5-[3-(2， 5- 二氯 -4， 6- 二甲基 -1- 氧吡啶 -3- 基 )-[1， 2， 4] 噁二唑 -5- 基 ]-3- 硝基苯 -1， 2- 二醇的晶型 技术领域 本 发 明 涉 及 一 种 儿 茶 酚 -O- 甲 基 转 移 酶 (COMT) 的 抑 制 剂 5-[3-(2，5- 二 氯 -4，6- 二甲基 -1- 氧吡啶 -3- 基 )-[1，2，4] 噁二唑 -5- 基 ]-3- 硝基苯 -1，2- 二醇的 新颖的多晶型物、用于制备它们的方法、以及包含上述新颖的多晶型物作为活性药物成 分的药物组合物。
背景技术 尽管已用于临床实践数十年，左旋多巴 (L-DOPA) 仍然是用于帕金森氏症的症 状治疗的金标 (gold standard) 药物。这帮助人们保持开发儿茶酚 -O- 甲基转移酶 (COMT) 抑制剂的强烈兴趣，这种开发是基于一种假设，即，此酶的抑制可以为遭受疾病例如帕 金森氏病痛苦并经受用 L-DOPA 和外周氨基酸脱羧酶 (AADC) 抑制剂进行治疗的患者提 供临床性改善。
对于使用 COMT 抑制剂作为 L-DOPA/AADC 治疗辅助物的基本原理是基于它们 减少 L-DOPA 变为 3-O- 甲基 -L-DOPA(3-OMD) 的代谢 O- 甲基化的能力。 L-DOPA 诱导的临床性改善的持续时间简要表现为 L-DOPA 较短的体内半衰期，其与 3-OMD 较 长的半衰期形成对照。 另外，3-OMD 与 L-DOPA 竞争输送穿过血脑屏障 (BBB)，这意 味着仅极少量的口服给药剂量的 L-DOPA 能实际到达作用部位，即脑部。 通常，在用普 通剂量开始 L-DOPA 治疗的仅几年之内， L-DOPA 诱导的临床改善会在各剂量周期的末 尾下降，导致症状波动的所谓 “疗效减退” 模式。 人们已叙述了 “疗效减退” 现象和 3-OMD 的累积之间的密切关系 (Tohgi， H. 等， Neurosci.Letters，132 ：19-22，1992)。 据推测，这可能是由于对 3-OMD 穿过 BBB 的传输系统的竞争导致受抑制的 L-DOPA 的 脑部穿透性而引起的 (Reches， A.et al.， Neurology，32 ：887-888，1982)，或者更简单 地讲，这是由可以到达脑部的 L-DOPA 较少所引起的 (Nutt， J.G.， Fellman， J.H.， Clin. Neuropharmacol.，7 ：35-49，1984)。从效果上讲，COMT 的抑制保护了 L-DOPA 免于在 外周组织外中通过 O- 甲基化的代谢损耗，因此用重复剂量 (repeated doses) 的 L-DOPA 可 提高平均血浆 L-DOPA 浓度。 除了输送入脑部的竞争下降之外，显著地更大百分比的口 服给药剂量的 L-DOPA 能到达作用部位。 因此，COMT 的抑制增加了 L-DOPA 的生物有 效率，并因此可用单剂量的 L-DOPA 来延长抗帕金森氏症作用的持续时间 (Nutt， J.G.， Lancet，351 ：1221-1222，1998)。
5-[3-(2，5- 二 氯 -4，6- 二 甲 基 -1- 氧 吡 啶 -3- 基 )-[1，2，4] 噁 二 唑 -5- 基 ]-3- 硝基苯 -1，2- 二醇是一种呈现出卓越长效作用以及生物活性、生物有效性 和安全性平衡性能的 COMT 抑制剂。 该抑制剂显著提高了 L-DOPA 的生物有效率，增加 了 L-DOPA 至大脑的传输，并显著增加了在脑中经过长时间后多巴胺的水平。
因 而，5-[3-(2，5- 二 氯 -4，6- 二 甲 基 -1- 氧 吡 啶 -3- 基 )-[1，2，4] 噁 二 唑 -5- 基 ]-3- 硝基苯 -1，2- 二醇是一种用于治疗经受中枢或外周神经系统疾病痛苦的
个体的潜在候选物，特别是用于治疗情感障碍、运动障碍例如帕金森氏病和帕金森氏 紊乱 (parkinsonian disorders) 以及多动腿综合症、消化道障碍、水肿形成状态 (oedema formation states) 和高血压。
在 WO 2007/013830 A1 中描述了生产 5-[3-(2，5- 二氯 -4，6- 二甲基 -1- 氧吡 啶 -3- 基 )-[1，2，4] 噁二唑 -5- 基 ]-3- 硝基苯 -1，2- 二醇的方法。
存在一种以上晶型的物质 ( 例如，5-[3-(2，5- 二氯 -4，6- 二甲基 -1- 氧吡 啶 -3- 基 )-[1，2，4] 噁二唑 -5- 基 ]-3- 硝基苯 -1，2- 二醇 ) 的能力被定义为多晶，并 且这些不同晶型可被称为 “多晶型变体” 或 “多晶型物”。 为说明目的，术语 “多晶型 物”还可能包含伪多晶型物 (pseudo-polymorphs)。 一般说来，多晶型是由物质分子的能 力所引起，所述能力改变物质分子的构象或形成不同的分子间和分子内相互相用，特别 是氢键，导致在不同晶型物的晶格中不同的原子排列。 物质的多晶型物拥有不同的晶格 能，并且因此还呈现出不同的固体物理性能例如形态、密度、熔点、颜色、稳定性、溶 解速率、研磨便利性 (milling facility)、造粒性能、可压性能 (compacting properties) 等。
存在多种用于表征多晶型物的方法。 目前的本领域技术包括 X 射线类技术例如 X 射线粉末衍射、 X- 射线单晶衍射、显微镜法、差示扫描量热法、和光谱法例如 IR、近 IR(NIR)、拉曼光谱、和固态 NMR 波谱。 在药物组合物中，不同多晶型物的使用常常影响如下要素，例如药物组合物的 制备、它们的稳定性、溶解性能、生物有效率，当然以及它们的作用。 换言之，多晶 型物的使用可调节活性药物成分 (API) 例如 5-[3-(2，5- 二氯 -4，6- 二甲基 -1- 氧吡 啶 -3- 基 )-[1，2，4] 噁二唑 -5- 基 ]-3- 硝基苯 -1，2- 二醇的性能以及影响 API 的剂型。
发明内容
因 此， 本 发 明 的 目 标 在 于 提 供 5-[3-(2，5- 二 氯 -4，6- 二 甲 基 -1- 氧 吡 啶 -3- 基 )-[1，2，4] 噁二唑 -5- 基 ]-3- 硝基苯 -1，2- 二醇的新颖多晶型物。
