一种八角茴香工业残渣中有效成分的提取方法 技术领域 本发明属于天然产物活性成分的提取分离技术领域， 具体涉及一种八角茴香工业 残渣中有效成分的提取方法。
背景技术 在 2010 年版的 《中国药典》 中收录， 八角茴香为木兰科植物， 其果实味芳香， 气辛、 甜， 具有温阳散寒， 理气止痛的功效。 现代药理研究表明， 该植物具有较明显的中枢兴奋、 抑 菌、 升高白细胞及镇痛等作用。
八角茴香中含有丰富的挥发油成分 ( 含量为 6 ～ 12％ )， 可用作香料， 此外还含有 大量的莽草酸 ( 含量为 3 ～ 7％ )， 由于莽草酸可作为抗流感药物 “达菲” 的合成原料而备 受关注。另外有报道， 八角茴香中还含有黄酮类、 醌类、 倍半萜类、 苯丙素类、 多糖、 脂肪油、 蛋白质、 树脂等成分， 具有抗菌和潜在的抗癌活性。但大多采用甲醇或乙醇提取， 忽略了醇 提后的残渣中的活性成分， 尤其是目前工业上只重视八角茴香中挥发油和莽草酸的提取， 丢弃残渣和其余成分， 这样不仅造成资源的浪费， 而且给环境带来污染。
关于八角茴香成分的制备工艺， 大多文献集中于对挥发油和莽草酸提取分离工艺 的研究， 其中参考文献 1 ： 徐静， 陆建平， 税志坚， 等 . 八角籽壳油脂的提取及残渣利用性分 析 [J]. 食品科技， 2010， 35(5) ： 284-288. 中徐静等人用索氏提取法分别提取八角籽和果壳 的挥发油成分， 分析了残渣八角籽粕和八角壳渣的部分质量指标， 最后得出八角籽粕的蛋 白质、 粗纤维含量与大豆皮相似， 可作为动物饲料。 但八角残渣中还有多种活性成分未被开 发利用， 若用作饲料， 则成本太高， 不利于八角的产业化发展。参考文献 2 ： 徐芃， 刘东成， 黄 天天， 等 . 索式提取与超声波提取对茴香抑菌成分的影响 [J]. 中国医药导报， 2008， 5(20) ： 39-40. 中徐芃等人研究了乙醇提取八角茴香油的最佳工艺条件， 比较了索氏提取法与超声 波提取法的效果。得到结果是索氏提取法所得到的提取物的抑菌效果较好。但索氏提取法 提取时间长， 温度高， 热敏感成分易分解， 并且不易实现生产放大。参考文献 3 ： 舒馨， 刘雄 民， 王巧 . 八角和八角残渣总黄酮提取工艺优化 [J]. 食品科学， 2010， 31(6) ： 65-69. 中舒 馨等人提出八角提取挥发油后产生的大量残渣， 目前基本没有得到任何应用， 通过采用乙 醇热回流法提取八角和八角残渣中的黄酮类化合物， 并考察了提取条件。因此对于已提取 挥发油和莽草酸后的八角茴香工业残渣的进一步提取成为现有技术中研究的重点和难点 问题。
发明内容
针对现有技术中存在的问题， 为了将八角茴香工业残渣得到更好的应用， 本发明 提出一种八角茴香工业残渣中有效成分的提取方法， 通过采用先进的闪式辅助提取技术， 在室温下即可进行操作， 提取时间短， 溶剂用量少， 提取效率高。该方法通过对提取挥发油 和莽草酸后的八角茴香工业残渣进行综合提取利用， 得到了多种活性成分， 这样避免资源 浪费的同时提高了产品的附加值。 本发明提供的提取方法流程简单， 生产周期短， 产物经测定具有极强的抗菌活性， 易实现工业应用。
本发明提出的一种八角茴香工业残渣中有效成分的提取方法， 具体包括以下步 骤：
