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头孢地尼的制备方法
    【技术领域】
     本发明涉及化学制药领域， 尤其涉及一种头孢地尼的制备方法。背景技术 头孢地尼 (Cefdinir) 是日本藤泽药品工业株式会社为克服头孢克肟 (Cefixime) 对金黄色葡萄球菌抗菌作用弱的缺点而开发的第三代口服头孢类抗菌素， 于 1991 年 10 月 在日本上市， 表现出广谱抗菌作用， 特别是对金黄色葡萄球菌、 链球菌、 肺炎球菌等革兰氏 阳性菌表现出良好的抗菌能力。头孢地尼对 β- 内酰胺酶稳定， 其化学结构的特点是在 7- 氨基头孢霉烷酸骨架的 7 位侧链上引入了氨基噻唑基和羟亚胺基， 在 3 位侧链上引入了 乙烯基。 临床上， 头孢地尼主要用于慢性支气管炎急性发作、 细菌性肺炎、 上呼吸道感染、 皮 肤及软组织感染等的治疗。
     目前头孢地尼的制备方法主要有以下方法 ：
     方法一 ： 美国专利 US4,559,334 中描述了以 7- 氨基 -3- 乙烯基 -3- 头孢烯 -4- 羧 酸二苯甲基酯与 4- 溴乙酰乙酰溴反应， 生成的产物用亚硝基氧化和环化后得到带保护基 团的头孢地尼， 最后去掉保护基团后得到头孢地尼。该路线中涉及的反应方程式如下所 示：
     该方法的缺点是 ： 原料不易取得， 产品收率低， 制备过程需要色谱分离和冻干， 工 艺复杂。
     方法二 ： 中国专利申请 ( 申请号 ： 200910099380.8) 中描述了一种方法， 采用 7- 氨 基 -3- 乙烯基 -8- 氧代 -5- 硫杂 -1- 氮杂双环 [4.2.0] 辛 -2- 烯 -2- 羧酸与 (Z)-2-(2- 氨 基噻唑 -4- 基 )-2- 乙酰氧亚胺基硫代乙酸 (S-2- 苯并噻唑 ) 酯在有机碱存在的条件下低 温反应， 经萃取， 调节 pH， 制备头孢地尼中间体， 最后除去头孢地尼中间体的酯基保护基， 得 到头孢地尼。
     该方法的缺点是 ： 头孢地尼酯中间体水解为头孢地尼时需要使用强碱， 同时要求 低温， 设备负担重， 而强碱水解时反应体系为强碱体系， 易造成反应产物降解及其他杂质的 生成， 不利于产品质量 ； 同时头孢地尼中间体需要分离出来， 延长了生产周期， 降低了产品 收率。
     发明内容
     本发明要解决的技术问题在于， 针对现有技术的上述缺陷， 提供一种成本低廉、 工 艺简单、 生产周期短、 产品收率高、 反应条件温和的头孢地尼的制备方法。
     本发明解决其技术问题所采用的技术方案是 ： 一种头孢地尼的制备方法， 包括以 下步骤 ：
     步 骤 S1 ： 在 有 机 溶 媒 和 水 形 成 的 混 合 体 系 中 加 入 7- 氨 基 -3- 乙 烯 基 -8- 氧 代 -5- 硫杂 -1- 氮杂双环 [4.2.0] 辛 -2- 烯 -2- 羧酸 ( 简称为 7-AVCA) 与头孢地尼活性 酯 ( 乙酰氧亚胺基 )(CAS NO. ： 104797-47-9)， 并加入有机碱使 7-AVCA 与头孢地尼活性酯 ( 乙酰氧亚胺基 ) 反应合成头孢地尼酯， 然后用有机溶媒萃取洗涤， 在水相中加入活性炭脱 色后洗涤， 真空蒸馏得到头孢地尼酯的水溶液。