本发明不仅涉及提供 5-[3-(2，5- 二氯 -4，6- 二甲基 -1- 氧吡啶 -3- 基 )-[1， 2，4] 噁二唑 -5- 基 ]-3- 硝基苯 -1，2- 二醇 ( 此后称为 “发明化合物” ) 的新颖的多晶 型物，而且涉及用于制备它们的方法，并且涉及包含一种以上上述新颖多晶型物作为活 性成分的药物组合物。 具体实施方式
在一具体实施方式中，本发明涉及发明化合物的一种多晶型物，在下述说明 中，该多晶型物被称为多晶型物 A。 用于制备多晶型物 A 的方法将在实验部分给出。 多 晶型物 A 是一种晶状多晶型物，并且因此可通过其粉末 X- 射线衍射图形 (XRPD) 来表 征。 该衍射图形可由多晶型物单位晶胞参数的测量结果来进行实验记录或计算。 如下表 格中，给出本发明多晶型物的 XRPDs 的特征峰 2θ 角度数 (Cu-Kα 辐射 )。
多晶型物 A 通过在如下表格中所给出的一个以上的峰来进行表征。
表 1- 多晶型物 A 的 XRPD
6CN 102015696 A CN 102015706 A说峰位 (° 2θ) 6.6 6.9 11.8 13.2 17.2 17.9 19.8 22.6 23.2 23.8 24.3 25.3 25.9 26.4 27.8 28.2 28.6 29.6 29.9 30.3明书相对强度 (％ ) 55 9 40 100 8 33 25 12 71 74 36 53 42 45 11 36 29 16 20 113/30 页7CN 102015696 A CN 102015706 A说30.7 32.0 32.7 33.5 34.1 35.1 36.5 37.0 37.6 39.2明14 5 14 6 6 9 9 8 4 5书4/30 页优选多晶型物 A 通过在约 5 ～ 25° /2θ 的范围内 (XRPDs 的高特征区域 ) 的一 个以上的上述峰来表征。 更优选的是，多晶型物 A 通过在约 5 ～ 25° /2θ 范围内的 2 ～ 10 个峰、更优选 3 ～ 5 个峰来表征。甚至更优选的是，多晶型物 A 通过 6.6、13.2、17.9、 23.2、23.8 和 24.3° /2θ 的信号来表征。 最优选的是，多晶型物 A 通过 6.6、13.2、17.9 和 23.8° /2θ 的信号来表征。
本领域技术人员将认可上述所给出的 2θ 角度数一般将在大约 ±0.10 的 2θ 角度 数至大约 ±0.20 的 2θ 角度数的范围内、在 ±0.1 的 2θ 角度数的优选范围内可再现。 参 见，例如美国药典 XXV(2002)，p.2088-2089。 这也适用于此说明书中给出的其他 XRPD 数据。
此外，多晶型物 A 还可通过差示扫描量热法 (DSC) 温谱图 (thermogram) 中在 251℃下的放热曲线来表征。
本领域技术人员将认可上述所给出的放热曲线一般将在大约 ±0.5 ～ 3℃的范围 内、优选在 ±2℃的范围内、更优选在 ±1℃的范围内、并最优选在 ±0.5℃的范围内可再 现。 这也适用于此说明书中给出的其他 DSC 以及热台的初始熔融 (melt-onset) 数据。
热台分析还显示，多晶型物 A 还可通过在 238℃下呈现的熔融初始来进行表征。
此外，多晶型物 A 还可通过在 25℃下在约 5％至约 95％范围内、更优选约 25％ 至约 80％、并更加优选约 40％至约 60％的相对湿度，经过 3 个月时间后的非吸湿性来表 征。
此外，由于在能量分解 (energetic decomposition) 之前的差示扫描量热法 (DSC) 和热解重量分析法 (TGA) 实验中证实了缺乏溶剂释出，多晶型物 A 优选是无水的。
多晶型物 A 还通过一个以上的如下傅里叶变换拉曼 (FT-Raman) 峰位来进行表
征。
表 2- 多晶型 A 的拉曼光谱 峰位 (cm-1) 145 170 216 237 256 285 339 370 420 442 465 505 526 710 810 974 1007 1059 相对强度 (％ ) 35 22 22 16 23 14 27 24 14 12 14 37 19 11 43 10 14 169CN 102015696 A CN 102015706 A说1159 1228 1254 1277 1325 1387 1414 1448 1498 1537 1589 1628 2927明书40 38 23 23 44 30 32 25 23 63 100 50 176/30 页优选的是，在上述表格中多晶型物 A 通过一个以上的峰位、优选 2 至 6 个、更优 选 3 至 5 个来表征。 更优选的是，多晶型物 A 通过一个以上如下位置的峰来表征 ：145、 505、810、1159、1228、1325、1537、1589、和 1628cm-1。 最优选的是，多晶型物 A 通 过如下位置的峰来表征 ：810、1325、1537、1589、和 1628cm-1。
本领域技术人员将认可傅里叶变换拉曼峰位一般将在大约 ±0cm-1 ～ ±5cm-1 的 范围内、优选在 ±1cm-1 ～ ±3cm-1 的范围内、最优选在 ±2cm-1 的范围内可再现。 这也
适用于此说明书中所示的其它拉曼 (Raman) 数据。
多晶型物 A 还通过一个以上在固态 13C-NMR 中的以下峰位来表征。
表 3- 多晶型物 A 的固态 13C-NMR
峰位 (ppm) 174.0163.9 150.4 148.8 144.5 140.2 134.8 133.2 129.8 124.9 124.0 122.1 114.6 22.5 15.7 优选的是，在上述表格中多晶型物 A 通过一个以上的峰位、优选 2 至 6 个、更优 选 3 至 5 个来表征。 最优选的是，多晶型物 A 通过在 15.7、114.6、148.8、和 174.0ppm 的峰来表征。
本领域技术人员将认可 13C-ssNMR 峰一般将在大约 ±0.1ppm ～ ±0.3ppm 的范 围内、优选 ±0.2ppm 的范围内可再现。 这也适用于此说明书中所示的其它 NMR 数据。
在另一具体实施方式中，本发明涉及发明化合物的一种多晶型物，在下述说明 中，该多晶型物被称为多晶型物 B。 用于制备多晶型物 B 的方法将在实验部分给出。
多晶型物 B 是一种晶状多晶型物，并且因此可通过其粉末 X- 射线衍射图形 (XRPD) 来表征。 衍射图形用 Cu-Kα 辐射来记录并且通过一个以上在如下表格中给出 的峰来表征。
