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一种青藤碱结构改造化合物及其制备方法
     本发明专利申请为分案申请， 原案申请号为 200710111253.6， 申请日为 2007 年 6 月 19 日， 发明名称为一种青藤碱结构改造化合物及其制备方法。技术领域
     本发明涉及一种化合物及其制备方法， 特别涉及一种青藤碱结构改造化合物及其 制备方法。 背景技术 青藤碱是从青风藤植物中提取的最有效的治疗风湿和类风湿性关节炎疾病的生 物碱类药物， 具有显著的镇痛、 镇静、 抗炎、 免疫抑制、 降血压等作用。它能作用于中枢神经 系统和内分泌系统， 通过双向调节， 改善免疫和抗炎机制， 消除体内致病因素， 修复组织损 伤。 现在广泛应用的青藤碱盐药物主要是以盐酸青藤碱为原料药， 制成各种类型的片剂、 胶 囊、 注射液等。在用药过程中发现有极少数患者出现一定程度的不良反应， 如肌肉红肿、 瘙 痒等。 本发明旨在研发出比盐酸青藤碱或青虅碱的疗效和性能更优良的青藤碱结构改造新
     化合物。 发明内容
     本发明的第一个目的在于公开一种化合物 ； 本发明的第二个目的在于公开该化合 物的制备方法 ； 本发明的第三个目的在于公开该化合物的制药新用途。
     本发明目的是通过如下技术方案实现的 ：
     本发明青藤碱结构改造化合物是以青藤碱为母体， 通过化学合成方法制备而成， 包括各个环上新取代基衍生物， 例如 ： 一类 A 环连接新的取代基的青藤碱衍生物、 一类 C 环 连接新的取代基的青藤碱衍生物或一类 D 环或 C、 D 环连接新的取代基的青藤碱衍生物。
     所述青藤碱母体的化学结构式为 ：
     上述一类 A 环连接新的取代基的青藤碱衍生物， 其结构式任选如下一种 ：
     上述一类 C 环连接新的取代基的青藤碱衍生物， 其结构式任选如下一种 ：
     上述一类 D 环或 C、 D 环连接新的取代基的青藤碱衍生物， 其结构式任选如下一种：
     本发明各类青藤碱结构改造化合物的制备方法为 ： 在水或 2000-3000 毫升 / 摩尔 的有机溶剂中， 室温 - 回流条件下， 青藤碱与试剂以 1 ∶ 1.0-2.0 的比例反应 1-48 小时， 产 物用重结晶的方法进行分离或用柱层析分离法分离， 获得青藤碱结构改造化合物。
     本发明各类青藤碱结构改造化合物的制备方法优选为 ： 在水或 2500 毫升 / 摩尔的 有机溶剂中， 室温 - 回流条件下， 青藤碱与试剂以 1 ∶ 1.5 的比例反应 24 小时， 产物用重结 晶的方法进行分离或用柱层析分离法分离， 获得青藤碱结构改造化合物。
     本发明所述的有机溶剂包括但不限于甲醇、 乙醇、 丙醇、 丁醇、 异丙醇、 叔丁醇、 二 氯甲烷、 氯仿、 1， 2- 二氯乙烷、 四氯化碳、 乙酸乙酯、 乙醚、 四氢呋喃、 1， 4- 二氧六烷、 苯、 甲 苯、 丙酮、 乙氰、 二甲亚砜、 或 N， N- 二甲基甲酰胺。
     本发明所述的试剂可以根据化合物的结构特点选用常规试剂。
     本发明青藤碱结构改造化合物用于制备抗炎、 镇痛、 镇静或免疫调节的药物。
     本发明青藤碱结构改造化合物经药效学试验证实 ： 具有与盐酸青藤碱或青虅碱相 似的镇痛、 镇静、 抗炎及免疫抑制作用， 青藤碱结构改造化合物具有比青藤碱更低的毒性和 更显著的药效作用。 本发明青藤碱结构改造化合物合成反应方法简单、 反应条件温和、 容易 操作， 适宜工业生产。
     下述实验和实施例用于进一步说明但不限于本发明。