     步骤 S2 ： 在头孢地尼酯的水溶液中加入固定化羧酸酯水解酶， 使头孢地尼酯水 解， 过滤， 调节滤液 pH 值为 3.0 ～ 7.0， 加入活性炭脱色， 然后加入结晶用有机溶剂， 并调节 pH 值为 1.0 ～ 3.0， 结晶， 干燥得到头孢地尼。
     在本发明所述的头孢地尼的制备方法中， 优选地， 所述结晶用有机溶剂与加入所 述结晶用有机溶剂前的反应体系的体积比为 1 ∶ 1 ～ 1 ∶ 10。
     在本发明所述的头孢地尼的制备方法中， 优选地， 所述 7-AVCA 与水的体积比为 1 ∶ 2 ～ 1 ∶ 20， 所述 7-AVCA 与有机溶媒的体积比为 1 ∶ 2 ～ 1 ∶ 20。
     在本发明所述的头孢地尼的制备方法中， 优选地， 所述有机碱为三乙胺、 三正丁 胺、 三丙胺、 叔丙胺、 1， 2- 二甲基丙胺、 己二胺或吡啶。
     在本发明所述的头孢地尼的制备方法中， 优选地， 所述有机溶媒为二氯甲仿、 氯仿、 丙酮、 丁酮、 乙酸乙酯、 乙酸丁酯、 四氢呋喃、 碳酸二四酯、 甲醇、 乙醇、 异丙醇、 正丁醇、 乙 腈中的一种或几种。
     在本发明所述的头孢地尼的制备方法中， 优选地， 所述合成头孢地尼酯的温度 为 -5 ～ 35℃， 所述合成头孢地尼酯的时间为 6 ～ 30h。
     在本发明所述的头孢地尼的制备方法中， 优选地， 所述头孢地尼酯水解的温度为 0 ～ 50℃， 所述头孢地尼酯水解体系的 pH 为 5.5 ～ 8.5。
     在本发明所述的头孢地尼的制备方法中， 进一步优选地， 所述头孢地尼水解的温 度为 25 ～ 35℃。
     在本发明所述的头孢地尼的制备方法中， 优选地， 所述结晶用有机溶剂为一元醇、 一元酮、 一元酯中的一种或几种。
     在本发明所述的头孢地尼的制备方法中， 进一步优选地， 所述结晶用有机溶剂为 甲醇、 乙醇、 正丁醇、 异丙醇、 丙酮、 丁酮、 乙酸乙酯、 乙酸丁酯中的一种或几种。
     采用本发明的头孢地尼的制备方法， 具有以下有益效果 ：
     1. 本发明的头孢地尼的制备方法中， 不需要将头孢地尼酯中间体结晶再溶解， 既 缩短了生产周期， 提高了终产物头孢地尼的收率， 又节约了溶媒， 降低了成本。 2. 本发明的头孢地尼的制备方法中， 采用了固定化羧酸酯水解酶水解头孢地尼酯 中间体生成头孢地尼。 酶是一种生物制剂， 相比于用无机强碱， 如氢氧化钠、 氢氧化钾、 碳酸 钠、 碳酸钾等来水解的方法， 反应条件温和、 易于控制， 头孢地尼活性酯 ( 乙酰氧亚胺基 ) 的 水解也更加完全， 产物降解少， 而且， 得到的头孢地尼晶形也较强碱水解好。
     3. 本发明的头孢地尼的制备方法中， 加入的无机碱仅用于调节水解体系的 pH， 而 非用于水解助剂， 用量也大为减少， 更有利于环保， 并且对于产品的收率和质量都有大幅度 提高。
     4. 本发明的头孢地尼的制备方法中， 在头孢地尼活性酯 ( 乙酰氧亚胺基 ) 水解后 头孢地尼的结晶过程中加入了结晶用有机溶剂， 使头孢地尼的结晶质量得到提高。
