肾复康片的质量控制方法.pdf

本发明涉及一种肾复康片的质量控制方法，属于中药技术领域，尤其是指中药制剂中成份含量测定和鉴别方法。包括用高效液相色谱法测定该药物中芦丁C27H30O16的含量；用薄层色谱法鉴别其中的槐花的主要成分芦丁成分。优点是建立了该药物先进的质量控制方法，建立了药物的鉴别项目和含量测定项目及其检测方法，对药物中主药槐花药味进行了薄层色谱法鉴别，采用高效液相色谱法测定该药物中的芦丁的含量，保证了药物质量控制方法的准确性和先进性，能够有效地控制该药物的产品质量。

1、  一种肾复康片的质量控制方法，其特征在于：包括用高效液相色谱法测定所述药物的一种成分的含量；用薄层色谱法鉴别其中的一种成分；
高效液相色谱法测定该药物中芦丁C₂₇H₃₀O₁₆的含量：
色谱条件：
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水∶冰乙酸＝10-40∶57-89∶1-3或甲醇∶水∶磷酸＝10-40∶57-89∶0.2-2.5为流动相；检测波长为276nm±2nm，理论板数按芦丁峰计算应不低于3000；
对照品溶液的制备：
精密称取芦丁对照品适量，加甲醇或乙醇制成每1ml含芦丁25μg-75μg的溶液；
供试品溶液的制备：
取本品10片，除去包衣后，精密称定药物重量，研细，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入25ml-75ml甲醇或乙醇，称定重量，超声处理20-40分钟，超声功率50-200W，频率25-75KHz，放置至18～25℃，再称定重量，用甲醇或乙醇补足减失的重量，滤过，取滤液，即得；
含量测定方法：
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1μl-10μl，注入液相色谱仪，测定芦丁含量；
该药物每片含槐花以芦丁C₂₇H₃₀O₁₆计，不得少于0.95mg；
用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁：
供试品溶液的制备：
取本品20片，除去包衣，加l0ml-20ml的甲醇或乙醇，超声处理10-20分钟，滤过，滤液浓缩至2.5ml-7.5ml，作为供试品溶液；
对照品溶液的制备：
称取芦丁对照品，加甲醇或乙醇制成每1ml含芦丁1mg-3mg的溶液，作为对照品溶液；
薄层色谱法试验：
吸取供试品溶液和对照品溶液各5μl-15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以展开剂展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，待挥干后，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

2、  根据权利要求1所述的肾复康片的质量控制方法，其特征在于：显色反应中喷以10％硫酸乙醇溶液或者喷以1％亚硝酸钠溶液，加热至斑点显色清晰，在日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

3、  根据权利要求1所述的肾复康片的质量控制方法，其特征在于：展开剂是二氯甲烷∶甲醇∶甲酸＝15-25∶2.5-7.5∶0.5-1.5或乙酸乙酯∶甲酸∶水＝6-10∶0.5-1.5∶0.5-1.5上层溶液或乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝8-12∶4-8∶0.5-1.5∶1-3上层溶液。

肾复康片的质量控制方法
技术领域
本发明属于中药技术领域，尤其是指中药制剂中成份含量测定和鉴别方法。
背景技术
肾复康片是由土茯苓366g、槐花93g、白茅根366g、益母草93g、藿香28g组成的中药复方制剂，土茯苓183g、藿香粉碎成细粉；其余土茯苓183g、槐花、白茅根、益母草加水煎煮二次，第一次加水煎煮3小时，第二次加水煎煮2小时，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度为1.32-1.35(50℃)的稠膏，加入土茯苓、藿香细粉，混匀，减压干燥，粉碎成细粉，加入糖粉，混匀，制粒，干燥，加入羧甲淀粉钠、硬脂酸镁，混匀，压制成1000片，包薄膜衣，即得。
该药物为薄膜衣片，除去包衣后显黄褐色；气微，味微甜。该药物的功能主治为：清热利尿，益肾化浊，用于热淋涩痛，急性肾炎水肿，慢性肾炎急性发作。该药物的用法用量：口服，一次4～6片，一日3次。该药物每片相当于处方药材0.946g。
槐花为豆科植物槐Sophora japonica L.的干燥花及花蕾，具有凉血止血，清热凉血的功效，用于便血，尿血、血淋等出血证，主要成分芦丁、槲皮素，具有抗炎、改善微循环、解痉、抗溃疡的作用。
土茯苓为百合科植物光叶菝葜Smilax glabra Roxb.的干燥根茎，具有除湿，解毒，通利关节的功效，用于湿热淋浊，带下，痈肿，瘰疬，疥癣。
益母草为唇形科植物益母草Leonurus japonicus Houtt.的新鲜或干燥地上部分，具有活血调经，利尿消肿的功效，可用于水肿尿少，急性肾炎水肿。
白茅根为禾本科植物白茅Imperata cylindrica Beauv.var.major(Nees)C.E.Hubb.的干燥根茎，具有凉血止血，清热利尿的功效，可用于血热吐血，衄血，尿血，热病烦渴，黄疸，水肿，热淋涩痛；急性肾炎水肿。
藿香为唇形科植物广藿香Pogostemon cablin(Blanco)Benth.的干燥地上部分或唇形科植物藿香Agastache rugosus(Fisch.et.Mey.)O.Ktze.的干燥地上部分，具有芳香化浊，开胃止呕，发表解暑的功效，可用于湿浊中阻，脘痞呕吐，暑湿倦怠，胸闷不舒，寒湿闭暑，腹痛吐泻，鼻渊头痛。
该药物目前的质量控制方法较为单一，在《中华人民共和国卫生部药品标准》(中药成方制剂)第十三册104页颁布了肾复康胶囊的质量标准，在肾复康胶囊的质量标准中，没有鉴别方法和含量测定方法，质量控制方法局限性大，专属性不强，难于控制药物的产品质量。
发明内容
本发明提供一种肾复康片的质量控制方法，以解决质量控制方法较为单一、专属性不强，难于控制药物的产品质量的问题。本发明采取的技术方案是：包括用高效液相色谱法测定所述药物的一种成分的含量；用薄层色谱法鉴别其中的一种成分；
