《一种饲用复合微生物制剂的生产方法.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《一种饲用复合微生物制剂的生产方法.pdf(9页珍藏版)》请在专利查询网上搜索。
1、10申请公布号CN102067941A43申请公布日20110525CN102067941ACN102067941A21申请号201010581066622申请日20101209A23K1/14200601A23K1/16200601C12N1/20200601C12N1/16200601C12R1/125200601C12R1/85200601C12R1/2520060171申请人四川省食品发酵工业研究设计院地址611130四川省成都市温江区杨柳东路中段98号72发明人康建平苏波黄静陈蓉周泽林岳晓敏谢文渊王拥军74专利代理机构成都金英专利代理事务所普通合伙51218代理人袁英54发明名称一种。
2、饲用复合微生物制剂的生产方法57摘要本发明公开了一种饲用复合微生物制剂的生产方法,它包括菌剂制作、配料、枯草芽孢杆菌培养基的制备、啤酒酵母培养基的制备和植物乳杆菌培养基的制备等步骤。本发明将枯草芽孢杆菌、啤酒酵母、植物乳杆菌三种菌种经选育形成复合菌种,提高了复合菌体的总数,具有菌种存活率、稳定性强等优点,与球磨糠、麸皮和低聚异麦芽糖以良好的配比混合,使其形成最佳的复合比例,为其畜禽肠道内环境的形成创造了良好的条件,好氧菌枯草芽孢杆菌和酵母菌相互作用产生更多营养物质和淀粉酶、蛋白酶纤维素等,同时还能耗去畜禽肠道内的氧气,为乳酸菌的繁殖创造了良好的生长环境,改善畜禽的肠道功能,提高饲料转化率,改善。
3、生畜禽肠道微生态平衡。51INTCL19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书2页说明书6页CN102067942A1/2页21一种饲用复合微生物制剂的生产方法,其特征在于它包括以下步骤(1)将枯草芽孢杆菌种、啤酒酵母菌种和植物乳杆菌种分别接种于枯草芽孢杆菌培养液、啤酒酵母培养液和植物乳杆菌培养液中,分别收集菌体后制成粉剂;(2)将步骤(1)制得的枯草芽孢杆菌粉剂、啤酒酵母菌粉剂和植物乳杆菌粉剂,与球磨糠、麸皮和低聚异麦芽糖混合,经称量、包装后生产出粉剂型饲用复合微生物制剂,其中,所述的饲用复合微生物制剂中各组分的重量百分比为球磨糠1525、麸皮7484、低聚异麦芽糖0021,。
4、其中枯草芽孢杆菌数2107CFU/G、啤酒酵母菌数5106CFU/G和植物乳杆菌数45106CFU/G。2根据权利要求1所述的饲用复合微生物制剂的生产方法,其特征在于所述的枯草芽孢杆菌培养液及枯草芽孢杆菌培养方法为将葡萄糖5G、蛋白胨10G、牛肉膏5G、氯化钠5G和水1000ML一并装入摇瓶中,在温度121,压力01MPA条件下灭菌20MIN后冷却到37左右,将保存的枯草芽孢杆菌斜面菌种在无菌台上接种于灭菌好的摇瓶中,摇瓶工作时的转速为160RMP,温度37,发酵24H,PH控制在74;然后再转入在温度121,压力01MPA条件下灭菌30MIN的50L种子发酵罐,发酵罐转速160RMP,温度3。
5、7,发酵24H,风量253M3/H,PH为74,压力00501MPA;接着再转入温度在121,压力01MPA条件下灭菌30MIN的500L发酵罐,发酵罐转速160RMP,温度37,发酵24H,风量1520M3/H,PH为74,压力00501MPA,将发酵好后的培养液通用高速管式离心机富集菌体后再通过喷雾干燥收集,喷雾干燥的配方重量比为麦芽糊精20,CACL21,菌体10,喷雾干燥时入口温度170、出口温度55、压力23KG/CM2。3根据权利要求1所述的饲用复合微生物制剂的生产方法,其特征在于所述的啤酒酵母培养液及啤酒酵母菌培养方法为将酵母膏5G、蛋白胨6G、葡萄糖20G和蒸馏水1000ML一。