     本发明的头孢地尼的制备方法， 制备的头孢地尼经 HPLC 分析其纯度大于 99％， 最 终含量超过 97％， 产品收率和质量均达到较高标准。
     具体实施方式
     为了使本发明的目的、 技术方案及优点更加清楚明白， 以下结合实施例对 本发明 进行进一步的详细说明。
     本发明中， 所用固定化羧酸酯水解酶为湖南福来格生物技术有限公司生产的固定 化去乙酰酯酶， 英文名为 lipase。在加入有机碱之前降至低温仅是为了使反应体系的温度 更加容易控制， 直接加入有机碱进行反应也是可以的。所用有机碱为三乙胺、 三正丁胺、 三 丙胺、 叔丙胺、 1， 2- 二甲基丙胺、 己二胺或吡啶， 所用有机溶媒为二氯甲仿、 氯仿、 丙酮、 丁 酮、 乙酸乙酯、 乙酸丁酯、 四氢呋喃、 碳酸二四酯、 甲醇、 乙醇、 异丙醇、 正丁醇、 乙腈中的一种 或几种， 所述结晶用有机溶剂为一元醇、 一元酮、 一元酯中的一种或几种， 具体地讲， 所述结 晶用有机溶剂为甲醇、 乙醇、 正丁醇、 异丙醇、 丙酮、 丁酮、 乙酸乙酯、 乙酸丁酯中的一种或几 种。
     实施例一 ：在 500mL 四口反应瓶中加入 180mL 纯化水、 20.0g7-AVCA 和 36g 头孢地尼活性酯 ( 乙酰氧亚胺基 )， 搅拌下加入 140mL 四氢呋喃， 降温至 0℃， 加入 16mL 三乙胺， 升温至 20℃， 搅拌反应 9 小时， 取样用 HPLC 检测 7-AVCA 残留量小于 1.0％后往反应液中加入 120mL 二氯 甲烷， 搅拌 30 分钟后静置 30 分钟， 分层， 下层二氯甲烷相再用 50mL 纯化水萃取， 搅拌 30 分 钟后静置 30 分钟， 分层， 下层二氯甲烷相进行有机溶媒回收， 合并上层水相并加入 80mL 二 氯甲烷洗涤， 搅拌 30 分钟后静置 30 分钟， 分层， 下层二氯甲烷相进行有机溶媒回收， 上层水 相中加入 2g 活性炭， 搅拌脱色 30 分钟后过滤， 用 30mL 纯化水洗涤滤饼， 滤液和洗液合并后 倒入另一 500mL 反应瓶中进行真空蒸馏。
     在真空蒸馏得到的水相中加入 6g 固定化羧酸酯水解酶， 用 15％氨水控制反应液 pH 为 7.2 ～ 7.5， 在 25℃下搅拌反应， 取样用 HPLC 检测头孢地尼酯的残留量低于 0.5％， 过 滤， 将固定化羧酸酯水解酶清洗后保存， 滤液倒入另一 500mL 反应瓶中， 加入 6N 盐酸调节 滤液 pH 为 5.0， 再加入 2g 活性炭搅拌脱色 30 分钟， 过滤， 用 40mL 纯化水洗涤滤饼， 滤液和 洗液转移至另一 500mL 反应瓶中， 加入 40mL 异丙醇， 加入 6N 盐酸调节结晶液 pH 为 2.0， 结 晶析出， 降温至 5℃， 继续搅拌 1 小时后过滤， 用 5mL 异丙醇和 20mL 纯化水的混合液洗涤， 干 燥后得到 21.2g 头孢地尼。 实施例二 ：
