新颖的三唑并 [4， 3-a] 吡啶衍生物， 其制备方法， 其作为药 物的用途， 药物组合物及新颖的尤其是作为 MET 抑制剂的 用途 本发明涉及新颖的三唑并 [4， 3-a] 吡啶衍生物， 其制备方法， 所得的新颖中间体， 其作为药物的用途， 含有它们的药物组合物， 以及该三唑并 [4， 3-a] 吡啶衍生物的新颖用 途。
本发明尤其涉及具有抗癌活性的新颖的三唑并 [4， 3-a] 吡啶衍生物， 其通过调节 蛋白， 尤其是激酶的活性。
至今， 在化疗药中大多数市售化合物为细胞毒剂， 它们具有明显的问题， 表现为副 作用和病人的耐受性。 如果所用药物选择性作用于癌细胞， 而不作用健康细胞， 则这些作用 可能被限制。 因此限制化疗药的不良作用的一种方案可以是使用作用于代谢途径或这些途 径的一些组成方面的药物， 所述代谢途径及其组成方面主要在癌细胞中表达， 且在健康细 胞中很少表达或不表达。蛋白激酶是催化蛋白质的特定残基 ( 例如酪氨酸， 丝氨酸或苏氨 酸残基 ) 的羟基磷酸化的酶家族。这些磷酸化能够大大改变蛋白质的功能， 因此蛋白激酶 在调节多种细胞过程 ( 尤其是代谢、 细胞增殖、 细胞粘附和活力、 细胞分化或细胞存活 ) 中 起重要的作用， 一些蛋白激酶在细胞周期事件的起始、 发展和完成中起核心作用。
在多种其中涉及蛋白激酶活性的细胞功能中， 一些过程表现为治疗一些疾病的有 吸引力的靶点。 例如， 尤其涉及由血管发生和细胞周期控制以及细胞增殖产生的那些过程， 其中蛋白激酶能够起关键的作用。这些过程对于实体瘤的生长以及对于其它疾病尤其重 要： 尤其是抑制这些激酶的分子能够限制不希望的细胞增殖， 例如在癌症中观察到的那些， 且可以在预防、 调节或治疗神经变性疾病 ( 如阿尔茨海默病 ) 或神经元凋亡中起作用。
本发明的主题为对于蛋白激酶具有抑制作用的新颖的衍生物。 因此根据本发明的 产物尤其可用于预防或治疗可以通过抑制蛋白激酶调节的疾病。
根据本发明的产物通过调节激酶的活性尤其表现出抗癌活性。 在寻找调节其活性 的激酶中， 优选 MET 以及 MET 蛋白的突变体。
本发明还涉及所述衍生物在制备用于人类治疗的药物中的用途。
因此， 本发明的一个主题是提供具有抗癌活性的组合物， 其尤其通过作用于激酶 起作用。在寻找调节其活性的激酶中， 优选 MET。
在下文的药理学部分中， 由此， 在生化检测和对细胞株的检测表明本申请的产物 尤其抑制 MET 的自磷酸化活性和其生长依赖 MET 或其突变体形式的细胞的增殖。
MET 或肝细胞生长因子受体， 是具有酪氨酸激酶活性的受体， 其尤其通过上皮和内 皮细胞表达。HGF( 肝细胞生长因子 ) 被描述为 MET 的特异性配体。HGF 由间质细胞分泌， 且激活 MET 受体 ( 其同型二聚 )。随后， 该受体对催化区域 Y1230、 Y1234 和 Y1235 的酪氨 酸进行自磷酸化。
HGF 对 MET 的刺激诱导细胞增殖、 散布 (scattering)( 或分散 (dispersion)) 和活 力、 对凋亡的抵抗、 侵入和血管发生。
发现 MET 和 HGF 在许多人肿瘤和多种癌症中过表达。还发现 MET 在胃肿瘤和成胶
质细胞瘤中扩增。MET 基因的许多点突变也出现在肿瘤中， 尤其是在激酶区域， 而且还在近 膜区域和 SEMA 区域。过表达、 扩增或突变导致受体的组成性激活及其功能的失调。
因此， 本发明尤其涉及新颖的 MET 蛋白激酶及其突变体的抑制剂， 其能够用于抗 增殖和抗转移治疗， 尤其是在肿瘤中。
本发明还涉及新颖的 MET 蛋白激酶及其突变体的抑制剂， 其能够用于抗血管生成 治疗， 尤其是在肿瘤中。
本发明主题是式 (I) 产物 ：
其中 ：