步骤一 ： 将八角茴香工业残渣利用石油醚进行脱脂处理， 并分离得到提取液 A 和 残渣 A， 将提取液 A 进行蒸发处理后得到八角油脂， 并回收石油醚， 蒸发温度为 40 ～ 50℃ ； 所述的脱脂处理具体为 ： 采用闪式提取器进行脱脂处理， 石油醚与八角茴香工业残渣的液 固比为 8 ～ 10ml/g， 转速为 3500 ～ 5500r/min 下搅拌破碎 1 ～ 2min， 常温处理 1 ～ 3 次。
所述的闪式提取器为 JHBE-50 型闪式提取器。所述的残渣 A 可以进行多次上述的 脱脂处理得到， 每次脱脂处理的转速相同， 每次脱脂处理所采用的石油醚体积均满足液固 比为 8 ～ 10ml/g。
步骤二 ： 将残渣 A 利用乙醇溶液进行回流提取处理， 分离得到提取液 B 和残渣 B， 并将提取液 B 蒸发得到醇提物， 蒸发温度为 40 ～ 50 ℃ ； 回流提取处理具体为 ： 将浓度为 85 ～ 95％的乙醇溶液按照液固比为 8 ～ 10ml/g 的比例加入残渣 A 中， 于 70 ～ 80℃回流提 取 8 ～ 10h， 分离得到提取液 B 和残渣 B， 并回收乙醇。所述的残渣 B 也可以是经过多次上 述的回流提取得到， 一般优选回流提取 1 ～ 3 次。
步骤三 ： 将残渣 B 进行碱液处理得到提取液 C， 将提取液 C 进行酸处理得到八角苷； 所述的碱液处理具体为 ： 将残渣 B 按照液固比为 10 ～ 30ml/g 的比例依次加入浓 度为 3 ～ 7％碳酸氢钠溶液、 浓度为 3 ～ 7％碳酸钠溶液、 浓度为 1 ～ 2％氢氧化钠溶液 A 和 浓度为 4 ～ 6％氢氧化钠溶液 B 中， 于 50 ～ 70℃水浴搅拌 2 ～ 4h 后离心， 顺次分离得到提 取液 C1、 提取液 C2、 提取液 C3 和提取液 C4， 将提取液 C1、 提取液 C2、 提取液 C3 和提取液 C4 分 别进行酸处理， 得到八角苷 A、 八角苷 B、 八角苷 C 和八角苷 D， 并混合得到八角苷， 所述的提 取液 C 是指提取液 C1、 提取液 C2、 提取液 C3 和提取液 C4。
所述的酸处理具体为 ： 利用浓度为 4 ～ 8M 的盐酸分别调节提取液 C1、 提取液 C2、 提 取液 C3 和提取液 C4， 使 pH 均为 1.5 ～ 2.5， 再离心处理并沉淀干燥， 得到八角苷 A、 八角苷 B、 八角苷 C 和八角苷 D。
步骤四 ： 将所述的醇提物和八角苷分别进行水解处理， 得到八角素 A 和八角素 B。
所述的水解处理具体为 ： 按照液固比为 20 ～ 40ml/g 的比例， 将浓度为 0.4 ～ 0.6M 盐酸分别加入醇提物和八角苷中， 均于 90 ～ 100℃水解 1 ～ 3h， 离心后将沉淀分别进行干 燥， 得到八角素 A 和八角素 B。
所述的液固比是指每克固体中加入的液体体积的毫升量， 单位为 ml/g。
本发明提出的一种八角茴香工业残渣中有效成分的提取方法中， 得到的产物八角 油脂的产率为 9.6 ～ 11％； 八角素 A 的产率为 2.1 ～ 3.5％； 八角素 B 的产率为 24 ～ 26％。
本发明的优点在于 ：
1、 本发明提出的一种八角茴香工业残渣中有效成分的提取方法， 采用了闪式辅助 提取技术， 与传统方法相比， 在室温下操作， 条件温和， 使不耐热的活性成分免遭破坏， 而且 提取时间短， 溶剂用量少， 提取效率高。
2、 本发明提出的一种八角茴香工业残渣中有效成分的提取方法， 通过对提取挥发 油和莽草酸后的工业残渣综合利用， 得到了多种活性成分， 其中非挥发性成分八角油脂， 可
