红栌的组培快繁方法.pdf

本发明涉及一种红栌的组培快繁方法。本发明通过对红栌的离体培养，建立起红栌的快速繁殖体系，其步骤依序为：材料选择、洗净、初代接种、增殖培养、生根培养、移栽，其中材料选择为红栌，采集半木质化新枝条为外值体，将茎段与顶芽去除叶片；所述初代接种系将外植体剪成3－4cm长度，消毒后切成1cm大小带1－2个腋芽或顶芽的植物材料，吸干表面水分，平放或斜插在诱导培养基上，每瓶接种一个外植体，散射光下培养7天左右，再放在培养架上光照培养；所述增殖培养系待诱导出的不定芽长至1.5－3cm，切下，接入增殖培养基中培养；所述生根培养系将增殖培养所得的2cm以上的有效苗切割下来，转入生根培养基中培养。本发明组培苗的成活率达90％。

1.  红栌的组培快繁方法，通过对红栌的离体培养，建立起红栌的快速繁殖体系，其步骤依序为：材料选择、洗净、初代接种、增殖培养、生根培养、移栽，其中材料选择为红栌，采集半木质化新枝条为外值体，将茎段与顶芽去除叶片；所述初代接种系将冲洗干净的外植体剪成3--4cm长度，消毒后切成1cm大小带1--2个腋芽或顶芽的植物材料，吸干表面水分，平放或斜插在诱导培养基上，每瓶接种一个外植体，散射光下培养7天左右，再放在培养架上光照培养；所述增殖培养系待诱导出的不定芽长至1.5--3cm，切下，接入增殖培养基中进行增值培养；所述生根培养系将增殖培养所得的2cm以上的有效苗切割下来，转入生根培养基中进行生根培养，生根培养基以1/2MS基本培养基，培养25天后统计生根率；所述移栽系当小苗的根长至1-2cm并有2-4条侧根时，即可炼苗移栽。

2.  根据权利要求1所述的红栌的组培快繁方法，其特征在于培养条件为初代培养基与增殖培养基均加入2.5％蔗糖和0.6％琼脂，生根培养基加入2.0％蔗糖和0.6％琼脂，pH5.8，培养室温度为24±1℃，光照强度为1500-2000lx，光照时间14小时/天。

3.  根据权利要求1或2所述的红栌的组培快繁方法，其特征在于对外植体洗净方法是用软毛刷在0.5％洗洁精溶液中仔细刷去表面灰尘，流水冲洗1小时。

4.  根据权利要求1或2所述的红栌的组培快繁方法，其特征在于所述初代接种中的消毒方法是用75％酒精消毒30秒，无菌水淋洗4次，再用0.1％升汞消毒10--15分钟，无菌水淋洗5-6次。

5.  根据权利要求4所述的红栌的组培快繁方法，其特征在于所述初代接种中的诱导培养基1/2MS6-BA(0.1-0.5)mg/L。

6.  根据权利要求1或2所述的红栌的组培快繁方法，其中特征在于所述增殖培养以1/2MS为基本培养基，附加激素。

7.  根据权利要求6所述的红栌的组培快繁方法，其特征在于所述红栌分化最佳培养基组合为MS+6-BA(0.2-0.5)mg/L+NAA(0.01-0.06)mg/L。

8.  根据权利要求1或2所述的红栌的组培快繁方法，其特征在于所述生根培养中红栌最佳生根培养基为1/2MS+NAA(0.1-0.3)mg/L+IBA(0.5-1.0)mg/L。

9.  根据权利要求1或2所述的红栌的组培快繁方法，其特征在于所述移栽中的基质成分为泥土∶泥炭土∶沙∶珍珠岩＝4∶3∶3∶1，盖农用薄膜保湿至50％-70％，培养10d左右后，逐渐揭开薄膜，红栌即可萌发新根，成活率达90％。