Ra 表示氢原子 ； 卤素原子 ； 芳基基团 ； 或杂芳基基团， 这些芳基和杂芳基基团如下 文所示任选被取代 ；
Rb 表示氢原子、 Rc、 -COORc 或 -CO-Rc 基团或 -CO-NRcRd 基团 ；
其中 Rc 表示烷基、 环烷基、 杂环烷基、 芳基或杂芳基基团， 所有这些基团如下文所 示任选被取代 ；
Rd 表示氢原子或烷基或环烷基基团 ；
所有上述烷基、 环烷基、 杂环烷基、 芳基和杂芳基基团任选被一个或多个选自 下述的基团取代 ： 卤素原子、 和羟基、 烷氧基、 CN、 CF3、 -NR1R2、 杂环烷基、 -COOH、 -COO 烷 基、 -CONR1R2 和 -NR1COR2 基团 ；
所述烷基和环烷基基团也任选被芳基或杂芳基基团取代， 所述芳基或杂芳基基团 本身任选被一个或多个选自下述的基团取代 ： 卤素原子和羟基、 烷基、 烷氧基和 NR3R4 基 团；
所述环烷基、 杂环烷基、 芳基或杂芳基基团也任选被烷基基团取代， 所述烷基基团 本身任选被一个或多个选自下述的基团取代 ： 卤素原子和羟基、 O- 杂环烷基、 烷基、 烷氧基 和 NR3R4 基团 ；
NR1R2 如下所述 ： 或者， R1 和 R2 相同或不同， R1 和 R2 之一表示氢原子或烷基基团， 且 R1 和 R2 的另一个表示氢原子、 或环烷基基团或烷基基团， 所述烷基任选被一个或多个可 相同或不同的选自下述的基团取代 ： 羟基、 烷氧基、 NR3R4、 杂环烷基、 杂芳基或苯基基团， 所 述取代基团本身任选被取代 ； 或者， R1 和 R2 与和它们相连的氮原子形成环状基团， 该环状 基团含有 3-10 个环成员和任选一个或多个选自 O、 S、 N 和 NH 的其它杂原子， 该基团 ( 包括 其含有的可能的 NH) 任选被取代 ；
NR3R4 如下所述 ： 或者， R3 和 R4 相同或不同， R3 和 R4 之一表示氢原子或烷基基 团， 且 R3 和 R4 的另一个表示氢原子、 或环烷基基团或烷基基团， 所述烷基基团任选被一个 羟基、 烷氧基、 杂环烷基、 杂芳基或苯基基团， 或多个可相同或不同的选自下述的基团取代 ： 所述取代基团本身任选被取代 ； 或 R3 和 R4 与和它们相连的氮原子形成环状基团， 该环状基
团含有 3-10 个环成员和任选一个或多个选自 O、 S、 N 和 NH 的其它杂原子， 该基团 ( 包括其 含有的可能的 NH) 任选被取代 ；
R1 和 R2 或 R3 和 R4 分别能够与和它们相连的氮原子形成的环状基团任选被一 个或多个可相同或不同的基团取代， 所述取代基团选自卤素原子、 羟基、 氧代基团、 烷氧基、 NH2、 NH 烷基和 N( 烷基 )2 基团， 和烷基、 苯基、 CH2- 苯基和杂芳基基团， 使得在后者基团中， 所述烷基、 苯基和杂芳基基团本身任选被一个或多个选自卤素原子和下述的基团取代 ： 羟 基、 含有 1-4 个碳原子的烷基和烷氧基、 NH2、 NH 烷基和 N( 烷基 )2 ；
所有上述烷基 (alk) 和烷氧基基团含有 1-6 个碳原子，
所述式 (I) 产物为所有可能的外消旋、 对映异构和非对映异构的异构体形式， 且 还为式 (I) 产物与无机和有机酸或与无机或有机碱形成的加成盐。
本发明的主题为上述定义的式 (I) 产物， 其中 ：
Ra 表示氢原子 ； 卤素原子 ； 或芳基或杂芳基基团， 这些芳基和杂芳基基团如下文 所示任选被取代 ；
Rb 表示氢原子、 -CO-Rc 基团或 -CO-NRcRd 基团 ；
其中 Rc 表示烷基基团或环烷基基团， 二者任选被一个或多个选自下述的基团取 代： 羟基、 烷氧基、 NR1R2、 杂环烷基、 芳基和杂芳基基团， 所述取代基团本身如下文所示任选 被取代 ； Rd 表示氢原子或烷基基团 ；
