7-(4，4-二甲基-3-氨甲基吡咯烷-1-基)取代的新喹啉羧酸衍生物及其制法 技术领域：
本发明涉及具有优良抗菌活性的新氟喹诺酮和萘啶酮甲酸衍生物及其制备方法；涉及含有它们的抗菌剂和饲料添加剂。
背景技术：
喹诺酮类药物从1962年的萘啶酸(nalidixic acid，J.Med.Chem.1962，5，1063)发展到现在已经成为一类广谱、高效、低毒的合成药物。早期的喹诺酮类药物对革兰氏阴性菌有较强的抗菌活性，但对革兰氏阳性菌活性较低，虽然新近上市的喹诺酮类药物如加替沙星(Drug，1999，58(4)：683)等的抗菌活性有所改善，但总体而言，抗革兰氏阳性菌的活性有待进一步增强，同时需要增强对某些特定细菌如肺炎链球菌、肠球菌等的抗菌活性。
有报道(JP05,345,777；Chem.Pharm.Bull.44(7)1376-1386(1996))，7位有(4，4-二甲基-3-氨基-吡咯基)取代的喹喏酮类化合物一定的抗菌活性。
在喹喏酮母环的7-位引入7-氨甲基-5-氮杂螺[2，4]庚烷取代基(CN.1400209，2003-03-05)，具有广谱抗菌活性。抗革兰氏阳性菌的活性明显增强。
我们在吡咯烷的3-位引入氨甲基，4-位引入二甲基，得到了新的喹啉羧酸类化合物，这些化合物不同于以往文献已知的化合物。经过测定这些化合物的药理活性，发现具有意想不到地效果，它们对革兰氏阳性菌，特别是对耐药菌(两株MRSA-耐甲氧西林金葡菌，两株MRSE-耐甲氧西林表皮葡萄球菌)显示强抗菌活性，从而完成了本发明。
发明内容：
本发明提供式(I)化合物或其药物可接受的盐、酯、酰胺、水合物、光学异构体、结晶体。
本发明的化合物，是一种在喹诺酮核7-位上有(4，4-二甲基-3-氨甲基-吡咯烷)取代基的喹诺酮化合物。本发明的化合物与已知对革兰氏阳性菌的活性较弱的喹诺酮抗菌药物相比，具有优越的抗革兰氏阳性菌特别是抗MRSA和MRSE菌活性。本发明的式(I)化合物结构如下：
其中：
A代表CH、CF、CCl、COCH3、CCH3或N
Z代表H、卤素、NH2、CH3；
R1代表C1-C3-烷基、FCH2CH2-、环丙基、氟环丙基或可被卤素单取代至三取代的苯基，或者A和R1一起代表具有C-O-CH2-CH(CH3)-结构的桥；
Y代表H，有或无羟基、卤素或氨基取代的C1-C6-烷基，或5-甲基-2-氧代-1，3-二氧杂环戊-4-烯基甲基、或烷基酰氧甲基；
R2、R3可以是相同的，也可以是不同的，各自代表H，C1-C6-烷基，氨基保护基等，这些氨基保护基有：甲酰基、乙酰基、三氟乙酰基、取代或未取代苯甲酰基、对甲苯磺酰基、甲氧或乙氧或叔丁氧或异丁氧或三氯乙氧羰基、取代或未取代苄氧羰基，烷基酰氧甲基、取代或未取代苄基、三苯甲基、四氢呋喃基、5-甲基-2-氧代-1，3-氧杂环戊-4-烯甲基、α-氨基烷基酰基。
本发明还涉及如上定义的式(I)化合物的制备方法，和含有式(I)化合物作为活性成分的抗菌药物组合物。
本发明涉及的式(I)化合物，在式(I)化合物的吡咯烷部分中，其中取代氨甲基的碳原子是不对称碳原子，因此可以R或S或R和S混合的形式存在，本发明包括所有这些异构体和混合物。
本发明的式(I)化合物可形成药学上可接受的非毒性盐。这些盐包括与无机酸如盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸等的盐，与有机酸如乙酸、三氟乙酸、柠檬酸、马来酸、草酸、琥珀酸、苯甲酸、酒石酸、富马酸、扁桃酸、抗坏血酸或苹果酸盐，以及象丙氨酸、天冬氨酸、赖氨酸等氨基酸盐或与磺酸如甲磺酸、对甲苯磺酸等的盐。也可按常规转化方法制备它们的碱金属盐、碱土金属盐、银盐、钡盐等。
本发明的式(I)化合物的酯类不仅包括取代或未取代的脂肪酯，尤其1-6个碳原子，如甲酯等低烷基酯，而且也包括通过体内的化学水解或酶水解，至少能部分转化为式(I)化合物的酯类，如乙酰氧甲酯，新戊酰氧甲酯、乙氧甲酰氧乙酯、胆碱酯、氨基乙酯(如：二甲氨乙酯或1-哌嗪基乙酯)、5-2，3-二氢化茚基酯、2-苯并[c]呋喃酮基酯和羟烷基酯(如：2-羟乙酯或2，3-二羟丙酯)、5-甲基-2-氧代-1，3-二氧杂环戊-4-烯甲基酯。
本发明的式(I)化合物也可以溶剂化物(如水合物)的形式存在，因此，这些溶剂化物也包括在本发明的化合物之内。
本发明还涉及式(I)化合物的制备方法，本发明的化合物可以采用如下的反应路线1所示的方法制备。
反应路线1：
在以上路线中，Y、R1、R2、R3、Z和A如前述的定义；及X代表卤原子，优选为氟和氯。
根据反应路线，可通过在溶剂存在下并加入适当的碱，或不用溶剂，用过量的式(III)化合物来满足需要，在室温到200℃有或无压力条件下搅拌反应式(II)化合物和式(III)化合物0.5-10小时，来制备式(I)化合物。在此反应中可用游离混合物形式的式(III)化合物或其与如盐酸、氢溴酸或三氟乙酸所形成的盐。
作为上述反应的溶剂，可使用对反应无不良影响的任何溶剂。优选使用乙腈、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、吡啶或六甲基磷酸酰胺。
该反应一般在酸接受体存在下进行。在此情形下，为了提高较贵的起始物式(II)化合物的反应效率，使用过量的反应物式(III)化合物，例如对相对起始物为等摩尔到10倍摩尔量，优越等摩尔量到5倍摩尔量。当使用过量反应物式(III)化合物时，反应后留下的未反应的混合物可回收并重新用于反应。优越用于该反应的酸接受体包括无机碱如碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸钾、氢化钠、氟化钾等，有机碱如三乙胺、二异丙基乙胺、吡啶、N，N-二甲氨吡啶、N，N-二甲氨基苯胺、1，8-二氮杂双环[5，4，0]十一碳-7-烯(DBU)、1，4-二氮杂双环[2，2，2]辛烷(DABCO)等。