     在 500mL 四口反应瓶中加入 180mL 纯化水、 20.0g7-AVCA 和 36g 头孢地尼活性酯 ( 乙酰氧亚胺基 )， 搅拌下加入 160mL 丙酮， 降温至 0℃， 加入 17mL 三乙胺， 升温至 20℃， 搅 拌反应 11 小时， 取样用 HPLC 检测 7-AVCA 残留量小于 1.0％后往反应液中加入 120mL 二氯 甲烷， 搅拌 30 分钟后静置 30 分钟， 分层， 下层二氯甲烷相再用 50mL 纯化水萃取， 搅拌 30 分 钟后静置 30 分钟， 分层， 下层二氯甲烷相进行有机溶媒回收， 合并上层水相并加入 80mL 二 氯甲烷洗涤， 搅拌 30 分钟后静置 30 分钟， 分层， 下层二氯甲烷相进行有机溶媒回收， 上层水 相中加入 2g 活性炭， 搅拌脱色 30 分钟后过滤， 用 30mL 纯化水洗涤滤饼， 滤液和洗液合并后 倒入另一 500mL 反应瓶中进行真空蒸馏。
     在真空蒸馏得到的水相中加入 6g 固定化羧酸酯水解酶， 用 15％氨水控制反应液 pH 为 5.5 ～ 6.0， 在 35℃下搅拌反应， 取样用 HPLC 检测头孢地尼酯的残留量低于 0.5％， 过 滤， 将固定化乙酰酯酶清洗后保存， 滤液倒入另一 500mL 反应瓶中， 加入 6N 盐酸调节滤液 pH 为 7.0， 再加入 2g 活性炭搅拌脱色 30 分钟， 过滤， 用 40mL 纯化水洗涤滤饼， 滤液和洗液转移 至另一 500mL 反应瓶中， 加入 40mL 异丙醇， 加入 6N 盐酸调节结晶液 pH 为 3.0， 结晶析出， 降 温至 5℃， 继续搅拌 1 小时后过滤， 用 5mL 异丙醇和 20mL 纯化水的混合液洗涤， 干燥后得到 20.8g 头孢地尼。
     实施例三 ：
     在 500mL 四口反应瓶中加入 180mL 纯化水、 20.0g7-AVCA 和 36g 头孢地尼活性酯 ( 乙酰氧亚胺基 )， 搅拌下加入 160mL 乙醇， 降温至 0℃， 加入 16mL 三乙胺， 升温至 20℃， 搅 拌反应 10 小时， 取样用 HPLC 检测 7-AVCA 残留量小于 1.0％后往反应液中加入 120mL 二氯 甲烷， 搅拌 30 分钟后静置 30 分钟， 分层， 下层二氯甲烷相再用 50mL 纯化水萃取， 搅拌 30 分 钟后静置 30 分钟， 分层， 下层二氯甲烷相进行有机溶媒回收， 合并上层水相并加入 80mL 二 氯甲烷洗涤， 搅拌 30 分钟后静置 30 分钟， 分层， 下层二氯甲烷相进行有机溶媒回收， 上层水 相中加入 2g 活性炭， 搅拌脱色 30 分钟后过滤， 用 30mL 纯化水洗涤滤饼， 滤液和洗液合并后
     倒入另一 500mL 反应瓶中进行真空蒸馏。
     在真空蒸馏得到的水相中加入 6g 固定化羧酸酯水解酶， 用 15％氨水控制反应液 pH 为 6.5 ～ 7.0， 在 0℃下搅拌反应， 取样用 HPLC 检测头孢地尼酯的残留量低于 0.5％， 过 滤， 将固定化羧酸酯水解酶清洗后保存， 滤液倒入另一 500mL 反应瓶中， 加入 6N 盐酸调节 滤液 pH 为 3.0， 再加入 2g 活性炭搅拌脱色 30 分钟， 过滤， 用 40mL 纯化水洗涤滤饼， 滤液和 洗液转移至另一 500mL 反应瓶中， 加入 40mL 异丙醇， 常温下加入 6N 盐酸调节结晶液 pH 为 1.0， 结晶析出， 降温至 5℃， 继续搅拌 1 小时后过滤， 用 5mL 异丙醇和 20mL 纯化水的混合液 洗涤， 干燥后得到 21.0g 头孢地尼。
