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一种促进骨生长和人骨替代材料的制备方法
    所属技术领域：骨外科、口腔外科、整形外科

    现有技术：本发明材料主要用于骨外科、口腔外科和整形外科等领域作为骨移植或促进骨折愈合的材料。目前，国内外已有文献报道作为骨替代材料的有羟基磷灰石、磷酸三钙、活性玻璃陶瓷、重组合异种骨(牛骨)和其它脱钙骨基质材料，但据查专利文献，尚未见有类似专利申请。上述有关技术文献如下：

    1、Hollinger JO，et al：Clin Orthop 1986；207：290

    2、Urist MR，et al：Clin Orthop 1984；187：277

    3、Urist MR，et al：Clin Orthop 1987；214：295

    4、Kawamura，M，et al：Clin Orthop 1987；217：287

    5、金岩，等：中华口腔医学杂志  1989；24：347

    6、刘玮，等：重组合异种骨的研制及其生物活性分析

             中华医学杂志  1991；71：378

    本发明的目的：用猪骨作为原材料，经过特殊的技术，将其制备成生物相容性良好，能促进骨折愈合又能替代自身植骨的生物材料，用于骨科、口腔科和整形外科等需要植骨或促进骨折愈合的病人。

    本发明的内容：

    一.屠宰场获得新鲜猪长骨→充分去除软组织、软骨和骨髓→洗净→干骺端分离，骨干锯成每段3cm长，骨骺制成大块状→用氯仿、甲醇脱脂→充分水洗、洗去残余的氯仿、甲醇，然后使其挥发过夜→用HCl脱钙，每24小时换液→反复水洗，洗去残余HCl，挤干水分→骨干部分成型为1×1×30mm3，骨骺部分成型为2×2×2mm3大小→再次用氯仿、甲醇脱脂→充分去除并挤干氯仿、甲醇液，挥发过夜→用水反复冲洗，彻底洗去残余氯仿、甲醇，再次使其充分挥发过夜→CaCl2搅拌抽提→去除CaCl2液体，充分水洗，除去残余液体→EDTA-Na2搅拌抽提→去除EDTA液体，充分水洗，除去残余液体→LiCl搅拌抽提→去除LiCl液体，流水充分水洗，除去残余液体，挤干水分→冷冻干燥→条、粒型分别包装，该材料命名为GW1。

    二.取上述粒型或条型材料，以每100g加入6M尿素或4～8M盐酸胍500ml的浓度，在室温下搅拌抽提24～48hrs，过滤除去残渣后，滤液10000rpm离心30min，4℃。上清装入透析袋内，对蒸馏水透析过夜直至沉淀产生。然后离心，10000rpm，30min，4℃，弃去上清。沉淀用水洗涤2-3次，完全去除水份后，冷冻干燥备用。

    三.将上述蛋白质用生理盐水稀释为适宜浓度的混悬液，以适当比例与GW1充分混匀后冷冻干燥，称为GW2(医用诱导骨基质)。

    四.粒、条型分别称量包装，环氧乙烷消毒。

    与现有技术相比较的优点：具有促进骨的生长，体内能较快吸收并转化为自身骨组织，生物相容性良好，材料来源价廉易得的特点。

    实现本发明的最好方式为用猪骨作原材料，将骨骺与骨干分开，在去除所有软组织和骨髓后，将其脱钙、脱脂，然后分别将骨骺和骨干制备成粒型或条形，再次脱脂后，分别用CaCl2、EDTA-Na2和LiCl抽提其内的非胶原蛋白。用尿素或盐酸胍抽提前述材料(GW1)，其抽提液对水透析后得到的蛋白质冷冻干燥后，再与GW1复合制成本材料。