常规用于有机化学领域中的并在反应后易于除去的而不分解目标化合物的结构的任何保护基，可用作式(III)化合物中适宜的氨基保护基。可用于此目的物保护基的具体例子包括甲酰基、乙酰基、三氟乙酰基、取代或未取代苯甲酰基、对甲苯磺酰基、甲氧基羰基、乙氧基羰基、异丁氧羰基、叔丁氧羰基、取代或未取代苄氧羰基、取代或未取代苄基、三苯甲基、四氢吡喃基、5-甲基-2-氧代-1，3-氧杂环戊-4-烯甲基、烷酰氧甲基、α-氨基烷基酰基等。
反应完成后，形成的式(I)化合物中存在的氨基保护基，可根据保护基的相关性质，通过水解、溶剂解或还原除去。例如，式(I)化合物在溶剂中在有或无机酸或碱存在下在0-150℃温度下处理脱去保护基。可用于此目的的酸可涉及无机酸如：盐酸、氢溴酸、磷酸等，有机酸如：乙酸、三氟乙酸、甲酸、甲苯磺酸等。或lewis酸如：三溴化硼、氧化铝等。用于该目的的碱，可使用碱金属或碱土金属的氢氧化物，如：氢氧化钠、氢氧化钡等、碱金属碳酸盐如：碳酸钠、碳酸钙等，碱金属醇盐如：甲醇钠、乙醇钠等，或乙酸钠等。反应可在溶剂中进行，例如水或有机溶剂如：乙醇、四氢呋喃、二恶烷、乙二醇、乙酸等，或这种有机溶剂与水的混合物、如需要，该反应还可在无任何溶剂中进行。
另外，当保护基为对甲苯磺酰基、苄基、三苯甲基、对甲氧基苄基、苄氧羰基、对甲氧基苄氧羰基、三氯乙氧羰基、β-碘代乙氧羰基等时，这些基团可通过还原有效地除去。虽然除去保护基的还原反应条件随着相关保护基的性质而变化，但此还原一般用氢气流，在惰性溶剂中，在催化剂如：铂、钯、Raney镍等存在下于10-150℃温度下进行，或用金属钠或金属锂在氨水中于-50℃至-10℃温度下进行。
本发明的式(I)化合物还可通过如下的反应路线2所示的方法制备。
反应路线2：
上述化合物中R代表有或无杂原子取代的2-6个碳原子的脂肪族羧基，或为7-11个碳原子的芳香族羧基，Y、R1、R2、R3、Z和A如前述的定义；及X代表卤原子，优越的为氟和氯。
本发明中式(II)化合物先转化为式(IV)化合物为已知方法，并按现有公开的方法可容易地实现转化(见CN 1059527A)。
通式(V)的化合物可这样制备：
使通式(IV)所表示的化合物与通式(III)表示的化合物进行缩合。
根据反应路线，可通过在溶剂存在下并加入适当的碱，或不用溶剂，用过量的式(III)化合物来满足需要，在室温到200℃有或无压力条件下搅拌反应式(IV)化合物和式(III)化合物0.5-10小时，来制备式(V)化合物。
作为上述反应的溶剂，可使用对反应无不良影响的任何溶剂。优选使用乙腈、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、吡啶或六甲基磷酸酰胺。
该反应一般在酸接受体存在下进行。在此情形下，为了提高较贵的起始物式(IV)化合物的反应效率，使用过量的反应物式(III)化合物，例如对相对起始物为等摩尔到10倍摩尔量，优越等摩尔量到5倍摩尔量。当使用过量反应物式(III)化合物时，反应后留下的未反应的混合物可回收并重新用于反应。优越用于该反应的酸接受体包括无机碱如碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸钾、氢化钠、氟化钾等，有机碱如三乙胺、二异丙基乙胺、吡啶、N，N-二甲氨吡啶、N，N-二甲氨基苯胺、1，8-二氮杂双环[5，4，0]十一碳-7-烯(DBU)、1，4-二氮杂双环[2，2，2]辛烷(DABCO)等。
通式(V)化合物的水解在碱性溶剂中(例如：三乙胺、氨水、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钠、氢氧化钾等在甲醇、乙醇、四氢呋喃、二氧六环或水中的溶液，或在酸性溶液中(例如：三氟乙酸、盐酸、硫酸、醋酸、氢溴酸等在水、醇、四氢呋喃、二氧六环、氯仿、二氯甲烷中的溶液)于0-150℃下反应0.5-10个小时。
常规用于有机化学领域中的并在反应后易于除去的而不分解目标化合物的结构的任何保护基，可用作式(III)化合物中适宜的氨基保护基。可用于此目的物保护基的具体例子包括甲酰基、乙酰基、三氟乙酰基、取代或未取代苯甲酰基、对甲苯磺酰基、甲氧基羰基、乙氧基羰基、异丁氧羰基、叔丁氧羰基、取代或未取代苄氧羰基、取代或未取代苄基、三苯甲基、四氢吡喃基、5-甲基-2-氧代-1，3-氧杂环戊-4-烯甲基、烷酰氧甲基、α-氨基烷基酰基等。
反应完成后，形成的式(I)化合物中若存在有氨基保护基，可根据保护基的相关性质，通过水解、溶剂解或还原除去。例如，式(V)化合物在溶剂中在有机酸或无机酸或碱存在下在0-150℃温度下处理脱去保护基。可用于此目的的酸可涉及无机酸如：盐酸、氢溴酸、磷酸等，有机酸如：乙酸、三氟乙酸、甲酸、甲苯磺酸等。或lewis酸如：三溴化硼、氧化铝等。用于该目的的碱，可使用碱金属或碱土金属的氢氧化物，如：氢氧化钠、氢氧化钡等、碱金属碳酸盐如：碳酸钠、碳酸钙等，碱金属醇盐如：甲醇钠、乙醇钠等，或乙酸钠等。反应可在溶剂中进行，例如水或有机溶剂如：乙醇、四氢呋喃、二恶烷、乙二醇、乙酸等，或这种有机溶剂与水的混合物、如需要，该反应还可在无任何溶剂中进行。
另外，当保护基为对甲苯磺酰基、苄基、三苯甲基、对甲氧基苄基、苄氧基羰基、对甲氧基苄氧基羰基、三氯乙氧基羰基、β-碘代乙氧基羰基等时，这些基团可通过还原有效地除去。虽然除去保护基的还原反应条件随着相关保护基的性质而变化，但此还原一般用氢气流，在惰性溶剂中，在催化剂如铂钯Raney镍等存在下于10-150℃温度下进行，或用金属钠或金属锂在氨水中于-50℃至-10℃温度下进行。