     实验例 1 对小鼠耳部巴豆油炎症抑制作用
     对小老鼠皮下注射 Sinos 50mg/kg， 0.5h 后左耳涂 2％巴豆油液 50ul 致炎， 4h 后 冲下耳片， 称重， 左右两耳片重量差为肿胀度， 以肿胀抑制率表示抗炎作用强度， 结果见表 1。
     表 1Sinos 对小鼠耳部巴豆油炎症抑制作用
     实验的 40 个化合物中， 有 12 个新化合物对小鼠耳部巴豆油炎症有较强的抑制作 用， 其中以 Sino-14 最强， Sino-30， Sino-23， Sino-31 次之。
     实验例 2 对大鼠角叉菜胶性足肿胀的抑制作用
     对大老鼠皮下注射 Sinos 50mg/kg， 0.5h 后左后足石皮内注射 1 ％的角叉菜胶 100ul 致炎， 以后每隔 1h 测量一次蜾关节周长， 连续 6 小时， 以左右后蜾关节周长差为肿胀 度， 肿胀抑制率表示抗炎作用强度。结果见表 -2
     表 2Sinos 对大鼠角叉菜胶性足肿胀的抑制作用
     结果表明 ： 化合物 Sino-14， 26， 29， 25 对大鼠角叉菜胶性足肿胀有较强的抑制作 用， 其中 Sino-14， 26 比 Sino-0 效果显著。
     实验例 3 镇痛作用
     小鼠皮下注射 Sinos50 或 25mg/kg， 0.5h 后腹腔注射 7％醋酸 10ml/kg， 立即观察 并记录小老鼠第一次扭体时间 ( 扭体潜伏期 ) 和 15min 内扭体次数， 以潜伏期延长率和扭
     体次数减少率表示化合物的镇痛活性。结果见表 3
     表3 Sinos 对大鼠镇痛作用
     结果表明 ： 上述表中列出的 18 个新化合物对大鼠镇痛都有一定的作用， 化合物 Sino-28， 25， 14， 30 的镇痛作用较强， 其中 Sino-28， 25， 14 比 Sino-0 效果显著。
     实验例 4 对大鼠腹腔肥大细胞脱颗粒作用
     取大老鼠腹腔白细胞， 加入 Sinos， 终浓度为 10-5mol/L， 37℃ 2min， 中性红染色， 镜下观察并记数肥大细胞脱颗粒百分率， 以半脱颗粒与全脱颗粒百分率之和表示脱颗粒强 度。结果见表 4。
     表 -4Sinos， 对大鼠腹腔肥大细胞脱颗粒作用，
     结果表明 ： 上表中的 30 个新化合物对大鼠腹腔肥大细胞脱颗粒作用都具有一定 的效果， 化合物 Sino-31， 46， 3， 33 的肥大细胞脱颗粒作用较强， 其中 Sino-33 比 Sino-0 效 果显著。
     实验例 5 对致敏大老鼠腹腔肥大细胞释放组胺的影响
     大老鼠以抗天花粉抗血清致敏， 取腹腔肥大细胞， 调节浓度为 106 细胞 /mL， 取细 胞液 0.1mL， 加待测化合物 ( 终浓度 10-5mol/L) 和天花粉液， 总体积 1mL， 37℃培养 10min， 释放组胺依次以碱 - 正丁醇和酸提取纯化， 邻苯二甲醛衍生化、 测定荧光强度 ( 激发波长 355nm， 发射波长 440nm)， 以此反映组胺释放水平， 计算待测化合物荧光强度占全脱粒管荧 光强度的百分率， 判断待测化合物对肥大细胞释放组胺的影响， 并与 Sinos 释放组胺程度 进行比较， 结果见表 -5
     表 -5Sinos 对致敏大老鼠腹腔肥大细胞释放组胺的影响
     结果表明 ： 上表中的 11 个新化合物对致敏大老鼠腹腔肥大细胞释放组胺的作用 都具有一定的效果， 化合物 Sino-28 的肥大细胞脱颗粒作用较强， 其中 Sino-28 比 Sino-0 效果显著。