用于食品和化妆品行业， 醇提物主要含有黄酮苷及苷元， 八角素 B 主要含有醌类和多酚类， 降低了生产成本， 提高了产品的附加值和经济效益。
3、 本发明提出的一种八角茴香工业残渣中有效成分的提取方法， 流程简单， 生产 周期短， 得到的八角素 A 和八角素 B 产率较高， 经测定具有极强的抗菌活性， 易实现工业应 用。 附图说明
图1： 本发明提出的一种八角茴香工业残渣中有效成分的提取方法的工艺流程图。 具体实施方式
下面将结合附图和实施例对本发明做进一步的详细说明。
本发明提出的一种八角茴香工业残渣中有效成分的提取方法， 如图 1 所示， 具体 包括以下步骤 ：
步骤一 ： 将八角茴香工业残渣利用石油醚进行脱脂处理， 并分离得到提取液 A 和 残渣 A， 将提取液 A 蒸发得到八角油脂， 蒸发温度为 40 ～ 50℃， 回收石油醚 ； 脱脂处理具体 为： 采用闪式提取器进行脱脂处理， 石油醚与八角茴香工业残渣的液固比为 8 ～ 10ml/g， 转 速为 3500 ～ 5500r/min 下搅拌破碎 1 ～ 2min， 常温处理 1 ～ 3 次。
所述的闪式提取器为 JHBE-50 型闪式提取器。所述的八角茴香工业残渣为经过提 取挥发油和莽草酸后的工业残渣。通过采用热水提取的方法提取莽草酸， 通过采用水蒸气 蒸馏法提取挥发油。
步骤二 ： 将残渣 A 利用乙醇溶液进行回流提取处理， 分离得到提取液 B 和残渣 B， 并将提取液 B 蒸发得到醇提物， 蒸发温度为 40 ～ 50 ℃ ； 回流提取处理具体为 ： 将浓度为 85 ～ 95％的乙醇溶液按照液固比为 8 ～ 10ml/g 的比例加入残渣 A 中， 于 70 ～ 80℃回流提 取 8 ～ 10h， 回流提取 1 ～ 3 次， 分离得到提取液 B 和残渣 B， 并回收乙醇。
步骤三 ： 将残渣 B 进行碱液处理得到提取液 C， 将提取液 C 进行酸处理得到八角 苷；
所述的碱液处理具体为 ： 将残渣 B 按照液固比为 10 ～ 30ml/g 的比例依次加入浓 度为 3 ～ 7％碳酸氢钠溶液、 浓度为 3 ～ 7％碳酸钠溶液、 浓度为 1 ～ 2％氢氧化钠溶液 A 和 浓度为 4 ～ 6％氢氧化钠溶液 B 中， 于 50 ～ 70℃水浴搅拌 2 ～ 4h 后离心， 顺次分离得到提 取液 C1、 提取液 C2、 提取液 C3 和提取液 C4， 将提取液 C1、 提取液 C2、 提取液 C3 和提取液 C4 分 别进行酸处理， 得到八角苷 A、 八角苷 B、 八角苷 C 和八角苷 D， 并混合得到八角苷， 所述的提 取液 C 是指提取液 C1、 提取液 C2、 提取液 C3 和提取液 C4。其中每种碱液下的碱液处理可以 连续重复处理 1 ～ 3 次。
所述的酸处理具体为 ： 利用浓度为 4 ～ 8M 的盐酸分别调节提取液 C1、 提取液 C2、 提 取液 C3 和提取液 C4 的 pH 值， 使 pH 值均为 1.5 ～ 2.5， 再离心处理并将沉淀干燥， 得到八角 苷 A、 八角苷 B、 八角苷 C 和八角苷 D。
步骤四 ： 将步骤二中制备得到的醇提物和步骤三中制备得到的八角苷分别进行水 解处理， 得到八角素 A 和八角素 B。所述的水解处理具体为 ： 按照液固比为 20 ～ 40ml/g 的比例， 将浓度为 0.4 ～ 0.6M 盐酸分别加入醇提物和八角苷中， 均于 90 ～ 100℃水解 1 ～ 3h， 离心后将沉淀分别进行干 燥， 得到八角素 A 和八角素 B。