6、并装入摇瓶中,在温度121,压力01MPA条件下灭菌20MIN后冷却到30左右,将保存的啤酒酵母斜面菌种在无菌台上接种于灭菌好的摇瓶中,摇瓶工作时的转速160RMP,温度30,发酵24H,PH保持自然;然后再转入在温度121,压力01MPA条件下灭菌30MIN的50L种子发酵罐,发酵罐的转速160RMP,温度30,发酵24H,风量253M3/H,PH自然,压力00501MPA;接着再转入在温度121,压力01MPA条件下灭菌30MIN的500L发酵罐,500L发酵罐的转速160RMP,温度30,发酵48H,风量1520M3/H,PH自然,压力00501MPA,将发酵好后的培养液通用高速管式离心。
7、机富集菌体后再通过冷冻干燥收集,冷冻干燥的配方重量比为海藻糖10、奶粉10、菌体5,冷冻干燥时真空度129101MPA、隔板温度45、压缩机温度3335、干燥时间1820H。4根据权利要求1所述的饲用复合微生物制剂的生产方法,其特征在于所述的植物乳杆菌培养液及植物乳杆菌培养方法为将蛋白胨100G、牛肉膏100G、酵母提取物50G、柠檬酸氢二铵20G、磷酸氢二钾20G、三水醋酸钠50G、四水硫酸锰025G、七水硫酸镁058G、葡萄糖20G、吐温8010ML和蒸馏水1000ML一并装入摇瓶中,在温度121,压力01MPA条件下灭菌20MIN后冷却到37左右,将保存的植物乳杆菌斜面菌种在无菌台上接种。
8、于灭菌好的摇瓶中,摇瓶工作温度37,发酵24H,PH调节为6264;然后再转入在温度121,压力01MPA条件下灭菌30MIN的50L种子发酵罐,发酵罐温度37,发酵24H,PH6264,压力00501MPA;接着再转入在温度121,压力01MPA条件下灭菌30MIN的500L发酵罐,500L发酵罐温度37,发酵72H,PH6264,压力00501MPA,权利要求书CN102067941ACN102067942A2/2页3将发酵好后的培养液通用高速管式离心机富集菌体后再通过冷冻干燥收集,冷冻干燥的配方比例海藻糖10、奶粉10、菌体5,冷冻干燥时真空度129101MPA、隔板温度45、压缩机温度。
9、3335、干燥时间1820H。5根据权利要求1所述的饲用复合微生物制剂的生产方法,其特征在于所述的饲用复合微生物制剂中水分100。6根据权利要求1所述的饲用复合微生物制剂的生产方法,其特征在于所述的高速管式离心机的转速达16000RMP,能够有效分离菌体达99以上。权利要求书CN102067941ACN102067942A1/6页4一种饲用复合微生物制剂的生产方法技术领域0001本发明涉及一种微生物制剂的制作方法,具体涉及一种采用液体深层发酵的饲用复合微生物制剂的生产方法。背景技术0002动物的消化系统特别是肠内有上百种、数百亿的细菌形成肠内菌丛,它与动物健康有着密切的关系。肠内菌丛在发挥各种。
10、营养生理学作用的同时,还可以抑制病原菌增殖等防御感染的作用。家畜的大肠菌症、沙门氏菌症以及梭状芽胞杆菌肠炎的发生都与肠内菌的状态有密切关系。因此,使肠内菌丛的平衡保持正常对维护动物健康是必不可少的。它与畜禽生产中的各项指标的提高和改善有密切关系。0003微生物制剂是一种取代或平衡动物生态系统中一种或多种菌系的微生物制品。狭义上讲,它是一种能激发自身有益菌种繁殖增长,同时抵制有害菌系生长的微生物制品。0004微生物制剂含有大量的乳酸菌、酵母菌等多种有益微生物,作为饲料进入畜禽体内后,能迅速繁殖,一方面投入菌种的代谢物中和肠内毒素,抑制了其它有害菌丛的生长,另一方面在宿主体内形成了正常微生物菌群,。