     实验例 6 对大老鼠脾细胞释放 IL-2 的影响
     取大老鼠脾细胞， 除去红细胞， 调节细胞浓度为 5×106/ml， 取细胞液 1 毫升， 加 -5 ConA1oul( 终浓度为 10ul/ml) 和待测化合物 ( 终浓度为 10 mol/L)37℃培养 24 小时， 测上 清中 IL-2 水平。结果见表 -6 ：
     表 -6 对大老鼠脾细胞释放 IL-2 的影响
     结果表明 ： 上表中的 4 个新化合物对大老鼠脾细胞释放 IL-2 的影响都具有一定的 效果， 化合物 Sino-34， 26， 14， 30 作用较强， 其中 Sino-26， 30 比 Sino-0 效果显著。
     下述实施例均能实现上述实验例的效果
     具体实施方式
     实施例 1 ：
     Sino-14 化合物， 由如下方法制备 ：
     A、 酚羟基的保护 ： 称取 10mmol 青藤碱， 加入到 250 毫升三颈圆底烧瓶中， 加入 KOH10％乙醇 ( 含 KOH11mmol)， 再加入 150 毫升乙醇做溶剂， 加热， 同时搅拌， 回流条件下反 应 30 分钟， 滴加 20mmol 氯甲醚， 加完后， 再在回流条件下反应 2 小时， 反应过程中用薄层色 谱跟踪， 约 2 小时反应完成， 停止加热， 冷却， 烧瓶中物质倾入 150 毫升水中， 用 150 毫升氯 仿分 3 次萃取， 合并萃取的氯仿溶液， 以无水 Na2SO4 干燥， 蒸发溶剂氯仿至干， 得固体混合 物， 通过柱层析分离， 以 8 ∶ 1 体积比的环己烷∶乙酸乙酯为展开剂， 显色剂稀碘化铋钾， 得 青藤碱保护产物 3.35 克， 收率 90％， 熔点 92-93℃ ；
     B、 甲酰化反应 ： 量取 1 毫升 POCl3 加入到 100 毫升三颈圆底烧瓶中， 烧瓶置于冰浴 中冷却到 0℃， 慢慢滴入 10 毫升 DMF， 10 分钟后撤去冰浴， 在干燥条件下搅拌 30 分钟， 再加 入 40 毫升 DMF 溶剂， 称取 10mmol 青藤碱保护产物， 加入到烧瓶中， 同时搅拌， 反应较剧烈， 放热， 然后在 60℃条件下反应 4 小时， 反应过程中用薄层色谱跟踪， 约 4 小时反应完成， 停止 加热， 冷却， 烧瓶中物质倾入 150 毫升 2N 醋酸钠溶液中， 用 150 毫升氯仿分 3 次萃取， 合并 萃取的氯仿溶液， 以无水 Na2SO4 干燥， 蒸发溶剂氯仿至干， 得固体混合物， 通过柱层析分离， 以 8 ∶ 1 体积比的环己烷∶乙酸乙酯为展开剂， 显色剂稀碘化铋钾， 得羟基保护的青藤碱甲 酰化产物 3.08 克， 收率 77％ .， 熔点 114-116℃ ；
     C、 脱保护反应 ： 称取 10mmol 羟基保护的青藤碱甲酰化产物， 加入到 250 毫升三颈 圆底烧瓶中， 加入 3 ∶ 1 体积比的甲醇∶二氯甲烷混合溶剂 150 毫升， 再加入 10 毫升浓盐酸， 在室温条件下搅拌反应 24 小时， 反应过程中用薄层色谱跟踪， 约 24 小时反应完成， 烧瓶 中物质倾入 150 毫升水中， 用 1moL/LNaOH 溶液中和至 PH 值为 9-10， 过滤固体产物， 滤液用 150 毫升氯仿分 3 次萃取， 合并萃取的氯仿溶液， 以无水 Na2SO4 干燥， 蒸发溶剂氯仿至干， 得 固体混合物， 通过柱层析分离， 8 ∶ 1 体积比的二氯甲烷∶甲醇为展开剂， 显色剂稀碘化铋 钾， 得 Sino-14 化合物产品 2.28 克， 收率 64％ . 熔点 102-104℃。
     实施例 2 ：
     Sino-1 化合物的合成 ：