所述的液固比是指每克固体中加入的液体体积的毫升量， 单位为 ml/g。
本发明提出的一种八角茴香工业残渣中有效成分的提取方法中， 得到的产物八角 油脂的产率为 9.6 ～ 11％ ； 八角素 A 的产率为 2.1 ～ 3.5％， 对金黄色葡萄球菌、 枯草芽孢 杆菌、 大肠埃希菌等均有抑制作用。 八角素 B 的产率为 24 ～ 26％， 对金黄色葡萄球菌、 枯草 芽孢杆菌、 大肠埃希菌、 沙门菌、 铜绿假单胞菌等均有抑制作用。
实施例 1 ：
一种八角茴香工业残渣中有效成分的提取方法， 具体包括以下步骤 ：
步骤一 ： 将干燥后八角茴香工业残渣利用石油醚进行脱脂处理， 按照液固比为 10ml/g 的比例向八角茴香工业残渣中加入石油醚， 使用闪式提取器， 在转速 5500r/min 下 搅拌破碎 2min， 并分离提取液 A 和残渣 A。将提取液 A 于 40℃蒸发得到八角油脂， 并回收石 油醚。
步骤二 ： 将残渣 A 利用乙醇溶液回流提取处理 ： 按照液固比为 10ml/g 的比例向残 渣 A 中加入浓度为 90％的乙醇溶液， 70℃回流提取 10h， 分离提取液 B 和残渣 B， 将提取液 B 于 40℃蒸发后得到醇提物， 并回收乙醇 ； 步骤三 ： 将残渣 B 进行碱液处理 ：
(1) 按照液固比为 10ml/g 的比例向残渣 B 中加入浓度为 3 ％的碳酸氢钠溶液， 70℃水浴搅拌 4h 后离心处理， 分离得到提取液 C1 和残渣 C1 ；
(2) 将提取液 C1 利用 8M 盐酸调节 pH ＝ 1.5， 离心处理， 分离沉淀并干燥， 得到八 角苷 A ；
(3) 按照液固比为 10ml/g 的比例向残渣 C1 中加入浓度为 3％的碳酸钠溶液， 70℃ 水浴搅拌 4h 后离心处理， 分离得到提取液 C2 和残渣 C2 ；
(4) 将提取液 C2 利用 8M 盐酸调节 pH ＝ 1.5， 离心处理， 分离沉淀并干燥， 得到八 角苷 B ；
(5) 按照液固比为 10ml/g 的比例向残渣 C2 中加入浓度为 1.5％的氢氧化钠溶液 A， 70℃水浴搅拌 4h 后离心处理， 分离得到提取液 C3 和残渣 C3 ；
(6) 将提取液 C3 利用 8M 盐酸调节 pH ＝ 1.5， 离心处理， 分离沉淀并干燥， 得到八 角苷 C ；
(7) 按照液固比为 10ml/g 的比例向残渣 C3 中加入浓度为 4％的氢氧化钠溶液 B， 70℃水浴搅拌 4h 后离心处理， 分离得到提取液 C4 和残渣 C4 ；
(8) 将提取液 C4 利用 8M 盐酸调节 pH ＝ 1.5， 离心处理， 分离沉淀并干燥， 得到八 角苷 D ；
(9) 将八角苷 A、 八角苷 B、 八角苷 C 和八角苷 D 混合得到八角苷 ；
步骤四 ： 将得到的醇提物和八角苷分别进行水解处理， 得到八角素 A 和八角素 B ；
所述的水解处理的条件为 ： 按照液固比为 40ml/g 的比例， 将 0.6M 盐酸分别加入醇 提物和八角苷中， 均于 90℃水解 3h， 离心后将沉淀分别进行干燥， 得到八角素 A 和八角素 B。
所述的八角油脂产率为 9.6％ ； 所述的八角素 A 的产率为 2.1％， 所述的八角素 B
产率为 24％。
实施例 2 ：
