药物组合物 271 本发明涉及含有 6-(4- 溴 -2- 氯 - 苯基氨基 )-7- 氟 -3- 甲基 -3H- 苯并咪唑 -5- 甲 酸 (2- 羟基 - 乙氧基 )- 酰胺的硫酸氢盐 ( 下文称为 “本药物” ) 的药物组合物， 更具体地讲 涉及含有本药物的可口服递送组合物 ； 涉及所述组合物用作药物的用途 ； 和涉及制备所述 组合物的方法。
本药物在国际专利申请 WO 2007/076245 中公开， 是 MEK 的强效抑制剂。本药物是 具有式 I 所示结构的化合物的硫酸氢盐 ：
本药物具有抗增殖活性， 预期可用于治疗单独或部分由 MEK 介导的疾病或医学病 症， 特别是癌症， 如脑癌、 肺癌、 鳞状细胞癌、 膀胱癌、 胃癌、 胰腺癌、 乳腺癌、 头癌、 颈癌、 肾 癌、 肾脏癌、 卵巢癌、 前列腺癌、 结肠直肠癌、 食管癌、 睾丸癌、 妇产科癌症或甲状腺癌或者恶 性黑素瘤。本药物还可用于治疗非癌性过度增殖性疾病， 如皮肤的良性增生 ( 例如牛皮 癣 )、 再狭窄或者前列腺肥大 ( 例如良性前列腺肥大 (BPH))， 和用于治疗其他 MEK 介导疾 病， 包括胰腺炎或肾病 ( 包括增殖性血管球性肾炎和糖尿病诱导的肾病 )， 或者治疗哺乳 动物中的疼痛。本药物预期还可用于防止哺乳动物中的胚细胞植入， 或者用于治疗与哺乳 动物中的血管生成或血管发生有关的疾病。这类疾病可包括肿瘤血管发生、 慢性炎性疾病 ( 如类风湿性关节炎 )、 动脉粥样硬化、 炎性肠病、 皮肤病 ( 如牛皮癣、 湿疹和硬皮病 )、 糖尿 病、 糖尿病性视网膜病、 早产儿视网膜病、 年龄相关性黄斑变性、 血管瘤、 神经胶质瘤、 黑素 瘤、 卡波济氏肉瘤以及卵巢癌、 乳腺癌、 肺癌、 胰腺癌、 前列腺癌、 结肠癌和表皮样癌。
本药物 ( 即 6-(4- 溴 -2- 氯 - 苯基氨基 )-7- 氟 -3- 甲基 -3H- 苯并咪唑 -5- 甲 酸 (2- 羟基 - 乙氧基 )- 酰胺 ) 的游离碱形式已被归类为 BCS 4 类化合物 ( 根据 《行业指 引： 基于生物药剂学分类系统进行的速释固体口服剂型的体内生物利用度和生物等效性 研究的弃权书》 (the Guidance forIndustry ： Waiver of In Vivo Bioavailability and Bioequivalence studiesfor immediate release solid oral dosage forms based on aBiopharmaceutics Classification System) 所定义的生物药剂学分类系统 )， 这表明它 具有低溶解性 / 溶出速率和低渗透性。这种化合物通常显示低的和 / 或可变的生物利用 度， 的确， 来自常规片剂制剂的本药物的游离碱形式的生物利用度相对较差 ( 在狗中大约 为 18％ )。
本申请人之前鉴定了 6-(4- 溴 -2- 氯 - 苯基氨基 )-7- 氟 -3- 甲基 -3H- 苯并咪
唑 -5- 甲酸 (2- 羟基 - 乙氧基 )- 酰胺的某种特定的盐形式， 它显示独特的药物特性， 使得它 特别适合在药物中使用。这种特定的盐形式即 6-(4- 溴 -2- 氯 - 苯基氨基 )-7- 氟 -3- 甲 基 -3H- 苯并咪唑 -5- 甲酸 (2- 羟基 - 乙氧基 )- 酰胺的硫酸氢盐 (1 ∶ 1 药物∶ H2SO4)( 上 文和下文称之为 “本药物” ) 已在 WO 2007/076245 中公开。该盐是晶体， 且出乎意料地发 现当它与本药物的游离碱形式和 6-(4- 溴 -2- 氯 - 苯基氨基 )-7- 氟 -3- 甲基 -3H- 苯并咪 唑 -5- 甲酸 (2- 羟基 - 乙氧基 )- 酰胺的其他盐相比较时具有改进的药物特性。具体地讲， 发现当与本药物的游离碱形式和 6-(4- 溴 -2- 氯 - 苯基氨基 )-7- 氟 -3- 甲基 -3H- 苯并咪 唑 -5- 甲酸 (2- 羟基 - 乙氧基 )- 酰胺的其他盐相比较时， 此盐的溶出速率及其生物利用度 特别高。
为了将药物活性化合物如本药物配制成适当可接受的剂型， 该活性化合物除了应 具有可接受的生物药剂学特性如溶解性和溶出特性之外， 还应适当地具有可接受的稳定性 和操作特性。 就此而言， 本药物会出现一个特定的问题。 本药物的游离碱形式是弱碱性化合 物， 具有两个 pKa 大约为 2.7 和 8.2 的碱性基团。pKa 值表示酸和碱的强度， 即酸失去质子 或者碱接受质子的趋势 (Bronsted J.N.Rec.trav.Chim.(47)， 718， 1923)。 本药物 ( 即硫酸 氢盐 ) 在制剂加工和 / 或储藏过程中特别易于离解成其游离碱形式。这种转化是不合需要 的， 因为本药物的游离碱形式的药剂学特性较差， 特别是在溶解性和溶出速率方面。的确， 这种转化应当避免， 因为预期它会造成生物利用度降低和 / 或导致患者个体之间和患者个 体内血浆浓度的变异性增加， 这两种情况都会导致对患者的治疗效果欠佳。
因此， 需要含有本药物 ( 即硫酸氢盐 ) 的药物组合物， 特别是其中在加工和保存过 程中本药物的稳定性得到保持以确保在给药时本药物的可接受的吸收和 / 或生物利用度 得到实现的组合物。
本发明的第一方面提供包含本药物和载体基质的药物组合物， 其中该载体基质基 本上由一种或多种选自以下的药物可接受载体组成 ：
(a)d-α- 生育酚聚乙二醇 1000 琥珀酸酯 ；
(b) 聚乙二醇化甘油酯 ；
(c) 聚乙二醇 (PEG) ； 和
(d) 硬脂 ；
且其中本药物分散在该载体基质当中。
我们出乎意料地发现， 在本发明的组合物中本药物的稳定性可得到保持。许多适 合形成该载体基质的材料是本领域公知的， 例如乳化剂、 增溶剂和吸收增强剂， 它们被用来 改进溶解性差的药物的溶出动力学和生物利用度。 但是， 本申请人出乎意料地发现， 这类赋 形剂还可用作惰性载体基质， 以使本药物在药物加工和长期保存过程中稳定在其硫酸氢盐 形式。
因此， 本发明的组合物提供了使本药物在制剂加工和随后的长期保存过程中稳定 在其硫酸氢盐形式的手段， 因而能确保在给药时本药物的可接受的吸收和 / 或生物利用度 得到实现。
本发明的又一个优点与用于制备本发明的合适组合物的制造方法有关。 大多数常 规制剂方法 ( 如那些用于配制常规片剂剂型的方法 ) 会涉及很多费时且复杂的步骤， 这可 能会导致本药物不稳定， 而相比之下， 本发明的组合物可通过相对简单且可放大的方法制备。 载体基质
本发明的载体基质包含一种或多种以上定义的药物可接受载体。 该载体基质可包 含选自以上定义的群组的单一药物可接受载体， 或者它可包含载体混合物。药物可接受载 体选自以下群组中的任一个 ：