在本发明中用作起始物的式(II)化合物为已知化合物，并按现有出版物中已知的方法可容易地制得(例如：L.A.Mitscher等，J.Med.Chem.30，2283(1987)；J.M.Domagala等，J.Med.Chem.31，503(1988)；D.T.W.Chu等，J.Med.Chem.29，2633(1986)；J.M.Domagala等，J.Med.Chem.34，1142(1991)；D.Bouzard等，J.Med.Chem.35，518(1992)；J.M.Domagala等，J.Med.Chem.31，991(1988))。
按照下述反应路线3所示的方法，可制备本发明的另一起始物的式(III)化合物。
反应路线3：
P代表氨基保护基。其保护基的定义如上所述。
本发明还提供含有式(I)化合物，或其药物可接受的盐、酯、酰胺、水合物、光学异构体、结晶体作为活性成分的抗菌组合物。当这种抗菌组合物用于临床目的时，可通过其与药学上可接受的惰性载体结合将其配制成口服、非胃肠使用或局部使用的固体、半固体或液体药物制剂。可用于该目的的药学上可接受的惰性载体可为固态或液态。可制备粉剂、片剂、可分散粉剂、胶囊剂、栓剂、和胶膏形式的固体或半固体药物制剂，在此情况下通常使用固态载体。可使用的固体载体优选为稀释剂、调味剂、增溶剂、润滑剂、悬浮剂、粘合剂、膨胀剂等中的一种或多种物质，或可为包封物质。在粉状制剂中，在载体中含有5％-70％的微粒化活性成分。适宜的固体载体的具体实例包括碳酸镁、硬脂酸镁，滑石粉、蔗糖、乳糖、果胶、糊精、淀粉、明胶、黄嗜胶，甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、低沸点蜡、可可脂等、由于它们易于给药、片剂、粉剂、胶囊剂代表最有利吸收的口服固体制剂。
液体制剂包括溶液、悬浮液和乳液。例如非肠胃道给药的可注射制剂可为水或水与丙二醇溶液形式，调节其等渗度，pH等适于活体的生理条件。液体制剂还可制成聚乙二醇水溶液中形式。可通过将活性成分溶溶解在水中，再加入适当的着色剂、调味剂、稳定剂和增稠剂，来制备口服水溶液。可将微粒化的活性成分分散在粘性物质如天然或合成胶、甲基纤维素、酸甲基纤维素钠和其它已知悬浮剂中制备使用于口服的水悬浮液。
为了易于给药及剂量均一，将上述药物制剂配制成剂量单位形式是特别有利的。制剂的剂量单位形式指适于作为单一剂量的物理分离单位，每个单位含有产生所期望的治疗效果的计算好的预定量的活性成分。这种剂量单位形式可为包装形式，如片剂、胶囊或装在小管或小瓶中的粉剂，或装在管或瓶中的软膏、凝胶或霜剂。
虽然剂量单位形式中所含活性成分的量可以变化，但一般根据所选择活性成分的效力，调节在1-500mg范围内。
当本发明的式(I)活性化合物用作治疗细菌感染的药物时，优选在第一阶段给以的6-14mg/kg体重的量。但给药剂量可随着病人的需要、欲治疗的感染的严重性、所选化合物等而变化。
本领域技术人员可按常规方法确定适于某种情况的优选剂量。一般，开始治疗的量低于活性成分的最佳剂量，然后逐渐增加给药剂量，直到达到最佳治疗效果。为方便起见，总的日剂量可分为几部分，分数次给药。
如上所述，本发明化合物对革兰氏阳性菌株特别是耐药菌的抗菌活性远高于已知抗菌剂的活性。
为了突出本专利化合物的实际应用价值与意义，将其中的实施例十八、二十与同类化合物中最新上市的加替沙星(由浙江新昌京新制药厂提供，批号020716)，以及一直以来广泛使用并占有很大市场份额的环丙沙星(由天津中央制药厂提供，批号020307)。最低抑菌浓度如下法测定：按两倍稀释法稀释试验的化合物，然后将其分散在pH调至8.0，并经高压灭菌的DIFCO培养基中，接种菌液后，于37℃培养18小时，观察记录抑制细菌生长的最低浓度(MIC)。测定结果列入表1中。
表1 实验细菌 MIC(mg/L) 实施例化合物 对照药 十八 二十 环丙沙星 加替沙星 金葡菌MRSA 03-1 0.125 0.03 0.125 0.125 金葡菌MRSA 03-19 0.125 0.015 0.125 0.06 肠球菌30428 2 0.5 16 16 表葡菌03-10 0.25 0.06 2 1 表葡菌MRSE 03-2 2 0.125 16 4 表葡菌MRSE 03-32 0.5 0.5 2 1
活性测定使用平皿二倍稀释法，培养基为MH(DIFCO)培养基，实验所用菌株均为2002-2003年从四川、北京地区收集的临床分离致病菌，所用菌种在收集分离的单位(华西医科大学检验科、重庆医科大学传染科及北京医院细菌室)均经自动细菌检测仪鉴定后，再经四川抗菌素工业研究所用API系统重新鉴定后使用。
药代动力学性能方面，与已知的喹诺酮化合物相比，本发明化合物具有适宜的水溶性，因此在体内能够被良好地吸收，表现非常高的生物利用度，适宜用作抗菌剂。
另外，因为本发明化合物的毒性低疗效高，它可有效地用于预防和治疗恒温动物包括人类中由细菌感染所引起的疾病。
具体实施方式：
在下列实施例中，将更具体地解释本发明。但应理解，下列实施例旨在说明本发明而不对本发明的范围构成任何限制。
实施例一 1-苄基-3，3-二甲基-2，4-二氧代吡咯烷
在配有干燥管和机械搅拌的1000ml三口瓶中，加入干燥的DMF(300ml)，乙酰乙酸乙酯(130g，1mol)，搅拌下加入无水碳酸钾(286g，2.2mol)，冰浴下滴加碘甲烷(390g，2.8mol)。完毕，室温搅拌反应7天。滤去固体，并用二氯甲烷(约100ml)洗涤固体，滤液加水(500ml)，用二氯甲烷(约100ml×3)萃取，合并有机层，水洗三次，无水硫酸镁干燥，过滤，蒸除溶剂至干，得浅黄色油状物(125g，收率79.0％)。
