具有固定化酶或防冰蛋白的表面.pdf

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1、10申请公布号CN102016020A43申请公布日20110413CN102016020ACN102016020A21申请号200980116714622申请日200904280808350320080509GBC12N11/14200601C07K17/14200601C09D5/16200601C09D189/0020060171申请人空中客车运营有限公司地址英国布里斯托尔72发明人卡林保尔克里斯蒂安博尔兹马舍尔阿洛伊斯弗里德贝热乌尔里希赖特74专利代理机构中科专利商标代理有限责任公司11021代理人王旭54发明名称具有固定化酶或防冰蛋白的表面57摘要本发明针对具有一个空气动力学或流体动。

2、力学活性表面的物品，其中一种或多种生物催化和/或防冰蛋白固定在它的表面上。本发明进一步针对向物品的空气动力学或流体动力学活性表面提供自清洁和/或防冻涂层的方法。30优先权数据85PCT申请进入国家阶段日2010110986PCT申请的申请数据PCT/GB2009/0504252009042887PCT申请的公布数据WO2009/136186EN2009111251INTCL19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书3页说明书8页附图1页CN102016030A1/3页21一种具有空气动力学或流体动力学活性表面的物品，其中一种或多种生物催化和/或防冰蛋白通过间隔物固定在所述表面上。

3、并且至少部分地包被所述表面，其特征在于所述蛋白通过含有所述间隔物的交联剂固定在所述表面上。2如权利要求1所述的物品，其中所述生物催化蛋白是选自由以下组成的组的酶淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶、核酸酶、几丁质酶以及它们的混合物，所述蛋白是天然来源的和/或人造来源的，优选是特殊工程蛋白。3如权利要求1或2所述的物品，其中所述防冰蛋白选自人造或天然来源的防冻蛋白AFPS。4如权利要求3所述的物品，其中所述AFP源于鱼类、昆虫或植物。5如权利要求4所述的物品，其中所述AFP源于博氏南冰PAGOTHENIABORCHGREVINKI、远东宽突鳕ELEGINUSGRACILIS、美洲拟鲽PSEUDOPL。

4、EURONECTESAMERICANUS、黄粉虫TENEBRIOMOLITOR、或云杉色卷蛾CHORISTONEURAFUMIFERANA。6如权利要求1所述的物品，其中所述表面首先已经通过应用硅烷被活化。7如权利要求6所述的物品，其中所述硅烷是选自具有以下通式的组其中RF有机官能团，优先选自氨基、羧基、巯基、羟基、氰基、环氧基、醛N120的整数X可水解基团，优选甲氧基；乙氧基；异丙氧基，甲氧基乙氧基。8如以上权利要求中一项或多项所述的物品，其中所述表面是由聚合物涂层包被的，所述涂层充当间隔物和充当驱避剂。9如权利要求8所述的物品，其中所述表面是由聚合物的自组装单层来包被的，所述聚合物如环氧丙。

5、氧丙基三甲氧基硅烷、三甲氧基甲硅烷基丙基甲基丙烯酸酯PEGPPGPEGPEG聚乙二醇，PPG聚丙二醇、星形聚合物、树枝状聚合物或聚合物刷子。10如以上权利要求中一项或多项所述的物品，所述物品是交通工具，具体是汽车、卡车、火车、船或飞机。11如以上权利要求中一项或多项所述的物品，其中所述表面是飞机机翼的表面，或汽车、卡车、火车或飞机的挡风玻璃、传感器表面等等，或风电站的转子的表面。12如以上权利要求中一项或多项所述的物品，其中所述表面是翼面的前缘。13如以上权利要求中一项或多项所述的物品，其中所述物品是建筑物或脚手架。14如以上权利要求中一项或多项所述的物品，其中所述物品是涡轮叶片或船的螺旋桨。。

6、15如以上权利要求中一项或多项所述的物品，其中所述蛋白包被了大约25的所述表面。16如以上权利要求中一项或多项所述的物品，其中所蛋白包被了大约50的所述表权利要求书CN102016020ACN102016030A2/3页3面。17如以上权利要求中一项或多项所述的物品，其中所述表面是微米或纳米结构的。18一种向物品的空气动力学或流体动力学活性表面提供自清洁和/或防冻涂层的方法，所述方法包括A提供一种或多种生物催化和/或防冰蛋白；并且B通过包含间隔物的交联剂将所述蛋白固定在至少一部分的所述表面上。19如权利要求18所述的方法，其中所述生物催化蛋白是选自由以下组成的组的酶淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维。