     实施例四 ：
     在 500mL 四口反应瓶中加入 180mL 纯化水、 20.0g7-AVCA 和 36g 头孢地尼活性酯 ( 乙酰氧亚胺基 )， 搅拌下加入 140mL 四氢呋喃， 降温至 0℃， 加入 16mL 三乙胺， 升温至 10℃， 搅拌反应 15 小时， 取样用 HPLC 检测 7-AVCA 残留量小于 1.0％后往反应液中加入 120mL 二 氯甲烷， 搅拌 30 分钟后静置 30 分钟， 分层， 下层二氯甲烷相再用 50mL 纯化水萃取， 搅拌 30 分钟后静置 30 分钟， 分层， 下层二氯甲烷相进行有机溶媒回收， 合并上层水相并加入 80mL 二氯甲烷洗涤， 搅拌 30 分钟后静置 30 分钟， 分层， 下层二氯甲烷相进行有机溶媒回收， 上层 水相中加入 2g 活性炭， 搅拌脱色 30 分钟后过滤， 用 30mL 纯化水洗涤滤饼， 滤液和洗液合并 后倒入另一 500mL 反应瓶中进行真空蒸馏。 在真空蒸馏得到的水相中加入 6g 固定化羧酸酯水解酶， 用 15％氨水控制反应液 pH 为 7.2 ～ 7.5， 在 50℃下搅拌反应， 取样用 HPLC 检测头孢地尼酯的残留量低于 0.5％， 过 滤， 将固定化羧酸酯水解酶清洗后保存， 滤液倒入另一 500mL 反应瓶中， 加入 6N 盐酸调节 滤液 pH 为 4.0， 再加入 2g 活性炭搅拌脱色 30 分钟， 过滤， 用 40mL 纯化水洗涤滤饼， 滤液和 洗液转移至另一 500mL 反应瓶中， 加入 40mL 异丙醇， 常温下加入 6N 盐酸调节结晶液 pH 为 2.0， 结晶析出， 降温至 5℃， 继续搅拌 1 小时后过滤， 用 5mL 异丙醇和 20ml 纯化水的混合液 洗涤， 干燥后得到 21.2g 头孢地尼。
     实施例五 ：
     在 500mL 四口反应瓶中加入 180mL 纯化水、 20.0g7-AVCA 和 36g 头孢地尼活性酯 ( 乙酰氧亚胺基 )， 搅拌下加入 140mL 四氢呋喃， 降温至 0℃， 加入 16mL 三乙胺， 维持 0℃， 搅 拌反应 20 小时， 取样用 HPLC 检测 7-AVCA 残留量小于 1.0％后往反应液中加入 120mL 二氯 甲烷， 搅拌 30 分钟后静置 30 分钟， 分层， 下层二氯甲烷相再用 50mL 纯化水萃取， 搅拌 30 分 钟后静置 30 分钟， 分层， 下层二氯甲烷相进行有机溶媒回收， 合并上层水相并加入 80mL 二 氯甲烷洗涤， 搅拌 30 分钟后静置 30 分钟， 分层， 下层二氯甲烷相进行有机溶媒回收， 上层水 相中加入 2g 活性炭， 搅拌脱色 30 分钟后过滤， 用 30mL 纯化水洗涤滤饼， 滤液和洗液合并后 倒入另一 500mL 反应瓶中进行真空蒸馏。
     在真空蒸馏得到的水相中加入 6g 固定化羧酸酯水解酶， 用 15％氨水控制反应液 pH 为 8.0 ～ 8.5， 在 15℃下搅拌反应， 取样用 HPLC 检测头孢地尼酯的残留量低于 0.5％， 过 滤， 将固定化羧酸酯水解酶清洗后保存， 滤液倒入另一 500mL 反应瓶中， 加入 6N 盐酸调节 滤液 pH 为 5.0， 再加入 2g 活性炭搅拌脱色 30 分钟， 过滤， 用 40mL 纯化水洗涤滤饼， 滤液和 洗液转移至另一 500mL 反应瓶中， 加入 40mL 异丙醇， 常温下加入 6N 盐酸调节结晶液 pH 为 2.0， 结晶析出， 降温至 5℃， 继续搅拌 1 小时后过滤， 用 5ml 异丙醇和 20ml 纯化水的混合液
