用于治疗癌症的异吲哚啉化合物
本申请是申请日为2009年10月26日，申请号为200980152492.3，名称为“用于治疗癌症的异吲哚啉化合物”的中国发明专利申请的分案申请。本申请要求于2008年10月29日提交的美国专利申请第61/109,475号的优先权，其在此以引用方式全文并入本发明。
1.技术领域
本发明提供了异吲哚啉化合物，包含一种或多种此类化合物的药物组合物，和使用它们治疗、预防或控制各种疾病的方法。
2.背景技术
2.1癌症和其它疾病的病理学
癌症的主要特征是源自特定正常组织的异常细胞数量增加、这些异常细胞对邻近组织的侵入、或者恶性细胞经淋巴或血液运载扩散到局部淋巴结和远距离位点(转移)。临床数据和分子生物学研究表明，癌症是从轻微癌前变化开始的多步骤过程，其可以在一定条件下发展为肿瘤形成。肿瘤病变可以克隆演化，并发展出不断增强的侵入、生长、转移和异质性的能力，特别是在肿瘤细胞逃脱了宿主的免疫监视的情况下。Roitt等人，Immunology17.1-17.12(第3版，Mosby，St.Louis，Mo.，1993)。
存在大量不同种类的癌症，其在医学文献中被详细描述。实例包括肺癌、结肠癌、直肠癌、前列腺癌、乳腺癌、脑癌和肠癌。随着整体人口的老龄化、新癌症的出现、和)易感人群(例如感染AIDS或过度暴露于阳光的人)的增加，癌症的发病率持续攀升。然而，治疗癌症的选择是有限的。例如，在血癌(例如多发性骨髓瘤)的情况下，几乎没有可被采用的治疗选择，特别是在常规化疗失败且不能选择骨髓移植的时候。因此，对能够用于治疗癌症患者的新的方法和组合物，存在极大的需求。
许多类型的癌症伴有新血管的形成，该过程被称作血管生成。肿瘤诱导的血管生成所涉及的一些机制已经被阐明。这些机制中最直接的是由肿瘤细胞分泌具有血管生成性质的细胞因子。这些细胞因子的实例包括酸性和碱性成纤维细胞生长因子(α,β-FGF)、血管生成素、血管内皮生长因子(VEGF)和TNF-α。或者，通过蛋白酶的生成和随后对贮存某些细胞因子(例如β-FGF)的细胞外基质的分解，肿瘤细胞可以释放血管生成肽。也可以通过募集炎症细胞(尤其是巨噬细胞)及其随后释放的血管生成细胞因子(例如TNF-α、 β-FGF)，来间接诱导血管生成。
多种其它疾病和病症也与不期望的血管生成相关，或以其为特征。例如，许多疾病和医学状况涉及血管生成的增强或失调，其包括但不限于：眼部新生血管性疾病、脉络膜新生血管性疾病、视网膜新生血管性疾病、红变(房角的新生血管形成)、病毒性疾病、遗传性疾病、炎症性疾病、过敏性疾病、和自体免疫性疾病。此类疾病和状况的实例，包括但不限于：糖尿病性视网膜病变、早产性视网膜病变、角膜移植排斥、新生血管性青光眼、晶状体后纤维增生、关节炎、和增殖性玻璃体视网膜病变。
因此，可以控制血管生成或抑制某些细胞因子包括TNF-α的生成的化合物，可以用于治疗和预防各种疾病和状况。
2.2治疗癌症的方法
目前的癌症治疗可以包括手术、化疗、激素治疗和/或放射治疗，以在患者中根除肿瘤细胞(参见例如Stockdale，1998，Medicine，第3卷，Rubenstein和Federman编辑，第12章，第IV部分)。最近，癌症治疗也可以包括生物治疗或免疫治疗。所有这些方法对患者都具有显著的缺点。例如，手术可能因为患者的健康状况或者患者无法接受而不合适。另外，手术可能无法完全除去肿瘤组织。仅当肿瘤组织比正常组织对放射显示出更高敏感度时，放射治疗才有效。放射治疗通常还会引发严重的副作用。激素治疗很少作为单一药剂给予。尽管激素治疗可能有效，但它通常在其它治疗已除去大部分癌细胞后用于预防或延迟癌症的复发。生物治疗和免疫治疗在数量上是有限的，并且可能产生副作用，例如皮疹或肿胀、流感样症状(包括发热、发冷和疲劳)、消化道问题或过敏反应。
对于化疗，存在多种可用于治疗癌症的化疗剂。大多数癌症化疗剂通过抑制DNA合成来起效，它们直接抑制或通过抑制三磷酸脱氧核苷酸前体的生物合成来间接抑制DNA合成，以预防DNA复制和伴随的细胞分裂。Gilman等，Goodman and Gilman's:The Pharmacological Basis of Therapeutics，第十版(McGraw Hill，New York)。
尽管可利用多种化疗剂，但是化疗也具有许多缺点。Stockdale，Medicine，第3卷，Rubenstein和Federman编辑，第12章，第10部分，1998。几乎所有的化疗剂都有毒，而且化疗引起了显著的、且通常危险的副作用，包括严重恶心、骨髓抑制和免疫抑制。另外，即使施用化疗剂的组合，许多肿瘤细胞仍能耐受化疗剂或对其发展出耐受性。事实上，对治疗方案中使用的特定化疗剂耐受的那些细胞通常被证明也会耐受其它药物，即使那些药剂通过与特定治疗中使用的药物所不同的机制起效。这一现象被称作多向耐药性或多药耐受性。因为药物耐受性，许多癌症被证实是或变成标准的化疗治疗方案 难治疗的。
与不期望的血管生成相关或以其为特征的其它疾病或状况也是难以治疗的。然而，一些化合物例如鱼精蛋白、肝素和类固醇已被提出可用于治疗某些特定疾病。Taylor等，Nature 297:307(1982)；Folkman等，Science 221:719(1983)；以及美国专利号5,001,116和4,994,443。
仍然对治疗、预防和控制癌症及其它疾病和状况同时降低或避免与常规治疗相关的毒性和/或副作用的有效方法存在显著需求，特别是用标准治疗例如手术、放射治疗、化疗和激素治疗难治疗的疾病。
3.发明概述
本文提供了异吲哚啉化合物，及其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体。
本文也提供了药物组合物，其包含本文提供的化合物(例如具有式I的化合物)，包括其单一的对映异构体、对映异构体的混合物、或非对映异构体的混合物；或其药学上可接受的盐、溶剂化物或前药；与一种或多种药学上可接受的载体结合。
本文进一步提供了在个体中治疗、预防或控制各种疾病的方法，其包含对该个体施用治疗有效量的本文提供的化合物(例如具有式I的化合物)，包括其单一的对映异构体、对映异构体的混合物、或非对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂化物或前药。
4.发明具体描述
4.1定义
为了帮助对本文的公开内容的理解，下面定义了一些术语。
一般地，本文使用的术语和本文描述的有机化学、药物化学和药理学的实验室程序是本领域熟知且普遍使用的。除非另外定义，本文使用的所有科技术语一般具有与本文公开内容所属领域中普通技术人员所普遍理解的相同含义。
术语“个体”指动物，包括但不限于灵长目动物(例如人)、母牛、绵羊、山羊、马、狗、猫、兔子、大鼠或小鼠。术语“个体”和“患者”在本文中可互换使用，用于指例如哺乳动物个体，例如人个体。
术语“治疗”指根除或改善疾病或病症、或者与疾病或病症相关的一种或多种症状。一般而言，治疗发生在疾病或病症发作后。在某些实施方案中，该术语指对患有疾病或病症的个体施用一种或多种预防或治疗剂，让此类疾病或病症的扩散或恶化最小化。
术语“预防”指预防疾病或病症、或其一种或多种症状的发作、复发或 扩散。一般而言，预防发生在疾病或病症发作前。
术语“控制”指预防或减缓疾病或病症、或其一种或多种症状的进展、扩散或恶化。有时候，个体从预防或治疗剂得到的有益效果不会导致疾病或病症的治愈。
术语“治疗有效量”意味着包括当施用时足以预防被治疗的病症、疾病或状况的一种或多种症状的发展，或在一定程度上将其减轻的化合物的量。术语“治疗有效量”也指足以引发研究人员、兽医、医师或临床医生所寻求的细胞、组织、系统、动物或人的生物或医学反应的化合物的量。
术语“IC50”指在测量此类反应的测试中50％抑制最大反应所需的化合物的量、浓度或剂量。
术语“药学上可接受的载体”、“药学上可接受的赋形剂”、“生理学上可接受的载体”或“生理学上可接受的赋形剂”指药学上可接受的材料、组合物或运载体，例如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、溶剂或封装材料。在一个实施方案中，各成分是“药学上可接受的”意味着与药物制剂的其它成分相容，而且适合与人和动物的组织或器官接触使用，没有过多的毒性、刺激、过敏反应、致免疫性、或其它问题或并发症，具有的合理利益/风险比。参见Remington:The Science and Practice of Pharmacy，第21版，Lippincott Williams & Wilkins:Philadelphia，PA，2005；Handbook of Pharmaceutical Excipients，第5版，Rowe等编辑，The Pharmaceutical Press and the American Pharmaceutical Association:2005；和Handbook of Pharmaceutical Additives，第3版，Ash和Ash编辑，Gower Publishing Company:2007；Pharmaceutical Preformulation and Formulation，Gibson编辑，CRC Press LLC:Boca Raton，FL，2004。
术语“约”或“大约”指本领域普通技术人员测定的特定值的可接受误差，其部分取决于该值是如何测量或测定的。在某些实施方案中，术语“约”或“大约”指标准差1、2、3或4以内。在某些实施方案中，术语“约”或“大约”指指定值或范围的50％、20％、15％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％、或0.05％以内。
术语“活性成分”和“活性物质”指化合物，其单独或与一种或多种药学上可接受的赋形剂联合向个体施用，以治疗、预防或改善状况、病症或疾病的一种或多种症状。本文使用的“活性成分”和“活性物质”可以是本文描述的化合物的光学活性异构体。
术语“药物”、“治疗剂”和“化疗剂”指化合物或其药物组合物，其对个体施用，以治疗、预防或改善状况、病症或疾病的一种或多种症状。
术语“烷基”指直链或带支链的饱和一价烃基，其中烷基可以任选地被 一个或多个取代基取代。除非另外指定，术语“烷基”同时包含直链和带支链的烷基两者。在某些实施方案中，烷基是具有1到20个(C1-20)、1到15个(C1-15)、1到12个(C1-12)、1到10个(C1-10)、或1到6个(C1-6)碳原子的直链饱和一价烃基，或者3到20个(C3-20)、3到15个(C3-15)、3到12个(C3-12)、3到10个(C3-10)、或3到6个(C3-6)碳原子的带支链的饱和一价烃基。本文使用的直链C1-6和带支链的C3-6烷基也被称作“低碳数烷基”。烷基的实例包括但不限于甲基、乙基、丙基(包括所有异构形式)、正丙基、异丙基、丁基(包括所有异构形式)、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基(包括所有异构形式)、和己基(包括所有异构形式)。例如，C1-6烷基指1到6个碳原子的直链饱和一价烃基或3到6个碳原子的带支链的饱和一价烃基。
术语“烯基”指直链或带支链的一价烃基，其包含一个或多个碳-碳双键，在一个实施方案中包含一到五个碳-碳双键。烯基可以任选地被一个或多个取代基取代。如本领域普通技术人员所意识到的，术语“烯基”还包括具有“顺式”和“反式”构型、或者“E”和“Z”构型的基团。除非另外指定，本文使用的术语“烯基”同时包含直链和带支链的烯基两者。例如，C2-6烯基指2到6个碳原子的直链不饱和一价烃基或3到6个碳原子的带支链的不饱和一价烃基。在某些实施方案中，烯基是2到20个(C2-20)、2到15个(C2-15)、2到12个(C2-12)、2到10个(C2-10)、或2到6个(C2-6)碳原子的直链一价烃基，或者3到20个(C3-20)、3到15个(C3-15)、3到12个(C3-12)、3到10个(C3-10)、或3到6个(C3-6)碳原子的带支链的一价烃基。烯基的实例包括但不限于乙烯基、丙烯-1-基、丙烯-2-基、烯丙基、丁烯基、和4-甲基丁烯基。
术语“炔基”指直链或带支链的一价烃基，其包含一个或多个碳-碳叁键，在一个实施方案中包含一到五个碳-碳叁键。炔基可以任选地被一个或多个取代基取代。除非另外指定，术语“炔基”同时包含直链和带支链的炔基两者。在某些实施方案中，炔基是2到20个(C2-20)、2到15个(C2-15)、2到12个(C2-12)、2到10个(C2-10)、或2到6个(C2-6)碳原子的直链一价烃基，或者3到20个(C3-20)、3到15个(C3-15)、3到12个(C3-12)、3到10个(C3-10)、或3到6个(C3-6)碳原子的带支链的一价烃基。炔基的实例包括但不限于乙炔基(-C≡CH)和炔丙基(-CH2C≡CH)。例如，C2-6炔基指2到6个碳原子的直链不饱和一价烃基，或3到6个碳原子的带支链的不饱和一价烃基。
术语“环烷基”指环形的饱和的桥连和/或非桥连的一价烃基，其可以任选地被一个或多个取代基取代。在某些实施方案中，环烷基具有3到20个(C3-20)、3到15个(C3-15)、3到12个(C3-12)、3到10个(C3-10)、或3到7个(C3-7)碳原子。环烷基的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、萘烷基和金刚烷基。
术语“芳基”指单环芳基和/或包含至少一个芳族烃环的多环一价芳基。在某些实施方案中，芳基具有6到20个(C6-20)、6到15个(C6-15)、或6到10个(C6-10)环原子。芳基的实例包括但不限于苯基、萘基、芴基、甘菊环基、蒽基、菲基、芘基、联苯基和三联苯基。芳基还指二环或三环的碳环，其中的一个环是芳族的而其它环可以是饱和的、部分不饱和的或芳族的，例如，二氢萘基、茚基、茚满基、或四氢萘基(萘满基)。在某些实施方案中，芳基也可以任选地被一个或多个取代基取代。
术语“芳烷基”或“芳基-烷基”指被芳基取代的一价烷基。在某些实施方案中，烷基和芳基两者都可以任选地被一个或多个取代基取代。
术语“杂芳基”指单环芳基和/或包含至少一个芳环的多环芳基，其中的至少一个芳环包含一个或多个独立地选自O、S和N的杂环原子。杂芳基的各环可以包含一或二个O原子、一或二个S原子、和/或一到四个N原子，条件是各环中杂环原子的总数≤四个且各环包含至少一个碳原子。只要创造出来的是稳定化合物，杂芳基可以在任一个杂环原子或碳原子处附着在主结构上。在某些实施方案中，杂芳基具有5到20个、5到15个、或5到10个环原子。单环杂芳基的实例包括但不限于吡咯基、吡唑基、吡唑啉基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、噻二唑基、异噻唑基、呋喃基、噻吩基、噁二唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、和三嗪基。二环杂芳基的实例包括但不限于吲哚基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并噻吩基、喹啉基、四氢异喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并吡喃基、吲嗪基、苯并呋喃基、异苯并呋喃基、色酮基、香豆素基、噌啉基、喹喔啉基、吲唑基、嘌呤基、吡咯并吡啶基、糠酰吡啶基、噻吩并吡啶基、二氢异吲哚基、和四氢喹啉基。三环杂芳基的实例包括但不限于咔唑基、苯并吲哚基、菲罗啉基、吖啶基、菲啶基、和呫吨基。在某些实施方案中，杂芳基也可以任选地被一个或多个取代基取代。
术语“杂环基”或“杂环”指单环的非芳环系统和/或包含至少一个非芳环的多环的环系统，其中的一个或多个非芳族的环原子是独立选自O、S或N的杂原子；而且剩下的环原子是碳原子。在某些实施方案中，杂环基或杂环基团具有3到20个、3到15个、3到10个、3到8个、4到7个、或5到6个环原子。在某些实施方案中，杂环基是单环、二环、三环、或四环的环系统，其可以包含稠合或桥连的环系统，而且其中的氮或硫原子可以任选地被氧化，氮原子可以任选地被季铵化，且一些环可以是部分或完全饱和的，或是芳族的。只要创造出来的是稳定化合物，杂环基可以在任一个杂环原子或碳原子处附着在主结构上。此类杂环基的实例包括但不限于吖啶基、氮杂卓基、苯并咪唑基、苯并吲哚基、苯并异噁唑基、苯并异噁嗪基、苯并二噁烷 基、苯并二噁茂基、苯并呋喃酮基、苯并呋喃基、苯并萘并呋喃基、苯并吡喃酮基、苯并吡喃基、苯并四氢呋喃基、苯并四氢噻吩基、苯并噻二唑基、苯并噻唑基、苯并硫苯基、苯并三唑基、苯并噻喃基、苯并噁嗪基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、β-咔啉基、咔唑基、苯并二氢吡喃基、色酮基、噌啉基、香豆素基、十氢异喹啉基、二苯并呋喃基、二氢苯并异噻嗪基、二氢苯并异噁嗪基、二氢呋喃基、二氢吡喃基、二氧戊环基、二氢吡嗪基、二氢吡啶基、二氢吡唑基、二氢嘧啶基、二氢吡咯基、二氧戊环基、1,4-二噻烷基、呋喃酮基、呋喃基、咪唑烷基、咪唑啉基、咪唑基、咪唑并吡啶基、咪唑并噻唑基、吲唑基、吲哚啉基、吲嗪基、吲哚基、异苯并四氢呋喃基、异苯并四氢噻吩基、异苯并噻吩基、异苯并二氢吡喃基、异香豆素基、异吲哚啉基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑烷基、异噻唑基、异噁唑烷基、异噁唑基、吗啉基、萘啶基、八氢吲哚基、八氢异吲哚基、噁二唑基、噁唑烷酮基、噁唑烷基、噁唑并吡啶基、噁唑基、环氧乙烷基、萘嵌间二氮杂苯基、菲啶基、菲罗啉基、吩吡嗪基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基、酞嗪基、哌嗪基、哌啶基、4-哌啶酮基、蝶啶基、嘌呤基、吡嗪基、吡唑烷基、吡唑基、哒嗪基、吡啶基、吡啶并吡啶基、嘧啶基、吡咯烷基、吡咯啉基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、奎宁环基、四氢呋喃基、四氢呋喃基、四氢异喹啉基、四氢吡喃基、四氢噻吩基、四唑基、噻二唑并嘧啶基、噻二唑基、硫吗啉基、噻唑烷基、噻唑基、噻吩基、三嗪基、三唑基、和1,3,5-三噻烷基。在某些实施方案中，杂环也可以任选地被一个或多个取代基取代。
术语“卤素”、“卤化物”或“卤代”指氟、氯、溴和/或碘。
术语“光学活性的”和“对映体活性的”指一批分子，其具有的对映体过量不低于约50％、不低于约70％、不低于约80％、不低于约90％、不低于约91％、不低于约92％、不低于约93％、不低于约94％、不低于约95％、不低于约96％、不低于约97％、不低于约98％、不低于约99％、不低于约99.5％、或不低于约99.8％。
描述光学活性化合物时，使用前缀R和S来表示分子关于其手性中心的绝对构型。使用(+)和(-)来表示化合物的旋光度，即平面偏振光被光学活性化合物所旋转的方向。(-)前缀表示化合物是左旋的，即化合物将平面偏振光旋转向左边或逆时针方向。(+)前缀表示化合物是右旋的，即化合物将平面偏振光旋转向右边或顺时针方向。但是旋光度符号(+)和(-)与分子的绝对构型R和S无关。
术语“溶剂化物”指本文提供的化合物或其盐，其进一步包含通过非共价的分子间作用力结合的可化学计量或不可化学计量数量的溶剂。当溶剂是水时，溶剂化物是水合物。
4.2化合物
本文提供了异吲哚啉化合物，包含一种或多种此类化合物的药物组合物，和使用它们治疗、预防或控制各种疾病的方法。
在一个实施方案中，提供了具有式I的化合物：
![]()
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体，其中：
X是C(＝O)或CH2；
Y是O、氰胺基(N-≡N)、或胺基(NH)；
m是整数0、1、2或3；
R1是氢或C1-6烷基；
R2是氢、-NO2、C1-10烷基、C0-6烷基-(5到10元杂芳基)、C0-6烷基-(5到6元杂环基)、C0-6烷基-OH、C0-4烷基-NH2、-NHCO-C1-6烷基、-OR21、或-(CH2-Z)0-2-(5到10元杂芳基)，其中各个杂芳基和杂环基任选地被一个或多个C1-6烷基取代；
R3是氢、卤素、-NO2、C0-6烷基-(5到10元杂芳基)、C0-6烷基-(5到6元杂环基)、C0-6烷基-OH、C0-4烷基-NH2、-NHCO-C1-6烷基、-OR21、或-(CH2-Z)0-2-(5到10元杂芳基)，其中各个杂芳基和杂环基任选地被一个或多个C1-6烷基取代；
R21是C6-10芳基、5到10元杂芳基、5到6元杂环基、或-CO(CH2)0-2R22，其中芳基、杂芳基和杂环基各自任选地被一个或多个C1-6烷基取代；
R22是-NH2或5到6元杂环基；而且
Z是CH2、NH、或O；
条件是若R1是氢，那么R2不是氢或C1-10烷基；
条件是若Y是O，那么R3不是卤素；而且
条件是若Y是O且R3是卤素，那么R2是C0-6烷基-(5-6元杂环基)。
在某些实施方案中，X是CH2。在某些实施方案中，X是C(＝O)。
在某些实施方案中，Y是O。在某些实施方案中，Y是氰胺基。在某些实施方案中，Y是酰胺基(amido)。
在某些实施方案中，Z是CH2。在某些实施方案中，Z是NH。在某些实施方案中，Z是O。
在某些实施方案中，m是0。在某些实施方案中，m是1。在某些实施方案中，m是2。在某些实施方案中，m是3。
在某些实施方案中，R1是氢。在某些实施方案中，R1是C1-6烷基，任选地被一个、两个或三个本文所述的取代基Q取代。在某些实施方案中，R1是甲基。
在某些实施方案中，R2是氢。在某些实施方案中，R2是卤素。在某些实施方案中，R2是硝基。在某些实施方案中，R2是C1-10烷基。在某些实施方案中，R2是C0-6烷基-(5到10元杂芳基)，其中杂芳基任选地被一个或多个C1-6烷基取代。在某些实施方案中，R2是C0-6烷基-(5到6元杂环基)，其中杂环基任选地被一个或多个C1-6烷基取代。在某些实施方案中，R2是C0-6烷基-OH。在某些实施方案中，R2是C0-4烷基-NH2。在某些实施方案中，R2是-NHCO-C1-6烷基。在某些实施方案中，R2是-OR21，其中R21如本文所述。在某些实施方案中，R2是-(CH2-Y)0-2-(5到10元杂芳基)，其中杂芳基任选地被一个或多个C1-6烷基取代。在某些实施方案中，R2是氢、酰胺基、乙酰胺基、羟基、硝基、氨基甲基、羟甲基、2-甲基-1H-咪唑-1-基、3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基、4-甲基哌嗪-1-基)甲基、2-甲基-2H-吡唑-3-基、1-甲基-1H-吡唑-3-基、2-甲基噻唑-4-基、4-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-基、吗啉基甲基、(吡啶-4-基)甲基、(吡啶-4-基氧基)甲基、苯氧基、吡啶-2-基氧基、哌啶-4-基氧基、2-氨基乙酰氧基、或2-哌嗪-1-基乙酰氧基。
在某些实施方案中，R3是氢。在某些实施方案中，R3是硝基。在某些实施方案中，R3是C0-6烷基-(5到10元杂芳基)，其中杂芳基任选地被一个或多个C1-6烷基取代。在某些实施方案中，R3是C0-6烷基-(5到6元杂环基)，其中杂环基任选地被一个或多个C1-6烷基取代。在某些实施方案中，R3是C0-6烷基-OH。在某些实施方案中，R3是C0-4烷基-NH2。在某些实施方案中，R3是-NHCO-C1-6烷基。在某些实施方案中，R3是-OR21，其中R21如本文所述。在某些实施方案中，R3是-(CH2-Y)0-2-(5到10元杂芳基)，其中杂芳基任选地被一个或多个C1-6烷基取代。在某些实施方案中，R3是氢、酰胺基、乙酰胺基、羟基、硝基、甲基、氨基甲基、羟甲基、2-甲基-1H-咪唑-1-基、3-甲基-1,2,4-噁二唑-5-基、4-甲基哌嗪-1-基)甲基、2-甲基-2H-吡唑-3-基、1-甲基-1H-吡唑-3-基、2-甲基噻唑-4-基、4-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-基、吗啉基甲基、(吡啶-4-基)甲基、(吡啶-4-基氧基)甲基、苯氧基、吡啶-2-基氧基、哌啶-4-基氧基、2-氨基乙酰氧基、或2-哌嗪-1-基乙酰氧基。
在一个实施方案中，该化合物是：
![]()
![]()
![]()
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药和立体异构体。
在另一个实施方案中，本文提供了具有式II的化合物：
![]()
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体，其中：
X是C(＝O)或CH2；
m是整数0、1、2或3；
R4是C3-10环烷基、5到10元杂环基、5到10元杂芳基、或C0-4烷基-NR41R42；其中环烷基、杂环基和杂芳基各自任选地被一个或多个卤素、C1-6烷基、-CO-NR43R44、-COOR45、或C0-4烷基-C6-10芳基取代，其中芳基自身可以任选地被一个或多个卤素取代；且
R41、R42、R43、R44和R45各自独立地是氢或C1-6烷基。
在某些实施方案中，X是CH2。在某些实施方案中，X是C(＝O)。
在某些实施方案中，m是0。在某些实施方案中，m是1。在某些实施方案中，m是2。在某些实施方案中，m是3。
在某些实施方案中，R4是C3-10环烷基，任选地被一个或多个(C1-6)烷基或C0-4烷基-C6-10芳基取代。在某些实施方案中，R4是5到6元杂环基，任选地被一个或多个(C1-6)烷基或C0-4烷基-C6-10芳基取代。在某些实施方案中，R4是C0-4烷基-NR41R42，其中R41和R42各自如本文所述。
在某些实施方案中，R4是3-(N,N-二乙基氨基)丙基、4-乙酰胺基苯基、3-(2-氨基乙酰氧基)-4-甲基苯基、3-氨基甲基-4-甲基苯基、2-氨基甲基-5-甲基苯基、3-氨基苯基、3-氨基-4-甲基苯基、3-氯-4-甲基苯基、4-羟甲基苯基、3-羟基-4-甲基苯基、3-(2-甲基-1H-咪唑-1-基)苯基、4-甲基-3-硝基苯基、3-(3-甲基-1,2,4- 噁二唑-5-基)苯基、4-甲基-3-(2-哌嗪-1-基乙酰氧基)-苯基、3-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基、3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基、3-(2-甲基-2H-吡唑-3-基)苯基、3-(2-甲基噻唑-4-基)苯基、4-(4-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-基)苯基、3-(吗啉基甲基)苯基、4-(吗啉基甲基)苯基、4-硝基苯基、苯基、3-(哌啶-4-氧基)苯基、4-(吡啶-4-基)甲基苯基、4-((吡啶-4-氧基)甲基)苯基、3-(吡啶-2-氧基)苯基、3-苯氧基苯基、4-叔丁基环己基、顺式-4-叔丁基环己基、反式-4-叔丁基环己基、4-甲基环己基、顺式-4-甲基环己基、反式-4-甲基环己基、1-苯甲基哌啶-4-基、4-甲基四氢-2H-吡喃-4-基、哌啶-4-基、4-苯基环己基、顺式-4-苯基环己基、或反式-4-苯基环己基。
在一个实施方案中，该化合物是：
![]()
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体。
在又一个实施方案中，本文提供了具有式III的化合物：
![]()
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体，其中：
X是C(＝O)或CH2；
m是整数0、1、2或3；
R5和R6各自独立地是：氢、卤素、C1-6烷基、氧、-NO2、C1-6烷氧基、-Z-C1-6烷基、C0-6烷基-(5到10元杂芳基)、C0-6烷基-(5到6元杂环基)、C0-6烷基-OH、C0-4烷基-NH2、-NHCO-C1-6烷基、-OR21、或-(CH2-Y)0-2-(5到10元杂芳基)，
其中Z是S或SO2；
其中R21如上面所定义；
其中以上各杂芳基和杂环基任选地被一个或多个C1-6烷基取代；而且
其中以上烷基或烷氧基可以任选地被一个或多个以下基团取代：卤素；氰基；硝基；酰胺基；C1-6亚烷基二氧；C1-6烷氧基，其自身任选地被一个或多个卤素取代；或C1-6烷硫基，自身任选地被一个或多个卤素取代；
R7是-COR71或-PO(OR72)(OR73)；
R71是C1-10烷基、C6-10芳基、或5到6元杂环基；其中烷基、芳基、杂环基可以任选地被一个或多个氨基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、或-COOR74取代；而且
R72、R73和R74各自独立地是氢或C1-10烷基。
在某些实施方案中，X是CH2。在某些实施方案中，X是C(＝O)。
在某些实施方案中，m是0。在某些实施方案中，m是1。在某些实施方案中，m是2。在某些实施方案中，m是3。
在某些实施方案中，R5是氢。在某些实施方案中，R5是卤素。在某些实施方案中，R5是氟或氯。
在某些实施方案中，R6是氢。在某些实施方案中，R6是卤素。在某些实施方案中，R6是氟或氯。
在某些实施方案中，R7是-COR41，其中R41如本文所述。在某些实施方案中，R7是-PO(OR42))(OR43)，其中R42和R43各自如本文所述。
在一个实施方案中，该化合物是：
![]()
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体，其中R5和R6如上面所定义。
在又一个实施方案中，本文提供了具有式IV的化合物：
![]()
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体，其中：
X是C(＝O)或CH2；
n是整数0或1；
R8是氢或卤素；且
R9是氢、氨基、或5到10元杂芳基或杂环基；
条件是若m是0，则R9不是氢。
在某些实施方案中，X是CH2。在某些实施方案中，X是C(＝O)。
在某些实施方案中，n是0。在某些实施方案中，n是1。
在某些实施方案中，R8是氢。在某些实施方案中，R8是卤素。在某些实施方案中，R8是氟或氯。
在某些实施方案中，R9是氢。在某些实施方案中，R9是氨基。在某些实施方案中，R9是5到10元杂芳基。在某些实施方案中，R9是5到10元杂环基。
在一个实施方案中，该化合物是：
![]()
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体。
在又一个实施方案中，本文提供了具有式V的化合物：
![]()
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体，其中：
X是C(＝O)或CH2；
m是整数0、1、2或3；
R10和R11各自独立地是氢、卤素、C1-6烷基、或C6-10芳氧基，其中烷基和芳基各自任选地被一个或多个卤素取代。
在某些实施方案中，X是CH2。在某些实施方案中，X是C(＝O)。
在某些实施方案中，m是0。在某些实施方案中，m是1。在某些实施方案中，m是2。在某些实施方案中，m是3。
在某些实施方案中，R10是氢。在某些实施方案中，R10是卤素。在某些实施方案中，R10是氟或氯。在某些实施方案中，R10是C1-6烷基，任选地被一个或多个卤素取代。在某些实施方案中，R10是C6-10芳氧基，任选地被一个或多个卤素取代。
在某些实施方案中，R11是氢。在某些实施方案中，R11是卤素。在某些实施方案中，R11是氟或氯。在某些实施方案中，R11是C1-6烷基，任选地被一个或多个卤素取代。在某些实施方案中，R11是C6-10芳氧基，任选地被一个或多个卤素取代。
在一个实施方案中，该化合物是：
![]()
![]()
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体。
在又一个实施方案中，本文提供了具有式VI的化合物：
![]()
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体，其中：
X是CH2或C＝O
m和n各自独立地是0或1；
p是0、1、2或3；
R81是5到6元杂环基，任选地被C1-6烷基取代；且
R82是氢或卤素。
在一个实施方案中，X是CH2。在另一个实施方案中，X是C＝O。
在一个实施方案中，m是0。在另一个实施方案中，m是1。在另一个实施方案中，n是0。在另一个实施方案中，n是1。
在一个实施方案中，p是0。在另一个实施方案中，p是1。在另一个实施方案中，p是2。在另一个实施方案中，p是3。
在一个实施方案中，R81是5元杂环。在另一个实施方案中，该5元杂环被C1-6烷基取代。在另一个实施方案中，R81是6元杂环。在另一个实施方案中，该6元杂环被C1-6烷基取代。
在一个实施方案中，R82是氢。在另一个实施方案中，R82是卤素。
在一个实施方案中，该化合物是：
![]()
![]()
![]()
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体。
在又一个实施方案中，本文提供了具有以下式的化合物：
![]()
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体。
除非指定特定的立体化学，本文提供的化合物意在包含全部可能的立体异构体。当本文提供的化合物包含烯基或亚烯基时，化合物可作为一种几何顺式/反式(或Z/E)异构体或其混合物存在。当结构异构体可通过低能垒互相转换时，化合物可作为单一互变异构体或互变异构体的混合物存在。这在包含例如亚氨基、酮基或肟基团的化合物中可以表现为质子互变异构的形式；或在包含芳族部分的化合物中可以表现为所谓化合价互变异构的形式。因此单一化合物可显示超过一种类型的异构。
本文提供的化合物可以是对映异构纯的，例如单一的对映异构体或单一的非对映异构体，或者是立体异构的混合物，例如对映异构体的混合物、外消旋的混合物、或非对映异构的混合物。同样地，本领域技术人员将认识到，对在体内经历差向异构的化合物，以其(R)形式施用某化合物与以其(S)形式施用该化合物是等同的。制备/分离各对映异构体的常规技术包括由合适的光学纯的前体合成，由非手性起始材料不对称合成，或拆分对映异构的混合物，例如手性色谱、重结晶、拆分、形成非对映异构的盐、或衍生成非对映异构的加合物接着再分离。
当本文提供的化合物包含酸性或碱性部分时，其也可以被提供为药学上可接受的盐(参见，Berge等，J.Pharm.Sci.1977，66，1-19；和“Handbook of Pharmaceutical Salts,Properties,and Use”，Stahl和Wermuth编辑；Wiley-VCH和VHCA，Zurich，2002)。
用于制备药学上可接受的盐的合适的酸，包括但不限于醋酸、2,2-二氯醋酸、酰化氨基酸、己二酸、藻酸、抗坏血酸、L-天冬氨酸、苯磺酸、苯甲酸、 4-乙酰胺基苯甲酸、硼酸、(+)-樟脑酸、樟脑磺酸、(+)-(1S)-樟脑-10-磺酸、癸酸、己酸、辛酸、肉桂酸、柠檬酸、环拉酸、环己烷氨基磺酸、十二烷基硫酸、乙烷-1,2-二磺酸、乙烷磺酸、2-羟基-乙烷磺酸、甲酸、富马酸、粘酸、龙胆酸、葡庚糖酸、D-葡萄糖酸、D-葡萄糖醛酸、L-谷氨酸、α-酮戊二酸、乙醇酸、马尿酸、氢溴酸、盐酸、氢碘酸、(+)-L-乳酸、(±)-DL-乳酸、乳糖酸、月桂酸、马来酸、(-)-L-苹果酸、丙二酸、(±)-DL-扁桃酸、甲烷磺酸、萘-2-磺酸、萘-1,5-二磺酸、1-羟基-2-萘甲酸、烟酸、硝酸、油酸、乳清酸、草酸、棕榈酸、扑酸、高氯酸、磷酸、L-焦谷氨酸、葡萄糖二酸、水杨酸、4-氨基-水杨酸、癸二酸、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、鞣酸、(+)-L-酒石酸、硫氰酸、对甲苯磺酸、十一碳烯酸、和戊酸。
用于制备药学上可接受的盐的合适的碱，包括但不限于无机碱，例如氢氧化镁、氢氧化钙、氢氧化钾、氢氧化锌、或氢氧化钠；和有机碱，例如伯胺、仲胺、叔胺和季胺，脂肪胺和芳香胺，包括L-精氨酸、苯乙苄胺、N,N'-双苄基乙撑二胺、胆碱、二甲基乙醇胺、二乙醇胺、二乙胺、二甲胺、二丙胺、二异丙胺、2-(二乙基氨基)-乙醇、乙醇胺、乙胺、乙二胺、异丙胺、N-甲基-葡糖胺、哈胺、1H-咪唑、L-赖氨酸、吗啉、4-(2-羟乙基)-吗啉、甲胺、哌啶、哌嗪、丙胺、吡咯烷、1-(2-羟乙基)-吡咯烷、吡啶、奎宁环、喹啉、异喹啉、仲胺、三乙醇胺、三甲胺、三乙胺、N-甲基-D-葡糖胺、2-氨基-2-(羟甲基)-1,3-丙二醇、和缓血酸胺。