在500ml三口瓶中，加入化合物上述油状物(77g，0.487mol)，无水乙醇(180ml)，冰浴下滴加溴素(77g，0.481mol)，完毕，室温搅拌反应2hr，减压蒸除约一半的溶剂，加水(200ml)，用二氯甲烷(约100ml×3)萃取，合并有机层，水洗三次，无水硫酸镁干燥，过滤，蒸除溶剂至干。
在上述残留物中加无水乙醇(160ml)，于冰浴下滴加苄胺(98g，0.92mol)。完毕，于室温反应20hr，薄层跟踪反应。减压蒸除溶剂，残留物溶于二氯甲烷(300ml)中，用1N盐酸洗涤两次，水洗至中性，无水硫酸镁干燥，过滤，蒸除溶剂得粗品(90g)。
将此粗品溶于二氯甲烷(200ml)中，加粗硅胶(90g)，减压蒸干，以乙酸乙酯和石油醚为梯度洗脱溶剂，用VLC柱层析分离，得产物，淡黄色固体(50.0g，47.6％)。
1HNMR(CDCl3)δppm：1.257(6H，s，3-2×CH3)，3.694(2H，s，5-CH2)，4.626(2H，s，苄基-CH2)，7.225～7.348(5H，m，ArH)
13CNMR(CDCl3)及DEPTδppm：20.523(伯C，2×CH3)，45.805(仲C，5-CH2)，47.124(季C，3-C)，53.588(仲C，苄-CH2)，128.019～128.947(叔C，芳环CH)，135.213(季C，芳环C)，175.550(季C，4-C＝O)，210.399(季C，2-C＝O)
EIMS：217(M+)
实施例二 1-苄基-3，3-二甲基-2-氧代-4-乙氧羰基亚甲基吡咯烷
在干燥的四氢呋喃(150ml)中加入60％的氢化钠(6.5g)，搅拌降温至0℃～-5℃，滴加膦酸三乙酯，完毕，室温搅拌反应1.5hr，反应液呈果冻状，室温滴加化合物实施例一化合物(28.0g，0.129mol)，完毕，室温反应2hr，用乙酸乙酯(300ml)稀释，饱和食盐水洗涤至中性，无水硫酸镁干燥，蒸除溶剂至干得油状产物C-7，(30.95g，83.6％)。
1HNMR(CDCl3)δppm：1.163～1.276(3H，t，乙酯CH3)，1.316(6H，s，3-2×CH3)，4.066～4.135(2H，q，乙酯CH2)，4.342，4.351(2H，d，苄基-CH2)，4.524(2H，s，5-CH2)，5.813～5.829(1H，t，烯＝CH)，7.219～7.346(5H，m，ArH)
EIMS：287(M+)，258(M+-CO-H)，91(C6H5CH2+)
实施例三 1-苄基-3，3-二甲基-2-氧代-4-乙氧羰基甲基吡咯烷
加无水乙醇(700ml)，活性镍及化合物实施例二化合物(30.95g，0.108mol)，于室温，40～50psi氢压下反应12hr，TLC显示反应结束，滤去镍粉，蒸除溶剂至干，得浅黄色油状物(29.3g，94.0％)。
1HNMR(CDCl3)δppm：0.970(3H，s，3-CH3)，1.187(3H，s，3-CH3)，1.187～1.244(3H，t，乙酯CH3，J＝7.8Hz)，2.197～2.253(1H，m，4-CH)，2.403～2.478(2H，m，侧链CH2)，2.789～2.850，3.330～3.387(2H，tt，5-CH2，同碳氢偶合，J＝9Hz)，4.060～4.131(2H，q，乙酯CH2，J＝7.2Hz)，4.297～4.575(2H，dd，苄基-CH2)，7.180～7.314(5H，m，ArH)
EIMS：289(M+)，244(M+-OEt)，114(C6H5N＝CH2)，91(C6H5CH2+)
实施例四 1-苄基-3，3-二甲基-2-氧代-4-羧基甲基吡咯烷
在500ml单口烧瓶中，加化合物施例三化合物(29.3g，0.101mol)，95％乙醇(150ml)，5％氢氧化钠水溶液(150ml)，室温搅拌反应3hr，TLC显示反应结束，减压蒸除部分乙醇，加活性碳脱色，过滤，滤液用10％盐酸调pH小于2，冷却，滤出固体，水层用二氯甲烷萃取，有机层水洗，干燥，蒸除溶剂，共得淡黄色固体(21.6g，81.6％)。
1HNMR(CDCl3)δppm：0.853(3H，s，3-CH3)，1.055(3H，s，3-CH3)，2.150～2.434(2H，m，侧链-CH2)，2.795～2.856(1H，m，5-CH)，3.255～3.337(2H，m，5-CH2及4-CH)，4.282～4.419(2H，dd，苄基-CH2，J＝14.7Hz)，7.161～7.366(5H，m，ArH)
EIMS：261(M+)，91(C6H5CH2+)
实施例五 1-苄基-3，3-二甲基-2-氧代-4-氨甲基吡咯烷
取化合物施例四化合物(8.0g，31mmol)，加丙酮(40ml)和三乙胺(3.9ml)，于0℃～-5℃之间滴加氯甲酸异丁酯(5.2ml)，完毕，反应40min，在此温度下滴加叠氮化钠(4.2g，0.7mol)溶于水(15ml)的溶液，再搅拌30min，加冰水(100ml)，用二甲苯(50ml×4)萃取，合并，水洗三次，无水硫酸镁干燥，过滤。
将此二甲苯溶液常压蒸馏，至内温升至140℃左右，改为回流装置，回流3hr，减压蒸除溶剂，加8N盐酸(60ml)，回流0.5hr，冷却，用苯(20ml×2)萃取弃之，水层用30％氢氧化钠溶液调pH大于10，用二氯甲烷(30ml×4)萃取，合并有机层，饱和食盐水洗两次，无水硫酸镁干燥，过滤，蒸除溶剂，得淡黄色油状物(3.59g，49.9％)。