     称取 60mmol 干燥精制过的青藤碱， 研成粉末， 加入到 250 毫升三口圆底烧瓶中， 以 甲苯为溶剂， 滴加等摩尔的对氟苯甲酰氯， 滴加完后， 在 80 度温度条件下， 连续搅拌反应 4 小时， 冷却反应物， 用 5％的氢氧化钠溶液， 调节 PH 值， 使固体产物完全析出， 过滤固体， 乙 醇重结晶， 得到 Sino-1 化合物产品， 熔点 96-100℃， 收率 54％。
     实施例 3 ：
     Sino-2， Sino-3、 Sino-9 化合物的合成 ：
     称取 60mmol 干燥精制过的青藤碱， 研成粉末， 加入到 250 毫升三口圆底烧瓶中， 以 甲醇溶剂， 在室温下滴加溴水， 滴加完后， 连续搅拌反应 2 小时， 用 5％的氢氧化钠溶液， 调 节 PH 值， 使固体产物完全析出， 过滤固体， 通过柱层析分离， 8 ∶ 1 体积比的二氯甲烷∶甲醇 为展开剂， 显色剂稀碘化铋钾， 得化合物产品 Sino-2 和 Sino-3， 收率分别为 77％和 64％ . 熔点分别为 130-135℃和 144-143℃； 将 Sino-3 用饱和碳酸钠溶液处理后， 得到另一中新化 合物 Sino-9， 熔点为 129-131℃， 收率 27％。
     实施例 4 ：
     Sino-4， Sino-5、 Sino-6 化合物的合成 ：
     称取 60mmol 干燥精制过的青藤碱， 研成粉末， 加入到 250 毫升三口圆底烧瓶中， 加 入 50 毫升 40％氢溴酸， 于 80℃反应 6 小时后用 5％的氢氧化钠中和到 PH 值等于 9， 过滤固 体， 乙醇重结晶， 得到化合物产品 Sino-6， 熔点 121-122℃， 收率 84％ ； 将 Sino-6 加入到乙 酸酐吡啶溶剂中， 同时加入催化量的 DMPA， 在 80 度搅拌反应 3 小时， 调节 PH 值使固体析出， 通过柱层析分离， 8 ∶ 1 体积比的二氯甲烷∶甲醇为展开剂， 显色剂稀碘化铋钾， 得化合物 产品 Sino-4 和 Sino-5， 收率分别为 53％和 73％ . 熔点分别为 85-87℃和 61-64℃。
     实施例 5 ：
     Sino-7 化合物的合成 ：
     称取 60mmol 干燥精制过的青藤碱， 研成粉末， 加入到 250 毫升三口圆底烧瓶中， 以 甲苯为溶剂， 滴加等摩尔的 (C2H5)NSF3， 在 80 度温度条件下， 连续搅拌反应 4 小时， 冷却反应 物， 用 5％的氢氧化钠溶液， 调节 PH 值， 使固体产物完全析出， 过滤固体， 乙醇重结晶， 得到 化合物产品 Sino-7， 熔点 152-153℃， 收率 33％。
     实施例 6 ：
     Sino-8 化合物的合成 ：
     称取 60mmol 干燥精制过的青藤碱， 研成粉末， 加入到 250 毫升三口圆底烧瓶中， 以 甲苯为溶剂， 滴加等摩尔的对乙酸酐， 加入三乙胺和催化量的 DMPA， 滴加完后， 在 80 度温度 条件下， 连续搅拌反应 4 小时， 冷却反应物， 用 5％的氢氧化钠溶液， 调节 PH 值， 使固体产物 完全析出， 过滤固体， 乙醇重结晶， 得到化合物产品 Sino-8， 熔点 82-84℃， 收率 83％。实施例 7 ：
     Sino-10 化合物的合成 ：
     称取 60mmol 干燥精制过的青藤碱， 研成粉末， 加入到 250 毫升三口圆底烧瓶中， 以 CH2Cl2 为溶剂， 滴加等摩尔的 CH3COONO2， 控制温度为 -78℃， 连续搅拌反应 1 小时， 用 5％的 氢氧化钠溶液， 调节 PH 值， 使固体产物完全析出， 过滤固体， 乙醇重结晶， 得到化合物产品 Sino-10， 熔点 136-138℃， 收率 30％。