所有上述定义的烷基、 环烷基、 杂环烷基、 芳基和杂芳基基团任选被一个或多个 选自下述的基团取代 ： 卤素原子、 和羟基、 烷氧基、 杂环烷基、 -NR1R2、 -COOH、 -COO 烷基 和 -CONR1R2 基团 ；
所述芳基或杂芳基基团也任选被烷基基团取代， 所述烷基基团本身任选被一个或 多个选自下述的基团取代 ： 卤素原子和羟基、 O- 杂环烷基和烷氧基基团 ；
NR1R2 如下所述 ： 或者， R1 和 R2 相同或不同， R1 和 R2 之一表示氢原子或烷基基 团， 且 R1 和 R2 的另一个表示氢原子、 或环烷基基团或烷基基团， 其任选被一个或多个可相 同或不同的选自下述的基团取代 ： 羟基、 烷氧基、 NR3R4、 杂环烷基、 杂芳基或苯基基团， 所述 取代基团本身任选被取代 ； 或者， R1 和 R2 与和它们相连的氮原子形成环状基团， 该环状基 团含有 3-10 个环成员和任选一个或多个选自 O、 S、 N 和 NH 的其它杂原子， 该基团， 包括其含 有的可能的 NH， 任选被取代 ；
NR3R4 如下所述 ： 或者， R3 和 R4 相同或不同， R3 和 R4 之一表示氢原子或烷基基团， 且 R3 和 R4 的另一个表示氢原子、 或环烷基基团或烷基基团， 其任选被一个或多个可相同或 不同的选自下述的基团取代 ： 羟基、 烷氧基、 杂环烷基、 杂芳基或苯基基团， 所述取代基团本 身任选被取代 ； 或 R3 和 R4 与和它们相连的氮原子形成环状基团， 该环状基团含有 3-10 个 环成员和任选一个或多个选自 O、 S、 N 和 NH 的其它杂原子， 该基团， 包括其含有的可能的 NH， 任选被取代 ；
R1 和 R2 或 R3 和 R4 分别能够与和它们相连的氮原子形成的环状基团任选被一 个或多个可相同或不同的基团取代， 所述取代基团选自卤素原子、 羟基和烷氧基基团， 和烷 基、 苯基和 CH2- 苯基基团， 其中所述烷基或苯基基团本身任选被一个或多个可相同或不同 的基团取代， 所述取代基团选自卤素原子和烷基、 羟基、 烷氧基、 NH2、 NH 烷基和 N( 烷基 )2 基
团； 所有上述烷基 (alk) 或烷氧基基团含有 1-6 个碳原子，
所述式 (I) 产物为所有可能的外消旋、 对映异构和非对映异构的异构体形式， 且 还为式 (I) 产物与无机和有机酸或与无机或有机碱形成的加成盐。
本发明主题为上述或下述定义的式 (I) 产物， 其中 ：
Ra 表示氢原子 ； 卤素原子 ； 苯基基团， 其如下文所示任选被取代 ； 或吡唑基基团， 所述吡唑基任选被杂环烷基基团或被烷基基团取代， 所述烷基基团本身任选被羟基基团或 被 O- 杂环烷基基团取代 ；
Rb 表示氢原子、 -CO-Rc 基团或 -CO-NRcRd 基团 ；
其中 Rc 表示烷基或环烷基基团， 二者任选被一个或多个选自下述的基团取代 ： 羟 基、 烷氧基、 NR1R2 和苯基， 所述苯基本身任选被一个或多个选自下述的基团取代 ： 卤素原 子， 和羟基、 烷氧基、 烷基、 NH2、 NH 烷基和 N( 烷基 )2 基团 ；
Rd 表示氢原子或烷基基团 ；
NR1R2 如下所述 ： 或者， R1 和 R2 相同或不同， R1 和 R2 之一表示氢原子或烷基基团 和 R1 和 R2 的另一个表示氢原子、 或环烷基基团或烷基基团， 其任选被一个或多个可相同或 不同的选自下述的基团取代 ： 羟基、 烷氧基、 NR3R4、 或苯基基团， 其本身任选被取代 ； 或者， R1 和 R2 与和它们相连的氮原子形成环状基团， 该环状基团含有 4-7 个环成员和任选选自 O、 S、 N 和 NH 的其它杂原子， 该基团， 包括其含有的可能的 NH， 任选被取代 ；