本文提供的化合物也可以被提供为前药，前药是化合物的功能性衍生物而且在体内可容易地转换成母体化合物。前药经常是有用的，因为在一些情况下它们可能比母体化合物更容易施用。例如，它们可能通过口服施用而被生物利用，而母体化合物不行。前药也可能在药物组合物中具有超过母体化合物的提高的溶解度。前药可以通过各种机制转换成母体药物，包括酶处理和代谢水解。参见Harper，Progress in Drug Research 1962，4，221-294；Morozowich等在“Design of Biopharmaceutical Properties through Prodrugs and Analogs”中，Roche编辑，APHA Acad.Pharm.Sci.1977；“Bioreversible Carriers in Drug in Drug Design,Theory and Application”，Roche编辑，APHA Acad.Pharm.Sci.1987；“Design of Prodrugs”，Bundgaard，Elsevier，1985；Wang等，Curr.Pharm.Design 1999，5，265-287；Pauletti等，Adv.Drug.Delivery Rev.1997，27，235-256；Mizen等，Pharm.Biotech.1998，11，345-365；Gaignault等，Pract.Med.Chem.1996，671-696；Asgharnejad在“Transport Processes in Pharmaceutical Systems”中，Amidon等编辑，Marcell Dekker，185-218，2000；Balant等，Eur.J.Drug Metab.Pharmacokinet.1990，15，143-53；Balimane和Sinko，Adv.Drug Delivery Rev.1999，39，183-209；Browne，Clin. Neuropharmacol.1997，20，1-12；Bundgaard，Arch.Pharm.Chem.1979，86，1-39；Bundgaard，Controlled Drug Delivery 1987，17，179-96；Bundgaard，Adv.Drug Delivery Rev.1992，8，1-38；Fleisher等，Adv.Drug Delivery Rev.1996，19，115-130；Fleisher等，Methods Enzymol.1985，112，360-381；Farquhar等，J.Pharm.Sci.1983，72，324-325；Freeman等，J.Chem.Soc.，Chem.Commun.1991，875-877；Friis和Bundgaard，Eur.J.Pharm.Sci.1996，4，49-59；Gangwar等，Des.Biopharm.Prop.Prodrugs Analogs，1977，409-421；Nathwani和Wood，Drugs 1993，45，866-94；Sinhababu和Thakker，Adv.Drug Delivery Rev.1996，19，241-273；Stella等，Drugs 1985，29，455-73；Tan等，Adv.Drug Delivery Rev.1999，39，117-151；Taylor，Adv.Drug Delivery Rev.1996，19，131-148；Valentino和Borchardt，Drug Discovery Today 1997，2，148-155；Wiebe和Knaus，Adv.Drug Delivery Rev.1999，39，63-80；以及Waller等，Br.J.Clin.Pharmac.1989，28，497-507。
4.3治疗、预防和控制的方法
在一个实施方案中，本文提供了治疗、预防和/或控制各种疾病或病症的方法，该方法使用本文提供的化合物，包括其单一的对映异构体、对映异构体的混合物、或非对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂化物或前药。不受限于特定理论，本文提供的化合物可以控制血管生成或抑制某些细胞因子的生成，包括但不限于TNF-α、IL-1β、IL-12、IL-18、GM-CSF、和/或IL-6。不受限于特定理论，本文提供的化合物可以刺激某些其它细胞因子包括IL-10的生成，而且还充当T细胞活化的协同刺激信号，引起细胞因子例如但不限于IL-12和/或IFN-γ的生成增加。另外，本文提供的化合物可以增强NK细胞效应和抗体介导的细胞的细胞毒性(ADCC)。此外，本文提供的化合物可以是免疫调节和/或细胞毒性的，并因此可以用作化疗剂。因此，不受限于特定理论，本文提供的化合物具有的一些或全部此类特征，可能令其在各种疾病或病症的治疗、控制和/或预防中有用。在一个实施方案中，本文提供的化合物是细胞毒性的。
可用本文提供的方法治疗的疾病或病症，包括但不限于：癌症、血管生成相关病症、疼痛包括复杂性区域疼痛综合症(“CRPS”)、黄斑变性(“MD”)和相关综合症、皮肤疾病、肺部病症、石棉相关病症、寄生虫病、免疫缺陷病症、CNS病症、CNS损伤、动脉粥样硬化和相关病症、睡眠功能障碍和相关病症、血红蛋白病和相关病症(例如贫血)、TNFα和其它细胞因子的相关病症，以及其它各种疾病和病症。
癌症和癌前状况的实例包括但不限于以下参考文献中描述的那些：Muller等的美国专利号6,281,230和5,635,517，Zeldis的多个美国专利公开物，包括 2004年11月4日公开的公开号2004/0220144A1(骨髓增生异常综合症的治疗)；2004年2月12日公开的2004/0029832A1(各类癌症的治疗)；和2004年5月6日公开的2004/0087546(骨髓增生性疾病的治疗)。实例还包括在2004年5月5日提交的PCT/US04/14004中描述的那些。所有这些参考文献作为参考全文并入本文。
癌症的实例包括但不限于：皮肤癌例如黑色素瘤；淋巴结癌；乳腺癌；子宫颈癌；子宫癌；胃肠道癌；肺癌；卵巢癌；前列腺癌；结肠癌；直肠癌；口腔癌；脑癌；头颈部癌；咽喉癌；睾丸癌；甲状腺癌；肾癌；胰腺癌；骨癌；脾脏癌；肝癌；膀胱癌；喉癌；鼻腔通道癌；和AIDS相关癌症。在此提供的化合物也可用于治疗血液和骨髓的癌症，例如多发性骨髓瘤和急性和慢性白血病，例如成淋巴细胞性、骨髓性、淋巴细胞性和髓细胞性白血病。本文提供的化合物可用于治疗、预防或控制原发性或转移性肿瘤。
癌症的其它实例包括但不限于：晚期恶性肿瘤、淀粉样变性、成神经细胞瘤、脑膜瘤、血管外皮细胞瘤、多发性脑转移瘤、多形型成胶质细胞瘤、成胶质细胞瘤、脑干胶质瘤、预后不良的恶性脑瘤、恶性胶质瘤、复发性恶性胶质瘤、间变性星形细胞瘤、间变性少突神经胶质瘤、神经内分泌肿瘤、直肠腺癌、Dukes C&D结肠直肠癌、不可切除的结肠直肠癌、转移性肝细胞癌、卡波济肉瘤、核型急性成髓细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、皮肤T细胞淋巴瘤、皮肤B细胞淋巴瘤、弥漫型大B细胞淋巴瘤、低度滤泡性淋巴瘤、转移性黑色素瘤(局部黑色素瘤，包括但不限于眼黑色素瘤)、恶性间皮瘤、恶性胸腔积液间皮瘤综合症、腹膜癌、乳头状浆液性癌、妇科肉瘤、软组织肉瘤、硬皮病、皮肤血管炎、朗格汉斯细胞组织细胞增生症、平滑肌肉瘤、进行性骨化性纤维发育不良、激素难治疗的前列腺癌、切除的高风险软组织肉瘤、不可切除的肝细胞癌、瓦氏巨球蛋白血症、郁积性骨髓瘤、惰性骨髓瘤、输卵管癌、雄激素非依赖性前列腺癌、雄激素依赖性IV期非转移性前列腺癌、激素不敏感的前列腺癌、化疗不敏感的前列腺癌、乳头状甲状腺癌、滤泡性甲状腺癌、甲状腺髓样癌、和平滑肌瘤。在某些实施方案中，癌症是转移性的。在某些实施方案中，癌症是化疗或放射难治疗的，或耐受化疗或放射的。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗、预防或控制各种形式的白血病的方法，例如慢性淋巴细胞白血病、慢性髓细胞白血病、急性成淋巴细胞白血病、急性骨髓白血病和急性成髓细胞白血病，包括复发的、难治疗的或耐受性的白血病，如在2006年2月9日公开的美国公开号2006/0030594中公开的，其作为参考全文并入。术语“白血病”指血液形成组织的恶性肿瘤。白血病包括但不限于慢性淋巴细胞白血病、慢性髓细胞白血病、急性成淋巴细 胞白血病、急性骨髓白血病和急性成髓细胞白血病。白血病可以是复发的、难治疗的、或耐受常规治疗的。术语“复发的”指在治疗后白血病已缓解的患者的骨髓中白血病细胞回复而且正常血细胞减少的情况。术语“难治疗的或耐受性的”指即使在强化治疗后，患者的骨髓中仍具有残留白血病细胞的情况。
在又一个实施方案中，本文提供了治疗、预防或控制各种类型的淋巴瘤的方法，包括非霍奇金淋巴瘤(NHL)。术语“淋巴瘤”指在网状内皮和淋巴系统中出现的异源性肿瘤群。“NHL”指免疫系统位点包括淋巴结、骨髓、脾脏、肝脏和胃肠道中的淋巴样细胞的恶性单克隆增殖。NHL的实例包括但不限于：套细胞淋巴瘤(MCL)、中度分化的淋巴细胞性淋巴瘤、中级淋巴细胞淋巴瘤(ILL)、弥漫性低分化淋巴细胞淋巴瘤(PDL)、中心细胞淋巴瘤、弥漫性小裂细胞性淋巴瘤(DSCCL)、滤泡性淋巴瘤、以及可在显微镜下观察到的任何类型的套细胞淋巴瘤(结节性、弥漫性、母细胞性、和套区淋巴瘤)。
与不期望的血管生成相关或以其为特征的疾病和病症的实例包括但不限于：炎症性疾病、自体免疫性疾病、病毒性疾病、遗传性疾病、过敏性疾病、细菌性疾病、眼部新生血管性疾病、脉络膜新生血管性疾病、视网膜新生血管性疾病、和红变(房角的新生血管形成)。与不期望的血管生成相关或以其为特征的疾病和病症的具体实例包括但不限于：子宫内膜异位症、克罗恩病、心力衰竭、重度心力衰竭、肾损伤、内毒素血症、中毒性休克综合症、骨关节炎、逆转录病毒的复制、消瘦、脑膜炎、二氧化硅诱发的纤维化、石棉诱发的纤维化、兽医病症、恶性肿瘤相关的高钙血症、中风、循环性休克、牙周炎、牙龈炎、巨红细胞性贫血、难治性贫血、和5q缺失综合症。
疼痛的实例包括但不限于：在2005年9月15日公开的美国专利公开号2005/0203142中描述的那些，其作为参考并入本文。疼痛的具体类型包括但不限于：伤害性疼痛、神经性疼痛、伤害性疼痛和神经性疼痛的混合疼痛、内脏痛、偏头痛、头痛和手术后疼痛。
伤害性疼痛的实例包括但不限于：与化学灼伤或热灼伤相关的疼痛、皮肤割伤、皮肤挫伤、骨关节炎、类风湿性关节炎、肌腱炎和肌筋膜痛。
神经性疼痛的实例包括但不限于：I型CRPS、II型CRPS、反射交感性营养不良(RSD)、反射神经血管性营养不良、反射性营养不良、交感持续性疼痛综合症、灼性神经痛、创伤后骨萎缩、痛觉神经营养不良、肩手综合症、创伤后营养不良、三叉神经痛、疱疹后神经痛、癌症相关疼痛、幻肢痛、纤维肌痛、慢性疲劳综合症、脊髓损伤性疼痛、中枢性中风后疼痛、神经根病、糖尿病性神经病变、中风后疼痛、梅毒性神经病变、和其它疼痛的神经性状况，例如由药物如长春新碱和万珂诱发的那些。本文使用的术语“复杂性区 域疼痛综合症”、“CRPS”和“CRPS及相关综合症”指具有一种或多种下述特征的慢性疼痛病症：疼痛，无论是自发的或诱发的，包括异常性疼痛(对通常不引起疼痛的刺激的疼痛反应)和痛觉过敏(对通常仅引起轻微疼痛的刺激的夸大反应)；与刺激事件不成比例的疼痛(例如踝关节扭伤后的多年严重疼痛)；不限于单一外周神经分布的区域性疼痛；和与营养性皮肤变化(毛发和指甲生长异常，以及皮肤溃疡)相关的自主神经失调(例如水肿、血流量改变和多汗)。
MD和相关综合症的实例包括但不限于：2004年5月13日公开的美国专利公开号2004/0091455中描述的那些，其作为参考并入本文。具体实例包括但不限于：萎缩性(干性)MD、渗出性(湿性)MD、年龄相关的黄斑病变(ARM)、脉络膜新生血管形成(CNVM)、视网膜色素上皮脱落(PED)、和视网膜色素上皮萎缩(RPE)。
皮肤疾病的实例包括但不限于：2005年9月29日公开的美国公开号2005/0214328A1中描述的那些，其作为参考并入本文。具体实例包括但不限于角化症和相关症状、以表皮的过度生长为特征的皮肤疾病或病症、痤疮和皱纹。本文使用的术语“角化症”指以存在角质层的局限性过度生长为标志的表皮上的任何病变，包括但不限于：光化性角化症、脂溢性角化症、角化棘皮瘤、毛囊角化症(达里耶病)、内翻性毛囊角化症、掌跖角皮病(PPK，掌跖角化症)、毛发角化症和灰泥角化症。术语“光化性角化症”也指老年性角化症、老年角化病、老年疣、老年扁平疣、日光性角化症、角皮病、或角质瘤。术语“脂溢性角化症”也指皮脂溢性疣、老年疣或基底细胞乳头状瘤。角化症的特征是一个或多个下述症状：暴露表面(例如面部、手、耳朵、颈部、腿和胸)的粗糙外观、鳞皮状、红斑丘疹、斑块、针状突起或小瘤；被称为皮角的角蛋白瘤；过度角化；微血管扩张；弹性组织变性；含色素的痣；棘皮症；角化不全；角化不良；乳头状瘤病；基底细胞色素过度沉积；细胞异型性；有丝分裂象；异常细胞间粘连；密集的炎症渗透和鳞状细胞癌的小范围普遍存在。
以表皮过度生长为特征的皮肤疾病或病症的实例，包括但不限于：以存在表皮过度生长为标志的任何状况、疾病或病症，包括但不限于与乳头状瘤病毒相关的感染、砷角化症、Leser-Trélat征兆、疣状角化不良瘤(WD)、小棘毛壅病(TS)、变异性红角皮病(EKV)、胎儿鱼鳞病(丑角样鱼鳞病)、指拐垫、表皮黑素棘皮瘤、汗孔角化症、银屑病、鳞状细胞癌、融合性网状乳头状瘤病(CRP)、软垂疣、皮角、考登病(多发性错构瘤综合症)、黑色丘疹性皮肤病(DPN)、表皮痣综合症(ENS)、寻常性鱼鳞癣、传染性软疣、结节性痒疹、和黑棘皮症(AN)。
肺部病症的实例包括但不限于：在2005年10月27日公开的美国公开号2005/0239842A1中描述的那些，其作为参考并入本文。具体实例包括肺动脉高压和相关病症。肺动脉高压和相关病症的实例包括但不限于：原发性肺动脉高压(PPH)；继发性肺动脉高压(SPH)；家族性PPH；偶发性PPH；前毛细血管肺动脉高压；肺动脉高血压(PAH)；肺动脉高压；特发性肺动脉高压；血栓性肺动脉病(TPA)；致丛性肺动脉病；I-IV功能级肺动脉高压；和与以下疾病相关、涉及以下疾病或由以下疾病继发的肺动脉高压：左心室功能不全、二尖瓣病变、缩窄性心包炎、主动脉瓣狭窄、心肌病、纵隔纤维化、肺静脉异位引流、肺静脉闭塞性病变、胶原血管病、先天性心脏病、HIV病毒感染、药物和毒素例如氟苯丙胺、先天性心脏病、肺静脉高压、慢性阻塞性肺病、间质性肺病、睡眠呼吸障碍、肺泡换气不足症、长期暴露于高海拔、新生儿肺病、肺泡-毛细血管发育不良、镰状细胞病、其它凝血障碍、慢性血栓栓塞、结缔组织疾病、狼疮包括全身性和皮肤性狼疮、血吸虫病、结节病或肺毛细管瘤。
石棉相关病症的实例包括但不限于：2005年5月12日公开的美国公开号2005/0100529中描述的那些，其作为参考并入本文。具体实例包括但不限于：间皮瘤、石棉沉着病、恶性胸腔积液、良性渗出性积液、胸膜斑块、胸膜钙化、弥漫性胸膜肥厚、圆形肺不张、纤维化团块、和肺癌。
寄生虫病的实例包括但不限于：2006年7月13日公开的美国公开号2006/0154880中描述的那些，其作为参考并入本文。寄生虫病包括由人胞内寄生物引起的疾病和病症，例如但不限于：恶性疟原虫(P.falcifarium)、卵形疟原虫(P.ovale)、间日疟原虫(P.vivax)、三日疟原虫(P.malariae)、杜氏利什曼原虫(L.donovari)、婴儿利什曼原虫(L.infantum)、埃塞俄比亚利什曼原虫(L.aethiopica)、硕大利什曼原虫(L.major)、热带利什曼原虫(L.tropica)、墨西哥利什曼原虫(L.mexicana)、巴西利什曼原虫(L.braziliensis)、弓形虫(T.Gondii)、仓鼠巴贝西原虫(B.microti)、分歧巴贝西原虫(B.divergens)、结肠小袋虫(B.coli)、微小隐孢子虫(C.parvum)、卡耶塔环孢子虫(C.cayetanensis)、赤痢阿米巴原虫(E.histolytica)、贝氏等孢子球虫(I.belli)、曼氏血吸虫(S.mansonii)、埃及血吸虫(S.haematobium)、锥虫属(Trypanosoma ssp.)、弓形虫属(Toxoplasma ssp.)、和盘尾丝虫(O.volvulus)。由非人胞内寄生物引起的其它疾病和病症，例如但不限于：牛巴贝西原虫(Babesia bovis)、犬巴贝西原虫(Babesia canis)、吉氏犬巴贝西原虫(Banesia Gibsoni)、蜥蜴的球孢子虫(Besnoitia darlingi)、猫胞簇虫(Cytauxzoon felis)、艾美球虫属(Eimeria ssp.)、哈蒙德虫属(Hammondia ssp.)和泰勒虫属(Theileria ssp.)。具体实例包括但不限于：疟疾、巴贝西虫病、锥虫病、利什曼病、弓形虫病、脑膜脑炎、角膜炎、阿米巴病、贾第鞭毛虫 病、隐孢子虫病、等孢子球虫病、环孢子虫病、微孢子虫病、蛔虫病、鞭虫病、钩虫病、类圆线虫病、弓蛔虫病、旋毛虫病、淋巴丝虫病、盘尾丝虫病、丝虫病、血吸虫病、和由动物血吸虫引起的皮炎。
免疫缺陷病症的实例包括但不限于：2006年8月24日公开的美国公开号2006/0188475中描述的那些，其作为参考并入本文。具体实例包括但不限于：腺苷脱氨酶缺乏、伴有正常或升高的Ig的抗体缺乏、共济失调-毛细血管扩张、裸淋巴细胞综合症、常见变异型免疫缺陷、伴有过高IgM的Ig缺乏、Ig重链缺失、IgA缺乏、伴有胸腺瘤的免疫缺陷、网状细胞发育不全、Nezelof综合症、选择性IgG亚类缺乏、婴儿期暂时性低丙种球蛋白血症、Wistcott-Aldrich综合症、X-连锁无丙种球蛋白血症、X-连锁严重联合免疫缺陷。
CNS病症的实例包括但不限于：2005年6月30日公开的美国公开号2005/0143344A1中描述的那些，其作为参考并入本文。具体实例包括但不限于：肌萎缩性侧索硬化症、阿尔茨海默病、帕金森症、亨廷顿舞蹈病、多发性硬化、其它神经免疫学病症例如Tourette综合症、谵妄、或短时期内发生的意识障碍、以及遗忘症，或在缺乏其它中枢神经系统损伤时发生的零散记忆损伤。
CNS损伤和相关综合症的实例包括但不限于：2006年6月8日公开的美国公开号2006/0122228中描述的那些，其作为参考并入本文。具体实例包括但不限于：CNS损伤/损害和相关综合症，包括但不限于原发性脑损伤、继发性脑损伤、外伤性脑损伤、局部脑损伤、弥漫性轴索损伤、头部损伤、脑震荡、脑震荡后综合症、脑挫裂伤、硬脑膜下血肿、表皮血肿、创伤后癫痫、长期植物人状态、完全SCI、不完全SCI、急性SCI、亚急性SCI、慢性SCI、中央脊髓综合症、脊髓半切综合症、脊髓前角综合症、脊髓圆锥综合症、马尾神经综合症、神经源性休克、脊髓休克、意识水平改变、头痛、恶心、呕吐、记忆丧失、眩晕、复视、视力模糊、情绪不稳、睡眠障碍、易怒、无法集中、神经质、行为损伤、认知障碍、和惊厥。
其它疾病或病症包括但不限于病毒性、遗传性、过敏性和自体免疫性疾病。具体实例包括但不限于：HIV、肝炎、成人呼吸窘迫综合症、骨吸收疾病、慢性肺部炎症性疾病、皮炎、囊性纤维化、感染性休克、败血症、内毒素性休克、血液动力学性休克、败血症综合症、缺血后再灌注损伤、脑膜炎、银屑病、纤维化疾病、恶病质、移植物抗宿主病、移植排斥、自体免疫性疾病、类风湿性脊椎炎、克罗恩病、溃疡性结肠炎、炎症性肠疾病、多发性硬化、全身性红斑狼疮、麻风病中的ENL、辐射损伤、癌症、哮喘、或高氧肺泡损伤。
动脉粥样硬化和相关状况的实例包括但不限于：2002年5月9日公开的 美国公开号2002/0054899中公开的那些，其作为参考并入本文。具体实例包括但不限于：涉及动脉粥样硬化的所有形式的状况，包括血管介入(例如血管成形术、支架植入术、粥样斑块切除术和移植)后的再狭窄。本文的公开内容包括所有形式的血管介入，包括心血管和肾脏系统的疾病，例如但不限于肾血管成形术、经皮冠状动脉介入(PCI)、经皮腔内冠状动脉成形术(PTCA)、颈动脉经皮腔内血管成形术(PTA)、冠状动脉旁路移植、伴有支架植入的血管成形术、髂动脉/股动脉/或腘动脉的外围经皮腔内介入、和使用浸渍过的人造移植物的手术介入。下表提供了可能需要治疗的主要体动脉列表，本文的公开内容包括其中的全部：
![]()
![]()
睡眠功能障碍和相关综合症的实例包括但不限于：2005年10月6日公开的美国公开号2005/0222209A1中公开的那些，其作为参考并入本文。具体实例包括但不限于：打鼾、睡眠呼吸暂停、失眠、嗜眠、下肢不宁综合症、夜惊、梦游梦食、以及与慢性神经性或炎症性状况相关的睡眠功能障碍。慢性神经性或炎症性状况包括但不限于：复杂性区域疼痛综合症，慢性腰痛，骨骼肌肉疼痛，关节炎，神经根病，癌症相关疼痛，纤维肌痛，慢性疲劳综合症，内脏疼痛，膀胱疼痛，慢性胰腺炎，神经病变(糖尿病性、疱疹后的、外伤性的或炎症性的)，和神经退行性疾病例如帕金森症、阿尔茨海默病、肌萎缩性侧索硬化症、多发性硬化、亨丁顿舞蹈症、运动迟缓；肌肉强直；帕金森震颤；帕金森步态；运动冻结；抑郁症；长期记忆缺陷，Rubinstein-Taybi综合症(RTS)；痴呆；姿势不稳定；运动不足症；突触核蛋白病症；多系统萎缩；纹状体黑质变性；橄榄体脑桥小脑萎缩；Shy-Drager综合症；具有帕金森特征的运动神经元病；路易体痴呆；Tau病理学病症；进行性核上性麻痹；皮质基底节变性；额颞叶痴呆；淀粉状朊病理学病症；轻度认知功能损害；伴有帕金森症的阿尔茨海默病；威尔森氏症；Hallervorden-Spatz病；Chediak-Hagashi病；SCA-3脊髓小脑性共济失调；X-连锁肌张力障碍帕金森症；朊病毒疾病；多动性障碍；舞蹈症；颤搐；肌张力障碍震颤；肌萎缩性侧索硬化症(ALS)；CNS创伤、和肌阵挛。
血红蛋白病和相关病症的实例包括但不限于：2005年6月30日公开的美国公开号2005/0143420A1中描述的那些，其作为参考并入本文。具体实例包括但不限于：血红蛋白病、镰状细胞贫血、和与CD34+细胞的分化相关的任何其它病症。
TNFα和其它细胞因子的相关病症的实例包括但不限于：WO 98/03502和WO 98/54170中描述的那些，二者都作为参考全文并入本文。具体实例包括但不限于：内毒素血症或中毒性休克综合症；恶病质；成人呼吸窘迫综合症；骨吸收疾病例如关节炎；高钙血症；移植物抗宿主反应；脑型疟疾；炎症；肿瘤生长；慢性肺部炎症性疾病；再灌注损伤；心肌梗塞；中风；循环性休克；类风湿性关节炎；克罗恩病；HIV感染和AIDS；其它病症例如类风湿性关节炎、类风湿性脊椎炎、骨关节炎和其它关节炎状况、感染性休克、败血 症、内毒素性休克、移植物抗宿主病、消瘦、克罗恩病、溃疡性结肠炎、多发性硬化、全身性红斑狼疮、麻风病中的ENL、HIV、AIDS、和AIDS中的机会性感染；cAMP相关病症例如感染性休克、败血症、内毒素性休克、血液动力学性休克和败血症综合症、缺血后再灌注损伤、疟疾、分支杆菌感染、脑膜炎、银屑病、充血性心力衰竭、纤维化疾病、恶病质、移植排斥、致癌的或癌性的状况、哮喘、自体免疫性疾病、辐射损伤和高氧肺泡损伤；病毒感染例如疱疹病毒引起的那些；病毒性结膜炎；或特应性皮炎。
在某些实施方案中，也涵盖了本文提供的化合物在各种免疫学应用中的用途，尤其是作为疫苗佐剂特别是抗癌疫苗佐剂的用途，如在2007年3月1号公开的美国公开号2007/0048327中公开的，其作为参考全文并入本文。本文公开内容的这一方面也涉及提供的化合物与疫苗联合用于治疗或预防癌症或传染性疾病，以及免疫调节化合物的其它各种用途例如过敏反应的减轻或脱敏。
取决于待治疗的状况、病症或疾病，以及个体的情况，本文提供的化合物可以通过口服、肠胃外(例如肌肉内、腹膜内、静脉内、ICV、脑池内注射或注入、皮下注射、或植入)、吸入、鼻、阴道、直肠、舌下、和/或局部(例如透皮或局部)施用路线施用，而且可以单独地或与药学上可接受的运载体、载体、稀释剂、赋形剂、或其混合物一起，配制成适合各个施用途径的合适的剂量单位。
剂量可以是每天以适当间隔施用的一个、两个、三个、四个、五个、六个或更多个亚剂量的形式。剂量或亚剂量可以用剂量单位形式施用，每剂量单位包含约0.1到约1,000mg、约0.1到约500mg、或约0.5到约100mg的活性成分，而且如果患者的状况需要，作为替代，剂量可以连续输注施用。
在某些实施方案中，适当的剂量水平是约0.01到约100mg每kg患者体重每天(mg/kg每天)、约0.01到约50mg/kg每天、约0.01到约25mg/kg每天、或约0.05到约10mg/kg每天，其可以以单一或多重剂量施用。合适的剂量水平可以是约0.01到约100mg/kg每天、约0.05到约50mg/kg每天、或约0.1到约10mg/kg每天。在该范围内，剂量可以是约0.01到约0.1、约0.1到约1.0、约1.0到约10、或约10到约50mg/kg每天。
对于口服施用，药物组合物可以作为片剂形式提供，其包含1.0到1,000mg活性成分，特别是约1、约5、约10、约15、约20、约25、约50、约75、约100、约150、约200、约250、约300、约400、约500、约600、约750、约800、约900、和约1,000mg活性成分，以对待治疗的患者进行基于症状的剂量调节。组合物可以以每天1到4次的方案施用，包括每天一次、两次、三次和四次。
但是，将会理解，对任何特定的患者，具体剂量水平和给药频率可以变化，而且将取决于多种因素，包括使用的具体化合物的活性、该化合物的代谢稳定性和起效时长、年龄、体重、总体健康、性别、饮食、施用模式和时间、排泄速率、药物组合、特定状况的严重程度、和宿主正经历的治疗。
4.4第二活性剂
本文提供的化合物也可以与其它治疗剂组合或联合使用，这些治疗剂可用于治疗、预防和/或控制可使用本文提供的化合物的各种疾病或病症。相信某些组合可以在特定类型的疾病或病症、以及与此类疾病或病症相关的状况和症状的治疗中协同起效。本文提供的化合物，包括其单一的对映异构体、对映异构体的混合物、或非对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，也可以起到减轻与某些第二活性剂相关的不良作用的作用，反之亦然。
本文使用的术语“组合”包括超过一种治疗剂的使用。但是，术语“组合”的使用不限制治疗剂对患有状况、病症或病症的个体施用的顺序或路线。第一治疗剂(例如治疗剂，例如本文提供的化合物)可以在向待治疗的个体施用第二治疗剂之前(例如5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1星期、2星期、3星期、4星期、5星期、6星期、8星期、或12星期前)、同时、或之后(例如5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1星期、2星期、3星期、4星期、5星期、6星期、8星期、或12星期后)施用。
对特定活性剂采用的特定施用途径的适合性将取决于活性剂自身(例如其是否可以口服施用而不会在进入血流前分解)和被治疗的疾病。在某些实施方案中，本文提供的化合物的施用途径是口服。在某些实施方案中，本文提供的第二活性药剂或成分的施用途径是如在Physicians'Desk Reference，1755-1760(第56版，2002)中描述的那些。
在一个实施方案中，第二活性剂以约1到约1000mg、约5到约500mg、约10到约350mg、或约50到约200mg的量每天一或两次静脉内或皮下施用。第二活性剂的具体用量将取决于使用的具体药剂、被治疗或控制的疾病类型、疾病的严重程度和阶段、以及本文提供的化合物和同时对患者施用的任何任选的额外活性剂的量。
在某些实施方案中，本文提供了减轻、治疗和/或预防常规治疗相关的不良作用或不期望的作用的方法，常规治疗包括但不限于手术、化疗、放射治疗、激素治疗、生物学治疗和免疫治疗。可以在常规治疗相关的不良作用发生前、发生期间或发生后，对患者施用本文提供的化合物和其它活性成分。
当本文提供的化合物与一种或多种治疗剂同时使用时，可以使用包含本文提供的化合物以及此类其它药剂的药物组合物，但这不是必需的。因此，本文提供的药物组合物包括除了本文提供的化合物以外还包含一种或多种其它治疗剂的药物组合物。
在本文提供的方法和组合物中可以使用一种或多种第二活性成分或药剂。第二活性剂可以是大分子(例如蛋白)或小分子(例如合成的无机的、有机金属的或有机的分子)。
大分子活性剂的实例包括但不限于：造血生长因子、细胞因子、以及单克隆和多克隆抗体。活性剂的具体实例是抗-CD40单克隆抗体(例如SGN-40、赫赛汀、利妥昔单抗)；组蛋白脱乙酰酶抑制剂(例如SAHA和LAQ 824)；热休克蛋白-90抑制剂(例如17-AAG)；胰岛素样生长因子-1受体激酶抑制剂；血管内皮生长因子受体激酶抑制剂(例如PTK787)；胰岛素生长因子受体抑制剂；溶血磷脂酸酰基转移酶抑制剂；IkB激酶抑制剂；p38MAPK抑制剂；EGFR抑制剂(例如吉非替尼和盐酸埃罗替尼)；HER-2抗体(例如曲妥珠单抗(![]()
![]()
)和帕妥珠单抗(OmnitargTM))；VEGFR抗体(例如贝伐单抗(AvastinTM))；VEGFR抑制剂(例如flk-1特异性激酶抑制剂、SU5416和ptk787/zk222584)；P13K抑制剂(例如渥曼青霉素)；C-Met抑制剂(例如PHA-665752)；单克隆抗体(例如利妥昔单抗(![]()
)、托西莫单抗(![]()
)、依决洛单抗(![]()
)和G250)；和抗-TNF-α抗体。小分子活性剂的实例包括但不限于小分子抗癌剂和抗生素(例如克拉霉素)。
可以与本文提供的化合物组合的具体第二活性化合物，取决于待治疗、预防或控制的具体适应症而变化。
例如，为治疗、预防或控制癌症，第二活性剂包括但不限于：司马沙尼；环孢菌素；依那西普；多西环素；硼替佐米；阿西维辛；阿柔比星；盐酸阿考达唑；阿克罗宁；阿多来新；阿地白介素；六甲蜜胺；安波霉素；醋酸阿美蒽醌；安吖啶；阿那曲唑；安曲霉素；门冬酰胺酶；曲林菌素；阿扎胞苷；阿扎替派；阿佐霉素；巴马司他；苯佐替派；比卡鲁胺；盐酸比生群；二甲磺酸双奈法德；比折来新；硫酸博来霉素；布喹那钠；溴匹立明；白消安；放线菌素C；卡普睾酮；卡醋胺；卡贝替姆；卡铂；卡莫司汀；盐酸卡柔比星；卡折来新；西地芬戈；塞来昔布；苯丁酸氮芥；西罗霉素；顺铂；克拉屈滨；甲磺酸克立那托；环磷酰胺；阿糖胞苷；达卡巴嗪；放线菌素D；盐酸柔红霉素；地西他滨；右奥马铂；地扎胍宁；甲磺酸地扎胍宁；地吖醌；多西紫杉醇；多柔比星；盐酸多柔比星；屈洛昔芬；柠檬酸屈洛昔芬；丙酸屈他雄酮；达佐霉素；依达曲沙；盐酸依氟鸟氨酸；依沙芦星；恩洛铂；恩普氨酯；依匹哌啶；盐酸表柔比星；厄布洛唑；盐酸依索比星；雌莫司汀； 雌莫司汀磷酸钠；依他硝唑；依托泊苷；磷酸依托泊苷；氯苯乙嘧胺；盐酸法倔唑；法扎拉滨；芬维A胺；氟尿苷；磷酸氟达拉滨；氟尿嘧啶；氟西他滨；磷喹酮；福司曲星钠；吉西他滨；盐酸吉西他滨；羟基脲；盐酸伊达比星；异环磷酰胺；伊莫福新；异丙铂；依立替康；盐酸依立替康；醋酸兰瑞肽；来曲唑；醋酸亮丙瑞林；盐酸利阿唑；洛美曲索钠；洛莫司汀；盐酸洛索蒽醌；马索罗酚；美登素；盐酸氮芥；醋酸甲地孕酮；醋酸美仑孕酮；美法仑；美诺立尔；巯嘌呤；甲氨蝶呤；甲氨蝶呤钠；氯苯氨啶；美妥替哌；米丁度胺；米托克星；丝裂红素；米托洁林；米托马星；丝裂霉素；米托司培；米托坦；盐酸米托蒽醌；麦考酚酸；诺考达唑；诺拉霉素；奥马铂；奥昔舒仑；紫杉醇；培门冬酶；培利霉素；奈莫司汀；硫酸培洛霉素；培磷酰胺；哌泊溴烷；哌泊舒凡；盐酸吡罗蒽醌；普卡霉素；普洛美坦；卟吩姆钠；泊非霉素；泼尼莫司汀；盐酸丙卡巴肼；嘌罗霉素；盐酸嘌罗霉素；吡唑呋喃菌素；利波腺苷；沙芬戈；盐酸沙芬戈；司莫司汀；辛曲秦；磷乙酰天冬氨酸钠；司帕霉素；盐酸锗螺胺；螺莫司汀；螺铂；链黑菌素；链佐星；磺氯苯脲；他利霉素；替可加兰钠；泰索帝；替加氟；盐酸替洛蒽醌；替莫泊芬；替尼泊苷；替罗昔隆；睾内酪；硫咪嘌呤；硫鸟嘌呤；塞替派；噻唑呋林；替拉扎明；柠檬酸托瑞米芬；醋酸曲托龙；磷酸曲西立滨；三甲曲沙；葡糖醛酸三甲曲沙；曲普瑞林；盐酸妥布氯唑；乌拉莫司汀；乌瑞替派；伐普肽；维替泊芬；硫酸长春碱；硫酸长春新碱；长春地辛；硫酸长春地辛；硫酸长春匹定；硫酸长春甘酯；硫酸长春罗新；酒石酸长春瑞滨；硫酸长春罗定；硫酸长春利定；伏氯唑；折尼铂；净司他丁；和盐酸佐柔比星。
其它第二药剂包括但不限于：20-表-1,25二羟基维生素D3；5-乙炔基尿嘧啶；阿比特龙；阿柔比星；酰基富烯；腺环戊醇；阿多来新；阿地白介素；全TK拮抗剂；六甲蜜胺；氨莫司汀；2,4二氯苯氧乙酸；氨磷汀；氨基乙酰丙酸；氨柔比星；安吖啶；阿那格雷；阿那曲唑；穿心莲内酯；血管生成抑制剂；拮抗剂D；拮抗剂G；安雷利克斯；抗背部化形态发生蛋白-1；抗雄激素，前列腺癌；抗雌激素；抗瘤酮；反义寡核苷酸；甘氨酸阿非迪霉素；凋亡基因调节剂；凋亡调节剂；脱嘌呤核酸；阿糖-CDP-DL-PTBA；精氨酸脱氨酶；9-[2-甲氧基-4-(甲基磺酰基氨基)苯基氨基]-N,5-二甲基-4-吖啶甲酰胺；阿他美坦；阿莫司汀；axinastatin 1；axinastatin 2；axinastatin 3；阿扎司琼；阿扎毒素；重氮酪氨酸；浆果赤霉素III衍生物；巴兰醇(balanol)；巴马司他；BCR/ABL拮抗剂；苯并绿素类；苯甲酰基星孢菌素；β内酰胺衍生物；β-alethine；贝塔克拉霉素(betaclamycin)B；白桦脂酸；bFGF抑制剂；比卡鲁胺；比生群；双氮丙啶基精胺；双奈法德；二枸橼酸环己噻卓酯A；比折来新；布福雷(breflate)；溴匹立明；布度钛；丁硫氨酸亚砜胺；卡泊三醇；PKC抑制剂 calphostin C；喜树碱衍生物；卡培他滨；羧胺-氨基-三唑；羧基酰胺基三唑；CaRest M3；CARN 700；源自软骨的抑制剂；卡折来新；酪蛋白激酶抑制剂(ICOS)；栗精胺；杀菌肽B；西曲瑞克；绿素类；磺酰胺氯喹喔啉；西卡前列素；顺式卟啉；克拉屈滨；氯米芬类似物；克霉唑；考利丝霉素(collismycin)A；考利丝霉素B；考布他汀A4；考布他汀类似物；conagenin；crambescidin 816；克立那托；自念珠藻环肽8；自念珠藻环肽A衍生物；curacin A；环戊蒽醌；环铂(cycloplatam)；赛可霉素(cypemycin)；阿糖胞苷十八烷基磷酸钠；细胞裂解因子；磷酸己烷雌酚；达昔单抗；地西他滨；脱氢膜海鞘素(dehydrodidemnin)B；地洛瑞林；地塞米松；右异环磷酰胺；右雷佐生；右维拉帕米；地吖醌；膜海鞘素B；3,4-二羟基苯并氧肟酸(didox)；二乙基去甲精胺；二氢-5-氮杂胞苷；二氢紫杉醇；dioxamycin；二苯基螺莫司汀；多西紫杉醇；二十二烷醇；多拉司琼；去氧氟尿苷；多柔比星；屈洛昔芬；屈大麻酚；多卡霉素(duocarmycin)SA；依布硒；依考莫司汀；依地福新；依决洛单抗；依氟鸟氨酸；榄香烯；乙嘧替氟；表柔比星；依立雄胺；雌莫司汀类似物；雌激素激动剂；雌激素拮抗剂；依他硝唑；磷酸依托泊苷；依西美坦；法倔唑；法扎拉滨；芬维A胺；非格司亭；非那雄胺；夫拉平度；氟卓斯汀；荧蒽固酮；氟达拉滨；盐酸氟道诺霉素；福酚美克；福美坦；福司曲星；福莫司汀；得克萨菲啉钆；硝酸镓；加洛他滨；加尼瑞克；明胶酶抑制剂；吉西他滨；谷胱甘肽抑制剂；氨基磺酸1,7庚烷二基酯；调蛋白(heregulin)；六亚甲基二乙酰胺；金丝桃素；伊班膦酸；伊达比星；艾多昔芬；伊决孟酮；伊莫福新；伊洛马司他；伊马替尼(![]()
)；咪喹莫特；免疫刺激肽；胰岛素样生长因子-1受体抑制剂；干扰素激动剂；干扰素；白细胞介素；碘苄胍；碘多柔比星；甘薯苦醇，4-；伊罗普拉；伊索拉定；异邦格唑(isobengazole)；isohomohalicondrin B；伊他司琼；促微丝聚合剂(jasplakinolide)；kahalalide F；三乙酸片螺素-N；兰瑞肽；雷那霉素(leinamycin)；来格司亭；硫酸香菇多糖；leptolstatin；来曲唑；白血病抑制因子；白细胞α干扰素；亮丙瑞林+雌激素+孕酮；亮丙瑞林；左旋咪唑；利阿唑；直链聚胺类似物；亲油的二糖肽；亲油的铂化合物；lissoclinamide7；洛铂；蚯蚓磷脂；洛美曲索；氯尼达明；洛索蒽醌；洛索立宾；勒托替康；得克萨菲啉镥；1-((R)-5-羟基己基)可可碱；裂解肽；美坦新；制甘糖霉素(mannostatin)A；马立马司他；马索罗酚；乳腺丝抑蛋白；基质溶解素抑制剂；基质金属蛋白酶抑制剂；美诺立尔；美巴龙；美替瑞林；蛋氨酸酶；甲氧氯普胺；MIF抑制剂；米非司酮；米替福新；米立司亭；米托胍腙；二溴卫矛醇；丝裂霉素类似物；米托萘胺；mitotoxin成纤维细胞生长因子-皂草素；米托蒽醌；莫法罗汀；莫拉司亭；爱必妥，人绒毛膜促性腺激素；单磷酰基脂质A+分支杆菌细胞壁sk；莫哌达醇；芥类抗癌剂；印度洋海绵(mycaperoxide) B；分枝杆菌细胞壁提取物；myriaporone；N-乙酰基地那林；N-取代的苯甲酰胺；那法瑞林；nagrestip；纳洛酮+喷他佐辛；napavin；萘萜二醇；那托司亭；奈达铂；奈莫柔比星；奈立膦酸；尼鲁米特；尼沙霉素(nisamycin)；一氧化氮调节剂；硝基氧抗氧化剂；nitrullyn；奥利默森(![]()