     实施例 8 ：
     Sino-11， Sino-12， Sino-13， Sino-17， Sino-18 化合物的合成 ：
     称取 60mmol 干燥精制过的青藤碱， 研成粉末， 加入到 250 毫升三口圆底烧瓶中， 加入等当量的多聚甲醛， 再加入 10 毫升的 2N 盐酸， 于 60℃反应 2 小时， 冷却后用 10％的 氢氧化钠溶液中和酸， 调节 PH 值等于 9-10， 过滤固体， 通过柱层析分离， 8 ∶ 1 体积比的二 氯甲烷∶甲醇为展开剂， 显色剂稀碘化铋钾， 得化合物产品 Sino-12 和 Sino-13， 收率分别 为 58％和 44％ . 熔点分别为 247℃ ( 分解 ) 和 263℃ ( 分解 ) ； 将 Sino-12 溶解在二氯甲 烷溶剂中， 加入试剂 DEAD 和 PPh3， 室温下反应 2 小时， 得到新化合物 Sino-11， 通过柱层 析纯化分离， 8 ∶ 1 体积比的二氯甲烷∶甲醇为展开剂， 熔点为 120-123 ℃， 收率 81 ％ ； 将 Sino-12 溶解在丙酮溶剂中， 加入 2N 氢氧化钠， 滴加 30％的双氧水， 室温下反应 2 小时， 得 到新化合物 Sino-17， 通过柱层析纯化分离， 8 ∶ 1 体积比的二氯甲烷∶甲醇为展开剂， 熔点 为 122-124℃， 收率 43％； 将 Sino-12 溶解在丙酮溶剂中， 将溶液用对亚硝基 N， N- 二甲基苯 胺氧化， 然后加入盐酸羟胺， 室温反应 2 小时， 产物通过柱层析纯化分离， 8 ∶ 1 体积比的二 氯甲烷∶甲醇为展开剂， 得到化合物产物 Sino-18， 熔点为 233-236℃， 收率 39％。
     实施例 9 ：
     Sino-16， Sino-15 化合物的合成 ：
     称取 60mmol 干燥精制过的青藤碱， 研成粉末， 加入到 250 毫升现制备好的对甲 氧基笨基重氮盐的烧瓶中， 保持温度在 0-5℃， 搅拌反应 1 小时， 过滤固体， 乙醇重结晶， 得 到新化合物 Sino-15， 熔点为 114-118 ℃， 收率 79 ％ ； 将 Sino-15 溶解在丙酮溶剂中， 加入 等当量的乙酸酐和三乙胺和催化量的 DMPA， 60 ℃反应 2 小时， 产物通过柱层析纯化分离， 8 ∶ 1 体积比的二氯甲烷∶甲醇为展开剂， 得到化合物产物 Sino-16， 熔点为 105-108℃， 收 率 81％。
     实施例 10 ：
     Sino-22、 Sino-21 化合物的合成 ：
     称取 60mmol 干燥精制过的青藤碱， 研成粉末， 加入含等当量的盐酸羟胺和醋酸 钠溶液， 室温反应 1 小时， 得到新化合物 Sino-21， 过滤固体， 乙醇重结晶， 新化合物熔点为 238 ℃， 收率 99 ％ ； 同样条件下， 用 2， 4- 二硝基苯胺 / 醋酸与青藤碱反应， 获得新化合物 Sino-22。
     实施例 11 ：
     Sino-23 化合物的合成 ：
     称取 60mmol 干燥精制过的青藤碱， 研成粉末， 加入到 250 毫升烧瓶中， 加入甲醇作 溶剂， Pd/C 为催化剂， 通入氢气， 然后加入对氯苯胺， 继续通入氢气， 彻底反应， 得到新化合 物 Sino-23， 乙醇重结晶， 新化合物熔点为 124-127℃， 收率 28％。实施例 12 ：
     Sino-20 化合物的合成 ：