NR3R4 如下所述 ： 或者， R3 和 R4 可相同或不同， 表示氢原子或烷基基团， 其任选被 一个或多个可相同或不同的选自下述的基团取代 ： 羟基或烷氧基基团 ； 或 R3 和 R4 与和它 们相连的氮原子形成环状基团， 该环状基团含有 4-7 个环成员和任选选自 O、 S、 N 和 NH 的其 它杂原子， 该基团， 包括其含有的可能的 NH， 任选被取代 ；
R1 和 R2 或 R3 和 R4 分别能够与和它们相连的氮原子形成的环状基团任选被一个 或多个可相同或不同的基团取代， 所述取代基团如权利要求 1 和 2 中任一项所定义 ；
所有上述烷基 (alk) 或烷氧基基团含有 1-4 个碳原子，
所述式 (I) 产物为所有可能的外消旋、 对映异构和非对映异构的异构体形式， 且 还为式 (I) 产物与无机和有机酸或与无机或有机碱形成的加成盐。
本发明的主题为上述或下述定义的式 (I) 产物， 其中 ：
Ra 表示氢原子 ； 卤素原子 ； 或苯基基团， 其任选被一个或多个选自下述的基团取 代： 卤素原子和烷基基团 ； 或吡唑基基团， 其任选被哌啶基基团或被烷基基团取代， 所述烷 基基团本身任选被羟基基团或被四氢 -2H- 吡喃 -2- 基氧基基团取代 ；
Rb 表示氢原子、 -CO-Rc 基团或 a-CO-NRcRd 基团 ；
其中 Rc 表示烷基或环烷基基团， 所述烷基或环烷基基团任选被一个或多个选自 下述的基团取代 ： 羟基、 烷氧基和 NR1R2 基团 ；
Rd 表示氢原子 ；
NR1R2 如下所述 ： 或者， R1 和 R2 可相同或不同， 表示氢原子或烷基基团， 其任选被 一个或多个可相同或不同的选自下述的基团取代 ： 选自羟基、 烷氧基、 NH2、 NH 烷基和 N( 烷 基 )2 基团 ； 或者， R1 和 R2 与和它们相连的氮原子形成环状基团， 该环状基团含有 4-7 个环 成员和任选其它选自 O、 S、 N 和 NH 的杂原子， 该环状基团任选被烷基、 苯基或 -CH2- 苯基基
团取代， 所述后者烷基、 苯基或 -CH2- 苯基基团本身任选被一个或多个可相同或不同的选自 下述的基团取代 ： 卤素原子和烷基、 羟基、 烷氧基、 NH2、 NH 烷基和 N( 烷基 )2 基团 ；
所有上述烷基 (alk) 或烷氧基基团含有 1-4 个碳原子，
所述式 (I) 产物为所有可能的外消旋、 对映异构和非对映异构的异构体形式， 且 还为式 (I) 产物与无机和有机酸或与无机或有机碱形成的加成盐。
本发明的主题为上述或下述定义的式 (I) 产物， 其中 ：
Ra 表示氢原子 ； 碘原子 ； 苯基基团， 其任选被一个或两个选自卤素原子和甲基基 团的基团取代 ； 或吡唑基基团， 所述吡唑基任选被哌啶基基团或被乙基基团取代， 所述乙基 本身任选被羟基基团或被四氢 -2H- 吡喃 -2- 基氧基基团取代 ；
Rb 表示氢原子、 CO-Rc 基团或 -CO-NRcRd 基团 ；
其中 Rc 表示环丙基基团或烷基基团， 所述烷基基团任选被烷氧基或 NR1R2 基团取 代；
Rd 表示氢原子 ；
NR1R2 如下所述 ： 或者， R1 和 R2 可相同或不同， 表示氢原子或烷基基团 ； 或者， R1 和 R2 与和它们相连的氮原子形成吗啉基或哌嗪基基团， 所述哌嗪基基团任选在第二个氮 原子上被烷基基团取代 ；
上述烷基和烷氧基基团含有 1-4 个碳原子，
所述式 (I) 产物为所有可能的外消旋、 对映异构和非对映异构的异构体形式， 且 还为式 (I) 产物与无机和有机酸或与无机或有机碱形成的加成盐。
因此， 本发明的主题为式 (I) 产物 ：
其中 ：
