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克林沙星氨基衍生物及其应用
    技术领域 本发明属于化学和药学领域， 涉及一种化合物的衍生物及其在制药方面的应用， 特别涉及克林沙星的氨基衍生物及其在制药方面的应用。
     背景技术 自 1962 年萘啶酸问世以来， 人们已经合成了数以万计的喹诺酮类抗菌药并对其 活性进行了评估。 在母核 ( 喹诺酮核或 1， 8- 萘啶酮核 ) 的基础上， 通过结构改造如 1- 位引 入取代基 ( 乙基、 环丙基、 氟代苯基等 )， 6- 位引入氟原子、 7- 位引入环胺基 ( 哌嗪基、 3- 氨 基吡咯烷基等 )、 8- 位引入甲氧基等， 使这类药物的抗菌谱、 抗菌活性和药代动力学性质等 不断得到改善。目前， 喹诺酮类抗菌药已发展至第四代， 主要代表药物有 ： 司帕沙星、 格帕 沙星、 妥舒沙星、 加替沙星、 曲伐沙星、 莫西沙星、 克林沙星、 吉米沙星、 佳诺沙星等。与第三 代喹诺酮类抗菌药相比， 第四代喹诺酮类抗菌药在保持了原有对革兰氏阴性菌的良好抗菌 活性的基础上， 明显增强了对革兰氏阳性菌 ( 如金黄色葡萄球菌、 肺炎链球菌等 ) 的抗菌活 性， 已成为目前临床上治疗各系统感染尤其是呼吸道感染的有力武器。
     克 林 沙 星 (Clinafloxacin)， 化 学 名 为 7-(3- 氨 基 -1- 吡 咯 烷 基 )-1- 环 丙 基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸， 是美国沃纳 - 兰博 (Warner-Lambert) 药物公司开发的第四代喹诺酮类抗菌药， 在国外已完成三期临床评价， 曾经由于具有优秀 的广谱抗菌活性尤其是对革兰氏阳性菌、 厌氧菌和肺炎支原体具有高活性而倍受关注， 但 因临床使用发现存在严重的毒性问题而停止研发。此外， 克林沙星在制药方面还存在溶解 性较差、 溶液不稳定等问题。如何通过结构改造使克林沙星在保持优秀广谱抗菌活性的同 时降低毒性并提高溶解性和溶液稳定性， 目前国内外尚未见报道。
     发明内容
     有鉴于此， 本发明要解决的技术问题之一在于对克林沙星进行结构改造， 从而获 得一批抗菌活性接近或优于克林沙星、 毒性低于克林沙星、 溶解性和溶液稳定性优于克林 沙星的衍生物。
     为解决上述技术问题， 本发明提供如下技术方案 ： 克林沙星氨基衍生物， 为式Ⅰ所 示化合物或其可药用盐 ：
     式中， R 为 -SO2R1 或 -COR2 ； R1 或 R2 为 C1-C10 烷基、 C3-C7 环烷基、 C2-C10 链烯基、 C2-C10 炔基、 芳香基或杂环基 ；所述 C1-C10 烷基、 C3-C7 脂环基、 C2-C10 链烯基和 C2-C10 炔基可以任选地被一个或多个取代基 所取代， 这些取代基独立地选自卤素、 -OR3、 -OCOR4、 -COOR5、 -CONR6R7、 -SR8、 -SO2OH、 -NR6R7、 -N 6 4 6 9 R COR 、 -NR SO2R 、 氰基、 芳香基或杂环基 ； 其中芳香基和杂环基以及前述芳香基和杂环基可 以任选地被一个或多个取代基所取代， 这些取代基独立地选自卤素、 -OR3、 -OCOR4、 -COOR5、 6 7 8 6 7 6 4 6 9 CONR R 、 -SR 、 -SO2OH、 -NR R 、 -NR COR 、 -NR SO2R 、 氰基、 硝基、 三氟甲基或 C1-C6 烷基 ； 3 4 5 6 7 8 9
     所述 R 、 R、 R、 R、 R、 R 和 R 独立地为氢、 C1-C6 烷基或苯基。 1
     进一步， 所述 R 为苯基或萘基。
     进一步， 所述苯基或萘基可以任选地被一个或多个取代基所取代， 这些取代基独 3 4 6 7 6 4 立地选自卤素、 -OR 、 -OCOR 、 -NR R 、 -NR COR 、 氰基、 硝基、 三氟甲基或 C1-C6 烷基 ； 所述 R3、 R4、 R6 和 R7 独立地为氢或 C1-C6 烷基。
     进一步， 所述 R1 为苯基 ； 所述苯基可以任选地被一个或多个取代基所取代， 这些取 3 3 代基独立地选自氟原子、 氯原子、 溴原子、 -OR 、 硝基或 C1-C6 烷基 ； 所述 R 为 C1-C6 烷基。 2
     进一步， 所述 R 为 C1 ～ C10 烷基、 C2 ～ C10 链烯基、 芳香基、 五元或六元杂环基。
     进一步， 所述 C1 ～ C10 烷基和 C2 ～ C10 链烯基可以任选地被一个或多个取代基所取 代， 这些取代基独立地选自卤素、 -OR3、 -COOR5、 -SR8、 -SO2OH、 -NR6R7、 氰基、 芳香基、 五元或六 元杂环基 ； 其中芳香基和五元或六元杂环基以及权利要求 5 中所述芳香基和五元或六元杂 环基可以任选地被一个或多个取代基所取代， 这些取代基独立地选自卤素、 -OR3、 -OCOR4、 -S R8、 -NR6R7、 -NR6COR4、 氰基、 硝基、 三氟甲基或 C1-C6 烷基。 2
     进一步， 所述 R 为 C1 ～ C6 烷基、 C2 ～ C6 链烯基、 苯基、 萘基、 呋喃基、 噻吩基、 吡啶 基或吡咯烷基 ； 所述 C1 ～ C6 烷基和 C2 ～ C6 链烯基可以任选地被一个或多个取代基所取代， 这些取代基独立地选自氟原子、 氯原子、 溴原子、 -OR3、 -COOH、 -SR8、 -SO2OH、 -NR6R7、 氰基、 苯 基、 萘基、 呋喃基、 噻吩基、 吡啶基或吡咯烷基 ； 其中苯基、 萘基、 呋喃基、 噻吩基、 吡啶基和吡 咯烷基以及前述苯基、 萘基、 呋喃基、 噻吩基、 吡啶基和吡咯烷基可以任选地被一个或多个 取代基所取代， 这些取代基独立地选自氟原子、 氯原子、 溴原子、 -OR3、 -OCOR4 或 C1-C6 烷基。
     进一步， 所述克林沙星氨基衍生物为下述化合物中的任一种 ：
     7-(3-(4- 硝 基 苯 磺 酰 氨 基 )-1- 吡 咯 烷 基 )-1- 环 丙 基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3-(3- 硝 基 苯 磺 酰 氨 基 )-1- 吡 咯 烷 基 )-1- 环 丙 基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3-(2- 硝 基 苯 磺 酰 氨 基 )-1- 吡 咯 烷 基 )-1- 环 丙 基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3-(4- 氟苯磺酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧 代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3-(4- 氯苯磺酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧 代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3-(4- 溴苯磺酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧 代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3-(4- 甲 基 苯 磺 酰 氨 基 )-1- 吡 咯 烷 基 )-1- 环 丙 基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸 ；7-(3-(2， 4， 6- 三甲基苯磺酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3-(4- 甲氧基苯磺酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3- 丙酰氨基 -1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹 啉羧酸 ；
     7-(3-(2-(4- 异丁基苯基 ) 丙酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3-(2- 甲 氧 基 乙 酰 氨 基 )-1- 吡 咯 烷 基 )-1- 环 丙 基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3-(2- 苯 氧 基 乙 酰 氨 基 )-1- 吡 咯 烷 基 )-1- 环 丙 基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3-(2- 羟基乙酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧 代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3-(2- 氰基乙酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧 代 -3- 喹啉羧酸 ； 7-(3-(2-(1- 萘基 ) 乙酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3- 丙 烯 酰 氨 基 -1- 吡 咯 烷 基 )-1- 环 丙 基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧 代 -3- 喹啉羧酸 ；
     (E)-7-(3- 肉桂酰氨基 -1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧 代 -3- 喹啉羧酸 ；
     (E)-7-(3-(3-(4- 羟基 -3- 甲氧基苯基 ) 丙烯酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙 基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3-(2- 乙酰氧基苯酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3-(1- 萘基甲酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧 代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3-(2- 呋 喃 基 甲 酰 氨 基 )-1- 吡 咯 烷 基 )-1- 环 丙 基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3-(2- 噻 吩 基 甲 酰 氨 基 )-1- 吡 咯 烷 基 )-1- 环 丙 基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3- 烟酰氨基 -1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹 啉羧酸 ；
     7-(3-(2- 羟基苯酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧 代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3-(3- 羧基丙酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧 代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3- 乙酰氨基 -1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹
     啉羧酸 ；
     7-(3-(2- 氯乙酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧 代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3-(2- 氨基乙酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧 代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3-(2- 氨基丙酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧 代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3-(2- 氨基 -3- 甲基戊酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3-(2- 氨基 -4- 甲基戊酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3-(2- 氨基 -3- 甲基丁酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3-(4- 氨基丁酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧 代 -3- 喹啉羧酸 ； 7-(3-(2- 吡咯烷基甲酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3-(2- 氨基 -3- 苯基丙酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3-(2- 氨基 4-( 甲硫基 ) 丁酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸 ；
     7-(3-(2-( 甲氨基 ) 乙酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸。
     本发明要解决的技术问题之二在于提供所述克林沙星氨基衍生物在制药方面的 应用， 从而为疾病的临床治疗提供更多高效、 安全的备选药物， 满足临床治疗的多方面需 求。
     为解决上述技术问题， 本发明提供如下技术方案 ： 所述克林沙星氨基衍生物在制 备抗菌药物中的应用。
     体外抑菌实验结果显示， 本发明的克林沙星氨基衍生物对革兰氏阳性菌如金黄色 葡萄球菌和革兰氏阴性菌如大肠埃希菌、 沙门菌和铜绿假单胞菌等都有一定的抑菌活性， 其中部分氨基衍生物的抑菌活性接近或优于克林沙星、 毒性低于克林沙星。 因此， 本发明的 克林沙星氨基衍生物可以单独或与其它具有生物活性的化合物和 / 或提取物等配伍， 再与 药学上可接受的载体组合， 制成各种剂型的单方或复方抗菌药物。
     本发明的有益效果在于 ： 本发明通过对克林沙星 7- 位取代基 ( 即 3- 氨基吡咯烷 基 ) 中的氨基进行酰化修饰， 获得了一批抗菌活性接近或优于克林沙星、 毒性低于克林沙 星、 溶解性和溶液稳定性优于克林沙星的氨基衍生物， 这些氨基衍生物具有潜在良好的开 发应用前景， 可用于制备抗菌药物， 能够为感染疾病的临床治疗提供更多高效、 安全的备选 药物， 满足临床治疗的多方面需求。
     具体实施方式
     为了使本发明的目的、 技术方案和优点更加清楚， 下面对本发明的优选实施例进 行详细的描述。
     实施例 1、 部分克林沙星磺酰氨基衍生物的合成
     化 合 物 HHY-1 ～ HHY-8 的 合 成 ： 向 反 应 瓶 中 加 入 氢 氧 化 钠 0.8g(20mmol)、 克 林沙星 3.66g(10mmol) 和水 50mL， 搅拌使溶解， 再在冰浴搅拌下缓慢滴加相应反应原料 (11-15mmol) 的丙酮溶液， 加毕升温至 40-80℃控温搅拌反应， 用薄层色谱 (TLC) 法监测反 应进程。反应结束后， 将反应液用 2mol/L 的盐酸溶液调节 pH 至 3-4， 室温静置过夜， 抽滤， 滤饼用无水甲醇洗涤后， 悬浮于无水甲醇、 乙醇或异丙醇 60-200mL 中， 室温搅拌 2-4 小时， 抽滤， 滤饼用无水甲醇洗涤， 干燥， 即得相应目标化合物。具体合成条件及结果见表 1。
     表 1 化合物 HHY-1 ～ HHY-8 的合成条件及结果
     HHY-1 ： 7-(3-(4- 硝基苯磺酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.288.5-290.6 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.21(s， 1H， H-11)， 8.91(s， 1H， H-2)， 8.44(d， 2H， J ＝ 8.7Hz， H-23 and H-21)， 8.06(d， 1H， J ＝ 11.4Hz， H-5)， 8.01(d， 2H， J ＝ 9.3Hz， H-20 and 24)， 4.26-4.33(m， 1H， H-12)， 3.40-3.52(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.30-3.40(m， 1H， H-16)， 1.97-2.05(m， 1H， H -15)， 2.08-2.17(m， 1H， H-15)， 0.94-1.30(m， 13 4H， H-13)， C NMR(75MHz， CDCl3)δ ： 11.47， 33.93， 48.37， 48.93， 51.02， 51.30， 108.62， 111.72， 120.42， 124.25， 125.76， 128.83， 134.96， 137.84， 143.84， 147.48， 152.12， 155.58，165.84， 171.73 ； HR MS ： C23H20ClFN4O7S[M+Na]+ 计算值为 573.0617， 测定值为 573.0612.