7、素酶、核酸酶、几丁质酶以及它们的混合物，所述蛋白是天然来源的和/或人造来源的。20如权利要求18或19所述的方法，其中所述防冰蛋白选自人造或天然来源的防冻蛋白AFPS。21如权利要求20所述的方法，其中所述AFP源于鱼类、昆虫或植物。22如权利要求21所述的方法，其中所述AFP是源于博氏南冰PAGOTHENIABORCHGREVINKI、远东宽突鳕ELEGINUSGRACILIS、美洲拟鲽PSEUDOPLEURONECTESAMERICANUS、黄粉虫TENEBRIOMOLITOR、或云杉色卷蛾CHORISTONEURAFUMIFERANA。23如权利要求1822中一项或多项所述的方法，其中所。

8、述固定是通过以下来提供的A使硅烷与所述物品表面进行反应其中RF有机官能团，优选选自氨基、羧基、巯基、羟基、氰基、环氧基、醛N120的整数X可水解基团，优选甲氧基；乙氧基；异丙氧基，甲氧基乙氧基；并且B通过交联分子将所述蛋白偶联到所述物品的改性的表面上其中基团R1R和R2R是相同或不同的，并且独立地选自NHS酯、马来酰亚胺、亚氨酸酯、碳二亚胺、异氰酸酯、酰肼基团。24如权利要求1822中一项或多项所述的方法，其中所述表面是由聚合物涂层包被的，所述涂层充当间隔物和充当驱避剂。25如权利要求24所述的方法，其中所述表面是由聚合物的自组装单层来包被的，所述聚合物如环氧丙氧丙基三甲氧基硅烷、三甲氧基甲硅。

9、烷基丙基甲基丙烯酸酯PEGPPGPEGPEG聚乙二醇，PPG聚丙二醇、星形聚合物、树枝状聚合物或聚合物刷子。权利要求书CN102016020ACN102016030A3/3页426如权利要求1825中一项或多项所述的方法，其中所述表面是交通工具，具体是汽车、卡车、火车、船或飞机。27如权利要求1826中一项或多项所述的方法，其中所述表面是飞机机翼的表面，或汽车、卡车、火车或飞机的挡风玻璃、传感器表面等等，或风电站的转子的表面。28如权利要求1827中一项或多项所述的方法，其中所述表面是翼面的前缘。29如权利要求1827中一项或多项所述的方法，其中所述物品是建筑物或脚手架。30如权利要求1827。

10、中一项或多项所述的方法，其中所物品是涡轮叶片或船的螺旋桨。31如权利要求1830中一项或多项所述的方法，其中所述蛋白包被到所述物品表面上从而覆盖它的表面的大约25的量。32如权利要求1830中一项或多项所述的方法，其中所述蛋白包被到所述物品的表面上从而覆盖它的表面的大约50的量。33如权利要求1832中一项或多项所述的方法，其中所述蛋白是以斑点样或岛状方式固定在所述物品表面上。34如权利要求1833中一项或多项所述的方法，其中固定的蛋白在具有大约10至1000NM的厚度的表面的表面上形成层。35如权利要求1834中一项或多项所述的方法，其中所述表面是微米或纳米结构的。36生物催化和/或防冰蛋白。

11、用于向物品表面提供自清洁和/或防冻涂层的用途。37如权利要求36所述的用途，其中所述涂层适合于从所述物品表面去除有机物质。38如权利要求37所述的用途，其中所述有机物质源自粘附到所述物品表面上的昆虫。39如权利要求36所述的用途，其中所述涂层适合于避免在所述物品表面上形成冰。权利要求书CN102016020ACN102016030A1/8页5具有固定化酶或防冰蛋白的表面0001本发明针对具有空气动力学或流体动力学活性表面的物品，其中一种或多种类型家族的生物催化和/或防冰蛋白固定在它的表面上。本发明进一步针对向物品的空气动力学或流体动力活性表面提供自清洁和/或防冻涂层的方法。0002在现有技术中。

12、，存在一些可以提供物品的“容易清洁”或自清洁表面的技术。0003在不要求加入能量的技术与那些基于使用能量的技术之间可以作出第一区分。0004第一组包括向物品提供人造表面结构，它们向物品的表面提供了自清洁作用。0005US6,660,363针对具有凸起和凹陷的人造表面结构的物品的自清洁表面，其中所述凸起之间的距离是在一个预定的范围内，其中至少所述凸起由疏水性聚合物或永久疏水化材料组成并且其中所述凸起不能被水或含水的清洁剂润湿。0006US2002/0016433提供用于生产难以润湿的表面的一种涂层组合物，其包括精细分割的粉末，所述粉末的颗粒具有疏水表面以及多孔结构，以及一种成膜黏合剂，其特征在于。