11、为宿主合成主要的维生素,提供营养和阻止致病菌的入侵。0005微生物制剂进入肠内抵制有害菌,降低恶臭及有害成分的形成(恶臭是由魏氏杆菌等有害菌分解蛋白质和氨基酸时产生的毒性胺、氨和硫化氢等有害物质造成的),使排出的粪便消除恶臭,从而减轻脏器负担,使末梢血管扩张,营养的供应变得顺畅。同时,由于消除了障碍,细胞繁殖加快,使得产生的肉质、蛋质、乳质得到提高。0006目前市场上的微生物制剂产品主要有粉剂和水剂两大类,但是粉剂类产品普遍菌种单一,存活率低,稳定性差。水剂则运输不便,活性保存期短,容易发生自溶现象等。发明内容0007本发明的目的针对现有技术的不足,提供一种饲用复合微生物制剂粉剂及其制造方法,。
12、复合微生物制剂采用枯草芽孢杆菌、酵母菌和乳杆菌构成的复合菌种,解决现有各类微生物制剂菌种单一、存活率低、稳定性差、活性保存期短和容易发生自溶等缺陷,大幅度提高微生物菌剂的产量和保存率。0008本发明的提供的一种饲用复合微生物制剂生产方法,该方法包括以下步骤(1)将枯草芽孢杆菌种、啤酒酵母菌种和植物乳杆菌种分别接种于枯草芽孢杆菌培养液、啤酒酵母培养液和植物乳杆菌培养液中,分别收集菌体后制成粉剂;(2)将步骤(1)制得的枯草芽孢杆菌粉剂、啤酒酵母菌粉剂和植物乳杆菌粉剂,与球磨糠、麸皮和低聚异麦芽糖混合,经称量、包装后生产出粉剂型饲用复合微生物制剂,其中,所述的饲用复合微生物制剂中各组分的重量百分比。
13、为球磨糠1525、麸皮7484、低聚异麦芽糖0021,枯草芽孢杆菌数2107CFU/G、啤酒酵母菌数5106CFU/G和植物乳杆菌数45106CFU/G。说明书CN102067941ACN102067942A2/6页50009其中,本发明所述的枯草芽孢杆菌培养液及枯草芽孢杆菌培养方法为将葡萄糖5G、蛋白胨10G、牛肉膏5G、氯化钠5G和水1000ML一并装入摇瓶中,在温度121,压力01MPA条件下灭菌20MIN后冷却到37左右,将保存的枯草芽孢杆菌斜面菌种在无菌台上接种于灭菌好的摇瓶中,摇瓶工作时的转速为160RMP,温度37,发酵24H,PH控制在74;然后再转入已灭菌好的(在温度121、。
14、压力01MPA条件下灭菌30MIN)50L种子发酵罐,发酵罐转速160RMP,温度37,发酵24H,风量253M3/H,PH为74,压力00501MPA;接着再转入已灭菌好的(在温度121、压力01MPA条件下灭菌30MIN)500L发酵罐,发酵罐转速160RMP,温度37,发酵24H,风量1520M3/H,PH为74,压力00501MPA,将发酵好后的培养液通用高速管式离心机(转速16000RMP)富集菌体后再通过喷雾干燥收集,喷雾干燥的配方重量比为麦芽糊精20,CACL21,菌体10,喷雾干燥时入口温度170、出口温度55、压力23KG/CM2。0010本发明所述的啤酒酵母培养液及啤酒酵母。
15、菌培养方法为将酵母膏5G、蛋白胨6G、葡萄糖20G和蒸馏水1000ML一并装入摇瓶中,在温度121,压力01MPA条件下灭菌20MIN后冷却到30左右,将保存的啤酒酵母斜面菌种在无菌台上接种于灭菌好的摇瓶中,摇瓶工作时的转速160RMP,温度30,发酵24H,PH保持自然;然后再转入已灭菌好的(温度在121、压力01MPA条件下灭菌30MIN)50L种子发酵罐,发酵罐的转速160RMP,温度30,发酵24H,风量253M3/H,PH自然,压力00501MPA;接着再转入已灭菌好的(在温度121、压力01MPA条件下灭菌30MIN)500L发酵罐,500L发酵罐的转速160RMP,温度30,发酵。
16、48H,风量1520M3/H,PH自然,压力00501MPA。将发酵好后的培养液通用高速管式离心机(转速16000RMP)富集菌体后再通过冷冻干燥收集,冷冻干燥的配方重量比为海藻糖10、奶粉10、菌体5,冷冻干燥时真空度129101MPA、隔板温度45、压缩机温度3335、干燥时间1820H。0011本发明所述的植物乳杆菌培养液及植物乳杆菌培养方法为将蛋白胨100G、牛肉膏100G、酵母提取物50G、柠檬酸氢二铵20G、磷酸氢二钾20G、三水醋酸钠50G、四水硫酸锰025G、七水硫酸镁058G、葡萄糖20G、吐温8010ML和蒸馏水1000ML一并装入摇瓶中,在温度121,压力01MPA条件下。