表 4- 多晶型物 B 的 XRPD
11CN 102015696 A CN 102015706 A说峰位 (° 2θ) 5.7 6.9 8.0 9.8 11.3 11.9 13.8 14.4 16.9 19.6 20.4明书相对强度 (％ ) 69 68 24 26 36 93 100 27 63 87 288/30 页优选多晶型物 B 通过在约 5 ～ 25° /2θ 的范围内 (XRPDs 的高特征区域 ) 的一 个以上上述峰来表征。 更优选的是，多晶型物 B 通过在约 5 ～ 25° /2θ 范围内的 2 ～ 10 个峰、更优选 3 ～ 5 个峰来表征。 甚至更优选的是，多晶型物 B 通过 5.7、6.9、11.9、 13.8、16.9、和 19.6° /2θ 的信号来表征。 甚至更优选的是，多晶型物 B 通过 5.7、6.9、 11.9、13.8、和 19.6° /2θ 的信号来表征。
此外，多晶型物 B 还可通过差示扫描量热法 (DSC) 温谱图中在 237℃下的放热 曲线来表征。 这一分析还可显示 231℃下的肩峰。
此外，由于在能量分析之前的差示扫描量热法 (DSC) 和热解重量分析法 (TGA) 实验中证实了缺乏溶剂释出，多晶型物 A 更优选无水的。 然而，多晶型物 B 的分子堆积 允许在基本上没有改变晶格的情况下容纳结晶水。
多晶型物 B 还通过一个以上的如下傅里叶变换拉曼 (FT-Raman) 峰位来进行表 征。
表 5- 多晶型物 B 的拉曼图谱
峰位 (cm-1)相对强度 (％ )12CN 102015696 A CN 102015706 A说141 214 235 253 280 339 361 372 399 415 440 463 505 526 710 812 887 926 970 1001 1059明书26 23 16 20 14 25 18 19 15 18 12 15 49 21 14 54 11 13 12 22 199/30 页13CN 102015696 A CN 102015706 A说1157 1227 1292 1317 1385 1406 1444 1504 1537 1583 1630 2933明书10 14 49 43 50 34 32 27 44 100 69 3110/30 页优选的是，在上述表格中多晶型物 B 通过一个以上峰位、优选 2 至 6 个、更优选 3 至 5 个来表征。 更优选的是，多晶型物 A 通过一个以上如下位置的峰来表征 ：505、 1292、1317、1385、1537、1583、和 1630cm-1。 更优选的是，多晶型物 A 通过一个以上 如下位置的峰来表征 ：505、1292、1385、1583、和 1630cm-1。
多晶型物 B 还通过一个以上在固态 13C-NMR 中的以下峰位来表征。
表 6- 多晶型物 B 的固态 13C-NMR
峰位 (ppm) 174.4 164.7 150.3 139.1133.9 132.8 123.5 120.3 114.0 112.6 19.8 16.6 优选的是，在上述表格中多晶型物 B 通过一个以上峰位、优选 2 至 6 个、更优选 3 至 5 个来表征。 最优选的是，多晶型物 B 通过在 150.3、133.9、112.6 和 19.8ppm 的峰 来表征。
在另一具体实施方式中，本发明涉及发明化合物的一种多晶型物，在下述说明 中，该多晶型物被称为多晶型物 C。 用于制备多晶型物 C 的方法将在实验部分给出。
多晶型物 C 是一种晶状多晶型物，并且因此可通过其粉末 x- 射线衍射图形 (XRPD) 的一个以上的峰来表征。 衍射图形用 Cu-Kα 辐射来记录并且在如下表格中给 出。
表 7- 多晶型物 C 的 XRPD
峰位 (° 2θ) 4.9 7.3 9.5 9.9 10.3 13.3相对强度 (％ ) 100 22 13 8 10 6115CN 102015696 A CN 102015706 A说13.8 14.5 17.2 18.0 19.1 19.9 20.7 21.9 22.6 23.4 24.0 24.6 24.9 25.3 25.8 26.7 27.2 27.6 28.4 28.8 29.3明6 13 8 19 34 13 19 5 21 11 44 16 31 24 8 25 16 8 23 9 11书12/30 页16CN 102015696 A CN 102015706 A说29.9 30.5 31.8 32.8 33.9 34.6 35.4 35.8 36.6 37.6 38.2 38.7明5 5 8 8 6 5 5 5 5 5 3 6书13/30 页优选多晶型物 C 通过在约 5 ～ 25° /2θ 的范围内 (XRPDs 的高特征区域 ) 的 一个以上的上述峰来表征。 更优选的是，多晶型物 C 通过在约 5 ～ 25° /2θ 范围内的 2 ～ 10 个峰、更优选 3 ～ 5 个峰来表征。 甚至更优选的是，多晶型物 C 通过 4.9、7.3、 13.3、19.1、21.9、23.4、和 24.0° /2θ 的信号来表征。 甚至更优选的是，多晶型物 C 通 过 4.9、13.3、19.1、和 24.0° /2θ 的信号来表征。
此外，多晶型物 B 还可通过显示差示扫描量热法 (DSC) 温谱图中在 203℃下的 放热曲线来表征。
多晶型物 C 还通过一个以上的如下傅里叶变换拉曼 (FT-Raman) 峰位来进行表 征。
表 8- 多晶型物 C 的拉曼光谱
峰位 (cm-1) 143 214相对强度 (％ ) 38 1917CN 102015696 A CN 102015706 A说237 253 282 299 339 370 401 418 444 465 507 530 667 710 739 810 972 1003 1061 1147 1244明书14 17 14 13 30 20 13 14 10 12 40 15 13 14 11 41 11 14 20 21 4214/30 页18CN 102015696 A CN 102015706 A说1281 1317 1352 1387 1406 1450 1483 1506 1537 1585 1630 2918明书34 36 36 55 45 30 22 24 42 100 59 1515/30 页优选的是，在上述表格中多晶型物 C 通过一个以上峰位、优选 2 至 6 个、更优 选 3 至 5 个来表征。 更优选的是，多晶型物 C 通过一个以上如下位置的峰来表征 ：143、 507、810、1244、1281、1317、1352、1387、1406、1537、1585、 和 1630cm-1。 更 优 选的是，多晶型物 C 通过一个以上如下位置的峰来表征 ：1387、1406、1537、1585、和 1630cm-1。
