抗肿瘤化合物CUCSUB10/SUBHSUB12/SUBNOSUB2/SUBSUB2/SUB.pdf

本发明提供了一种新的化抗肿瘤合物Cu(C10H12NO2)2，该化合物具有式I结构，由两分子镰刀菌酸(Fusaric acid，FA，C10H13NO2)和一分子Cu2+配位合成。通过体外抗肿瘤实验发现，本发明化合物对人肝癌BEL-7402细胞有较好的抑制作用。本发明合成步骤简单，选择性高、抗肿瘤效果好，毒副作用低，是一种较好的肿瘤抑制剂，具有极大的药用价值。

1.  一种如式I的化合物：


2.  根据权利要求1所述的抗肿瘤化合物Cu(C₁₀H₁₂NO₂)₂，其特征是由两分子镰刀菌酸(Fusaric acid，FA，C₁₀H₁₃NO₂)和一分子Cu²⁺配位合成，Cu原子为四配位共面的正方形构型，每个镰刀菌酸阴离子配体通过氮原子和氧原子和铜相连接，一个Cu²⁺与两个镰刀菌酸阴离子组成，镰刀菌酸为二齿配位。每个Cu²⁺处于对称中心，并且均与不同的的两个镰刀菌酸配体中的氧和原子配位，而且每个Cu²⁺和与它配位的两个氧原子和两个氮原子处于同一平面，形成共面的正方形构型。

3.  根据权利要求1所述的抗肿瘤化合物Cu(C₁₀H₁₂NO₂)₂，其特征是抗肿瘤化合
物Cu(C₁₀H₁₂NO₂)₂的溶剂挥发法合成包括如下步骤：
a.取30mmol镰刀菌酸提取液，充分搅拌，过滤；
b.称量20mmol CuCl₂，用5ml蒸馏水溶解，搅拌使完全溶解，过滤；
c.将上述两种溶液混合，水浴加热，搅拌下滴加0.1mol/L的NaOH调节混合溶液pH值；
d.混合溶液冷却至室温，过滤，静置；
e.滤液放置一星期后得到本发明化合物。

4.  根据权利要求1所述的抗肿瘤化合物Cu(C₁₀H₁₂NO₂)₂，其特征是抗肿瘤化合物Cu(C₁₀H₁₂NO₂)₂的水热合成法合成包括如下步骤：
a.取30mmol镰刀菌酸提取液，水浴加热，搅拌下滴加0.1mol/L的NaOH调节溶液pH值；
b.称量20mmol CuCl₂，加入到上述溶液中；
c.将混合溶液加入水热反应釜中，125℃下封闭反应48h；
打开水热反应釜，将溶液过滤，得到本发明化合物。

抗肿瘤化合物Cu(C₁₀H₁₂NO₂)₂
技术领域
本发明所涉及医药化工领域，特别是一种抗肿瘤化合物Cu(C₁₀H₁₂NO₂)₂。
背景技术
癌症是当前危害人类健康和正常生活的最主要的疾病之一。抗癌药物的研究开发一直是科学家选择的课题。由于癌症发生机制的特殊性和复杂性，寻找高选择性、高效及低毒副作用的抗癌药物并非易事。
自从20世纪六七十年代顺铂抗癌作用的发现以来，寻找毒副作用弱，抗癌效果好的低毒高效金属配合物作为新型抗肿瘤药物受到越来越多的科学家的重视。探讨金属配合物的抗癌和抗肿瘤活性的研究逐渐成为研究的热点之一。顺铂、碳铂、镓、铑、锡等的化合物和配合物的抗癌和抗肿瘤活性已得到了广泛研究。邓元等介绍了含钼化合物及其配合物的抗癌抗肿瘤机理等研究情况。过渡金属作为DNA结构和构象的探针一直是研究的一大热点。如张芳等合成了铜(II)-苏氨酸-咪唑混配混合物[Cu(Thr)(Im)₃]Cl·H₂O，通过电子吸收光谱法和EB荧光分析法研究了该配合物与鱼精DNA的作用，得出其与DNA作用是以弱的插入作用相结合。王流芳等研究了桑色素合铜、桑色素合锌、桑色素合钴三种配合物与DNA的作用，前两者比后者强，可能与前两者抗肿瘤活性较强有关。
镰刀菌酸(Fusaric acid，FA，C10H₁₃NO₂)亦称萎蔫酸，是镰刀菌萎蔫毒素(Fusarium wilt toxin)的一种，是引起植物镰刀菌枯萎病的主要毒素，是导致作物萎蔫的主要致病因子之一。镰刀菌酸主要是由镰刀菌属(Fusarium)的一种，特别是尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)所产生的一种寄主非专化性毒素，它作为病原菌产生的一种次生代谢产物，能引起多种植物的萎蔫，造成包括番茄、棉花、香蕉、西瓜、黄瓜等作物的枯萎病，导致植株的萎蔫枯死。
在植物枯萎病菌的致病机理中，镰刀菌酸起着极为重要的作用。植物枯萎病菌可以产生以镰刀菌酸为主的致萎物质，对寄主植物造成毒害作用，主要表现为：影响原生质透水性，降低细胞保持水分的能力；通过干扰蒸腾代谢过程、堵塞导管等影响植株蒸腾作用；鳌合许多代谢过程中酶的重金属离子，影响酶活性等等。镰刀菌酸在植物枯萎病的发生发展中起着重要的作用，也是导致寄主植物萎蔫枯死的主要原因之一。
发明内容
本发明的目的在于提供一种新的抗肿瘤化合物Cu(C₁₀H₁₂NO₂)₂，该化合物具有式1结构，由两分子镰刀菌酸(Fusaric acid，FA，C10H₁₃NO₂)和一分子Cu²⁺配位合成。通过体外抗肿瘤实验发现，本发明化合物对人肝癌BEL-7402细胞有较好的抑制作用。
本发明是一种如式I的化合物：