Ra 表示氢原子 ； 卤素原子 ； 芳基基团 ； 或杂芳基基团， 这些芳基和杂芳基基团如下 文所示任选被取代 ；
Rb 表示氢原子、 Rc、 -COORc 或 -CO-Rc 基团或 -CO-NRcRd 基团 ；
其中 Rc 表示烷基、 环烷基、 杂环烷基、 芳基或杂芳基基团， 所有这些基团如下文所 示任选被取代 ；
Rd 表示氢原子或烷基或环烷基基团 ；
所述上述定义的烷基、 环烷基、 杂环烷基、 芳基或杂芳基基团任选被一个或多个选 自下述的基团取代 ： 卤素原子、 和羟基、 烷氧基、 CN、 CF3、 -NR1R2、 -COOH、 -COO 烷基、 -CONR1R2 和 -NR1COR2 基团 ；
所述烷基和环烷基基团还任选被杂环烷基、 芳基或杂芳基基团取代， 所述取代基 团本身任选被一个或多个选自下述的基团取代 ： 卤素原子和羟基、 烷基、 烷氧基和 NR3R4 基 团；
所述环烷基、 杂环烷基、 芳基或杂芳基基团还任选被烷基基团取代， 所述烷基基团 本身任选被一个或多个选自下述的基团取代 ： 卤素原子和羟基、 烷基、 烷氧基和 NR3R4 基 团；
NR1R2 如下所述 ： 或者， R1 和 R2 相同或不同， R1 和 R2 之一表示氢原子或烷基基 团， 且 R1 和 R2 的另一个表示氢原子、 或环烷基基团或烷基基团， 其任选被一个或多个可相 同或不同的选自下述的基团取代 ： 羟基、 烷氧基、 NR3R4、 杂环烷基、 杂芳基或苯基基团， 所述 取代基团本身任选被取代 ； 或者， R1 和 R2 与和它们相连的氮原子形成环状基团， 该环状基 团含有 3-10 个环成员和任选一个或多个选自 O、 S、 N 和 NH 的其它杂原子， 该基团， 包括其含 有的可能的 NH， 任选被取代 ；
NR3R4 如下所述 ： 或者， R3 和 R4 相同或不同， R3 和 R4 之一表示氢原子或烷基基 团， 且 R3 和 R4 的另一个表示氢原子、 或环烷基基团或烷基基团， 其任选被一个或多个可相 同或不同的选自下述的基团取代 ： 羟基、 烷氧基、 杂环烷基、 杂芳基或苯基基团， 所述取代基 团本身任选被取代 ； 或者， R3 和 R4 与和它们相连的氮原子形成环状基团， 该环状基团含有 3-10 个环成员和任选一个或多个其它选自 O、 S、 N 和 NH 的杂原子， 该基团， 包括其含有的可 能的 NH， 任选被取代 ；
R1 和 R2 或 R3 和 R4 分别能够与和它们相连的氮原子形成的环状基团任选被一 个或多个可相同或不同的基团取代， 所述取代基团选自卤素原子、 羟基、 氧代基团、 烷氧基、 NH2、 NH 烷基和 N( 烷基 )2 基团， 和烷基、 苯基、 CH2- 苯基和杂芳基基团， 使得在后者基团中， 所述烷基、 苯基和杂芳基基团本身任选被一个或多个选自卤素原子和下述的基团取代 ： 羟 基、 含有 1-4 个碳原子的烷基和烷氧基、 NH2、 NH 烷基和 N( 烷基 )2 ；
所述上述烷基 (alk) 和烷氧基基团含有 1-6 个碳原子，
所述式 (I) 产物为所有可能的外消旋、 对映异构和非对映异构的异构体形式， 且 还为式 (I) 产物与无机和有机酸或与无机或有机碱形成的加成盐。
尤其， 在式 (I) 产物中，
所有上述定义的烷基、 环烷基、 杂环烷基、 芳基和杂芳基基团任选被一个或多个选 自下述的基团取代 ： 卤素原子、 和羟基、 烷氧基、 CN、 CF3、 -NR1R2、 -COOH、 -COO 烷基、 -CONR1R2 和 -NR1COR2 基团 ；
所述烷基基团也任选被芳基或杂芳基基团取代， 所述取代基团本身任选被一个或 多个选自下述的基团取代 ： 卤素原子和羟基、 烷基、 烷氧基和 NR3R4 基团 ；