     HHY-2 ： 7-(3-(3- 硝基苯磺酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.228.5-230.2 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.26(s， 1H， H-11)， 8.90(s， 1H， H-2)， 8.65(s， 1H， H-20)， 8.52(d， 1H， J ＝ 9.6Hz， H-22)， 8.15(d， 1H， J ＝ 7.2Hz， H-24)， 8.04(d， 1H， J ＝ 11.4Hz， H-5)， 7.83(t， 1H， J ＝ 8.1Hz， H-23)， 4.25-4.39(m， 1H， H-12)， 3.43-3.55(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.31-3.38(m， 1H， H-16)， 1.52-2.18(m， 2H， H-15)， 13 0.96-1.31(m， 4H， H-13) ；C NMR(75MHz， CDCl3)δ ： 11.45， 33.76， 37.47， 41.32， 46.80， 50.53， 108.51， 111.96， 120.48， 124.35， 129.09， 129.69， 134.36， 137.85， 139.69， 143.62， + 147.69， 152.54， 154.56， 157.94， 165.84， 176.68 ； HR MS ： C23H20ClFN4O7S[M+Na] 计 算 值 为
     573.0617， 测定值为 573.0617.
     HHY-3 ： 7-(3-(2- 硝基苯磺酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.262.5-264.3 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.29(s， 1H， H-11)， 8.92(s， 1H， H-2)， 8.07(d， 1H， J ＝ 6Hz， H-23)， 8.03(d， 1H， J ＝ 12Hz， H-5)， 7.67-7.80(m， 3H， H-20， H-21 and H-22)， 4.31-4.37(m， 1H， H-12)， 3.47-3.63(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.46-3.49(m， 1H， 13 H-16)， 1.51-1.70(m， 2H， H-15)， 0.92-1.34(m， 4H， H-13) ；C NMR(75MHz， CDCl3)δ ： 11.44， 33.96 ， 37.26 ， 41.32 ， 46.73 ， 50.52 ， 108.52 ， 111.95 ， 124.34 ， 129.08 ， 129.59 ， 132.86 ， 134.34， 134.60， 137.72， 139.69， 143.58， 152.54， 154.56， 157.91， 165.74， 176.67 ； HR MS ：C23H20ClFN4O7S[M+Na]+ 计算值为 573.0617， 测定值为 573.0612.
     HHY-4 ： 7-(3-(4- 氟苯磺酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.268.3-269.2 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.26(s， 1H， H-11)， 8.90(s， 1H， H-2)， 8.04(d1H， J ＝ 11.4Hz， H-5)， 7.84(dd， 2H， J ＝ 5.4Hz， J ＝ 5.1Hz， H-21 and H-23)， 7.28(d， 2H， J ＝ 7.5Hz， H-20and H-24)， 4.27-4.34(m， 1H， H-12)， 3.39-3.51(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.23-3.31(m， 1H， H-16)， 2.18(s， 1H， H-15)， 1.52-1.68(m， 1H， H-15)， 0.92-1.32(m， 13 4H， H-13) ；C NMR(75MHz， CDCl3)δ ： 11.46， 33.85， 37.29， 42.08， 47.52， 50.52， 108.51， 112.06， 115.89， 124.34， 125.83， 129.12， 134.57， 137.82， 139.74， 143.29， 147.62， 161.87， + 165.83， 176.82 ； HR MS ： C23H20ClF2N3O5S[M+Na] 计算值为 546.0672， 测定值为 546.0668.
     HHY-5 ： 7-(3-(4- 氯苯磺酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.241.0-242.9 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ； 14.25(s， 1H， H-11)， 8.90(s， 1H， H-2)， 8.04(d， 1H， J ＝ 11.7Hz， H-5)， 7.75(d， 2H J ＝ 8.4Hz， H-20 and H-24)， 7.57(d， 2H， J ＝ 9Hz， H-21 and H-23)， 4.27-4.34(m， 1H， H-12)， 3.40-3.52(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.31-3.38(m， 1H， H-16)， 2.17(s， 1H， H-15)， 1.53-1.70(m， 1H， H-15)， 0.92-1.32(m， 4H， 13 H-13) ；C NMR(75MHz ， CDCl 3) δ ： 11.42 ， 29.65 ， 31.88 ， 41.32 ， 46.47 ， 50.52 ， 108.56 ， 111.94， 120.46， 124.34， 129.08， 129.59， 137.71， 139.69， 143.58， 152.14， 154.58， 157.91， + 165.74， 176.67 ； HR MS ： C23H20C12FN3O5S[M+Na] 计算值为 562.377， 测定值为 562.0381.
     HHY-6 ： 7-(3-(4- 溴苯磺酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.262.3-264.2 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.25(s， 1H， H-11)， 8.90(s， 1H， H-2)， 8.04(d,1H， J ＝ 11.7Hz， H-5)， 7.58(dd， 4HJ ＝ 8.4Hz， J ＝ 8.4Hz， H-20， H-21， H-23 and H-24)， 4.27-4.34(m， 1H， H-12)， 3.40-3.50(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.31-3.38(m， 1H， 13 H-16)， 2.18(s， 1H， H-15)， 1.52-1.68(m， 1H， H-15)， 0.89-1.32(m， 4H， H-13) ；C NMR(75MHz， CDCl 3) δ ： 11.41 ， 29.58 ， 30.98 ， 40.82 ， 46.47 ， 50.48 ， 108.76 ， 111.27 ， 121.43 ， 126.34 ， 129.08， 129.89， 137.81， 139.99， 143.68， 152.84， 154.68， 157.97， 165.78， 176.67 ； HR MS ： + C23H20BrClFN3O5S[M+Na] 计算值为 605.9872， 测定值为 605.9875.
     HHY-7 ： 7-(3-(4- 甲基苯磺酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.251.0-253.0 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.28(s， 1H， H-11)， 8.90(s， 1H， H-2)， 8.03(d， 1H， J ＝ 11.4Hz， H-5)， 7.69(d， 2H， J ＝ 8.7Hz， H-20 and H-24)， 7.37(dd， 2H， J ＝ 7.8Hz， H-21 and H-23)， 4.21-4.37(m， 1H， H-12)， 3.38-3.57(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.22-3.31(m， 1H， H-16)， 2.41(s， 3H， H-25)， 1.43-2.18(m， 2H， H-15)， 0.86-1.34(m， 4H， 13 H-13) ；C NMR(75MHz， CDCl3)δ ： 11.42， 21.66， 29.65， 31.88， 41.31， 46.48， 50.57， 108.55， 111.91， 120.28， 124.19， 127.72， 129.84， 132.70， 134.61， 137.76， 143.73， 147.36， 152.10， + 165.81， 176.68 ； HR MS ： C24H23ClFN3O5S[M+Na] 计算值为 542.0923， 测定值为 542.0920.
     HHY-8 ： 7-(3-(2， 4， 6- 三 甲 基 苯 磺 酰 氨 基 )-1- 吡 咯 烷 基 )-1- 环 丙 基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.249.5-251.4 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.31(s， 1H， H-11)， 8.91(s， 1H， H-2)， 8.04(d， 1H， J ＝ 12Hz， H-5)， 6.99(s， 2H， H-22 and H-24)， 4.27-4.40(m， 1H， H-12)， 3.40-3.52(m， 4H， H-14and H-17)， 3.31-3.38(m， 1H， H-16)， 2.17(s， 9H， H-21)， 13 1.67-1.99(m， 2H， H-15)， 0.92-1.32(m， 4H， H-13) ；C NMR(75MHz， CDCl3)δ ： 11.42， 22.93， 29.67 ， 30.93 ， 41.29 ， 47.70 ， 50.58 ， 108.62 ， 112.03 ， 120.45 ， 124.15 ， 130.01 ， 130.93 ， 132.97， 137.77， 140.62， 143.67， 145.89， 152.11， 154.62， 157.99， 165.89， 176.71 ； HR MS ： C26H27ClFN3O5S[M+Na]+ 计算值为 570.1236， 测定值为 570.1233.