     洗涤， 干燥后得到 20.4g 头孢地尼。
     实施例六 ：
     在 500mL 四口反应瓶中加入 180mL 纯化水、 20.0g7-AVCA 和 36g 头孢地尼活性酯 ( 乙酰氧亚胺基 )， 搅拌下加入 140mL 四氢呋喃， 降温至 0℃， 加入 16mL 三乙胺， 降温至 -5℃， 搅拌反应 30 小时， 取样用 HPLC 检测 7-AVCA 残留量小于 1.0％后往反应液中加入 100mL 乙 酸乙酯， 搅拌 30 分钟后静置 30 分钟， 分层， 上层乙酸乙酯相再用 50mL 纯化水萃取， 搅拌 30 分钟后静置 30 分钟， 分层， 上层乙酸乙酯相进行有机溶媒回收， 合并下层水相并加入 80mL 乙酸乙酯洗涤， 搅拌 30 分钟后静置 30 分钟， 分层， 上层乙酸乙酯相进行有机溶媒回收， 下层 水相中加入 2g 活性炭， 搅拌脱色 30 分钟后过滤， 用 30mL 纯化水洗涤滤饼， 滤液和洗液合并 后倒入另一 500mL 反应瓶进行真空蒸馏。
     在真空蒸馏得到的水相中加入 6g 固定化羧酸酯水解酶， 用 15％氨水控制反应液 pH 为 7.2 ～ 7.5， 在 30℃下搅拌反应， 取样用 HPLC 检测头孢地尼酯的残留量低于 0.5％， 过 滤， 将固定化羧酸酯水解酶清洗后保存， 滤液倒入另一 500mL 反应瓶中， 加入 6N 盐酸调节 滤液 pH 为 5.0， 再加入 2g 活性炭搅拌脱色 30 分钟， 过滤， 用 40mL 纯化水洗涤滤饼， 滤液和 洗液转移至另一 500mL 反应瓶中， 加入 40mL 异丙醇， 常温下加入 6N 盐酸调节结晶液 pH 为 2.0， 结晶析出， 降温至 5℃， 继续搅拌 1 小时后过滤， 用 5mL 异丙醇和 20mL 纯化水混合液洗 涤， 干燥后得到 22.1g 头孢地尼。
     实施例七 ：
     在 500mL 四口反应瓶中加入 180mL 纯化水、 20.0g7-AVCA 和 36g 头孢地尼活性酯 ( 乙酰氧亚胺基 )， 搅拌下加入 140mL 四氢呋喃， 降温至 0℃， 加入 16mL 三乙胺， 升温至 35℃， 搅拌反应 6 小时， 取样用 HPLC 检测 7-AVCA 残留量小于 1.0％后往反应液中加入 100mL 乙酸 乙酯， 搅拌 30 分钟后静置 30 分钟， 分层， 上层乙酸乙酯相再用 50mL 纯化水萃取， 搅拌 30 分 钟后静置 30 分钟， 分层， 上层乙酸乙酯相进行有机溶媒回收， 合并下层水相并加入 80mL 乙 酸乙酯洗涤， 搅拌 30 分钟后静置 30 分钟， 分层， 上层乙酸乙酯相进行有机溶媒回收， 下层水 相中加入 2g 活性炭， 搅拌脱色 30 分钟后过滤， 用 30mL 纯化水洗涤滤饼， 滤液和洗液合并后 倒入另一 500mL 反应瓶中进行真空蒸馏。