用高效液相色谱法测定该药物中芦丁C₂₇H₃₀O₁₆的含量：
色谱条件：
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水∶冰乙酸＝10-40∶57-89∶1-3或甲醇∶水∶磷酸＝10-40∶57-89∶0.2-2.5为流动相；检测波长为276nm±2nm，理论板数按芦丁峰计算应不低于3000；
对照品溶液的制备：
精密称取芦丁对照品适量，加甲醇或乙醇制成每1ml含芦丁25μg-75μg的溶液；
供试品溶液的制备：
取本品10片，除去包衣后，精密称定药物重量，研细，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入25ml-75ml甲醇或乙醇，称定重量，超声处理20-40分钟，超声功率50-200W，频率25-75KHz，放置至18～25℃，再称定重量，用甲醇或乙醇补足减失的重量，滤过，取滤液，即得；
含量测定方法：
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1μl-10μl，注入液相色谱仪，测定芦丁含量；
该药物每片含槐花以芦丁C₂₇H₃₀O₁₆计，不得少于0.95mg；
用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁：
供试品溶液的制备：
取本品20片，除去包衣，加10ml-20ml的甲醇或乙醇，超声处理10-20分钟，滤过，滤液浓缩至2.5ml-7.5ml，作为供试品溶液；
对照品溶液的制备：
称取芦丁对照品，加甲醇或乙醇制成每1ml含芦丁1mg-3mg的溶液，作为对照品溶液；
薄层色谱法试验：
吸取供试品溶液和对照品溶液各5μl-15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以展开剂展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，待挥干后，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
本发明一种实施方式是：显色反应中喷以10％硫酸乙醇溶液或者喷以1％亚硝酸钠溶液，加热至斑点显色清晰，在日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；以及其它常用显色反应；
本发明一种实施方式是：展开剂是二氯甲烷∶甲醇∶甲酸＝15-25∶2.5-7.5∶0.5-1.5或乙酸乙酯∶甲酸∶水＝6-10∶0.5-1.5∶0.5-1.5上层溶液或乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝8-12∶4-8∶0.5-1.5∶1-3上层溶液；以及其它常用的展开剂及配比。
本发明的优点是：克服了现有技术的不足，提高了药品的质量控制标准，建立了该药物先进的质量控制方法，建立了药物的鉴别项目和含量测定项目及其检测方法，对药物中主药槐花药味进行了薄层色谱法鉴别，采用高效液相色谱法测定该药物中的芦丁的含量，保证了药物质量控制方法的准确性和先进性，能够有效地控制该药物的产品质量。
具体实施方式
实施例1
包括用高效液相色谱法测定所述药物的一种成分的含量；用薄层色谱法鉴别其中的一种成分；
用高效液相色谱法测定该药物中芦丁C₂₇H₃₀O₁₆的含量：
色谱条件：
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水∶冰乙酸＝10∶89∶1为流动相；检测波长为276nm±2nm，理论板数按芦丁峰计算应不低于3000；
对照品溶液的制备：
精密称取芦丁对照品适量，加甲醇制成每1ml含芦丁25μg的溶液；
供试品溶液的制备：
取本品10片，除去包衣后，精密称定药物重量，研细，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入25ml甲醇，称定重量，超声处理20分钟，超声功率200W，频率75KHz，放置至18℃，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，滤过，取滤液，即得；
含量测定方法：
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1μl，注入液相色谱仪，测定芦丁含量；
该药物每片含槐花以芦丁C₂₇H₃₀O₁₆计，不得少于0.95mg；
用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁：
供试品溶液的制备：
取本品20片，除去包衣，加10ml的甲醇，超声处理20分钟，滤过，滤液浓缩至2.5ml，作为供试品溶液；
对照品溶液的制备：
称取芦丁对照品，加甲醇制成每1ml含芦丁3mg的溶液，作为对照品溶液；
薄层色谱法试验：
吸取供试品溶液和对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以展开剂乙酸乙酯∶甲酸∶水＝6∶0.5∶0.5上层溶液展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，待挥干后，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
本实施例中：用高效液相色谱法测定该药物中芦丁C₂₇H₃₀O₁₆的含量的色谱条件，还可以是：以甲醇∶水∶磷酸＝10∶89∶0.2为流动相；
本实施例中：用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁中，显色反应中喷以10％硫酸乙醇溶液或者喷以1％亚硝酸钠溶液，加热至斑点显色清晰，在日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
本实施例中：用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁中，展开剂还可以是二氯甲烷∶甲醇∶甲酸＝15∶2.5∶0.5或乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝8∶4∶0.5∶1上层溶液。