一种八角茴香工业残渣中有效成分的提取方法， 具体包括以下步骤 ：
步骤一 ： 将干燥后八角茴香工业残渣利用石油醚进行脱脂处理， 按照液固比为加 入 8ml/g 的比例向八角茴香工业残渣中加入石油醚， 使用闪式提取器， 在转速 3500r/min 下 搅拌破碎 1min， 并分离得到提取液 A1 和残渣 A1。
按照液固比为 8ml/g 的比例向将残渣 A1 中加入石油醚， 使用闪式提取器， 在转速 3500r/min 下搅拌破碎 1min， 并分离得到提取液 A2 和残渣 A2。将提取液 A1 和提取液 A2 混 合得到提取液 A， 并于 45℃蒸发后得到八角油脂， 回收石油醚 ； 所述的残渣 A2 即为残渣 A。
步骤二 ： 将残渣 A 利用乙醇溶液回流提取处理 ： 按照液固比为 8ml/g 的比例向残 渣 A 中加入浓度为 95％的乙醇溶液， 80℃回流提取 8h， 分离得到提取液 B1 和残渣 B1 ； 按照 液固比为 8ml/g 的比例再向残渣 B1 中加入浓度为 95％的乙醇溶液， 80℃回流提取 8h， 分离 提取液 B2 和残渣 B2。将提取液 B1 和提取液 B2 混合为提取液 B， 并于 45℃蒸发提取液 B 后 得到醇提物， 回收乙醇 ； 所述的残渣 B2 即为残渣 B。
步骤三 ： 将残渣 B 进行碱液处理 ： (1) 按照液固比为 20ml/g 的比例向残渣 B 中加入浓度为 3 ％的碳酸氢钠溶液， 70℃水浴搅拌 2h 后离心处理， 分离得到提取液 C11 和残渣 C11 ；
(2) 按照液固比为 20ml/g 的比例向残渣 C11 中加入浓度为 3％的碳酸氢钠溶液， 70℃水浴搅拌 2h 后离心处理， 分离得到提取液 C12 和残渣 C12 ；
(3) 将提取液 C11 和提取液 C12 混合为提取液 C1， 再利用 6M 盐酸调节提取液 C1 的 pH ＝ 2， 离心处理， 分离沉淀并干燥， 得到八角苷 A ；
(4) 按照液固比为 20ml/g 的比例向残渣 C12 中加入浓度为 5％的碳酸钠溶液， 70℃ 水浴搅拌 2h 后离心处理， 分离得到提取液 C21 和残渣 C21 ；
(5) 按照液固比为 20ml/g 的比例向残渣 C21 中加入浓度为 5％的碳酸钠溶液， 70℃ 水浴搅拌 2h 后离心处理， 分离得到提取液 C22 和残渣 C22 ；
(6) 将提取液 C21 和提取液 C22 混合为提取液 C2， 再利用 6M 盐酸调节提取液 C2 的 pH ＝ 2， 离心处理， 分离沉淀并干燥， 得到八角苷 B ；
(7) 按照液固比为 20ml/g 的比例向残渣 C22 中加入浓度为 1％的氢氧化钠溶液 A， 70℃水浴搅拌 2h 后离心处理， 分离得到提取液 C31 和残渣 C31 ；
(8) 按照液固比为 20ml/g 的比例向残渣 C31 中加入浓度为 1％的氢氧化钠溶液 A， 70℃水浴搅拌 2h 后离心处理， 分离得到提取液 C32 和残渣 C32 ；
(9) 将提取液 C31 和提取液 C32 混合为提取液 C3， 再利用 6M 盐酸调节提取液 C3 的 pH ＝ 2， 离心处理， 分离得到沉淀并干燥， 得到八角苷 C ；
(10) 按照液固比为 20ml/g 的比例向残渣 C32 中加入浓度为 5％的氢氧化钠溶液 B， 70℃水浴搅拌 2h 后离心处理， 分离得到提取液 C41 和残渣 C41 ；