(a)d-α- 生育酚聚乙二醇 1000 琥珀酸酯 ；
(b) 聚乙二醇化甘油酯 ；
(c) 聚乙二醇 ； 和
(d) 硬脂。
D-α- 生育酚聚乙二醇 1000 琥珀酸酯 ( 或称维生素 E TPGS) 是天然来源维生素 E 的水溶性衍生物， 具有类似于两亲物的亲水性和亲脂性双重特性。维生素 E TPGS 是通过用 聚乙二醇对结晶 d-α- 生育酚酸琥珀酸酯进行酯化而获得 ( 参见美国药典 25- 国家处方集 20)。维生素 E TPGS 在药物应用中作为乳化剂、 增溶剂和吸收增强剂的用途已为人所知， 可 举出 WO 96/36316、 US 5891845 和 WO 00/76482 作为例子。有关维生素 E TPGS 在这类应 用中的用途的更多信息， 另参见 “EastmanVitamin E TPGS” Eastman 公司小册子， Eastman Chemical Co.， Kingsport， Tenn.(2002 年 11 月 )。
聚乙二醇化甘油酯是脂肪酸的甘油酯和聚氧乙烯与脂肪酸的酯的混合物。 在这些 混合物中， 脂肪酸是饱和或不饱和的， 甘油酯是一甘油酯、 二甘油酯或三甘油酯或者它们以 任何比例的混合物。 合适的聚乙二醇化甘油酯的例子包括但不限于癸酰己酰聚乙二醇甘油 酯 ( 例如 Labrasol)、 油酰聚乙二醇甘油酯 ( 例如 Labrafil M1944 CS)、 亚油酰聚乙二醇甘 油酯 ( 例如 Labrafil M2125 CS)、 月桂酰聚乙二醇甘油酯 ( 例如月桂酰聚乙二醇 -32 甘油 酯 ) 和硬脂酰聚乙二醇甘油酯 ( 例如 Gelucire50/13)( 有关这些聚乙二醇化甘油酯的更 多细节参见 PhEur 6thEdition2008)。在一组具体组合物中， 载体基质中所含的聚乙二醇化 甘油酯具有大于 10 的亲水 - 亲脂平衡值 (HLB)。在另一组具体组合物中， 载体基质中所含 的聚乙二醇化甘油酯可分散在水中。在又一组具体组合物中， 聚乙二醇化甘油酯是月桂酰 聚乙二醇甘油酯或硬脂酰聚乙二醇甘油酯。在还又一组具体组合物中， 聚乙二醇化甘油酯 是月桂酰聚乙二醇甘油酯。在还又一组具体组合物中， 聚乙二醇化甘油酯是月桂酰聚乙二 醇 -32 甘油酯或 Gelucire 50/13。在还又一组具体组合物中， 聚乙二醇化甘油酯是月桂酰 聚乙二醇 -32 甘油酯。月桂酰聚乙二醇 -32 甘油酯 (EP 公司以商品名 Gelucire 44/14 或
C-44 市售 ) 是由一甘油酯、 二甘油酯和三甘油酯以及聚乙二醇 (PEG) 的一脂肪 酸和二脂肪酸组成的饱和聚乙二醇化甘油酯。月桂酰聚乙二醇 -32 甘油酯在室温下为半固 体 / 固体， 熔点为 44℃， 由氢化棕榈仁油与聚乙二醇 1500 反应获得。
聚乙二醇 USP(PEG)， 也称 macrogol( 参见 PhEur 6th Edition 2008)， 是氧化乙烯 的亲水聚合物。平均分子量大于 900 道尔顿的 PEG 在环境温度下通常是半固体或固体。本 发明的 PEG 的合适平均分子量范围为 900-35,000 道尔顿。合适的市售产品包括但不限于 PEG 900、 PEG 1000、 PEG 1450、 PEG 2000、 PEG 6000 和 PEG 20000。在一组具体组合物中， 载体基质中存在的 PEG 其平均分子量范围为 900-25,000 道尔顿。在这个实施方案的又一 组具体制剂中， 此 PEG 的平均分子量为 6,000 道尔顿左右。在这个实施方案的还又一组具 体制剂中， PEG 的平均分子量为 20,000 道尔顿左右。硬脂是一甘油酯、 二甘油酯和三甘油酯的固体混合物， 它基本上不溶于水。 合适的 硬脂的例子包括但不限于 Gelucire 33/01( 参见 USP-NF ‘Hard fat’ )、 Gelucire 39/01( 参 rd 见 USP-NF 和 EP ‘Hard fat’ ) 和 Gelucire 43/01( 参见 EP 3 edition 和 USP24/NF19 ‘Hard fat’ )。
根据本发明的一个实施方案， 载体基质由一种或多种选自以下的药物可接受载体 组成 ：
(a)d-α- 生育酚聚乙二醇 1000 琥珀酸酯 ；
(b) 聚乙二醇化甘油酯 ； 和
(c) 聚乙二醇 (PEG) ；
其中本药物分散在载体基质当中。
在本发明的又一个实施方案中， 载体基质是维生素 E TPGS。
在本发明的还又一个实施方案中， 载体基质是聚乙二醇化甘油酯。 便利地， 聚乙二 醇化甘油酯是月桂酰聚乙二醇 -32 甘油酯或 Gelucire50/13， 特别是月桂酰聚乙二醇 -32 甘 油酯。
在本发明的又一个实施方案中， 载体基质包含维生素 E TPGS 和至少一种聚乙二醇 化甘油酯的混合物。便利地， 这个实施方案中存在的该至少一种聚乙二醇化甘油酯是月桂 酰聚乙二醇 -32 甘油酯， 且合适地， 月桂酰聚乙二醇 -32 甘油酯的存在量占组合物的载体基 质组分的 1-60 重量％， 便利地是大约 30-55％， 还更便利地是占组合物的载体基质组分的 大约 50 重量％。优选地， 月桂酰聚乙二醇 -32 甘油酯是这个实施方案中存在的唯一聚乙二 醇化甘油酯。 在本发明的又一个实施方案中， 载体基质包含维生素 E TPGS 和至少一种 PEG 的 混合物。便利地， 这个实施方案中存在的该至少一种 PEG 其平均分子量在 900-25000 道尔 顿之间， 且合适地， PEG 的存在量占组合物的载体基质组分的 1-30 重量％， 便利地是大约 5-15％， 还更便利地是占组合物的载体基质组分的大约 10 重量％。优选地， 在这个实施方 案中仅存在一种 PEG。在这个实施方案的一组具体制剂中， 此 PEG 的平均分子量为 6000 道 尔顿。在这个实施方案的还又一组具体制剂中， PEG 的平均分子量为 20000 道尔顿。在这 个实施方案的还又一组具体制剂中， PEG 的平均分子量为 1000 道尔顿。
应理解， 上文用来指赋形剂 ( 如月桂酰聚乙二醇 -32 甘油酯或 PEG) 在组合物的载 体基质组分中的比例的术语 “大约” 是指载体基质组分的 ±2 重量％。
合适地， 组合物含有 40-99 重量％、 具体地讲大约 60-95 重量％、 更具体地讲大约 65-95 重量％的载体基质。
在本发明的一组具体组合物中， 组合物含有大约 90-95 重量％的载体基质， 更具 体地讲大约 95 重量％的载体基质。
在本发明的又一组具体组合物中， 组合物含有大约 85-90 重量％的载体基质， 更 具体地讲大约 90 重量％的载体基质。