所述环烷基、 杂环烷基、 芳基或杂芳基基团还任选被烷基基团取代， 所述烷基基团 本身任选被一个或多个选自下述的基团取代 ： 卤素原子和羟基、 烷基、 烷氧基和 NR3R4 基 团。
本发明的主题为上述定义的式 (I) 产物， 其中 ：
Ra 表示氢原子 ； 卤素原子 ； 或芳基或杂芳基基团， 这些芳基和杂芳基基团如下文 所示任选被取代 ；
Rb 表示氢原子、 -CO-Rc 基团或 -CO-NRcRd 基团 ；
其中 Rc 表示烷基基团或环烷基基团， 二者任选被一个或多个选自下述的基团取 代： 羟基、 烷氧基、 NR1R2、 杂环烷基、 芳基和杂芳基基团， 所述取代基团本身如下文所示任选 被取代 ；Rd 表示氢原子或烷基基团 ；
所有上述定义的烷基、 环烷基、 杂环烷基、 芳基和杂芳基基团任选被一个或多个选 自下述的基团取代 ： 卤素原子和羟基、 烷氧基、 -NR1R2、 -COOH、 -COO 烷基和 -CONR1R2 基团 ；
NR1R2 如下所述 ： 或者， R1 和 R2 相同或不同， R1 和 R2 之一表示氢原子或烷基基 团， 且 R1 和 R2 的另一个表示氢原子、 或环烷基基团或烷基基团， 其任选被一个或多个可相 同或不同的选自下述的基团取代 ： 羟基、 烷氧基、 NR3R4、 杂环烷基、 杂芳基或苯基基团， 所述 取代基团本身任选被取代 ； 或者， R1 和 R2 与和它们相连的氮原子形成环状基团， 该环状基 团含有 3-10 个环成员和任选一个或多个选自 O、 S、 N 和 NH 的其它杂原子， 该基团， 包括其含 有的可能的 NH， 任选被取代 ；
NR3R4 如下所述 ： 或者， R3 和 R4 相同或不同， R3 和 R4 之一表示氢原子或烷基基 团， 且 R3 和 R4 的另一个表示氢原子、 或环烷基基团或烷基基团， 其任选被一个或多个可相 同或不同的选自下述的基团取代 ： 羟基、 烷氧基、 杂环烷基、 杂芳基或苯基基团， 所述取代基 团本身任选被取代 ； 或者， R3 和 R4 与和它们相连的氮原子形成环状基团， 该环状基团含有 3-10 个环成员和任选一个或多个选自 O、 S、 N 和 NH 的其它杂原子， 该基团， 包括其含有的可 能的 NH， 任选被取代 ；
R1 和 R2 或 R3 和 R4 分别能够与和它们相连的氮原子形成的环状基团任选被一 个或多个可相同或不同的基团取代， 所述取代基团选自卤素原子、 羟基和烷氧基基团， 和烷 基、 苯基和 CH2- 苯基基团， 其中所述烷基或苯基基团本身任选被一个或多个可相同或不同 的选自下述的基团取代 ： 卤素原子和烷基、 羟基、 烷氧基、 NH2、 NH 烷基和 N( 烷基 )2 基团 ；
所有上述烷基 (alk) 或烷氧基基团含有 1-6 个碳原子，
所述式 (I) 产物为所有可能的外消旋、 对映异构和非对映异构的异构体形式， 且 还为式 (I) 产物与无机和有机酸或与无机或有机碱形成的加成盐。
本发明的主题为上述或下述定义的式 (I) 产物， 其中 ：
Ra 表示氢原子 ； 卤素原子 ； 或苯基基团， 其如下文所示任选被取代 ；
Rb 表示氢原子、 -CO-Rc 基团或 -CO-NRcRd 基团 ；
其中 Rc 表示烷基或环烷基基团， 二者任选被一个或多个选自下述的基团取代 ： 羟 基、 烷氧基、 NR1R2 和苯基， 所述苯基基团本身任选被一个或多个选自下述的基团取代 ： 卤 素原子、 和羟基、 烷氧基、 烷基、 NH2、 NH 烷基和 N( 烷基 )2 基团 ；
Rd 表示氢原子或烷基基团 ；