)；O6-苄基鸟嘌呤；奥曲肽；okicenone；寡核苷酸；奥那司酮；昂丹司琼；昂丹司琼；oracin；口服的细胞因子诱导剂；奥马铂；奥沙特隆；奥沙利铂；奥克萨霉素(oxaunomycin)；紫杉醇；紫杉醇类似物；紫杉醇衍生物；palauamine；棕榈酰根瘤菌素；帕米膦酸；人参三醇；帕诺米芬；六配位儿茶胺铁螯合剂副菌铁素；帕折普汀；培门冬酶；培得星；木聚硫钠；喷司他丁；pentrozole；全氟溴烷；培磷酰胺；紫苏醇；苯连氮霉素；乙酸苯酯；磷酸酶抑制剂；溶链菌；盐酸匹鲁卡品；吡柔比星；吡曲克辛；placetin A；placetin B；纤溶酶原激活物抑制剂；铂复合物；铂化合物；铂-三胺复合物；卟吩姆钠；泊非霉素；泼尼松；丙基二-吖啶酮；前列腺素J2；蛋白酶体抑制剂；基于蛋白A的免疫调节剂；蛋白激酶C抑制剂；蛋白激酶C抑制剂，微藻；蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂；嘌呤核苷磷酸化酶抑制剂；羟基茜草素；吡唑啉吖啶；血红蛋白吡醇羟乙酯聚氧乙烯共轭物；raf拮抗剂；雷替曲塞；雷莫司琼；ras法呢基蛋白转移酶抑制剂；ras抑制剂；ras-GAP抑制剂；去甲基瑞替普汀；依替膦酸铼Re186；根瘤菌素；核酶；RII维A胺；罗希吐碱；罗莫肽；罗喹美克；rubiginone B1；ruboxyl；沙芬戈；saintopin；SarCNU；肌肉叶绿醇(sarcophytol)A；沙格司亭；Sdi 1模仿物；司莫司汀；源自衰老的抑制剂1；正义寡核苷酸；信号转导抑制剂；西佐喃；索布佐生；硼卡钠；苯乙酸钠；solverol；生长调节素结合蛋白；索纳明；膦门冬酸；穗霉素D；螺莫司汀；脾脏五肽；CD-螺环缩酮前体δ-内酯1；角鲨胺；stipiamide；基质分解素抑制剂；sulfinosine；强效的血管活性肠肽拮抗剂；suradista；苏拉明；苦马豆碱；他莫司汀；他莫昔芬甲碘化物；牛磺莫司汀；他扎罗汀；替可加兰钠；替加氟；tellurapyrylium；端粒酶抑制剂；替莫泊芬；替尼泊苷；十氧化四氯；四氮胺(tetrazomine)；唐松草碱；噻可拉林；血小板生成素；血小板生成素模仿物；胸腺法新；胸腺生成素受体激动剂；胸腺曲南；促甲状腺激素；乙基锡初紫红素；替拉扎明；二氯环戊二烯钛；topsentin；托瑞米芬；转译抑制剂；维A酸；三乙酰基尿苷；曲西立滨；三甲曲沙；曲普瑞林；托烷司琼；妥罗雄脲；酪氨酸激酶抑制剂；酪氨酸磷酸化抑制剂；UBC抑制剂；乌苯美司；源自泌尿生殖窦的生长抑制因子；尿激酶受体拮抗剂；伐普肽；variolin B；维拉雷琐；藜芦胺；verdins；维替泊芬；长春瑞滨；长春磷汀；维他辛(vitaxin)；伏氯唑；扎诺特隆；折尼铂；亚苄维C；和净司他丁斯酯。
具体的第二活性剂包括但不限于：2-甲氧基雌二醇、telomestatin、多发性 骨髓瘤细胞中的凋亡诱导剂(例如TRAIL)、他汀类、司马沙尼、环孢菌素、依那西普、多西环素、硼替佐米、奥利默森(![]()
)、英利昔单抗、多西紫杉醇、塞来昔布、美法仑、地塞米松(![]()
)、类固醇、吉西他滨、顺铂、替莫唑胺、依托泊苷、环磷酰胺、替莫唑胺、卡铂、丙卡巴肼、卡氮芥、他莫昔芬、拓扑替康、甲氨蝶呤、![]()
泰素、泰索帝、氟尿嘧啶、甲酰四氢叶酸、依立替康、希罗达、CPT-11、干扰素α、聚乙二醇干扰素α(例如PEG INTRON-A)、卡培他滨、顺铂、塞替派、氟达拉滨、卡铂、脂质体柔红霉素、阿糖胞苷、紫杉特尔、紫杉醇、长春碱、IL-2、GM-CSF、达卡巴嗪、长春瑞滨、唑来膦酸、十六烷膦酸(palmitronate)、克拉霉素、白消安、泼尼松、双磷酸盐、三氧化二砷、长春新碱、多柔比星(![]()
)、紫杉醇、更昔洛韦、阿霉素、雌莫司汀磷酸钠(![]()
)、舒林酸、和依托泊苷。
类似地，根据待治疗、预防或控制的适应症，具体第二药剂的实例可以在下列参考文献中找到，其全部全文并入本文：美国专利号6,281,230和5,635,517；美国申请号10/411,649、10/483,213、10/411,656、10/693,794、10/699,154和10/981,189；以及美国临时申请号60/554,923、60/565,172、60/626,975、60/630,599、60/631,870和60/533,862。
可用于治疗、预防和/或控制疼痛的第二活性剂的实例，包括但不限于用于治疗或预防疼痛的常规治疗剂，例如抗抑郁剂、抗痉挛剂、抗高血压剂、抗焦虑剂、钙通道阻断剂、肌肉松弛剂、非麻醉性镇痛剂、阿片类镇痛剂、抗炎剂、cox-2抑制剂、免疫调节剂、α-肾上腺素受体激动剂或拮抗剂、免疫抑制剂、皮质类固醇、高压氧、氯胺酮、其它麻醉剂、NMDA拮抗剂、以及在例如Physician's Desk Reference 2003中找到的其它治疗剂。具体实例包括但不限于：乙酰水杨酸(![]()
）、塞来昔布(![]()
)、![]()
氯胺酮、加巴喷丁(![]()
)、苯妥英(![]()
)、卡马西平(![]()
)、奥卡西平(![]()
)、丙戊酸(![]()
)、硫酸吗啡、氢吗啡酮、泼尼松、灰黄霉素、溴戊双铵、阿仑膦酸盐、dyphenhydramide、胍乙啶、酮咯酸(![]()
)、降钙素、二甲基亚砜(DMSO)、可乐定(![]()
)、溴苄胺、酮舍林、利血平、氟哌利多、阿托品、酚妥拉明、布比卡因、利多卡因、对乙酰氨基酚、去甲替林(![]()
)、阿米替林(![]()
)、丙咪嗪(![]()
)、多塞平(![]()
)、氯米帕明(![]()
)、氟西汀(![]()
)、舍曲林(![]()
)、萘法唑酮(![]()
)、文拉法辛(![]()
)、曲唑酮(![]()
)、安非他酮(![]()
)、美西律、硝苯地平、普萘洛尔、曲马多、拉莫三嗪、齐考诺肽、氯胺酮、右美沙芬、苯二氮卓类、巴氯芬、替扎尼定和酚苄明。
可用于治疗、预防和/或控制MD和相关综合症的第二活性剂的实例，包括但不限于：类固醇、光敏化剂、整联蛋白、抗氧化剂、干扰素、黄嘌呤衍 生物、生长激素、神经营养因子、新生血管形成调节剂、抗-VEGF抗体、前列腺素、抗生素、植物雌激素、抗炎化合物或抗血管生成化合物、或其组合。具体实例包括但不限于：维替泊芬、purlytin、抑制血管生成的类固醇、rhuFab、干扰素-2α、己酮可可碱、锡初紫红素、莫特沙芬镥、9-氟-11,21-二羟基-16,17-1-甲基亚乙基双(氧)孕-1,4-二烯-3,20-二酮、拉坦前列素(参见美国专利号6,225,348)、四环素及其衍生物、利福霉素及其衍生物、大环内酯、甲硝唑(美国专利号6,218,369和6,015,803)、染料木素、染料木苷、6'-O-Mal染料木苷、6'-O-Ac染料木苷、黄豆苷元、黄豆苷、6'-O-Mal黄豆苷、6'-O-Ac黄豆苷、黄豆黄素、黄豆黄苷、6'-O-Mal黄豆黄苷、鹰嘴豆素A、芒柄花黄素(美国专利号6,001,368)、曲安奈德、地塞米松(美国专利号5,770,589)、沙利度胺、谷胱甘肽(美国专利号5,632,984)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、转化生长因子b(TGF-b)、脑源神经营养因子(BDNF)、纤溶酶原激活物因子2型(PAI-2)、EYE101(Eyetech Pharmaceuticals)、LY333531(Eli Lilly)、Miravant、和RETISERT植入物(Bausch & Lomb)。上面引用的所有参考文献作为参考全文并入本文。
可用于治疗、预防和/或控制皮肤疾病的第二活性剂的实例，包括但不限于：角质层分离剂、类维生素A、α-羟基酸、抗生素、胶原、肉毒杆菌毒素、干扰素、和免疫调节剂。具体实例包括但不限于：5-氟尿嘧啶、马索罗酚、三氯乙酸、水杨酸、乳酸、乳酸铵、尿素、维A酸、异维A酸、抗生素、胶原、肉毒杆菌毒素、干扰素、皮质类固醇、反式视黄酸、和胶原例如人胎盘胶原、动物胎盘胶原、真皮胶原、人工真皮、Fascia、Cymetra、自体胶原、Zyderm、Zyplast、Resoplast、和Isolagen。
可用于治疗、预防和/或控制肺动脉高压和相关病症的第二活性剂的实例，包括但不限于：抗凝血剂、利尿剂、强心苷、钙通道阻断剂、血管扩张剂、前列环素类似物、内皮素拮抗剂、磷酸二酯酶抑制剂(例如PDE V抑制剂)、肽链内切酶抑制剂、降脂剂、凝血噁烷抑制剂、和已知降低肺动脉压的其它治疗剂。具体实例包括但不限于：华法林(![]()
)、利尿剂、强心苷、地高辛-氧、地尔硫卓、硝苯地平、血管扩张剂例如前列环素(例如前列腺素I2(PGI2)、依前列醇(EPO，![]()
)、曲前列环素(![]()
)、一氧化氮(NO)、波生坦(![]()
)、氨氯地平、依前列醇(![]()
)、曲前列环素(![]()
)、前列环素、他达拉非(![]()
)、辛伐他汀(![]()
)、奥马屈拉(![]()
)、厄贝沙坦(![]()
)、普伐他汀(![]()
)、地高辛、L-精氨酸、伊洛前列素、贝前列素、和西地那非(![]()
)。
可用于治疗、预防和/或控制石棉相关病症的第二活性剂的实例，包括但不限于：蒽环霉素、铂、烷化剂、奥利默森(![]()
)、顺铂、环磷酰胺、 替莫唑胺、卡铂、丙卡巴肼、卡氮芥、他莫昔芬、拓扑替康、甲氨蝶呤、泰索帝、依立替康、卡培他滨、顺铂、塞替派、氟达拉滨、卡铂、脂质体柔红霉素、阿糖胞苷、紫杉特尔、紫杉醇、长春碱、IL-2、GM-CSF、达卡巴嗪、长春瑞滨、唑来膦酸、十六烷膦酸(palmitronate)、克拉霉素、白消安、泼尼松、双磷酸盐、三氧化二砷、长春新碱、多柔比星(![]()
)、紫杉醇、更昔洛韦、阿霉素、博来霉素、透明质酸酶、丝裂霉素C、米帕林、塞替派、四环素和吉西他滨。
可用于治疗、预防和/或控制寄生虫病的第二活性剂的实例，包括但不限于：氯喹、奎宁、奎尼丁、乙胺嘧啶、磺胺嘧啶、多西环素、克林霉素、甲氟喹、卤泛群、伯氨喹、羟氯喹、氯胍、阿托伐醌、阿奇霉素、苏拉明、喷他脒、美拉胂醇、硝呋替莫、苄硝唑、两性霉素B、五价锑化合物(例如葡糖醛酸锑钠)、干扰素γ、伊曲康唑、死亡前鞭毛体和BCG的组合、甲酰四氢叶酸、皮质类固醇、磺酰胺、螺旋霉素、IgG(血清学)、甲氧苄啶、和磺胺甲噁唑。
可用于治疗、预防和/或控制免疫缺陷病症的第二活性剂的实例，包括但不限于：抗生素(治疗或预防的)，例如但不限于氨苄青霉素、克拉霉素、四环素、青霉素、头孢菌素类、链霉素、卡那霉素和红霉素；抗病毒剂，例如但不限于金刚烷胺、金刚乙胺、阿昔洛韦和利巴韦林；免疫球蛋白；血浆；免疫增强药物，例如但不限于左旋咪唑和异丙肌苷；生物制剂，例如但不限于γ球蛋白、转移因子、白细胞介素和干扰素；激素例如但不限于胸腺激素；以及其它免疫学药剂，例如但不限于B细胞刺激剂(例如BAFF/BlyS)、细胞因子(例如IL-2、IL-4和IL-5)、生长因子(例如TGF-α)、抗体(例如抗-CD40和IgM)、包含未甲基化的CpG基序的寡核苷酸、和疫苗(例如病毒和肿瘤肽疫苗)。
可用于治疗、预防和/或控制CNS病症的第二活性剂的实例，包括但不限于：多巴胺激动剂或拮抗剂，例如但不限于左旋多巴、L-DOPA、可卡因、α-甲基-酪氨酸、利血平、丁苯那嗪、苯托品、帕吉林、甲磺酸非诺多泮、卡麦角林、二盐酸普拉克索、罗匹尼罗、盐酸金刚烷胺、盐酸司来吉兰、卡比多巴、甲磺酸培高利特、息宁控释片、和金刚烷胺；MAO抑制剂，例如但不限于异烟酰异丙肼、氯吉兰、苯乙肼和异卡波肼；COMT抑制剂，例如但不限于托卡朋和恩他卡朋；胆碱酯酶抑制剂，例如但不限于水杨酸毒扁豆碱、硫酸毒扁豆碱、溴毒扁豆碱、溴新斯的明、甲基硫酸新斯的明、安贝氯铵、依酚氯铵、他克林、氯解磷定、双复磷、溴双解磷、丁酮肟、endrophonium、吡斯的明、和地美溴铵；抗炎剂，例如但不限于萘普生钠、双氯芬酸钠、双氯芬酸钾、塞来昔布、舒林酸、奥沙普嗪、二氟尼柳、依托度酸、美洛昔康、布洛芬、酮洛芬、萘丁美酮、罗非昔布、甲氨蝶呤、来氟米特、柳氮磺吡啶、 金盐、Rho-D免疫球蛋白、麦考酚酸吗乙酯、环孢菌素、硫唑嘌呤、他克莫司、巴利昔单抗、达珠单抗、水杨酸、乙酰水杨酸、水杨酸甲酯、二氟尼柳、双水杨酯、奥沙拉嗪、柳氮磺吡啶、对乙酰氨基酚、吲哚美辛、舒林酸、甲芬那酸、甲氯灭酸钠、托美丁、酮咯酸、双氯芬酸、氟比洛芬、奥沙普嗪、吡罗昔康、美洛昔康、安吡昔康、屈噁昔康、吡渥昔康(pivoxicam)、替诺昔康、保泰松、羟布宗、安替比林、氨基比林、阿扎丙宗、齐留通、金硫葡糖、金硫丁二钠、金诺芬、甲氨蝶呤、秋水仙碱、别嘌醇、丙磺舒、磺吡酮和苯溴马隆、或倍他米松和其它糖皮质激素；和止吐剂，例如但不限于甲氧氯普胺、多潘立酮、丙氯拉嗪、异丙嗪、氯丙嗪、曲美苄胺、昂丹司琼、格拉司琼、羟嗪、乙酰亮氨酸单乙醇胺、阿立必利、阿扎司琼、苯喹胺、氨醇醋茶碱、溴必利、布克力嗪、氯波必利、赛克力嗪、茶苯海明、地芬尼多、多拉司琼、美克洛嗪、美沙拉妥、美托哌丙嗪、大麻隆、奥昔喷地、匹哌马嗪、东莨菪碱、舒必利、四氢大麻酚、硫乙拉嗪、硫丙拉嗪、托烷司琼、及其混合物。
可用于治疗、预防和/或控制CNS损伤和相关综合症的第二活性剂的实例，包括但不限于：免疫调节剂、免疫抑制剂、抗高血压剂、抗痉挛剂、纤维蛋白溶解剂、抗血小板剂、抗精神病剂、抗抑郁剂、苯二氮卓类、丁螺环酮、金刚烷胺、和用于患有CNS损伤/损害和相关综合症的患者的其它已知或常规药剂。具体实例包括但不限于：类固醇(例如糖皮质激素，例如但不限于甲泼尼龙、地塞米松和倍他米松)；抗炎剂，包括但不限于萘普生钠、双氯芬酸钠、双氯芬酸钾、塞来昔布、舒林酸、奥沙普嗪、二氟尼柳、依托度酸、美洛昔康、布洛芬、酮洛芬、萘丁美酮、罗非昔布、甲氨蝶呤、来氟米特、柳氮磺吡啶、金盐、RHo-D免疫球蛋白、麦考酚酸吗乙酯、环孢菌素、硫唑嘌呤、他克莫司、巴利昔单抗、达珠单抗、水杨酸、乙酰水杨酸、水杨酸甲酯、二氟尼柳、双水杨酯、奥沙拉嗪、柳氮磺吡啶、对乙酰氨基酚、吲哚美辛、舒林酸、甲芬那酸、甲氯灭酸钠、托美丁、酮咯酸、双氯芬酸、氟比洛芬、奥沙普嗪、吡罗昔康、美洛昔康、安吡昔康、屈噁昔康、吡渥昔康、替诺昔康、保泰松、羟布宗、安替比林、氨基比林、阿扎丙宗、齐留通、金硫葡糖、金硫丁二钠、金诺芬、甲氨蝶呤、秋水仙碱、别嘌醇、丙磺舒、磺吡酮和苯溴马隆；cAMP类似物，包括但不限于db-cAMP；包含哌甲酯药物的药剂，其包括l-苏式-哌甲酯、d-苏式-哌甲酯、dl-苏式-哌甲酯、l-赤式-哌甲酯、d-赤式-哌甲酯、dl-赤式-哌甲酯、及其混合物；和利尿剂，例如但不限于甘露醇、呋塞米、甘油和尿素。
可用于治疗、预防和/或控制睡眠功能障碍和相关综合症的第二活性剂的实例，包括但不限于：三环抗抑郁剂、选择性血清素再摄取抑制剂、抗癫痫剂(加巴喷丁、普瑞巴林、卡马西平、奥卡西平、左乙拉西坦、托吡酯)、抗心 律失常剂、钠通道阻断剂、选择性炎症介质抑制剂、阿片类药剂、第二免疫调节化合物、组合药剂、和用于睡眠治疗的其它已知或常规药剂。具体实例包括但不限于：加巴喷丁、奥施康定、吗啡、托吡酯、阿米替林、去甲替林、卡马西平、左旋多巴、L-DOPA、可卡因、α-甲基-酪氨酸、利血平、丁苯那嗪、苯托品、帕吉林、甲磺酸非诺多泮、卡麦角林、二盐酸普拉克索、罗匹尼罗、盐酸金刚烷胺、盐酸司来吉兰、卡比多巴、甲磺酸培高利特、息宁控释片、金刚烷胺、异烟酰异丙肼、氯吉兰、苯乙肼、异卡波肼、托卡朋、恩他卡朋、水杨酸毒扁豆碱、硫酸毒扁豆碱、溴毒扁豆碱、溴新斯的明、甲基硫酸新斯的明、安贝氯铵、依酚氯铵、他克林、氯解磷定、双复磷、溴双解磷、丁酮肟、endrophonium、吡斯的明、地美溴铵、萘普生钠、双氯芬酸钠、双氯芬酸钾、塞来昔布、舒林酸、奥沙普嗪、二氟尼柳、依托度酸、美洛昔康、布洛芬、酮洛芬、萘丁美酮、罗非昔布、甲氨蝶呤、来氟米特、柳氮磺吡啶、金盐、RHo-D免疫球蛋白、麦考酚酸吗乙酯、环孢菌素、硫唑嘌呤、他克莫司、巴利昔单抗、达珠单抗、水杨酸、乙酰水杨酸、水杨酸甲酯、二氟尼柳、双水杨酯、奥沙拉嗪、柳氮磺吡啶、对乙酰氨基酚、吲哚美辛、舒林酸、甲芬那酸、甲氯灭酸钠、托美丁、酮咯酸、双氯芬酸、氟比洛芬、奥沙普嗪、吡罗昔康、美洛昔康、安吡昔康、屈噁昔康、吡渥昔康、替诺昔康、保泰松、羟布宗、安替比林、氨基比林、阿扎丙宗、齐留通、金硫葡糖、金硫丁二钠、金诺芬、甲氨蝶呤、秋水仙碱、别嘌醇、丙磺舒、磺吡酮、苯溴马隆、倍他米松和其它糖皮质激素、甲氧氯普胺、多潘立酮、丙氯拉嗪、异丙嗪、氯丙嗪、曲美苄胺、昂丹司琼、格拉司琼、羟嗪、乙酰亮氨酸单乙醇胺、阿立必利、阿扎司琼、苯喹胺、氨醇醋茶碱、溴必利、布克力嗪、氯波必利、赛克力嗪、茶苯海明、地芬尼多、多拉司琼、美克洛嗪、美沙拉妥、美托哌丙嗪、大麻隆、奥昔喷地、匹哌马嗪、东莨菪碱、舒必利、四氢大麻酚、硫乙拉嗪、硫丙拉嗪、托烷司琼、及其混合物。
可用于治疗、预防和/或控制血红蛋白病和相关病症的第二活性剂的实例，包括但不限于：白细胞介素，例如IL-2(包括重组的IL-II(“rIL2”)和金丝雀痘IL-2)、IL-10、IL-12和IL-18；干扰素，例如干扰素α-2a、干扰素α-2b、干扰素α-n1、干扰素α-n3、干扰素β-I a和干扰素γ-I b；和G-CSF；羟基脲；丁酸酯或丁酸酯衍生物；一氧化二氮；HEMOXINTM(NIPRISANTM；参见美国专利号5,800,819)；Gardos通道拮抗剂，例如克霉唑和三芳基甲烷衍生物；去铁胺；蛋白C；和输血或输入血液代用品例如HemospanTM或HemospanTMPS(Sangart)。
给予的剂量将取决于药物的吸收、失活和排泄速率，以及本领域技术人员已知的其它因素。应注意到，剂量值还将随着待缓解的状况的严重程度而 变化。应进一步理解，对任何特定的个体，具体给药方案和时间表应当依照个体需求和施用或监督组合物施用的人的专业判断，随时间而调节。
本文提供的化合物与第二活性成分的重量比，取决于各成分的有效剂量。一般地，将使用各自的有效剂量。因此，举例来说，当本文提供的化合物与PPAR激动剂联合时，本文提供的化合物与PPAR激动剂的重量比的一般范围是约1000:1到约1:1000或约200:1到约1:200。本文提供的化合物和其它活性成分的组合，一般也将处于前述范围内，但是在所有情况下，应当使用各活性成分的有效剂量。
4.5循环治疗
在某些实施方案中，对患者循环施用本文提供的预防或治疗剂。循环治疗包括施用活性剂一段时间，接着停止一段时间，并重复该顺序施用。循环治疗可以减轻对一种或多种治疗发展的耐受性，避免或减轻其中一种治疗的副作用，和/或改善治疗的功效。
在某些实施方案中，本文提供的化合物在四到六星期的循环中，以单一剂量或分开的剂量每天施用，伴有约一星期或两星期的停药期。本文的公开内容进一步允许增加给药循环的频率、次数和长度。在某些实施方案中，以比其单独施用时的典型次数更多的循环，施用本文提供的化合物。在某些实施方案中，本文提供的化合物被施用了更多个循环，该循环次数在未同时施用第二活性成分的患者中，通常会引起剂量限制性毒性。
在一个实施方案中，本文提供的化合物以每天约0.1mg到约500mg的剂量每天且连续施用三或四星期，接着中止一或两星期。在其它实施方案中，剂量可以是约1mg到约300mg、约0.1mg到约150mg、约1mg到约200mg、约10mg到约100mg、约0.1mg到约50mg、约1mg到约50mg、约10mg到约50mg、约20mg到约30mg、或约1mg到约20mg，随后中止。
在一个实施方案中，在四到六星期循环期间，口服施用本文提供的化合物和第二活性成分，本文提供的化合物在第二活性成分之前30到60分钟施用。在另一个实施方案中，在每个循环中，本文提供的化合物和第二活性成分的组合通过静脉内注入在约90分钟内施用。在某些实施方案中，向患者施用联合治疗的循环次数是约1到约24个循环、约2到约16个循环、或约四到约三个循环。
4.6药物组合物和剂型
药物组合物可用于制备独立的单一单位剂型。本文提供的药物组合物和剂型包含本文提供的化合物，或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体或前药。本文提供的药物组合物和剂型可以进一步包含一种或多种赋形剂。
本文提供的药物组合物和剂型还可以包含一种或多种额外活性成分。在 上面4.4部分中公开了任选的第二或额外活性成分的实例。
本文提供的单一单位剂型适合对患者口服、粘膜(例如鼻、舌下、阴道、口腔或直肠)、肠胃外(例如皮下、静脉内、推注、肌肉内或动脉内)、表面(例如滴眼液或其它眼科制剂)、透皮或经皮施用。剂型的实例包括但不限于：片剂；囊片；胶囊例如弹性软明胶胶囊；扁囊剂；糖锭；锭剂；分散剂；栓剂；粉剂；气溶胶(例如鼻喷雾剂或吸入剂)；凝胶；适合对患者口服或粘膜施用的液体剂型，包括悬浮液(例如水性或非水性液体悬浮液、水包油乳液、或油包水液体乳剂)、溶液和酏剂；适合对患者肠胃外施用的液体剂型；适合局部施用的滴眼液或其它眼科制剂；和无菌固体(例如结晶或无定形固体)，其可以被重配以提供适合对患者肠胃外施用的液体剂型。
本文提供的剂型的组成、形状和类型，将典型地取决于其用途而变化。例如，和用于同一疾病的慢性治疗的剂型相比，用于疾病的急救治疗的剂型可以包含更大量的一种或多种活性成分。类似地，和用于治疗同一疾病的口服剂型相比，肠胃外剂型可以包含更少量的一种或多种活性成分。本文的公开内容所包含的具体剂型的相互变化的各种方式对本领域技术人员将是显而易见的。参见例如，Remington's Pharmaceutical Sciences，第18版，Mack Publishing，Easton PA(1990)。
在某些实施方案中，本文提供的药物组合物和剂型包含一种或多种赋形剂。合适的赋形剂是制药领域技术人员熟知的，而且本文提供了合适的赋形剂的非限制性实例。特定赋形剂是否适合掺入药物组合物或剂型，取决于本领域熟知的多种因素，包括但不限于将剂型施用于患者的方式。例如，口服剂型例如片剂可以包含不适合在肠胃外剂型中使用的赋形剂。特定赋形剂的适合性也可以取决于剂型中的具体活性成分。例如，一些活性成分的分解可以被一些赋形剂例如乳糖加速，或当暴露于水时加速。包含伯胺或仲胺的活性成分特别易于发生此类加速分解。因此，本文的公开内容涵盖了含有极少的(如果含有的话)乳糖和其它单糖或二糖的药物组合物和剂型。本文使用的术语“不含乳糖”指存在的乳糖量(如果存在的话)不足以显著增加活性成分的降解速率。
本文提供的不含乳糖的组合物可以包含本领域熟知的和在例如美国药典(USP)25-NF20(2002)中列出的赋形剂。一般而言，不含乳糖的组合物包含药学上相容且药学上可接受量的活性成分、粘合剂/填充剂、以及润滑剂。在某些实施方案中，本文提供的不含乳糖的剂型包含活性成分、微晶纤维素、预胶化淀粉、和硬脂酸镁。
因为水可以促进一些化合物的降解，本文的公开内容进一步涵盖了包含活性成分的无水药物组合物和剂型。例如，为了确定例如保质期或制剂随时 间的稳定性等特性，加水(例如5％)是药学领域广泛接受的模拟长期贮存的手段。参见例如，Jens T.Carstensen，Drug Stability:Principles & Practice，第2版，Marcel Dekker，NY，NY，1995，379-80页。实际上，水和热量加速一些化合物的分解。因此，水对制剂的作用可以具有重要意义，因为在制剂的制造、处理、包装、贮存、运输和使用期间经常会遇到水分和/或湿气。
本文提供的无水药物组合物和剂型可以使用无水的或低水分含量的成分，在低水分或低湿度条件下制备。在某些实施方案中，如果预期在制造、包装和/或贮存期间与水分和/或湿气会有实质性接触，那么包含乳糖和至少一种含有伯胺或仲胺的活性成分的药物组合物和剂型是无水的。
应该制备和贮存无水药物组合物使其无水性质被保持。在某些实施方案中，使用已知防止暴露于水的材料包装无水组合物，使得它们可以被包含在合适的配方试剂盒中。合适的包装的实例包括但不限于密封铝箔、塑料、单位剂量容器(例如小瓶)、泡罩包装和条带包装。
本文的公开内容进一步涵盖了药物组合物和剂型，其包含一种或多种降低活性成分分解速率的化合物。此类化合物在本文中被称作“稳定剂”，其包括但不限于抗氧化剂例如抗坏血酸、pH缓冲剂或盐缓冲剂。和赋形剂的量和类型一样，剂型中活性成分的量和具体类型可以取决于各种因素而不同，例如但不限于向患者施用的途径。在某些实施方案中，本文提供的剂型包含含量约0.10到约500mg的本文提供的化合物。在某些实施方案中，本文提供的剂型包含含量约0.1、1、2、5、7.5、10、12.5、15、17.5、20、25、50、100、150、200、250、300、350、400、450或500mg的本文提供的化合物。
在某些实施方案中，剂型包含的第二活性成分的量是1到约1000mg、约5到约500mg、约10到约350mg、或约50到约200mg。当然，第二活性剂的具体用量将取决于使用的具体药剂、被治疗或控制的疾病类型、以及本文提供的化合物和同时对患者施用的任何任选的额外活性剂的量。
4.6.1口服剂型
适合口服施用的本文提供的药物组合物可以作为离散剂型存在，例如但不限于片剂(例如咀嚼片剂)、囊片、胶囊和液体(例如调味糖浆)。此类剂型包含预定量的活性成分，而且可以通过本领域技术人员熟知的制药方法制备。一般参见Remington's Pharmaceutical Sciences，第18版，Mack Publishing，Easton PA(1990)。
在某些实施方案中，通过将活性成分与至少一种赋形剂依照常规药学混合技术充分混合，来制备本文提供的口服剂型。根据施用所需的制剂形式，赋形剂可以具有多种形式。例如，适用于口服液体或气溶胶剂型的赋形剂，包括但不限于水、乙二醇、油、醇、调味剂、防腐剂和着色剂。适用于固体 口服剂型(例如粉剂、片剂、胶囊和囊片)的赋形剂的实例，包括但不限于淀粉、糖、微晶纤维素、稀释剂、造粒剂、润滑剂、粘合剂和崩解剂。因为其施用方便，使用固体赋形剂的片剂和胶囊代表了最有利的口服剂量单位形式。如果需要，片剂可以通过标准的水性或非水性技术包衣。此类剂型可以通过任何制药方法制备。一般而言，通过将活性成分与液体载体、精细固体载体、或两者均匀充分地混合来制备药物组合物和剂型，然后如果有必要的话，把产品制成所需的形状。
例如，可以通过压制或模制来制备片剂。可以通过在合适的机器中压制任选地与赋形剂混合的处于自由流动形式(例如粉末或颗粒)的活性成分来制备压制的片剂。可以通过在合适的机器中模制被惰性液体稀释剂润湿的粉末化合物的混合物来制备模制的片剂。
可以用于本文提供的口服剂型的赋形剂的实例，包括但不限于粘合剂、填充剂、崩解剂和润滑剂。适用于药物组合物和剂型的粘合剂，包括但不限于玉米淀粉、土豆淀粉、或其它淀粉、明胶、天然和合成的胶例如阿拉伯树胶、藻酸钠、藻酸、其它藻酸盐、粉末黄蓍胶、瓜尔豆胶、纤维素及其衍生物(例如乙基纤维素、醋酸纤维素、羧甲基纤维素钙、羧甲基纤维素钠)、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纤维素、预胶化淀粉、羟丙甲基纤维素(例如2208、2906、2910号)、微晶纤维素、及其混合物。
微晶纤维素的合适形式，包括但不限于作为AVICEL-PH-101、AVICEL-PH-103、AVICEL RC-581、AVICEL-PH-105(可从FMC Corporation，American Viscose Division，Avicel Sales，Marcus Hook，PA得到)出售的材料，及其混合物。具体的粘合剂是作为AVICEL RC-581出售的微晶纤维素和羧甲基纤维素钠的混合物。合适的无水或低水分的赋形剂或添加剂，包括AVICEL-PH-103TM和淀粉1500LM。
适用于本文提供的药物组合物和剂型的填充剂的实例，包括但不限于滑石、碳酸钙(例如颗粒或粉末)、微晶纤维素、粉末纤维素、葡聚糖、高岭土、甘露醇、硅酸、山梨糖醇、淀粉、预胶化淀粉、及其混合物。在某些实施方案中，本文提供的药物组合物中的粘合剂或填充剂，占药物组合物或剂型的约50到约99重量％。
在本文提供的组合物中使用崩解剂以提供在暴露于水性环境时崩解的片剂。包含过多崩解剂的片剂可能在贮存中崩解，而包含过少崩解剂的片剂可能不能以所需速率崩解，或不能在所需条件下崩解。因此，应该使用足量的崩解剂来形成本文提供的固体口服剂型，该量不过多也不过少，不会有害地改变活性成分的释放。使用的崩解剂的量基于制剂的类型而变化，而且是本领域普通技术人员容易识别的。在某些实施方案中，本文提供的药物组合物 包含约0.5到约15重量％的崩解剂，或约1到约5重量％的崩解剂。
可以用于本文提供的药物组合物和剂型的崩解剂，包括但不限于琼脂、藻酸、碳酸钙、微晶纤维素、交联羧甲纤维素钠、交联聚维酮、波拉克林钾、羟基乙酸淀粉钠、土豆或木薯淀粉、其它淀粉、预胶化淀粉、其它淀粉、粘土、其它褐藻胶、其它纤维素、胶、及其混合物。
可以用于本文提供的药物组合物和剂型的润滑剂，包括但不限于硬脂酸钙、硬脂酸镁、矿物油、轻质矿物油、甘油、山梨糖醇、甘露醇、聚乙二醇、其它乙二醇、硬脂酸、十二烷基硫酸钠、滑石、氢化植物油(例如花生油、棉籽油、葵花籽油、芝麻油、橄榄油、玉米油和豆油)、硬脂酸锌、油酸乙酯、月桂酸乙酯、琼脂、及其混合物。另外的润滑剂包括例如syloid硅胶(AEROSIL200，W.R.Grace Co.，Baltimore，MD制造)、合成二氧化硅的凝固气溶胶(Degussa Co.，Piano，TX销售)、CAB-O-SIL(Cabot Co.，Boston，MA出售的高热制成的二氧化硅产品)，及其混合物。如果使用的话，润滑剂典型地以少于其掺入的药物组合物或剂型的约1重量％的量使用。
本文提供的一种固体口服剂型包含本文提供的化合物、无水乳糖、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、硬脂酸、无水二氧化硅胶体、和明胶。
4.6.2控释剂型
可以通过本领域普通技术人员熟知的控释手段或递送装置来施用本文提供的活性成分。实例包括但不限于在美国专利号：3,845,770；3,916,899；3,536,809；3,598,123；以及4,008,719、5,674,533、5,059,595、5,591,767、5,120,548、5,073,543、5,639,476、5,354,556和5,733,566中描述的那些，其各自作为参考并入本文。此类剂型可用于提供一种或多种活性成分的缓释或控释，其使用例如不同比例的羟丙甲基纤维素、其它聚合物基质、凝胶、渗透膜、渗透系统、多层包衣、微粒、脂质体、微球、或其组合，来提供所需的释放特征。可以容易地选择本领域普通技术人员已知的合适的控释制剂(包括本文描述的那些)与本文提供的活性成分一起使用。因此，本文的公开内容涵盖了适合口服施用的单一单位剂型，例如但不限于适合控释的片剂、胶囊、软胶囊和囊片。
所有控释药物产品都具有共同目标，即相对于其不受控的等同物改善药物治疗。理想地，医学治疗中最佳设计的控释制剂的使用的特征是在最短时间内使用最少的药物来治愈或控制状况。控释制剂的优点包括延长的药物活性、降低的给药频率、和增加的患者依从性。另外，控释制剂可用于影响作用的起效时间或其它特征例如血药水平，并因此可以影响副作用(例如不良作用)的发生。
大多数控释制剂被设计成最初释放一定量的药物(活性成分)，其迅速地产 生所需的治疗效果，并逐步和连续地释放其它量的药物，以在延长的时间段内维持这个水平的治疗或预防效果。为了在体内保持药物的该恒定水平，药物必须从剂型中以一定速率释放，该速率将会替换被新陈代谢和从体内排出的药物量。活性成分的控释可以通过各种条件刺激，包括但不限于pH、温度、酶、水、或其它生理条件或化合物。
4.6.3肠胃外剂型
可以通过各种途径对患者施用肠胃外剂型，包括但不限于皮下、静脉内(包括推注)、肌肉内和动脉内。因为肠胃外剂型的施用通常绕开了患者对污染物的天然防御，它们优选地是无菌的或者能够在对患者施用前被灭菌。肠胃外剂型的实例包括但不限于注射用溶液、适于在药学上可接受的运载体中溶解或悬浮以供注射的干粉产品、注射用悬浮液、和乳液。
可用于提供本文提供的肠胃外剂型的合适的运载体，是本领域技术人员熟知的。实例包括但不限于：USP注射用水；水性运载体例如但不限于氯化钠注射液、林格氏注射液、右旋糖注射液、右旋糖和氯化钠注射液、和乳酸盐林格氏注射液；易与水混合的运载体例如但不限于乙醇、聚乙二醇和聚丙二醇；以及非水性运载体例如但不限于玉米油、棉籽油、花生油、芝麻油、油酸乙酯、肉豆蔻酸异丙酯和苯甲酸苯甲酯。
能提高本文公开的一种或多种活性成分的溶解度的化合物，也可以掺入到本文提供的肠胃外剂型中。例如，环糊精及其衍生物可以用来提高本文提供的免疫调节化合物及其衍生物的溶解度。参见例如美国专利号5,134,127，其作为参考并入本文。
4.6.4表面(topical)和粘膜剂型
本文提供的表面和粘膜剂型包括但不限于喷雾剂、气溶胶、溶液、乳液、悬浮液、滴眼液或其它眼科制剂，或本领域技术人员已知的其它形式。参见例如Remington's Pharmaceutical Sciences，第16版和第18版，Mack Publishing，Easton PA(1980&1990)；和Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms，第4版，Lea & Febiger，Philadelphia(1985)。适合治疗口腔内的粘膜组织的剂型可以被配制成漱口剂或口服凝胶。
可用于提供本文的公开内容所涵盖的表面和粘膜剂型的合适的赋形剂(例如载体和稀释剂)和其它材料是制药领域技术人员熟知的，而且取决于给定药物组合物或剂型所要应用的特定组织。考虑到这一事实，典型的赋形剂包括但不限于水、丙酮、乙醇、乙二醇、丙二醇、1,3-丁二醇、肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、矿物油、及其混合物，以形成无毒的且药学上可接受的溶液、乳液或凝胶。如果需要，还可以向药物组合物和剂型中加入保湿剂或润湿剂。此类附加成分的实例是本领域熟知的。参见例如Remington's Pharmaceutical Sciences，第16版和第18版，Mack Publishing，Easton PA(1980&1990)。
也可以调节药物组合物或剂型的pH值来改善一种或多种活性成分的递送。类似地，可以调节溶剂载体的极性、其离子强度或张力来改善递送。化合物例如硬脂酸盐也可以被加入到药物组合物或剂型中，以有利地改变一种或多种活性成分的亲水性或亲脂性，从而改善递送。在这点上，硬脂酸盐可以充当制剂的脂质运载体、乳化剂或表面活性剂、以及递送提高或渗透增强剂。活性成分的不同的盐、水合物或溶剂化物可以用来进一步调节得到的组合物的性质。
4.7试剂盒
也可以使用本领域技术人员熟知的包装材料将本文提供的化合物作为一件制品提供。参见例如，美国专利号5,323,907；5,052,558；和5,033,252。药学包装材料的实例包括但不限于：泡罩包装、瓶子、管子、吸入器、泵、袋子、小瓶、容器、注射器，以及任何适合所选制剂及预期的施用和治疗模式的包装材料。
本文也提供了试剂盒，当其被执业医师使用时，可以简化适量的活性成分对个体的施用。在某些实施方案中，本文提供的试剂盒包含容器和本文提供的化合物的剂型，包括其单一的对映异构体、对映异构体对的混合物、独立的非对映异构体、或非对映异构体的混合物；或其药学上可接受的盐、溶剂化物或前药。
在某些实施方案中，试剂盒包含一个包含本文提供的化合物的剂型的容器，包括其单一的对映异构体、对映异构体对的混合物、独立的非对映异构体、或非对映异构体的混合物；或其药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，在包含一种或多种本文描述的其它治疗剂的容器中。本文提供的试剂盒可以进一步包含额外的活性成分，例如奥利默森(![]()
)、美法仑、G-CSF、GM-CSF、EPO、拓扑替康、达卡巴嗪、依立替康、泰索帝、IFN、COX-2抑制剂、己酮可可碱、环丙沙星、地塞米松、IL2、IL8、IL18、Ara-C、长春瑞滨、异维A酸、13顺式-视黄酸、或其药理学活性变体或衍生物，或其组合。额外的活性成分的实例包括但不限于本文公开的那些。
本文提供的试剂盒可以进一步包含用来施用活性成分的装置。此类装置的实例包括但不限于注射器、无针注射器滴液袋、贴片和吸入器。本文提供的试剂盒还可以包含供施用活性成分的安全套。
本文提供的试剂盒可以进一步包含可用于施用一种或多种活性成分的药学上可接受的运载体。例如，如果活性成分以必须重配以供肠胃外施用的固体形式提供，那么试剂盒可以包含一密封容器的合适运载体，活性成分可以在其中溶解，以形成适合肠胃外施用的无微粒的无菌溶液。药学上可接受的 运载体的实例包括但不限于：水性运载体，包括但不限于USP注射用水、氯化钠注射液、林格氏注射液、右旋糖注射液、右旋糖和氯化钠注射液、和乳酸盐林格氏注射液；易与水混合的运载体，包括但不限于乙醇、聚乙二醇和聚丙二醇；和非水性运载体，包括但不限于玉米油、棉籽油、花生油、芝麻油、油酸乙酯、肉豆蔻酸异丙酯和苯甲酸苯甲酯。
通过以下非限制性实施例，公开内容会被更进一步理解。
5.实施例
5.1 1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-(4-吡啶-4-基甲基-苯基)-脲
![]()