在本发明的还又一组具体组合物中， 组合物含有大约 75-85 重量％的载体基质， 更具体地讲大约 80 重量％的载体基质。
在本发明的还又一组具体组合物中， 组合物含有大约 65-80 重量％的载体基质， 更具体地讲大约 70 重量％的载体基质。
应理解， 术语 “大约” 当指载体基质在组合物中的比例时是指总组合物的 ±2 重 量％。因此举例说， 如果组合物据称含有大约 70 重量％的载体基质， 这将涵盖含有 68-72 重量％的载体基质的组合物。
在本发明的还又一组具体组合物中， 组合物含有 79-81 重量％、 例如 79.83 重量％ 的载体基质。
本药物
通常， 本药物的存在量将在占组合物的 1-50％的范围内， 合适地为约 1-35％， 尤 其为约 5-30 重量％。 在一组具体组合物中， 本药物的存在量将占最终组合物的约 5 重量％。 在又一组具体组合物中， 本药物的存在量将占最终组合物的约 10 重量％。在还又一组具体 组合物中， 本药物的存在量将占最终组合物的约 20 重量％。在还又一组具体组合物中， 本 药物的存在量将占最终组合物的约 30 重量％。在还又一组具体组合物中， 本药物的存在量 将占最终组合物的 19-21 重量％， 例如 20.17 重量％。
应理解， 术语 “约” 当指本药物在组合物中存在的比例时是指总组合物的 ±2 重 量％。
合适地， 本发明的单位剂量组合物可含有 0.01mg-500mg 的本药物。合适地， 每个 治疗剂量的组合物将含有足量的本药物以在一个或多个单位中提供本药物的日剂量。 在不 同实施方案中， 取决于所需的剂量和药物组合物的具体形式， 本药物在单位剂量中的合适 数量包括例如大约 6.05、 12.1、 18.15、 30.25、 60.5、 72.6、 78.65、 84.7、 90.75、 96.8、 102.85、 108.9、 114.95、 121、 151.25、 181.5、 242、 302.5、 363、 423.5、 484mg 或更高。在一个具体实施 方案中， 单位剂量的组合物含有 1mg-150mg 的本药物， 特别是 50mg-130mg 的本药物， 例如大 约 72.6、 78.65、 84.7、 90.75、 96.8、 102.85、 108.9、 114.95 或 121mg 的本药物， 尤其是 72.6、 78.65、 84.7、 90.75 或 96.8mg 的本药物。上一段落所用的术语 “大约” 定义为指定的重量的 +/-2mg。在一个具体实施方案中， 单位剂量的组合物含有 90.75 或 60.5mg 的本药物。在一 个具体实施方案中， 单位剂量的组合物含有 90.75mg 的本药物。在一个具体实施方案中， 单 位剂量的组合物含有 60.5mg 的本药物。
本药物可以以多种形式使用， 这些形式都包括在本发明范围内。这些形式包括无 定形形式或结晶形式， 还有无水形式以及溶剂合物或水合物。 在一组具体制剂中， 本药物是 晶体且为无水形式。
我们发现， 本药物在本发明的合适载体基质中可稳定化。本文所用的术语 “稳定 化” 是指组合物中存在的活性成分 (6-(4- 溴 -2- 氯 - 苯基氨基 )-7- 氟 -3- 甲基 -3H- 苯并 咪唑 -5- 甲酸 (2- 羟基 - 乙氧基 )- 酰胺 ) 在加工和 / 或保存之后基本上作为硫酸氢盐存 在， 即作为本药物存在而不是作为本药物的游离碱形式存在。 技术人员会容易认识到， 采用 19 例如 XRPD 和 F 固态核磁共振光谱术的技术， 可获得组合物中本药物的游离碱形式的数量 和本药物 ( 即硫酸氢盐形式 ) 的数量的读数， 且所述读数也可通过溶出试验来监测。
本文所用的术语 “分散 ( 的 )” 描述这样的两相体系， 其中一相由本药物组成， 而本 药物分布在包含载体基质的第二相中， 本药物是分散相， 包含载体基质的相是连续相。 在一 组具体制剂中， 形成 “分散相” 的本药物为遍布于包含载体基质的 “第二相” 中的微细颗粒 的形式。在一组具体制剂中， 组合物中存在的本药物的总量的 60 重量％以上是分散的。在 又一组具体制剂中， 组合物中存在的本药物的总量的 90 重量％以上、 优选 95 重量％以上是分散的。技术人员会容易认识到， 采用例如差示扫描量热法 (DSC)、 热重分析 (TGA)、 差示扫 19 描微量热法和 F 固态核磁共振光谱术的技术， 可确定以固体分散体形式存在的药物的比 例的读数。技术人员还会容易认识到， 采用例如 X- 射线衍射的技术， 可确定药物在制剂中 的结晶度。
在一组具体的本发明组合物中， 分散的本药物的粒径可在约 1-20 微米之间。优选 地， 分散的本药物其粒径分布使得 90％的颗粒具有 15 微米以下的直径。
在本发明的一个实施方案中， 本药物分散在载体基质当中， 且不存在另外的溶剂 或添加剂。 这个实施方案的组合物可用特别高的装填量的本药物制备， 而这是有利的， 因为 另外的组分往往会带来缺陷， 如毒性风险潜在提高和剂型大小增加， 这两点都会造成患者 依从性和治疗可接受性差。
本发明的又一个方面提供包含以下组分的药物组合物 ：
(i) 本药物 ； 和
(ii) 载体基质 ；
其中载体基质具有上文定义的任何含义 ；
且其中本药物分散在载体基质当中， 组合物在环境温度下是半固体或固体。
本文所用的术语 “半固体” 描述其刚性和粘度介于固体和液体之间的组分或组合 物。半固体不像粉末那样流动， 且在环境温度下不是液体 ( 即其熔点在环境温度以上 )。本 文所用的术语 “固化” 是指形成固体或半固体。环境温度应理解为指 18-23℃范围内的温 度。
本发明的又一个方面提供包含以下组分的药物组合物 ：
(i) 本药物 ； 和
(ii) 基本上由维生素 E TPGS 组成的载体基质 ；
其中本药物分散在维生素 E TPGS 当中， 组合物在环境温度下是半固体或固体。
本发明的又一个方面提供包含以下组分的药物组合物 ：
(i) 本药物 ； 和
(ii) 基本上由聚乙二醇化甘油酯组成的载体基质 ；
其中本药物分散在聚乙二醇化甘油酯当中， 组合物在环境温度下是半固体或固 体。
本发明的又一个方面提供包含以下组分的药物组合物 ：
(i) 本药物 ； 和
(ii) 基本上由维生素 E TPGS 和月桂酰聚乙二醇 32 甘油酯组成的载体基质 ；
其中本药物分散在载体基质当中， 组合物在环境温度下是半固体或固体。
本发明的又一个方面提供包含以下组分的药物组合物 ：
(i) 本药物 ； 和
(ii) 基本上由维生素 E TPGS 和 PEG 组成的载体基质 ；
其中本药物分散在载体基质当中， 组合物在环境温度下是半固体或固体。
在一个具体实施方案中， 提供包含以下组分的药物组合物 ：