     在真空蒸馏得到的水相中加入 6g 固定化羧酸酯水解酶， 用 15％氨水控制反应液 pH 为 7.7 ～ 7.9， 在 40℃下搅拌反应， 取样用 HPLC 检测头孢地尼酯的残留量低于 0.5％， 过 滤， 将固定化羧酸酯水解酶清洗后保存， 滤液倒入另一 500mL 反应瓶中， 加入 6N 盐酸调节 滤液 pH 为 5.0， 再加入 2g 活性炭搅拌脱色 30 分钟， 过滤， 用 40mL 纯化水洗涤滤饼， 滤液和 洗液转移至另一 500mL 反应瓶中， 加入 40mL 异丙醇， 常温下加入 6N 盐酸调节结晶液 pH 为 2.0， 结晶析出， 降温至 5℃， 继续搅拌 1 小时后过滤， 用 5mL 异丙醇和 20mL 纯化水的混合液 洗涤， 干燥后得到 20.6g 头孢地尼。
     实施例八 ：
     在 500mL 四口反应瓶中加入 180mL 纯化水、 20.0g7-AVCA 和 36g 头孢地 尼活性酯 ( 乙酰氧亚胺基 )， 搅拌下加入 140mL 四氢呋喃， 降温至 0℃， 加入 16mL 三乙胺， 升温至 15℃， 搅拌反应 25 小时， 取样用 HPLC 检测 7-AVCA 残留量小于 1.0％后往反应液中加入 100mL 乙 酸乙酯， 搅拌 30 分钟后静置 30 分钟， 分层， 上层乙酸乙酯相再用 50mL 纯化水萃取， 搅拌 30 分钟后静置 30 分钟， 分层， 上层乙酸乙酯相进行有机溶媒回收， 合并下层水相并加入 80mL乙酸乙酯洗涤， 搅拌 30 分钟后静置 30 分钟， 分层， 上层乙酸乙酯相进行有机溶媒回收， 下层 水相中加入 2g 活性炭， 搅拌脱色 30 分钟后过滤， 用 30mL 纯化水洗涤滤饼， 滤液和洗液合并 后倒入另一 500mL 反应瓶中进行真空蒸馏。
     在真空蒸馏得到的水相中加入 6g 固定化羧酸酯水解酶， 用 5 ％碳酸钾溶液控制 反应液 pH 为 7.7 ～ 7.9， 在 45℃下搅拌反应， 取样用 HPLC 检测头孢地尼酯的残留量低于 0.5％， 过滤， 将固定化羧酸酯水解酶清洗后保存， 滤液倒入另一 500mL 反应瓶中， 加入 6N 盐 酸调节滤液 pH 为 5.0， 再加入 2g 活性炭搅拌脱色 30 分钟， 过滤， 用 40mL 纯化水洗涤滤饼， 滤液和洗液转移至另一 500mL 反应瓶中， 加入 40mL 异丙醇， 常温下加入 6N 盐酸调节结晶液 pH 为 2.0， 结晶析出， 降温至 5℃， 继续搅拌 1 小时后过滤， 用 5mL 异丙醇和 20mL 纯化水的混 合液洗涤， 干燥后得到 20.0g 头孢地尼。
     实施例九 ：
     在 500mL 四口反应瓶中加入 180mL 纯化水、 20.0g7-AVCA 和 36g 头孢地尼活性酯 ( 乙酰氧亚胺基 )， 搅拌下加入 140mL 四氢呋喃， 降温至 0℃， 加入 16mL 三乙胺， 升温至 20℃， 搅拌反应 9 小时， 取样用 HPLC 检测 7-AVCA 残留量小于 1.0％后往反应液中加入 100mL 乙酸 乙酯， 搅拌 30 分钟后静置 30 分钟， 分层， 上层乙酸乙酯相再用 50mL 纯化水萃取， 搅拌 30 分 钟后静置 30 分钟， 分层， 上层乙酸乙酯相进行有机溶媒回收， 合并下层水相并加入 80mL 乙 酸乙酯洗涤， 搅拌 30 分钟后静置 30 分钟， 分层， 上层乙酸乙酯相进行有机溶媒回收， 下层水 相中加入 2g 活性炭， 搅拌脱色 30 分钟后过滤， 用 30mL 纯化水洗涤滤饼， 滤液和洗液合并后 倒入另一 500mL 反应瓶中进行真空蒸馏。 