向3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.18g，0.5mmol)在DMF(2mL)中的悬浮液中，加入CDI(81mg，0.5mmol)。混合物在室温下搅拌过夜。向混合物中加入4-吡啶-4-基甲基-苯胺(92mg，0.5mmol)，并在室温下搅拌混合物4小时。然后升温至40℃，在该温度下搅拌混合物8小时。混合物冷却至室温，加入水(5mL)，搅拌10分钟。过滤悬浮液，固体用水(20mL)、EtOAc(20mL)和CH3CN(20mL)洗涤，得到产物，为灰白色固体(100mg，产率41％)：HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，5分钟内5％梯度至100％，CH3CN/0.1％H3PO4，4.69分钟(94％)；mp：290-292℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.93-2.06(m，1H，CHH)，2.29-2.44(m，1H，CHH)，2.54-2.68(m，1H，CHH)，2.82-3.02(m，1H，CHH)，3.88(s，2H，CH2)，4.24-4.54(m，4H，CH2，CH2)，5.10(dd，J＝5.0、13.7Hz，1H，NCH)，6.70(s，1H，NH)，7.10(d，J＝8.3Hz，2H，Ar)，7.22(d，J＝5.3Hz，2H，Ar)，7.34(d，J＝8.3Hz，2H，Ar)，7.39-7.48(m，1H，Ar)，7.51(s，1H，Ar)，7.69(d，J＝7.7Hz，1H，Ar)，8.40-8.52(m，2H，Ar)，8.59(s，1H，NH)，10.98(s，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.49，31.20，40.63，42.76，47.12，51.56，118.03，121.83，122.91，123.99，126.86，129.06，130.27，132.08，138.75，142.36，144.87，149.42，155.22，163.87，167.93，170.98，172.85；LCMS MH+＝484；C27H25N5O4+1.5H2O的分析计算值：C，63.52；H，5.53；N，13.72；S，6.55；实测值：C，63.68；H，5.24；N，13.79。
5.2 1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-(4-羟甲基-苯基)-脲
![]()
向3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.18g，0.5mmol)在DMF(2mL)中的悬浮液中，加入CDI(81mg，0.5mmol)。混合物在室温下搅拌过夜。向混合物中加入4-氨基-苯甲醇(62mg，0.5mmol)，并在室温下搅拌混合物4小时。然后升温至40℃，在该温度下搅拌混合物8小时。混合物冷却至室温，加入水(5mL)，搅拌10分钟。过滤悬浮液，用水(20mL)、EtOAc(20mL)和CH3CN(20mL)洗涤固体，得到微红的固体(100mg，产率41％)：该固体用ISCO硅胶柱纯化，使用甲醇和DCM为洗脱液，得到产物，为白色固体(30mg，产率15％)：HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，5分钟内5％梯度至100％，CH3CN/0.1％H3PO4，4.99分钟(97％)；mp：309-311℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.92-2.10(m，1H，CHH)，2.20-2.47(m，1H，CHH)，2.54-2.69(m，1H，CHH)，2.80-3.07(m，1H，CHH)，4.19-4.54(m，6H，CH2，CH2，CH2)，4.94-5.05(m，1H，OH)，5.11(dd，J＝5.1、13.2Hz，1H，CHN)，6.70(t，J＝6.0Hz，1H，NH)，7.16(d，J＝8.7Hz，2H，Ar)，7.28-7.40(m，2H，Ar)，7.39-7.48(m，1H，Ar)，7.52(s，1H，Ar)，7.69(d，J＝7.7Hz，1H，Ar)，8.57(s，1H，NH)，10.98(s，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.49，31.18，42.77，47.12，51.56，62.67，117.49，121.89，122.93，126.91，127.05，130.29，135.22，138.99，142.38，144.88，155.25，167.95，170.99，172.85；LCMS MH+＝423；C22H22N4O5+0.4H2O的分析计算值：C，61.50；H，5.35；N，13.04；实测值：C，61.21；H，5.05；N，12.80。
5.3 1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(2-甲基-2H-吡唑-3-基)-苯基]-脲
![]()
在室温下，向5-(3-异氰酰-苯基)-1-甲基-1H-吡唑(0.22g，1.1mmol)和3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.40g，1.1mmol)在乙腈(5mL)中的混合物中加入TEA(0.31mL，2.2mmol)，混合物放置22小时。向混合物中加入水(25mL)，在室温下搅拌混合物3小时。过滤悬浮 液，固体用水(20mL)、EtOAc(20mL)和水(20mL)洗涤，得到固体。该固体用制备HPLC纯化，得到产物，为白色固体(122mg，产率24％)：ΗPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，30/70CΗ3CN/0.1％H3PO4，3.34分钟(99.8％)；mp：260-262℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.88-2.10(m，1H，CHH)，2.27-2.47(m，1H，CHH)，2.55-2.66(m，1H，CHH)，2.80-3.02(m，1H，CHH)，3.84(s，3H，CH3)，4.30(d，J＝17.6Hz，1H，CHH)，4.40-4.50(m，3H，CHH，CH2)，5.11(dd，J＝5.2、13.3Hz，1H，NCH)，6.35(d，J＝1.9Hz，1H，Ar)，6.83(t，J＝6.1Hz，1H，NH)，7.06(dt，J＝1.4、7.6Hz，1H，Ar)，7.31-7.38(m，1H，Ar)，7.40-7.48(m，3H，Ar)，7.53(d，J＝0.4Hz，1H，Ar)，7.63(t，J＝1.9Hz，1H，Ar)，7.70(d，J＝7.9Hz，1H，Ar)，8.82(s，1H，NH)，10.98(br.s.，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.48，31.19，37.45，42.78，47.11，51.55，105.55，117.62(2个碳，通过HMQC)，121.18，121.87，122.93，126.87，129.08，130.29，130.51，137.86，140.73，142.38，142.82，144.76，155.21，167.94，170.98，172.84；LCMS MH+＝473；C25H24N6O4的分析计算值：C，63.55；H，5.12；N，17.79；实测值：C，63.36；H，5.17；N，17.72。
5.4 1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(2-甲基-咪唑-1-基)-苯基]-脲；甲酸
![]()
将3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.40g，1.1mmol)和CDI(0.19g，1.2mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室温下搅拌18小时。在室温下向混合物中加入3-(2-甲基-咪唑-1-基)-苯胺(0.19g，1.1mmol)，在60℃搅拌混合物24小时。向混合物中加入水(25mL)和乙醚(20mL)。在室温下搅拌混合物2小时。过滤悬浮液，固体用水(20mL)、乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)洗涤，得到固体。该固体用制备HPLC纯化，得到产物，为白色固体(100mg，产率20％)：HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，5分钟内5％梯度至95％，CH3CN/0.1％H3PO4，4.48分钟(96.8％)；mp：218-220℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.89-2.12(m，1H，CHH)，2.25-2.29(m，3H，CH3)，2.30-2.46(m，1H，CHH)，2.54-2.68(m，1H，CHH)，2.78-3.04(m，1H，CHH)，4.31(d，J＝17.4Hz，1H，CHH)，4.38-4.53(m，3H，CHH，CH2)，5.11(dd，J＝5.1、13.2Hz，1H，NCH)，6.89(d，J＝1.3Hz，1H，Ar)，6.92-7.05(m，2H，Ar，NH)，7.23(d，J＝1.3Hz，1H， Ar)，7.32-7.40(m，2H，Ar)，7.41-7.49(m，1H，Ar)，7.52(s，1H，Ar)，7.57-7.65(m，1H，Ar)，7.69(d，J＝7.9Hz，1H，Ar)，8.18(s，1H，HCOOH)，9.03(s，1H，NH)，10.98(s，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ13.60，22.49，31.20，42.77，47.12，51.58，114.22，116.89，117.61，120.68，121.88，122.93，126.89，127.13，129.63，130.30，137.90，141.50，142.38，143.43，144.69，155.16，163.44，167.93，170.98，172.85；LCMS MH+＝473；C25H24N6O4+HCOOH+1.5H2O的分析计算值：C，57.24；H，5.36；N，15.40；实测值：C，57.43；H，5.11；N，15.57。
5.5 1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[4-(4-甲基-4H-[1,2,4]三唑-3-基)-苯基]-脲
![]()
在40℃向4-(4-甲基-4H-[1,2,4]三唑-3-基)-苯胺(0.31g，1.77mmol)在DMF(10mL)中的搅拌悬浮液中，加入CDI(0.32g，1.94mmol)。将混合物搅拌15分钟，接着加入3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.65g，1.77mmol)。1.5小时后，停止加热，混合物在室温下搅拌过夜。蒸发溶剂，残余物通过制备HPLC纯化，得到产物，为白色固体(0.13g，产率15％)：HPLC，Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1ml/分钟，240nm，14/86CH3CN/0.1％H3PO4，4.70分钟(93.9％)；mp，248-250℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.93-2.06(m，1H，CHH)，2.29-2.46(m，1Η，CHH)，2.55-2.70(m，1Η，CHH)，2.82-3.02(m，1Η，CHH)，3.72(s，3Η，CH3)，4.24-4.55(m，4Η，CH2，CH2)，5.11(dd，J＝4.9、13.2Hz，1H，NCH)，6.95(t，J＝5.7Hz，1H，NH)，7.41-7.81(m，7Η，ArH)，8.51(s，1Η，ArH)，9.02(s，1Η，NH)，10.99(s，1Η，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.49，31.20，31.94，42.79，47.13，51.58，117.50，119.49，121.88，122.94，126.91，128.80，130.32，141.84，142.39，144.72，145.76，153.08，155.12，167.95，170.99，172.85；LC/MS MH+＝474；C24H23N7O4的分析计算值：C，60.88；H，4.90；N，20.71。实测值：C，58.28；H，4.67；N，19.49(注：这一分析偏离，而且HPLC和1H NMR都显示有6％的杂质)。
5.6 1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(2-甲基-噻唑-4-基)-苯基]-脲
![]()
在室温下，向4-(3-异氰酰-苯基)-2-甲基-噻唑(0.25g，1.2mmol)和3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.43g，1.2mmol)在乙腈(5mL)中的混合物中，加入TEA(0.33mL，2.3mmol)，将混合物放置3小时。向混合物中加入水(25mL)，在室温下搅拌混合物3小时。过滤悬浮液，固体用水(20mL)、乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)洗涤，得到固体。该固体用制备型HPLC纯化，得到产物，为白色固体(160mg，产率28％)：HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，30/70CH3CN/0.1％H3PO4，5.93分钟(99.4％)；mp：252-254℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.92-2.06(m，1H，CHH)，2.27-2.47(m，1H，CHH)，2.54-2.66(m，1H，CHH)，2.71(s，3H，CH3)，2.81-3.01(m，1H，CHH)，4.31(d，J＝17.6Hz，1H，CHH)，4.38-4.53(m，3H，CHH，CH2)，5.11(dd，J＝5.1、13.2Hz，1H，NCH)，6.74(t，J＝6.0Hz，1H，NH)，7.20-7.32(m，1H，Ar)，7.40(ddd，J＝1.1、2.3、8.1Hz，1H，Ar)，7.46(dq，J＝1.4、7.6Hz，2H，Ar)，7.53(s，1H，Ar)，7.70(d，J＝7.9Hz，1H，Ar)，7.81(s，1H，Ar)，8.02(t，J＝1.9Hz，1H，Ar)，8.79(s，1H，NH)，10.98(s，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ18.91，22.51，31.18，42.79，47.12，51.56，113.55，115.55，117.28，118.86，121.86，122.94，126.89，129.01，130.29，134.58，140.82，142.39，144.90，153.89，155.21，165.29，167.95，170.99，172.85；LCMS MH+＝490；C25H23N5O4S的分析计算值：C，61.34；H，4.74；N，14.31；S，6.55；实测值：C，61.09；H，4.60；N，14.19；S，6.49。
5.7 1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-苯基]-脲
![]()
在室温下，向3-(3-异氰酰-苯基)-1-甲基-1H-吡唑(0.25g，1.25mmol)和3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.46g，1.25mmol)在乙腈(5mL)中的搅拌悬浮液中，加入TEA(0.35mL，2.51mmol)。混合物搅拌4小时，接着加入1N HCl(10mL)，搅拌10分钟。混合物通过制备型HPLC纯化，得到产物，为灰白色固体(0.22g，产率38％)：ΗPLC，Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1ml/分钟，240nm，25/75CΗ3CN/0.1％ H3PO4，5.99分钟(99.9％)；mp，232-234℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.93-2.07(m，1H，CHH)，2.29-2.46(m，1Η，CHH)，2.55-2.68(m，1Η，CHH)，2.82-3.01(m，1Η，CHH)，3.87(s，3Η，CH3)，4.24-4.55(m，4Η，CH2，CH2)，5.11(dd，J＝5.0、13.3Hz，1H，NCH)，6.57(d，J＝2.3Hz，1H，ArH)，6.73(t，J＝5.9Hz，1H，NH)，7.18-7.37(m，3Η，ArH)，7.46(d，J＝7.9Hz，1H，ArH)，7.53(s，1Η，ArH)，7.65-7.77(m，2Η，ArH)，7.89(s，1Η，ArH)，8.71(s，1Η，NH)，10.98(s，1Η，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.51，31.18，38.60，42.79，47.13，51.58，102.33，114.31，116.77，118.16，121.86，122.93，126.89，128.85，130.29，132.17，133.85，140.66，142.39，144.91，150.03，155.22，167.95，170.99，172.85；LC/MS MH+＝473；C25H24N6O4+0.5H2O的分析计算值：C，62.36；H，5.23；N，17.45。实测值：C，62.06；H，5.19；N，17.28。
5.8 1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(3-(吗啉基甲基)苯基)脲甲酸盐
![]()
在室温下，在氮气中，向3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮盐酸盐(0.37g，1.00mmol)和4-(3-异氰酰苯甲基)-吗啉(0.22g，1.00mmol)在乙腈(10mL)中的搅拌混合物中，加入TEA(0.28mL，2.00mmol)。2小时后，加入另外的4-(3-异氰酰苯甲基)吗啉(0.22g，1.00mmol)和TEA(0.28mL，2.00mmol)。12小时后，过滤不需要的固体，并浓缩滤液。残余物在乙腈中溶解，通过制备型HPLC纯化(梯度：CH3CN+0.1％甲酸/H2O+0.1％甲酸：10/90持续5分钟，10分钟内达到100/0，100/0持续5分钟)。溶剂蒸发后，残余物在乙醚(20mL)中研磨1小时。然后过滤分离产物，并在真空中干燥，得到产物，为米色固体(0.16g，产率30％)：HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，梯度：CH3CN/0.1％H3PO4：10分钟内10/90至90/10，90/10(5分钟)：4.64分钟(95.84％)；mp：198-200℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.83-2.12(m，1H，CHH)，2.21-2.47(m，5H，CHH，CH2，CH2)，2.54-2.69(m，J＝11.0Hz，1H，CHH)，2.79-3.03(m，1H，CHH)，3.38(s，2H，CH2)，3.52-3.72(m，4H，CH2，CH2)，4.31(d，J＝17.2Hz，1H，CHH)，4.37-4.55(m，3H，CHH，CH2)，5.11(dd，J＝5.1、13.2Hz，1H，CH)，6.83(d，J＝7.6Hz，1H，Ar)，6.99(t，J＝5.6Hz，1H，NH)，7.15(t，J＝7.7Hz，1H，Ar)，7.32(d，J＝8.3Hz，1H，Ar)，7.39(s，1H，Ar)，7.44(d，J＝7.7Hz，1H，Ar)，7.52(s，1H，Ar)，7.69(d，J＝7.7Hz，1H，Ar)，8.29(br.s.，1H，HCOO)， 8.90(s，1H，NH)，10.98(br.s.，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.51，31.20，42.73，47.12，51.56，53.20，62.69，66.17，116.42，118.13，121.72，121.83，122.90，126.86，128.34，130.25，138.24，140.48，142.36，144.99，155.31，164.30，167.95，170.98，172.85；LCMS：MH+＝492；C27H31N5O7+3H2O的分析计算值：C，54.82；H，6.30；N，11.84；实测值：C，55.12；H，6.12；N，11.72。
5.9 1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(4-甲基-3-硝基苯基)脲
![]()
在室温下，在氮气中，向3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮盐酸盐(1.00g，2.70mmol)和4-甲基-3-硝基苯基异氰酸酯(0.48mL，2.70mmol)在乙腈(20mL)中的搅拌混合物中，加入TEA(0.75mL，5.40mmol)。2小时后，加入1N HCl(20mL)，过滤分离固体，用水(3×20mL)洗涤。粗产物在EtOAc(50mL)中研磨12小时。过滤分离产物，并在真空中干燥，得到产物，为黄色固体(0.74g，产率61％)：HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，梯度：CH3CN/0.1％H3PO4：10分钟内10/90至90/10，90/10(5分钟)：7.94分钟(96.79％)；mp：230-232℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.87-2.08(m，1H，CHH)，2.26-2.48(m，3H，CHH，CH3)，2.60(d，J＝17.6Hz，1H，CHH)，2.79-3.07(m，1H，CHH)，4.31(d，J＝17.4Hz，1H，CHH)，4.38-4.55(m，3H，CHH，CH2)，5.11(dd，J＝5.0、13.3Hz，1H，CH)，6.92(t，J＝5.9Hz，1H，NH)，7.34(d，J＝8.3Hz，1H，Ar)，7.45(d，J＝7.9Hz，1H，Ar)，7.49-7.60(m，2H，Ar)，7.70(d，J＝7.7Hz，1H，Ar)，8.26(d，J＝2.3Hz，1H，Ar)，9.07(s，1H，NH)，10.99(s，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ18.95，22.49，31.20，42.82，47.12，51.56，112.74，121.92，122.45，122.94，124.71，126.92，130.33，132.84，139.46，142.38，144.59，148.72，155.02，167.93，170.98，172.85；LCMS：MH+＝452；C22H21N4O6的分析计算值：C，58.53；H，4.69；N，15.51；实测值：C，58.23；H，4.58；N，15.34。
5.10 1-(3-氨基-4-甲基苯基)-3-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)脲
![]()
向1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(4-甲基-3-硝基苯基)脲(0.30g，0.66mmol)在DMF(50mL)中的溶液中加入Pd-C(0.10g，重量10％)。反应混合物用Parr-shaker在55psi下氢化。16小时后，通过硅藻土垫过滤混合物，用另外的DMF(20mL)洗涤硅藻土垫。然后蒸发滤液，残余物在水(100mL)中搅拌3小时。过滤固体，用另外的水(50mL)洗涤，干燥。粗制的绿色产物在DMF(100mL)中溶解，加入脱色碳，搅拌反应混合物3小时。然后通过硅藻土垫过滤混合物，用另外的DMF(50mL)洗涤硅藻土垫。然后蒸发滤液，残余物在水(100mL)中搅拌4小时。过滤固体，用另外的水(50mL)洗涤，并在真空中干燥。固体用乙醚研磨1小时，产物过滤分离，得到淡绿色固体产物(0.22g，产率79％)：HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，梯度：CH3CN/0.1％H3PO4：10分钟内10/90至90/10，90/10(5分钟)：4.50分钟(96.74％)；mp：228-230℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.82-2.10(m，4H，CHH，CH3)，2.25-2.47(m，1H，CHH)，2.59(d，J＝18.3Hz，1H，CHH)，2.77-3.02(m，1H，CHH)，4.30(d，J＝17.6Hz，1H，CHH)，4.35-4.53(m，3H，CH2，CHH)，4.93(br.s.，2H，NH2)，5.11(dd，J＝5.0、12.9Hz，1H，CH)，6.51(dd，J＝1.9、7.9Hz，1H，Ar)，6.58(t，J＝5.7Hz，1H，NH)，6.75(d，J＝8.5Hz，2H，Ar)，7.43(d，J＝7.9Hz，1H，Ar)，7.50(s，1H，Ar)，7.69(d，J＝7.7Hz，1H，Ar)，8.23(s，1H，NH)，10.98(s，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ16.75，22.49，31.20，42.74，47.10，51.56，104.16，106.57，114.59，121.86，122.90，126.89，129.79，130.25，138.75，142.36，145.06，146.12，155.22，167.95，170.98，172.85；LCMS：MH+＝422；C22H23N5O4+0.1H2O+0.5Et2O的分析计算值：C，62.62；H，6.17；N，15.21；实测值：C，62.30；H，5.89；N，14.89。
5.11 1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-(3-苯氧基-苯基)-脲
![]()
在氮气中，在室温下，将TEA(0.20g，2.00mmol)加入到3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.37g，1.00mmol)和1-异氰酰-3-苯氧基-苯(0.212g，1.00mmol)在乙腈(10mL)中的搅拌混合物中。3小时后，加入1N HCl(10mL)，将混合物搅拌10分钟。过滤分离固体，用水(20mL)和乙腈(10mL)洗涤。粗产物在最小量的DMF中溶解，缓慢加入水(～ 30mL)，让产物沉淀。过滤收集固体，用Et2O洗涤，并在真空中干燥18小时，得到产物，为白色固体(422mg，87％)：HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1ml/分钟，240nm，35/65，CH3CN/0.1％H3PO4，3.76分钟(99.3％)；mp：224-226℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.99(s，4H，CH，CH3)，2.29-2.46(m，1H，CH)，2.55-2.66(m，1H，CH)，2.80-3.01(m，1H，CH)，4.18-4.56(m，4H，CH2，CH2)，5.10(dd，J＝4.9、13.2Hz，1H，CH)，6.71(t，J＝5.9Hz，1H，NH)，7.23-7.36(m，1H，Ar)，7.36-7.48(m，2H，Ar)，7.51(s，1H，Ar)，7.69(d，J＝7.7Hz，1H，Ar)，8.55(s，1H，NH)，9.75(s，1H，NH)，10.67-11.27(m，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.49，23.82，31.18，42.77，47.12，51.56，118.12，119.57，121.85，122.91，126.88，130.26，133.18，135.70，142.36，144.94，155.29，167.67，167.95，170.98，172.85；LCMS：MH+＝485；C27H24N4O5的分析计算值：C，66.93；H，4.99；N，11.56。实测值：C，67.03；H，4.72；N，11.41。
5.12 1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(4-硝基苯基)脲
![]()
在氮气中，将TEA(0.20g，2.0mmol)加入到3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.37g，1.0mmol)和1-异氰酰-4-硝基苯(164mg，1.0mmol)在乙腈(10mL)中的搅拌混合物中。混合物在室温下搅拌3小时，在这期间它仍然是悬浮液。加入1N HCl溶液(10mL)，将混合物搅拌10分钟。过滤分离固体，用另外的水(20mL)和乙腈(10mL)洗涤。固体在最小量的DMF中溶解，缓慢加入水(～30mL)，让产物沉淀。过滤收集固体，用Et2O洗涤以除去大部分残留的黄颜色。剩下的固体在真空炉中干燥过夜，以提供产物，为灰白色固体(330mg，75％)：HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1ml/分钟，240nm，30/70，CH3CN/0.1％H3PO4，6.15分钟(97.1％)；mp：272-274℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.84-2.13(m，1H，CHH)，2.24-2.44(m，1H，CHH)，2.55-2.66(m，1H，CHH)，2.77-3.02(m，1H，CHH)，4.16-4.55(m，4H，CH2，CH2)，5.11(dd，J＝4.7、13.0Hz，1H，CH)，7.07(t，J＝5.6Hz，1H，NH)，7.37-7.83(m，5H，Ar)，8.15(d，J＝8.9Hz，2H，Ar)，9.48(s，1H，NH)，10.98(s，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.48，31.17，42.83，47.11，51.57，116.97，121.94，122.96，125.09，126.93，130.38，140.48，142.41，144.26，147.04，154.51，167.91，170.98，172.85；LCMS： MH+＝438；C21H19N5O6+0.5H2O的分析计算值：C，56.50；H，4.52；N，15.69；实测值：C，56.45；H，4.31；N，15.71。
5.13 N-(4-{3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲基}-苯基)-乙酰胺
![]()
步骤1：1-(4-氨基-苯基)-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲的制备。向1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(4-硝基苯基)脲(150mg，0.343mmol)在EtOH(2mL)中的搅拌混合物中，加入在水(2mL)中的亚硫酸氢钠(597mg，3.43mmol)。将得到的混合物加热到60℃20分钟，此时LC-MS表明硝基起始材料完全消失。反应混合物与来自另一批次的粗产物合并，在真空中浓缩。残余物在最小量的DMF中溶解，用配备了质量引发性收集的C-18制备型ΗPLC柱进行色谱层析。合并所需部分，在真空中浓缩，以提供1-(4-氨基-苯基)-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲，为淡黄色固体(90mg，来自两个独立批次的合并平均产率40％)：mp：>400℃；LCMS：MH+＝408。
步骤2：N-(4-{3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲基}-苯基)-乙酰胺的制备。将1-(4-氨基-苯基)-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲(64mg，0.157mmol)在室温下在乙酸酐(5mL)中搅拌2小时。在真空中除去挥发物，残余物在最小量的DMF中溶解，用C-18制备型ΗPLC柱纯化。合并所需部分，在真空中浓缩，以提供产物，为淡黄色固体(37mg，产率52％)：ΗPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1ml/分钟，240nm，17/83，CΗ3CN/0.1％H3PO4，5.19分钟(97.4％)；mp：265-267℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.99(s，4H，CH，CH3)，2.29-2.46(m，1H，CH)，2.55-2.66(m，1H，CH)，2.80-3.01(m，1H，CH)，4.18-4.56(m，4H，CH2，CH2)，5.10(dd，J＝4.9、13.2Hz，1H，CH)，6.71(t，J＝5.9Hz，1H，NH)，7.23-7.36(m，1H，Ar)，7.36-7.48(m，2H，Ar)，7.51(s，1H，Ar)，7.69(d，J＝7.7Hz，1H，Ar)，8.55(s，1H，NH)，9.75(s，1H，NH)，10.67-11.27(m，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.49，23.82，31.18，42.77，47.12，51.56，118.12，119.57，121.85，122.91，126.88，130.26，133.18，135.70，142.36，144.94，155.29，167.67，167.95，170.98，172.85；LCMS：MH+＝450；C23H23N5O5+1.0H2O的分析计算值：C，59.09；H，5.39；N，14.98；实测值：C，58.75；H，4.99；N，14.59。
5.14 3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-1-甲基-1-苯基-脲
![]()
向3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.18g，0.5mmol)在CH3CN(10mL)中的悬浮液中加入DIPEA(0.4mL，2.5mmol)和N-甲基苯基氨基甲酰氯(178mg，1.05mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜。过滤悬浮液，固体用水(20mL)、乙酸乙酯(20mL)和CH3CN(20mL)洗涤，得到产物，为白色固体(200mg，产率47％)：HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，30/70CH3CN/0.1％H3PO4，3.56分钟(96％)；mp：168-170℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.89-2.07(m，1H，CHH)，2.30-2.47(m，1H，CHH)，2.55-2.69(m，1H，CHH)，2.79-3.01(m，1H，CHH)，3.18(s，3H，CH3)，4.22-4.58(m，4H，CH2，CH2)，5.11(dd，J＝5.0、13.3Hz，1H，NCH)，6.68(t，J＝5.9Hz，1H，NH)，7.16-7.35(m，3H，Ar)，7.36-7.44(m，3H，Ar)，7.46(s，1H，Ar)，7.66(d，J＝7.7Hz，1H，Ar)，10.98(s，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.51，31.21，37.14，43.76，47.10，51.55，121.85，122.71，125.78，126.54，126.86，129.23，130.04，142.19，144.02，145.41，156.74，168.02，171.02，172.86；LCMS MH+＝407；C22H22N4O4+0.5H2O的分析计算值：C，63.60；H，5.58；N，13.49；S，6.55；实测值：C，63.61；H，5.51；N，13.48。