     称取 60mmol 干燥精制过的青藤碱， 研成粉末， 加入到 250 毫升烧瓶中， 加入甲醇作 溶剂， Pd/C 为催化剂， 通入氢气， 然后加入等当量的盐酸羟胺和醋酸钠溶液， 室温下反应半 小时， 得化合物 Sino-20， 乙醇重结晶， 新化合物熔点为 244-246℃， 收率 54％。
     实施例 13 ：
     Sino-19 化合物的合成 ：
     称取 60mmol 干燥精制过的青藤碱， 研成粉末， 加入到 250 毫升烧瓶中， 加入甲醇作 溶剂， 等当量的乙二醇， 通入干燥的氯化氢气体， 反应 4 小时， 得新化合物 Sino-19， 乙醇重 结晶， 新化合物熔点为 87℃， 收率 64％。
     实施例 14 ：
     Sino-24， Sino-25， Sino-26， Sino-27， Sino-28， Sino-29， Sino-30， Sino-31 化合 物的合成
     A、 羰基的还原 ： 称取 60mmol 干燥精制过的青藤碱， 研成粉末， 加入到 250 毫升三 口圆底烧瓶中， 加入 200 毫升甲醇为溶剂， 搅拌使青藤碱全部溶解， 另称取 180mmolNaBH4 晶 体， 将晶体放在一小烧杯中， 放置于干燥器中， 用小勺分次慢慢加入 NaBH4 晶体于反应瓶中， 反应放出大量的热， 烧瓶外用冷水冷却， 温度控制在 10℃以下为宜， 加入 NaBH4 的速度以不 放出大量气体为宜， 大约在 1.5-2 小时的时间内能够将 NaBH4 加完， 加完 NaBH4 后， 撤去水冷 却， 继续搅拌反应物 2 小时， 使其充分反应完全， 然后慢慢滴加 1mol/L 的盐酸， 使未反应的 NaBH4 反应完全， 将烧瓶中的物质用旋转蒸发仪蒸发大部分溶剂甲醇， 蒸发至成粘稠状态为 止， 将粘稠状物质趁热倒入 200 毫升水的烧杯中， 然后再补加 100 毫升水， 剧烈搅拌使粘稠 状的物质彻底溶解在水中， 溶液变成浅黄色， 静止几分钟， 立即析出白色粗状晶体， 用 1mol/ L 的盐酸调节 PH 值至 9-11， 搅拌半小时， 过滤得晶体， 用水洗涤晶体 2-3 次， 抽干得固体 17.84 克， 真空干燥得固体 13.3 克， 母液放置 2 小时后析出晶体 2.0 克， 过滤后的母液放在 冰箱里过夜， 析出晶体 1.2 克， 共获得干燥的粗产品 16.5 克， 产率 83％， 粗品用甲醇重结晶， 得晶体物质， 熔点 216-217℃ ；
     B、 氯代反应 ： 将前面制备获得的晶体物质取 30mmol 溶解在 250 毫升三口瓶中， 加 入 50 毫升吡啶溶解， 连接气体吸收装置后， 在烧瓶内慢慢滴加 33mmol 氯化亚砜， 滴加完后， 加热到 45℃， 反应半小时， 冰水冷却， 过滤固体， 滤液减压蒸去溶剂后， 残渣再加入 10％的 碳酸氢钠充分搅拌 10 分中， 过滤， 干燥得 7.7 克白色固体， 即氯代产物， 熔点 134-136℃ ；
     C、 取上面制备的氯代产物 10mmol 溶解在 250 毫升三口瓶中， 加入 100 毫升乙腈溶 解， 再加入 10.1mmol 的对溴苯胺， 在回流条件下连续反应 6 小时， 蒸去溶剂后加入 5％的碳 酸氢钠溶液， 充分将反应物， 过滤固体， 固体用甲醇重结晶， 获得 6.6 克白色晶体 Sino-24， 熔点 155-157℃ ； 在相同反应条件下， 分别以对氟苯胺、 对氯苯胺、 对三氟甲基苯胺、 苯胺、 对甲氧基苯胺、 对三氟甲氧基苯胺、 间氯苯胺代替对溴苯胺进行反应， 分别得到 Sino-25， Sino-26， Sino-27， Sino-28， Sino-29， Sino-30， Sino-31 七个新化合物， 其熔点分别为 ： 115-120℃， 120-123℃， 143-147℃， 155-160℃， 93-97℃， 126-130℃， 137-140℃。