1HNMR(CDCl3)δppm：0.990(3H，s，3-CH3)，1.227(3H，s，3-CH3)，1.740(bro，NH2加D2O交换消失)，1.986～2.061(1H，m，4-CH)，2.538～2.613(1H，m，5-CH)，2.841～2.925(2H，m，5-CH及侧链-CH)，3.276～3.333(1H，m，侧链-CH)，4.356～4.605(2H，dd，苄基-CH2)，7.192～7.342(5H，m，ArH)
FABMS：233(M++1)，91(C6H5CH2+)
实施例六 1-苄基-4，4-二甲基-3-氨甲基吡咯烷
在干燥的四氢呋喃(25ml)中，加LiAlH4(2.54g，54mmol)，冰浴下滴加化合物施例五化合物(2.59g，11.6mmol)溶于四氢呋喃(10ml)的溶液，完毕加热回流5hr。冷却，依次滴加水(2ml)，15％氢氧化钠水溶液(2ml)，水(6ml)，室温搅拌20min，过滤，蒸除溶剂至干，得淡黄色油状物(2.22g，87.7％)。取少量板层分离分析。
1HNMR(CDCl3)δppm：0.975(3H，s，3-CH3)，0.998(3H，s，3-CH3)，0.852～2.082(5H，m)，3.059～3.107(2H，m，侧链-CH2)，4.075，4.097(2H，d，苄基-CH2)，7.355～7.723(5H，m，ArH)
ESIMS：219(M++1)
实施例七 1-苄基-4，4-二甲基-3-N-叔丁氧羰基氨甲基吡咯烷
取化合物施例六化合物(3.0g，13.7mmol)溶于二氯甲烷(30ml)，加入叔丁氧羰基二碳酸酯(5.56g，32mmol)，室温搅拌反应2hr，然后用水(50ml×3)洗。无水硫酸镁干燥，蒸除溶剂至干。VLC柱层析分离(石油醚、乙酸乙酯为洗脱剂)。得淡黄色油状物(3.9g，89.0％)。
1HNMR(CDCl3)δppm：0.993(3H，s，3-CH3)，1.089(3H，s，3-CH3)，1.433(9H，s，-COC(CH3)3)，1.896～1.940，2.370～3.226(7H，m，3×CH2及4-CH)，3.598(2H，s，苄基-CH2)，7.222～7.331(5H，m，ArH)
ESIMS：319(M++1)
实施例八 4，4-二甲基-3-N-叔丁氧羰基氨甲基吡咯烷
取化合物施例七化合物(6.0g，18.6mmol)，溶于无水乙醇(约100ml)中，加新制备的10％的Pd/C(8.0g)，室温40～50Psi氢压下反应24hr，TLC显示原料消失，滤去Pd/C，浓缩至干，得淡黄色油状物(3.4g，79.8％)。
1HNMR(CDCl3)δppm：0.991(3H，s，3-CH3)，1.086(3H，s，3-CH3)，1.431(9H，s，-COC(CH3)3)，1.890～1.941，2.36δ～3.220(7H，m，3×CH2及4-CH)
ESIMS：229(M++1)
实施例九 4，4-二甲基-3-氨甲基吡咯烷盐酸盐
将实施例八的化合物(2.28g，10mmol)，加入无水HCl的甲醇/乙酸甲酯溶液(10ml)，搅拌0.5hr脱BOC，蒸除溶剂得油状物(1.09g，85.3％)。
1HNMR(CDCl3)δppm：0.995(3H，s，3-CH3)，1.080(3H，s，3-CH3)，1.890～1.941，2.366～3.220(7H，m，3×CH2及4-CH)
ESIMS：129(M++1)
实施例十 1-苄基-3，3-二甲基-4-(N-甲基-N-叔丁氧羰基)氨甲基吡咯烷
在干燥的四氢呋喃(40ml)中，加实施例八化合物(4.0g，12.5mmol)，冰浴滴加碘甲烷(3.55g，25mmol)，室温反应2hr，慢慢加水，二氯甲烷萃取(100ml×3)，水洗有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，蒸除溶剂至干，得淡黄色油状物(3.42g，82.3％)。
1HNMR(CDCl3)δppm：0.976(3H，s，3-CH3)，0.980(3H，s，3-CH3)，0.840～2.009(5H，m)，1.430(9H，s，-COC(CH3)3，2.130(3H，s，-N(CH3)，3.048～3.100(2H，m，侧链-CH2)，4.080，4.077(2H，d，苄基-CH2)，7.345～7.633(5H，m，ArH)
ESIMS：333(M++1)
实施例十一 3，3-二甲基-4-(N-甲基-N-叔丁氧羰基)氨甲基吡咯烷
取实施例十化合物(3.4g，10.2mmol)，溶于无水乙醇(80ml)中，加新制备的10％的Pd/C(4.0g)，室温40～50Psi氢压下反应24hr，TLC显示原料消失，滤去Pd/C，浓缩至干，得淡黄色油状物(0.87g，90.1％)。
1HNMR(CDCl3)δppm：0.980(3H，s，3-CH3)，0.996(3H，s，3-CH3)，0.839～2.105(5H，m)，1.430(9H，s，-COC(CH3)3，2.134(3H，s，-N(CH3)，3.048～3.003(2H，m，侧链-CH2)
ESIMS：243(M++1)
实施例十二 3，3-二甲基-4-甲基氨甲基吡咯烷盐酸盐
将实施例十一的化合物(2.43g，10mmol)，加入无水HCl的甲醇/乙酸甲酯溶液(10ml)，搅拌0.5hr脱BOC，蒸除溶剂得油状物(1.31g，92％)。
1HNMR(CDCl3)δppm：0.990(3H，s，3-CH3)，1.000(3H，s，3-CH3)，0.839～2.105(5H，m)，2.160(3H，s，-N(CH3)，3.048～3.003(2H，m，侧链-CH2)
ESIMS：143(M++1)
实施例十三 1-(2，4-二氟苯基)-6-氟-7-(4，4-二甲基-3-甲基氨甲基吡咯烷-1-基)-1，4-二氢-4-氧代-1，8-萘啶-3-羧酸盐酸盐