17、灭菌20MIN后冷却到37左右,将保存的植物乳杆菌斜面菌种在无菌台上接种于灭菌好的摇瓶中,摇瓶工作温度37,发酵24H,PH调节为6264;然后再转入已灭菌好的(在温度121、压力01MPA条件下灭菌30MIN)50L种子发酵罐,发酵罐温度37,发酵24H,PH6264,压力00501MPA;接着再转入已灭菌好的(在温度121、压力01MPA条件下灭菌30MIN)500L发酵罐,500L发酵罐温度37,发酵72H,PH6264,压力00501MPA。将发酵好后的培养液通用高速管式离心机(转速16000RMP)富集菌体后再通过冷冻干燥收集,冷冻干燥的配方比例海藻糖10、奶粉10、菌体5,冷冻干燥。
18、时真空度129101MPA、隔板温度45、压缩机温度3335、干燥时间1820H。0012所述的饲用复合微生物制剂中水分100,所述的粉剂为枯草芽孢杆菌、啤酒酵母及植物乳杆菌的复合菌剂。0013为了考察本发明方法在生产过程中的卫生指标变化,发明人对产品中的感官指标、水分、粒度、枯草芽孢杆菌菌数、啤酒酵母菌数和植物乳杆菌菌数含量分别按目测鼻嗅(感官指标测定法)、GB/T6435(水分测定法)、GB/T59171(粒度测定法)、枯草芽孢杆菌平说明书CN102067941ACN102067942A3/6页6板计数法、啤酒酵母平板计数法和植物乳杆菌平板计数法进行测定。0014本发明与市场上现有饲用微生。
19、物制剂技术相比,具有以下优点1、本发明采用液体深层发酵技术,可以明显提高成品中活体菌数,发酵液能达到101010CFU/ML,产品中枯草芽孢杆菌的菌数2107CFU/G,啤酒酵母菌数5106CFU/G,植物乳杆菌数45106CFU/G。00152、本发明通过改进发酵配料和培养工艺条件,提高了菌体的总数,解决了目前菌种单一、活菌数保存率低等问题,菌种存活率1年高达80。00163、本发明将枯草芽孢杆菌、酵母菌、乳杆菌三种菌种经选育,并通过改进发酵配料和培养工艺条件,提高了复合菌体的总数,具有菌种存活率、稳定性强等优点,与球磨糠、麸皮和低聚异麦芽糖以良好的配比混合,使其形成最佳的复合比例,为其畜禽。
20、肠道内环境的形成创造了良好的条件,通过好氧菌枯草芽孢杆菌和酵母菌相互作用产生更多营养物质和淀粉酶、蛋白酶纤维素等,同时还能耗去畜禽肠道内的氧气,为乳酸菌的繁殖创造了良好的生长环境,改善畜禽的肠道功能,提高饲料转化率,改善生畜禽肠道微生态平衡。00174、本发明方法简单,工艺成熟,易于掌握控制,便于推广。具体实施方式0018下面给出实施例以对本发明进行具体的描述,需指出的是以下实施例不能理解为对本发明保护范围的限制,本领域的技术熟练人员根据本发明的上述内容对本发明作出的一些非本质的改进和调整仍属于本发明的保护范围。0019【实施例1】饲用复合微生物制剂的生产方法,它包括以下步骤(1)将枯草芽孢杆。
21、菌种、啤酒酵母菌种和植物乳杆菌种分别接种于枯草芽孢杆菌培养液、啤酒酵母培养液和植物乳杆菌培养液中,分别收集菌体后制成粉剂;(2)将步骤(1)制得的枯草芽孢杆菌粉剂、啤酒酵母菌粉剂和植物乳杆菌粉剂,与球磨糠、麸皮和低聚异麦芽糖混合,经称量、包装后生产出粉剂型饲用复合微生物制剂,其产品中,所述的饲用复合微生物制剂中各组分的重量百分比为球磨糠15、麸皮84、低聚异麦芽糖002,其中枯草芽孢杆菌数2107CFU/G、啤酒酵母菌数5106CFU/G和植物乳杆菌数45106CFU/G。0020枯草芽孢杆菌培养液及枯草芽孢杆菌培养方法为将葡萄糖50G、蛋白胨100G、牛肉膏50G、氯化钠50G和水1000M。