多晶型物 C 还通过一个以上在固态 13C-ssNMR 中的以下峰位来进行表征。
表 9- 多晶型物 C 的固态 13C-NMR
峰位 (ppm) 173.9 165.0 150.7 141.0138.6 133.5 122.8 120.3 114.0 112.4 41.1 20.2 17.9 优选的是，在上述表格中多晶型物 C 通过一个以上峰位、优选 2 至 6 个、更优 选 3 至 5 个来表征。 最优选的是，多晶型物 C 通过在 150.7、114.0、和 20.2ppm 的峰来 表征。
在另一具体实施方式中，本发明涉及发明化合物的一种多晶型物，在下述说明 中，该多晶型物被称为多晶型物 D。 用于制备多晶型物 D 的方法将在实验部分给出。
多晶型物 D 是一种晶状多晶型物，并且因此可通过其粉末 X- 射线衍射图形 (XRPD) 的一个以上的峰来表征。 衍射图形用 Cu-Kα 辐射来记录并且在如下表格中给 出。
表 10- 多晶型物 D 的 XRPD
峰位 (° 2θ) 11.6 12.3 20.0 20.7 21.4相对强度 (％ ) 21 23 43 100 6920CN 102015696 A CN 102015706 A说23.8 24.8 26.6 27.4 28.0 29.1 31.1 32.0 33.3 35.0 36.0明书25 26 11 12 12 31 56 20 39 23 3517/30 页优选的是，多晶型物 D 通过在约 5 ～ 25° /2θ 的范围内 (XRPDs 的高特征区 域 ) 的一个以上的上述峰来表征。 更优选的是，多晶型物 D 通过在约 5 ～ 25° /2θ 范围 内的 2 ～ 10 个峰、更优选 3 ～ 5 个峰来表征。 甚至更优选的是，多晶型物 D 通过 11.6、 12.3、20.0、20.7、21.4、和 24.8° /2θ 的信号来表征。 最优选的是，多晶型物 D 通过 12.3、20.0、20.7、和 21.4° /2θ 的信号来表征。
在另一具体实施方式中，本发明涉及发明化合物的一种多晶型物，在下述说明 中，该多晶型物被称为多晶型物 E。 用于制备多晶型物 E 的方法将在实验部分给出。
多晶型物 E 是一种晶状多晶型物，并且因此可通过其粉末 X- 射线衍射图形 (XRPD) 的一个以上的峰来表征。 衍射图形用 Cu-Kα 辐射来记录并且在如下表格中给 出。
表 11- 多晶型物 E 的 XRPD
峰位 (° 2θ) 相对强度 (％ ) 4.5 5.4 8 3421CN 102015696 A CN 102015706 A说6.2 6.9 7.8 8.4 9.8 10.8 11.2 11.5 12.2 12.4 13.8 14.6 15.6 16.2 17.1 17.6 18.7 19.8 20.1 21.7 22.6明36 4 52 3 100 89 69 11 87 31 22 44 16 4 5 15 30 48 37 8 21书18/30 页22CN 102015696 A CN 102015706 A说22.9 24.0 24.5 25.1 26.0 27.3 28.8 30.6 31.5 32.7 33.5 34.1 35.8 36.9 39.2明26 16 30 16 81 68 13 9 11 8 20 21 8 9 7书19/30 页优选的是，多晶型物 E 通过在约 5 ～ 25° /2θ 的范围内 (XRPDs 的高特征区域 ) 的一个以上上述峰来表征。 更优选的是，多晶型物 E 通过在约 5 ～ 25° /2θ 范围内的 2 ～ 10 个峰、更优选 3 ～ 5 个峰来表征。 甚至更优选的是，多晶型物 E 通过 7.8、9.8、 12.2、15.6、16.2、17.6、19.8、21.7、22.9 和 24.5° /2θ 的信号来表征。 最优选的是， 多晶型物 E 通过 9.8、11.2、19.8、和 24.5° /2θ 的信号来表征。
多晶型物 E 可通过显示差示扫描量热法 (DSC) 温谱图中在 159℃下的吸热曲线 来进一步表征。 多晶型物 E 可通过显示差示扫描量热法 (DSC) 温谱图中在 243℃下的放 热曲线来更进一步表征。
多晶型物 E 还通过一个以上的如下傅里叶变换拉曼 (FT-Raman) 峰位来进行表 征。
表 12- 多晶型物 E 的拉曼光谱
23CN 102015696 A CN 102015706 A
说峰位 (cm-1) 127 216 231 260 341 384 461 498 526 712 739 769 816 893 922 972 1005 1022 1057 1174明书相对强度 (％ ) 58 16 17 16 21 20 15 20 14 13 26 10 19 15 19 17 27 45 17 1520/30 页24CN 102015696 A CN 102015706 A说1209 1234 1269 1288 1327 1356 1412 1460 1506 1533 1556 1583 1635 2931明23 31 34 33 35书21/30 页100 35 29 31 52 58 97 79 11优选的是，在上述表格中多晶型物 E 通过一个以上峰位、优选 2 至 6 个、更优 选 3 至 5 个来表征。 更优选的是，多晶型物 E 通过一个以上如下位置的峰来表征 ：127、 1022、1269、1288、1327、1412、1533、1556、1583 和 1635cm-1。 更优选的是，多晶型 物 E 通过一个以上如下位置的峰来表征 ：1356、1533、1556、1583、和 1635cm-1。
多晶型物 E 还通过一个以上在固态 13C-NMR 中的以下峰位来进行表征。