5.15 1-联苯基-4-基-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲
![]()
向3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.37g，1mmol)在DMF(2mL)中的悬浮液中，加入CDI(162mg，1mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜。向混合物中加入4-苯基苯胺(169mg，1mmol)，在室温下搅拌混合物4小时。然后升温至40℃，在该温度下搅拌混合物8小时。让混合物冷却至室温。过滤悬浮液，向滤液加入CH3CN(5mL)，过滤得到的悬浮液。收集的固体从DMF中重结晶，得到产物，为白色固体(30mg，产率15％)：HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟， 240nm，50/50CH3CN/0.1％H3PO4，2.78分钟(95％)；1H NMR(DMSO-d6)δ2.02(br.s.，1H，CHH)，2.28-2.47(m，1H，CHH)，2.60(d，J＝18.5Hz，1H，CHH)，2.82-3.04(m，1H，CHH)，4.23-4.59(m，4H，CH2，CH2)，5.11(dd，J＝4.9、13.2Hz，1H，NCH)，6.73-6.83(m，1H，NH)，7.22-7.35(m，1H，Ar)，7.37-7.66(m，10H，Ar)，7.70(d，J＝7.9Hz，1H，Ar)，8.75(s，1H，NH)，10.98(s，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.51，31.20，42.80，47.13，51.58，118.09，121.89，122.94，125.99，126.64，126.85，128.82，130.30，132.86，139.93，142.40，144.81，155.18，167.95，170.99，172.85；LCMS MH+＝423。
5.16 1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-苯基]-脲
![]()
在室温下，向3-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-苯胺(0.22g，1.09mmol)和3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.40g，1.09mmol)在乙腈(5mL)中的搅拌悬浮液中，加入TEA(0.31mL，2.19mmol)。将混合物搅拌3小时，接着加入1N HCl(10mL)，搅拌10分钟。混合物通过制备型HPLC纯化，得到产物，为白色固体(0.10g，产率19％)：HPLC，Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1ml/分钟，240nm，30/70CH3CN/0.1％H3PO4，4.37分钟(99.3％)；mp，242-244℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.92-2.07(m，1H，CHH)，2.30-2.46(m，4Η，CH3，CHH)，2.55-2.67(m，1Η，CHH)，2.82-3.02(m，1Η，CHH)，4.24-4.56(m，4Η，CH2，CH2)，5.11(dd，J＝5.1、13.2Hz，1H，NCH)，6.91(t，J＝5.8Hz，1H，NH)，7.39-7.80(m，6H，ArH)，8.37(s，1Η，ArH)，9.05(s，1Η，NH)，10.98(s，1Η，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ11.25，22.49，31.20，42.83，47.12，51.58，116.37，120.24，121.93，121.96，122.94，123.77，126.94，129.90，130.33，141.41，142.39，144.68，155.10，167.61，167.93，170.99，172.85，174.86。LC/MS MH＝475；C24H22N6O5+0.4H2O的分析计算值：C，59.85；H，4.77；N，17.45；实测值：C，59.53；H，4.68；N，17.30。
5.17 1-(3-氨基苯基)-3-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)脲
![]()
步骤1：在室温下，在氮气中，向3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮盐酸盐(0.74g，2.00mmol)和异氰酸3-硝基苯酯(0.33g，2.00mmol)在乙腈(20mL)中的搅拌混合物中加入TEA(0.56mL，4.00mmol)。12小时后，过滤固体，并通过制备型HPLC(梯度：CH3CN/H2O：15/85持续5分钟，10分钟内至100/0，100/0持续5分钟)纯化。溶剂蒸发后，残余物在乙醚(20mL)中研磨1小时。然后过滤分离产物，并在真空中干燥，得到1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(3-硝基苯基)脲，为黄色固体(0.34g，产率39％)。
步骤2：向1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(3-硝基苯基)脲(0.33g，0.80mmol)在DMF(80mL)中的溶液中加入Pd-C(0.10g，重量<10％)。反应混合物用Parr-shaker在55psi下氢化。12小时后，通过硅藻土垫过滤混合物，用另外的DMF(50mL)洗涤硅藻土垫。然后蒸发滤液，残余物在水(150mL)中搅拌3小时。过滤固体，用另外的水(50mL)洗涤，干燥。粗产物在DMF(50mL)中溶解，加入脱色碳，搅拌反应混合物12小时。然后通过硅藻土垫过滤混合物，用另外的DMF(50mL)洗涤硅藻土垫。然后蒸发滤液，残余物在水(100mL)中搅拌3小时。过滤固体，用另外的水(50mL)洗涤，并在真空中干燥，得到产物，为淡黄色固体(0.24g，产率77％)：HPLC：X-Terra RP 18，3.9×150mm，5μm，1mL/分钟，240nm：CH3CN/0.1％(HCO2)NH4：15/85：7.95分钟(95.27％)；mp：233-235℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.78-2.08(m，1H，CHH)，2.38(qd，J＝4.5、13.2Hz，1H，CHH)，2.59(d，J＝17.8Hz，1H，CHH)，2.79-3.06(m，1H，CHH)，4.18-4.36(m，1H，CHH)，4.36-4.60(m，3H，CHH，CH2)，4.91-5.36(m，3H，NH2，CH)，6.15(ddd，J＝0.9、2.1、7.9Hz，1H，Ar)，6.48-6.58(m，1H，Ar)，6.63(t，J＝6.0Hz，1H，NH)，6.76(t，J＝2.0Hz，1H，Ar)，6.85(t，J＝7.9Hz，1H，Ar)，7.44(d，J＝7.7Hz，1H，Ar)，7.51(s，1H，Ar)，7.69(d，J＝7.9Hz，1H，Ar)，8.32(s，1H，NH)，10.98(s，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.51，31.20，42.73，47.12，51.58，103.78，106.20，107.79，121.86，122.91，126.89，128.89，130.26，140.92，142.38，144.99，148.44，155.16，167.95，170.99，172.85；LCMS：MH+＝408；C21H21N5O4的分析计算值：C，61.91，H，5.20，N，17.19；实测值：C，62.40，H，5.67，N，15.59。
5.18 1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(吡啶-2-基氧基)-苯基]-脲
![]()
3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(1.11g，3.0mmol)和1,1'-羰基二咪唑(535mg，3.3mmol)在无水DMF(20mL)中悬浮，混合物在室温下搅拌24h。在搅拌的同时，将一部分反应混合物(6.7mL，～1mmol)转移到包含3-(吡啶-2-氧基)-苯胺(205mg，1.1mmol)的小瓶中。得到的混合物在室温下搅拌过夜，通过LCMS监测反应进展。48小时后，向反应混合物中转移另外的3-(吡啶-2-氧基)-苯胺(37mg，0.2mmol)，继续搅拌另外24小时。用酸性的酸和水酸化反应混合物。在真空中除去挥发物，残余物在DMF中溶解，使用C-18制备型HPLC纯化，得到1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(吡啶-2-氧基)-苯基]-脲，为白色固体(310mg，产率64％)：HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1ml/分钟，240nm，30/70CH3CN/0.1％H3PO4，4.81分钟(98.6％)；mp：298-300℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.84-2.06(m，1H，CHH)，2.19-2.44(m，1H，CHH)，2.54-2.68(m，1H，CHH)，2.79-3.05(m，1H，CHH)，4.08-4.60(m，4H，CH2，CH2)，5.10(dd，J＝5.1、13.2Hz，1H，CH)，6.64(dd，J＝1.4、8.0Hz，1H，Ar)，6.81(t，J＝5.9Hz，1H，NH)，6.99(d，J＝8.3Hz，1H，Ar)，7.07-7.18(m，2H，Ar)，7.24(t，J＝8.1Hz，1H，Ar)，7.33(t，J＝2.1Hz，1H，Ar)，7.43(d，J＝7.7Hz，1H，Ar)，7.50(s，1H，Ar)，7.68(d，J＝7.7Hz，1H，Ar)，7.78-7.97(m，1H，Ar)，8.16(dd，J＝1.5、4.9Hz，1H，Ar)，8.82(s，1H，NH)，10.97(s，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.49，31.18，42.73，47.12，51.56，110.23，111.51，113.54，113.68，118.99，121.85，122.93，126.86，129.56，130.29，140.10，141.79，142.39，144.77，147.52，154.37，155.09，163.03，167.93，170.99，172.85；LCMS：MH＝486；C26H23N5O5+0.3H2O的分析计算值：C，63.61；H，4.85；N，14.27。实测值：C，63.62；H，4.62；N，14.18。
5.19 1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(3-(哌啶-4-基氧基)苯基)脲
![]()
使用如5.15节中所述的步骤，由3-(哌啶-4-基氧基)苯胺和3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲烷磺酸盐制备该产物。
5.20 1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(3-羟基-4-甲基苯基)脲
![]()
步骤1：使用如5.15节中所述的步骤，由3-(叔丁基二甲基硅氧基)-4-甲基苯胺和3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲烷磺酸盐制备1-(3-(叔丁基二甲基硅氧基)-4-甲基苯基)-3-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)脲。
步骤2：将1-(3-(叔丁基二甲基硅氧基)-4-甲基苯基)-3-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)脲(0.54g，1.0mmol)和氟化铯(0.15g，1.0mmol)在DMF(10mL)中的混合物加热到70℃8小时。冷却混合物，用水(10mL)稀释。过滤固体沉淀，用水(10mL)冲洗，在真空中干燥，以提供产物。
5.21 5-(3-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)脲基)-2-甲基苯基2-氨基醋酸酯盐酸盐
![]()
步骤1：使用如5.15节中所述的步骤，由5-氨基-2-甲基苯基2-(叔丁氧基羰基氨基)醋酸酯和3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲烷磺酸盐制备5-(3-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)脲基)-2-甲基苯基2-(叔丁氧基羰基氨基)醋酸酯。
步骤2：向5-(3-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)脲基)-2-甲基苯基2-(叔丁氧基羰基氨基)醋酸酯(0.58g，1.0mmol)在DCM(50mL)中的混合物中，加入含2M HCl的乙醚(1mL)，将混合物搅拌24小时。过滤固体沉淀，用DCM(10mL)冲洗，在真空中干燥，以提供产物。
5.22 5-(3-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)脲基)-2-甲基苯基2-(哌嗪-1-基)醋酸酯盐酸盐
![]()
步骤1：使用如5.15节中所述的步骤，由4-(2-(5-氨基-2-甲基苯氧基)-2-氧乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯和3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲烷磺酸盐制备4-(2-(5-(3-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)脲基)-2-甲基苯氧基)-2-氧乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯。
步骤2：向4-(2-(5-(3-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)脲基)-2-甲基苯氧基)-2-氧乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.65g，1.0mmol)在二氯甲烷(50mL)中的混合物中加入含2M HCl的乙醚(1mL)，将混合物搅拌24小时。过滤固体沉淀，用DCM(10mL)冲洗，在真空中干燥，以提供产物。
5.23 1-(3-(氨基甲基)-4-甲基苯基)-3-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)脲
![]()
步骤1：使用如5.15节中所述的步骤，由5-氨基-2-甲基苄腈和3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲烷磺酸盐制备1-(3-氰基-4-甲基苯基)-3-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)脲。
步骤2：将1-(3-氰基-4-甲基苯基)-3-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)脲(0.54g，1.0mmol)、氧化铂(0.1g)和含5-6M HCl的异丙醇(2mL)在醋酸(15mL)中的混合物在50psi氢气下氢化48小时。通过硅藻土过滤混合物，在真空中蒸发滤液，残余物通过制备HPLC纯化，以提供产物。
5.24 1-(2-(氨基甲基)-5-甲基苯基)-3-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)脲
![]()
步骤1：使用如5.15节中所述的步骤，由2-氨基-4-甲基苄腈和3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲烷磺酸盐制备1-(2-氰基-5-甲基苯基)-3-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)脲。
步骤2：将1-(2-氰基-5-甲基苯基)-3-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)脲(0.54g，1.0mmol)、氧化铂(0.1g)和含5-6M HCl的异丙醇(2mL)在醋酸(15mL)中的混合物在50psi的氢气下氢化48小时。通过硅藻土过滤混合物，在真空中蒸发滤液，残余物通过制备型HPLC纯化，以提供产物。
5.25 1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(4-(吗啉基甲基)苯基)脲
![]()
使用如5.15节中所述的步骤，由4-(吗啉基甲基)苯胺和3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲烷磺酸盐制备该产物。
5.26 1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(3-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)脲
![]()
使用如5.15节中所述的步骤，由3-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯胺和3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲烷磺酸盐制备该产物。
5.27异吲哚啉化合物
![]()
上面显示的异吲哚啉化合物是使用如5.15节中所述的步骤制成的。
5.28 1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[4-(2-吡啶-4-基-乙基)-苯基]-脲盐酸盐
![]()
步骤1：4-[2-(4-硝基-苯基)-乙烯基]-吡啶的制备
向1-碘-4-硝基苯(498mg，2mmol)和4-乙烯基吡啶(262mg，2.5mmol) 的CH3CN溶液中加入TEA(350μL，2.5mmol)和Pd(OAc)2(0.45mg，0.2mmol)。将混合物在加盖的Pyrex管中加热到100℃持续48小时。然后将其冷却至室温，用1N HCl(20mL)淬灭，减压浓缩。过滤混合物，用EtOAc(30mL)溶解固体，用1N NaOH(30mL)洗涤。浓缩有机层，用Na2SO4干燥，浓缩，得到4-[2-(4-硝基-苯基)-乙烯基]-吡啶，为黄色固体(160mg，37％)。
步骤2：4-(2-吡啶-4-基-乙基)-苯胺的制备
向4-[2-(4-硝基-苯基)-乙烯基]-吡啶(160mg，0.71mmol)的EtOAc溶液(30mL)中加入钯碳(0.1g，50％湿润)。悬浮液在50psi的氢气下氢化2小时。混合物通过硅藻土垫过滤。浓缩滤液，得到4-(2-吡啶-4-基-乙基)-苯胺，为黄色固体(140mg，100％)。
步骤3：1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[4-(2-吡啶-4-基-乙基)-苯基]-脲盐酸盐的制备
向3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.37g，1mmol)在DMF(2mL)中的悬浮液中加入羰基二咪唑(162mg，1mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜。向混合物中加入4-吡啶-4-基乙基-苯胺(140mg，0.7mmol)，将混合物在40℃搅拌过夜，然后在80℃搅拌1.5小时。将混合物冷却至室温，加入水(5mL)，搅拌10分钟。过滤悬浮液，并浓缩滤液，用制备型HPLC纯化。纯化后得到的固体与1N HCl一起搅拌，过滤，浓缩滤液，得到1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[4-(2-吡啶-4-基-乙基)-苯基]-脲盐酸盐，为灰白色固体(30mg，产率8％)。HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，5分钟内5％梯度至95％，CH3CN/0.1％H3PO4：tR＝4.70分钟(92％)；mp：>400℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.89-2.06(m，1H，CHH)，2.37(br.s.，1H，CHH)，2.55-2.67(m，1H，CHH)，2.82-3.01(m，3H，CH2，CHH)，3.12(d，J＝7.7Hz，2H，CH2)，4.20-4.53(m，5H，CH2，CH2)，5.11(dd，J＝4.8、13.3Hz，1H，NCH)，6.89(br.s.，1H，NH)，7.07(d，J＝8.3Hz，2H，Ar)，7.32(d，J＝8.3Hz，2H，Ar)，7.44(d，J＝7.9Hz，1H，Ar)，7.51(s，1H，Ar)，7.69(d，J＝7.7Hz，1H，Ar)，7.83(d，J＝5.5Hz，2H，Ar)，8.71-8.78(m，2H，Ar)，8.80(s，1H，NH)，10.98(s，1H，NH)。13C NMR(DMSO-d6)δ22.44，31.13，34.25，36.52，42.64，47.05，51.49，117.59，121.78，122.84，126.56，126.78，128.49，130.19，132.39，138.59，142.12，142.28，144.86，155.24，167.86，170.91，172.78；LCMS MH＝498；C28H27N5O4+1.55HCl+0.75H2O+0.15CH3CN的分析计算值C，56.78；H，5.29；N，11.64；Cl，8.87；实测值：C，56.47；H，5.15；N，11.99；Cl，8.85。
5.29异吲哚啉化合物
![]()
上面显示的这些异吲哚啉化合物是使用如5.15节中所述的步骤制成的。
5.30 N"-(3-氯-4-甲基-苯基)-N'-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-N-氰基-胍
![]()
步骤1：(3-氯-4-甲基-苯基)-氨基甲酸苯酯的制备
在THF(10mL)中溶解2-氯-4-氨基甲苯(282mg，2mmol)。向混合物中加入氢化钠(128mg，3.2mmol)，在室温下搅拌15分钟。加入二苯基N-氰基-碳亚氨酸酯(715mg，3.0mmol)，将混合物加热回流4小时。将反应混合物冷却至室温，用饱和NH4Cl(10mL)淬灭，过滤，在烤箱中干燥固体，得到(3-氯-4-甲基-苯基)-氨基甲酸苯酯，为固体(0.5g，87％)。
步骤2：N"-(3-氯-4-甲基-苯基)-N'-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-N-氰基-胍的制备
向3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.18g，0.5mmol)在DMF(2mL)中的悬浮液中加入(3-氯-4-甲基-苯基)-氨基甲酸苯酯(143mg，0.5mmol)和DIPEA(83μL，0.5mmol)。将混合物在100℃搅拌4小时。减压浓缩混合物以除去DMF，用硅胶柱纯化，使用甲醇和二氯甲烷洗脱，得到N"-(3-氯-4-甲基-苯基)-N'-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-N-氰基-胍，为白色固体(40mg，产率17％)。HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，50/50，CH3CN/0.1％H3PO4：tR＝3.06分钟(96.5％)；mp：325-327℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.93-2.09(m，1H，CHH)，2.25-2.32(m，3H，CH3)，2.33-2.45(m，1H，CHH)，2.55-2.67(m，1H，CHH)，2.82-3.01(m，1H，CHH)，4.27-4.57(m，4H，CH2，CH2)，5.11(dd，J＝5.1、13.2Hz，1H，NCH)，7.13(dd，J＝2.3、8.1Hz，1H，Ar)，7.32(d，J＝1.5Hz，2H，Ar)，7.43(d，J＝7.7Hz，1H，Ar)，7.51(s，1H，Ar)，7.71(d，J＝7.7Hz，1H，Ar)，7.85(s，1H，NH)，9.20(s，1H，NH)，10.99(s，1H，NH)。13C NMR(DMSO-d6)δ18.98，22.49，31.20，44.70，47.15，51.58，116.88，121.98，122.94，124.33，126.97，130.52，131.41， 132.08，133.10，136.46，142.36，142.97，158.15，167.86，170.98，172.86；LC-MS：465；C23H21ClN6O3+0.6H2O+0.2EtOAc的分析计算值：C，57.94；H，4.86；N，17.03；实测值：C，57.66；H，4.81；N，17.10。
5.31 1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[4-(1H-咪唑-2-基)-苯基]-脲
![]()
将3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.40g，1.1mmol)和CDI(0.19g，1.2mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室温下搅拌18小时。在室温下，向混合物中加入4-(1H-咪唑-2-基)-苯胺(0.17g，1.1mmol)，在60℃搅拌混合物1天。向混合物中加入水(25mL)和乙酸乙酯(20mL)。在室温下搅拌混合物2小时。过滤悬浮液，固体用水(20mL)、乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)洗涤，得到固体。该固体用制备型HPLC纯化，得到1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[4-(1H-咪唑-2-基)-苯基]-脲，为白色固体(150mg，产率30％)：HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，5分钟内5/95梯度至95/5，CH3CN/0.1％H3PO4，4.41分钟(95.9％)；mp：190-192℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.91-2.08(m，1H，CHH)，2.27-2.47(m，1H，CHH)，2.54-2.66(m，1H，CHH)，2.81-3.01(m，1H，CHH)，4.31(d，J＝17.4Hz，1H，CHH)，4.38-4.52(m，3H，CHH，CH2)，5.11(dd，J＝5.0、13.3Hz，1H，NCH)，6.78(t，J＝6.0Hz，1H，NH)，7.33-7.76(m，9H，Ar)，8.17(s，1H，HCOOH)，8.67(s，1H，NH)，10.99(s，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.41，31.10，42.69，47.02，51.49，114.17(br)，117.80，121.79，122.84，124.55，126.81，126.98，130.19，135.46，138.55，142.31，144.83，155.14，163.19(HCOOH)，167.88，170.92，172.77；LCMS MH＝459；C24H22N6O4+2H2O+0.7HCOOH+0.3DMF的分析计算值：C，56.04；H，5.42；N，16.08；实测值：C，55.84；H，5.34；N，16.11。
5.32 1-[3-(1H-苯并咪唑-2-基)-4-氯-苯基]-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲
![]()
将3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.40g，1.1mmol)和CDI(0.21g，1.3mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室温下搅拌18小时。在室温下，向混合物中加入3-(1H-苯并咪唑-2-基)-4-氯-苯胺(0.32g，1.3mmol)，在100℃搅拌混合物18小时。向混合物中加入水(25mL)和乙醚(20mL)。在室温下搅拌混合物2小时。倾出溶剂。用制备型HPLC纯化固体，得到1-[3-(1H-苯并咪唑-2-基)-4-氯-苯基]-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲，为白色固体(130mg，产率22％)：HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，20/80CH3CN/0.1％H3PO4，4.44分钟(99.2％)；mp：275-277℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.90-2.10(m，1H，CHH)，2.23-2.46(m，1H，CHH)，2.54-2.68(m，1H，CHH)，2.80-3.02(m，1H，CHH)，4.31(d，J＝17.4Hz，1H，CHH)，4.37-4.51(m，3H，CHH，CH2)，5.11(dd，J＝5.0、13.3Hz，1H，NCH)，6.89(t，J＝5.9Hz，1H，NH)，7.23(d，J＝4.5Hz，2H，Ar)，7.40-7.76(m，7H，Ar)，8.07(d，J＝2.5Hz，1H，Ar)，9.02(s，1H，NH)，10.98(s，1H，NH)，12.64(br.s.，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.39，31.10，42.75，47.02，51.48，111.62，118.88，120.11，120.62，121.55，121.83，122.56，122.85，126.85，129.79，130.23，130.35，134.56，139.56，142.29，143.00，144.58，149.12，154.96，162.96，167.86，170.91，172.76；LCMS MH＝543，545；C28H23N6O4Cl+3H2O的分析计算值：C，56.33；H，4.90；N，14.08；实测值：C，56.73；H，4.67；N，14.09。
5.33 N-(3-氯-4-甲基-苯基)-N'-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-胍盐酸盐
![]()
步骤1：3-氯-4-甲基-苯基)-硫脲
向2-氯-4-异硫氰酰-1-甲基-苯(2gm，10.89mmol)在无水乙腈(10mL)中的溶液中加入NH3的MeOH溶液(2N，6mL)，在室温下搅拌混合物2小时。向反应混合物中加入水，引起沉淀的形成。将反应浆体在真空中浓缩到～1/4体积，过滤收集白色固体，并在真空炉中干燥，得到2.1gm(产率96％)3-氯-4-甲基-苯基)-硫脲，为白色固体，其无需进一步纯化而被使用。LCMS：MH＝201。
步骤2：1-(3-氯-4-甲基-苯基)-2-甲基-异硫脲氢碘酸盐
向3-氯-4-甲基-苯基)-硫脲(2.1gm，10.46mmol)在MeOH(15mL)中的浆液中，加入碘甲烷(2.5mL，40mmol)，在室温下搅拌混合物4小时。将反应混合物浓缩至干燥，向残余物中加入一小部分二氯甲烷，在真空中除去挥发物。该过程再重复两次，以提供黄褐色泡沫，将其在真空炉中干燥过夜，得到3.5gm(产率98％)粗制的(2x).1-(3-氯-4-甲基-苯基)-2-甲基-异硫脲氢碘酸盐。发现该材料高度吸湿，将其贮存在干燥器中供进一步使用。LCMS：MH＝215。
步骤3：N-(3-氯-4-甲基-苯基)-N'-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-胍盐酸盐
将1-(3-氯-4-甲基-苯基)-2-甲基-异硫脲氢碘酸盐(597mg，1.74mmol)、3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(560mg，1.52mmol)和DIEA(1.1mL，6.06mmol)在配备了搅棒的微波小瓶中合并到无水DMF(5mL)中。密封小瓶，在120℃微波辐照30分钟。向反应混合物中加入另外100mg 3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐，反应在120℃辐照30分钟。该过程再重复两次，以消耗全部的1-(3-氯-4-甲基-苯基)-2-甲基-异硫脲氢碘酸盐起始材料，因为LCMS发现其与所需产物共洗脱。用醋酸酸化反应混合物，在真空中蒸发挥发物。残余物在最小量的DMF中溶解，过滤，并使用C-18制备型HPLC纯化。向包含所需产物的合并部分中加入1N HCl，在真空中除去溶剂。将获得的白色固体在最小量的水中溶解并冻干，得到180mg(产率27％)的N-(3-氯-4-甲基-苯基)-N'-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-胍盐酸盐：HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1ml/分钟，240nm，20/80CH3CN/0.1％H3PO4，3.73分钟(97.4％)；mp：>400℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.91-2.09(m，1H，CHH)，2.33(s，3H，CH3)，2.41(dd，J＝4.3、13.2Hz，1H，CHH)，2.54-2.68(m，1H，CHH)，2.80-3.05(m，1H，CHH)，4.21-4.56(m，2H，CH2)，4.66(d，J＝5.7Hz，2H，CH2)，5.13(dd，J＝4.9、13.2Hz，1H，CH)，7.14(dd，J＝1.9、8.1Hz，1H，Ar)，7.34(d，J＝1.9Hz，1H，Ar)，7.42(d，J＝8.1Hz，1H，Ar)，7.51(d，J＝7.9Hz，1H，Ar)，7.61(s，1H，Ar)， 7.76(d，J＝7.7Hz，1H，Ar)，7.98(br.s.，1H，NH)，8.62(br.s.，1H，NH)，10.16(s，1H，NH)，11.00(s，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ21.04，24.19，32.95，46.33，49.85，54.03，124.13，125.48，125.79，127.28，129.17，132.57，134.20，135.82，135.95，136.64，143.17，144.68，156.84，170.94，173.00，175.82；LCMS：MH＝440、442；C22H23Cl2N5O3+2.3H2O+1.9HCl+0.2HCOOH的分析计算值：C，44.72；H，5.05；N，11.74；Cl，23.19；实测值：C，44.55；H，4.71；N，11.48；Cl，22.92。
5.34 1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(3-羟基-4-甲基苯基)脲