     HHY-9 ： 7-(3-(4- 甲氧基苯磺酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.287.0-288.2 ℃ ； H NMR(300MHz CDCl3)δ ： 14.29(s， 1H， H-11)， 8.90(s， 1H， H-2)， 8.03(d， 1H， J ＝ 12Hz， H-5)， 7.74(d， 2H， J ＝ 8.7Hz， H-20 and H-25)， 7.04(d， 2H， J＝ 8.7Hz， H-21 and H-24)， 4.23-4.36(m， 1H， H-12)， 3.90(s， 3H， H-23)， 3.39-3.51(m， 4H， H-14 13 and H-17)， 3.30-3.40(m， 1H， H-16)， 1.46-1.71(m， 2H， H-15)， 0.88-1.30(m， 4H， H-13) ； C NMR(75MHz， CDCl3)δ ： 11.42， 20.99， 29.67， 30.93， 41.29， 47.70， 50.58， 108.62， 112.03，120.45， 123.67， 124.15， 128.45， 134.93， 138.97， 140.62， 143.67， 152.11， 154.62， 165.89， + 176.71 ； HR MS ： C24H23ClFN306S[M+Na] 计算值为 558.0872， 测定值为 558.0876.
     参照上述化合物的制备方法， 采用商业上可得到的其它反应原料如甲磺酰氯、 乙 磺酰氯、 2- 氯乙磺酰氯、 3- 氯丙磺酰氯、 三氟甲烷磺酰氯、 环丙烷磺酰氯、 苄磺酰氯、 4- 甲基 苄磺酰氯、 苯磺酰氯、 2， 4， 6- 三异丙基苯磺酰氯、 4- 三氟甲基苯磺酰氯、 4- 丁氧基苯磺酰 氯、 2， 6- 二氯苯磺酰氯、 3， 5- 二氯 -4- 羟基苯磺酰氯、 4- 羟基 -3- 硝基苯磺酰氯、 4- 乙氨基 苯磺酰氯、 4- 乙酰胺基苯磺酰氯、 1- 萘磺酰氯、 2- 萘磺酰氯、 5- 氯 -1- 萘磺酰氯、 6- 氯 -2- 萘 磺酰氯、 5- 二甲氨基萘磺酰氯、 噻吩 -2- 磺酰氯、 5- 氯噻吩 -2- 磺酰氯、 5- 溴噻吩 -2- 磺酰 氯、 5- 溴吡啶 -3- 磺酰氯、 8- 喹啉磺酰氯等， 可合成其它克林沙星磺酰氨基衍生物。
     实施例 2、 部分克林沙星碳酰氨基衍生物的合成
     A、 化合物 HHY-10 ～ HHY-24 的合成
     向 反 应 瓶 中 加 入 相 应 反 应 原 料 (24mmol)、 1- 羟 基 苯 并 三 氮 唑 (HOBt)3.24g(24mmol) 和四氢呋喃 (THF)20mL， 搅拌使溶解， 再在冰浴搅拌下加入二环己基 碳化二亚胺 (DCC)4.94g(24mmol) 和三乙胺 (TEA)2.02g(20mmol)， 冰浴搅拌 30 分钟后加 入克林沙星 7.32g(20mmol)， 补加适量 THF( 以利于搅拌为准 )， 升温至 20-45 ℃控温搅拌 反应， 用 TLC 法监测反应进程。反应结束后， 将反应液于 4 ℃静置过夜， 抽滤， 滤饼用二氯 甲烷 (DCM) 充分洗涤， 洗液与滤液合并， 减压蒸馏除去溶剂， 残余物用 DCM 溶解后， 依次用 0.5mol/L 的碳酸氢钠溶液、 10％ (w/w) 的柠檬酸溶液和饱和食盐水洗涤， 分别收集 DCM 溶液 和洗液。将洗液用 DCM 萃取两次， 收集 DCM 萃取液， 与前述 DCM 溶液合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 滤液减压蒸馏除去溶剂， 即得粗品。将粗品用 DCM- 石油醚、 乙酸乙酯 - 石油醚或乙酸 丁酯 - 石油醚等混合溶剂重结晶或用柱层析分离纯化， 即得相应目标化合物。具体合成条 件及结果见表 2。
     表 2 化合物 HHY-10 ～ HHY-24 的合成条件及结果
     HHY-10 ： 7-(3- 丙酰氨基 -1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧 代 -3- 喹啉羧酸1 m.p.199.2-203.5 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.33(s， 1H， H-11)， 8.93(s， 1H， H-2)， 8.07(d， 1H， J ＝ 11.7Hz， H-5)， 4.32-4.46(m， 1H， H-12)， 3.62-3.86(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.39-3.45(m， 1H， H-16)， 2.40-2.47(q， 2H， J ＝ 7.5Hz， H-20)， 1.58-2.00(m， 2H， H-15)， 1.30-1.37(m， 2H， H-13)， 1.208(t， 3H， J ＝ 7.4Hz， H-21)， 0.90-1.04(m， 2H， H-13) ； 13 C NMR(75MHz， CDCl3)δ ： 9.45， 11.42， 26.52， 33.88， 41.34， 42.10， 46.07， 51.06， 108.15， 111.88， 123.93， 137.81， 143.83， 152.05， 154.60， 157.69， 164.32， 165.83， 176.65 ； HR MS ： + C20H21ClFN3O4[M+Na] 计算值为 444.1097， 测定值为 444.1100.
     HHY-11 ： 7-(3-(2-(4- 异 丁 基 苯 基 ) 丙 酰 氨 基 )-1- 吡 咯 烷 基 )-1- 环 丙 基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.228.5-230.1 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.32(s， 1H， H-11)， 8.90(s， 1H， H-2)， 8.01(d， 1H， J ＝ 11.4Hz， H-5)， 7.15(dd， 4H， J ＝ 8.1Hz， H-23 and 24)， 4.27-4.35(m， 1H， H-12)， 3.86-3.93(q， 1H， J ＝ 6.9Hz， J ＝ 6.9Hz， H-20)， 3.20-3.66(m， 5H， H-14， H-16 and H-17)， 2.43(d， J ＝ 7.6Hz， H-16)， 1.62-1.97(m， 3H， H-15 and H-27)， 1.48(d， 3H， J 13 ＝ 7.2Hz， H-21)， 0.93-1.33(m， 4H， H-13)， 0.89(d， 6H， J ＝ 6.6Hz， H-28) ； C NMR(75MHz， CDCl3)δ ： 11.36， 16.36， 20.54， 22.47， 29.94， 41.33， 42.56， 43.20， 44.91， 45.98， 50.70， 108.36， 111.36， 111.68， 119.75， 123.69， 126.87， 129.68， 137.78， 139.06， 140.25， 143.74， + 151.96， 165.77， 172.46， 176.56 ； HR MS ： C30H33ClFN3O4[M+Na] 计算值为 576.2036， 测定值为 576.2035.
     HHY-12 ： 7-(3-(2- 甲氧基乙酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.206.7-209.1 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.31(s， 1H， H-11)， 8.93(s， 1H， H-2)， 8.07(d， 1H， J ＝ 11.7Hz， H-5)， 4.32-4.39(m， 1H， H-12)， 4.18(s， 2H， H-20)， 3.63-3.86(m ， 4H ，H-4 and H-17) ， 3.41(s ， 3H ，H-21) ， 3.31-3.38(m ， 1H ，H-16) ， 13 1.61-2.04(m， 2H， H-15)， 0.95-1.36(m， 4H， H-13) ；CNMR(75MHz， CDCl3)δ ： 11.41， 24.91， 33.87 ， 41.31 ， 45.74 ， 51.34 ， 56.76 ， 59.06 ， 108.56 ， 111.64 ， 120.43 ， 124.20 ， 137.81 ， 143.93， 146.86， 152.06， 165.77， 167.83， 176.70.
     HHY-13 ： 7-(3-(2- 苯氧基乙酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.216.3-218.2 ℃ ； H NMR(300MHz， DMSO-d6)δ ： 14.52(s， 1H， H-11)， 8.85(s， 1H， H-2)， 7.96(d， 1H， J ＝ 12.0Hz， H-5)， 7.30(t， 2H， J ＝ 8.1Hz， H-23)， 6.94-6.97(m， 3H， H-22 and H-24)， 4.90(s， 2H， H-20)， 4.38-4.44(m， 1H， H-12)， 3.57-3.77(m， 1H， H-16)， 3.36-3.45(m， 4H， H-14 and H-17)， 1.70-1.73(m， 1H， H-15)， 1.49-1.56(m， 1H， H-15)， 13 1.06-1.24(m， 4H， H-13) ；C NMR(300MHz， DMSO-d6)δ ： 11.27， 23.72， 30.84， 42.00， 45.47， 51.24， 66.37， 108.26， 111.06， 115.02， 120.11， 121.31， 123.40， 129.82， 138.35， 143.94， 153.26 ， 154.62 ， 158.43 ， 165.49 ， 166.65 ， 176.46 ； ESIMS(m/z) ： 501.2([M+H] +， 100) ， + + 522.2([M+Na] ， 5) ； HR MS ： C25H23ClFN3O5[M+Na] 计算值为 522.1202， 测定值为 522.1201.
     HHY-14 ： 7-(3-(2- 羟基乙酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.194.2-196.8 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.26(s， 1H， H-11)， 8.93(s， 1H， H-2)， 8.08(d， 1H， J ＝ 11.4Hz， H-5)， 4.32-4.39(m， 1H， H-12)， 4.25(s， 2H， H-20)， 3.47-4.03(m， 5H， H-14， H-17 and H-21)， 3.38-3.41(m， 1H， H-16)， 1.64-2.08(m， 2H， H-15)， 13 0.98-1.36(m， 4H， H-13) ；C NMR (75MHz， CDCl3)δ ： 11.41， 24.91， 33.87， 41.31， 45.74， 51.34， 59.06， 108.56， 111.64， 120.43， 124.20， 133.63， 137.81， 143.93， 152.06， 165.77，
     167.83， 176.70 ； HR MS ： C19H19ClFN3O5[M+Na]+ 计算值为 446.0889， 测定值为 446.0891.
     HHY-15 ： 7-(3-(2- 氰基乙酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.248.2-250.6 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.26(s， 1H， H-11)， 8.94(s， 1H， H-2)， 8.09(d， 1H， J ＝ 12Hz， H-5)， 4.31-4.42(m， 1H， H-12)， 3.69-3.96(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.57(s， 2H， H-20)， 3.44-3.53(m， 1H， H-16)， 1.58-1.73(m， 2H， H-15)， 0.95-1.38(m， 13 4H， H-13) ；C NMR(75MHz， CDCl3)δ ： 11.47， 25.57， 29.67， 33.86， 43.10， 49.19， 51.28， 108.18， 110， 63， 124.13， 128.66， 132.08， 139.14， 139.99， 143.07， 153.40， 162.69， 165.46， + 175.67 ； HR MS ： C20H18ClFN4O4[M+Na] 计算值为 455.893， 测定值为 455.0887.