方法一：化合物7-氯-1-(2，4-二氟苯基)-6-氟-1，4-二氢-4-氧代-1，8-萘啶-3-羧酸(0.5g，1.40mmol)、DBU(0.43ml，5mmol)与实施例十一的化合物(0.47g，2.1mmol)溶于乙腈(10ml)中，室温反应8h，滤出固体。
将甲醇(10ml)冰浴冷却，往其中缓慢加入乙酰氯(5ml)。该混合物室温搅拌30分钟以制备无水HCl的甲醇/乙酸甲酯溶液，往其中加入上述固体(0.30g，0.56mmol)。反应混合物于室温搅拌30分钟，然后减压浓缩至剩余少量溶剂，降温后加入乙醚(50ml)并快速搅拌使产物固化，充分沉降后过滤，滤饼以乙醇重结晶得类白色固体(0.58g，90.1％)。
1HNMR(CF3COOD)δppm：0.938-1.304(6H，m，4’位2个CH3)，2.517(1H，m，3’-H)，2.940(3H，s，NCH3)，2.700-4.547(6H，m，2’，5’-H and5’-CH2N)，7.122-7.147(2H，m，Ar-H)，7.354-7.501(3H，m，bro，Ar-H，NH2)，8.050，8.082(1H，d，5-H)，9.034(1H，s，2-H)。
MS(ESI m/z)：461(M++1)。
类似地，也可制备下述的盐，例如
1-(2，4-二氟苯基)-6-氟-7-(4，4-二甲基-3-甲基氨甲基吡咯烷-1-基)-1，4-二氢-4-氧代-1，8-萘啶-3-羧酸氢溴酸盐；
1-(2，4-二氟苯基)-6-氟-7-(4，4-二甲基-3-甲基氨甲基吡咯烷-1-基)-1，4-二氢-4-氧代-1，8-萘啶-3-羧酸硫酸盐。
方法二：化合物7-氯-1-(2，4-二氟苯基)-6-氟-1，4-二氢-4-氧代-1，8-萘啶-3-羧酸(0.5g，1.40mmol)、DBU(0.43ml，5mmol)与实施例十二的化合物(0.30g，2.1mmol)溶于乙腈(10ml)中，室温反应8h，滤出固体，然后以80％乙醇重结晶得类白色固体(0.54g，80.3％)，C23H23F3N4O3.H2O C H N计算值57.68 5.36 11.61实测值57.74 5.27 11.71
实施例十四 1-环丙基-6-氟-7-(4，4-二甲基-3-甲基氨甲基吡咯烷-1-基)-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-羧酸三氟乙酸盐
方法一：硼酸(1.50g，24.2mmol)，乙酸酐(8ml，80mmol)，于110°反应1.5hr，稍冷，加入1-环丙基-6-氟7-氯-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-羧酸(5.0g，15mmol)，同温反应6hr，降至室温，倾入冰水中，过滤，乙醇洗，真空干燥，得1-环丙基-6-氟-7-氯-1，4-二氢-4-氧代-3-羧硼二乙酯。由此化合物和实施例十一的化合物在乙腈/DBU中缩合后，直接用5％NaOH水解，用HCl调pH至中性，滤出固体，真空干燥。用三氟乙酸脱BOC，得淡黄色固体，产率76.3％。
1HNMR(300MHz，CF3COOD)δppm：1.064-1.573(10H，m，螺环环丙基两个-CH2，吡咯烷基4’位两个-CH3)，2.553(1H，m，吡咯烷基3’-H)，2.948(3H，s，-NCH3)，3.298-4.270(7H，m，吡咯烷基2’，5’，4’-CH2-，1位环丙基1H)，7.216(1H，8-H)，7.969，8.013(1H，d，5-H)，9.368(1H，s，2-H)。
MS(ESI m/z)：388.7(M++2)。
类似地，也可制备下述的盐，例如
1-环丙基-6-氟-7-(4，4-二甲基-3-甲基氨甲基吡咯烷-1-基)-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-羧酸乙酸盐；
1-环丙基-6-氟-7-(4，4-二甲基-3-甲基氨甲基吡咯烷-1-基)-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-羧酸乳酸盐；
1-环丙基-6-氟-7-(4，4-二甲基-3-甲基氨甲基吡咯烷-1-基)-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-羧酸马来酸盐；
1-环丙基-6-氟-7-(4，4-二甲基-3-甲基氨甲基吡咯烷-1-基)-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-羧酸草酸盐。
方法二：按方法一的方法制备1-环丙基-6-氟-7-氯-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧硼二乙酯后，由此化合物和实施例十二的化合物在乙腈/DBU中缩合后，直接用5％NaOH水解，用HCl调pH至中性，滤出固体，真空干燥得固体，用三氟乙酸成盐，得标题化合物。化合物的特征数据同方法一的产物。
实施例十五 5-氨基-1-环丙基-6-氟-7-(4，4-二甲基-3-甲基氨甲基吡咯烷-1-基)-8-甲氧基-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸盐酸盐
5-氨基-1-环丙基-6，7-二氟-8-甲氧基-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸(0.50g，1.6mmol)以及实施例十一的化合物(0.72g，3.2mmol)溶于吡啶(10.0ml)中，于100℃下反应6h。反应完毕，蒸除溶剂，残余物用无水HCl的甲醇/乙酸甲酯溶液脱BOC，再以乙醇重结晶后得黄色固体产物(45.6％)。