![]()
步骤1：将2-甲基-5-硝基酚(3.0g，19.6mmol)、TBS-Cl(3.0g，19.6mmol)和TEA(2.2g，21.6mmol)在DMF(30mL)中的混合物在环境温度下搅拌16小时。在真空中蒸发混合物。残余物在乙酸乙酯(100mL)中溶解，用水(3×100mL)洗涤，并在真空中蒸发。残余物用己烷-乙酸乙酯梯度进行色谱层析，提供了4.7g的叔丁基二甲基(2-甲基-5-硝基苯氧基)硅烷，产率91％；1H NMR(DMSO-d6)δ0.27(s，6H)，1.01(s，9H)，2.27(s，3H)，7.47(d，J＝8.5Hz，1H)，7.52(d，J＝2.3Hz，1H)，7.78(dd，J＝2.3、8.3Hz，1H)。
步骤2：将来自步骤1的产物(4.7g，17.6mmol)和10％Pd-C(1.0g，50％湿润)在乙酸乙酯中的混合物在50psi的氢气下氢化16小时。然后通过硅藻土过滤混合物，在真空中蒸发滤液，提供了3.9g的-(叔丁基二甲基硅氧基)-4-甲基苯胺，产率94％；1H NMR(DMSO-d6)δ0.17(s，6H)，0.97(s，9H)，1.96(s，3H)，4.81(s，2H)，6.00-6.21(m，2H)，6.74(d，J＝7.9Hz，1H)。
步骤3：将3-(5-(氨基甲基)-1-氧异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.74g，2.0mmol)和CDI(0.32g，2.0mmol)在DMF(30mL)中的混合物在室温下搅拌3小时，然后加入来自步骤2的产物(0.47g，2.0mmol)。将混合物加热到70℃持续16小时。然后将混合物冷却至室温，并用1N HCl(30mL)淬灭。得到的混合物在真空中蒸发，残余物通过制备型HPLC纯化，使用乙腈-水梯度，提供了0.38g的1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(3-羟基-4-甲基苯基)脲，为白色固体，产率46％；HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1ml/分钟，240nm，25/75CH3CN/0.1％H3PO4，4.80分钟(100.00％)；mp 273-275℃；1H NMR(DMSO-d6)δ2.02(s，4H)，2.27-2.47(m，1H)，2.63(m.，1H)，2.80-3.04(m，1H)，4.17-4.59(m，4H)，5.11 (dd，J＝4.7、13.0Hz，1H)，6.47-6.72(m，2H)，6.86(d，J＝7.9Hz，1H)，7.04(s，1H)，7.44(d，J＝7.7Hz，1H)，7.51(s，1H)，7.69(d，J＝7.7Hz，1H)，8.39(s，1H)，9.13(s，1H)，10.98(s，1H)；13C NMR(DMSO-d6)δ15.35，22.49，31.20，42.74，47.12，51.58，104.76，108.45，116.48，121.86，122.91，126.91，130.19，130.26，138.92，142.36，144.96，155.18，155.29，167.95，170.99，172.85；LCMS MH＝423；C22H22N4O5的分析计算值：C，62.55；H，5.25；N，13.26；实测值：C，62.27；H，5.15；N，13.18。
5.35 1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(4-羟基-3-甲基苯基)脲
![]()
步骤1：将2-甲基-4-硝基酚(3.0g，19.6mmol)、TBS-Cl(3.0g，19.6mmol)和TEA(2.2g，21.6mmol)在DMF(30mL)中的混合物在环境温度下搅拌16小时。混合物在10％碳酸氢钠水溶液(100mL)和乙酸乙酯(100mL)之间分配，用乙酸乙酯(100mL)萃取水层。合并的有机层用10％碳酸氢钠水溶液(3×100mL)和水(100mL)洗涤，在真空中蒸发。残余物用己烷-乙酸乙酯梯度进行色谱层析，提供了3.9g的叔丁基二甲基(2-甲基-4-硝基苯氧基)硅烷，产率75％；1H NMR(DMSO-d6)δ0.29(s，6H)，1.00(s，9H)，2.24(s，3H)，7.03(d，J＝8.9Hz，1H)，8.02(dd，J＝2.8、8.9Hz，1H)，8.12(d，J＝2.5Hz，1H)。
步骤2：将来自步骤1的产物(3.9g，14.6mmol)和10％Pd-C(0.5g，50％湿润)在乙酸乙酯中的混合物在50psi的氢气下氢化18小时。通过硅藻土过滤混合物，蒸发滤液，提供了3.2g的4-(叔丁基二甲基硅氧基)-3-甲基苯胺，产率93％。
步骤3：将3-(5-(氨基甲基)-1-氧异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.74g，2.0mmol)和CDI(0.32g，2.0mmol)在DMF(30mL)中的混合物在室温下搅拌3小时，然后加入来自步骤2的产物(0.47g，2.0mmol)。将混合物加热到70℃持续30小时。然后将混合物冷却至室温，并用1N HCl(30mL)淬灭，引起固体沉淀。该固体通过色谱用硅胶柱纯化，使用二氯甲烷-甲醇梯度，提供了0.59g的1-(4-(叔丁基二甲基硅氧基)-3-甲基苯基)-3-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)脲，为灰白色固体，产率55％；1H NMR(DMSO-d6)δ0.16(s，6H)，0.97(s，9H)，1.88-2.06(m，1H)，2.10(s，3H)，2.25-2.47(m，1H)，2.53-2.70(m，1H)，2.80-3.02(m，1H)，4.31(d，J＝17.4Hz，1H)，4.36-4.52(m，3H)，5.11(dd，J＝4.9、13.2Hz，1H)，6.51-6.74(m， 2H)，7.08(dd，J＝2.5、8.6Hz，1H)，7.18(d，J＝2.3Hz，1H)，7.43(d，J＝7.7Hz，1H)，7.50(s，1H)，7.69(d，J＝7.7Hz，1H)，8.35(s，1H)，10.98(s，1H)。
步骤4：向来自步骤3的产物(0.5g，0.9mmol)在二氯甲烷(20mL)中的溶液中加入含2N HCl的乙醚(2mL)。将混合物在环境温度下搅拌16小时。沉淀的产物通过过滤分离，用二氯甲烷(20mL)冲洗，在真空中干燥，提供了0.4g的1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(4-羟基-3-甲基苯基)脲，为灰白色固体，定量产率；HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1ml/分钟，240nm，30/70CH3CN/0.1％H3PO4，1.88分钟(96.94％)；mp210-212℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.94-2.18(m，4H)，2.30-2.51(m，1H)，2.58-2.72(m，1H)，2.87-3.06(m，1H)，4.25-4.56(m，4H)，5.15(dd，J＝5.0、13.3Hz，1H)，6.67(d，J＝8.5Hz，1H)，7.02(dd，J＝2.5、8.6Hz，1H)，7.12(d，J＝2.3Hz，1H)，7.47(d，J＝7.7Hz，1H)，7.54(s，1H)，7.73(d，J＝7.7Hz，1H)，8.32(br.s.，1H)，11.02(s，1H)；13C NMR(DMSO-d6)δ16.15，22.51，31.20，42.77，47.12，51.56，114.47，117.11，121.32，121.83，122.88，123.61，126.86，130.22，131.72，142.35，145.17，150.10，155.58，170.99，172.85；LCMS MH＝423；C22H22N4O5+0.25CH2Cl2的分析计算值：C，60.23；H，5.11；N，12.63；实测值：C，60.14；H，5.43；N，12.54。
5.36 1-(4-叔丁基-环己基)-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲
![]()
在40℃，向4-叔丁基-环己胺(0.20g，1.28mmol)在DMF(5mL)中的搅拌悬浮液中加入CDI(0.23g，1.40mmol)。将混合物搅拌15分钟，接着加入3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.47g，1.28mmol)。1.5小时后，停止加热，将混合物在室温下搅拌过夜。蒸发溶剂，残余物通过制备型HPLC纯化，得到产物，为白色固体(0.076g，产率13％)：HPLC，Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1ml/分钟，240nm，35/65CH3CN/0.1％H3PO4，13.37分钟(44.7％)，14.68分钟(54.3％)；mp，182-184℃；1H NMR(DMSO-d6)δ0.83(s，9H，CH3，CH3，CH3)，0.90-1.21(m，4Η，CH2，CH2)，1.30-1.58(m，2Η，CΗH，CHH)，1.61-1.78(m，2Η，CHH，CHH)，1.87(br.s.，1Η，CHH)，1.95-2.06(m，1Η，CHH)，2.28-2.47(m，1Η，CHH)，2.63(br.s.，1Η，CHH)，2.83-3.00(m，1Η，CHH)，3.78&3.27 (2s，1Η，CH)，4.23-4.50(m，4Η，CH2，CH2)，5.11(dd，J＝5.0、13.1Hz，1H，NCH)，5.79-6.12(m，1Η，NH)，6.25-6.44(m，1Η，NH)，7.38(t，J＝6.8Hz，1H，ArH)，7.45(d，J＝6.2Hz，1H，ArH)，7.67(dd，J＝4.1、7.6Hz，1H，ArH)，10.99(s，1Η，NH)；(注：1H NMR显示约55％/45％的异构体比)；13C NMR(DMSO-d6)δ21.33，22.49，25.95，27.38，27.45，31.02，31.20，32.06，32.26，33.76，42.87，43.43，46.81，47.10，47.42，48.69，51.56，121.76，121.88，122.83，122.90，126.81，126.88，130.11，130.19，142.29，142.35，145.36，145.52，157.35，167.98，170.99，172.85。LC/MS MH+＝455；C25H34N4O4+0.7H2O的分析计算值：C，64.27；H，7.64；N，11.99；实测值：C，63.98；H，7.98；N，11.92。
5.37 1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-(4-甲基-环己基)-脲
![]()
在40℃，向4-甲基-环己胺(顺式/反式异构体的混合物，0.21g，1.86mmol)在DMF(10mL)中的搅拌悬浮液中加入CDI(0.33g，2.04mmol)。将混合物搅拌15分钟，接着加入3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.69g，1.86mmol)。1.5小时后，停止加热，将混合物在室温下搅拌过夜。蒸发溶剂，残余物通过制备型HPLC纯化，得到产物，为白色固体(0.14g，产率18％)：HPLC，Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1ml/分钟，240nm，25/75CH3CN/0.1％H3PO4，11.33分钟(59.1％)，12.41分钟(39.7％)；mp，223-225℃；1H NMR(DMSO-d6)δ0.81-0.93(m，3H，CH3)，0.95-1.35(m，3Η，CHH，CΗH，CHH)，1.37-1.57(m，4Η，CHH，CΗH，CΗH，CH)，1.58-1.70(m，1Η，CHH)，1.73-1.88(m，1Η，CΗH)，1.92-2.07(m，1Η，CΗH)，2.30-2.47(m，1Η，CΗH)，2.54-2.67(m，1Η，CΗH)，2.83-3.00(m，1Η，CΗH)，3.20-3.75(m，1Η，CH)，4.21-4.51(m，4Η，CH2，CH2)，5.11(dd，J＝5.0、13.1Hz，1H，NCH)，5.78-6.11(m，1Η，NH)，6.24-6.40(m，1Η，NH)，7.34-7.42(m，1Η，ArH)，7.42-7.50(m，1Η，ArH)，7.63-7.72(m，1Η，ArH)，10.98(s，1Η，NH)；(注：1H NMR显示约60％/40％的异构体比)；13C NMR(DMSO-d6)δ21.47，22.17，22.49，29.42，29.77，30.42，31.20，31.50，33.28，33.73，42.86，44.54，47.09，48.37，51.56，121.78，122.87，126.81，130.16，142.33，145.44，145.52，157.33，167.98，170.99，172.85；LC/MS MH+＝413；C22H28N4O4+0.4H2O的分析计算值：C，63.23； H，6.90；N，13.41；实测值：C，62.93；H，6.92；N，13.09。
5.38 1-(3-二乙基氨基-丙基)-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲，甲酸盐
![]()
在0℃，向氯甲酸对硝基苯酯(202mg，1mmol)在CH3CN(5mL)中的溶液中滴加N,N-二乙基-丙烷-1,3-二胺(130mg，1mmol)和DIPEA(0.082mL，1mmol)在CH3CN(5mL)中的溶液。混合物在0℃搅拌10分钟。加入3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.37g，1mmol)，接着加入另外的DIPEA(0.082mL，1mmol)。让混合物升温至室温，并在室温下搅拌过夜。向混合物中加入1N HCl(15mL)并过滤。得到的固体用制备型HPLC纯化，得到产物，为灰白色固体(280mg，产率65％)：HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，5分钟内5％梯度至100％，CH3CN/0.1％H3PO4，4.46分钟(97％)；mp：90-92℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.01(t，J＝7.1Hz，6H，CH3，CH3)，1.58(quin，J＝7.1Hz，2H，CH2)，1.94-2.06(m，1H，CHH)，2.39(qd，J＝4.5、13.2Hz，1H，CHH)，2.55-2.73(m，7H，CH2，CH2，CH2，CHH)，2.83-2.99(m，1H，CHH)，3.05(d，J＝5.3Hz，2H，CH2)，4.15-4.56(m，4H，CH2，CH2)，5.10(dd，J＝5.1、13.4Hz，1H，NCH)，6.17(br.s.，1H，NH)，6.60(s，1H，NH)，7.39(d，J＝7.7Hz，1H，Ar)，7.45(s，1H，Ar)，7.67(d，J＝7.9Hz，1H，Ar)，8.25(br.s.，1H，HCOOH)，10.98(br.s.，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ10.25，22.49，26.14，31.20，37.39，42.93，46.11，47.09，51.56，121.73，122.81，126.76，130.13，142.27，145.54，158.18，167.99，171.01，172.86；LCMS MH+＝430；C23H33N5O6+2H2O的分析计算值：C，54.00；H，7.29；N，13.69；实测值：C，54.04；H，6.92；N，13.63。
5.39 1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-(4-甲基-四氢-吡喃-4-基)-脲
![]()
在0℃，向氯甲酸对硝基苯酯(202mg，1mmol)在CH3CN(5mL)中的溶液中滴加4-甲基-四氢-吡喃-4-基胺(150mg，1mmol)和DIPEA(0.082mL，1mmol)在CH3CN(5mL)中的溶液。混合物在0℃搅拌10分钟。加入3-(5-氨基 甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.37g，1mmol)，接着加入另外的DIPEA(0.082mL，1mmol)。让混合物升温至室温，并在室温下搅拌过夜。向混合物中加入1N HCl(15mL)并过滤。得到的固体用制备型HPLC纯化，得到固体。固体从DMF(1mL)和水(1mL)中重结晶，得到产物，为白色固体(55mg，产率12％)：HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，5分钟内5％梯度至100％，CH3CN/0.1％H3PO4，5.02分钟(98％)；mp：158-160℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.29(s，3H，CH3)，1.40-1.58(m，2H，CHH)，1.84-1.96(m，2H，CHH，CHH)，1.99(s，1H，CHH)，2.30-2.45(m，1H，CHH)，2.55-2.65(m，1H，CHH)，2.84-2.99(m，1H，CHH)，3.44-3.68(m，4H，CH2，CH2)，4.22-4.58(m，4H，CH2，CH2)，4.95-5.29(m，1H，NCH)，5.85(s，1H，NH)，6.08-6.52(m，1H，NH)，7.33-7.42(m，1H，Ar)，7.45(s，1H，Ar)，7.68(d，J＝7.6Hz，1H，Ar)，10.98(s，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.48，27.00，31.20，36.93，42.58，47.10，48.85，51.56，62.92，120.99，121.67，122.88，126.69，142.35，145.48，157.22，167.98，171.01，172.86；LCMS MH+＝415；C21H26N4O5+0.5H2O的分析计算值：C，59.56；H，6.43；N，13.23；实测值：C，59.34；H，6.35；N，13.21。
5.40 1-(1-苯甲基-哌啶-4-基)-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲
![]()
在0℃，向氯甲酸对硝基苯酯(202mg，1mmol)在CH3CN(5mL)中的溶液中滴加4-氨基-苯甲基-哌啶(190mg，1mmol)和DIPEA(0.082mL，1mmol)在CH3CN(5mL)中的溶液。混合物在0℃搅拌10分钟。加入3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.37g，1mmol)，接着加入另外的DIPEA(0.082mL，1mmol)。让混合物升温至室温，并在室温下搅拌过夜。向混合物中加入1N HCl(15mL)并过滤。得到的固体用制备型HPLC纯化，得到胶质固体。该固体在DMF(1mL)中溶解，滴加饱和NaHCO3溶液，直到开始出现沉淀。让其在室温下静置30分钟，过滤固体，得到产物，为白色固体(55mg，产率12％)：HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，5分钟内5％梯度至100％，CH3CN/0.1％H3PO4，4.64分钟(99％)；mp：208-210℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.21-1.52(m，2H，CHH)，1.63-1.82(m，2H，CHH)，1.89-2.14(m，3H，CHH，CHH，CHH)，2.39(d，J＝13.6Hz，1H，CHH)，2.55-2.65(m，1H，CHH)，2.64-2.75(m， 2H，CHH，CHH)，2.83-3.02(m，1H，CHH)，3.37-3.41(m，1H，CH)，3.43(s，2H，CH2)，4.21-4.50(m，3H，CH2，CH2)，5.10(dd，J＝5.0、13.3Hz，1H，NCH)，5.94(d，J＝7.9Hz，1H，NH)，6.34(t，J＝6.0Hz，1H，NH)，7.13-7.48(m，6H，Ar)，7.66(d，J＝7.6Hz，1H，Ar)，10.97(s，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.49，31.20，32.46，42.86，46.43，47.09，51.55，51.90，62.19，121.78，122.84，126.79，128.10，128.69，130.13，138.64，142.29，145.44，157.32，167.96，170.99，172.85；LCMS MH+＝490；C21H26N4O5+0.5H2O的分析计算值：C，59.56；H，6.43；N，13.23；实测值：C，59.34；H，6.35；N，13.21。
5.41 1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-哌啶-4-基-脲盐酸盐
![]()
步骤1：将3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(1.25g，3.39mmol)和CDI(0.61g，3.73mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。然后加入4-氨基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.68g，3.39mmol)，将混合物搅拌过夜。通过制备型HPLC纯化混合物，得到4-{3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲基}-哌啶-1-羧酸叔丁酯，为灰白色固体(0.46g，产率27％)。产物无需进一步纯化而被用于下一步骤中。ΗPLC，Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1ml/分钟，240nm，30/70CΗ3CN/0.1％H3PO4，4.35分钟(99.4％)。
步骤2：将4-{3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲基}-哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.45g，0.90mmol)在含2M盐酸的乙醚(30mL，9.01mmol)中的混合物搅拌过夜。过滤白色的悬浮液，用乙醚洗涤。得到的白色固体在50℃在乙腈(80mL)中搅拌过夜。过滤悬浮液，用乙腈洗涤，真空干燥，得到产物，为白色固体(0.34g，产率86％)：HPLC：Waters Xterra C18，5μm，3.9×150mm，1ml/分钟，240nm，5分钟内5/95CH3CN/0.1％HCOONH4梯度至95/5，保持5分钟，3.10分钟(95.1％)；mp，340-342℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.46-1.65(m，2H，CHH，CHH)，1.85-2.05(m，3Η，CHH，CΗH，CHH)，2.30-2.47(m，1Η，CHH)，2.55-2.67(m，1Η，CHH)，2.83-3.03(m，3Η，CHH，CΗH，CΗH)，3.15-3.27(m，2Η，CΗH，CΗH)，3.59-3.77(m，1Η，CH)，4.23-4.51(m，4Η，CH2，CH2)，5.11(dd，J＝4.9、13.2Hz，1Η，NCH)，6.40-6.57(m，2Η，NH，NH)，7.39(d，J＝7.9Hz，1H，ArH)， 7.45(s，1Η，ArH)，7.67(d，J＝7.7Hz，1H，ArH)，8.75(br.s.，2Η，ClH2N)，10.98(s，1Η，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.49，28.92，31.20，41.96，42.82，43.95，47.09，51.55，121.76，122.84，126.76，130.14，142.29，145.35，157.32，167.98，171.01，172.87；LC/MS MH+＝400；C20H26N5O4Cl+1.7H2O的分析计算值：C，51.49；H，6.35；N，15.01；Cl，7.60；实测值：C，51.18；H，6.15；N，14.90；Cl，7.51。
5.42异吲哚啉化合物
![]()
上面显示的异吲哚啉化合物使用了如5.15节中所述的步骤。
5.43 4-{3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲基}-环己烷羧酸酰胺
![]()
在室温下，向氯甲酸对硝基苯酯(200mg，1mmol)在CH3CN(5mL)中的溶液中滴加4-氨基-环己烷羧酸酰胺(210mg，1mmol)和DIPEA(0.3mL，2mmol)的CH3CN溶液(5mL)。将混合物在室温下搅拌10分钟。加入3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.37g，1mmol)，接着加入另外的DIPEA(0.15mL，1mmol)。将混合物在环境温度下搅拌过夜。然后过滤混合物。滤液用制备型HPLC纯化，得到4-{3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲基}-环己烷羧酸酰胺，为白色固体(130mg，产率30％)。HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，5分钟内5％梯度至95％，CH3CN/0.1％H3PO4：tR＝4.78min(92％)；mp：195-197℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.32-1.73(m，8H，CHH+CHH+CHH+CHH)，1.97(br.S.，1H，CHH)，2.09-2.21(m，1H，CHH)，2.40(d，J＝13.4Hz，1H，CHH)，2.62(br.S.，1H，CHH)，2.80-3.03(m，1H，CHH)，3.70(br.S.，1H，CHH)，4.18-4.58(m，4H，CH2+CH2)，5.11(dd，1H，CHN)，6.15(d，J＝7.9Hz，1H，NH)，6.38(t，J＝5.9Hz，1H，NH)，6.67(br.S.，1H，NH)，7.19(br.S.，1H，NH)，7.38(d，J＝7.7Hz，1H，Ar)，7.45(s，1H，Ar)，7.67(d，J＝7.9Hz，1H，Ar)，10.98(br.S.，1H，NH)；13C NMR (DMSO-d6)δ0.03，22.42，24.06，24.19，29.73，41.73，42.79，44.16，47.03，51.49，121.68，122.80，126.71，130.09，142.26，145.37，157.28，163.37，167.89，170.92，172.78，176.83；LC-MS：442；C22H27N5O5+0.5HCOOH+1H2O+0.2CH3CN的分析计算值：C，56.05；H，6.21；N，14.84；实测值：C，55.70；H，6.46；N，14.78。
5.44 1-(6-氯-吡啶-3-基)-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲
![]()
向3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.37g，1mmol)在DMF(3mL)中的悬浮液中加入羰基二咪唑(162mg，1mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜。向混合物中加入5-氨基-2-氯-吡啶(128.5mg，1mmol)，并在80℃加热混合物6小时。然后减压浓缩混合物，将得到的混合物用硅胶柱纯化，用二氯甲烷和甲醇洗脱，得到11-(6-氯-吡啶-3-基)-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲，为灰白色固体(20mg，产率5％)：HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，5分钟内5％梯度至95％，CH3CN/0.1％H3PO4，tR＝5.43分钟(97％)；mp：224-226℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.89-2.09(m，1H，CHH)，2.29-2.44(m，1H，CHH)，2.54-2.66(m，1H，CHH)，2.83-3.04(m，1H，CHH)，4.20-4.57(m，4H，CH2，CH2)，5.11(dd，J＝5.0、13.3Hz，1H，NCH)，6.99(t，J＝6.2Hz，1H，NH)，7.37(d，J＝8.5Hz，1H，Ar)，7.45(d，J＝7.7Hz，1H，Ar)，7.52(s，1H，Ar)，7.70(d，J＝7.7Hz，1H，Ar)，7.95(dd，J＝2.8、8.7Hz，1H，Ar)，8.42(d，J＝2.3Hz，1H，Ar)，9.03(s，1H，NH)，10.98(s，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.49，31.18，42.86，47.12，51.58，121.91，122.94，123.89，126.92，128.37，130.42，136.75，139.04，142.39，144.50，154.97，167.93，171.01，172.86，215.61；LC-MS：428；C20H18N5O4Cl+0.1H2O的分析计算值C，55.91；H，4.27；N，16.30；Cl，8.25；实测值：C，56.31；H，4.51；N，15.92；Cl，8.47。
5.45 1-[4-(2,4-二氟-苯基)-噻唑-2-基]-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲
![]()
将3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.40g，1.1mmol)和CDI(0.18g，1.1mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室温下搅拌18小时。在室温下向混合物中加入4-(2,4-二氟-苯基)-噻唑-2-基胺(0.23g，1.1mmol)，在100℃搅拌混合物2天。向混合物中加入水(25mL)和乙酸乙酯(20mL)。在室温下搅拌混合物2小时。过滤悬浮液，固体用水(20mL)、乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)洗涤，得到固体。该固体用制备型HPLC纯化，得到1-[4-(2,4-二氟-苯基)-噻唑-2-基]-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲，为白色固体(70mg，产率13％)：HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，40/60CH3CN/0.1％H3PO4，6.43分钟(97.7％)；mp：264-266℃；1H NMR(DMSO-d6)1.93-2.05(m，1H，CHH)，2.30-2.45(m，1H，CHH)，2.55-2.68(m，1H，CHH)，2.82-3.00(m，1H，CHH)，4.32(d，J＝17.4Hz，1H，CHH)，4.41-4.54(m，3H，CH2，CHH)，5.11(dd，J＝5.1、13.2Hz，1H，NCH)，7.09-7.24(m，2H，Ar，NH)，7.28-7.41(m，2H，Ar)，7.46(d，J＝7.7Hz，1H，Ar)，7.53(s，1H，Ar)，7.71(d，J＝7.9Hz，1H，Ar)，7.93-8.10(m，1H，Ar)，10.85(s，1H，NH)，10.98(s，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)22.48，31.18，42.94，47.12，51.57，104.54(t，JC-F＝26.4Hz)，110.67(d，JC-F＝14.3Hz)，111.81(dd，JC-F＝3.3、20.9Hz)，118.91(dd，JC-F＝2.8、11.6Hz)，121.95，123.03，126.95，130.29(dd，JC-F＝4.4、9.9Hz)，130.49，141.44，142.45，143.95，154.02，159.48(dd，JC-F＝252.2、12.1Hz)，159.36，161.24(dd，JC-F＝246.9、13.2Hz)，167.88，170.98，172.85；LCMS MH＝512；C24H19N5O4F2S的分析计算值：C，56.36；H，3.74；N，13.69；实测值：C，56.16；H，3.80；N，14.07。
5.46 6-{3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲基}-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸叔丁酯
![]()
将3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(1.11g，3.0mmol)和1,1'-羰基二咪唑(535mg，3.3mmol)在无水DMF(20mL)中悬浮，将混合物在室温下搅拌24小时。在搅拌的同时，将一部分反应混合物(6.7mL，～1mmol)转移到包含6-氨基-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(273mg，1.1mmol)的小瓶中。将得到的混合物在室温下搅拌过夜，通过LCMS监测反应进展。48小时后，向反应混合物中转移另外的6-氨基-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-羧酸叔丁酯(50mg，0.2mmol)，继续搅拌另外24小时。用酸性的酸 和水酸化反应混合物。在真空中除去挥发物，将残余物在DMF中溶解，使用C-18制备型HPLC纯化，得到6-{3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲基}-3,4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸叔丁酯，为白色固体(290mg，产率53％)：HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1ml/分钟，240nm，40/60CH3CN/0.1％H3PO4，5.02分钟(96.5％)；mp：230-232℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.42(s，9H，(CH3)3)，1.90-2.11(m，1H，CHH)，2.23-2.47(m，1H，CHH)，2.60(d，J＝17.9Hz，1H，CHH)，2.70(t，J＝5.6Hz，2H，CH2)，2.81-3.06(m，1H，CHH)，3.51(t，J＝5.7Hz，2H，CH2)，4.18-4.58(m，6H，CH2，CH2，CH2)，5.11(dd，J＝4.9、13.2Hz，1H，CH)，6.72(t，J＝5.9Hz，1H，NH)，7.00(d，J＝8.3Hz，1H，Ar)，7.17(d，J＝8.1Hz，1H，Ar)，7.27(br.s.，1H，Ar)，7.44(d，J＝7.9Hz，1H，Ar)，7.51(s，1H，Ar)，7.69(d，J＝7.9Hz，1H，Ar)，8.56(s，1H，NH)，10.98(s，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.46，28.07，28.44，31.16，41.51，42.75，45.04，47.08，51.55，78.81，116.01，117.49，121.87，122.90，126.20，126.36，126.88，130.25，134.70，138.56，142.35，144.86，153.97，155.21，167.93，170.96，172.83；LCMS：MH＝548；C29H33N5O6+1.1H2O的分析计算值：C，61.39；H，6.25；N，12.34。实测值：C，61.38；H，6.11；N，12.29。