NR1R2 如下所述 ： 或者， R1 和 R2 相同或不同， R1 和 R2 之一表示氢原子或烷基基 团， 且 R1 和 R2 的另一个表示氢原子、 或环烷基基团或烷基基团， 所述烷基基团任选被一个 或多个可相同或不同的选自下述的基团取代 ： 羟基、 烷氧基、 NR3R4 或苯基基团， 所述取代 基本身任选被取代 ； 或者， R1 和 R2 与和它们相连的氮原子形成环状基团， 该环状基团含有 4-7 个环成员和任选其它选自 O、 S、 N 和 NH 的杂原子， 该基团， 包括其含有的可能的 NH， 任选 被取代 ；
NR3R4 如下所述 ： 或者， R3 和 R4 可相同或不同， 表示氢原子或烷基基团， 所述烷基 基团任选被一个或多个可相同或不同的基团取代， 所述取代基团选自羟基或烷氧基基团 ； 或者， R3 和 R4 与和它们相连的氮原子形成环状基团， 该环状基团含有 4-7 个环成员和任选 其它选自 O、 S、 N 和 NH 的杂原子， 该基团， 包括其含有的可能的 NH， 任选被取代 ；R1 和 R2 或 R3 和 R4 分别能够与和它们相连的氮原子形成的环状基团任选被一个 或多个可相同或不同的基团取代， 所述取代基团如上定义 ；
所有上述烷基和烷氧基基团含有 1-4 个碳原子 ；
所述式 (I) 产物为所有可能的外消旋、 对映异构和非对映异构的异构体形式， 且 还为式 (I) 产物与无机和有机酸或与无机或有机碱形成的加成盐。
本发明的主题为上述或下述定义的式 (I) 产物， 其中 ：
Ra 表示氢原子 ； 卤素原子 ； 或任选被卤素原子取代的苯基基团 ；
Rb 表示氢原子、 -CO-Rc 基团或 -CO-NRcRd 基团 ；
其中 Rc 表示烷基或环烷基基团， 所述烷基或环烷基基团任选被一个或多个选自 下述的基团取代 ： 羟基、 烷氧基和 NR1R2 基团 ；
Rd 表示氢原子 ；
NR1R2 如下所述 ： 或者， R1 和 R2 可相同或不同， 表示氢原子或烷基基团， 所述烷 基基团任选被一个或多个可相同或不同的基团取代， 所述取代基团选自羟基、 烷氧基、 NH2、 NH 烷基和 N( 烷基 )2 基团 ； 或者， R1 和 R2 与和它们相连的氮原子形成环状基团， 该环状基 团含有 4-7 个环成员和任选其它选自 O、 S、 N 和 NH 的杂原子， 该环状基团任选被烷基、 苯基 或 -CH2- 苯基基团取代， 所述烷基、 苯基或 -CH2- 苯基基团本身任选被一个或多个可相同或 不同的选自下述的基团取代 ： 卤素原子和烷基、 羟基、 烷氧基、 NH2、 NH 烷基和 N( 烷基 )2 基 团；
所有上述烷基 (alk) 或烷氧基基团含有 1-4 个碳原子，
所述式 (I) 产物为所有可能的外消旋、 对映异构和非对映异构的异构体形式， 且 还为式 (I) 产物与无机和有机酸或与无机或有机碱形成的加成盐。
在式 (I) 产物中和在下文中 ：
- 术语 “烷基 ( 或 alk) 基团” 表示直链的， 和当适合时支链的， 甲基、 乙基、 丙基、 异 丙基、 丁基、 异丁基、 仲丁基、 叔丁基、 戊基、 异戊基、 己基、 异己基以及庚基、 辛基、 壬基和癸 基基团， 以及其直链或支链的位置异构体 ： 优选上述含有 1-6 个碳原子的烷基基团， 且尤其 是含有 1-4 个碳原子的烷基基团 ；
- 术语 “烷氧基基团” 表示直链的， 和当适合时支链的， 甲氧基、 乙氧基、 丙氧基、 异 丙氧基、 直链丁氧基、 仲丁氧基或叔丁氧基、 戊氧基或己氧基基团， 及其直链或支链的位置 异构体 ： 优选上述含有 1-4 个碳原子的烷氧基基团 ；
- 术语 “卤素原子” 表示氯、 溴、 碘或氟原子， 且优选氯、 溴或氟原子 ；
- 术语 “环烷基基团” 表示含有 3-10 个碳原子的饱和碳环基团， 且由此尤其表示环 丙基、 环丁基、 环戊基和环己基基团， 且最特别是环丙基、 环戊基和环己基基团 ；