1HNMR(300MHz，CF3COOD)δppm：0.828-1.414(10H，m，螺环环丙基两个-CH2，吡咯烷基4’位两个-CH3)，2.407(1H，m，吡咯烷基3’-H)，2.907(3H，s，-NCH3)，3.562(3H，s，-OCH3)，3.005-4.535(7H，m，吡咯烷基2’，5’，4’-CH2-，1位环丙基1H)，7.069，7.452(bro，-NH)，8.908，9.071(1H，d，2-H)。
MS(ESI m/z)：433.5(M++1)。
实施例十六 1-环丙基-6-氟-7-(4，4-二甲基-3-甲基氨甲基吡咯烷-1-基)-1，4-二氢-4-氧代-1，8-萘啶-3-羧酸盐酸盐
用1-环丙基-6-氟-7-氯-1，4-二氢-4-氧代-1，8-二萘啶-3-羧酸和实施例十一的化合物在吡啶中缩合后，浓缩至干，直接用无水HCl的甲醇/乙酸甲酯溶液脱BOC，得类白色固体，产率80.3％。
1HNMR(300MHz，CF3COOD)δppm：1.056-1.467(10H，m，螺环环丙基两个-CH2，吡咯烷基4’位两个-CH3)，2.505-2.663(1H，m，吡咯烷基3’-H)，2.932(3H，s，-NCH3)，2.663-4.575(7H，m，吡咯烷基2’，5’，4’-CH2-，1位环丙基1H)，7.362-7.879(bro，-NH3+)，7.956，7.993(1H，d，5-H)，9.026(1H，s，2-H)。
MS(ESI m/z)：389.5(M++1)。
实施例十七 1-环丙基-6-氟-7-(4，4-二甲基-3-甲基氨甲基吡咯烷-1-基)-8-甲氧基-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸盐酸盐
硼酸，乙酸酐，于110°反应1.5hr，稍冷，待温度降至80℃，加入1-环丙基-6，7-二氟-1，4-二氢-8-甲氧基-4-氧代-3-喹啉羧酸乙酯，80-100℃搅拌5h。降至室温，将上述反应液缓慢倾入冰-水中，继续搅拌0.5h。过滤，依次用大量水、少量乙醇洗，滤饼于室温真空干燥过夜，得白色固体的1-环丙基-6，7-二氟-1，4-二氢-8-甲氧基-4-氧代-3-喹啉羧硼二乙酯。此化合物与实施例十一溶于吡啶中，于100℃下反应6h。反应完毕，蒸除溶剂，残余物用无水HCl的甲醇/乙酸甲酯溶液脱BOC，浓缩至干，以乙醇重结晶后得土黄色固体产物，53.3％。
1HNMR(300MHz，CF3COOD)δppm：1.093-1.508(10H，m，螺环环丙基两个-CH2，吡咯烷基4’位两个-CH3)，2.480(1H，m，吡咯烷基3’-H)，2.940(3H，s，-NCH3)，3.648(3H，s，-OCH3)，3.432-4.409(7H，m，吡咯烷基2’，5’，4’-CH2-，1位环丙基1H)，7.143-7.358(bro，-NH)，7.920(1H，s，5-H)，9.189(1H，s，2-H)。
MS(ESI m/z)：418.7(M++1)。
实施例十八 1-(2，4-二氟苯基)-6-氟-7-(4，4-二甲基-3-氨甲基吡咯烷-1-基)-1，4-二氢-4-氧代-1，8-萘啶-3-羧酸盐酸盐
方法一：制备方法同实施例十三，7-氯-1-(2，4-二氟苯基)-6-氟-1，4-二氢-4-氧代-1，8-萘啶-3-羧酸与实施例八化合物反应，得类白色固体，收率：84.3％。
1HNMR(CF3COOD)δppm：0.975-1.340(6H，m，4’位2×CH3)，2.540(1H，m，3’-H)，3.164-4.606(6H，m，2’，5’-H and 5’-CH2N)，7.354-7.501(3H，m，bro，Ar-H，NH2)，7.539-7.554(1H，m，Ar-H)，8.080，8.117(1H，d，5-H)，9.071(1H，s，2-H)。
MS(ESI m/z)：447.6(M++1)。
方法二：制备方法同实施例十三方法二，7-氯-1-(2，4-二氟苯基)-6-氟-1，4-二氢-4-氧代-1，8-萘啶-3-羧酸与实施例九反应，所得的产物以80％的乙醇处理得类白色固体，收率：86.3％。C22H21F3N4O3.H2O C H N计算值56.78 5.08 11.98实测值56.89 4.99 12.06
实施例十九 1-环丙基-6-氟-7-(4，4-二甲基-3-氨甲基吡咯烷-1-基)-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-羧酸盐酸盐
制备方法同实施例十四，1-环丙基-6-氟-7-氯-1，4-二氢-4-氧代-3-羧硼二乙酯与实施例八化合物反应，处理得类白色固体，收率：84.3％。
1HNMR(300MHz，CF3COOD)δppm：1.015-1.504(10H，m，螺环环丙基两个-CH2，吡咯烷基4’位两个-CH3)，2.484(1H，m，吡咯烷基3’-H)，3.245-4.291(7H，m，吡咯烷基2’，5’，4’-CH2-，1位环丙基1H)，7.216-7.716(4H，m，bro，8-Ar-H，NH3+)，7.956，7.997(1H，d，5-H)，9.022(1H，s，2-H)。
MS(ESI m/z)：374(M+)。
实施例二十 5-氨基-1-环丙基-6-氟-7-(4，4-二甲基-3-氨甲基吡咯烷-1-基)-8-甲氧基-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸盐酸盐