(i)15-30( 特别是 15-25) 份的本药物 ； 和
(ii)70-85( 特别是 15-85) 份的载体基质 ；其中这两份都以重量计， 且 (i) 份 +(ii) 份的总和等于 100， 载体基质具有上文定 义的任何含义， 本药物分散在载体基质当中， 组合物在环境温度下是半固体或固体。
在一个具体实施方案中， 提供包含以下组分的药物组合物 ：
(i)15-25( 特别是 18-22) 份的本药物 ； 和
(ii)75-85( 特别是 78-82) 份的载体基质 ；
其中这两份都以重量计， 且 (i) 份 +(ii) 份的总和等于 100， 载体基质具有上文定 义的任何含义， 本药物分散在载体基质当中， 组合物在环境温度下是半固体或固体。
在一个具体实施方案中， 提供包含以下组分的药物组合物 ：
(i)25-40( 特别是 25-35) 份的本药物 ； 和
(ii)60-75( 特别是 65-75) 份的载体基质 ；
其中这两份都以重量计， 且 (i) 份 +(ii) 份的总和等于 100， 载体基质具有上文定 义的任何含义， 本药物分散在载体基质当中， 组合物在环境温度下是半固体或固体。
在一个具体实施方案中， 提供包含以下组分的药物组合物 ：
(i)25-35( 特别是 28-32) 份的本药物 ； 和
(ii)65-75( 特别是 68-72) 份的载体基质 ； 其中这两份都以重量计， 且 (i) 份 +(ii) 份的总和等于 100， 载体基质具有上文定 义的任何含义， 本药物分散在载体基质当中， 组合物在环境温度下是半固体或固体。
在一个具体实施方案中， 提供包含以下组分的药物组合物 ：
(i)15-25( 特别是 18-22) 份的本药物 ； 和
(ii)75-85( 特别是 78-82) 份的维生素 E TPGS ；
其中这两份都以重量计， 且 (i) 份 +(ii) 份的总和等于 100 ； 且其中本药物分散在 维生素 E TPGS 当中， 组合物在环境温度下是半固体或固体。
在一个具体实施方案中， 提供包含以下组分的药物组合物 ：
(i)25-35( 特别是 28-32) 份的本药物 ； 和
(ii)65-75( 特别是 68-72) 份的维生素 E TPGS ；
其中这两份都以重量计， 且 (i) 份 +(ii) 份的总和等于 100 ； 且其中本药物分散在 维生素 E TPGS 当中， 组合物在环境温度下是半固体或固体。
在一个具体实施方案中， 提供包含以下组分的药物组合物 ：
(i)19-21 份、 例如 20.17 份的本药物 ； 和
(ii)79-81 份、 例如 79.83 份的维生素 E TPGS ；
其中这两份都以重量计， 且 (i) 份 +(ii) 份的总和等于 100 ； 且其中本药物分散在 维生素 E TPGS 当中， 组合物在环境温度下是半固体或固体。
在一个具体实施方案中， 提供包含以下组分的药物组合物 ：
(i)25-35( 特别是 28-32) 份的本药物 ； 和
(ii)65-75( 特别是 68-72) 份的由维生素 E TPGS 和至少一种聚乙二醇化甘油酯的 混合物组成的载体基质 ；
其中这两份都以重量计， 且 (i) 份 +(ii) 份的总和等于 100 ； 且其中本药物分散在 维生素 E TPGS 和至少一种聚乙二醇化甘油酯当中， 组合物在环境温度下是半固体或固体。
制剂
任选地， 在本发明的组合物中可包括另外的赋形剂， 前提是这类赋形剂的加入不 会不可接受地影响本药物的盐形式在组合物当中的稳定性。因此， 本领域技术人员会认 识到， 在本发明的某些实施方案中， 本发明组合物中存在的本药物可分散在由载体基质 和另外赋形剂构成的混合物中， 这在下文的一些具体实施例中进行描述。可存在的另外 赋形剂包括例如防腐剂、 稳定剂、 乳化剂、 抗氧化剂、 甜味剂、 矫味剂、 pH 调节剂、 助分散剂 ( 例如表面活性剂， 如乙氧基化蓖麻油 (Cremophor EL)、 乙氧基化氢化蓖麻油 (Cremophor RH40) 或聚山梨醇酯 80) 和粘度改进剂。这类另外赋形剂是本领域技术人员公知的， 在例 如以下文献中有描述 ： The Handbook of Pharmaceutical Excipients， 第 4 版， American Pharmaceutical Association ； The Theory and Practiceof Industrial Pharmacy， 第 3 版， Lachman 等 人 .1986 ； PharmaceuticalDosage Forms ： Tablets Volume 1，第 2 版， Lieberman， Hebert A. 等 人， 1989 ； Modern Pharmaceutics， Banker， Gilbert 和 Rhodes， Christopher T， 第 3 版， 1995 和 Remington′ s Pharmaceutical Sciences， 第 20 版， 2000。
合适地， 本发明的组合物为适于口服给予的形式， 例如适合口服给予的胶囊制剂 或液体分散剂。 合适的胶囊制剂是公知的， 包括例如包含在软明胶胶囊或硬明胶胶囊、 水溶 性纤维素醚 ( 例如羟丙甲纤维素 ) 胶囊或淀粉胶囊当中的固体、 液体或半固体组合物。 因此， 本发明的又一个方面是包含本药物和载体基质的适于口服给予的药物组合 物， 其中载体基质具有上文定义的任何含义， 且其中本药物分散在载体基质当中。
本发明的还又一个方面是包含本药物和载体基质的药物胶囊组合物， 其中载体基 质具有上文定义的任何含义， 且其中本药物分散在载体基质当中。
本发明的组合物可用药学领域公知的常规方法制备。 例如在一个具体的实施方案 中， 将载体基质的组分加热到熔化为止， 将本药物 ( 其可能已例如通过研磨或微粉化降低 了尺寸 ) 逐渐掺入到熔化的混合物中， 并持续搅动 / 搅拌以确保均匀分布。然后可将熔化 的混合物填充到硬胶囊或软胶囊中， 让其冷却而在胶囊当中形成粘稠液体、 固体或半固体 团块。胶囊体和胶囊帽通过本领域公知的常规方法 ( 例如绷带式封口 (banding)) 密封。
或者， 本发明的组合物可通过其他常规方法如熔体挤出法或熔体造粒法制备 ( 有 关 合 适 的 制 造 方 法 的 细 节， 参 见 A.Royce， J， Drug Dev.Ind.Pharm.22(1996)917-924， G.Verreck ， Bull.tech.Gattefossé(2004)85-95 和 J.Breitenbach ， Eur.J.Pharm. Biopharm.54(2002)107-117)。