表 13- 多晶型物 E 的固态 13C-NMR
峰位 (ppm) 175.2 164.2158.8 151.8 147.1 145.5 143.4 139.4 136.4 133.6 130.7 127.3 124.8 123.3 118.1 108.3 105.1 19.4 17.6 优选的是，在上述表格中多晶型物 E 通过一个以上峰位、优选 2 至 6 个、更优选 3 至 5 个来表征。 最优选的是，多晶型物 C 通过在 151.8、133.6、105.1、和 19.4ppm 的 峰来表征。
在另一具体实施方式中，本发明涉及发明化合物的一种多晶型物，在下述说明 中，该多晶型物被称为多晶型物 F。 用于制备多晶型物 F 的方法将在实验部分给出。
多晶型物 F 是一种晶状多晶型物，并且因此可通过其粉末 X- 射线衍射图形 (XRPD) 的一个以上的峰来表征。 衍射图谱用 Cu-Kα 辐射来记录并且在如下表格中给 出。
表 14- 多晶型物 F 的 XRPD 峰位 (° 2θ) 相对强度 (％ ) 4.9 6.3 8.2 10.7 11.4 12.6 13.5 14.4 16.4 18.8 20.5 21.5 23.9 24.8 25.4 26.4 27.5 28.5 29.7 62 64 80 81 58 65 59 49 58 55 56 66 58 65 100 46 57 42 4227CN 102015696 A CN 102015706 A说33.2 34.7明33 28书24/30 页优选多晶型物 F 通过在约 5 ～ 25° /2θ 的范围内 (XRPDs 的高特征区域 ) 的一 个以上上述峰来表征。 更优选的是，多晶型物 F 通过在约 5 ～ 25° /2θ 范围内的 2 ～ 10 个峰、更优选 3 ～ 5 个峰来表征。 甚至更优选的是，多晶型物 B 通过 8.2、10.7、12.6、 13.5、16.4 和 25.4° /2θ 的信号来表征。 最更优选的是，多晶型物 F 通过 10.7、12.6、 16.4、和 25.4° /2θ 的信号来表征。
在相互转换实验中可以发现，多晶型物 C、 D、 E 和 F 可转化成多晶型物 A 或 B，即，变体 A 和 B 是动力学 (kinetically) 稳定多晶型物。 此外，发现当包含变体 A 的 晶种的水中浆液经过一段长时间的周期后，多晶型物 B 会转变为多晶型物 A。 因此，多 晶型 A 是热力学稳定多晶型物。
特别是，在室温下或在 60℃下真空干燥多晶型物 C 会产生多晶型物 B，并且在 室温或在真空下干燥多晶型物 E 会产生多晶型物 A。
在假定变体 A 和 B 各自是热力学稳定和动力学稳定的情况下，它们的特点特别 是在于良好的贮存稳定性。 多晶型物的贮存稳定性在此处被定义为在 30％相对湿度和 25℃的贮藏条件下经过 3 个月时间，而没有发生从一种多晶型变体变为另一种变体的重 排。 因此，在上述指定条件下贮藏时，涉及多晶型变体的物理参数例如 XRPD、拉曼光 谱和差示扫描量热法 (DSC) 差示热分析图不会改变。
此外，这些多晶型物还将呈现出稳定的溶解性能，因为这些性能取决于上述所 定义的多晶型物的贮存稳定性。 因此，变体 A 和 B，其特征还在于，它们在贮藏时的溶 解曲线将不会发生改变。 溶解曲线没有改变在此处被定义为 ：在根据美国药典桨式试验 法 (USP Paddle Test Method)( 美国药典，第 30 版 ；国家药典第 25 版，2007 年 ；美国药 典委员会，Rockville，第 1 卷，第 711 章 ) 的试验条件下，在 25℃和 60％的相对湿度下经 过至少 3 个月时间贮藏后，在直到 80％的多晶型物已经溶解的时间期间的变化量为 10％ 以下，优选 5％以下，并且最优选 1％以下。
本发明的多晶型物可用作药物制剂例如药片、胶囊或注射剂中的活性药物成 分，可以与或者不与一种以上如下药学可接受的添加剂相结合 ：例如糖、淀粉、淀粉衍 生物、纤维素、纤维素衍生物、脱模剂、抗粘剂 (anti-adhesive agents) 以及用于调节流动 性的试剂。
对于包含多晶型物 A 的药物制剂，本发明还涉及一种药物组合物，其特征在 于，该组合物包含 5-[3-(2，5- 二氯 -4，6- 二甲基 -1- 氧吡啶 -3- 基 )-[1，2，4] 噁二 唑 -5- 基 ]-3- 硝基苯 -1，2- 二醇，并且该组合物的 X 射线粉末衍射呈现出一个以上如 下所列的 2θ 角 ：6.6、6.9、11.8、13.2、17.2、17.9、19.8、22.6、23.2、23.8、24.3、和 25.3，优选 1 至 6 个，更优选 2 至 4 个，并且最优选 3 个。 优选的是，所述制剂通过具有 一个以上如下多晶型物 A 特征峰的 XRPD 来表征 ：6.6、23.2 和 24.3。
此外，所述药物组合物进一步的特征是，其拉曼光谱呈现出如下所列峰 [cm-1] 中 的 至 少 一 个 峰 ：145、170、216、237、256、285、339、370、420、442、465、505、
526、710、810、974、1007、1059、1159、1228、1254、1277、1325、1387、1414、 1448、1498、1537、1589、1628、2927，优选 1 至 6 个，更优选 2 至 4 个，并且最优选 3 个。
此外，所述药物组合物进一步的特征还在于，其固态 13C-NMR 波谱 (100MHz) 呈现出如下所列峰 [ppm] 中的至少一个峰 ：174.0、163.9、150.4、148.8、144.5、140.2、 134.8、133.2、129.8、124.9、124.0、122.1、114.6、22.5、和 15.7，优选 1 至 6 个，更优 选 2 至 4 个，并且最优选 3 个。
包含多晶型物 A 的药物制剂在差示扫描量热法 (DSC) 温谱图中还可在 251℃处 出现放热曲线。
在另一可选具体实施方式中，对于包含多晶型物 B 的药物制剂，本发明涉及一 种药物组合物，其特征在于，该组合物包含 5-[3-(2，5- 二氯 -4，6- 二甲基 -1- 氧吡 啶 -3- 基 )-[1，2，4] 噁二唑 -5- 基 ]-3- 硝基苯 -1，2- 二醇，并且该组合物的 X 射线粉 末衍射图呈现出选自如下所列 2θ 角中的一个以上 2θ 角 ：5.7、6.9、8.0、9.8、11.3、 11.9、13.8、14.4、16.9、19.6、和 20.4，优选 1 至 6 个，更优选 2 至 4 个，并最优选 3 个。 优选的是，所述制剂通过具有一个以上多晶型物 B 的特征峰的 XRPD 来表征 ：5.7、16.9 和 19.6。
