最佳实施方式
一方面，本发明涉及治疗肥胖相关疾病、抑制食物摄取或者减少体脂的组合物，所述组合物包含通过非肽基接头共价连接促胰岛素释放肽与载体物质制备的缀合物。
如本文所用，术语“肥胖相关疾病”可选自如下疾病：过食症(overeating)、暴食症(binge eating)、易饥症、高血压、糖尿病、血浆胰岛素浓度升高、胰岛素抗性、高脂血症、代谢综合征、胰岛素抗性综合征、肥胖相关的胃食管返流症、动脉硬化症、高胆固醇血症、高尿酸血症、下背痛、心脏肥大和左心室肥大、脂肪代谢障碍、非酒精性脂肪性肝炎、心血管疾病，和多囊性卵巢综合征，以及具有这些肥胖相关疾病包括希望减轻体重的那些对象。
如本文所用，术语“促胰岛素释放肽”是具有促胰岛素释放功能的肽，其促进胰腺β细胞中胰岛素的合成与表达。这些肽包括前体、激动剂、衍生物、片段以及变体，优选GLP(胰高血糖素样肽)-1、exendin 3和exendin 4或者其衍生物。
本发明的促胰岛素释放肽衍生物是具有化学修饰的N-末端组氨酸残基的衍生物，或者是具有化学修饰的N-末端组氨酸残基的氨基基团的衍生物。此外，exendin-4或者exendin-3的衍生物是指通过在天然肽中取代、缺失或者插入一或多个氨基酸制备的肽，或者通过烷化、酰化、酯化或者酰胺化天然肽中的一或多个氨基酸制备的化学修饰的肽，以及是指具有天然活性的肽。举例的exendin-3或者exendin-4衍生物包括但不限于具有部分缺失的C-末端或者用非天然氨基酸正亮氨酸取代的exendin类似物，其在WO97/46584中描述；具有非天然氨基酸如戊基甘氨酸、高脯氨酸和叔丁基甘氨酸(tertbutylglycine)取代的exendin类似物，其在WO99/07404中描述；具有由于部分缺失C-末端氨基酸残基而比天然exendin短的氨基酸序列的exendin类似物；以及具有其它氨基酸取代的exendin类似物，其在US2008/0119390中揭示，所述文献在此均以其全部内容并入本文作参考。更优选所述促胰岛素释放肽是exendin-4或者其衍生物。
具体地，本发明的促胰岛素释放肽衍生物可包括其除去N-末端胺基团的衍生物(脱氨-组氨酰-衍生物)、通过用羟基基团取代氨基基团制备的衍生物(β-羟基咪唑并丙酰-衍生物)、通过用两个甲基残基修饰氨基基团制备的衍生物(二甲基-组氨酰-衍生物)、通过用羧基基团取代N-末端氨基基团制备的衍生物(β-羧基咪唑并丙酰-衍生物)，或者除去氨基基团的正电荷的衍生物，其中除去N-末端组氨酸残基的α碳原子而仅剩下咪唑并乙酰基团，以及其它N-末端氨基基团修饰的衍生物。
在本发明中，促胰岛素释放肽衍生物更优选是具有化学修饰的N-末端氨基基团和氨基酸残基的exendin 4衍生物，更优选通过除去或者取代exendin-4的N-末端His1残基α碳原子中存在的α氨基基团或者通过除去或者取代α碳原子制备的exendin-4衍生物。更优选，如下文<a>至<e>所示，除去N-末端氨基基团的脱氨-组氨酰-exendin-4(DA-Exendin-4)、通过用羟基基团取代氨基基团制备的β-羟基咪唑并丙基-exendin-4(HY-exendin-4)、通过用羧基基团取代氨基基团制备的β-羧基咪唑并丙基-exendin-4(CX-exendin-4)、通过用两个甲基残基修饰氨基基团制备的二甲基-组氨酰-exendin-4(DM-exendin-4)或者除去N-末端组氨酸残基的α碳原子制备的咪唑并乙酰-exendin-4(CA-exendin-4)。
