一种珍珠酶解液中活性肽RO反渗透选择性提纯方法和设备 技术领域 本发明属于珍珠酶解混合物的分离技术和设备。
背景技术 珍珠在医药方面的应用具有悠久的历史，珍珠味甘咸，性寒无毒，具有定惊安神，去翳明目，清热解毒，除痰生肌等功效，临床上用于治疗惊悸、癫痫、头痛、耳鸣、目生翳障、溃疡不愈、毒疮等症，内服外用均可。
珍珠含有大量的矿物质、多种氨基酸(如亮氨酸、蛋氨酸、丙氨酸等)、肽类化合物，卟啉类化合物以及其他生理活性物质成份。珍珠中所含的牛磺酸，对大及神经及视网神经的发育具有极重要的作用，对婴幼儿的智力发育更是必不可少的，对中老年人的大脑功能性衰退具有明显的延缓作用。珍珠中的卟啉类化合物能明显抑制人体内脂肪褐含量，具有护肤养颜、防衰老功效，珍珠肽具有提高人体抗病毒免疫力、减低局部血管扩张的功效，对癌细胞、瘤细胞等均有不同程度的抑制作用，是面部美容护肤品的上等原料，也是内服类辅助性美容品的最佳选择。
由于珍珠具有较高的硬度，人体对其生物利用率不高。酶解技术可将珍珠蛋白分解成含有游离氨基酸、活性肽、多种矿物质以及其它化学成分的混合水溶液。传统地化学、物理、机械等分离技术，不能将混合物中的活性肽等特定成分有效地分离出来，致使珍珠酶解的工艺产品长期停留在混合氨基酸的水平，医药价值非常低。
国内外有采用分配技术分离酶解方法制造出的氨基酸，该技术是依据被分配的原料成分在两种不相混合的溶剂系统中的分配系数不同而达到分离的目的。该方法由于溶剂用量大、分配精度不高、产品需要进一步净化、操作复杂以及生产成本高等缺点，仅适合在小规模试验产品的制作方面。
为此能提供一种能使珍珠酶解产物中的珍珠活性肽得到有效分离，得到高纯净度的珍珠肽溶液或浓缩的高纯净度的珍珠肽溶液的珍珠酶解液中活性肽RO反渗透选择性提纯方法和设备尤为必要。
发明内容 本发明的目的是针对上述现状，旨在提供一种能使珍珠酶解产物中的珍珠活性肽得到有效分离，得到高纯净度的珍珠肽溶液或浓缩的高纯净度的珍珠肽溶液的珍珠酶解液中活性肽RO反渗透选择性提纯方法和设备。利用本发明，不仅可以得到珍珠酶解液中的活性肽，还可以得到珍珠中的其他成分，例如氨基酸、矿物质等物质的高纯净度产品。
本发明目的的实现方式为，一种珍珠酶解液中活性肽RO反渗透选择性提纯方法，具体步骤为：
一、将用定向酶解方法得到的药用珍珠酶解原液(该原液不得含有铁、镁、铬、镍离子)，用活性碳层析柱处理，在流量≤1立方米/小时，压力≤0.2兆帕，环境温度10～30℃条件下，用物料泵9打入脱色罐2脱除色素、油脂及机械杂质后用螺旋离心机4，在分离度≥3000，流出量≤1立方米/小时，环境温度10～30℃条件下，脱除悬浮杂质，用孔径≤0.005mm的PVC微孔过滤器6，在流量≤1立方米，压力≤0.2兆帕，环境温度10～30℃条件下，滤除残余的机械杂质，得到含有珍珠全部成分的珍珠酶解净化液送入储罐7，
二：将珍珠酶解净化液，在环境温度10～30℃，压力≥4兆帕，流量≤1立方米/小时的条件下，通过预先装有A号仿生膜的反渗透仪11(A号RO机组)，分别得到通过反渗透仪的小分子量珍珠肽、小分子量的游离氨基酸、水溶性无机盐的混合溶液1送入储罐12和未通过反渗透仪的含有未水解的水溶性蛋白、大分子量肽、长链氨基酸、胶原蛋白以及其他大分子化合物和水不溶盐胶体物质的混合物2送入储罐10。
三：将混合溶液1，在环境温度10～30℃，压力≥4兆帕，流量≤1立方米/小时的条件下，通过预先装有B号仿生膜的反渗透仪14(B号RO机组)，分别得到未通过反渗透仪的小分子量珍珠肽溶液3送入储罐15和通过反渗透仪的含有小分子量的游离氨基酸、水溶性无机盐的混合溶液4送入储罐13。