     HHY-16 ： 7-(3-(2-(1- 萘基 ) 乙酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.271.8-273.3 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.29(s， 1H， H-11)， 8.91(s， 1H， H-2)， 8.05(d， 1H， J ＝ 11.7Hz， H-5)， 7.91(d， 3H， J ＝ 7.5Hz， H-22， H-26 and H-27)， 7.47-7.61(m， 4H， H-23， H-24， H-28and H-29)， 4.30-4.37(m， 1H， H-12)， 4.08-4.13(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.86(s， 2H， H-20)， 3.22-3.54(m， 1H， H-16)， 1.97-2.05(m， 1H， H-15)， 13 2.08-2.17(m， 1H， H-15)， 0.94-1.30(m， 4H， H-13) ；C NMR(75MHz， CDCl3)δ ： 11.33， 41.29， 42.33 ， 47.83 ， 51.26 ， 51.39 ， 51.67 ， 108.52， 111.92 ， 120.37 ， 123.93 ， 124.13 ， 124.61 ， 125.19， 126.55， 127.16， 128.51， 129.50， 133.44， 133.76， 134.47， 137.77， 143.68， 152.06， 154.57， 169.80， 165.79， 176.63 ； HR MS ： C29H25ClFN3O4[M+Na]+ 计算值为 556.1410， 测定值为 556.1411.
     HHY-17 ： 7-(3- 丙 烯 酰 氨 基 -1- 吡 咯 烷 基 )-1- 环 丙 基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.164.8-167.3 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.31(s， 1H， H-11)， 8.92(s， 1H，H-2)， 8.07(d， 1H， J ＝ 11.4Hz， H-5)， 6.57-6.68(q， 1H， J ＝ 10.5Hz， H-20)， 632-6.38(q， 1H， J ＝ 1.8Hz， H-21)， 5.75-5.79(q， 1H， J ＝ 1.8Hz， H-22)， 4.32-4.39(m， 1H， H-12)， 3.67-3.96(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.39-3.45(m， 1H， H-16)， 1.62-1.78(m， 2H， H-15)， 13 0.95-1.34(m， 4H， H-13) ； C NMR(75MHz， CDCl3)δ ： 11.29， 32.47， 36.45， 41.88， 43.92， 48.09， 108.13， 110.93， 120.67， 123.90， 125.88， 133.07， 138.10， 138.80， 143.22， 153.40， 165.41， 166.82， 175.67.
     HHY-18 ： (E)-7-(3- 肉桂酰氨基 -1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.265.4-267.3 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.33(s， 1H， H-11)， 8.91(s， 1H， H-2)， 8.05(d， 1H， J ＝ 11.7Hz， H-5)， 7.72(d， 1H， J ＝ 15.3Hz， H-21)， 7.40(t， 5H， J＝ 8.7Hz， H-23， H-24 and H-25)， 6.92(d， 1H， J ＝ 15.3Hz， H-20)， 4.28-4.41(m， 1H， H-12)， 3.74-4.20(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.41-3.45(m， 1H， H-16)， 1.65-1.83(m， 2H， H-15)， 13 CDCl3)δ ： 11.80， 33.71， 36.31， 41.23， 46.11， 0.88-1.38(m， 4H， H-13) ； C NMR(75MHz， 51.25， 108.64， 111.74， 112.05， 116.64， 127.77， 128.82， 129.80， 130.19， 135.03， 143.35， 147.16， 147.25， 152.10， 164.45， 165.73， 165.92， 176.71 ； HR MS ： C26H23ClFN3O4[M+Na]+ 计算 值为 518.1253， 测定值为 518.1250.
     HHY-19 ： (E)-7-(3-(3-(4- 羟 基 -3- 甲 氧 基 苯 基 ) 丙 烯 酰 氨 基 )-1- 吡 咯 烷 基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.268.6-270.4 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.37(s， 1H， H-11)， 8.91(s， 1H， H-2)， 8.04(d， 1H， J ＝ 11.4Hz， H-5)， 8.02(d， 1H， J ＝ 8.1Hz， H-21)， 7.26-7.57(m， 4H， H-20， H-23， H-24 and H-27)， 5.36(s， 1H， H-28)， 4.29-4.40(m， 2H， H-12)， 3.87(s， 3H， H-29)， 3.51-3.83(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.21-3.47(m， 1H， H-16)， 1.68-1.84(m， 2H， H-15)， 13 0.99-1.34(m， 4H， H-13) ；C NMR(75MHz， CDCl3)δ ： 11.43， 26.57， 30.97， 33.88， 35.43， 49.18， 55.84， 109.56， 111.75， 114.80， 117.58， 120.23， 122.94， 125.89， 127.09， 131.26， 134.88， 137.65， 140.09， 143.88， 145.68， 148.22， 153.09， 166.24， 168.60， 171.65 ； HR MS ： + C27H25ClFN3O6[M+Na] 计算值为 564.1308， 测定值为 564.1303.
     HHY-20 ： 7-(3-(2- 乙酰氧基苯酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.213.5-214.9 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.31(s， 1H， H-11)， 8.91(s， 1H， H-2)， 8.04(d， 1H， J ＝ 11.4Hz， H-5)， 8.02(d， 1H， J ＝ 8.1Hz， H-23)， 7.16-7.48(m， 3H， H-24， H-25 and H-26)， 4.29-4.40(m， 2H， H-12)， 3.51-3.83(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.31-3.48(m， 1H， H-16)， 2.32(s， 3H， H-22)， 1.68-1.94(m， 1H， H-15)， 1.48-1.71(m， 1H， 13 H-15)， 0.91-1.32(m， 4H， H-13) ；C NMR(75MHz， CDCl3)δ ： 11.42， 21.02， 31.42， 36.64， 41.32， 50.99， 60.40， 108.55， 111.44， 111.96， 120.05， 123.09， 124.15， 126.09， 127.66， 128.76， 130.58， 137.80， 143.96， 147.00， 152.11， 165.89， 166.91， 168.78， 176.74 ； HR MS ： + C26H23ClFN3O6[M+Na] 计算值为 550.1152， 测定值为 550.1155.
     HHY-21 ： 7-(3-(1- 萘基甲酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.271.4-272.9 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.29(s， 1H， H-11)， 8.91(s， 1H， H-2)， 8.05(d， 1H， J ＝ 11.7Hz， H-5)， 7.91(d， 3H， J ＝ 7.5Hz， H-22， H-25 and H-27)， 7.47-7.61(m， 4H， H-23， H-24， H-28 and H-29)， 4.30-4.37(m， 1H， H-12)， 4.08-4.13(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.22-3.54(m， 1H， H-16)， 1.97-2.05(m， 1H， H-15)， 2.08-2.17(m， 1H， 13 H-15)， 0.94-1.30(m， 4H， H-13) ；C NMR(75MHz， CDCl3)δ ： 11.39， 29.89， 34.67， 42.33， 47.83， 51.20， 108.52， 111.92， 120.37， 124.02， 124.13， 124.61， 125.18， 126.55， 127.16， 128.51， 129.50， 131.48， 133.77， 135.66， 138.69， 143.87， 152.05， 154.58， 165.79， 169.65， + 176.76 ； HR MS ： C28H23ClFN3O4[M+Na] 计算值为 542.1253， 测定值为 542.1249.
     HHY-22 ： 7-(3-(2- 呋喃基甲酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.209.2-211.7 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.34(s， 1H， H-11)， 8.93(s， 1H， H-2)， 8.06(d， 1H， J ＝ 11.7Hz， H-5)， 7.52(d， 1H， J ＝ 4.5Hz， H-23)， 7.08(d， 1H， J ＝ 3.9Hz， H-21)， 6.52(t， 1H， J ＝ 3.9Hz， H-22)， 4.35-4.38(m， 1H， H-12)， 3.78-3.81(m， 1H， H-16)，3.35-3.46(m， 4H， H-14 and H-17)， 1.70-1.73(m， 1H， H-15)， 1.49-1.56(m， 1H， H-15)， 13 0.96-1.30(m， 4H， H-13) ； C NMR(75MHz， CDCl3)δ ： 11.47， 23.98， 31.36， 41.21， 46.45， 50.52， 108.69， 111.72， 112.03， 116.49， 120.20， 123.49， 124.29， 137.07， 145.49， 147.58， + 147.53， 154.96， 159.30， 165.76， 176.78 ； ESI MS(m/z) ： 461.2([M+H] ， 100)， 483.2(M+Na]+， 5).
     HHY-23 ： 7-(3-(2- 噻吩基甲酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.231.1-232.3 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.34(s， 1H， H-11)， 8.93(s， 1H， H-2)， 8.06(d， 1H， J ＝ 11.7Hz， H-5)， 7.52(d， 1H， J ＝ 4.5Hz， H-23)， 7.08(d， 1H， J ＝ 3.9Hz， H-21)， 6.52(t， 1H， J ＝ 3.9Hz， H-22)， 4.35-4.38(m， 1H， H-12)， 3.78-3.81(m， 1H， H-16)， 3.35-3.46(m， 4H， H-14 and H-17)， 1.91-1.95(m， 1H， H-15)， 1.68-1.72(m， 1H， 13 H-15)， 0.96-1.30(m， 4H， H-13) ； C NMR(75MHz， CDCl3)δ ： 11.39， 24.68， 33.26， 41.25， 46.47， 50.63， 108.69， 112.28， 112.06， 116.49， 120.280， 123.49， 124.24， 137.67， 148.49， 146.88 ， 147.53 ， 153.26 ， 158.57 ， 165.42 ， 176.69 ； ESI MS(m/z) ： 476.1([M+H]+， 100) ， + 498.1([M+Na] ， 5).
     HHY-24 ： 7-(3- 烟酰氨基 -1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧 代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.181.4-183.7 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.28(s， 1H， H-11)， 8.93(s， 1H， H-2)， 8.739(s， 1H， H-24)， 8.72(d， 1H， J ＝ 4.8Hz， H-23)， 8.07(d， 1H， J ＝ 11.7Hz， H-5)， 7.86(d， 1H， J ＝ 6.0Hz， H-21)， 7.42-7.46(q， 1H， J ＝ 4.8Hz， H-22)， 4.32-4.38(m， 1H， H-12)， 3.67-4.09(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.39-3.45(m， 1H， H-16)， 1.54-2.28(m， 2H， 13 H-15)， 1.30-1.37(m， 2H， H-13)， 0.97-1.33(m， 2H， H-13) ；C NMR(75MHz， CDCl3)δ ： 11.44， 33.81 ， 41.34 ， 42.60 ， 51.05 ， 51.18 ， 108.51 ， 111.65 ， 120.48 ， 123.66 ， 124.28 ， 129.88 ， 131.35， 135.29， 137.76， 143.52， 147.76， 150.78， 154.63， 16311， 165.79， 176.62 ； HR MS ： + C23H20ClFN4O4[M+Na] 计算值为 493.1049， 测定值为 493.1052.