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可用于本发明中的载体物质是这样的物质，其通过非肽基接头与促胰岛素释放肽共价连接，及显著延长所述肽的血液半衰期，且可以选自免疫球蛋白Fc区域、血清白蛋白、运铁蛋白、胶原蛋白及其片段、纤连蛋白及其片段以及PEG，优选免疫球蛋白Fc区域。如本文所用，术语“免疫球蛋白Fc区域”是指这样的蛋白质，其含有免疫球蛋白的重链恒定区2(CH2)和重链恒定区3(CH3)，排除了免疫球蛋白的重链和轻链可变区、重链恒定区1(CH1)和轻链恒定区1(CL1)。其在重链恒定区可进一步包含铰链区。本发明的免疫球蛋白Fc区也可含有部分或者全部Fc区域，包括重链恒定区1(CH1)和/或轻链恒定区1(CL1)，排除了重链和轻链的可变区，只要其具有与天然免疫球蛋白基本相似或者优于其的生理学功能即可。所述免疫球蛋白Fc区域也可以是缺失CH2和/或CH3的氨基酸序列的相对较长部分的片段。也就是说，本发明的免疫球蛋白Fc区域可包含：1)CH1结构域，CH2结构域，CH3结构域和CH4结构域；2)CH1结构域和CH2结构域；3)CH1结构域和CH3结构域；4)CH2结构域和CH3结构域；5)一或多个结构域与免疫球蛋白铰链区(或者铰链区的一部分)的组合；以及6)重链恒定区和轻链恒定区的每个结构域的二聚体。本发明的免疫球蛋白Fc区域包括天然氨基酸序列及其序列衍生物(突变体)。氨基酸序列衍生物是与天然氨基酸序列由于缺失、插入、非保守或者保守取代一或多个氨基酸残基或者这些方法的组合而不同的序列。例如，在IgG Fc中，已知在结合中起重要作用的在214-238、297-299、318-322或者327-331位置的氨基酸残基，可以用作修饰的合适靶位。其它各种衍生物也是可能的，包括其中缺失能形成二硫键的区域的衍生物，或者在天然Fc形式的N-末端消除一些氨基酸残基或者在此加入甲硫氨酸残基的衍生物。此外，为了除去效应物功能，缺失可以在补体结合位点如C1q-结合位点和ADCC(抗体依赖性细胞介导的细胞毒性)位点发生。制备免疫球蛋白Fc区域的这种序列衍生物的技术在WO97/34631和WO 96/32478中揭示。本领域已知通常不改变蛋白质或者肽活性的所述蛋白质和肽中的氨基酸置换(H.Neurath，R.L.Hill，The Proteins，Academic Press，New York，1979)。最常见的置换是Ala/Ser、Val/Ile、Asp/Glu、Thr/Ser、Ala/Gly、Ala/Thr、Ser/Asn、Ala/Val、Ser/Gly、Thy/Phe、Ala/Pro、Lys/Arg、Asp/Asn、Leu/Ile、Leu/Val、Ala/Glu和Asp/Gly双方置换。此外，如果需要，可以通过磷酸化、硫酸化、酰化(acrylation)、糖基化、甲基化、法尼基化(farnesylation)、乙酰化、酰胺化等方式修饰Fc区域。前述Fc衍生物是具有与本发明的Fc区域相同生物学活性或者改良的稳定性如对于热、pH等的稳定性的衍生物。此外，这些Fc区域可以得自分离自人及其它动物包括牛、山羊、猪、小鼠、兔、仓鼠、大鼠和豚鼠的天然形式，或者可以是得自转化的动物细胞或者微生物的其重组或者衍生形式。在此，其可以得自天然免疫球蛋白，通过从人或者动物生物体中分离总免疫球蛋白以及用蛋白酶解酶处理其而获得。用木瓜蛋白酶将天然免疫球蛋白消化为Fab和Fc区域以及用胃蛋白酶处理导致pF′c和F(ab)2片段产生。对这些片段可以进行例如大小排阻层析以分离Fc或者pF′c。优选地，人衍生的Fc区域是得自微生物的重组免疫球蛋白Fc区域。此外，本发明的免疫球蛋白Fc区域可以是具有天然糖链形式、与天然形式相比糖链增多或者与天然形式相比糖链减少，或者可以是去糖基化形式。增多、减少或者除去免疫球蛋白FC糖链可以通过本领域常用方法实现，例如化学方法、酶方法以及使用微生物的遗传工程方法。从Fc区域中除去糖链导致与第一个补体成分C1的C1q部分的结合亲和性显著降低，以及抗体依赖性细胞介导的细胞毒性或者补体依赖性细胞毒性降低或丧失，从而在体内不诱导不希望的免疫应答。在这方面，去糖基化(deglycosylated)或者非糖基化(aglycosylated)形式的免疫球蛋白Fc区域作为药物载体可以更适于本发明目的。