在真空蒸馏得到的水相中加入 6g 固定化羧酸酯水解酶， 用 15 ％氨水溶液控制 反应液 pH 为 7.7 ～ 7.9， 在 25℃下搅拌反应， 取样用 HPLC 检测头孢地尼酯的残留量低于 0.5％， 过滤， 将固定化羧酸酯水解酶清洗后保存， 滤液倒入另一 500mL 反应瓶中， 加入 6N 盐 酸调节滤液 pH 为 5.0， 再加入 2g 活性炭搅拌脱色 30 分钟， 过滤， 用 40mL 纯化水洗涤滤饼， 滤液和洗液转移至另一 500mL 反应瓶中， 加入 40mL 异丙醇， 常温下加入 6N 盐酸调节结晶液 pH 为 1.0， 结晶析出， 降温至 5℃， 继续搅拌 1 小时后过滤， 用 5mL 异丙醇和 20mL 纯化水的混 合液洗涤， 干燥后得到 21.3g 头孢地尼。
     实施例十 ：
     在 500mL 四口反应瓶中加入 180mL 纯化水、 20.0g7-AVCA 和 36g 头孢地尼活性酯 ( 乙酰氧亚胺基 )， 搅拌下加入 140mL 四氢呋喃， 降温至 0℃， 加入 16mL 三乙胺， 升温至 20℃， 搅拌反应 9 小时， 取样用 HPLC 检测 7-AVCA 残留量小于 1.0％后往反应液中加入 100mL 乙酸 乙酯， 搅拌 30 分钟后静置 30 分钟， 分层， 上层乙酸乙酯相再用 50mL 纯化水萃取， 搅拌 30 分 钟后静置 30 分钟， 分层， 上层乙酸乙酯相进行有机溶媒回收， 合并下层水相并加入 80mL 乙 酸乙酯洗涤， 搅拌 30 分钟后静置 30 分钟， 分层， 上层乙酸乙酯相进行有机溶媒回收， 下层水 相中加入 2g 活性炭， 搅拌脱色 30 分钟后过滤， 用 30mL 纯化水洗涤滤饼， 滤液和洗液合并后 倒入另一 500mL 反应瓶中进行真空蒸馏。
     在真空蒸馏得到的水相中加入 6g 固定化羧酸酯水解酶， 用 5 ％碳酸钾溶液控制 反应液 pH 为 7.7 ～ 7.9， 在 35℃下搅拌反应， 取样用 HPLC 检测头孢地 尼酯的残留量低于 0.5％， 过滤， 将固定化羧酸酯水解酶清洗后保存， 滤液倒入另一 500mL 反应瓶中， 加入 6N 盐 酸调节滤液 pH 为 5.0， 再加入 2g 活性炭搅拌脱色 30 分钟， 过滤， 用 40mL 纯化水洗涤滤饼，
     滤液和洗液转移至另一 500mL 反应瓶中， 加入 40mL 丙酮， 常温下加入 6N 盐酸调节结晶液 pH 为 2.0， 结晶析出， 降温至 5℃， 继续搅拌 1 小时后过滤， 用 5mL 丙酮和 20mL 纯化水的混合液 洗涤， 干燥后得到 21.5g 头孢地尼。
     以上所述仅为本发明的具有代表性的实施例， 不以任何方式限制本发明， 凡在本 发明的精神和原则之内所作的任何修改、 等同替换或改进等， 均应包含在本发明的保护范 围之内。11