     B、 化合物 HHY-25 的合成
     HHY-25 ： 7-(3-(2- 羟基苯酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     向反应瓶中加入化合物 HHY-20 5.28g(10mmol) 和 THF 45mL， 搅拌使溶解， 再在 冰浴搅拌下缓慢滴加 2N LiOH 100mL， 加毕室温搅拌反应， 用 TLC 法监测反应进程。反应 结束后， 减压旋蒸除去溶剂， 将反应液用 2mol/L 的盐酸溶液调节 pH 至 3-4， 室温静置过夜， 1 抽滤， 滤饼用水洗涤， 干燥， 即得目标化合物 3.392g， 收率 68.2％。m.p.284.5-287.4℃ ； H NMR(300MHz， DMSO-d6)δ ： 14.52(s， 1H， H-11)， 9.88(s， 1H， H-22)， 8.83(s， 1H， H-2)， 7.95(d， 1H， J ＝ 12Hz， H-5)， 7.15-7.23(m， 2H， H-23 and H-26)， 6.85-6.90(m， 2H， H-24 and H-25)， 4.29-4.42(m， 2H， H-12)， 3.44-3.94(m， 4H， H-14 and H-17)， 1.48-1.71(m， 2H， H-15)， 13 0.93-1.19(m， 4H， H-13) ；CNMR(75MHz， DMSO-d6)δ ： 11.22， 24.81， 33.74， 39.11， 41.90， 51.35， 108.24， 111.17， 116.43， 119.56， 124.33， 128.54， 130.57， 138.41， 138.77， 144.27， 153.00， 153.93， 154.92， 160.43， 165.29， 168.02， 176.57 ； HR MS ： C24H21ClFN3O5[M+Na]+ 计算 值为 508.1046， 测定值为 508.1045.
     C、 化合物 HHY-26 的合成
     HHY-26 ： 7-(3-(3- 羧基丙酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     向反应瓶中加入克林沙星 7.32g(20mmol)、 TEA 2.02g(20mmol) 和 THF 20mL， 冰浴 搅拌 30 分钟后， 再加入丁二酸酐 1.01g(22mmol)， 冰浴搅拌 10 分钟后， 升温至 60℃控温搅 拌反应 6 小时。反应结束后， 将反应液室温静置过夜， 抽滤， 滤饼悬浮于乙醇 100mL 中， 室温 搅拌 3 小时， 用 2mol/L 的盐酸溶液调节 pH 至 3-4， 静置， 抽滤， 滤饼依次用水和乙醇洗涤， 1 干燥， 即得目标化合物 7.87g， 收率 84.5％。m.p.209.4-211.2℃ ； H NMR(300MHz， DMSO-d6)δ： 14.51(s， 1H， H-11)， 11.07(s， 1H， H-23)， 8.84(s， 1H， H-2)， 7.96(d， 1H， J ＝ 12.0Hz， H-5)， 4.38-4.44(m， 1H， H-12)， 3.57-3.77(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.36-3.4(m， 1H， H-16)， 2.78(t， 2H， J ＝ 6.7Hz， H-21)， 2.38(t， 2H， J ＝ 6.4Hz， H-20)， 2.02-2.12(m， 1H， H-15)， 13 1.96-1.99(m， 1H， H-15)， 1.06-1.24(m， 4H， H-13) ；C NMR(75MHz， DMSO-d 6)δ ： 10.74， 27.38， 38.81， 40.06， 41.47， 41.81， 45.40， 50.61， 107.57， 110.58， 119.68， 122.94， 137.82， 143.44， 152.67， 156.74， 164.95， 169.82， 173.83， 176.02 ； HR MS ： C21H21ClFN3O6M+Na]+ 计 算 值为 488.1153， 测定值为 488.1049.
     D、 化合物 HHY-27 和 HHY-28 的合成HHY-27 ： 7-(3- 乙酰氨基 -1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧 代 -3- 喹啉羧酸
     向 反 应 瓶 中 加 入 克 林 沙 星 3.66g(10mmol)、 无 水 碳 酸 钾 6.90g(50mmol) 和 THF 50mL， 室温搅拌 30 分钟后， 再在冰浴搅拌下滴加乙酰氯 0.94g(15mmol)， 加毕 26 ℃搅拌反 应 3 小时。反应结束后， 将反应液抽滤， 滤饼用 DCM 充分洗涤， 洗液与滤液合并， 减压蒸馏除 去溶剂， 残余物用乙醚 - 石油醚 ( 体积比 2 ∶ 3) 混合溶剂重结晶， 即得目标化合物 3.37g， 1 收率 82.6％。m.p.241.8-243.9℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.31(s， 1H， H-11)， 8.92(s， 1H， H-2)， 8.06(d， 1H， J ＝ 12Hz， H-5)， 4.33-4.39(m， 1H， H-12)， 3.65-3.92(m， 4H， H-14 and H-17)， 2.18(s， 3H， H-20)， 3.44-3.53(m， 1H， H-16)， 1.54-1.92(m， 2H， H-15)， 0.95-1.36(m， 13 4H， H-13) ；C NMR(75MHz， CDCl3)δ ： 11.42， 21.43， 41.34， 41.96， 46.97， 50.97， 51.19， 108.49， 111.87， 120.38， 124.12， 143.98， 152.06， 154.79， 157.98， 165.81， 169.21， 176.73 ； + HR MS ： C19H19ClFN3O4[M+Na] 计算值为 430.0940， 测定值为 430.0940.
     HHY-28 ： 7-(3-(2- 氯乙酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸向 反 应 瓶 中 加 入 克 林 沙 星 3.66g(10mmol)、 无 水 碳 酸 钾 6.90g(50mmol) 和 THF 50mL， 室温搅拌 30 分钟后， 再在冰浴搅拌下滴加氯乙酰氯 1.69g(15mmol)， 加毕 20-40℃搅 拌反应 4 小时。反应结束后， 将反应液抽滤， 滤饼用 DCM 充分洗涤， 洗液与滤液合并， 减压 蒸馏除去溶剂， 残余物用乙醚 - 石油醚 ( 体积比 2 ∶ 3) 混合溶剂重结晶， 即得目标化合物 1 3.32g， 收率 75.2％。m.p.197.8-201.4℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.31(s， 1H， H-11)， 8.92(s， 1H， H-2)， 8.05(d， 1H， J ＝ 11.1Hz， H-5)， 4.29-4.41(m， 1H， H-12)， 4.14(s， 2H， H-20)， 3.65-3.95(m， 4H， H-14and H-17)， 3.46-3.62(m， 1H， H-16)， 1.74-2.26(m， 2H， H-15)， 13 0.92-1.35(m， 4H， H-13) ；C NMR(75MHz， CDCl3)δ ： 11.49， 40.78， 41.00， 41.43， 42.80， 47.08， 50.79， 108.40， 111.65， 120.51， 124.18， 137.82， 143.77， 152.23， 154.62， 165.72， + 169.15， 176.69 ； HR MS ： C19H18C12FN3O4[M+Na] 计算值为 464.0551， 测定值为 464.0550.
     E、 化合物 HHY-29 ～ HHY-38 的合成
     向反应瓶中加入氨基被叔丁氧羰基 (Boc) 保护的氨基酸 Boc-AA-OH(24mmol)、 HOBt3.24g(24mmol) 和 FHF 40mL， 搅拌使溶解， 再在冰浴搅拌下加入 DCC 4.94g(24mmol) 和 N， N- 二 异 丙 基 乙 胺 (DIPEA)2.58g(20mmol)， 冰 浴 搅 拌 30 分 钟， 再加入克林沙星 7.32g(20mmol) 并补加适量 THF( 以利于搅拌为准 )， 控温搅拌反应， 用 TLC 法监测反应进 程。 反应结束后， 将反应液于 4℃静置过夜， 抽滤， 滤饼用 DCM 充分洗涤， 洗液与滤液合并， 减 压蒸馏除去溶剂， 残余物用 DCM 溶解后， 依次用 0.5mol/L 的碳酸氢钠溶液、 10％ (w/w) 的柠 檬酸溶液和饱和食盐水洗涤， 分别收集 DCM 溶液和洗液。将洗液用 DCM 萃取两次， 收集 DCM 萃取液， 与前述 DCM 溶液合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 滤液减压蒸馏除去溶剂， 即得粗品。 将粗品用 DCM- 石油醚、 乙酸乙酯 - 石油醚、 乙酸丁酯 - 石油醚或丙酮 - 石油醚等混合溶剂 重结晶或用柱层析分离纯化， 即得化合物 M。
     向反应瓶中加入化合物 M 和 DCM 30-60mL， 搅拌使溶解， 再在冰浴搅拌下缓慢滴加 三氟乙酸 (TFA)10mL， 加毕冰浴搅拌反应 30 分钟。反应结束后， 将反应液减压浓缩， 滴加乙 醚至析出固体， 抽滤， 将滤饼悬浮于乙醚 30-50mL 中， 室温搅拌 5 小时， 再抽滤， 滤饼用乙醚 洗涤， 干燥， 即得目标化合物 TM。具体合成条件及结果见表 3 和表 4。
     表 3 化合物 M 的合成条件及结果
     注： *GABA ： γ-aminobutyric acid(γ- 氨基丁酸 )。 表 4 目标化合物 TM 的合成条件及结果HHY-29-1 ： 7-(3-(2-( 叔 丁 氧 碳 基 氨 基 ) 乙 酰 氨 基 )-1- 吡 咯 烷 基 )-1- 环 丙 基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.222.7-224.4 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.27(s， 1H， H-11)， 8.92(s， 1H， H-2)， 8.06(d， 1H， J ＝ 11.1Hz， H-5)， 5.52(t， 1H， J ＝ 9Hz， H-21)， 4.31-4.39(m， 1H， H-12)， 4.03(d， 2H， J ＝ 6Hz， H-20)， 3.52-3.92(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.44-3.53(m， 1H， H-16)， 13 1.68-2.03(m ， 2H， H-15)， 1.47(s， 9H ， H-24) ， 0.91-1.36(m ， 4H， H-13) ； C NMR(75MHz ， CDCl3)δ ： 11.43， 24.90， 28.31， 33.85， 41.32， 42.57， 45.09， 50.89， 79.71， 108.59， 111.68， 120.58， 124.35， 37.77， 143.71， 152.11， 154.67， 58.02， 65.75， 167.18， 176.66.