13、一个确定的表面张力。该方法生产难以润湿的表面并且提供这些涂层组合物用于生产具有自清洁作用的表面以及用于降低管中液体流动阻力的用途。0007US2004/0213904描述了用于生产在物品上的可分开的防污和防水表面涂层的一种方法。该方法包括将这些疏水颗粒悬浮在处于高挥发性硅氧烷中的硅蜡溶液中并且将此悬浮液施涂在物品的至少一个表面上，然后将高挥发性硅氧烷去除。0008所有这些方法和涂层具有的缺点是，没有提供有机材料的活性降解。此外，冰的粘着仅被减小，然而，未能被避免到较大程度。0009第二组技术涉及使用机械能和/或使用紫外线辐射。0010美国专利申请号US2006/0177371披露了一种制备用于。

14、可见光光催化的含有纳米二氧化钛颗粒的凝胶的方法。该方法包括获得氢氧化钛，通过加入氧化剂、改善剂、任选的酸以及任选的表面活性剂以组成溶液将氢氧化钛转化成二氧化钛；并且通过加热使该溶液老化以使得该溶液变成凝胶。该凝胶在可见光范围内具有光催化特征以及自清洁功效。从这种方法获得的凝胶可以施用在一种底物的表面上并且当被可见光照亮时具有自清洁、光催化以及杀菌的特性。0011US2004/0009119提供了二氧化钛的发热制剂PYROGENICPREPARATION，其中金属盐溶液雾化以形成气溶胶，所述气溶胶注入生产流中。这种二氧化钛可以用作光催化剂或用作紫外线吸收剂，并且可以用于玻璃的涂层中或塑料中。00。

15、12然而这些方法需要另外的必须向其供给能量的结构组件以及装置。这引起了高度维护精力以及增加的技术复杂性。在光催化途径中，降解过程是极度缓慢的并且该降解在不存在光的条件下不起作用。0013鉴于所引用的现有技术，本发明的一个目的是提供物品的自清洁表面，特别是具有空气动力学或流体动力学活性表面的物品，所述表面具有不需要能量使用或供给的自清洁活性。本发明的另一个目的是提供能够从表面去除或至少降解有机污染物，如蛋白、糖类以及脂肪并且此外具有防冻或防冰特征的自清洁表面。0014本发明的另一个目的是提供一种物品的表面，该表面不需要持续再生并且不负说明书CN102016020ACN102016030A2/8页。

16、6面地影响该表面的空气动力学或流体动力学特征并且最终不需要使用有机溶剂或表面活性剂。0015通过独立权利要求的主题解决了这些以及另外的目的。在从属权利要求中陈述了优选的实施方案。0016本发明使用了具有自清洁特征的层表面以及物品，其通常包括底物基质以及固定化有机大分子如蛋白薄膜。这些蛋白的功能是降解有机材料并且将它去除和/或避免在表面上形成冰。0017本发明的一个主要优点是，在这种功能中涉及的蛋白，由于它们的作为生物催化剂的性质，在降解的过程中没有消耗。这意味着蛋白的表面层不需要任何种类的再生并且仅仅少量的蛋白如酶就是足够的。就这一点而言，另一个优点是，为了提供本发明的效果，空气动力学或流体动。

17、力学活性表面不需要完全被蛋白覆盖，而是局部的覆盖以及蛋白小岛ISLETSOFPROTEIN是足够的。结果是，功能层在这样一种情况下也会起作用，其中它们的一些部分已经被腐蚀或已经通过其他方法去除或已经被损坏。0018本发明的一个另外的优点是，由于向空气动力学或流体动力学活性表面施涂的层的厚度减小，这些层在可见光中是透明的，并且因此完美地适用于挡风玻璃、飞机表面等的终饰FINISHING应用即暴露于环境的最上层。本发明的改性的表面的一个另外的重要的应用是风力机的转子。0019根据本发明，这些生物催化和/或防冰蛋白通过间隔物或连接物被应用于物品的表面，所述间隔物或连接物对本发明的效果做出了正面贡献，。