本药物具有抗增殖活性， 因此本发明的组合物可用于治疗诸如在国际专利申请 WO 2007/076245( 其公开了本药物 ( 即硫酸氢盐 )) 中以及在 WO 03/077914( 其中例示了本药 物的游离碱形式 ) 中描述的那些病症。例如， 本发明的组合物可用于治疗许多普通的人类 癌症， 如恶性黑素瘤、 脑癌、 肺癌、 鳞状细胞癌、 膀胱癌、 胃癌、 胰腺癌、 乳腺癌、 头癌、 颈癌、 肾 癌、 肾脏癌、 卵巢癌、 前列腺癌、 结肠直肠癌、 食管癌、 睾丸癌、 妇产科癌症或甲状腺癌。还预 期本发明的组合物将可用于治疗其他涉及过度细胞增殖的疾病， 如良性皮肤增生 ( 例如牛 皮癣 )、 再狭窄或良性前列腺肥大 (BPH)。也可用本药物治疗的 MEK 介导疾病的其他例子包 括胰腺炎或肾病 ( 包括增生性肾小球肾炎和糖尿病引发肾病 )， 或者哺乳动物中的疼痛的 治疗。 此外， 本药物还可用于防止哺乳动物中的胚细胞植入， 或者用于治疗与哺乳动物中的 血管生成或血管发生相关的疾病。这类疾病可包括肿瘤血管发生、 慢性炎性疾病 ( 如类风 湿性关节炎 )、 动脉粥样硬化、 炎性肠病、 皮肤病 ( 如牛皮癣、 湿疹和硬皮病 )、 糖尿病、 糖尿
病性视网膜病、 早产儿视网膜病、 年龄相关性黄斑变性、 血管瘤、 神经胶质瘤、 黑素瘤、 卡波 济氏肉瘤以及卵巢癌、 乳腺癌、 肺癌、 胰腺癌、 前列腺癌、 结肠癌和表皮样癌。
本发明的又一个方面提供用作药物的上文所定义的本发明药物组合物。
本发明组合物中存在的本药物具有据认为来源于其 MEK 抑制活性的抗增殖特性， 如抗癌特性。因此， 本发明的组合物预期可用于治疗单独或部分由 MEK 介导的疾病或医学 病症， 即本发明的组合物可用于在需要这种治疗的温血动物中产生 MEK 抑制作用。因此， 本 发明的组合物提供以抑制 MEK 为特征的治疗恶性细胞增殖的方法， 即本发明的组合物可用 于产生单独或部分通过抑制 MEK 来介导的抗增殖作用。因此， 本发明的组合物预期可用于 通过提供抗增殖作用来治疗癌症， 特别是用于治疗 MEK 敏感性癌症， 如上文所述的癌症。
在本发明的一个实施方案中， 提供用于在温血动物 ( 优选人 ) 中产生抗增殖作用 的上文所定义的本发明药物组合物。在另一个实施方案中， 提供用于治疗癌症的上文所定 义的本发明药物组合物。在还另一个实施方案中， 提供用于预防或治疗对 MEK 抑制敏感的 肿瘤的本发明药物组合物。
本发明的又一个方面提供上文所定义的本发明药物组合物在制造用于在温血动 物 ( 优选人 ) 中产生抗增殖作用的药物中的用途。 本发明的又一个方面提供上文所定义的本发明药物组合物在制造用于治疗癌症 的药物中的用途。
本发明的又一个方面提供防止本药物在需要本药物的患者中的生物利用度不可 接受地降低的方法， 该方法包括将上文所定义的本发明药物组合物口服给予所述患者。
本发明的又一个方面提供上文所定义的本发明药物组合物在制造用于防止本药 物生物利用度不可接受地降低的药物中的用途。
本发明的药物组合物可作为唯一疗法单独给予， 或者可与另外一种或多种其他物 质和 / 或治疗法一起给予。这种联合治疗可通过将该治疗的各个组分同时给予、 依次给予 或分别给予来实现。在医学肿瘤学领域， 通常做法是使用不同形式的治疗法的组合来治疗 每个癌症患者。在医学肿瘤学中， 这种联合治疗的除本发明组合物以外的其他组成部分可 以是 ： 外科手术、 放射疗法或化学疗法。这种化学疗法可涵盖各类治疗剂， 如：
(i) 其他抗血管形成剂， 如那些抑制血管内皮生长因子的作用的抗血管形成剂 ( 例如抗血管内皮细胞生长因子抗体贝伐单抗 [AvastinTM] 和那些通过与上文所定义的机 制不同的机制起作用的抗血管形成剂 ( 例如利诺胺、 整联蛋白 αvβ3 功能的抑制剂、 血管 生长抑素、 razoxin、 沙利度胺、 MMP-2( 基质金属蛋白酶 2) 抑制剂、 MMP-9( 基质金属蛋白酶 9) 抑制剂和 COX-II( 环加氧酶 II) 抑制剂 )， 包括血管靶向剂在内 ( 例如考布他汀磷酸酯 和国际专利申请 WO 00/40529、 WO 00/41669、 WO01/92224、 WO 02/04434 和 WO 02/08213 中 公开的化合物以及国际专利申请公开 WO 99/02166( 这个文献的全部公开内容通过引用并 入本文 ) 中描述的血管损伤剂 ( 例如 N- 乙酰秋水仙醇 -O- 磷酸酯 )) ；
(ii) 细胞生长抑制剂， 如抗雌激素药 ( 例如他莫昔芬、 托瑞米芬、 雷洛昔芬、 屈洛 昔芬、 iodoxyfene)、 雌激素受体下调剂 ( 例如氟维司群 )、 孕激素 ( 例如醋酸甲地孕酮 )、 芳香酶抑制剂 ( 例如阿那曲唑、 来曲唑、 vorazole、 依西美坦 )、 抗孕激素、 抗雄激素药 ( 例 如氟他胺、 尼鲁米特、 比卡鲁胺、 醋酸环丙孕酮 )、 LHRH 激动剂和拮抗剂 ( 例如醋酸戈舍瑞 林、 亮丙立德、 布舍瑞林 )、 5α- 还原酶的抑制剂 ( 例如非那雄胺 )、 抗侵入剂 ( 例如金属蛋
白酶抑制剂如马立马司他和尿激酶型纤溶酶原激活物受体功能的抑制剂 ) 和生长因子功 能的抑制剂 ( 这类生长因子包括例如血小板衍生的生长因子和肝细胞生长因子 )， 这类抑 制剂包括生长因子抗体、 生长因子受体抗体 ( 例如抗 erbb2 抗体曲妥珠单抗 [HerceptinTM] 和抗 erbb1 抗体西妥昔单抗 [C225])、 法尼基转移酶抑制剂、 酪氨酸激酶抑制剂如表皮生长 因子家族的抑制剂 ( 例如 EGFR 家族酪氨酸激酶抑制剂如 N-(3- 氯 -4- 氟苯基 )-7- 甲氧 基 -6-(3- 吗啉代丙氧基 ) 喹唑啉 -4- 胺 ( 吉非替尼 )、 N-(3- 乙炔基苯基 )-6， 7- 双 (2- 甲 氧基乙氧基 ) 喹唑啉 -4- 胺 ( 埃洛替尼， OSI-774) 和 6- 丙烯酰胺基 -N-(3- 氯 -4- 氟苯 基 )-7-(3- 吗啉代丙氧基 ) 喹唑啉 -4- 胺 (CI 1033)) 和丝氨酸 / 苏氨酸激酶抑制剂 ) ； 和
(iii) 如在医学肿瘤学中所用的抗增殖 / 抗肿瘤药以及它们的组合， 如抗代谢物 ( 例如抗叶酸剂如甲氨喋呤、 氟嘧啶如 5- 氟尿嘧啶、 替加氟、 嘌呤和腺苷类似物、 胞嘧啶阿 拉伯糖苷 ； 抗肿瘤抗生素 ( 例如蒽环霉素如阿霉素、 博来霉素、 多柔比星、 道诺霉素、 表柔比 星和伊达比星、 丝裂霉素 C、 放线菌素、 光辉霉素 ) ； 铂衍生物 ( 例如顺铂、 卡铂 ) ； 烷基化剂 ( 例如氮芥、 美法仑、 苯丁酸氮芥、 白消安、 环磷酰胺、 异环磷酰胺、 亚硝基脲、 塞替派 ) ； 抗有 丝分裂药 ( 例如长春花生物碱如长春新碱、 长春碱、 长春地辛、 长春酰胺、 长春瑞滨和紫杉 类化合物如紫杉酚、 泰索帝 ) ； 拓扑异构酶抑制剂 ( 例如表鬼臼毒素如依托泊苷和替尼泊 苷、 安吖啶、 托泊替康、 喜树碱以及伊立替康 ) ； 还有酶类 ( 例如天冬酰胺酶 ) ； 和胸苷酸合 酶抑制剂 ( 例如雷替曲塞 ) ；