5.47具有式III的异吲哚啉化合物
![]()
具有式III的异吲哚啉化合物如方案1中所示制成。
方案1
![]()
向5-氨基甲基异吲哚啉酮戊二酰亚胺1(1.134mmol)在无水DMF(10mL)中的溶液中加入CS2CO3(406mg，1.248mmol)。搅拌5分钟后，加入适当的氯甲氧基羰基试剂2(1.248mmol)，得到的混合物在50℃搅拌过夜。用0.5N HCl中和反应混合物，然后让其在真空中浓缩至干燥。残余物通过制备型HPLC纯化，接着在标准条件下除去保护基团(如果必要的话)，以得到具有式III的化合物。
5.48 2,2-二甲基-丙酸3-{5-[3-(3-氯-4-甲基-苯基)-脲基甲基]-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基}-2,6-二氧-哌啶-1-基甲酯
![]()
向1-(3-氯-4-甲基-苯基)-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲(500mg，1.134mmol)在无水DMF(10mL)中的溶液中加入Cs2CO3(406mg，1.248mmol)。搅拌5分钟后，加入特戊酸氯甲酯(188mg， 1.248mmol)，将得到的混合物在50℃搅拌过夜。用0.5N HCl中和反应混合物，然后让其在真空中浓缩至干燥。将残余物在乙腈中溶解，缓慢加入水，引起沉淀形成。过滤收集固体，在DMF中溶解，用C-18制备型ΗPLC柱(50/50CΗ3CN/水)纯化。合并包含所需产物的部分，在真空中浓缩以除去大部分的CH3CN，然后冻干以提供产物，为白色固体(81mg，产率13％)：HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，55/45CH3CN/0.1％H3PO4，4.58分钟(97.2％)；mp：155-157℃；1H NMR(DMSO-d6)δ0.95-1.23(m，9H，tBu)，1.96-2.15(m，1H，CH)，2.23(s，3H，CH3)，2.31-2.47(m，1H，CH)，2.83(d，J＝16.6Hz，1H，CH)，3.00-3.22(m，1H，CH)，4.17-4.60(m，4H，CH2，CH2)，5.30(dd，J＝5.0、13.3Hz，1H，CH)，5.47-5.83(m，2H，CH2)，6.79(t，J＝5.9Hz，1H，CH2NH)，7.02-7.28(m，2H，Ar)，7.36-7.60(m，2H，Ar)，7.60-7.86(m，2H，Ar)，8.74(s，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ18.73，21.56，26.62，31.21，38.21，42.79，47.04，52.01，63.39，116.45，117.66，121.95，123.01，126.98，127.42，130.11，131.00，132.99，139.58，142.36，144.87，155.07，167.96，170.13，171.23，176.51；LCMS：MH+＝555、557；C28H31ClN4O6+0.2H2O的分析计算值：C，60.20；H，5.67；N，10.03；Cl，6.35；实测值：C，60.20；H，5.74；N，9.94；Cl，6.39。
5.49(3-(5-((3-(3-氯-4-甲基苯基)脲基)甲基)-1-氧异吲哚啉-2-基)-2,6-二氧哌啶-1-基)甲基哌啶-4-羧酸酯盐酸盐
![]()
向1-叔丁基4-(3-(5-((3-(3-氯-4-甲基苯基)脲基)甲基)-1-氧异吲哚啉-2-基)-2,6-二氧哌啶-1-基)甲基哌啶-1,4-二羧酸酯(300mg，0.44mmol，如先前实施例中所述获得)中加入含2N HCl的Et2O(15mL)。将浆体在室温下剧烈搅拌2小时。过滤固体，用大量Et2O洗涤，在真空炉中干燥过夜，得到(3-(5-((3-(3-氯-4-甲基苯基)脲基)甲基)-1-氧异吲哚啉-2-基)-2,6-二氧哌啶-1-基)甲基哌啶-4-羧酸酯盐酸盐，为白色固体(285mg，产率105％)：HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1ml/分钟，240nm，30/70CH3CN/0.1％H3PO4，3.26分钟(98.2％)；mp：234-236℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.62-1.81(m，2H，CHH，CHH)，1.87-2.01(m，2H，CHH，CHH)，2.02-2.16(m，1H，CHH)，2.16-2.29(m，3H，CH3)，2.32-2.47(m，1H，CHH)，2.59-2.76(m，1H，CHH)，2.77-2.99(m，3H，CHH，CHH，CHH)，3.00-3.28(m，3H，CHH， CHH，CHH)，4.15-4.66(m，4H，CH2，CH2)，5.26(dd，J＝4.9、13.2Hz，1H，CH)，5.55-5.80(m，2H，CH2O)，7.02(t，J＝5.9Hz，1H，NH)，7.09-7.29(m，2H，Ar)，7.45(d，J＝7.9Hz，1H，Ar)，7.53(s，1H，Ar)，7.62-7.82(m，2H，Ar)，8.41-8.96(m，2H，NH，NH)，9.09(s，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ18.73，21.46，24.31，31.24，37.30，42.00，42.73，47.20，52.09，63.40，116.31，117.50，121.91，122.99，126.97，127.27，130.09，130.99，132.96，139.69，142.38，144.94，155.21，167.96，170.19，171.29，172.20；LCMS：MH＝582、584；C29H33Cl2N5O6+1.6H2O+0.6HCl+0.2Et2O+0.4tBuCl的分析计算值：C，53.35；H，6.05；N，9.91；Cl，13.04。实测值：C，53.13；H，6.06；N，9.70；Cl，13.25。
5.50 1-叔丁基4-(3-(5-((3-(3-氯-4-甲基苯基)脲基)甲基)-1-氧异吲哚啉-2-基)-2,6-二氧哌啶-1-基)甲基哌啶-1,4-二羧酸酯
![]()
步骤1：1-叔丁基4-氯甲基哌啶-1,4-二羧酸酯
![]()
向1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-羧酸(3g，13.1mmol)在二氯甲烷(40mL)和水(50mL)中的混合物中加入NaHCO3(4.4g，52.3mmol)和四丁基硫酸氢铵(444mg，1.3mmol)。在0℃在冰浴中搅拌混合物～10分钟后，滴加含有氯硫酸氯甲酯(2.59g，15.7mmol)的10mL二氯甲烷。让反应混合物升温至室温，并剧烈搅拌过夜。将混合物转移到含二氯甲烷和水(各200mL)的分液漏斗中。有机层用另外的水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，并在真空中浓缩，得到1-叔丁基4-氯甲基哌啶-1,4-二羧酸酯，为澄清的油(3.5g，产率96％)。该材料无需进一步纯化而被使用。1H NMR(DMSO-d6)δ1.26-1.48(m，11H，CHH，CHH，tertBu)，1.83(dd，J＝3.0、13.2Hz，2H，CHH，CHH)，2.58-2.75(m，1H，CH)，2.74-2.99(m，2H，CHH，CHH)，3.61-4.02(m，2H，CHH，CHH)，5.87(s，2H，CH2O)；13C NMR(DMSO-d6)δ27.16，27.98，39.58，42.35，69.41，78.67，153.75，172.25；LCMS：MH＝278。
步骤2：1-叔丁基4-碘甲基哌啶-1,4-二羧酸酯
![]()
向NaI(1.6g，11.09mmol)在无水乙腈(8mL)中的溶液中滴加含有1-叔丁基4-氯甲基哌啶-1,4-二羧酸酯(2.8g，10.08mmol)的2mL乙腈。混合物变成深橙色，在室温下在黑暗中搅拌24小时。过滤反应混合物以除去NaCl，在真空中浓缩滤液。剩下的残余物在DCM和5％NaHSO3水溶液之间分离。用水和盐水洗涤有机层，干燥(Na2SO4)，并在真空中浓缩，得到1-叔丁基4-碘甲基哌啶-1,4-二羧酸酯，为淡黄色油(3.5g，94％)。用NMR在DMSO-d6表征的尝试导致了快速的分解。将该材料在黑暗中在-20℃贮存，以在进一步使用前使分解最小化。LCMS：MH＝370。
步骤3：1-叔丁基4-(3-(5-((3-(3-氯-4-甲基苯基)脲基)甲基)-1-氧异吲哚啉-2-基)-2,6-二氧哌啶-1-基)甲基哌啶-1,4-二羧酸酯
![]()
将1-(3-氯-4-甲基-苯基)-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲(400mg，0.907mmol)和NaH(43.5mg，1.82mmol)在无水DMF(15mL)中搅拌～10分钟。向混合物中加入1-叔丁基4-碘甲基哌啶-1,4-二羧酸酯(402mg，1.09mmol)，反应在黑暗中在室温下搅拌2小时。用醋酸(5mL)淬灭反应，并在真空中浓缩。残余物在水和EtOAc(各100mL)之间分配。分离的有机层用另外的水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，并在真空中浓缩，得到1.4gm淡黄色固体，其在DMF中溶解，用C-18制备型HPLC柱纯化。合并包含所需产物的部分，在真空中浓缩以除去大部分的CH3CN，然后冻干，以提供1-叔丁基4-(3-(5-((3-(3-氯-4-甲基苯基)脲基)甲基)-1-氧异吲哚啉-2-基)-2,6-二氧哌啶-1-基)甲基哌啶-1,4-二羧酸酯，为白色固体(380mg，理论产率49％，来自两个独立批次，其在制备型HPLC前合并)。HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1ml/分钟，240nm，55/45CH3CN/0.1％H3PO4，5.82分钟(99.4％)；mp：157-159℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.23-1.51(m，11H，(CH3)3，CHH，CHH)，1.68-1.84(m，2H，CHH，CHH)，1.97-2.13(m，1H，CHH)，2.15-2.31(m，4H，CH3，CH)，2.32-2.46(m，1H，CHH)，2.68-2.94(m，3H，CHH，CHH，CHH)，2.98-3.21(m，1H，CHH)，3.69-3.89(m， 2H，CHH，CHH)，4.20-4.57(m，4H，CH2，CH2)，5.27(dd，J＝5.0、13.3Hz，1H，CH)，5.53-5.73(m，2H，CH2O)，6.81(t，J＝5.9Hz，1H，NH)，7.06-7.24(m，2H，Ar)，7.45(d，J＝7.9Hz，1H，Ar)，7.53(s，1H，NH)，7.67(d，J＝1.9Hz，1H，Ar)，7.71(d，J＝7.7Hz，1H，Ar)，8.76(s，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ18.66，21.39，27.38，27.97，31.16，42.72，47.08，51.98，63.15，78.60，116.37，117.60，121.88，122.93，126.91，127.34，130.06，130.94，132.91，139.52，142.32，144.82，153.74，155.01，167.90，170.11，171.18，172.97(因为与DMSO-d6重叠，有两个来自哌啶环的13C信号没有观察到)；LCMS：MH＝682、684；C34H40ClN5O8+1.0H2O的分析计算值：C，58.32；H，6.05；N，10.00；Cl，5.06。实测值：C，58.41；H，5.93；N，9.96；Cl，5.22。
5.51 N-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-4-咪唑-1-基-苯甲酰胺
![]()
将4-咪唑-1-基-苯甲酸(0.21g，1.1mmol)和CDI(0.19g，1.2mmol)在DMF(14mL)中的混合物在40℃搅拌2小时。向悬浮液中加入3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.40g，1.1mmol)，将混合物在40℃搅拌20小时。向反应混合物中加入水(20mL)，在室温下搅拌混合物30分钟。过滤悬浮液，用水(20mL)、乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)洗涤固体，得到产物，为白色固体(340mg，产率71％)：HPLC：Waters Xterra C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，5分钟内5％梯度至95％，CH3CN/0.1％NH4OOCH，3.92分钟(99.0％)；mp：268-270℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.90-2.08(m，1H，CHH)，2.24-2.47(m，1H，CHH)，2.54-2.67(m，1H，CHH)，2.82-3.02(m，1H，CHH)，4.31(d，J＝17.4Hz，1H，CHH)，4.45(d，J＝17.4Hz，1H，CHH)，4.62(d，J＝5.7Hz，2H，CH2)，5.11(dd，J＝5.1、13.2Hz，1H，NCH)，7.14(s，1H，Ar)，7.49(d，J＝7.9Hz，1H，Ar)，7.56(s，1H，Ar)，7.71(d，J＝7.7Hz，1H，Ar)，7.77-7.91(m，3H，Ar)，8.05(d，J＝8.7Hz，2H，Ar)，8.39(s，1H，Ar)，9.24(t，J＝5.9Hz，1H，NH)，10.98(br.s.，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.49，31.20，42.79，47.13，51.58，117.78，119.59，122.10，122.97，127.08，129.02，130.20，130.39，132.07，135.60，138.99，142.40，143.83，165.25，167.92，170.99，172.86；LCMS：MH+＝444；C24H21N5O4+1.5H2O的分析计算值：C，61.27；H，5.14；N，14.89；实测值：C，61.03； H，4.93；N，14.75。
5.52 N-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-4-吗啉-4-基-苯甲酰胺
![]()
将4-吗啉-4-基-苯甲酸(0.22g，1.1mmol)和CDI(0.19g，1.2mmol)在DMF(4mL)中的混合物在40℃搅拌2小时。向悬浮液中加入3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.40g，1.1mmol)，在40℃搅拌混合物2小时。向反应混合物中加入水(20mL)，在室温下搅拌混合物30分钟。过滤悬浮液，用水(20mL)、乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)洗涤固体，得到产物，为白色固体(370mg，产率74％)：HPLC：Waters Xterra C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，5分钟内5％梯度至95％，CH3CN/0.1％NH4OOCH，1.10min(96.5％)；mp：275-277℃；1H NMR(DMSO-d6)δ2.00(d，J＝5.1Hz，1H，CHH)，2.38(m，1H，CHH)，2.54-2.66(m，1H，CHH)，2.81-3.01(m，1H，CHH)，3.15-3.28(m，4H，CH2，CH2)，3.65-3.80(m，4H，CH2，CH2)，4.30(d，J＝17.4Hz，1H，CHH)，4.44(d，J＝17.6Hz，1H，CHH)，4.56(d，J＝5.9Hz，2H，CH2)，5.10(dd，J＝5.1、13.2Hz，1H，NCH)，6.98(d，J＝9.1Hz，2H，Ar)，7.45(d，J＝7.9Hz，1H，Ar)，7.51(s，1H，Ar)，7.68(d，J＝7.9Hz，1H，Ar)，7.81(d，J＝8.9Hz，2H，Ar)，8.88(s，1H，NH)，10.98(s，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.46，31.15，42.54，47.07，47.33，51.53，65.86，113.40，121.96，122.86，123.72，126.99，128.50，130.24，142.31，144.38，152.95，165.87，167.91，170.96，172.83；LCMS：MH+＝463；C25H26N4O5+0.6H2O的分析计算值：C，63.44；H，5.79；N，11.84；实测值：C，63.19；H，5.42；N，12.09。
5.53 2-氨基-2-(4-氯苯基)-N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)乙酰胺盐酸盐
![]()
步骤1：向N-Boc-(4'-氯苯基)甘氨酸(1.16g，4.10mmol)在DMF(20mL)中的搅拌溶液中加入CDI(0.69g，4.30mmol)。将反应混合物加热到40℃维持2小时。然后加入3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二 酮盐酸盐(1.50g，4.10mmol)。在40℃维持3.5小时后，加入水(70mL)。过滤分离固体沉淀，用水(3×20mL)洗涤，并在真空中干燥，以提供1-(4-氯苯基)-2-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基氨基)-2-氧乙基氨基甲酸叔丁酯，为白色固体(1.77g，产率80％)。粗产物在下一步骤中使用而无需进一步纯化。
步骤2：向1-(4-氯苯基)-2-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基氨基)-2-氧乙基氨基甲酸叔丁酯(0.84g，1.50mmol)在EtOAc(35mL)中的搅拌溶液中加入HCl的稀释溶液(2N，乙醚中，30mL)。3天后，过滤分离固体，用乙醚(3×10mL)洗涤，并在真空中干燥。然后让固体在水(100mL)中溶解，用EtOAc(2×50mL)萃取。浓缩水相，残余物用乙醚研磨1小时。过滤分离产物，并在真空中干燥，得到产物，为白色固体(0.65g，产率88％)：HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，梯度：CH3CN/0.1％H3PO4：10分钟内10/90至90/10，90/10(5分钟)：4.91分钟(98.00％)；mp：255-257℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.93-2.09(m，1H，CHH)，2.39(qd，J＝4.4、13.1Hz，1H，CHH)，2.54-2.69(m，1H，CHH)，2.82-3.03(m，1H，CHH)，4.24(d，J＝17.4Hz，1H，CHH)，4.30-4.54(m，3H，CH2，CHH)，5.02-5.19(m，2H，CH，CH)，7.22-7.41(m，2H，Ar)，7.47-7.71(m，5H，Ar)，9.35(t，J＝5.9Hz，1H，NH)，10.99(s，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.48，31.20，42.26，47.03，51.59，54.80，121.89，121.96，122.85，126.97，128.80，129.81，130.49，133.02，133.99，142.27，142.70，167.22，167.82，170.98，172.85；LCMS：MH+＝441/443；C22H22N4O4Cl2+0.6H2O的分析计算值：C，54.13；H，4.79；N，11.48；实测值：C，53.89；H，4.82；N，11.60。
5.54 2-氨基-5-氯-N-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-苯甲酰胺
![]()
在氮气中，将DIPEA(1.46mL，8.12mmol)加入到3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(1.0g，2.71mmol)和5-氯-靛红酸酐3(0.535g，2.71mmol)在乙腈(10mL)中的搅拌混合物中。将反应混合物回流14小时，此时LCMS表明反应完成。向浆体中加入水，过滤收集固体，用另外的水洗涤，并在真空中干燥，以提供产物，为白色固体(860mg，产率74％)：HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，30/70CH3CN/0.1％H3PO4，6.30分钟(98.7％)；mp：242-244℃；1H NMR (DMSO-d6)δ1.79-2.16(m，1H，CHH)，2.29-2.46(m，1H，CHH)，2.60(d，J＝16.6Hz，1H，CHH)，2.74-3.08(m，1H，CHH)，4.08-4.69(m，4H，CH2，CH2)，5.11(dd，J＝4.9、13.2Hz，1H，CH)，6.60(s，2H，NH2)，6.73(d，J＝8.7Hz，1H，Ar)，7.18(dd，J＝2.4、8.8Hz，1H，Ar)，7.46(d，J＝7.9Hz，1H，Ar)，7.53(s，1H，Ar)，7.59-7.76(m，2H，Ar)，9.01(t，J＝5.8Hz，1H，NH)，10.98(s，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.51，31.20，42.44，47.12，51.56，114.81，117.71，118.12，122.07，122.91，127.07，127.33，130.35，131.60，142.38，143.92，148.78，167.67，167.92，170.98，172.85；LCMS：MH+＝427，429；C21H19ClN4O4+0.2H2O的分析计算值：C，58.73；H，4.32；N，13.05；实测值：C，58.68；H，4.26；N，12.80。
5.55异吲哚啉化合物
![]()
上面显示的异吲哚啉化合物如方案2中所示制成。
方案2
![]()
步骤1：在氮气中，将DIPEA(2.0mmol，2当量)加入到3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐3(0.26g，1.0mmol)和适当的硝基苯基异硫氰酸酯4(1.1mmol)在乙腈(10mL)中的搅拌混合物中。在室温下搅拌混合物12小时。加入1N HCl溶液(10mL)，过滤形成的固体，用另外的水洗涤，干燥，以提供取代的1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(2-硝基苯基)硫脲5。
步骤2：向该中间体5(1.0mmol)在EtOH(10mL)中的搅拌混合物中，加入亚硫酸氢钠(1.74g，10mmol)在水(10mL)中的溶液。将混合物加热到60℃ 持续1小时。将反应混合物浓缩至干燥，以生成化合物6，其直接在下一步骤中使用而无需进一步纯化。
步骤3：将化合物6悬浮在DMF中，并加入EDCI(0.19g，1.0mmol)。将混合物搅拌过夜，通过加入醋酸(2mL)，淬灭反应混合物。使用制备型HPLC纯化粗产物，以提供化合物7。
5.56异吲哚啉化合物
依照5.34-5.35节中提供的步骤，由4,5-二甲基-2-硝基酚开始制备1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(2-羟基-4,5-二甲基苯基)脲。
通用步骤A：将适当的羧酸起始材料(2.0mmol)和CDI(0.32g，2.0mmol)在DMF(30mL)中的混合物在40℃搅拌2小时，然后加入3-(5-(氨基甲基)-1-氧异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.74g，2.0mmol)，搅拌进行24小时。混合物在真空中蒸发，残余物通过制备型HPLC纯化。
使用通用步骤A，制备以下化合物：
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-2-(3-(吗啉基甲基)苯基)乙酰胺；
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-2-(3-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙酰胺；
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-2-(4-甲基-3-(吗啉基甲基)苯基)乙酰胺；
![]()
2-(4-氯-3-(吗啉基甲基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)乙酰胺；
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-2-(3-(2-吗啉基乙基)苯基)乙酰胺；
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-2-(4-甲基-3-(2-吗啉基乙基)苯基)乙酰胺；
![]()
2-(4-氯-3-(2-吗啉基乙基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)乙酰胺；
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-2-(4-(吗啉基甲基)苯基)乙酰胺；
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-2-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙酰胺；
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-2-(3-甲基-4-(吗啉基甲基)苯基)乙酰胺；
![]()
2-(3-氯-4-(吗啉基甲基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)乙酰胺；
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-2-(4-(2-吗啉基乙基)苯基)乙酰胺；
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-2-(3-甲基-4-(2-吗啉基乙基)苯基)乙酰胺；
![]()
2-(3-氯-4-(2-吗啉基乙基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)乙酰胺；
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-2-(4-(2-吗啉基乙氧 基)苯基)乙酰胺；
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-2-(3-甲基-4-(2-吗啉基乙氧基)苯基)乙酰胺；
![]()
2-(3-氯-4-(2-吗啉基乙氧基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)乙酰胺；
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-2-(3-(2-吗啉基乙氧基)苯基)乙酰胺；
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-2-(4-甲基-3-(2-吗啉基乙氧基)苯基)乙酰胺；
![]()
2-(4-氯-3-(2-吗啉基乙氧基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)乙酰胺；
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-4-(吗啉基甲基)苯甲酰胺；
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺；
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-甲基-4-(吗啉基甲基)苯甲酰胺；
![]()
3-氯-N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-4-(吗啉基甲基)苯甲酰胺；
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-4-(2-吗啉基乙基)苯甲酰胺；
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-甲基-4-(2-吗啉基乙基)苯甲酰胺；
![]()
3-氯-N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-4-(2-吗啉基乙基)苯甲酰胺；
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(吗啉基甲基)苯甲酰胺；
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺；
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-4-甲基-3-(吗啉基甲基)苯甲酰胺；
![]()
4-氯-N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(吗啉基甲基)苯甲酰胺；
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(2-吗啉基乙基)苯甲酰胺；
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-4-甲基-3-(2-吗啉基乙基)苯甲酰胺；
![]()
4-氯-N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(2-吗啉基乙基)苯甲酰胺；
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-4-(2-吗啉基乙氧基)苯甲酰胺；
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-甲基-4-(2-吗啉基乙氧基)苯甲酰胺；
![]()
3-氯-N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-4-(2-吗啉基乙氧基)苯甲酰胺；
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(2-吗啉基乙氧基)苯甲酰胺；
![]()
N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-4-甲基-3-(2-吗啉基乙氧基)苯甲酰胺；和
![]()
4-氯-N-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(2-吗啉基乙氧基)苯甲酰胺。
5.57 3-[5-(6-氯-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基甲基)-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基]-哌啶-2,6-二酮
![]()
将2-氨基-5-氯-N-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-苯甲酰胺(250mg，0.586mmol)悬浮在原甲酸三甲酯(3mL)中，并将混合物加热到85℃过夜。向反应中加入甲酸(100L)，加热混合物1小时。向反应中加入水，生成白色沉淀。过滤固体，用另外的水洗涤，并在真空炉中干燥，以提供产物，为白色固体(140mg，产率55％)：ΗPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，30/70CΗ3CN/0.1％H3PO4，7.20分钟(97.9％)；mp：308-310℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.90-2.08(m，1H，CHH)，2.37(qd，J＝4.3、13.2Hz，1H，CHH)，2.59(d，J＝17.6Hz，1H，CHH)，2.78-3.03(m，1H，CHH)，4.23-4.35(m，1H，NCHH)，4.38-4.51(m，1H，NCHH)，5.10(dd，J＝5.0、13.1Hz，1H，NCH)，5.33(s，2H，NCH2)，7.52(d，J＝7.7Hz，1H，Ar)，7.59(s，1H，Ar)，7.67-7.80(m，2H，Ar)，7.88(dd，J＝2.5、8.7Hz，1H，Ar)，8.09(d，J＝2.3Hz，1H，Ar)，8.66(s，1H，NCHN)，10.98(s，1H，CONH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.45，31.17，47.13，49.20，51.59，122.68，122.91，123.23，125.11，127.56，129.59，131.14，131.50，134.59，140.45，142.59，146.68，148.47，159.20，167.63，170.92，172.82；LCMS：MH+＝437、439；C22H17ClN4O4+0.4H2O的分析计算值：C，59.51；H，4.04；N，12.62；7.98，Cl；实测值：C，59.29；H，3.66；N，12.39；7.82，Cl。
5.58 6-氯-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-1H-喹唑啉-2,4-二酮
![]()