Cu原子为四配位共面的正方形构型，每个镰刀菌酸阴离子配体通过氮原子和氧原子和铜相连接，一个Cu²⁺与两个镰刀菌酸阴离子组成，镰刀菌酸为二齿配位。每个Cu²⁺处于对称中心，并且均与不同的的两个镰刀菌酸配体中的氧和原子配位，而且每个Cu²⁺和与它配位的两个氧原子和两个氮原子处于同一平面，形成共面的正方形构型。
本发明合成步骤简单，选择性高、抗肿瘤效果好，毒副作用低，是一种较好的肿瘤抑制剂，具有极大的药用价值。
附图说明
图1是本发明的结构图。
具体实施方式
实施例1
溶剂挥发法合成本发明化合物：
a.取30mmol镰刀菌酸提取液，充分搅拌，过滤；
b.称量20mmolCuCl₂，用5ml蒸馏水溶解，搅拌使完全溶解，过滤；
c.将上述两种溶液混合，水浴加热，搅拌下滴加0.1mol/L的NaOH调节混合溶液pH值；
d.混合溶液冷却至室温，过滤，静置；
e.滤液放置一星期后得到本发明化合物。
实施例2
水热合成法合成本发明化合物：
a.取30mmol镰刀菌酸提取液，水浴加热，搅拌下滴加0.1mol/L的NaOH调节溶液pH值；
b.称量20mmol CuCl₂，加入到上述溶液中；
c.将混合溶液加入水热反应釜中，125℃下封闭反应48h；
d.打开水热反应釜，将溶液过滤，得到本发明化合物。
通过体外抗肿瘤实验发现，本发明化合物对人肝癌BEL-7402细胞有较好的抑制作用。
实施例3
体外抗肿瘤实验：
a.本发明化合物溶液分别用RPMI-1640培养液配制成浓度为10μmol/L、50μmol/L、100μmol/L溶液，4℃保存6天；
b.BEL-7402细胞培养于含10％小牛血清、100kU/L青霉素和100mg/L链霉素的RPMI-1640培养液中，放在5％CO2饱和湿度细胞培养箱中恒温培养；
c.取对数生长期的BEL-7402细胞，用0.25％胰蛋白酶消化，RPMI-1640完全培养液调制成5.0×104个/ml细胞悬液，接种于96孔培养板中，每孔接种100μl(含5.0×103个细胞)；
d.吸出培养液，加入新培养液90μl及不同浓度的镰刀菌酸溶液10μl，使终浓度分别为10μmol/L、50μmol/L、100μmol/L；
e.同时设置空白及5-Fu阳性对照孔，空白组加入相同体积的培养液，阳性对照组加入40μmol/L，每一浓度设8个平行孔；
f.继续培养24h、48h、72h后，每孔加入MTT(5g/L)20μl，继续培养5h；
g.吸出孔内培养液(尽量完全)，加入DMSO液(100μl/孔)，置37℃微型振荡器上摇匀15min，使结晶充分溶解；
h.用ELX800型酶标仪在主波长为570nm，参比波长为630nm处测量OD值，比色以空白孔调零；
i.抑制率＝(空白组8孔OD值的平均值—实验组8孔OD值的平均值)/空白组8孔OD值的平均值×100％。
实验结果如下表所示：
镰刀菌酸铜配合物Cu(C₁₀H₁₂NO₂)₂对人肝癌BEL-7402细胞生长抑制率

Data are shown as X±s(n＝8)^*P<0.05，^**P<0.01，^***P<0.001
从上表可以看出，在相同的时间内，本发明化合物对人肝癌BEL-7402细胞生长抑制率随着提取液浓度的增加而升高；在24h和48h时，浓度为100μmol/ml的提取液的抑制率都高于阳性对照组，抑制细胞生长的活性较高。
体外抗肿瘤活性实验结果表明：本发明对人肝癌BEL-7402细胞的生长有较好的抑制活性。
由一个Cu²⁺与两个5-丁基吡啶-2-羧酸(镰刀菌酸)阴离子组成，镰刀菌酸为二齿配位。每个Cu²⁺处于对称中心，并且均与不同的的两个镰刀菌酸配体中的氧和原子配位，而且每个Cu²⁺和与它配位的两个氧原子和两个氮原子处于同一平面，形成共面的正方形构型。