以及另外类型的化学治疗剂， 包括 ：
(iv) 生物应答调节物 ( 例如干扰素 ) ；
(v) 抗体 ( 例如依决可单抗 ) ；
(vi) 反义疗法， 例如那些针对以上所列的靶标的反义疗法， 如 ISIS2503( 一种抗 ras 反义药剂 ) ；
(vii) 基 因 治 疗 方 法， 包 括 例 如 替 换 异 常 基 因 ( 如 异 常 p53 或 者 异 常 BRCA1 或 BRCA2) 的 方 法， GDEPT( 基 因 指 导 的 酶 前 药 疗 法 (gene-directed enzyme pro-drug therapy)) 方法， 如那些使用胞嘧啶脱氨酶、 胸苷激酶或细菌硝基还原酶的方法， 和提高患 者对化学疗法或放射疗法的耐受性的方法， 如多药抗性基因疗法 ； 和
(viii) 免疫疗法方法， 包括例如提高患者肿瘤细胞的免疫原性的离体方法或体内 方法， 如用细胞因子 ( 如白细胞介素 2、 白细胞介素 4 或粒细胞 - 巨噬细胞集落刺激因子 ) 转染， 降低 T 细胞无力 (T-cell anergy) 的方法， 使用转染的免疫细胞 ( 如细胞因子转染的 树突细胞 ) 的方法， 使用细胞因子转染的肿瘤细胞系的方法和使用抗独特型抗体的方法 ；
(ix) 有丝分裂抑制剂， 例如长春碱 ；
(x) 烷基化剂， 例如顺铂、 卡铂和环磷酰胺 ；
(xi) 抗代谢物， 例如 5- 氟尿嘧啶、 胞嘧啶阿拉伯糖苷和羟基脲， 或者例如欧洲专 利 EP 0239362 B1(1991 年 4 月 12 日授权 ) 中公开的优选的抗代谢物之一， 如 N-(5-[N-(3， 4- 二氢 -2- 甲基 -4- 氧代喹唑啉 -6- 基甲基 )-N- 甲基氨基 -2- 噻吩甲酰 )-L- 谷氨酸 ；
(xii) 生长因子抑制剂 ； 细胞周期抑制剂 ； 插入性抗生素， 例如阿霉素和博来霉 TM 素； 酶类， 例如干扰素 ； 和抗激素， 例如抗雌激素， 如 Nolvadex ( 他莫昔芬 )， 或者例如抗雄 TM 激素如 Casodex (4’ - 氰基 -3-(4- 氟苯基磺酰基 )-2- 羟基 -2- 甲基 -3’ -( 三氟甲基 ) 丙 酰苯胺 )。具体地讲， 本发明的药物组合物可与有效量的一种或多种选自抗血管发生剂、 信 号转导抑制剂和抗增殖剂的物质联合使用。
在一个具体实施方案中， 抗血管发生剂如 MMP-2( 基质金属蛋白酶 2) 抑制剂、 MMP-9( 基质金属蛋白酶 9) 抑制剂和 COX-II( 环加氧酶 II) 抑制剂可与本发明的药物组合 物联合使用。有用的 COX-II 抑制剂的例子包括 CELEBREXTM(alecoxib)、 伐地考昔和罗非 考昔。有用的基质金属蛋白酶抑制剂的例子在以下专利中有描述 ： WO 96/33172(1996 年 10 月 24 日公布 )、 WO 96/27583(1996 年 3 月 7 日公布 )、 欧洲专利公开 EP0818442A2(1998 年 1 月 14 日公布 )、 欧洲专利 EP 1004578B1(2004 年 2 月 25 日公布 )、 WO 98/07697(1998 年 2 月 26 日 公 布 )、 WO 98/03516(1998 年 1 月 29 日 公 布 )、 WO 98/34918(1998 年 8 月 13 日 公 布 )、 WO 98/34915(1998 年 8 月 13 日 公 布 )、 WO 98/33768(1998 年 8 月 6 日 公 布 )、 WO98/30566(1998 年 7 月 16 日公布 )、 欧洲专利公开 606,046(1994 年 7 月 13 日公 布 )、 欧洲专利公开 931,788(1999 年 7 月 28 日公布 )、 WO 90/05719(1990 年 5 月 31 日公 布 )、 WO 99/52910(1999 年 10 月 21 日公布 )、 WO99/52889(1999 年 10 月 21 日公布 )、 WO 99/29667(1999 年 6 月 17 日公布 )、 PCT 国际申请 No.WO 99/07675(1999 年 2 月 18 日公 布 )、 欧洲专利 EP0952148 B1(2004 年 5 月 12 日公布 )、 英国专利申请 No.9912961.1(1999 年 6 月 3 日提交 )、 美国临时申请 No.60/148,464(1999 年 8 月 12 日提交 )、 美国专利 5， 863,949(1999 年 1 月 26 日公布 )、 美国专利 5,861,510(1999 年 1 月 19 日授权 ) 和欧洲专 利公开 780,386(1997 年 6 月 25 日公布 )， 所有这些专利都通过引用整体并入本文。优选的 MMP-2 和 MMP-9 抑制剂是那些极少有或没有 MMP-1 抑制活性的抑制剂。更优选的是那些能 相对于其他基质金属蛋白酶 ( 即 MMP-1、 MMP-3、 MMP-4、 MMP-5、 MMP-6、 MMP-7、 MMP-8、 MMP-10、 MMP-11、 MMP-12 和 MMP-13) 选择性抑制 MMP-2 和 / 或 MMP-9 的抑制剂。
可 用 于 本 发 明 的 MMP 抑 制 剂 的 一 些 具 体 例 子 有 AG-3340、 RO32-3555 和 RS 13-0830。
本发明组合物中的为对特定疾病或医学病症 ( 例如增殖性疾病 ) 进行医疗性治疗 或预防性治疗所需的本药物的剂量， 必然要根据例如所治疗的宿主和所治疗的疾病的严重 程度而变。 所给予的活性化合物的量要决定于所治疗的受试者、 疾病或病症的严重程度、 给 药速度、 化合物的分布和处方医师的判断。但是， 有效剂量在约 0.01 至约 100mg/kg 体重 / 天的范围内， 优选约 1 至约 35mg/kg/day， 以单剂量或分次剂量给予。对于 70kg 的人， 这将 等于约 0.7-7000mg/ 天， 优选约 70 至约 2500mg/ 天。在一些情况中， 低于上述范围的下限 的剂量水平可能远远足够， 而在其他情况中， 在不造成任何有害副作用的情况下可采用更 大的剂量， 前提是首先将这些更大剂量分成几个小剂量， 供在一天内服用。 单位剂量的组合 物通常将含有例如 1-500mg 的活性成分， 优选 5-150mg 的活性成分。优选地， 设想到每日剂 量在 0.03-6mg/kg 的范围内。