向2-氨基-5-氯-N-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-苯甲酰胺(250mg，0.586mmol)在乙腈(5mL)中的浆体中加入DIPEA(0.204mL，1.171mmol)，接着加入光气(0.62mL，1.171mmol)。将反应混合物升温至60℃。4小时后，加入另外的光气(0.31mL)，继续搅拌1小时，此 时LC-MS指示反应完成。用稀释HCl淬灭反应浆体，通过过滤收集白色固体，用另外的水和大量Et2O洗涤。在真空炉中干燥滤饼，以提供产物，为白色固体(185mg，产率84％)：ΗPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，30/70CΗ3CN/0.1％H3PO4，7.97分钟(97.6％)；mp：358-360℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.88-2.07(m，1H，CHH)，2.24-2.45(m，1H，CHH)，2.53-2.68(m，1H，CHH)，2.79-3.01(m，1H，CHH)，4.17-4.36(m，1H，CHH)，4.36-4.54(m，1H，CHH)，5.09(dd，J＝4.9、13.2Hz，1H，CH)，5.19(s，2H，PhCH2)，7.24(d，J＝8.7Hz，1H，Ar)，7.47(d，J＝7.9Hz，1H，Ar)，7.54(s，1H，Ar)，7.68(d，J＝7.7Hz，1H，Ar)，7.74(dd，J＝2.4、8.8Hz，1H，Ar)，7.89(d，J＝2.3Hz，1H，Ar)，10.98(s，1H，NH)，11.72(s，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.46，31.18，43.50，47.12，51.58，115.11，117.49，122.29，122.96，126.37，126.54，127.29，130.65，135.04，138.38，141.17，142.39，149.90，161.08，167.79，170.94，172.83。LCMS：MH＝453、455；C22H17ClN4O5+0.3H2O的分析计算值：C，57.66；H，3.87；N，12.23；Cl，7.74；实测值：C，57.60；H，3.90；N，11.97；Cl，7.72。
5.59[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-氨基甲酸4-氯-3-甲基-苯酯
![]()
在室温下，向氯甲酸对硝基苯酯(1000mg，0.5mmol)在CH3CN(5mL)中的溶液中滴加4-氯-间甲酚(71.3mg，0.5mmol)和DIPEA(0.24mL，1.5mmol)的CH3CN溶液(5mL)。将混合物在室温下搅拌10分钟。加入3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.37g，1mmol)，接着加入另外的DIPEA(0.24mL，1.5mmol)。将混合物在环境温度下搅拌过夜。然后过滤混合物。得到的固体用硅胶柱纯化，使用甲醇和二氯甲烷洗脱，得到[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-氨基甲酸4-氯-3-甲基-苯酯，为白色固体(30mg，产率14％)。HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，50/50，CH3CN/0.1％H3PO4：tR＝3.0分钟(97％)；mp 225-227℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.91-2.08(m，1H，CHH)，2.32(s，3H，CH3)，2.40(dd，J＝4.3、12.8Hz，1H，CHH)，2.63(br.s.，1H，CHH)，2.83-3.02(m，1H，CHH)，4.22-4.56(m，4H，CH2，CH2)，5.12(dd，J＝5.1、13.2Hz，1H，NCH)，7.01(dd，J＝2.3、8.7Hz，1H，Ar)，7.17(d，J＝2.3Hz，1H，Ar)，7.40(d，J＝8.7Hz，1H，Ar)，7.46(d，J＝7.4Hz，1H， Ar)，7.55(s，1H，Ar)，7.72(d，J＝7.9Hz，1H，Ar)，8.47(t，J＝6.0Hz，1H，NH)，10.99(s，1H，NH)。13C NMR(DMSO-d6)δ19.52，22.49，31.20，44.04，47.15，51.59，121.03，122.04，123.04，124.43，127.01，129.33，130.58，136.54，142.45，143.35，145.35，149.62，154.43，167.87，170.99，172.86；LC-MS：442；C22H20ClN3O6的分析计算值C，59.80；H，4.56；N，9.51；实测值：C，59.74；H，4.45；N，9.58。
5.60 1-[1-(3,4-二氯-苯基)-乙基]-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲
![]()
将3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲烷磺酸盐(0.37g，1.00mmol)和CDI(0.18g，1.10mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的搅拌混合物在氮气中加热到40℃过夜。然后加入1-(3,4-二氯-苯基)-乙胺(0.19g，1.00mmol)，并将混合物在40℃加热过夜。加入水(60mL)，过滤固体沉淀，用水(30mL)洗涤，通过制备型HPLC(梯度：CH3CN/H2O：10/90持续5分钟，10分钟内达到100/0，100/0持续5分钟)纯化。蒸发溶剂，残余物在乙醚(20mL)中研磨1小时。然后过滤分离产物，并在真空中干燥，得到1-[1-(3,4-二氯-苯基)-乙基]-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲，为白色固体(0.084g，产率17％)：HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1mL/分钟，240nm，梯度：CH3CN/0.1％H3PO4：10分钟内10/90至90/10，90/10(5分钟)：8.57分钟(96.68％)；mp：200-202℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.32(d，J＝7.0Hz，3H，CH3)，1.88-2.13(m，1H，CHH)，2.28-2.47(m，1H，CHH)，2.55-2.70(m，1H，CHH)，2.79-3.04(m，1H，CHH)，4.18-4.55(m，4H，CH2，CH2)，4.74(quin，J＝7.0Hz，1H，CH)，5.11(dd，J＝4.9、13.2Hz，1H，CH)，6.51(s，1H，NH)，6.66(d，J＝7.9Hz，1H，NH)，7.20-7.46(m，3H，Ar)，7.48-7.62(m，2H，Ar)，7.65(d，J＝7.7Hz，1H，Ar)，10.99(s，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.51，22.80，31.20，42.86，47.07，48.18，51.55，121.61，122.81，126.28，126.70，127.78，128.79，130.14，130.38，130.77，142.26，145.29，147.41，157.20，167.95，170.98，172.85；LCMS：MH＝489、491；C23H22N4O4Cl2+0.9H2O的分析计算值：C，54.64，H，4.75，N，11.08；实测值：C，54.27，H，4.66，N，10.98。
5.61 1-(3-氯-4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)-3-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)脲
![]()
将3-(5-氨基甲基-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(1.11g，3.0mmol)和1,1'-羰基二咪唑(535mg，3.3mmol)在无水DMF(20mL)中悬浮，将混合物在室温下搅拌24小时。在搅拌的同时，将一部分反应混合物(6.7mL，～1mmol)转移到包含3-氯-4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯胺盐酸盐(310mg，1.1mmol)的小瓶中。将得到的混合物在室温下搅拌过夜，通过LCMS监测反应进展。48小时后，向反应混合物中转移另外的3-氯-4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯胺盐酸盐(56mg，0.2mmol)，继续搅拌另外24小时。用1N HCl酸化反应混合物，一边搅拌一边加入水，直到沉淀形成。过滤收集固体，抽吸干燥，然后在DMF中溶解，使用C-18制备型HPLC纯化，得到1-(3-氯-4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)-3-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)脲，为白色固体(390mg，产率72％)：HPLC：Waters Symmetry C18，5μm，3.9×150mm，1ml/分钟，240nm，30/70CH3CN/0.1％H3PO4，5.40分钟(99.8％)；mp：188-190℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.92-2.10(m，1H，CHH)，2.29-2.47(m，1H，CHH)，2.60(dd，J＝2.2、15.4Hz，1H，CHH)，2.82-3.01(m，1H，CHH)，3.25(s，3H，CH3)，3.46(dd，J＝3.7、5.6Hz，2H，CH2)，3.61(dd，J＝3.8、5.7Hz，2H，CH2)，3.73(d，J＝4.7Hz，2H，CH2)，4.09(t，J＝4.9Hz，2H，CH2)，4.24-4.55(m，4H，CH2，CH2)，5.11(dd，J＝5.1、13.2Hz，1H，CH)，6.77(t，J＝5.9Hz，1H，NH)，7.04(d，J＝9.1Hz，1H，Ar)，7.19(dd，J＝2.5、9.0Hz，1H，Ar)，7.38-7.49(m，1H，Ar)，7.51(s，1H，Ar)，7.64(d，J＝2.6Hz，1H，Ar)，7.69(d，J＝7.7Hz，1H，Ar)，8.65(s，1H，NH)，10.98(s，1H，NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ22.51，31.20，42.80，47.12，51.56，58.05，68.80，68.85，69.84，71.29，114.66，117.58，119.49，121.24，121.88，122.91，126.89，130.29，134.53，142.38，144.84，148.40，155.25，167.95，171.01，172.86；LCMS：MH＝545、547；C26H29ClN4O7+0.4H2O的分析计算值：C，56.55；H，5.44；N，10.15。实测值：C，56.64；H，5.34；N，10.15。
5.62测试
5.62.1PMBC中的TNFα抑制测试
通过Ficoll Hypaque(Pharmacia，Piscataway，NJ，USA)密度离心，获得 来自正常供体的外周血单核细胞(PBMC)。在补充了10％AB+人血清(Gemini Bio-products，Woodland，CA，USA)、2mM L-谷氨酰胺、100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素(Life Technologies)的RPMI 1640(Life Technologies，Grand Island，NY，USA)中培养细胞。
将PBMC(2×105个细胞)在96孔平底Costar组织培养板(Corning，NY，USA)中铺板，一式三份。在化合物缺乏或存在时，用LPS(来自马流产沙门氏菌(Salmonella abortus equi)，Sigma目录号L-1887，St.Louis，MO，USA)以1ng/ml的终浓度刺激细胞。将本文提供的化合物在DMSO(Sigma)中溶解，并在使用前即刻用培养基进一步稀释。所有测试中，最终的DMSO浓度可以为约0.25％。在LPS刺激前1小时，将化合物加入到细胞中。然后在37℃在5％CO2下培养细胞18-20小时，然后收集上清液，用培养基稀释，通过ELISA(Endogen，Boston，MA，USA)测试TNFα水平。使用非线性回归、S形剂量-应答计算IC50值，限制顶部为100％而底部为0％，允许可变斜率(GraphPad Prism 3.02版)。
5.62.2T细胞的IL-2和MIP-3α生成
通过在每个10cm组织培养皿中将1×108个PBMC放入10ml完全培养基(RPMI 1640，补充了10％热灭活的胎牛血清、2mM L-谷氨酰胺、100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素)中在37℃5％CO2培养箱中30-60分钟，除去PBMC中的贴壁单核细胞。用培养基冲洗培养皿，以移走全部非贴壁PBMC。对每1×108个非贴壁PBMC，使用下列抗体(Pharmingen)和Dynabead(Dynal)混合物通过负筛选来纯化T细胞：0.3mL绵羊抗小鼠IgG珠、15μL抗-CD16、15μL抗-CD33、15μL抗-CD56、0.23mL抗-CD19珠、0.23mL抗-HLA II类珠、和56μL抗-CD14珠。在4℃让细胞和珠/抗体混合物颠倒旋转30-60分钟。使用Dynal磁铁，从珠中移走纯化的T细胞。根据流式细胞术，典型产率为约50％T细胞，87-95％CD3+。
用100μL/孔含5μg/mL抗-CD3抗体OKT3的PBS包被组织培养96孔平底板，在37℃培养3-6小时，然后在加入T细胞前即刻用100μL/孔的完全培养基洗涤四次。在圆底组织培养96孔板中，将化合物稀释至终浓度的20倍。终浓度为约10μM到约0.00064μM。将本文提供的化合物的10mM储液在2％DMSO中全部1:50稀释为最初的200μM 20×稀释液，并连续1:5稀释到2％DMSO中。每200μL培养物中加入10μL各化合物，得到的最终DMSO浓度是0.1％。将培养物在37℃5％CO2培养2-3天，通过ELISA(R&D Systems)分析上清液中的IL-2和MIP-3α。将IL-2和MIP-3α水平标准化成在一定量本文提供的化合物存在时生成的量，并使用非线性回归、S形剂量-应答计算EC50值，限制顶部为100％而底部为0％，允许可变斜率(GraphPad Prism 3.02版)。
5.62.3细胞增殖测试
从Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH(Braunschweig，Germany)获得细胞系Namalwa、MUTZ-5和UT-7。从美国典型培养物保藏中心(Manassas，VA，USA)获得细胞系KG-1。在所有细胞系中，细胞增殖(用3H-胸苷的掺入来表示)如下测量。
在96孔板中，细胞以6000个细胞/孔接种到培养基中。在37℃在潮湿的培养箱中在5％CO2下，以约0.25％DMSO的终浓度，用约100、10、1、0.1、0.01、0.001、0.0001和0μM化合物将细胞预处理72小时，一式三份。然后向各孔中加入一微居的3H-胸苷(Amersham)，在37℃在潮湿的培养箱中在5％CO2下将细胞再培养6小时。使用细胞收集器(Tomtec)将细胞收集到UniFilter GF/C滤板(Perkin Elmer)上，让板干燥过夜。加入Microscint20(Packard)(25μL/孔)，在TopCount NXT(Packard)中分析板。每孔计数一分钟。通过全部三份取平均值并用DMSO对照(0％抑制)标准化，计算细胞增殖的百分比抑制。各细胞系中，各化合物在三个独立实验中测试。使用非线性回归、S形剂量-应答计算最终的IC50值，限制顶部为100％而底部为0％，允许可变斜率(GraphPad Prism v3.02)。
5.62.4免疫沉淀和免疫印迹
用DMSO或一定量本文提供的化合物处理Namalwa细胞1小时，然后用10U/ml的Epo(R&D Systems)刺激30分钟。制备细胞裂解液，用Epo受体Ab免疫沉淀，或立即通过SDS-PAGE分离。用Akt、磷酸化-Akt(Ser473或Thr308)、磷酸化-Gab1(Y627)、Gab1、IRS2、肌动蛋白和IRF-1Ab作为探针检测免疫印迹，并在Storm 860Imager上使用ImageQuant软件(Molecular Dynamics)分析。
5.62.5细胞周期分析
用DMSO或一定量本文提供的化合物处理细胞过夜。依照制造商的说明那个，使用CycleTEST PLUS(Becton Dickinson)对细胞周期进行碘化丙啶染色。染色后，通过FACSCalibur流式细胞仪，使用ModFit LT软件(Becton Dickinson)分析细胞。
5.62.6凋亡分析
在不同时间点，用DMSO或一定量本文提供的化合物处理细胞，然后用膜联蛋白-V洗涤缓冲液(BD Biosciences)洗涤。用膜联蛋白-V结合蛋白和碘化丙啶(BD Biosciences)培养细胞10分钟。使用流式细胞术分析样本。
5.62.7荧光素酶测试
依照制造商的说明书，用4μg AP1-荧光素酶(Stratagene)每1×106个细胞和3μl Lipofectamine 2,000(Invitrogen)试剂转染Namalwa细胞。转染后六小时， 用DMSO或一定量本文提供的化合物处理细胞。使用荧光素酶裂解缓冲液和底物(Promega)测试并使用照度计(Turner Designs)测量荧光素酶活性。
5.62.8抗增殖测试
第1天：细胞以50μl/孔在10％FBS RPMI(具有谷氨酰胺，没有pen-strip)中接种到96孔板中过夜。使用以下细胞：
结直肠癌细胞：Colo 2053200个细胞/孔；阳性对照依立替康
胰腺癌细胞：BXPC-31200个细胞/孔；阳性对照吉西他滨
前列腺癌细胞：PC31200个细胞/孔；阳性对照多西紫杉醇
乳腺癌细胞：MDA-MB-2312400个细胞/孔；阳性对照紫杉醇
第2天：化合物连续稀释到0.00001μm～10μm(或0.000001-1μM)，以50μl/孔(2×)一式两份和相应的阳性对照一起加入到板中。然后将板在37℃培养72小时。
第5天：通过CellTiter Glo方法检测结果。向板中加入100μl/孔的CellTiter Glo试剂，在室温下培养10分钟，然后用Top Count reader分析。各化合物的IC50值典型地基于两个或多个独立实验的结果。
5.63TNFα抑制
使用与上面6.62.1节中描述的步骤基本类似的步骤，评估本文提供的某些化合物的TNFα抑制性质。测试化合物包括：1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-(4-吡啶-4-基甲基-苯基)-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-(4-羟甲基-苯基)-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(2-甲基-2Η-吡唑-3-基)-苯基]-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(2-甲基-咪唑-1-基)-苯基]-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[4-(4-甲基-4Η-[1,2,4]三唑-3-基)-苯基]-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(2-甲基-噻唑-4-基)-苯基]-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(1-甲基-1Η-吡唑-3-基)-苯基]-脲；1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(3-(吗啉基甲基)苯基)脲；1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(4-甲基-3-硝基苯基)脲；1-(3-氨基-4-甲基苯基)-3-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-(3-苯氧基-苯基)-脲；1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(4-硝基苯基)脲；N-(4-{3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲基}-苯基)-乙酰胺；1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(3-羟基-4-甲基苯基)脲；1-[3-(1H-苯并咪唑-2-基)-4-氯-苯基]-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢 -1H-异吲哚-5-基甲基]-脲；1-(4-叔丁基-环己基)-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-(4-甲基-环己基)-脲；1-(6-氯-吡啶-3-基)-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1Η-异吲哚-5-基甲基]-脲；1-[4-(2,4-二氟-苯基)-噻唑-2-基]-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲；和2,2-二甲基-丙酸3-{5-[3-(3-氯-4-甲基-苯基)-脲基甲基]-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基}-2,6-二氧-哌啶-1-基甲酯。全部测试化合物测得的IC50值在约0.2到300nM范围内。
5.64抗增殖-Νamalwa
通过与上面5.62.3节中描述的那些步骤基本类似的步骤，使用Νamalwa细胞评估本文提供的某些化合物的抗增殖。测试化合物包括：1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-(4-吡啶-4-基甲基-苯基)-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-(4-羟甲基-苯基)-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(2-甲基-2Η-吡唑-3-基)-苯基]-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(2-甲基-咪唑-1-基)-苯基]-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(2-甲基-噻唑-4-基)-苯基]-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(1-甲基-1Η-吡唑-3-基)-苯基]-脲；1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(3-(吗啉基甲基)苯基)脲；1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(4-甲基-3-硝基苯基)脲；1-(3-氨基-4-甲基苯基)-3-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-(3-苯氧基-苯基)-脲；1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(4-硝基苯基)脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-苯基]-脲；1-(4-叔丁基-环己基)-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-(4-甲基-环己基)-脲；和2,2-二甲基-丙酸3-{5-[3-(3-氯-4-甲基-苯基)-脲基甲基]-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基}-2,6-二氧-哌啶-1-基甲酯。全部测试化合物测得的IC50值在约0.02到40nM范围内。
5.65抗增殖-PC3
通过与上面5.62.8节中描述的步骤基本类似的步骤，使用PC3细胞评估本文提供的某些化合物的抗增殖。测试化合物包括：1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-(4-吡啶-4-基甲基-苯基)-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(2-甲基 -2Η-吡唑-3-基)-苯基]-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(2-甲基-噻唑-4-基)-苯基]-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(1-甲基-1Η-吡唑-3-基)-苯基]-脲；1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(3-(吗啉基甲基)苯基)脲；1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(4-甲基-3-硝基苯基)脲；1-(3-氨基-4-甲基苯基)-3-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-(3-苯氧基-苯基)-脲；1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(4-硝基苯基)脲；1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(3-羟基-4-甲基苯基)脲；1-[3-(1Η-苯并咪唑-2-基)-4-氯-苯基]-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲；1-(4-叔丁基-环己基)-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-(4-甲基-环己基)-脲；1-(6-氯-吡啶-3-基)-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1Η-异吲哚-5-基甲基]-脲；1-[4-(2,4-二氟-苯基)-噻唑-2-基]-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲；2,2-二甲基-丙酸3-{5-[3-(3-氯-4-甲基-苯基)-脲基甲基]-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基}-2,6-二氧-哌啶-1-基甲酯；和1-[1-(3,4-二氯-苯基)-乙基]-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲。全部测试化合物测得的IC50值在约0.001到0.74μM范围内。
5.66抗增殖-BxPC3
通过与上面5.62.8节中描述的步骤基本类似的步骤，使用BxPC3细胞评估本文提供的某些化合物的抗增殖。测试化合物包括：1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-(4-吡啶-4-基甲基-苯基)-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(2-甲基-2Η-吡唑-3-基)-苯基]-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(2-甲基-噻唑-4-基)-苯基]-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(1-甲基-1Η-吡唑-3-基)-苯基]-脲；1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(3-(吗啉基甲基)苯基)脲；1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(4-甲基-3-硝基苯基)脲；1-(3-氨基-4-甲基苯基)-3-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-(3-苯氧基-苯基)-脲；1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(4-硝基苯基)脲；1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(3-羟基-4-甲基苯基)脲；1-[3-(1Η-苯并咪唑-2-基)-4-氯-苯基]-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲；1-(4-叔丁基-环己基)-3-[2-(2,6-二氧-哌啶 -3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-(4-甲基-环己基)-脲；1-[4-(2,4-二氟-苯基)-噻唑-2-基]-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1Η-异吲哚-5-基甲基]-脲；2,2-二甲基-丙酸3-{5-[3-(3-氯-4-甲基-苯基)-脲基甲基]-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基}-2,6-二氧-哌啶-1-基甲酯；和1-[1-(3,4-二氯-苯基)-乙基]-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲。全部测试化合物测得的IC50值在约0.01到0.94μM范围内。
5.67抗增殖-MDAMB321
通过与上面5.62.8节中描述的步骤基本类似的步骤，使用MDAMB321细胞评估本文提供的某些化合物的抗增殖。测试化合物包括：1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-(4-吡啶-4-基甲基-苯基)-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(2-甲基-2Η-吡唑-3-基)-苯基]-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(2-甲基-噻唑-4-基)-苯基]-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(1-甲基-1Η-吡唑-3-基)-苯基]-脲；1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(3-(吗啉基甲基)苯基)脲；1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(4-甲基-3-硝基苯基)脲；1-(3-氨基-4-甲基苯基)-3-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-(3-苯氧基-苯基)-脲；1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(4-硝基苯基)脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-苯基]-脲；1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(3-羟基-4-甲基苯基)脲；1-[3-(1Η-苯并咪唑-2-基)-4-氯-苯基]-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲；1-(4-叔丁基-环己基)-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-(4-甲基-环己基)-脲；1-(6-氯-吡啶-3-基)-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1Η-异吲哚-5-基甲基]-脲；1-[4-(2,4-二氟-苯基)-噻唑-2-基]-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲；2,2-二甲基-丙酸3-{5-[3-(3-氯-4-甲基-苯基)-脲基甲基]-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基}-2,6-二氧-哌啶-1-基甲酯；和1-[1-(3,4-二氯-苯基)-乙基]-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲。全部测试化合物测得的IC50值在约0.4到380nM范围内。
5.68抗增殖-Colo205
通过与上面5.62.8节中描述的步骤基本类似的步骤，使用Colo205细胞 评估本文提供的某些化合物的抗增殖。测试化合物包括：1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-(4-吡啶-4-基甲基-苯基)-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(2-甲基-2Η-吡唑-3-基)-苯基]-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(2-甲基-噻唑-4-基)-苯基]-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(1-甲基-1Η-吡唑-3-基)-苯基]-脲；1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(3-(吗啉基甲基)苯基)脲；1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(4-甲基-3-硝基苯基)脲；1-(3-氨基-4-甲基苯基)-3-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-(3-苯氧基-苯基)-脲；1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(4-硝基苯基)脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-[3-(3-甲基-[1,2,4]噁二唑-5-基)-苯基]-脲；1-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧异吲哚啉-5-基)甲基)-3-(3-羟基-4-甲基苯基)脲；1-[3-(1Η-苯并咪唑-2-基)-4-氯-苯基]-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲；1-(4-叔丁基-环己基)-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲；1-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-3-(4-甲基-环己基)-脲；1-(6-氯-吡啶-3-基)-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲；1-[4-(2,4-二氟-苯基)-噻唑-2-基]-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲；2,2-二甲基-丙酸3-{5-[3-(3-氯-4-甲基-苯基)-脲基甲基]-1-氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基}-2,6-二氧-哌啶-1-基甲酯；和1-[1-(3,4-二氯-苯基)-乙基]-3-[2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-5-基甲基]-脲。全部测试化合物测得的IC50值在约0.15到130nM范围内。
提供上述实施例是为了就怎样制造和使用主张的实施方案为本领域普通技术人员提供完全的公开和描述，而非意在限制本文公开的内容的范围。对本领域技术人员而言显而易见的改变将包含在所附权利要求的范围内。本说明书中引用的所有公开物、专利和专利申请，都作为参考全文并入本文，如同每个公开物、专利或专利申请都被特别且独立地指出作为参考并入本文一样。