     HHY-30-1 ： 7-(3-(2-( 叔 丁 氧 羰 基 氨 基 ) 丙 酰 氨 基 )-1- 吡 咯 烷 基 )-1- 环 丙 基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.156.9-159.0 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.31(s， 1H， H-11)， 8.95(s， 1H， H-2)， 8.09(d， 1H， J ＝ 12Hz， H-5)， 4.35-4.42(m， 1H-12)， 3.94(m， 1H， H-20)， 3.63-3.82(m， 1H， H-16)， 3.28-3.40(m， 4H， H-14 and H-17)， 1.60-199(m， 2H， H-15)， 1.52-1.56(m， 3H， 13 H-25) ， 1.48(s ， 9H ， H-24) ， 1.00-1.39(m ， 4H ， H-13) ；C NMR(75MHz ， CDCl 3) δ ： 14.84 ， 17.88， 29.66， 33.96， 37.26， 43.35， 45.95， 54.50， 59.69， 82.94， 108.67， 111.99， 115.10， 120.51， 124.18， 134.56， 137.89， 147.38， 155.42， 157.85， 167.19， 169.25， 174.49 ； HR MS ： + 测定值为 537.1909. C25H30ClFN4O6M+H] 计算值为 537.1911，
     HHY-31-1 ： 7-(3-(2- 叔丁氧羰基氨基 -3- 甲基戊酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙 基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.134.7-136.8 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.31(s， 1H， H-11)， 8.92(s， 1H， H-2)， 8.05(d， 1H， J ＝ 11.4Hz， H-5)， 5.29(d， 1H， J ＝ 9.6Hz， H-21)， 4.49-4.54(m， 1H， H-20)， 4.32-4.39(m， 1H， H-12)， 3.64-3.94(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.39-3.45(m， 1H， H-16)， 1.69-2.35(m， 5H， H-15， H-27 and H-25)， 1.49-1.59(m， 2H， H-27)， 1.44(s， 9H， H-24)， 13 0.89-1.36(m， 10H， H-13， H-26 and H-28) ；CNMR(75MHz， CDCl3)δ ： 11.42， 15.90， 23.94， 28.29， 34.36， 37.97， 36.21， 41.31， 42.61， 46.57， 51.052， 54.153， 79.58， 108.73， 112.11， 124.23， 137.09， 137.80， 143.66， 152.10， 155.60， 157.91， 162.11， 166.16， 171.48 ； HR MS ： C28H36ClFN4O6[M+Na]+ 计算值为 601.2200， 测定值为 601.2199.
     HHY-32-1 ： 7-(3-(2- 叔丁氧羰基氨基 -4- 甲基戊酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙 基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.152.3-154.6 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.32(s， 1H， H-11)， 8.95(s， 1H， H-2)， 8.08(d， 1H， J ＝ 11.7Hz， H-5)， 5.28(d， 1H， J ＝ 8.7Hz， H-24)， 4.69-4.82(m， 1H， H-20)， 4.33-4.42(m， 1H， H-12)， 3.62-4.02(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.41-3.51(m， 1H， H-16)， 1.54-1.98(m， 5H， H-15， H-21 and H-22)， 1.48(s， 9H， H-27)， 0.97-1.36(m， 10H， H-13 and 13 H-23) ； C NMR(75MHz， CDCl3)δ ： 11.43， 21.97， 24.92， 28.31， 29.61， 33.88， 41.30， 48.32， 48.89 ， 51.00 ， 51.23 ， 79.61 ， 108.57 ， 111.97 ， 120.30 ， 124.17 ， 137.81 ， 143.6 ， 152.08 ， 154.58， 155.52， 165.79， 171.64， 176.64 ； HR MS ： C28H36Cl FN4O6[M+Na]+ 计算值为 601.2200， 测定值为 601.2209.
     HHY-33-1 ： 7-(3-(2- 叔丁氧羰基氨基 -3- 甲基丁酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙 基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.162.1-163.9 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.32(s， 1H， H-11)， 8.95(s， 1H， H-2)， 8.08(d， 1H， J ＝ 11.7Hz， H-5)， 5.35(d， 1H， J ＝ 9Hz， H-23)， 4.50-4.55(m， 1H，
     H-20)， 4.35-4.40(m， 1H， H-12)， 3.77-3.82(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.35-3.45(m， 1H， H-16)， 1.92-2.07(m， 1H， H-15)， 2.13-2.19(m， 1H， H-15)， 1.47(s， 9H， H-26)， 1.35(d， 1H， 13 J ＝ 6Hz， H-21)， 0.95-1.04(m， 10H， H-13 and H-22) ；CNMR(75MHz， CDCl3)δ ： 11.47， 19.73， 24.97， 28.73， 31.55， 33.93， 41.36， 46.55， 51.08， 51.30， 79.60， 108.66， 111.71， 120.43， 124.15， 134.66， 137.88， 143.68， 146.99， 152.12， 155.88， 165.79， 176.71 ； HR MS ： + C27H34ClFN4O6[M+H] 计算值为 565.2224， 测定值为 565.2219.
     HHY-34-1 ： 7-(3-(4-( 叔 丁 氧 羰 基 氨 基 ) 丁 酰 氨 基 )-1- 吡 咯 烷 基 )-1- 环 丙 基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.240.2-243.9 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.30(s， 1H， H-11)， 8.92(s， 1H， H-2)， 8.06(d， 1H， J ＝ 11.4Hz， H-5)， 5.53(d， 1H， J ＝ 9Hz， H-23)， 4.30-4.40(m， 1H-12)， 3.56-3.95(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.20-3.42(m， 3H， H-16 and H-22)， 2.44(t， 2H， J ＝ 7.2Hz， H-20)， 2.13-2.18(m， 1H， H-15)， 1.83-1.93(m， 2H， H-21)， 1.60-1.75(m， 13 1H， H-15)， 1.45(s， 9H， H-26)， 0.95-1.36(m， 4H， H-13) ；CNMR(75MHz， CDCl3)δ ： 11.43， 25.43， 28.39， 30.52， 40.13， 41.30， 42.16， 46.18， 51.05， 51.23， 79.08， 108.58， 111.68， 120.32， 124.13， 137.81， 143.75， 152.08， 156.10， 157.96， 165.85， 171.25， 176.68 ； HR MS ： + C26H32ClFN4O6[M+H] 计算值为 551.2067， 测定值为 551.2072.
     HHY-35-1 ： 7-(3-(1- 叔丁氧羰基 -2- 吡咯烷基甲酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙 基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.202.6-203.9 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.34(s， 1H， H-11)， 8.92(s， 1H， H-2)， 8.05(d， 1H， J ＝ 11.4Hz， H-5)， 4.59-4.74(m， 1H， H-20)， 4.24-4.44(m， 1H， H-12)， 3.48-3.80(m ， 6H ， H-14 ， H-17 and H-23) ， 3.29-3.41(m ， 1H ， H-16) ， 2.04-2.17(m ， 2H ， H-21)， 1.84-1.97(m， 2H， H-15)， 1.56-1.78(m， 2H， H-22)， 1.48(s， 9H， H-26)， 0.88-1.31(m， 13 4H， H-13) ；C NMR(75MHz， CDCl3)δ ： 11.27， 23.73， 28.14， 31.11， 34.88， 37.89， 40.80， 45.54 ， 51.13 ， 51.36 ， 69.33 ， 79.66 ， 108.10 ， 111.19 ， 120.240 ， 123.53 ， 138.37 ， 143.72 ， + 153.26， 154.35， 165.49， 176.55 ； HR MS ： C27H32ClFN4O6[M+Na] 计算值为 585.1887， 测定值为 585.1882.
     HHY-36-1 ： 7-(3-(2- 叔丁氧羰基氨基 -3- 苯基丙酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙
     基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.142.9-146.0 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.30(s， 1H， H-11)， 8.91(s， 1H， H-2)， 8.03(d， 1H， J ＝ 11.4Hz， H-5)， 7.24-7.35(m， 5H， H-23， H-24 and H-25)， 5.43(d， 2H， J ＝ 7.8Hz， H-18 and H-26)， 4.88-4.93(m， 1H， H-20)， 427-4.36(m， 1H-12)， 3.65-3.85(m， 1H， H-16)， 338-3.46(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.04(d， 1H， J ＝ 6Hz， H-21)， 2.98(d， 1H， J ＝ 11.7Hz， H-21)， 1.91-2.17(m， 1H， H-15)， 1.65-1.76(m， 1H， H-15)， 1.44(s， 9H， H-29)， 13 0.92-1.31(m， 4H， H-13) ； C NMR(75MHz， CDCl3)δ ： 11.40， 28.32， 33.80， 40.36， 41.26， 42.54 ， 46.22 ， 50.47 ， 50.88 ， 79.85 ， 108.58 ， 111.64 ， 111.95 ， 127.08 ， 128.60 ， 129.56 ， 136.32， 137.76， 143.56， 143.72， 152.06， 154.53， 155.05， 157.88， 165.84， 176.66 ； HR MS ： + C31H34ClFN4O6[M+H] 计算值为 613.2224， 测定值为 613.2231.
     HHY-37-1 ： 7-(3-(2- 叔 丁 氧 羰 基 氨 基 -4-( 甲 硫 基 ) 丁 酰 氨 基 )-1- 吡 咯 烷 基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.206.2-208.5 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.27(s， 1H， H-11)， 8.92(s， 1H， H-2)， 8.06(d， 1H， J ＝ 11.1Hz， H-5)， 5.52(t， 1H， J ＝ 9Hz， H-22)， 4.31-4.39(m， 1H， H-12)， 4.03(d， 2H， J ＝ 6.4Hz， H-20)， 3.52-3.92(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.44-3.53(m， 1H， H-16)， 2.14(s， 3H， H-23)1.68-2.03(m， 2H， H-15)， 1.47(s， 9H， H-27)， 0.91-1.36(m， 4H， H-13) ； 13 C NMR(75MHz， CDCl3)δ ： 11.41， 24.70， 25.19， 28.39， 29.77， 33.89， 37.56， 41.29， 45.34， 48.82， 51.13， 80.11， 107.96， 111.19 ， 120.24， 123.48， 138.42， 143.79， 153.26， 154.25，
     158.75， 165.47， 167.63， 176.54.
     HHY-38-1 ： 7-(3-(2-(N- 甲 基 -N- 叔 丁 氧 羰 基 ) 氨 基 ) 乙 酰 氨 基 )-1- 吡 咯 烷 基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸
     1 m.p.206.2-208.5 ℃ ； H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 14.28(s， 1H， H-11)， 8.92(s， 1H， H-2)， 8.04(d， 111， J ＝ 11.1Hz， H-5)， 4.31-4.39(m， 1H， H-12)， 3.89(s， 2H， H-20)，
     3.52-3.72(m ， 4H ，H-14 and H-17) ， 3.57(s ， 3H ，H-21) ， 3.44-3.53(m ， 1H ，H-16) ， 13 1.68-2.03(m， 2H， H-15)， 1.47(s， 9H， H-24)， 0.96-1.39(m， 4H， H-13) ；C NMR(75MHz， CDCl3) δ： 11.48， 28.40， 34.22， 36.56， 41.64， 43.68， 48.79， 51.07， 55.47， 80.23， 108.36， 111.23， 123.24， 125.48， 134.76， 138.42， 143.79， 153.26， 158.75， 165.47， 167.63， 176.54 ； HR MS ： + C25H30ClFN4O6[M+H] 计算值为 537.1911， 测定值为 537.1911.