以下非限制性实施例进一步说明本发明， 其中除非另有规定， 否则 “本药物” 是 6-(4- 溴 -2- 氯 - 苯基氨基 )-7- 氟 -3- 甲基 -3H- 苯并咪唑 -5- 甲酸 (2- 羟基 - 乙氧基 )- 酰 胺的硫酸氢盐。
附图简述
图 1 显示含有不同数量的本药物游离碱形式和本药物 ( 即硫酸氢盐 ) 的各组合物 的 X 射线粉末衍射数据， 其中 x 轴线表示 2-θ 值， y 轴表示 Lin( 计数 )。X 射线粉末衍射数据指出了组合物中本药物游离碱形式的检测水平。
图 2 显示本发明组合物在制造后的 X 射线粉末衍射图样， 其中 x 轴线表示 2-θ 值， y 轴表示 Lin( 计数 )。数据表明在各组合物中只有本药物 ( 即硫酸氢盐 ) 可检测到。
图 3 显示用 19F SS-NMR 测量的， 用以确定维生素 E TPGS 组合物中的本药物游离碱 19 形式的大约检测限的 F SS-NMR 谱。
图 4 显示实施例 1.2 的组合物的 19F SS-NMR 谱。该谱证明组合物中不存在可检测 水平的本药物游离碱形式。
图 5 显示实施例 1.3 的组合物的 19F SS-NMR 谱。该谱证明组合物中不存在可检测 水平的本药物游离碱形式。
实施例 1 ： 本发明组合物的制备
表 1 所示的组合物是通过借助炉子将载体基质加热到 60-70℃的温度制备的。使 温度保持大约 2 小时， 以确保所有的物料完全熔化。然后逐渐加入本药物， 并用磁力搅拌棒 或高剪切均化器机械搅拌到载体基质中。将该体系维持在足够高的温度， 以保持混合物在 搅拌过程中处于熔化状态， 继续搅拌至获得明显均匀的混合物。搅拌时间随具体的组合物 而变， 但通常在 3-35 分钟的范围内。然后将所得的混合物填充到 HPMC 胶囊中， 让其冷却到 环境温度。将胶囊密封， 一般在冷冻条件下保存备用。
表1实施例 2 ： X 射线粉末衍射 (XRPD) 研究本发明组合物的稳定性
XRPD 可指示本药物 ( 即硫酸氢盐 ) 在制剂中的稳定性。这种技术能够同时检测 组合物当中的本药物结晶游离碱形式和本药物结晶硫酸氢盐形式。将组合物样品放在硅
晶片载片上， 用 Siemen 公司的 D5000X 射线衍射计进行分析。以连续扫描、 θ-θ 模式， 在 2° -40° 2θ 范围内， 每 0.02° θ 使样品暴露 4 秒钟。
制备本药物结晶游离碱形式与结晶本药物 ( 即硫酸氢盐形式 ) 的相对数量不同 的制剂， 并通过 XRPD 分析这些组合物， 由此确定本发明组合物当中的本药物结晶游离碱形 式的大约检测限。图 1 显示本药物游离碱形式在基于维生素 E TPGS 的组合物中可检测至 2.5％ w/w 游离碱的水平， 该组合物名义上还含有 21.2％ w/w 的本药物。
实施例 1.1、 1.2 和 1.3 中所述的组合物各自在制造后立即获取 XRPD 图样。这些 图样 ( 图 2 中显示 ) 证明只存在本药物 ( 即硫酸氢盐形式 )。
实施例 3 ： 固态 NMR 光谱术测定本发明组合物的稳定性 19
用 F 固态 NMR 光谱术 (19F SS-NMR) 可指示本药物在本发明组合物中的稳定性。 这种技术能够同时检测组合物当中的本药物结晶游离碱形式和结晶本药物 ( 即硫酸氢盐 形式 )。 本药物游离碱形式和本药物 ( 即硫酸氢盐形式 ) 在谱图中产生不同的特征性氟峰。 这些峰可以以针对 NMR 信号以正常方式进行积分， 且各峰之比与所存在的两种固态形式即 本药物游离碱形式和本药物 ( 即硫酸氢盐形式 ) 之比成比例。如下对组合物进行分析 ： 将 样品材料放在 4mm MAS(Magic AngleSpinning) 转子中。用 4mm HFX(Bruker Biospin) 探 针， 在 Avance 400 光谱仪上记录 19F NMR[376MHZ] 谱 ( 带 1H 组合脉冲去偶 [TPPM15])。用 脉冲程序 “aringdec” (anti-ring with decoupling)， 将所有样品以 12kHz 旋转。应指出， 魔角旋转技术所带来的摩擦力会造成样品加热， 最多达环境温度以上大约 10℃ -20℃。
制备本药物结晶游离碱形式与结晶本药物 ( 即硫酸氢盐形式 ) 的相对数量不同 的制剂， 由此确定本发明组合物当中的本药物结晶游离碱形式的大约检测限。然后通过 19F SS-NMR 分析这些制剂。图 3 所示的 NMR 谱显示， 本药物游离碱形式在基于维生素 E TPGS 的 组合物中可检测至 1％ w/w 游离碱的水平， 该组合物还含有 28.9％ w/w 的本药物 ( 即硫酸 氢盐形式 )。
将实施例 1.2 和 1.3 中所述的制剂在制造后通过 19F SS-NMR 测试， 没有发现本 药物游离碱形式的存在迹象， 参见图 4 和图 5。在分析这些样品过程中观察到一些样品加 热现象， 这可能导致了 -129.5ppm 处的同向性峰 (isotropic peak) 的出现。不想受任何 具体理论的约束， 但认为该峰可归因于溶于维生素 E TPGS 中的 6-(4- 溴 -2- 氯 - 苯基氨 基 )-7- 氟 -3- 甲基 -3H- 苯并咪唑 -5- 甲酸 (2- 羟基 - 乙氧基 )- 酰胺的存在， 该物质在样 品加热时发生熔化。
实施例 4. 组合物的保存稳定性
对实施例 1.2 和 1.3 中描述的组合物进行长达 12 个月的稳定性研究， 表明它们在 封装于白色高密度聚乙烯 (HDPE) 瓶 ( 感应密封且装有干燥剂 ) 的情况下， 在高温和高湿 度下是稳定的。实施例 1.2 和 1.3 的组合物在 HDPE 瓶中于 25 ℃ /60 ％相对湿度 (RH) 和 30℃ /65％ RH 下保存 12 个月之后， 没有观察到稳定性数据的显著变化， 参见表 1 和表 2 的 数据。
表 1 保存在装有干燥剂的感应密封 HDPE 瓶中的实施例 1.3 组合物于 25℃ /60％ RH 和 30℃ /65％ RH 下
以 mg 游离碱当量表示。用带 UV 检测的梯度反相液相色谱法， 采用 YMC-Pack ODS-AQ， 3μm， 150x4.6mm( 内径 ) 柱， 样品稀释液 10 ％ TH， 90 ％甲醇进行分析。流动相 A ： 0.01％ HFBA/1％ IPA/ 水 (v/v/v)， 流动相 B ： 0.01％ HFBA/1％ IPA/ACN(v/v/v)。 梯度 ： 0mins ＝ 30％ B， 7.5min ＝ 30％ B， 10.5min ＝ 36％ B， 16.5min ＝ 36％ B， 30.5min ＝ 90％ B， 33min ＝ 90％ B， 34min ＝ 30％ B， 40min ＝ 30％ B。HPLC 参数 ： 流速＝ 1.2ml/min， 柱温＝ 40℃， 波长＝ 258nm， 注射体积＝ 10μl。 b