此外，所述药物组合物进一步特征在于，该组合物的拉曼光谱呈现出如下所列 -1 峰 [cm ] 中至少一个峰 ：141、214、235、253、280、339、361、372、399、415、440、 463、505、526、710、812、887、926、970、1001、1059、1157、1227、1292、1317、 1385、1406、1444、1504、1537、1583、1630、和 2933，优选 1 至 6 个，更优选 2 至 4 个，并最优选 3 个。
此外，所述药物组合物进一步的特征还在于，该组合物的固态 13C-NMR 波谱 (100MHz) 呈现出如下所列峰 [ppm] 中至少一个 ：174.4、164.7、150.3、139.1、133.9、 132.8、123.5、120.3、114.0、112.6、19.8、和 16.6，优选 1 至 6 个，更优选 2 至 4 个，并 且最优选 3 个。
包含多晶型物 B 的药物制剂还在差示扫描量热法 (DSC) 温谱图中在 237℃处出 现放热曲线。
在另一可选具体实施方式中，对于包含多晶型物 C 的药物制剂，本发明涉及一 种药物组合物，其特征在于，该组合物包含 5-[3-(2，5- 二氯 -4，6- 二甲基 -1- 氧吡 啶 -3- 基 )-[1，2，4] 噁二唑 -5- 基 ]-3- 硝基苯 -1，2- 二醇，并且该组合物的 X 射线粉 末衍射图呈现出选自如下所列 2θ 角中的一个以上 2θ 角 ：4.9、7.3、9.5、9.9、10.3、 13.3、13.8、14.5、17.2、18.0、19.1、19.9、20.7、21.9、22.6、23.4、24.0、24.6、24.9、 和 25.3，优选 1 至 6 个，更优选 2 至 4 个，并最优选 3 个。 优选的是，所述制剂的特征 在于具有一个以上多晶型物 C 的特征峰的 XRPD ：7.3、19.1、21.9 和 23.4。
此外，所述药物组合物进一步的特征在于，该组合物的拉曼光谱呈现出如下所 列 峰 [cm-1] 中 至 少 一 个 峰 ：143、214、237、253、282、299、339、370、401、418、 444、465、507、530、667、710、739、810、972、1003、1061、1147、1244、1281、 1317、1352、1387、1406、1450、1483、1506、1537、1585、1630、和 2918，优选 1 至 6 个，更优选 2 至 4 个，并最优选 3 个。此外，所述药物组合物进一步特征还在于，该组合物的固态 13C-NMR 波谱 (100MHz) 呈现出如下所列峰 [ppm] 中至少一个 ：173.9、165.0、150.7、141.0、138.6、 133.5、122.8、120.3、114.0、112.4、41.1、20.2、和 17.9，优选 1 至 6 个，更优选 2 至 4 个，并且最优选 3 个。
包含多晶型物 C 的药物制剂还在差示扫描量热法 (DSC) 温谱图中在 203℃处出 现放热曲线。
在另一可选具体实施方式中，对于包含多晶型物 D 的药物制剂，本发明涉及一 种药物组合物，其特征在于，该组合物包含 5-[3-(2，5- 二氯 -4，6- 二甲基 -1- 氧吡 啶 -3- 基 )-[1，2，4] 噁二唑 -5- 基 ]-3- 硝基苯 -1，2- 二醇，并且该组合物的 X 射线粉末 衍射图呈现出选自如下所列 2θ 角中的一个以上 2θ 角 ：11.6、12.3、20.0、20.7、21.4、 23.8、24.8、26.6、27.4、28.0、29.1、31.1、32.0、33.3、35.0、和 36.0，优选 2 至 10 个， 更优选 3 至 5 个，并最优选 4 个。
在另一可选具体实施方式中，对于包含多晶型物 E 的药物制剂，本发明涉及一 种药物组合物，其特征在于，该组合物包含 5-[3-(2，5- 二氯 -4，6- 二甲基 -1- 氧吡 啶 -3- 基 )-[1，2，4] 噁二唑 -5- 基 ]-3- 硝基苯 -1，2- 二醇，并且该组合物的 X 射线粉末 衍射图呈现出选自如下所列 2θ 角中的一个以上 2θ 角 ：4.5、5.4、6.2、6.9、7.8、8.4、 9.8、10.8、11.2、11.5、12.2、12.4、13.8、14.6、15.6、16.2、17.1、17.6、18.7、19.8、 20.1、21.7、22.6、22.9、24.0、24.5、25.1、26.0、27.3、28 .8、30.6、31.5、32.7、33.5、 34.1、35.8、36.9、和 39.2，优选 1 至 6 个，更优选 2 至 4 个，并最优选 3 个。 优选的 是，所述制剂的特征在于具有一个以上多晶型物 E 的特征峰的 XRPD ：7.8、15.6、16.2、 17.6、21.7 和 22.9。
此外，所述药物组合物进一步的特征在于，该组合物的拉曼光谱呈现出如下所 列 峰 [cm-1] 中 至 少 一 个 峰 ：127、216、231、260、341、384、461、498、526、712、 739 、 769 、 816 、 893 、 922 、 972 、 1005 、 1022 、 1057 、 1174 、 1209 、 1234 、 1269 、 1288、1327、1356、1412、1460、1506、1533、1556、1583、1635、和 2931，优选 1 至 6 个，更优选 2 至 4 个，并最优选 3 个。
此外，所述药物组合物进一步的特征还在于，该组合物的固态 13C-NMR 波谱 (100MHz) 呈现出如下所列峰 [ppm] 中至少一个 ：175.2、164.2、158.8、151.8、147.1、 145 . 5 、 143 . 4 、 139 . 4 、 136 . 4 、 133 . 6 、 130 . 7 、 127 . 3 、 124 . 8 、 123 . 3 、 118 . 1 、 108 . 3 、 105.1、19.4、和 17.6，优选 2 至 10 个，更优选 3 至 5 个，并且最优选 4 个。