如本文所用，术语“去糖基化”是指通过酶从Fc区域中除去糖部分，术语“非糖基化”是指Fc区域由原核生物优选大肠杆菌以非糖基化形式产生。另一方面，免疫球蛋白Fc区域可以衍生自人或者其它动物，包括牛、山羊、猪、小鼠、兔、仓鼠、大鼠和豚鼠，优选人。此外，所述免疫球蛋白Fc区域可以是衍生自IgG、IgA、IgD、IgE和IgM的Fc区域，或者可以由其组合或者杂交体制成。优选地，衍生自IgG或者IgM，其是人血液中最丰富的蛋白质，最优选衍生自IgG，已知其提高配体结合蛋白的半衰期。另一方面，如本文所用，术语“组合”是指编码相同来源的单链免疫球蛋白Fc区域的多肽与不同来源的单链多肽连接，形成二聚体或者多聚体。也就是说，二聚体和多聚体可以从选自IgG Fc、IgA Fc、IgM Fc、IgD Fc和IgE Fc片段的两或多个片段中形成。如本文所用，术语“杂交体”是指编码不同来源的两或多个免疫球蛋白Fc区域的序列存在于一个单链免疫球蛋白Fc区域中。在本发明中，各种类型的杂交体均是可能的。也就是说，结构域杂交体可以由选自IgG Fc、IgM Fc、IgA Fc、IgE Fc和IgD Fc的CH1、CH2、CH3和CH4的1-4个结构域组成，以及可包含铰链区。另一方面，将IgG分为IgG1、IgG2、IgG3和IgG4亚类，且本发明包括其组合和杂交体。优选IgG2和IgG4亚类，最优选很少具有效应功能如CDC(补体依赖性细胞毒性)的IgG4的Fc区域。也就是说，作为本发明的药物载体，最优选的免疫球蛋白Fc区域是人IgG4-衍生的非糖基化Fc区域。人衍生的Fc区域比非人衍生的Fc区域更优选，所述非人衍生的Fc区域在人体内可以作为抗原，导致不希望的免疫应答如产生所述抗原的新抗体。
在本发明的组合物包含的缀合物中，促胰岛素释放肽通过非肽基接头与载体物质连接。如本文所用，术语“非肽基接头”是指单一(singe)化合物或者包含彼此连接的两或多个重复单位的生物相容的聚合物。可用于本发明中的非肽基接头可具有任何化学结构，主要功能是作为接头通过共价键连接促胰岛素释放肽与载体物质。因此，非肽基接头特征在于其是在两端具有能共价结合肽/载体物质的反应性基团的化合物，其中在两端的末端反应性基团彼此相同或者不同。在非肽基接头两端的反应性基团可以相同或不同。例如，非肽基接头在一端可具有马来酰亚胺基团，在另一端可具有醛基团、丙醛基团或者丁醛基团。在非肽基接头两端的反应性基团优选选自反应性醛基团、丙醛基团、丁醛基团、马来酰亚胺基团和琥珀酰亚胺衍生物。所述琥珀酰亚胺衍生物可以是琥珀酰亚胺丙酯、羟基琥珀酰亚胺、琥珀酰亚胺羧基甲酯或者琥珀酰亚胺碳酸盐。特别地，当非肽基接头在其两端均具有反应性醛基团时，在这两端可以通过最小的非特异性反应有效地连接生理学活性多肽和免疫球蛋白Fc区域。通过醛键的还原性烷化产生的终产物与通过酰胺键连接相比更稳定。醛反应性基团在低pH选择性结合N-末端，且在高pH如pH 9.0可以结合赖氨酸残基形成共价键。当使用其两端均具有反应性羟基基团的聚乙二醇作为非肽基聚合物时，所述羟基可以通过已知的化学反应有各种反应基团激活，或者可以使用具有可商购修饰的反应基团的聚乙二醇以制备本发明的促胰岛素释放肽缀合物。可用于本发明中的非肽基聚合物可以是SMCC(琥珀酰亚胺4-(N-马来酰亚胺-甲基)环己烷-1-羧酸酯)或者SFB(琥珀酰亚胺4-甲酰基苯甲酸)，其可以与肽的胺和巯基(sulfydryl)共价连接，但非限于此。所述非肽基聚合物可选自聚乙二醇、聚丙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、乙二醇与丙二醇的共聚物、聚氧乙烯多元醇、聚乙烯醇、多糖、葡聚糖、聚乙烯乙醚、可生物降解的聚合物如PLA(聚(乳酸)和PLGA(聚乳酸乙醇酸)、脂质聚合物、壳多糖、透明质酸，及这些聚合物的组合，优选聚乙二醇。本领域熟知的且本领域技术人员易于制备的其衍生物也包含在本发明范围内。