四：将溶液3，在在环境温度10～30℃，压力≥4兆帕，流量≤1立方米/小时的条件下，通过预先装有C号仿生膜的反渗透仪17(C号RO机组)，收集未通过反渗透仪的溶液，即高纯净度的珍珠肽溶液5或浓缩的高纯净度的珍珠肽溶液6送入储罐18，收集通过反渗透仪的溶液送入储罐16。
A号仿生膜是一种可以使选定分子量的物质在一定压力条件下渗透通过的专用仿生膜，如聚砜、聚酰胺或醋酸纤维。
B号仿生膜是一种可以使较小分子量的物质，在一定压力条件下渗透通过的专用仿生膜，如聚砜、聚酰胺或醋酸纤维。
C号仿生膜是一种可以使很小分子量的物质，例如水、无机盐、游离氨基酸在压力下渗透通过的专用仿生膜，如聚砜、聚酰胺或醋酸纤维。
一种珍珠酶解液中活性肽RO反渗透选择性提纯设备，由储罐1、脱色罐2、储罐3、螺旋离心机4、储罐5、微孔过滤器6、储罐7、储罐8、装有A号仿生膜机组11、储罐10、储罐12、装有B号仿生膜机组14、储罐13、储罐15、装有C号仿生膜机组17、储罐16、储罐18构成，各罐或仿生膜机组之间用物料泵9及管道相连。
本发明工艺流程原理如下：
本发明用仿生膜反渗透定向分离制取珍珠活性肽的工艺方法的技术方案，是依据特定的仿生膜具有的，对水溶性混合物中的特定成分可以以分子水平分离的特性，选用一组或多组由多级仿生膜组成的RO反渗透系统，选择性地精确分离珍珠酶解混合溶液。具体是将混合物溶液在一定压力条件下，通过一层仿生膜，使分子量小的物质渗透过去，分子量大的物质则被截留，含有小分子量物质的溶液再经过另外一层仿生膜，使分子量更小的物质渗透出去，截留下的即是所需要的成分。通过选择不同规格的仿生膜，经过多次、多级渗透处理，即可得到高纯净度的产品。采用本发明根据不同用途的需要，可将生物活性肽、氨基酸、卟啉以及矿物质和微量元素分别提取出来。本发明不仅可用于蛋白质酶解溶液的精确分离方面，还可用于其他动植物萃取液、分解液的精密分离、浓缩，例如水溶性维生素的分离制取、水溶性植物多糖的提纯纯化分离等，在生物工程技术产品领域具有广阔的发展应用空间。在分子级水平、选择性精确分离珍珠肽等生物活性物质成分，具有定向性程度高，适用范围广，运行成本低，易于生产性操控等优点。
由于本发明的生物膜反渗透定向分离制取珍珠活性肽的工艺方法采用了有别于现有蛋白质酶解液中短肽的提取净化技术，使用了对珍珠酶解液成分无任何改变的物理方法，不加入任何原料溶液中以外的物质，不造成对原料溶液成分的化学影响，按原料溶液的分子量区域分别处理，使产成品完全保持了原料溶液中固有的化学性质，产品质量高于现有的所有技术，珍珠肽产品的纯净度可达到98％以上，非肽类含氮物质含量小于0.5％，无机盐杂质含量小于0.2％，而且工艺简单，操作容易，工序清晰，省时、节能、节省人力，工效高，每道工序均可自成系统，通过调整膜的型号、改变渗透压力等操作参数，可得到不同分子量区域的中间产品或产品。本发明还可用于其他动植物萃取液、分解液的精密分离、浓缩，例如氨基酸的分取、水溶性维生素的分离制取、水溶性植物多糖的提纯纯化分离等。
用本发明精确分离出的珍珠高纯度液体，可用于要求纯净度高、杂质极少的医药注射液等产品的生产原料，还可支持开发速溶冲剂、口服液剂、注射剂、缓释微胶囊剂等新型中药制剂和保健品。
【附图说明】
附图为本发明提纯设备结构示意图
参照附图，来自酶解工艺的酶解液脱色罐2脱色，螺旋离心机4离心分离，微孔过滤器6过滤，再经装有A号仿生膜机组11、装有B号仿生膜机组14、装有C号仿生膜机组17多次、多级渗透定向分离处理，得到高纯净度的产品。