(11) 按照液固比为 20ml/g 的比例向残渣 C41 中加入浓度为 5％的氢氧化钠溶液 B， 70℃水浴搅拌 2h 后离心处理， 分离得到提取液 C42 和残渣 C42 ；
(12) 将提取液 C41 和提取液 C42 混合后利用 6M 盐酸调节 pH ＝ 2， 离心处理， 分离沉 淀并干燥， 得到八角苷 D ；
(13) 将八角苷 A、 八角苷 B、 八角苷 C 和八角苷 D 混合得到八角苷 ；
步骤四 ： 将得到的醇提物和八角苷分别进行水解处理， 得到八角素 A 和八角素 B ；
所述的水解处理的条件为 ： 按照液固比为 40ml/g 的比例， 将 0.4M 盐酸分别加入醇 提物和八角苷中， 均于 100℃水解 1h， 离心后将沉淀分别进行干燥， 得到八角素 A 和八角素 B。
所述的八角油脂产率为 11％， 所述的八角素 A 的产率为 3.5％， 所述的八角素 B 的 产率为 26％。
实施例 3 ：
一种八角茴香工业残渣中有效成分的提取方法， 具体包括以下步骤 ：
步骤一 ： 将干燥后八角茴香工业残渣利用石油醚进行脱脂处理， 按照液固比为加 入 9ml/g 的比例向八角茴香工业残渣中加入石油醚， 使用闪式提取器， 在转速 4500r/min 下 搅拌破碎 1min， 并分离得到提取液 A1 和残渣 A1。
按照液固比为 9ml/g 的比例向将残渣 A1 中加入石油醚， 使用闪式提取器， 在转速 4500r/min 下搅拌破碎 1min， 并分离得到提取液 A2 和残渣 A2。
按照液固比为 9ml/g 的比例向将残渣 A2 中加入石油醚， 使用闪式提取器， 在转速 4500r/min 下搅拌破碎 1min， 并分离提取液 A3 和残渣 A3。将提取液 A1、 提取液 A2 和提取液 A2 混合为提取液 A， 并于 50℃蒸发后得到八角油脂， 回收石油醚 ； 所述的残渣 A3 即为残渣 A。
步骤二 ： 将残渣 A 利用乙醇回流提取处理 ： 按照液固比为 9ml/g 的比例向残渣 A 中 加入浓度为 85％的乙醇溶液， 75℃回流提取 9h， 分离得到提取液 B1 和残渣 B1 ；
按照液固比为 9ml/g 的比例再向残渣 B1 中加入浓度为 85％的乙醇溶液， 75℃回流 提取 9h， 分离得到提取液 B2 和残渣 B2 ；
按照液固比为 9ml/g 的比例再向残渣 B2 中加入浓度为 85％的乙醇溶液， 75℃回流 提取 9h， 分离得到提取液 B3 和残渣 B3 ；
将提取液 B1、 提取液 B2 和提取液 B3 混合为提取液 B， 并于 50℃蒸发， 得到醇提物， 回收乙醇。所述的残渣 B3 即为残渣 B。
步骤三 ： 将残渣 B 进行碱液处理 ：
(1) 按照液固比为 30ml/g 的比例向残渣 B 中加入浓度为 7 ％的碳酸氢钠溶液， 50℃水浴搅拌 4h 后离心处理， 分离得到提取液 C11 和残渣 C11 ；
(2) 按照液固比为 30ml/g 的比例向残渣 C11 中加入浓度为 7％的碳酸氢钠溶液， 50℃水浴搅拌 4h 后离心处理， 分离得到提取液 C12 和残渣 C12 ；
(3) 按照液固比为 30ml/g 的比例向残渣 C12 中加入浓度为 7％的碳酸氢钠溶液， 50℃水浴搅拌 4h 后离心处理， 分离得到提取液 C13 和残渣 C13 ；