18、这是由于维持了蛋白构造PROTEINCONFIRMATION并且避免了空间位阻现象。这可以引起与溶液中的活性相当的酶活性。0020本发明具体针对以下方面和实施方案0021根据第一个方面，本发明针对具有空气动力学或流体动力学活性表面的物品，其中一种或多种不同类型的生物催化和/或防冰蛋白通过间隔物固定在所述表面上并且至少部分地包被所述表面。0022如以上已经提及的，本发明的方法具有的重要优点是，空气动力学或流体动力学活性表面的各自的特征不受负面影响并且因此完美地适用于空气动力学或流体动力学活性表面如飞机机翼、风电站的转子、飞机、汽车、卡车以及火车的挡风玻璃、传感器表面等等。这些待用于物品的功能表面。

19、通常是薄的并且它的厚度范围是在大约10NM与1000NM之间。对于可见光和紫外光，它一般是透明的。0023应该另外注意到，蛋白防冰和生物催化蛋白的组可以组合，从而在极端环境如它们需要用于例如飞机机翼的空气动力学或流体动力学活性表面中中实现其功能。0024如以上已经指出的，本发明的一个主要优点是，为了达到本发明的效果，即为了在空气动力学或流体动力学活性物品上提供自清洁表面，生物催化和/或防冰蛋白涂层没有必要覆盖物品的全部表面，而是应用部分涂层小岛或斑点就是足够的。例如，有可能仅仅覆盖翼面的前缘。0025根据一个实施方案，这些生物催化蛋白是选自由以下组成的组的酶淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶、核。

20、酸酶、几丁质酶以及优选它们的混合物。这些蛋白是天然来源的或人造的，例如通过化学合成或通过遗传工程。说明书CN102016020ACN102016030A3/8页70026本发明的一个通常应用是，降解来自粘附到物品表面上的昆虫的残骸。昆虫身体几乎包括所有的可想到的有机物质如糖类、脂肪、蛋白等等。为了去除和/或降解源于昆虫的残骸，需要例如蛋白酶、脂肪酶、几丁质酶的混合物。注意到，以上列出的酶当然不是受限的，且可以根据物品的预期用途来进行扩展。0027图1中图示了关于通过间隔物固定到物品表面上的酶层构造的图解。0028根据一个另外的实施方案，所述防冰蛋白选自人造或天然来源的防冻蛋白AFPS。此类天然。

21、AFPS可以源于鱼类、昆虫或植物，特别是源于博氏南冰PAGOTHENIABORCHGREVINKI、远东宽突鳕ELEGINUSGRACILIS、美洲拟鲽PSEUDOPLEURONECTESAMERICANUS、黄粉虫TENEBRIOMOLITOR、或云杉色卷蛾CHORISTONEURAFUMIFERANA。此外，该列表不是受限制的，可以基于新的科学发展以及应用中的特定要求进行扩展。此外，这些蛋白不局限于天然来源的蛋白，而是还包括人造蛋白，如通过重组技术制造和/或修饰的蛋白、融合蛋白等等。0029在一个另外的优选实施方案中，待包被的表面是一种微米或纳米结构的表面。这些微米或纳米结构的表面显示出改。

22、进的空气动力学或流体动力学效果并且可以通过特定的几何形状促进减小流动阻力。证明了那些微米或纳米结构表面的空气动力学或流体动力学特征没有受到应用本发明蛋白的负面影响。0030另外，微米或纳米结构的表面具有允许蛋白与表面的改进的粘附的优点，这些蛋白可以被较少地腐蚀并且会更好地维持它们的功能。0031为了使蛋白附着于表面上，在多数情况下，首先必须将该表面活化。在一个优选的实施方案中，这种改性将通过应用硅烷来完成。在一个优选的实施方案中，这种改性将通过应用硅烷来完成0032如果使用的话，所述硅烷优先选自具有以下通式的组00330034其中0035RF有机官能团，优先选自氨基、羧基、巯基、羟基、氰基、环。

23、氧基、或醛基0036N120的整数0037X可水解基团，优选甲氧基、乙氧基、异丙氧基、或甲氧基乙氧基。注意到甲氧基是优选的。0038以下说明了进一步的偶联反应0039第一步使硅烷与物品的表面进行反应“活化”0040说明书CN102016020ACN102016030A4/8页80041其中0042RF有机官能团，优先选自氨基、羧基、巯基、羟基、氰基、环氧基、醛基；0043N120的整数0044X可水解基团，优选甲氧基；乙氧基、异丙氧基、甲氧基乙氧基；0045并且0046第二步通过交联剂分子将该蛋白偶联到该物品的活化的表面上00470048其中反应基团R1R和R2R是相同同双功能交联剂或不同的异。