包含多晶型物 E 的药物制剂还在差示扫描量热法 (DSC) 温谱图中在 243℃处出 现放热曲线。
在另一可选具体实施方式中，对于包含多晶型物 F 的药物制剂，本发明涉及一 种药物组合物，其特征在于，该组合物包含 5-[3-(2，5- 二氯 -4，6- 二甲基 -1- 氧吡 啶 -3- 基 )-[1，2，4] 噁二唑 -5- 基 ]-3- 硝基苯 -1，2- 二醇，并且该组合物的 X 射线粉 末衍射图呈现出选自如下所列 2θ 角中的一个以上 2θ 角 ：4.9、6.3、8.2、10.7、11.4、 12.6、13.5、14.4、16.4、18.8、20.5、21.5、23.9、24.8、25.4、26.4、27.5、28.5、29.7、 33.2、和 34.7，优选 2 至 10 个，更优选 3 至 5 个，并最优选 4 个。 优选的是，所述制剂 的特征在于具有一个以上多晶型物 F 的特征峰的 XRPD ：8.2、12.6、13.5、和 16.4。当通过本领域技术人员适当地制定配方时，多晶型物的物理性能反映在药物制 剂中。 因此，包含稳定的多晶型物 A 和 / 或 B 的药物制剂也将是存储稳定的。 因此， 包含变体 A 和 B 的药物制剂进一步的特征在于，它们不会因贮藏而导致其溶解曲线发生 改变。 溶解曲线不发生改变在此处被定义为 ：在根据美国药典桨式试验法 (USP Paddle Test Method)( 美 国 药 典， 第 30 版 ；国 家 药 典 第 25 版，2007 年 ；美 国 药 典 委 员 会， Rockville，第 1 卷，第 711 章 ) 的试验条件下，在 25℃和 60％的相对湿度下贮藏至少 3 个 月时间后，直到 80％的活性药物成分已经被释放所用时间的变化量很小，为 10％以下， 优选 5％以下，并且最优选 1％以下。
此外，变体 A 和 B 的稳定性可用于将亚稳定的例如变体 C 至 F 转换为更稳定的 变体 A 或 B。 而且，由于变体 A 和 B 的稳定性，亚稳定变体的混合物可转变为多态纯变 体 A 和 B，例如，通过将变体 A 或 B 作为晶种加入这种混合物的浆液。 变体 B 也可变为 变体 A，例如，通过将变体 A 的晶体作为晶种加入变体 B 的浆液。
特别优选的是，将比变体 A 不稳定的变体例如无定形的、亚稳定的、多晶型掺 杂的变体转换为热力学最稳定的变体 A。 最优选用于进行如此转变的方法是，将变体 A 的晶体加作为晶种加入这些变体或变体混合物。 另一个优选的用于实现转变的方法为 ： 溶解所述变体，然后将变体 A 的晶体作为晶种加入。
试验部分
用于制备多晶型物 A 的方法 ：
将 245kg 甲酸和 10kg5-[3-(2，5- 二氯 -4，6- 二甲基 -1- 氧吡啶 -3- 基 )-[1，2， 4] 噁二唑 -5- 基 ]-3- 硝基苯 -1，2- 二醇装入 1600L 的反应器中。将混合物加热至 70-75℃ 直至固体溶解。 然后将热溶液过滤至一个 250L 的反应器中，然后冷却至 25-35℃。 混合 物在 50℃下施加真空进行蒸馏直至剩余 50-70 升。 将 160kg 异丙醇倒入此混合物中。 混 合物冷却至 5-10℃，并且搅拌 10 小时。 然后离心悬浊液，并用 13kg 异丙醇冲洗。 将湿 物料从离心机中取出，并在真空盘式干燥机中干燥。 取样后，干燥物料重量为 8.995kg。 多晶型物 A 的产量为 9.395kg，93.9％。
用于制备多晶型物 B 的方法 ：
将 161.6mg 的 5-[3-(2，5- 二 氯 -4，6- 二 甲 基 -1- 氧 吡 啶 -3- 基 )-[1，2，4] 噁二唑 -5- 基 ]-3- 硝基苯 -1，2- 二醇加入玻璃瓶中。 加入甲酸 (2.0mL) 并将样品油浴 加热至 73℃。 所得混合物经过 0.2μm 尼龙过滤器在室温下过滤入干净的瓶中。 经由水 (2.0mL) 的加入沉淀出多晶型物 B 的固体并通过过滤收集。
用于制备多晶型物 C 的方法 ：
将 161.0mg 的 5-[3-(2，5- 二氯 -4，6- 二甲基 -1- 氧吡啶 -3- 基 )-[1，2，4] 噁 二唑 -5- 基 ]-3- 硝基苯 -1，2- 二醇加入玻璃瓶中，并溶解在 DMSO(4.0mL) 中。 溶液 经由 0.2μm 尼龙过滤器过滤入干净的瓶中，并在设置为 50℃的离心蒸发器中真空蒸发至 干燥，从而产出多晶型物 C。
用于制备多晶型物 D 的方法 ：
在 1 ∶ 1 的二噁烷∶水混合物 (1.0mL) 中生成 5-[3-(2，5- 二氯 -4，6- 二甲 基 -1- 氧吡啶 -3- 基 )-[1，2，4] 噁二唑 -5- 基 ]-3- 硝基苯 -1，2- 二醇的饱和溶液。 所 得混合物经由 0.2μm 尼龙过滤器过滤入干净的瓶中，并在环境条件下蒸发至干燥，从而产出多晶型物 D。
用于制备多晶型物 E 的方法 ：
将 151.2mg 的 5-[3-(2，5- 二氯 -4，6- 二甲基 -1- 氧吡啶 -3- 基 )-[1，2，4] 噁 二唑 -5- 基 ]-3- 硝基苯 -1，2- 二醇加入玻璃瓶中，并溶解在吡啶 (3.0mL) 中。 溶液经 由 0.2μm 尼龙过滤器过滤入干净的瓶中，并在氮气保护下蒸发至干燥，从而产出多晶型 物 E。
用于制备多晶型物 F 的方法 ：
在 DMSO(0.500mL) 中 生 成 5-[3-(2，5- 二 氯 -4，6- 二 甲 基 -1- 氧 吡 啶 -3- 基 )-[1，2，4] 噁二唑 -5- 基 ]-3- 硝基苯 -1，2- 二醇的饱和溶液。 所得混合物经 过 0.2μm 尼龙过滤器在室温下过滤入干净的瓶中。 将大约 60μL 的此溶液分送入毛细管 内。在室温下将毛细管放入离心蒸发器，并且在减压条件下除去溶剂，产出多晶型物 F。
用以下仪器进行分析 ：
1.PANalytical X′ Pert Pro X- 射线衍射仪