     HHY-29 ： 7-(3-(2- 氨基乙酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸的三氟乙酸盐
     1 m.p.223.1-225.6℃； H NMR(300MHz， DMSO-d6)δ ： 14.48(s， 1H， H-11)， 8.85(s， 1H， H-2)， 8.08(s， 3H， H-21)， 7.97(d， 1H， J ＝ 11.7Hz， H-5)， 4.34-4.45(m， 1H， H-12)， 3.96(s， 2H， H-20)， 3.49-3.79(m， 5H， H-14， H-16 and H-17)， 1.71-2.14(m， 2H， H-15)， 0.97-1.22(m， 13 4H， H-13) ；C NMR(75MHz， DMSO-d6)δ ： 11.28， 39.64， 39.81， 40.18， 40.46， 42.01， 51.02，
     108.13， 111.12， 120.38， 123.42， 133.68， 138.25， 143.81， 153.27， 165.41， 167.63， 176.54 ； + HR MS ： C19H20ClFN4O4[M+H] 计算值为 423.1230， 测定值为 423.1232.
     HHY-30 ： 7-(3-(2- 氨基丙酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸的三氟乙酸盐
     1 m.p.209.3-211.1 ℃ ； H NMR(300MHz， DMSO-d6)δ ： 14.48(s， 1H， H-11)， 8.85(s， 1H， H-2)， 8.16(s， 3H， H-21)， 7.98(d， 1H， J ＝ 11.7Hz， H-5)， 4.66-4.69(m， 1H， H-20)， 4.35-4.46(m， 1H， H-12)， 3.56-3.85(m， 4H ， H-14 and H-17)， 3.38-3.43(m， 1H， H-16)， 13 1.82-1.89(m， 5H， H-15 and H-22)， 1.10-1.20(m， 4H， H-13) ；C NMR(75MHz， DMSO-d6)δ ： 12.27， 24.22， 29.09， 41.00， 43.05， 46.05， 50.79， 58.12， 108.10， 110.87， 120.32， 123.54， 134.98， 138.36， 143.74， 147.25， 165.55， 167.33， 176.60 ； HR MS ： C22H22ClFN4O5[M+H]+ 计 算 值为 437.1386， 测定值为 437.1383.
     HHY-31 ： 7-(3-(2- 氨 基 -3- 甲 基 戊 酰 氨 基 )-1- 吡 咯 烷 基 )-1- 环 丙 基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸的三氟乙酸盐
     1 m.p.229.3-231.4 ℃ ； H NMR(300MHz， DMSO-d6)δ ： 14.46(s， 1H， H-11)， 8.85(s， 1H， H-2)， 8.02(s， 3H， H-21)， 7.97(d， 1H， J ＝ 11.7Hz， H-5)， 4.36-4.42(m， 2H， H-12 and H-20)， 3.47-3.88(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.36-3.49(m， 1H， H-16)， 1.72-2.06(m， 2H， H-15)， 1.75-2.33(m， 3H， H-15H-22)， 1.42-1.50(m， 2H， H-24)， 0.85-1.20(m， 10H， H-13， H-23 13 and H-25) ；C NMR(75MHz， DMSO-d6)δ ： 11.27， 11.77， 15.22， 23.65， 36.40， 39.02， 41.98， 42.96 ， 46.67 ， 51.37 ， 53.91 ， 108.12 ， 111.14 ， 120.41 ， 123.58 ， 138.20 ， 143.72 ， 145.82 ， + 153.21， 165.46， 167.65， 176.48 ； HR MS ： C23H28ClFN4O4[M+H] 计算值为 479.1856， 测定值为 479.1852.
     HHY-32 ： 7-3-(2- 氨 基 -4- 甲 基 戊 酰 氨 基 )-1- 吡 咯 烷 基 )-1- 环 丙 基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸的三氟乙酸盐
     1 m.p.220.5-222.4 ℃ ； H NMR(300MHz， DMSO-d6)δ ： 14.48(s， 1H， H-11)， 8.85(s， 1H， H-2)， 8.16(s， 3H， H-21)， 7.98(d， 1H， J ＝ 11.7Hz， H-5)， 4.38-4.47(m， 2H， H-12 and H-20)， 3.55-3.89(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.38-3.43(m， 1H， H-16)， 2.06-2.13(m， 1H， 13 H-23)， 1.48-1.89(m， 2H， H-15)， 0.93-1.36(m， 12H， H-13， H-22 and H-24) ；C NMR(75MHz， DMSO-d 6) δ ： 11.26 ， 19.07 ， 24.81 ， 29.85 ， 42.00 ， 42.94 ， 46.60 ， 51.34 ， 54.04 ， 107.90 ， 111.19， 120.30， 123.70， 138.25， 143.45， 153.36， 154.49， 162.43， 165.52， 176.49 ； HR MS ： C23H28ClFN4O4[M+H]+ 计算值为 479.1856， 测定值为 479.1854.
     HHY-33 ： 7-(3-(2- 氨 基 -3- 甲 基 丁 酰 氨 基 )-1- 吡 咯 烷 基 )-1- 环 丙 基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸的三氟乙酸盐
     1 m.p.223.0-224.7℃； H NMR(300MHz， DMSO-d6)δ ： 14.48(s， 1H， H-11)， 8.85(s， 1H， H-2)， 8.16(s， 3H， H-21)， 7.98(d， 1H， J ＝ 11.7Hz， H-5)， 4.35-4.41(m， 2H， H-12 and H-20)， 3.606-3.90(m， 4H， H-14and H-17)， 3.44-3.53(m， 1H， H-16)， 2.06-2.13(m， 1H， H-22)， 13 1.58-1.86(m， 2H， H-15)， 0.93-1.22(m， 10H， H-13 and H-23) ；C NMR(75MHz， DMSO-d6)δ ：
     11.28， 21.94， 23.43， 39.91， 40.19， 42.01， 48.55， 107.96， 111.19， 120.24， 123.48， 133.68， + 138.42， 143.79， 153.26， 165.47， 167.63， 176.54 ； HR MS ： C22H26ClFN4O4M+H] 计 算 值 为 465.1699， 测定值为 465.1691.
     HHY-34 ： 7-(3-(4- 氨基丁酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二 氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸的三氟乙酸盐
     1 m.p.230.0-233.1 ℃ ； H NMR(300MHz， DMSO-d6)δ ： 14.50(s， 1H， H-11)， 8.84(s， 1H， H-2)， 7.97(d， 1H， J ＝ 11.7Hz， H-5)， 7.64-7.82(m， 3H， H-23)， 4.36-4.44(m， 1H， H-12)， 3.53-3.74(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.28-3.32(m， 2H， H-22)， 3.46-3.51(m， 1H， H-16)， 2.86(t， 2H， J ＝ 7.2Hz， H-20)， 1.74-2.07(m， 4H， H-15 and H-21)， 0.96-1.22(m， 4H， H-13) ；
     C NMR(75MHz ， DMSO-d 6) δ ： 11.26 ， 19.07 ， 29.85 ， 35.62 ， 42.00 ， 42.94 ， 46.60 ， 51.34 ， 54.04， 107.96， 111.19， 120.24， 123.48， 133.82， 138.42， 143.79， 153.26， 165.47， 167.63， + 176.54 ； HR MS ： C21H24ClFN4O4[M+H] 计算值为 451.1543， 测定值为 451.1542.
     HHY-35 ： 7-(3-(2- 吡咯烷基甲酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸的三氟乙酸盐
     131 m.p.196.8-199.8 ℃ ； H NMR(300MHz， DMSO-d6)δ ： 14.47(s， 1H， H-11)， 8.85(s， 1H， H-2)， 8.14(s， 2H， H-24)， 7.97(d， 1H， J ＝ 11.7Hz， H-5)， 4.32-4.50(m， 2H， H-12 and H-20)， 3.60-3.80(m， 6H， H-14， H-17 and H-23)， 3.38-3.53(m， 1H， H-16)， 2.04-2.17(m， 13 2H， H-21)， 1.68-2.00(m， 2H， H-15)， 1.33-1.35(m， 2H， H-22)， 0.88-1.31(m， 4H， H-13) ； C NMR(75MHz， DMSO-d6)δ ： 11.27， 24.25， 28.76， 33.54， 39.64， 40.47， 41.88， 46.72， 51.34， 62.04， 108.09， 111.20， 123.64， 128.36， 133.80， 138.28， 143.70， 153.28， 165.48， 168.69， + 176.64 ； HR MS ： C22H24ClFN4O4[M+H] 计算值为 463.1543， 测定值为 463.1540.
     HHY-36 ： 7-(3-(2- 氨 基 -3- 苯 基 丙 酰 氨 基 )-1- 吡 咯 烷 基 )-1- 环 丙 基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸的三氟乙酸盐
     1 m.p.234.4-236.3 ℃ ； H NMR(300MHz， DMSO-d6)δ ： 14.48(s， 1H， H-11)， 8.85(s， 1H， H-2)， 8.16(s， 3H， H-26)， 7.94(d， 1H， J ＝ 11.7Hz， H-5)， 7.27-7.39(m， 5H， H-23， H-24 and H-25)， 4.67-4.78(m， 1H， H-20)， 4.34-4.41(m， 1H， H-12)， 3.607-3.96(m， 6H， H-14， H-17 and H-21)， 3.44-3.53(m， 1H， H-16)， 1.79-1.98(m， 2H， H-15)， 0.95-1.22(m， 4H， H-13) ； 13 C NMR(75MHz ， DMSO-d 6) δ ： 11.59 ， 28.32 ， 33.80 ， 37.68 ， 41.26 ， 46.22 ， 50.70 ， 50.88 ， 107.87， 111.02， 120.17， 121.61， 123.60， 127.61， 129.04， 130.47， 135.05， 138.48， 143.63， + 154.22， 165.38， 167.38， 176.54 ； HR MS ： C26H26ClFN4O4[M+H] 计算值为 513.1699， 测定值为 513.1701.
     HHY-37 ： 7-(3-(2- 氨 基 -4-( 甲 硫 基 ) 丁 酰 氨 基 )-1- 吡 咯 烷 基 )-1- 环 丙 基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸的三氟乙酸盐
     1 m.p.244.7-247.6 ℃ ； H NMR(300MHz， DMSO-d6)δ ： 14.27(s， 1H， H-11)， 8.92(s， 1H， H-2)， 8.76(s， 3H， H-24)， 8.06(d， 1H， J ＝ 11.1Hz， H-5)， 5.47(t， 1H， J ＝ 9Hz， H-20)， 4.31-4.39(m， 1H， H-12)， 4.03(t， 2H， J ＝ 9Hz， H-22)， 3.52-3.92(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.44-3.53(m， 1H， H-16)， 2.43(s， 3H， H-23)， 2.17-2.21(m， 2H， H-21)， 1.68-2.03(m， 2H， 13 H-15)， 0.91-1.36(m， 4H， H-13) ；C NMR(75MHz， DMSO-d6)δ ： 11.41， 15.19， 28.39， 33.89， 34.39 ， 41.29 ， 43.10 ， 48.82 ， 49.20 ， 51.13 ， 107.96 ， 111.19 ， 123.24 ， 125.48 ， 134.66 ， 138.42， 143.79， 153.26， 165.47， 167.63， 176.54.