红栌的组培快繁方法
技术领域
本发明涉及植物苗木的培养技术，尤其是一种红栌的组培快繁方法。
背景技术
红栌(Cotinus coggyia)，落叶灌木或小乔木，树形美观大方，叶片大而鲜艳，具有独特的彩叶树性状。生长季中，叶色各有不同：初春时全部叶片为鲜嫩的红色；春夏之交，叶色红而艳丽；盛夏时节树冠下部叶片渐渐变为绿色，顶稍还是深红色；入秋之后整株叶色变为深红色。喜光也耐半荫；耐寒、耐干旱贫瘠和碱性土壤，但是不耐水湿，低洼积水处易烂根死亡。以深厚、肥沃而排水良好之沙质壤土生长最好；根系发达。萌蘖性强，砍伐后易形成次生林。抗空气污染，对二氧化硫有较强的抗性。
组织培养快速繁殖苗木技术，具有繁殖系数高、便于经营、缩短育种周期、改善和提高苗木质量等优点。苗木的组培快繁方法主要涉及温度、湿度、光照、基质的的成份、及其透气性能和瓶苗的木质化程度。
发明内容
本发明目的在于提供一种红栌的组培快繁方法，为红栌的规模化育苗提供一条有效途径。
本发明红栌的组培快繁方法，是通过对红栌的离体培养，建立起红栌的快速繁殖体系，其步骤依序为进行材料选择、洗净、初代接种、增殖培养、生根培养、移栽，其中材料选择为红栌，采集半木质化新枝条为外值体，将茎段与顶芽去除叶片；所述初代接种系将冲洗干净的外植体剪成3--4cm长度，消毒后切成1cm大小带1--2个腋芽或顶芽的植物材料，吸干表面水分，平放或斜插在诱导培养基上，每瓶接种一个外植体，散射光下培养7天左右，再放在培养架上光照培养；所述增殖培养系待诱导出的不定芽长至1.5--3cm，切下，接入增殖培养基中进行增值培养；所述生根培养系将增殖培养所得的2cm以上的有效苗切割下来，转入生根培养基中进行生根培养，生根培养基以1/2MS基本培养基，培养25天后统计生根率；所述移栽系当小苗的根长至1-2cm并有2-4条侧根时，即可炼苗移栽。
本发明的优越性在于成活率达90％，为红栌的规模化育苗提供了一条有效途径，使这一优良彩叶树种更快地应用到城市及公园绿化.也推广至荒山、厂矿绿化美化、净化方面。
具体实施方式
1  材料与方法
1.1  试验材料
红栌。
1.2  试验方法
1.2.1  材料处理
于晴朗上午，采集半木质化新枝条为外值体带回实验室，将茎段与顶芽去除叶片，用软毛刷在0.5％洗洁精溶液中仔细刷去表面灰尘，流水冲洗1小时，备用。
1.2.2  初代接种
将冲洗干净的外植体材料置于超净工作台上，剪成3--4cm长度，放在三角瓶内，用75％酒精消毒30秒，无菌水淋洗4次，再用0.1％升汞消毒10--15分钟，无菌水淋洗5-6次。然后用锋利的手术刀切成1cm大小带1--2个腋芽或顶芽的植物材料，用无菌滤纸吸干表面水分，平放或斜插在诱导培养基1/2MS6-BA(0.1-0.5)mg/L上。每瓶接种一个外植体。散射光下培养7天左右，再放在培养架上光照培养。
1.2.3  增殖培养
待诱导出的不定芽长至1.5--3cm，切下，接入增殖培养基中进行增值培养。增殖培养基以1/2MS为基本培养基，附加不同种类、浓度的激素配比。
1.2.4  生根培养
将增殖培养所得的2cm以上地有效苗切割下来，转入生根培养基中进行生根培养，生根培养基以1/2MS基本培养基，以不添加激素的培养基为对照，培养25天后统计生根率。
1.2.5  培养条件
初代培养基与增殖培养基均加入2.5％蔗糖和0.6％琼脂，生根培界基加入2.0％蔗糖和0.6％琼脂，pH5.8。培养室温度为24±1℃，光照强度为1500-20001x，光照时间14小时/天。
1.2.6  移栽
当小苗的根长至1-2cm并有2-4条侧根时，即可炼苗移栽。
2  结果与分析
2.1  外植体诱导结果
将灭菌的材料接种到芽诱导培养基上，15d左右芽点开始萌动并生长，腋芽及顶芽有新的绿点出现，30d左右茎段在培养基上的腋芽长成2-3片叶的不定芽，节间短、叶色绿、且健壮。
2.2  芽的增殖与生长情况
将上述无菌芽转接到分化培养基上继代繁殖过程3-4周次，经试验观察，最初转入增殖时，嫩茎增加的倍数较低，形成丛生芽的数量少，经过2-3次继代，增殖率会提高。为探索红栌最佳分化培养基，进行了试验，分化最佳培养基组合为MS+6-BA(0.2-0.5)mg/L+NAA(0.01-0.06)mg/L。
2.3  生根培养
芽分化增殖2-3cm高时，采用NAA、IBA不同浓度生长素进行生根试验，以不添加激素的培养基为对照，红栌最佳生根培养基为1/2MS+NAA(0.1-0.3)mg/L+IBA(0.5-1.0)mg/L。
2.4  移栽
生根苗高3-4cm，根长至1-2cm并有2-4条侧根时，移栽到装有已灭菌基质的育苗杯中，基质成分为泥土∶泥炭土∶沙∶珍珠岩＝4∶3∶3∶1，盖农用薄膜保湿至50％-70％，培养10d左右后，逐渐揭开薄膜，红栌即可萌发新根，成活率达90％。