实施例2
包括用高效液相色谱法测定所述药物的一种成分的含量；用薄层色谱法鉴别其中的一种成分；
高效液相色谱法测定该药物中芦丁C₂₇H₃₀O₁₆的含量
色谱条件：
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水∶冰乙酸＝25∶73∶2为流动相；检测波长为276nm±2nm，理论板数按芦丁峰计算应不低于3000；
对照品溶液的制备：
精密称取芦丁对照品适量，加甲醇制成每1ml含芦丁50μg的溶液；
供试品溶液的制备：
取本品10片，除去包衣后，精密称定药物重量，研细，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50ml甲醇，称定重量，超声处理30分钟，超声功率120W，频率50KHz，放置至21℃，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，滤过，取滤液，即得；
含量测定方法：
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定芦丁含量；
该药物每片含槐花以芦丁C₂₇H₃₀O₁₆计，不得少于0.95mg；
用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁：
供试品溶液的制备：
取本品20片，除去包衣，加15ml的甲醇，超声处理15分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，作为供试品溶液；
对照品溶液的制备：
称取芦丁对照品，加甲醇制成每1ml含芦丁2mg的溶液，作为对照品溶液；
薄层色谱法试验：
吸取供试品溶液和对照品溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯∶甲酸∶水＝8∶1∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，待挥干后，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
本实施例中：用高效液相色谱法测定该药物中芦丁C₂₇H₃₀O₁₆的含量的色谱条件，还可以是以甲醇∶水∶磷酸＝25∶73∶2为流动相；
本实施例中：用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁中，显色反应中喷以10％硫酸乙醇溶液或者喷以1％亚硝酸钠溶液，加热至斑点显色清晰，在日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
本实施例中：用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁中，展开剂还可以是二氯甲烷∶甲醇∶甲酸＝20∶5∶1或乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝10∶6∶1∶2上层溶液。
实施例3
包括用高效液相色谱法测定所述药物的一种成分的含量；用薄层色谱法鉴别其中的一种成分；
高效液相色谱法测定该药物中芦丁C₂₇H₃₀O₁₆的含量：
色谱条件：
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水∶冰乙酸＝40∶57∶3为流动相；检测波长为276nm±2nm，理论板数按芦丁峰计算应不低于3000；
对照品溶液的制备：
精密称取芦丁对照品适量，加甲醇制成每1ml含芦丁75μg的溶液；
供试品溶液的制备：
取本品10片，除去包衣后，精密称定药物重量，研细，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75ml甲醇，称定重量，超声处理40分钟，超声功率50W，频率25KHz，放置至25℃，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，滤过，取滤液，即得；
含量测定方法：
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定芦丁含量；
该药物每片含槐花以芦丁C₂₇H₃₀O₁₆计，不得少于0.95mg；
用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁：
供试品溶液的制备：
取本品20片，除去包衣，加20ml的甲醇，超声处理10分钟，滤过，滤液浓缩至7.5ml，作为供试品溶液；
对照品溶液的制备：
称取芦丁对照品，加甲醇制成每1ml含芦丁1mg的溶液，作为对照品溶液；
薄层色谱法试验：
吸取供试品溶液和对照品溶液各15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以展开剂乙酸乙酯∶甲酸∶水＝10∶1.5∶1.5上层溶液展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，待挥干后，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
本实施例中：用高效液相色谱法测定该药物中芦丁C₂₇H₃₀O₁₆的含量的色谱条件，还可以是以甲醇∶水∶磷酸＝40∶57.5∶2.5为流动相；
本实施例中：用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁中，显色反应中喷以10％硫酸乙醇溶液或者喷以1％亚硝酸钠溶液，加热至斑点显色清晰，在日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
本实施例中：用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁中，展开剂还可以是二氯甲烷∶甲醇∶甲酸＝25∶7.5∶1.5或乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝12∶8∶1.5∶3上层溶液。
实施例4
包括用高效液相色谱法测定所述药物的一种成分的含量；用薄层色谱法鉴别其中的一种成分；
用高效液相色谱法测定该药物中芦丁C₂₇H₃₀O₁₆的含量：