(4) 将提取液 C11、 提取液 C12 和提取液 C13 混合为提取液 C1， 并利用 4M 盐酸调节提 取液 C1 的 pH ＝ 2.5， 离心处理， 分离沉淀并干燥， 得到八角苷 A ；
(5) 按照液固比为 30ml/g 的比例向残渣 C13 中加入浓度为 7％的碳酸钠溶液， 50℃ 水浴搅拌 4h 后离心处理， 分离得到提取液 C21 和残渣 C21 ；
(6) 按照液固比为 30ml/g 的比例向残渣 C21 中加入浓度为 7％的碳酸钠溶液， 50℃ 水浴搅拌 4h 后离心处理， 分离提取液 C22 和残渣 C22 ；
(7) 按照液固比为 30ml/g 的比例向残渣 C22 中加入浓度为 7％的碳酸钠溶液， 50℃水浴搅拌 4h 后离心处理， 分离得到提取液 C23 和残渣 C23 ；
(8) 将提取液 C21、 提取液 C22 和提取液 C23 混合为提取液 C2， 再利用 4M 盐酸调节提 取液 C2 的 pH ＝ 2.5， 离心处理， 分离沉淀并干燥， 得到八角苷 B ；
(9) 按照液固比为 30ml/g 的比例向残渣 C23 中加入浓度为 2％的氢氧化钠溶液 A， 50℃水浴搅拌 4h 后离心处理， 分离得到提取液 C31 和残渣 C31 ；
(10) 按照液固比为 30ml/g 的比例向残渣 C31 中加入浓度为 2％的氢氧化钠溶液 A， 50℃水浴搅拌 4h 后离心处理， 分离得到提取液 C32 和残渣 C32 ；
(11) 按照液固比为 30ml/g 的比例向残渣 C32 中加入浓度为 2％的氢氧化钠溶液 A， 50℃水浴搅拌 4h 后离心处理， 分离得到提取液 C33 和残渣 C33 ；
(12) 将提取液 C31、 提取液 C32 和提取液 C33 混合为提取液 C3， 再利用 4M 盐酸调节 提取液 C3 的 pH ＝ 2.5， 离心处理， 分离沉淀并干燥， 得到八角苷 C ；
(13) 按照液固比为 30ml/g 的比例向残渣 C33 中加入浓度为 6％的氢氧化钠溶液 B， 50℃水浴搅拌 4h 后离心处理， 分离得到提取液 C41 和残渣 C41 ；
(14) 按照液固比为 20ml/g 的比例向残渣 C41 中加入浓度为 6％的氢氧化钠溶液 B， 50℃水浴搅拌 4h 后离心处理， 分离得到提取液 C42 和残渣 C42 ；
(15) 按照液固比为 20ml/g 的比例向残渣 C42 中加入浓度为 6％的氢氧化钠溶液 B， 50℃水浴搅拌 4h 后离心处理， 分离得到提取液 C43 和残渣 C43 ；
(16) 将提取液 C41、 提取液 C42 和提取液 C43 混合为提取液 C4， 再利用 4M 盐酸调节 提取液 C4 的 pH ＝ 2.5， 离心处理， 分离沉淀并干燥， 得到八角苷 D ；
(17) 将八角苷 A、 八角苷 B、 八角苷 C 和八角苷 D 混合得到八角苷 ；
步骤四 ： 将得到的醇提物和八角苷分别进行水解处理， 得到八角素 A 和八角素 B ；
所述的水解处理的条件为 ： 按照液固比为 40ml/g 的比例， 将 0.4M 盐酸分别加入醇 提物和八角苷中， 均于 95℃水解 1h， 离心后将沉淀分别进行干燥， 得到八角素 A 和八角素 B。
所述的八角素 B 的产率为 25％， 对金黄色葡萄球菌、 枯草芽孢杆菌、 大肠埃希菌、 沙门菌、 铜绿假单胞菌等均有抑制作用 ； 所述的八角油脂产率为 10.3％， 所述的八角素 A 的 产率为 2.9％。