制备方法同实施例十五，5-氨基-1-环丙基-6，7-二氟-8-甲氧基-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸与实施例八化合物反应，得绿色固体，收率：34.3％。
1HNMR(300MHz，CF3COOD)δppm：0.849-1.443(10H，m，螺环环丙基两个-CH2，吡咯烷基4’位两个-CH3)，2.394-431(1H，m，吡咯烷基3’-H)，3.591(3H，s，-OCH3)，3.135-4.441(7H，m，吡咯烷基2’，5’，4’-CH2-，1位环丙基1H)，7.269-7.387(bro，-NH)，8.993，9.091(1H，d，2-H)。
MS(ESI m/z)：419.5(M++1)。
实施例二十一 1-环丙基-6-氟-7-(4，4-二甲基-3-氨甲基吡咯烷-1-基)-1，4-二氢-4-氧代-1，8-萘啶-3-羧酸盐酸盐
制备方法同实施例十六，1-环丙基-6-氟-7-氯-1，4-二氢-4-氧代-1，8-二萘啶-3-羧酸与实施例八化合物反应，得类白色固体，收率：67.3％。
1HNMR(300MHz，CF3COOD)δppm：0.954-1.455(10H，m，螺环环丙基两个-CH2，吡咯烷基4’位两个-CH3)，2.606(1H，m，吡咯烷基3’-H)，3.334-4.584(7H，m，吡咯烷基2’，5’，4’-CH2-，1位环丙基1H)，7.102-7.757(bro，-NH3+)，7.985，8.021(1H，d，5-H)，9.047(1H，s，2-H)。
MS(ESI m/z)：375(M++1)
实施例二十二 1-环丙基-6-氟-7-(4，4-二甲基-3-氨甲基吡咯烷-1-基)-8-甲氧基-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸盐酸盐
制备方法同实施例十七，11-环丙基-6，7-二氟-1，4-二氢-8-甲氧基-4-氧代-3-喹啉羧硼二乙酯与实施例八化合物反应，得土黄色固体，收率：72.5％。
1HNMR(300MHz，CF3COOD)δppm：0.958-1.528(10H，m，螺环环丙基两个-CH2，吡咯烷基4’位两个-CH3)，2.382-2.582(1H，m，吡咯烷基3’-H)，3.591(3H，s，-OCH3)，3.261-4.356(7H，m，吡咯烷基2’，5’，4’-CH2-，1位环丙基1H)，7.000-7.728(bro，-NH3+)，7.867，7.912(1H，s，5-H)，9.140(1H，s，2-H)。
MS(ESI m/z)：404(M++1)。
实施例二十三 1-苄基-4，4-二甲基-3-N-乙酰基氨甲基吡咯烷
取化合物施例六化合物(3.0g，13.7mmol)溶于二氯甲烷(30ml)，滴加乙酰氯(2.51g，32mmol)，室温搅拌反应2hr，然后用水(50ml×3)洗。无水硫酸镁干燥，蒸除溶剂至干。VLC柱层析分离(石油醚、乙酸乙酯为洗脱剂)。得淡黄色油状物(2.96g，83.1％)。
1HNMR(CDCl3)δppm：0.991(3H，s，3-CH3)，1.092(3H，s，3-CH3)，2.425(3H，s，-COCH3)，1.906～1.957，2.400～3.226(7H，m，3×CH2及4-CH)，3.600(2H，s，苄基-CH2)，7.219～7.321(5H，m，ArH)
ESIMS：261(M++1)
实施例二十四 4，4-二甲基-3-N-乙酰基氨甲基吡咯烷
取施例二十二化合物(2.5g，9.6mmol)，溶于无水乙醇(约50ml)中，加新制备的10％的Pd/C(4.0g)，室温40～50Psi氢压下反应24hr，TLC显示原料消失，滤去Pd/C，浓缩至干，得淡黄色油状物(1.32g，80.0％)。
1HNMR(CDCl3)δppm：0.989(3H，s，3-CH3)，1.100(3H，s，3-CH3)，2.359(H，s，-COCH3)，1.900～1.941，2.370～3.230(7H，m，3×CH2及4-CH)
ESIMS：173(M++1)
实施例二十五 1-(2，4-二氟苯基)-6-氟-7-(4，4-二甲基-3-氨甲基吡咯烷-1-基)-1，4-二氢-4-氧代-1，8-萘啶-3-羧酸
化合物7-氯-1-(2，4-二氟苯基)-6-氟-1，4-二氢-4-氧代-1，8-萘啶-3-羧酸(0.5g，1.40mmol)、DBU(0.43ml，5mmol)与实施例二十四的化合物(0.36g，2.1mmol)溶于乙腈(10ml)中，室温反应8h，滤出固体，然后用30％氢氧化钠水解4h，稀盐酸调pH至7，滤出固体，80％，乙醇重结晶得类白色固体。
所得产物的分析数据同实施例十八方法二化合物。
实施例二十六包衣片：
片芯处方：
实施例化合物十八 10.0g
乳糖 50.0g
淀粉 40.0g
羟丙纤维素 4.0g
10％孕维酮 适量
硬脂酸镁 0.5g
取上述成分混合均匀，制粒后过筛整粒，干燥、压片制成100片片芯。
包衣液处方：
欧巴代(Opadry)5g，80％乙醇适量包衣。
实施例二十七胶囊
处方：
实施例化合物二十 100g
淀粉 10g
羧甲基淀粉钠 20g
低取代羟丙基纤维素 10g
吐温80 适量
聚乙烯吡咯烷酮5％乙醇液 适量
十二烷基硫酸钠 8g
0号胃溶胶囊 1000粒
制成 1000粒胶囊
制备方法：
取处方量原辅料，分别过筛，加入5％聚乙烯吡咯烷酮醇液和吐温80制软材，用20目筛制粒，在室温15℃下晾干，加入十二烷基硫酸钠，混合均匀，按0.27g/S装入0号胃溶胶囊，取样化验，溶出限度为Q＝80％，含量应为标示量的90-110％。