO₄ 3H₂O。
实施例2
本发明的制备工艺，其特点是：按如下顺序依次进行：
(A)菌液制备；
将嗜硒ZM菌接种于1.5％蛋白胨液体培养基中，于37℃培养24小时，备用。
(B)生物红硒的制备；
按下列顺序依次进行：
1)于1～2％蛋白胨液体培养基1000ml中，分别加入上述菌液、5％的亚硒酸钠溶液10ml，在40℃环境下培养，发酵液由浅黄色变为红色，显微镜下可见红色ZM菌滑动；
2)经浓缩处理可得到50mg/ml(以Na₂SeO₃ 5H₂O计)的红色菌硒。
所述A项菌液制备中蛋白胨液体培养基中含有：0.1％磷酸氢二钾K₂HPO₄ 3H₂O。
以生物硒作为主药制成的复方制剂(长寿饮)治疗肿瘤的疗效：
(1)单独使用：手术患者(包括淋巴转移1/2)，如及时给药(手术后一、二月内)可阻断转移、复发，可达痊愈(五年以上生存)。无手术机会晚期患者，用药2～3月，可见肿瘤不同程度稳定、缩小、消失。带瘤生存或部分治愈(三年以上生存者不鲜见)。
(2)联合用药：与放化疗联合使用，可减轻对骨髓粒系的毒性反应，肾毒性，胃肠反应等，增加肌体对放化疗的耐受性，提高疗效。
本品为广谱抗癌药，未发现不良反应和耐药性。