24、双功能交联剂并且优选独立地选自NHS酯、马来酰亚胺MALEIMIDO、亚氨酸酯、碳二亚胺、异氰酸酯、酰肼基团。0049注意到，在这个反应中，还可能使用“DIPODAL”硅烷，即其携带236个基团X并且因此可以导致与底物的6个联接。0050此外，第一步中可以优选使用以下硅烷0051氨丙基三乙氧基硅烷APTES0052氨丙基三甲氧基硅烷0053氨丙基二甲基乙氧基硅烷0054氨己基氨甲基三甲氧基硅烷0055氨己基氨丙基三甲氧基硅烷0056三乙氧基甲硅烷基十一醛0057双2羟乙基3氨丙基三乙氧基硅烷0058氰基丙基三甲氧基硅烷0059巯基丙基三甲氧基硅烷0060环氧己基三乙氧基硅烷0061环氧丙氧基三。

25、甲氧基硅烷0062环氧丙氧丙基三甲氧基硅烷GOPS0063十八烷基三甲氧基硅烷0064丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷0065甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷。0066第一步，即物品表面的改性还可以由将物品用聚乙烯亚胺POLYETHYLENIMINE或氨基PCP进行包被来代替。0067在交联剂分子的帮助下的第二步即将蛋白附着于物品的活化表面上中，以下的反应基团R1R和/或R2R可以优选地用于该交联剂说明书CN102016020ACN102016030A5/8页900680069在蛋白侧，反应配偶体RF通常是氨基或羧基。0070通过碳二亚胺的偶联反应的例子00710072通过氰酸盐的一个偶联反应的例子0。

26、0730074交联剂的优选实例如下0075乙基二甲基氨丙基碳二亚胺异双功能的，氨基羧基反应性的0076乙二异氰酸酯同双功能的，羟基反应性的0077六亚甲基二异氰酸酯同双功能的，羟基反应性的0078戊二醛同双功能的，氨基反应性的0079在一个优选的实施方案中，该交联剂的反应基团R1R和R2R是由一个间隔物分开的。具有间隔基团的交联剂的实例是0080NHSPEON马来酰亚胺异双功能的，氨基巯基反应性的说明书CN102016020ACN102016030A6/8页100081双NHSPEON同双功能的，氨基反应性的0082双马来酰亚胺PEON同双功能的，巯基反应性的0083双磺基NHS辛二酸酯同双功。

27、能的，氨基反应性的0084琥珀酰亚胺基马来酰亚氨苯基丁酸酯同双功能的，氨基反应性的0085PEO聚氧化乙烯；NHS琥珀酰亚胺基0086在一个另外的实施方案中，该物品的表面可以优选由聚合物涂层包被，该聚合物涂层充当间隔物和充当驱避剂。0087在一方面，聚合物提供了一种便利种类的表面改性，在另一方面，它们提供了扩大的表面，这样使得可以结合更大量的蛋白分子。由于结合的蛋白酶至物品表面的大距离，正确的蛋白折叠的可能性将会增加，并且因此，蛋白的功能将会维持。0088聚合物还可以充当一种蛋白驱避剂，导致仅仅偶联所需的蛋白，而非“外来”蛋白。最后，但不是最不重要的，此类聚合物层还会采取“水凝胶”的形式，即三。

28、维结构，这种结构能够接受吸收水或水溶液。通过这种方法，水环境局部产生，这对于大多的蛋白的功能是必要的。0089在这种情况下，蛋白会通过此类聚合物连接到物品的表面，需要向这些聚合物提供反应性末端基团所谓的“加帽”，例如提供氨基NH2或羧基COOH基团。通过如上所述的交联，蛋白可以连接到这些反应性末端基团上。0090在一个优选的实施方案中，所述聚合物选自一个或多个以下类别00911自组装单层SAM；自组织单层0092一种自组装单层是通过将表面活性或有机物质浸没在溶液或悬浮液中而自发形成的。合适的物质是例如具有多于10个碳原子长度的氯硅烷和烷基硅烷。它们在具有高度内部次序的金、玻璃和硅上形成了高度有。

