银荆的组培快繁方法.pdf

本发明涉及一种银荆的组培快繁方法。本发明通过对银荆的离体培养，建立起银荆的快速繁殖体系，其步骤依序为：材料选择、洗净、进行初代接种、增殖培养、生根培养、移栽，其中，材料选择银荆，系采集半木质化新枝条为外植体；所述初代接种系将外植体剪成3－4cm长度，消毒后切成1cm大小带1至2个腋芽或顶芽的植物材料，吸干表面水分，平放或斜插在诱导培养基上，每瓶接种一个外植体，散射光下培养7天左右，再放在培养架上光照培养；所述增殖培养系待诱导出的不定芽长至1.5－3cm，切下，接入增殖培养基中培养；所述的生根培养系将增殖培养所得的2cm以上的有效苗切割下来，转入生根培养基中培养。本发明组培苗成活率高达90％。

1，  一种银荆的组培快繁方法，通过对银荆的离体培养，建立起银荆的快速繁殖体系，其步骤依序为进行材料选择、洗净、进行初代接种、增殖培养、生根培养、移栽，其中，材料选择银荆，系采集半木质化新枝条为外植体，将茎段与顶芽去除叶片；所述初代接种系将外植体剪成3-4cm长度，消毒后切成1cm大小带1至2个腋芽或顶芽的植物材料，吸干表面水分，平放或斜插在诱导培养基上，每瓶接种一个外植体，散射光下培养7天左右，再放在培养架上光照培养；所述增殖培养系待诱导出的不定芽长至1.5-3cm，切下，接入增殖培养基中进行增殖培养；所述的生根培养系将增殖培养所得的2cm以上的有效苗切割下来，转入生根培养基中进行生根培养，生根培养基以1/2MS为基本培养基，培养25天后统计生根率；所述移栽是当小苗的根长至1-2cm，并有2-4条侧根时，即可炼苗移栽。

2，  根据权利要求1所述的银荆的组培快繁方法，其特征在于培养条件为初代培养基与增殖培养基均加入3.0％蔗糖和0.6％琼脂，生根培养基加入2.0％蔗糖和0.6％琼脂，pH5.8，培养室温度为24±1℃，光照强度为1500-2000lx，光照时间14小时/天。

3，  根据权利要求1或2所述的银荆的组培快繁方法，其特征在于将初选外植体洗净方法系用软毛刷在0.5％洗洁精溶液中仔细刷去表面灰尘，流水冲洗1小时。

4，  根据权利要求1或2所述的银荆的组培快繁方法，其特征在于在初代接种中其消毒方法为将剪成3-4cm长度的外植体材料放在三角瓶内用75％酒精消毒30秒，无菌水淋洗4次，再用0.1％升汞消毒10-15分钟无菌水淋洗5-6次。

5，  根据权利要求1或2所述的银荆的组培快繁方法，其特征在于在初代接种中选用的诱导培养基为1/2MS₀或1/2MS+6-BA(0.1-0.3)mg/L。

6，  根据权利要求4所述的银荆的组培快繁方法，其特征在于在初代接种中选用的诱导培养基为1/2MS+6-BA(0.1-0.3)mg/L。

7，  根据权利要求1或2所述的银荆的组培快繁方法，其特征在于所述的增殖培养中其增殖培养基以MS基本培养基，附加激素，分化最佳培养基组合为MS+6-BA(1-3)mg/L+NAA(0.1-0.8)mg/L。

8，  根据权利要求1所述的银荆的组培快繁方法，其特征在于所述的生根培养中，生根培养时生长素最佳浓度为1/2MS+IBA(0.2-0.6)mg/L。

9，  根据权利要求1所述的银荆的组培快繁方法，其特征在于所述的移栽系在生根苗高3-4cm，根长至1-2cm并有2-4cm条侧根时，移栽到装有已灭菌基质的育苗杯中，基质成分为泥土∶泥炭土∶沙∶珍珠岩＝4∶3∶3∶1，盖农用薄膜保湿至50％-70％，培养10天左右逐渐揭开薄膜，银荆萌发新根。