色谱条件：
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水∶冰乙酸＝10∶89∶1为流动相；检测波长为276nm±2nm，理论板数按芦丁峰计算应不低于3000；
对照品溶液的制备：
精密称取芦丁对照品适量，加乙醇制成每1ml含芦丁25μg的溶液；
供试品溶液的制备：
取本品10片，除去包衣后，精密称定药物重量，研细，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入25ml乙醇，称定重量，超声处理20分钟，超声功率200W，频率75KHz，放置至18℃，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，滤过，取滤液，即得；
含量测定方法：
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1μl，注入液相色谱仪，测定芦丁含量；
该药物每片含槐花以芦丁C₂₇H₃₀O₁₆计，不得少于0.95mg；
用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁：
供试品溶液的制备：
取本品20片，除去包衣，加10ml的乙醇，超声处理20分钟，滤过，滤液浓缩至2.5ml，作为供试品溶液；
对照品溶液的制备：
称取芦丁对照品，加乙醇制成每1ml含芦丁3mg的溶液，作为对照品溶液；
薄层色谱法试验：
吸取供试品溶液和对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以展开剂乙酸乙酯∶甲酸∶水＝6∶0.5∶0.5上层溶液展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，待挥干后，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
实施例5
包括用高效液相色谱法测定所述药物的一种成分的含量；用薄层色谱法鉴别其中的一种成分；
高效液相色谱法测定该药物中芦丁C₂₇H₃₀O₁₆的含量
色谱条件：
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水∶冰乙酸＝25∶73∶2为流动相；检测波长为276nm±2nm，理论板数按芦丁峰计算应不低于3000；
对照品溶液的制备：
精密称取芦丁对照品适量，加乙醇制成每1ml含芦丁50μg的溶液；
供试品溶液的制备：
取本品10片，除去包衣后，精密称定药物重量，研细，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50ml乙醇，称定重量，超声处理30分钟，超声功率120W，频率50KHz，放置至21℃，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，滤过，取滤液，即得；
含量测定方法：
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定芦丁含量；
该药物每片含槐花以芦丁C₂₇H₃₀O₁₆计，不得少于0.95mg；
用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁：
供试品溶液的制备：
取本品20片，除去包衣，加15ml的乙醇，超声处理15分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，作为供试品溶液；
对照品溶液的制备：
称取芦丁对照品，加乙醇制成每1ml含芦丁2mg的溶液，作为对照品溶液；
薄层色谱法试验：
吸取供试品溶液和对照品溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯∶甲酸∶水＝8∶1∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，待挥干后，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
实施例6
包括用高效液相色谱法测定所述药物的一种成分的含量；用薄层色谱法鉴别其中的一种成分；
高效液相色谱法测定该药物中芦丁C₂₇H₃₀O₁₆的含量：
色谱条件：
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水∶冰乙酸＝40∶57∶3为流动相；检测波长为276nm±2nm，理论板数按芦丁峰计算应不低于3000；
对照品溶液的制备：
精密称取芦丁对照品适量，加乙醇制成每1ml含芦丁75μg的溶液；
供试品溶液的制备：
取本品10片，除去包衣后，精密称定药物重量，研细，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75ml乙醇，称定重量，超声处理40分钟，超声功率50W，频率25KHz，放置至25℃，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，滤过，取滤液，即得；
含量测定方法：
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定芦丁含量；
该药物每片含槐花以芦丁C₂₇H₃₀O₁₆计，不得少于0.95mg；
用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁：
供试品溶液的制备：
取本品20片，除去包衣，加20ml的乙醇，超声处理10分钟，滤过，滤液浓缩至7.5ml，作为供试品溶液；
对照品溶液的制备：
称取芦丁对照品，加乙醇制成每1ml含芦丁1mg的溶液，作为对照品溶液；
薄层色谱法试验：
吸取供试品溶液和对照品溶液各15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以展开剂乙酸乙酯∶甲酸∶水＝10∶1.5∶1.5上层溶液展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，待挥干后，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。