29、序的单层。用这种方式进行处理的表面在空气中稳定数月。与常规的表面涂层对比，SAM具有确定的厚度，范围为0，1至2NM。0093SAM的例子是0094环氧丙氧丙基三甲氧基硅烷0095三甲氧基甲硅烷基丙基甲基丙烯酸酯0096PEGPPGPEGPEG聚乙二醇，PPG聚丙二醇00972星形聚合物0098STARPEG是一种星形“预聚物”，具有在大多数情况下6个基于PEG的“臂”。末端通常为OH可以例如用异氰酸酯基团NCO进行改性，该异氰酸酯基团随即可以与蛋白的伯胺进行反应。另外的末端改性是丙烯酸根和乙烯砜末端基团。0099存在对于蛋白偶联的以下选项0100A在形成层之前，在溶液中通过异氰酸酯将蛋白结合。

30、至STARPEG1步涂层；0101B连接至新的层中的异氰酸酯基团；0102C连接至已经交联的层中的氨基基团。01033树枝状聚合物DENDRIMER0104树枝状聚合物是高度分支的“树形”聚合物结构。如同线型聚合物，可以向它们提供反应性末端基团所谓的“加帽”，参见以上。通过这些基团，它们可以共价说明书CN102016020ACN102016030A7/8页11地结合至表面上。然而，通过形成膜，结合至表面上也是可行的。0105例子0106PAMAM聚酰胺型胺类树枝状聚合物0107聚赖氨酸树枝状聚合物01084聚合物刷子0109术语聚合物刷子用于吸附至表面上的聚合物，所述聚合物被压紧，这样使得单独。

31、的聚合物链必须由所述物质展开。在这方面，可以使用末端功能化聚合物来偶联蛋白通过交联剂。0110例子0111聚DMABGMA二甲基丙烯酰胺与甲基丙烯酸缩水甘油酯的嵌段共聚物0112聚甲基丙烯酸羟基乙酯0113聚PEG甲基丙烯酸酯0114如以上所述，根据一个优选的实施方案，本发明的物品优选是交通工具，具体是汽车、卡车、火车、船、或飞机。更准确地讲，该物品表面是飞机机翼的表面、或汽车、卡车、火车或飞机的挡风玻璃、传感器的表面或船身，等等。0115除了交通工具，本发明的改性的表面在需要空气动力学或流体动力学活性表面的风车动力设计以及其他设备中存在应用。例如，它们可以用于包被建筑物或脚手架的表面。另外，。

32、所述物品可以是涡轮叶片或船的螺旋桨。0116在一个优选的实施方案中，蛋白包被大约20至100的表面。如以上已经指出的，在许多应用中，为了达到本发明的效果，即有机物质的降解以及防冻特性，将这些蛋白以小岛或斑点样的形式固定在物品的表面上是足够的。然而，基于技术经验，可以假定至少25的表面应该被生物催化和/或防冰蛋白所覆盖。0117在第二个方面，本发明针对向物品的空气动力学或流体动力学活性表面提供自清洁和/或防冻涂层的方法，其包括0118A提供一种或多种生物催化和/或防冰蛋白；并且0119B通过间隔物将所述蛋白固定在该物品的至少一部分的表面上。0120在本发明的方法中，可以使用如以上所指出的蛋白。将。

33、会应用如以上所指出的类似物、间隔物、表面等。关于蛋白与物品表面之间的偶联反应，参考以上信息参见第一个方面。0121在第三个方面，本发明针对生物催化和/或防冰蛋白用于向物品的表面提供自清洁和/或防冻涂层的用途。这种涂层适合用于从物品的表面去除有机物质，具体是粘附到物品表面上的昆虫以及昆虫残骸或粘附到船身的水下表面上的藻类以及藻类残骸。0122备选地或另外地，该涂层适合用于避免在物品的表面上形成冰。因此，本发明特别适合用于向飞机提供自清洁和/或防冻表面。0123现在通过实例，参考附上的图表，对本发明进行进一步说明。0124在图中，显示了以下0125图1展示了本发明的一个实施方案，其中蛋白偶联到飞机。

34、机翼的表面上。0126实例0127以下是对酶进行固定的具体实例说明书CN102016020ACN102016030A8/8页120128净化该物品的表面玻璃或TITAN0129施用氨丙基三乙氧基硅烷溶液0130将过量的进行冲洗0131向该表面加入在偶联缓冲剂中无胺的胰蛋白酶TRYPSINE0132加入乙基二甲基氨丙基碳二亚胺溶液0133于室温温育30分钟0134冲洗0135在光度计中通过显色反应CLORREACTION测定在表面上的酶反应。0136虽然通过实例对本发明进行了说明，但本发明不仅限于此，而是可以由技术人员以任何可想到的方式对本发明作出改变。说明书CN102016020ACN102016030A1/1页13图1说明书附图CN102016020A。