用以治疗肥胖相关疾病的本发明组合物中包含的缀合物优选通过非肽基接头共价连接促胰岛素释放肽与载体物质制备，其在WO08/082274中揭示，如式1所示：
式1
R1-X-R2-L-F
其中R1选自脱(des)-氨基-组氨酰、二甲基-组氨酰、β-羟基咪唑并丙酰、4-咪唑并乙酰和β-羧基咪唑并丙酰，
R2选自-NH2、-OH和-Lys，
X选自
Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Y-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Z-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser、
Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Y-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Z-Asn-Gly-Gly和
Ser-Asp-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Y-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Z-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser，
Y选自Lys、Ser和Arg，
Z选自Lys、Ser和Arg，
L是非肽基接头，
F是免疫球蛋白Fc。
此外，本发明的包含缀合物的药物组合物可包含药物可接受的载体。对于口服给予，所述药物可接受的载体可包括粘合剂、润滑剂、崩解剂、赋形剂、增溶剂、分散剂、稳定剂、悬浮剂、着色剂和香味剂。对于可注射制品，所述药物可接受的载体可包括缓冲剂、防腐剂、止痛剂、增溶剂、等渗剂和稳定剂。对于局部给予制品，所述药物可接受的载体可包括基质、赋形剂、润滑剂和防腐剂。本发明的药物组合物可以组合前述药物可接受的载体配制成各种剂量形式。例如，对于口服给予，所述药物组合物可以配制为片剂、锭剂、胶囊、酏剂、悬浮液、糖浆或者包药干糊片(wafer)。对于可注射制品，所述药物组合物可以配制为单位剂量形式，如以单一剂量形式置于多剂量容器或者安瓿中。所述药物组合物也可以配制为溶液、悬浮液、片剂、药丸、胶囊和长效制品形式。另一方面，举例的适于药物配制的载体、赋形剂和稀释剂包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、木糖醇、赤藻糖醇、麦芽糖醇、淀粉、阿拉伯树胶、藻酸盐、凝胶、磷酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、羟基苯甲酸甲酯(methylhydroxybenzoate)、羟基苯甲酸丙酯(propylhydroxybenzoate)、滑石、硬脂酸镁和矿物油。此外，所述药物配制物可进一步包含充填剂、抗凝剂、润滑剂、保湿剂、香味剂以及抗菌剂。本发明的药物组合物的给予剂量可以通过一些相关因素确定，包括治疗疾病的类型、给予途径、患者年龄、性别、体重和疾病严重性。由于本发明的药物组合物具有极佳的体内效力和效价持续时间，因此可以显著减少包含本发明组合物的药物的给予频率和剂量。
本发明组合物中包含的促胰岛素释放肽缀合物以明显低于天然促胰岛素释放肽的量即可呈现出持续抑制食物摄取的作用，从而可用于治疗如肥胖症和急性冠状动脉综合征等疾病。此外，由于抑制食物摄取的作用(抑制食欲)，所述促胰岛素释放肽缀合物可用于减少体脂如胆固醇和脂肪组织。为了治疗肥胖症和肥胖相关疾病，需要减少体脂，但是减轻瘦体重(leantissue)-即丧失蛋白质-是不可取的。由于瘦体重由肌肉、生命器官、骨、结缔组织及其它非脂肪组织组成，因此确信瘦体重的丧失对于人体健康有害。因此，由于本发明的组合物抑制食欲引起的体重减轻不导致瘦体重减轻，而是脂肪组织减轻，因此是治疗肥胖相关疾病的非常重要的因素。