     HHY-38 ： 7-(3-(2-( 甲氨基 ) 乙酰氨基 )-1- 吡咯烷基 )-1- 环丙基 -6- 氟 -8- 氯 -1， 4- 二氢 -4- 氧代 -3- 喹啉羧酸的三氟乙酸盐
     1 m.p.244.2-246.1 ℃ ； H NMR(300MHz， DMSO-d6)δ ： 14.48(s， 1H， H-11)， 8.85(s， 1H， H-2)， 8.76(s， 2H， H-21)， 7.97(d， 1H， J ＝ 11.7Hz， H-5)， 4.30-4.44(m， 1H， H-12)， 4.13(s， 2H， H-20)， 3.53-3.81(m， 4H， H-14 and H-17)， 3.44-3.56(m， 1H， H-16)， 2.59(s， 13 3H， H-22)， 1.68-1.83(m， 2H， H-15)， 1.10-1.20(m， 4H， H-13) ；C NMR(75MHz， DMSO-d6)δ ： 11.44， 29.77， 33.40， 41.98， 42.96， 43.10， 49.20， 50.57 108.12， 111.14， 123.41， 1125.58， 138.20， 143.72， 145.82， 153.21， 165.46， 167.65， 176.48 ； HR MS ： C20H22ClFN4O4[M+H]+ 计 算 值为 437.1386， 测定值为 451.1542.
     参照上述化合物的制备方法， 采用商业上可得到的其它反应原料例如各种羧酸、 酸酐、 酰氯或侧链被 Boc、 苄氧羰基 (Z 或 Cbz) 或芴甲氧羰基 (Fmoc) 保护的天然 / 非天然氨 基酸等， 可合成其它克林沙星碳酰氨基衍生物。
     实施例 3、 部分克林沙星氨基衍生物的琼脂扩散抑菌试验
     融化普通琼脂培养基， 冷却至 55-60 ℃， 加入 1.0×106CFU/mL 的试验用细菌悬液 ( 金黄色葡萄球菌 ATCC29213、 沙门菌 SR96-1 或铜绿假单胞菌 ATCC27853)1.0mL， 倾倒至直 径为 90mm 的平皿中， 凝固后打孔备用。向上述琼脂孔中加入含有克林沙星氨基衍生物的磷 酸盐缓冲溶液 (100mmol/L， pH7.2)， 克林沙星氨基衍生物的加入量为 2μg/ 孔。加毕 37℃ 培养 24 小时， 测定抑菌圈直径。 结果见表 5， 可见本发明的克林沙星氨基衍生物对金黄色葡 萄球菌 ATCC29213、 沙门菌 SR96-1 和铜绿假单胞菌 ATCC27853 基本都具有抑制作用， 且大多 数衍生物的作用强度接近或优于克林沙星。
     表 5 部分克林沙星氨基衍生物的琼脂扩散抑菌试验结果 ( 抑菌圈直径 ： mm)
     注： - 表示阴性
     实施例 4、 部分克林沙星氨基衍生物的体外最小抑菌浓度 (MIC) 测定
     1、 对部分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的 MIC 测定
     按照美国国家临床实验室标准化委员会 (NCCLS) 推荐的微量稀释法测定克林沙 星氨基衍生物对金黄色葡萄球菌 ATCC29213、 大肠埃希菌临床分离株、 沙门菌 SR96-1 和 铜绿假单胞菌 ATCC27853 的 MIC ： 将克林沙星氨基衍生物的水溶液用 MH 液体培养基以二 倍稀释法稀释备用。在 48 孔板中加入克林沙星氨基衍生物稀释液， 当试验用细菌为金黄 色葡萄球菌或沙门菌时， 克林沙星氨基衍生物加入量分别为 2.0、 1.0、 0.5、 0.25、 0.125、 0.0625μg/ 孔 ； 当试验用细菌为大肠埃希菌时， 克林沙星氨基衍生物加入量分别为 4.0、 2.0、 1.0、 0.5、 0.25、 0.125μg/ 孔 ； 当试验用细菌为铜绿假单胞菌时， 克林沙星氨基衍生物
     加入量分别为 1.0、 0.5、 0.25、 0.125、 0.0625、 0.03125μg/ 孔。 然后， 每孔加入 1.0×106CFU/ mL 的试验用细菌悬液 10μL， 37 ℃培养 24 小时， 观察细菌生长情况， 所得 MIC 用琼脂平 板抑菌法进行验证。结果见表 6， 可见本发明克林沙星氨基衍生物对金黄色葡萄球菌 ATCC29213、 大肠埃希菌临床分离株、 沙门菌 SR96-1 和铜绿假单胞菌 ATCC27853 的抑制作用 接近或优于克林沙星。
     表 6 部分克林沙星氨基衍生物的 MIC(μg/mL)
     2、 对大肠埃希菌 ATCC35218 的 MIC 测定
     委托中国人民解放军第三军医大学药学院盲测了部分克林沙星氨基衍生物对大 肠埃希菌 ATCC35218 的 MIC。采用微量稀释法测定 ： 将克林沙星氨基衍生物的水溶液用 MH 液体培养基以二倍稀释法稀释备用 ； 在 96 孔板中加入克林沙星氨基衍生物稀释液， 克林沙 星氨基衍生物加入量分别为 32.0、 16.0、 8.0、 4.0、 2.0、 1.0、 0.5、 0.25μg/ 孔 ； 之后每孔加 6 37 ℃培养 24 小时， 测定 MIC。结 入 1.0×10 CFU/mL 的大肠埃希菌 ATCC35218 悬液 10μL， 果见表 7， 可见本发明克林沙星氨基衍生物对大肠埃希菌 ATCC35218 的抑制作用接近或优 于克林沙星。
     表 7 部分克林沙星氨基衍生物对大肠埃希菌 ATCC35218 的 MIC(μg/mL)
     3、 对临床耐氟喹诺酮类大肠埃希菌的 MIC 测定
     委托西南大学药学院盲测了部分克林沙星氨基衍生物对临床耐氟喹诺酮类大肠 埃希菌的 MIC。采用微量稀释法测定 ： 将克林沙星氨基衍生物的水溶液用 LB 液体培养基以 二倍稀释法稀释备用 ； 在 96 孔板中加入克林沙星氨基衍生物稀释液， 克林沙星氨基衍生物 加入量分别为 16.0、 8.0、 4.0、 2.0、 1.0、 0.5μg/ 孔 ； 之后每孔加入 1.0×106CFU/mL 的临床 耐氟喹诺酮类大肠埃希菌悬液 10μL， 37℃培养 24 小时， 测定 MIC。 结果见表 8， 可见本发明 克林沙星氨基衍生物对临床耐氟喹诺酮类大肠埃希菌的抑制作用与克林沙星基本相当。
     表 8 部分克林沙星氨基修饰物对临床耐氟喹诺酮类大肠埃希菌的 MIC(μg/mL)
     实施例 5、 部分克林沙星氨基衍生物的急性毒性试验
     1、 克林沙星的小鼠半数致死量 (LD50) 测定
     将 50 只小鼠随机分成 5 组， 每组 10 只， 雌雄各半， 试验前禁食 24 小时， 正常给 水。 根据预实验结果 ： 克林沙星对小鼠的最大致死量 (Dm) 为 170mg/kg， 最小致死量 (Dn) 为 88mg/kg， 按照等比数列 ( 公比取 0.85) 设计 5 个不同剂量组 ： 170mg/kg 组、 144.5mg/kg 组、 122.8mg/kg 组、 108.70mg/kg 组和 88.74mg/kg 组。将 5 组小鼠分别给予上述 5 种不同剂量 的克林沙星， 腹腔注射给药， 注射体积按 0.2ml/10g 计算， 观察并记录小鼠的毒性反应、 死 亡时间和数目， 连续观察 7 天， 按孙氏改良寇氏法计算 LD50。
     实验显示， 给药后各组小鼠均出现静卧、 呼吸困难、 躁动不安等症状， 死亡小鼠大 多在给药后 40 分钟左右死亡， 死亡前出现抽搐、 惊厥、 运动困难、 身体僵直、 呼吸抑制等症 状， 存活小鼠在给药后第 2 天逐渐恢复正常， 出现大便稀疏症状， 之后几天无异常现象发 生。 第 8 天将死亡小鼠和存活小鼠全部解剖肉眼观察， 未见各内脏器官的明显异常改变。 经 计算， 克林沙星的 LD50 为 116.60±5mg/kg(P ＝ 0.95)。
     2、 部分克林沙星氨基衍生物的急性毒性试验
     将小鼠腹腔注射给予一定剂量的克林沙星氨基衍生物， 注射体积按 0.2ml/10g 计 算， 连续观察 7 天， 统计小鼠死亡数， 计算死亡率。 结果见表 9 ～ 12， 可见本发明部分克林沙 星氨基衍生物的毒性较克林沙星明显减小。
     表 9 部分克林沙星氨基衍生物的急性毒性试验结果
     表 10 化合物 HHY-12 的不同剂量急性毒性试验结果表 11 化合物 HHY-13 的不同剂量急性毒性试验结果
     表 12 化合物 HHY-28 的不同剂量急性毒性试验结果实施例 6、 部分克林沙星氨基衍生物的溶解性试验
     本发明对克林沙星及克林沙星氨基衍生物在多种常用溶剂中的溶解性进行了考 察。结果见表 13， 可见克林沙星在多种常用溶剂如二甲亚砜、 二氯甲烷、 三氯甲烷、 水、 乙酸 乙酯中的溶解性都较小， 而本发明的克林沙星氨基衍生物在上述常用溶剂中的溶解性较克 林沙星明显增大。
     表 13 部分克林沙星氨基衍生物的溶解性试验结果
     实施例 7、 部分克林沙星氨基衍生物溶液稳定性试验
     将克林沙星或克林沙星氨基衍生物用二甲亚砜溶解， 再用磷酸盐缓冲液 (pH ＝ 7.0) 稀释至浓度为 2.0mg/mL， 室温避光储存， 分别于储存第 30、 60、 90、 120、 150、 180 天时， 用磷酸盐缓冲液 (pH ＝ 7.0) 做 20 倍稀释， 采用琼脂平板扩散法测定各样品 (20μL/ 孔 ) 对金黄色葡萄球菌 ATCC29213 的抑制作用， 测定抑菌圈直径。 结果见表 14， 可见以磷酸盐缓 冲液为稀释剂的克林沙星溶液稳定性较差， 而本发明的克林沙星氨基衍生物溶液在储存第 180 天时仍保持了良好的抗菌活性， 稳定性较好。
     表 14 部分克林沙星氨基衍生物溶液稳定性试验结果 ( 抑菌圈直径 ： mm)
     注： - 表示阴性。
     最后说明的是， 以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制， 尽管通过参 照本发明的优选实施例已经对本发明进行了描述， 但本领域的普通技术人员应当理解， 可 以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变， 而不偏离所附权利要求书所限定的本发明 的精神和范围。
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