总有机杂质包括≥ 0.05 的有机杂质。括号中的数字指检测到≥ 0.05％的有机 杂质的数目。
表 2 保存在装有干燥剂的感应密封 HDPE 瓶中的实施例 1.2 组合物于 25℃ /60％ RH 和 30℃ /65％ RH 下
a以 mg 游离碱当量表示。用带 UV 检测的梯度反相液相色谱法， 采用 YMC-Pack ODS-AQ， 3μm， 150x4.6mm( 内径 ) 柱， 样品稀释液 10 ％ TH， 90 ％甲醇进行分析。流动相 A ： 0.01％ HFBA/1％ IPA/ 水 (v/v/v)， 流动相 B ： 0.01％ HFBA/1％ IPA/ACN(v/v/v)。 梯度 ： 0mins ＝ 30％ B， 7.5min ＝ 30％ B， 10.5min ＝ 36％ B， 16.5min ＝ 36％ B， 30.5min ＝ 90％ B， 33min ＝ 90％ B， 34min ＝ 30％ B， 40min ＝ 30％ B。HPLC 参数 ： 流速＝ 1.2ml/min， 柱温＝ 40℃， 波长＝ 258nm， 注射体积＝ 10μl。 b
总有机杂质包括≥ 0.05 的有机杂质。括号中的数字指检测到≥ 0.05％的有机 杂质的数目。
实施例 5. 本发明组合物的溶出
开发了体外溶出方法， 以测试装在 HPMC 胶囊当中的制剂的性能。对下表 3 中所列 的各制剂进行溶出， 重复试验两次或三次。
胶囊的溶出按照美国药典器械 II( 桨式 ) 的一般程序进行。在加入胶囊后不同时 间点提取溶出介质的样品， 通过将 6-(4- 溴 -2- 氯 - 苯基氨基 )-7- 氟 -3- 甲基 -3H- 苯并 咪唑 -5- 甲酸 (2- 羟基 - 乙氧基 )- 酰胺的 HPLC 响应峰面积与以相当于该化合物 100％释 放的水平制备的标准溶液的 HPLC 响应峰面积进行比较， 来定量该化合物的浓度。该方法使 用透明玻璃峰容器溶出罐 (clear glass peak vessel dissolution pot)， 并使用螺旋不锈 钢胶囊坠子 (Capsule Sinker) 来保持胶囊。在 27℃下使用 900mlpH2.0735mOsmol\L 磷酸 盐缓冲溶液， 并使用 100rpm 的桨速。
a表 3 溶出结果除了实施例 1.1-1.3 和 1.5-1.7 中描述的组合物外， 还用结晶游离碱和结晶本药 物 ( 即硫酸氢盐 ) 的混合物制备了一些另外的比较制剂。按照与实施例 1 中所述方法类似 的方法将该两种形式的混合物分散在维生素 E TPGS 中， 并填充到 HPMC 胶囊中。
比较制剂的溶出数据显示， 随着组合物中本药物游离碱形式的数量增加， 溶出降 低。对于含有 2％ w/w 的本药物游离碱形式的制剂， 观察到 50 分钟溶出下降 17％。通过分 析含游离碱的比较制剂而产生的数据表明， 该溶出方法可指示组合物当中存在的本药物游 离碱形式的水平。 实施例 1.1-1.3 和 1.5-1.7 中描述的组合物的溶出结果显示实现了 95％ 或更高的溶出， 表明该化合物基本上以其硫酸氢盐形式存在 ( 即作为本药物存在 )。
实施例 6 ： 本发明另外的组合物的制备
如下制备表 4 中所示的组合物 ： 在设定在 70℃的炉子中加热载体基质至少一小 时。然后逐渐加入本药物， 并用磁力搅拌棒或高剪切均化器机械搅拌到载体基质中。将该 体系维持在足够高的温度， 以保持混合物在搅拌过程中处于熔化状态。进行搅拌直至获得 明显均匀的混合物。实现均匀所花的时间随组合物而变， 但至少为 10 分钟， 最多可达 60 分 钟。各体系的总重量在 3.75g-75g 的范围 ( 表 4 中显示 )。将所得的混合物填充到 HPMC 胶 囊中， 让其冷却到环境温度并固化。将胶囊在室温下或者在冷冻条件下保存备用
表4
实施例 7. 组合物在 pH 6.5 溶出介质中的溶出
使用应用 pH 6.5 溶出介质的体外溶出方法测试装在 HPMC 胶囊中的组合物的性 能。pH 6.5 溶出方法与实施例 5 中描述的溶出方法相比， 改进了对本药物游离碱形式在组 合物中的存在的辨别力。对表 4 中所列的各制剂还有实施例 1.7 的制剂进行溶出， 重复试 验两次或三次。
胶囊的溶出按照美国药典器械 II( 桨式 ) 的一般程序进行。在加入胶囊后不同时 间点提取溶出介质的样品， 通过将 6-(4- 溴 -2- 氯 - 苯基氨基 )-7- 氟 -3- 甲基 -3H- 苯并 咪唑 -5- 甲酸 (2- 羟基 - 乙氧基 )- 酰胺的 HPLC 响应峰面积与以相当于该化合物 100％释 放的水平制备的标准溶液的 HPLC 响应峰面积进行比较， 来定量该化合物的浓度。该方法使 用透明玻璃峰容器溶出罐 (clear glass peak vessel dissolution pot)， 并使用螺旋不锈 钢胶囊坠子 (Capsule Sinker) 来固定胶囊。在 37℃下使用 1000ml 的 pH 6.5 溶出介质， 并
使用 50rpm 的桨速。
pH 6.5 溶出介质是如下制备 ： 将 1.74g 氢氧化钠颗粒、 19.77g 含水磷酸二氢钠 ( 或 17.19g 无水磷酸二氢钠 ) 和 30.93g 氯化钠加入到 5 升去离子水中。然后用 1M 盐酸或 1M 氢氧化钠将 pH 调节到 6.5。
除了表 4 中描述的组合物外， 还用本药物结晶游离碱和结晶本药物 ( 即硫酸氢盐 ) 的混合物制备了一些另外的比较制剂。按照与实施例 6 中所述方法类似的方法将该两种形 式的混合物分散在维生素 E TPGS 中， 并填充到 HPMC 胶囊中。比较制剂的具体组成在表 5 中显示。
表 5. 比较组合物
比较制剂的溶出数据 ( 表 6) 显示， 随着组合物中本药物游离碱形式的数量增加， 溶出降低。对于含有 0.4 ％ w/w 的本药物游离碱形式的制剂， 观察到 60 分钟时溶出下降 90％。此外， 0.02％ w/w 本药物游离碱形式的存在造成了 60 分钟时溶出下降 13％。通过分 析含游离碱的比较制剂而产生的数据表明， pH 6.5 溶出方法可很好地指示组合物当中存在 的本药物游离碱形式的水平。
表 6 比较组合物在 pH 6.5 溶出介质中的溶出结果
实施例 6 中描述的组合物的溶出结果还有实施例 1.7 的制剂的溶出结果在表 7 中 显示。对于所有的制剂， 实现了 60 分钟时溶出在 96％以上， 这表明本药物在这些组合物中 基本上以其硫酸氢盐形式存在。
表 7 在 pH 6.5 溶出介质中的溶出结果