     实施例 15 ：
     Sino-33， Sino-34， Sino-35， Sino-36 化合物的合成 ：称取 60mmol 干燥精制过的青藤碱， 研成粉末， 加入到 250 毫升三口圆底烧瓶中， 加 入 200 毫升甲醇为溶剂， 搅拌使青藤碱全部溶解， 加入 60mmol 溴化氰， 于 60℃反应 2 小时后 加入 8.4 克碳酸钠粉末， 继续在此温度下反应 4 小时， 蒸发溶剂甲醇， 析出化合物 Sino-33， 熔点 171-172℃ ； 将 Sino-33 加入到 2N 的盐酸中， 煮沸 1 小时， 用 5％的氢氧化钠中和到 PH 值等于 9， 过滤固体， 乙醇重结晶， 得到 8.7 克化合物产品 Sino-34， 熔点 121-123 ℃ ； 称取 10mmol 干燥精制过的 Sino-34 化合物， 研成粉末， 加入到 250 毫升三口圆底烧瓶中， 再加入 15mmol 碳酸氢钠粉末， 加入 100 毫升甲醇做溶剂， 加入 10mmol 2- 甲基 -1- 溴丁烷， 在回流 条件下搅拌， 连续反应 3 小时， 蒸去甲醇， 残渣用冷水洗涤， 乙醇重结晶， 得到 3.1 克化合物 产品 Sino-36， 熔点 171-172℃； 另称取 10mmol 干燥精制过的 Sino-34 化合物， 研成粉末， 加 入到 250 毫升三口圆底烧瓶中， 再加入 15mmol 碳酸钠粉末， 加入 100 毫升甲醇做溶剂， 滴加 10mmol 乙酰氯， 然后在回流条件下搅拌， 连续反应 3 小时， 蒸去甲醇， 残渣用冷水洗涤， 乙醇 重结晶， 得到 3.3 克化合物产品 Sino-35， 熔点 150-153℃。
     实施例 16 ：
     Sino-32 化合物的合成 ：
     称取 60mmol 干燥精制过的青藤碱， 研成粉末， 加入到 250 毫升三口圆底烧瓶中， 加 入 200 毫升四氯化碳溶剂， 搅拌使青藤碱全部溶解， 然后加入氧化剂 mCPBA， 于室温条件下 反应 48 小时， 得到新化合物 Sino-32。 实施例 17 ：
     Sino-37 化合物的合成 ：
     称取 60mmol 干燥精制过的青藤碱， 研成粉末， 加入到 250 毫升三口圆底烧瓶中， 加 入 200 毫升四氯化碳溶剂， 搅拌使青藤碱全部溶解， 然后加入乙酸酐和乙酰氯， 于 90℃条件 下反应 8 小时， 然后用 30％的双氧水氧化得到新化合物 Sino-37， 熔点 72-74℃。
     实施例 18 ：
     Sino-38， Sino-39， Sino-40 化合物的合成 ：
     称取 60mmol 干燥精制过的青藤碱， 研成粉末， 加入到 250 毫升三口圆底烧瓶中， 加 入 200 毫升四氯化碳溶剂， 搅拌使青藤碱全部溶解， 然后加入试剂 NBS， 于室温条件下反应 12 小时， 得到新化合物 Sino-38， 熔点 84℃， 收率 69.6％； 相同条件下， 以 NCS 代替 NBS 反应 得到新化合物 Sino-39， 熔点 92℃， 收率 50％， 将 Sino-38 放于 2N 硫酸中煮沸 1 小时， 得到 新化合物 Sino-40， 熔点 150-153℃。
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