由于促胰岛素释放肽如GLP-1、amylin、CCK和exendin在给予后1-6小时的短时间内维持其抑制食欲的效力，因此必须重复给予以治疗慢性疾病如肥胖症和肥胖相关疾病。本发明的组合物中包含的促胰岛素释放肽缀合物在低剂量即可维持其效力达到一周以上的时间，从而呈现出最大治疗效力。
再一方面，本发明提供了通过使用所述组合物治疗肥胖相关疾病的方法、抑制食物摄取的方法以及减轻体重的方法。特别地，本发明的方法可包括给予治疗可接受量的所述组合物的步骤。
如本文所用，术语“给予”是指通过某一合适方法将预定量的物质导入患者体内。包含所述缀合物的组合物可以通过任何常用模式给予，只要其可以到达希望的组织即可。可以通过各种给予模式给予，包括腹膜内、静脉内、肌内、皮下、皮内、口服、局部、鼻内、肺内以及直肠内给予，但是本发明不限于这些举例的给予模式。然而，由于肽在经口服给予时被消化，因此口服给予的组合物的活性成分应加以包膜或者配制为在胃中抗降解形式。优选地，本发明的组合物可以可注射形式给予。此外，本发明的药物组合物可以通过使用能将活性成分转运至靶细胞的某一装置给予。在这方面，所述组合物的治疗可接受剂量可以根据前述各个因素确定。
根据本发明另一方面，本发明提供了单独使用促胰岛素释放肽缀合物或者与一或多种抗肥胖药物组合治疗肥胖相关疾病的药物组合物。组成本发明药物组合物的用以与所述促胰岛素释放肽缀合物组合治疗肥胖相关疾病的物质例如包括示出抑制食欲或者增强能量代谢活性的物质、抑制脂质降解活性的物质、延迟胃排空活性的物质、示出蛋白质酪氨酸磷酸酶(PTP)1b-抑制活性及DPPIV-抑制活性的物质，如GLP-1及其衍生物(Patricia.，Trends in endocrinology and metabolism 2007；18：240-245)、糊精、PYY(肽YY)(Lynn et al.，Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters2007；17：1916-1919)、瘦素、缩胆促胰素(cholecytokinin)(CCK)、胃泌酸调节素(oxyntomodulin)、ghrelin拮抗剂、NPY拮抗剂(Elena et al.，Nutrition，Metabolism & Cardiovascular Disease 2008；18：158-168)，Sarika et al.，Neuropeptides 2006；40：375-401)、利莫那班(rimonabant)、西布曲明和奥利司他(Alan Dove.，Nature biotechnology 2001；19：25-28)，但不限于这些物质。
实施例
在下文中，通过如下实施例可以获得对于本发明更好的理解，所述实施例只是例证本发明，而无限制本发明之意。
实施例1：制备促胰岛素释放肽缀合物(CA-Exendin)
将3.4K PropionALD(2)PEG(具有两个丙醛基团的PEG，IDB Inc.，Korea)和咪唑并-乙酰Exendin-4的赖氨酸残基(Bachem，Swiss)进行聚乙二醇化(pegylation)，通过将所述肽与PEG以1∶15摩尔比率在4℃反应过夜，肽浓度为5mg/ml。在此期间，在pH 7.5缓冲剂中进行反应，向其中加入作为还原剂的20mM SCB(NaCNBH3)以进行反应。在如下条件下使用SOURCE S(XK 16ml，Amersham Biosciences)分离单聚乙二醇化的exendin和异构体。
柱：SOURCE S(XK 16ml，Amersham Biosciences)
流速：2.0ml/分钟
梯度：A 0→100％45分钟B(A：20mM柠檬酸pH 3.0；B：A+0.5MKCl)