银荆的组培快繁方法
技术领域
本发明涉及植物苗木的培养技术，尤其是一种银荆的组织培养快速繁殖的方法。
背景技术
银荆(Acacia dealbata Link.)，别名圣诞树、白粉金合欢、鱼骨松、银栲皮树、银荆、澳洲白色金合欢、是含羞草科，金合欢属，是世界著名的速生高产优质鞣料树种。银荆原产澳大利亚东南部维多利亚、新南威尔土和塔斯马尼亚洲。我国分布区包括浙江、广西、四川、贵州、云南等南方11个省区有引种栽。花期(第一次1月-4月)、果期(第一次5月-6月)、树高(1500.00cm)、树高年生长量(160.00cm)、胸径年生长量(2.54cm)。银荆是常绿乔木，有速生、萌芽性强、较耐寒的特性；花黄色、枝条细长、羽状叶片色泽优雅，枝叶为上等插花素材。为优良用材、水土保持、栲胶、鞣料、庭院树、行道树、四旁绿化等多用途树种。利用组培技术繁殖银荆具高快速、保持母本优良种性等优点，具有很大的经济效益。
苗木的组培快繁方法主要涉及温度、湿度、光照、基质的成份、及其透气性能和瓶苗的木质化程度。
发明内容
本发明目的在于提供一种银荆的组织培养快速繁殖方法，为银荆的规模化育苗提供一条有效途径。
本发明是通过对银荆的离体培养，建立起银荆的快速繁殖体系，其步骤依序为进行材料选择、洗净、进行初代接种、增殖培养、生根培养、移栽，其中，材料选择银荆，系采集半木质化新枝条为外植体，将茎段与顶芽去除叶片；所述初代接种系将外植体剪成3-4cm长度，消毒后切成1cm大小带1至2个腋芽或顶芽的植物材料，吸干表面水分，平放或斜插在诱导培养基上，每瓶接种一个外植体，散射光下培养7天左右，再放在培养架上光照培养；所述增殖培养系待诱导出的不定芽长至1.5-3cm，切下，接入增殖培养基中进行增殖培养；所述的生根培养系将增殖培养所得的2cm以上的有效苗切割下来，转入生根培养基中进行生根培养，生根培养基以1/2MS为基本培养基，培养25天后统计生根率；所述移栽是当小苗的根长至1-2cm，并有2-4条侧根时，即可炼苗移栽。
本发明的优越性在于成活率高达90％，为银荆的规模化育苗提供了一条有效途径。
具体实施方式
1  材料与方法
1.1  试验材料
银荆。
1.2  试验方法
1.2.1  材料处理
于晴朗上午，采集半木质化新枝条为外植体，带回实验室，将茎段与顶芽去除叶片，用软毛刷在0.5％洗洁精溶液中仔细刷去表面灰尘，流水冲洗1小时备用。
1.2.2  初代接种
将冲洗干净的外植体材料置于超净工作台上，剪成3-4cm长度，放在三角瓶内用75％酒精消毒30秒，无菌水淋洗4次，再用0.1％升汞消毒10-15分钟，无菌水淋洗5-6次。然后，用锋利的手术刀切成1cm大小带1-2个腋芽或顶芽的植物材料，用无菌滤纸吸干表面水分，平放或斜插在诱导培养基(1)1/2MS0；(2)1/2MS+6-BA(0.1-0.3)mg/L，每瓶接种一个外植体。散射光下培养7天左右，再放在培养架上光照培养。
1.2.3  增殖培养
待诱导出的不定芽长至1.5-3cm，切下接入增殖培养基中进行增殖培养。增殖培养基以MS基本培养基，附加不同种类、浓度的激素配比。
1.2.4  生根培养
将增殖培养所得地2cm以上的有效苗切割下来，转入生根培养基中进行生根培养，生根培养基以1/2MS基本培养基，以不添加激素的培养基为对照，培养25天后统计生根率。
1.2.5  培养条件
初代培养基与增殖培养基均加入3.0％蔗糖和0.6％琼脂，生根培养基加入2.0％蔗糖和0.6％琼脂，pH5.8。培养室温度为24±1℃，光照强度为1500-20001x，光照时间14小时/天。
1.2.6  移栽
当小苗的根长至1-2cm并有2-4条侧根时，即可炼苗移栽。
结果与分析
2.1  外植体诱导结果
将灭菌的材料接种到芽诱导培养基(1)、(2)上，15d左右芽点开始萌动并生长，腋芽及顶芽有新的绿点出现，30d左右茎段在(2)号培养基上的腋芽长成2-3片叶的不定芽，节间短、叶色绿且健壮；(1)号培养基上的芽生长缓慢，且叶色发黄。
2.2  芽的增殖与生长情况
将上述无菌芽转接到分化培养基上，继代繁殖过程3-4周次，经试验观察，最初转入增殖时，嫩茎增加的倍数较低，形成丛生芽的数量少，经过2-3次继代，增值率会提高。为探索银荆最佳分化培养基，进行了试验，分化最佳培养基组合为：
MS+6-BA(1-3)mg/L+NAA(0.1-0.8)mg/L。
2.3  生根培养
芽分化增殖2-3cm高时，采用IBA不同浓度生长素进行生根试验，以不添加激素的培养基为对照，生根培养时生长素最佳浓度为：
1/2MS+IBA(0.2-0.6)mg/L。
2.4  移裁
生根苗高3-4cm，根长至1-2cm，并且有2-4cm条侧根时，移栽到装有已灭菌基质的育苗杯中。基质成分为泥土∶泥炭土∶沙∶珍珠岩＝4∶3∶3∶1，盖农用薄膜保湿50％-70％，培养10天左右后，逐渐揭开薄膜，银荆即可萌发新根，成活率高达90％。