22、L一并装入摇瓶中,在温度121,压力01MPA条件下灭菌20MIN后冷却到37左右,将保存的枯草芽孢杆菌斜面菌种在无菌台上接种于灭菌好的摇瓶中,摇瓶工作时的转速为160RMP,温度37,发酵24H,PH控制在74;然后再转入已灭菌好的(在温度121、压力01MPA条件下灭菌30MIN)50L种子发酵罐,发酵罐转速160RMP,温度37,发酵24H,风量25M3/H,PH为74,压力005MPA;接着再转入已灭菌好的(在温度121、压力01MPA条件下灭菌30MIN)500L发酵罐,发酵罐转速160RMP,温度37,发酵24H,风量15M3/H,PH为74,压力005MPA,将发酵好后的培养液通。
23、用高速管式离心机(转速16000RMP)富集菌体后再通过喷雾干燥收集,喷雾干燥的配方重量比为麦芽糊精20,CACL21,菌体10,喷雾干燥时入口温度170、出口温度55、压力2KG/CM2。0021啤酒酵母培养液及啤酒酵母菌培养方法为将酵母膏50G、蛋白胨60G、葡萄糖200G和蒸馏水1000ML一并装入摇瓶中,在温度121,压力01MPA条件下灭菌20MIN后说明书CN102067941ACN102067942A4/6页7冷却到30左右,将保存的啤酒酵母斜面菌种在无菌台上接种于灭菌好的摇瓶中,摇瓶工作时的转速160RMP,温度30,发酵24H,PH保持自然;然后再转入已灭菌好的(在温度121。
24、、压力01MPA条件下灭菌30MIN)50L种子发酵罐,发酵罐的转速160RMP,温度30,发酵24H,风量3M3H,PH自然,压力01MPA;接着再转入已灭菌好的(在温度121、压力01MPA条件下灭菌30MIN)500L发酵罐,500L发酵罐的转速160RMP,温度30,发酵48H,风量20M3/H,PH自然,压力01MPA,将发酵好后的培养液通用高速管式离心机(转速16000RMP)富集菌体后再通过冷冻干燥收集,冷冻干燥的配方重量比为海藻糖10、奶粉10、菌体5,冷冻干燥时真空度129101MPA、隔板温度45、压缩机温度33、干燥时间20H。0022植物乳杆菌培养液及植物乳杆菌培养方法。
25、为将蛋白胨100G、牛肉膏100G、酵母提取物50G、柠檬酸氢二铵20G、磷酸氢二钾20G、三水醋酸钠50G、四水硫酸锰025G、七水硫酸镁058G、葡萄糖20G、吐温8010ML和蒸馏水1000ML一并装入摇瓶中,在温度121,压力01MPA条件下灭菌20MIN后冷却到37左右,将保存的植物乳杆菌斜面菌种在无菌台上接种于灭菌好的摇瓶中,摇瓶工作温度37,发酵24H,PH调节为62;然后再转入已灭菌好的(在温度121、压力01MPA条件下灭菌30MIN)50L种子发酵罐,发酵罐温度37,发酵24H,PH62,压力01MPA;接着再转入已灭菌好的(在温度121、压力01MPA条件下灭菌30MIN。
26、)500L发酵罐,500L发酵罐温度37,发酵72H,PH64,压力01MPA,将发酵好后的培养液通用高速管式离心机(转速16000RMP)富集菌体后再通过冷冻干燥收集,冷冻干燥的配方比例海藻糖10、奶粉10、菌体5,冷冻干燥时真空度129101MPA、隔板温度45、压缩机温度35、干燥时间20H。0023本发明方法中饲用复合微生物制剂中水分为100以下。0024【实施例2】饲用复合微生物制剂的生产方法,其特征在于它包括以下步骤(1)将枯草芽孢杆菌种、啤酒酵母菌种和植物乳杆菌种分别接种于枯草芽孢杆菌培养液、啤酒酵母培养液和植物乳杆菌培养液中,分别收集菌体后制成粉剂;(2)将步骤(1)制得的枯草。