【具体实施方式】
实例1、珍珠活性肽(碳3～碳9)的精制：
取药用珍珠100kg，洗涤后用复合酶解方法，制成含有珍珠的全部成分(如氨基酸、肽、钙盐、其他矿物质盐以及未水解的水溶性蛋白等)的珍珠酶解溶液。将珍珠酶解溶液通过初步的离心分离，得到总氮含量8％的珍珠酶解原液。将珍珠酶解原液用活性碳层析柱处理，在流量1立方米/小时，压力0.2兆帕，环境温度20℃条件下，脱除色素、油脂及机械杂质。用卧式连续离心机，在分离度3000，流出量1立方米/小时，环境温度20℃条件下，脱除悬浮杂质，用孔径0.005mm的PVC微孔过滤器，在流量1立方米，压力0.2兆帕，环境温度20℃条件下，滤除残余的机械杂质，得到含有珍珠全部成分的珍珠酶解净化液。在环境温度20℃，压力4兆帕，流量1立方米/小时的条件下，通过预先装有9000型A号聚砜生物膜的反渗透仪，分别得到通过反渗透仪的碳9以下分子量的珍珠肽、小分子量的游离氨基酸、水溶性无机盐的混合溶液1和未通过反渗透仪的含有未水解的水溶性蛋白、大分子量肽、长链氨基酸、胶原蛋白以及其他大分子化合物和水不溶盐胶体物质的混合物2。将混合溶液1，在环境温度20℃，压力4兆帕，流量1立方米/小时的条件下，通过预先装有3000型B号聚砜生物膜的反渗透仪，分别得到未通过反渗透仪的小分子量珍珠肽溶液3和通过反渗透仪的含有小分子量的游离氨基酸、水溶性无机盐的混合溶液4。将溶液3在环境温度20℃，压力4兆帕，流量1立方米/小时的条件下，通过预先装有3000型C号醋酸纤维生物膜的反渗透仪，收集通过反渗透仪的溶液(含有无机盐、游离氨基酸等)并另外处理。收集未通过反渗透仪的珍珠肽溶液，得到高纯净度珍珠肽溶液5。
实例2、珍珠活性肽(碳3～碳9)的浓缩精制：
取药用珍珠100kg，洗涤后用复合酶解方法，制成含有珍珠的全部成分(如氨基酸、肽、钙盐、其他矿物质盐以及未水解的水溶性蛋白等)的珍珠酶解溶液。将珍珠酶解溶液通过初步的离心分离，得到总氮含量8％的珍珠酶解原液。将珍珠酶解原液用活性碳层析柱处理，在流量1立方米/小时，压力0.2兆帕，环境温度20℃条件下，脱除色素、油脂及机械杂质。用卧式连续离心机，在分离度3000，流出量1立方米/小时，环境温度20℃条件下，脱除悬浮杂质，用孔径0.005mm的PVC微孔过滤器，在流量1立方米，压力0.2兆帕，环境温度20℃条件下，滤除残余的机械杂质，得到含有珍珠全部成分的珍珠酶解净化液。在环境温度20℃，压力4兆帕，流量1立方米/小时的条件下，通过预先装有9000型A号聚砜生物膜的反渗透仪，分别得到通过反渗透仪的碳9以下分子量的珍珠肽、小分子量的游离氨基酸、水溶性无机盐的混合溶液1和未通过反渗透仪的含有未水解的水溶性蛋白、大分子量肽、长链氨基酸、胶原蛋白以及其他大分子化合物和水不溶盐胶体物质的混合物2。将混合溶液1，在环境温度20℃，压力4兆帕，流量1立方米/小时的条件下，通过预先装有3000型B号聚砜生物膜的反渗透仪，分别得到未通过反渗透仪的小分子量珍珠肽溶液3和通过反渗透仪的含有小分子量的游离氨基酸、水溶性无机盐的混合溶液4。将溶液3在环境温度20℃，压力4兆帕，流量1立方米/小时的条件下，通过预先装有3000型C号醋酸纤维生物膜的反渗透仪，收集通过反渗透仪的溶液(含有无机盐、游离氨基酸等)并另外处理。检测未通过反渗透仪的珍珠肽溶液的浓度，将料液在环境温度20℃，压力≥4兆帕，流量1立方米/小时的条件下反复循环通过反渗透仪，使未通过反渗透仪的物料浓度达到5波美度以上。收集浓缩液，得到浓缩的高纯净度珍珠肽溶液6。