将分离的单聚乙二醇化的CA-Exendin-4与免疫球蛋白Fc结合。反应在肽∶免疫球蛋白Fc＝1∶4的比率在4℃进行16小时，总蛋白质浓度为50mg/ml。反应在100mM K-P(pH 6.0)溶液中进行，向其中加入作为还原剂的20mM SCB。在结合反应之后，使用SOURCE Phe(16ml)和SOURCE Q(16ml)进行两次纯化步骤。
柱：SOURCE Phe(HR16ml，Amersham Biosciences)
流速：2.0ml/分钟
梯度：B 100→0％30分钟B(A：20mM Tris pH7.5；B：A+1.5M NaCl)
柱：SOURCE Q(XK16ml，Amersham Biosciences)
流速：2.0ml/分钟
梯度：A 0→25％60分钟B(A：20mM Tris pH7.5；B：A+1M NaCl)
实施例2：促胰岛素释放肽缀合物在ob/ob小鼠中的减轻体重作用
将熟知的肥胖症动物模型ob/ob小鼠(C57BL/6JHamSlc-ob/bo，雌性，8-9周龄)分为4组(每组5只小鼠)，然后给予载体和Byetta(Amylin-Lily，exendin-4，45μg/kg，每天皮下注射)以及在实施例1中制备的促胰岛素释放肽缀合物(45μg或者100μg/kg，每周皮下注射一次)。然后，测量28天体重改变情况，在完成给予后测量血液脂质代谢参数如胆固醇和游离脂肪酸水平。在完成检验后，切离肝和脂肪组织，并称重。促胰岛素释放肽缀合物在ob/ob小鼠中的减轻体重作用示于表1。
表1
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如表1和图1和图2所示，所述促胰岛素释放肽缀合物示出在1/7剂量优于Byetta的减轻体重和降低胆固醇水平的作用，且该作用是剂量依赖性的。此外，每周给予一次所述促胰岛素释放肽缀合物的效力维持时间比每天给予exendin-4的效力维持时间长。
实施例3：促胰岛素释放肽缀合物在DIO小鼠中的减轻体重作用
将熟知的肥胖症动物模型DIO(饮食诱导的肥胖症)小鼠mice(C57BL/6NcrjBgi，雄性，25周龄)分为5组(每组5只小鼠)，然后给予载体和Byetta(100μg/kg，每天皮下注射)以及在实施例1中制备的促胰岛素释放肽缀合物(20、50、100μg/kg，每周皮下注射一次)。然后，测量2周体重改变情况。促胰岛素释放肽缀合物在DIO小鼠中的减轻体重作用示于表2。
表2
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如表2和图3所示，所述促胰岛素释放肽缀合物示出在1/17.5剂量优于Byetta的减轻体重的作用，且该作用是剂量依赖性的。此外，每周给予一次所述促胰岛素释放肽缀合物的效力维持时间比每天给予exendin-4的效力维持时间长。
实施例4：促胰岛素释放肽缀合物在ZDF(Zucker糖尿病大鼠)大鼠中的减轻体重作用
ZDF通常用于糖尿病研究中，且具有与ob/ob小鼠相似的特征(ZDF/Gmi-fa/fa，雄性，7周龄)，将其分为5组(每组5只小鼠)，然后给予载体和Byetta(100μg/kg，每天皮下注射)以及在实施例1中制备的促胰岛素释放肽缀合物(20、50、100μg/kg，每周一次皮下注射)。然后，测量8周的体重和食物摄取情况中的改变，在完成给予之后测量血液脂质代谢参数如胆固醇水平。在完成检验之后，切离脂肪组织并称重。所述促胰岛素释放肽缀合物在ZDF大鼠中的减轻体重作用在表3中示出。
表3
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如表3和图4和图5所示，所述促胰岛素释放肽缀合物示出在1/35剂量优于Byetta的减轻体重和体脂以及抑制食物摄取的作用，且该作用是剂量依赖性的。此外，每周给予一次所述促胰岛素释放肽缀合物的效力维持时间比每天给予exendin-4的效力维持时间长。