27、芽孢杆菌粉剂、啤酒酵母菌粉剂和植物乳杆菌粉剂,与球磨糠、麸皮和低聚异麦芽糖混合,经称量、包装后生产出粉剂型饲用复合微生物制剂,其产品中,所述的饲用复合微生物制剂中各组分的重量百分比为球磨糠25、麸皮74、低聚异麦芽糖1,其中枯草芽孢杆菌数2107CFU/G、啤酒酵母菌数5106CFU/G和植物乳杆菌数45106CFU/G。0025枯草芽孢杆菌培养液及枯草芽孢杆菌培养方法为将葡萄糖50G、蛋白胨100G、牛肉膏50G、氯化钠50G和水1000ML一并装入摇瓶中,在温度121,压力01MPA条件下灭菌20MIN后冷却到37左右,将保存的枯草芽孢杆菌斜面菌种在无菌台上接种于灭菌好的摇瓶中,摇瓶工作时。
28、的转速为160RMP,温度37,发酵24H,PH控制在74;然后再转入已灭菌好的(在温度121、压力01MPA条件下灭菌30MIN)50L种子发酵罐,发酵罐转速160RMP,温度37,发酵24H,风量3M3/H,PH为74,压力01MPA;接着再转入已灭菌好的(在温度121、压力01MPA条件下灭菌30MIN)500L发酵罐,发酵罐转速160RMP,温度37,发酵24H,风量20M3/H,PH为74,压力01MPA,将发酵好后的培养液通用高速管式离心机(转速16000RMP)富集菌体后再通过喷雾干燥收集,喷雾干燥的配方重量比为麦芽糊精20,CACL21,菌体10,喷雾干燥时入口温度170、出口。
29、温度55、压力3KG/CM2。说明书CN102067941ACN102067942A5/6页80026啤酒酵母培养液及啤酒酵母菌培养方法为将酵母膏50G、蛋白胨60G、葡萄糖200G和蒸馏水1000ML一并装入摇瓶中,在温度121,压力01MPA条件下灭菌20MIN后冷却到30左右,将保存的啤酒酵母斜面菌种在无菌台上接种于灭菌好的摇瓶中,摇瓶工作时的转速160RMP,温度30,发酵24H,PH保持自然;然后再转入已灭菌好的(在温度121、压力01MPA条件下灭菌30MIN)50L种子发酵罐,发酵罐的转速160RMP,温度30,发酵24H,风量25M3/H,PH自然,压力005MPA;接着再转入。
30、已灭菌好的(在温度121、压力01MPA条件下灭菌30MIN)500L发酵罐,500L发酵罐的转速160RMP,温度30,发酵48H,风量15M3/H,PH自然,压力005MPA,将发酵好后的培养液通用高速管式离心机(转速16000RMP)富集菌体后再通过冷冻干燥收集,冷冻干燥的配方重量比为海藻糖10、奶粉10、菌体5,冷冻干燥时真空度129101MPA、隔板温度45、压缩机温度35、干燥时间18H。0027植物乳杆菌培养液及植物乳杆菌培养方法为将蛋白胨100G、牛肉膏100G、酵母提取物50G、柠檬酸氢二铵20G、磷酸氢二钾20G、三水醋酸钠50G、四水硫酸锰0250G、七水硫酸镁058G、。
31、葡萄糖200G、吐温8010ML和蒸馏水1000ML一并装入摇瓶中,在温度121,压力01MPA条件下灭菌20MIN后冷却到37左右,将保存的植物乳杆菌斜面菌种在无菌台上接种于灭菌好的摇瓶中,摇瓶工作温度37,发酵24H,PH调节为64;然后再转入已灭菌好的(在温度121、压力01MPA条件下灭菌30MIN)50L种子发酵罐,发酵罐温度37,发酵24H,PH64,压力005MPA;接着再转入已灭菌好的(在温度121、压力01MPA条件下灭菌30MIN)500L发酵罐,发酵罐温度37,发酵72H,PH62,压力005MPA,将发酵好后的培养液通用高速管式离心机(转速16000RMP)富集菌体后再。
32、通过冷冻干燥收集,冷冻干燥的配方比例海藻糖10、奶粉10、菌体5,冷冻干燥时真空度129101MPA、隔板温度45、压缩机温度33、干燥时间18H。0028本发明方法中饲用复合微生物制剂中水分为100以下。0029【实施例3】饲用复合微生物制剂的生产方法,它包括以下步骤(1)将枯草芽孢杆菌种、啤酒酵母菌种和植物乳杆菌种分别接种于枯草芽孢杆菌培养液、啤酒酵母培养液和植物乳杆菌培养液中,分别收集菌体后制成粉剂;(2)将步骤(1)制得的枯草芽孢杆菌粉剂、啤酒酵母菌粉剂和植物乳杆菌粉剂,与球磨糠、麸皮和低聚异麦芽糖混合,经称量、包装后生产出粉剂型饲用复合微生物制剂,其产品中,所述的饲用复合微生物制剂中。