使用 PANalytical 多功能 X 射线衍射仪 (PANalytical X′ Pert Pro diffractometer) 分 析多晶型物 A、C 和 E 的样品。使用采用 Optix 长细焦辐射源 (Optix long fine-focus source) 产生的 Cu 放射线来分析样品。 使用椭圆多层镜 (elliptically graded multilayer mirror) 来 聚焦 Cu Kα 的 X 射线源穿过样品并聚焦在检测器上。 将样品夹在 3 微米厚薄膜之间， 进行透射几何 (transmission geometry) 学分析，并旋转至最佳定向统计。 光束截捕器和 氦气被用于将空气散射所产生的背景降到最小。 索勒缝隙用于入射和衍射光束，从而将 轴向衍射降到最低。 使用位于距离样品 240mm 处的扫描位置敏感探测器 ( 超能探测仪 (X′ Celerator)) 收集衍射图形。 各衍射图形的数据采集参数显示了上述各图形在附录 (appendix) 数据段中的的图像。 在分析之前，分析硅标样 (NIST 标准参考物质 640c) 从 而校验硅 111 峰的位置。
2. 岛津 XRD-6000 衍射仪
使用采用 Cu Kα 辐射的岛津 XRD-6000 型 X 射线粉末衍射仪分析多晶型物 B 的 样品。 该仪器装有细长的聚焦 X 射线管。 管电压和管电流各自设定为 40kV 和 40mA。 发散狭缝和防发散狭缝设定为 1°，并且接收狭缝设定为 0.15mm。 通过 NaI 闪烁检测器 检测衍射辐射。 使用以 3° / 分钟 (0.4 秒 /0.02°步长 ) 从 2.5° 2θ 至 40° 2θ 的 θ-2θ 连续扫描。 分析硅标从而核对仪器校正。 通过将样品放在铝 / 硅样品架 (sample holder) 上，制备样品用于分析。
3.Bruker D8 Discover 衍射仪
使用 Bruker D-8 Discover 衍射仪和 Bruker′ s 二维衍射仪探测系统 (Bruker′ s General Area Diffraction Detection System)(GADDS，v.4.1.20) 分析多晶型物 D 的样品。 使 用细焦射线管 (40kV，40mA)、多层膜反射镜 (Goebel mirror)、以及 0.5mm 的双孔准直仪 (double-pinhole collimator) 来产生 Cu Kα 辐射的入射束。 将样品填充 3 微米厚薄膜之间 从而形成便携 (portable) 圆盘形样品，并使用透射几何学来分析。 在分析中，扫描入射 束，进入光栅的入射束穿过样品从而优化定向统计。 光束截捕器被用于将来自小角度入 射束的空气散射降到最小。 使用位于距离样品 15cm 处的 HI-STAR 区域探测器收集衍射 图形，并使用 GADDS 处理。 使用 0.04° 2θ 的步长对在衍射图形的 GADDS 图像中的强度进行积分。 被积分的图形显示出衍射强度与 2θ 有关。 在分析之前，分析硅标样从 而校验硅 111 峰的位置。
4.Inel XRG-3000 衍射仪
使用装有具有 120°的 2q 范围内的 CPS( 曲线位置灵敏 ) 检测器的 Inel XRG-3000 衍射仪进行多晶型物 F 的 X 射线粉末衍射 (XRPD) 分析。 使用 Cu-Kα 辐射收集实时 数据。 管电压和管电流各自设定为 40kV 和 30mA。 单色器狭缝设定为间隔 160μm 的 1-5mm(1-5mm by 160μm)。 图形显示了从 2.5 至 40° 2q。 通过将样品填入薄壁玻璃毛 细管来准备样品用于分析。 各毛细管安装在测角计头上，所述测角计头被机动化从而在 数据获取期间进行毛细管的旋转。 分析样品 300 秒。 使用硅参考标样进行仪器校准。
使用 TA Instruments 型 Q2000 量热仪用于多晶型物 A 的 DSC。 样品被置于铝 DSC 盘，精确记录重量并将盘卷边。 样品室在 25℃下平衡并在压缩氮气吹洗下以 10℃ / 分钟加热至 250℃或 300℃的最终温度。 金属铟用作校准标准。 对于所有其他多晶型物， 使用 TA Instruments 型 2920 量热仪进行分析。 样品室在 25℃下平衡并在压缩氮气吹洗下 以 10℃ / 分钟加热至 250℃或 300℃的最终温度。 金属铟用作校准标准。
在 TA Instruments 型 2950 热重分析仪进行 TGA 分析。 加热炉在 25℃下平衡并 在压缩氮气吹洗下以 10℃ / 分钟加热至 300℃或 350℃的最终温度。 镍和 AlumeTM 用作 校准标准。
使用安装在 Leica DMLP 显微镜上的 Linkam 热台 ( 型号 FTIR 600) 进行热台显微 镜法。 使用正交偏振光观察样品。 样品夹在玻片之间并且在加热台时肉眼观察。 使用 美国药典熔点标准校准热台。
使用 1064nm 的激发波长在 FT-Raman 960 光谱仪 (Thermo Nicolet) 来获得傅里 叶变换拉曼 (FT-Raman) 光谱。 大约 0.2 ～ 0.3W 的 Nd:YVO4 激光功率被用于照射样品。 用锗探测器测量拉曼光谱。 通过将材料放入玻璃试管并将试管放在配件中镀金管座内的 位置来准备样品用于分析。 使用 Happ-Genzel 衍射控象法以 4cm-1 的光谱分辨率由 3600 至 100cm-1 收集总共 256 个样品扫描。 使用硫和环己烷进行波长校正。
对 于 13C-ssMAS NMR 波 谱 法， 通 过 将 样 品 装 入 4mm 笔 型 (PENCIL type) 氧 化锆转子来准备样品。 在室温下，使用 VNMR 6.1C(patch a 11205) 作为处理软件在 INOVA-400 上进行采集。 采集参数如下 ：
序列 ：xpolvt1rho1
延迟时间 (Relax.Delay) ：40.000sec
脉宽 ：对于多晶型物 E，2.2usec(90.0deg.) 或 2.2usec(76.2deg)
采样时间 ：0.030sec
谱宽 ：44994.4Hz(447.517ppm)
400 次扫描
2 次空扫
采集点 (Acquired points) ：2700
观察核 (Observed Nucleus) ：C13(100MHz) 去偶核 (Decoupled Nucleus) ：H1(400MHz) SPINAL-64 去偶交叉极化 C13 上的 TRAMP-CP 切线 接触时间 ：5.0ms 扭转速率 ：12000Hz34