33、各组分的重量百分比为球磨糠20、麸皮795、低聚异麦芽糖05,其中枯草芽孢杆菌数2107CFU/G、啤酒酵母菌数5106CFU/G和植物乳杆菌数45106CFU/G。0030枯草芽孢杆菌培养液及枯草芽孢杆菌培养方法为将葡萄糖50G、蛋白胨100G、牛肉膏50G、氯化钠50G和水1000ML一并装入摇瓶中,在温度121,压力01MPA条件下灭菌20MIN后冷却到37左右,将保存的植物乳杆菌斜面菌种在无菌台上接种于灭菌好的摇瓶中,摇瓶工作时的转速为160RMP,温度37,发酵24H,PH控制在74;然后再转入已灭菌好的(在温度121、压力01MPA条件下灭菌30MIN)50L种子发酵罐,发酵罐转速。
34、160RMP,温度37,发酵24H,风量28M3/H,PH为74,压力008MPA;接着再转入已灭菌好的(在温度121、压力01MPA条件下灭菌30MIN)500L发酵罐,发酵罐转速160RMP,温度37,发酵24H,风量18M3/H,PH为74,压力008MPA,将发酵好后的培养液通用高速管式离说明书CN102067941ACN102067942A6/6页9心机(转速16000RMP)富集菌体后再通过喷雾干燥收集,喷雾干燥的配方重量比为麦芽糊精20,CACL21,菌体10,喷雾干燥时入口温度170、出口温度55、压力25KG/CM2。0031啤酒酵母培养液及啤酒酵母菌培养方法为将酵母膏50G。
35、、蛋白胨60G、葡萄糖200G和蒸馏水1000ML一并装入摇瓶中,在温度121,压力01MPA条件下灭菌20MIN后冷却到30左右,将保存的啤酒酵母斜面菌种在无菌台上接种于灭菌好的摇瓶中,摇瓶工作时的转速160RMP,温度30,发酵24H,PH保持自然;然后再转入已灭菌好的(在温度121、压力01MPA条件下灭菌30MIN)50L种子发酵罐,发酵罐的转速160RMP,温度30,发酵24H,风量28M3/H,PH自然,压力008MPA;接着再转入已灭菌好的(在温度121、压力01MPA条件下灭菌30MIN)500L发酵罐,500L发酵罐的转速160RMP,温度30,发酵48H,风量18M3/H,。
36、PH自然,压力008MPA,将发酵好后的培养液通用高速管式离心机(转速16000RMP)富集菌体后再通过冷冻干燥收集,冷冻干燥的配方重量比为海藻糖10、奶粉10、菌体5,冷冻干燥时真空度129101MPA、隔板温度45、压缩机温度34、干燥时间19H。0032植物乳杆菌培养液及植物乳杆菌培养方法为将蛋白胨100G、牛肉膏100G、酵母提取物50G、柠檬酸氢二铵20G、磷酸氢二钾20G、三水醋酸钠50G、四水硫酸锰025G、七水硫酸镁058G、葡萄糖200G、吐温8010ML和蒸馏水1000ML一并装入摇瓶中,在温度121,压力01MPA条件下灭菌20MIN后冷却到37左右,将保存的植物乳杆菌斜。
37、面菌种在无菌台上接种于灭菌好的摇瓶中,摇瓶工作温度37,发酵24H,PH调节为63;然后再转入已灭菌好的(在温度121、压力01MPA条件下灭菌30MIN)50L种子发酵罐,发酵罐温度37,发酵24H,PH63,压力008MPA;接着再转入已灭菌好的(在温度121、压力01MPA条件下灭菌30MIN)500L发酵罐,500L发酵罐温度37,发酵72H,PH63,压力008MPA,将发酵好后的培养液通用高速管式离心机(转速16000RMP)富集菌体后再通过冷冻干燥收集,冷冻干燥的配方比例海藻糖10、奶粉10、菌体5,冷冻干燥时真空度129101MPA、隔板温度45、压缩机温度34、干燥时间19H。0033本发明方法中饲用复合微生物制剂中水分为100以下。说明书CN102067941A。