- 术语 “杂环烷基基团” 由此表示单环或双环碳环基团， 其含有 3-10 个环成员， 间 隔 (interrupt) 一个或多个可相同或不同的杂原子， 所述杂原子选自氧、 氮或硫原子 ： 例如 可以提及吗啉基、 硫吗啉基、 高吗啉基、 氮杂环丙烷基、 氮杂环丁烷基、 哌嗪基、 哌啶基、 高哌 嗪基、 吡咯烷基、 咪唑烷基， 吡唑烷基、 四氢呋喃基、 四氢噻吩基、 四氢吡喃基、 四氢吡喃、 氧 代二氢哒嗪基或氧杂环丁烷基基团， 所有这些基团任选被取代 ； 尤其可以提及四氢吡喃基、 吗啉基、 硫吗啉基、 高吗啉基、 哌嗪基、 哌啶基、 高哌嗪基或吡咯烷基基团 ；
- 术语 “-O- 杂环烷基基团” 表示如上定义的杂环烷基基团， 其与 -O-( 氧基 ) 官能团相连 ： 例如可以提及吗啉基氧基、 硫吗啉基氧基、 高吗啉基氧基、 氮杂环丙烷基氧基、 氮杂环丁烷基氧基、 哌嗪基氧基、 哌啶基氧基、 高哌嗪基氧基、 吡咯烷基氧基、 咪唑烷基氧 基、 吡唑烷基氧基、 四氢呋喃基氧基、 四氢噻吩基氧基、 四氢吡喃基氧基， 六氢吡喃氧基、 氧 代二氢哒嗪基氧基或氧杂环丁烷基氧基基团， 所有这些基团任选被取代 ； 尤其可以提及四 氢 -2H- 吡喃 -2- 基氧基、 吗啉基氧基、 硫吗啉基氧基、 高吗啉基氧基、 哌嗪基氧基、 哌啶基氧 基、 高哌嗪基氧基或吡咯烷基氧基基团 ；
- 术语 “芳基” 和 “杂芳基” 表示单环或双环， 不饱和或部分不饱和， 分别为碳环和 杂环基团， 其含有最多 12 个环成员， 其可任选含有 -C(O) 环成员， 所述杂环基团含有一个或 多个可相同或不同的杂原子， 所述杂原子选自 O、 N 或 S， 当适合时 N 任选被取代 ；
- 术语 “芳基基团” 由此表示单环或双环基团， 其含有 6-12 个环成员， 例如苯基、 萘 基、 联苯基、 茚基、 芴基和蒽基基团， 尤其是苯基和萘基基团， 且甚至尤其是苯基基团。可以 注意到含有 -C(O) 环成员的碳环基团为， 例如， 四氢萘酮基团 ；
- 术语 “杂芳基基团” 由此表示单环或双环基团， 其含有 5-12 个环成员 ： 单环杂 芳基基团， 例如下述基团 ： 噻吩基如 2- 噻吩基和 3- 噻吩基、 呋喃基如 2- 呋喃基或 3- 呋喃 基、 吡喃基、 吡咯基、 吡咯啉基、 吡唑啉基、 咪唑基、 吡唑基、 吡啶基如 2- 吡啶基、 3- 吡啶基和 噻唑基、 异噻唑基、 二唑基、 噻二唑基、 噻三唑 4- 吡啶基、 吡嗪基、 嘧啶基、 哒嗪基、 唑基、 基、 二唑基、 异 唑基如 3- 或 4- 异 唑基、 呋咱基 (furazanyl) 或四唑基， 其可为游离 唑 的或成盐的， 所有这些基团任选被取代， 其中尤其是下述基团 ： 噻吩基如 2- 噻吩基和 3- 噻 吩基、 呋喃基如 2- 呋喃基、 吡咯基、 吡咯啉基、 吡唑啉基、 咪唑基、 吡唑基、 唑基、 异 基、 吡啶基、 哒嗪基， 这些基团任选被取代 ； 双环杂芳基基团， 例如下述基团 ： 苯并噻吩基如 3- 苯并噻吩基、 苯并噻唑基、 喹啉基、 异喹啉基、 二氢喹啉基、 喹诺酮、 四氢萘酮、 金刚烷基 (adamentyl)、 苯并呋喃基、 异苯并呋喃基、 二氢苯并呋喃、 亚乙基二氧基苯基、 噻蒽基、 苯并 吡咯基、 苯并咪唑基、 苯并 唑基、 硫萘基 (thionaphthyl)、 吲哚基、 氮杂吲哚基、 吲唑基、 嘌呤基、 噻吩并吡唑基、 四氢吲唑基、 四氢环戊烯并吡唑基、 二氢呋喃并吡唑基、 四氢吡咯并 吡唑基、 氧代四氢吡咯并吡唑基、 四氢吡喃并吡唑基、 四氢吡啶并吡唑基或氧代二氢吡啶并 吡唑基， 所有这些基团任选被取代。
杂芳基或双环基团的实例， 可以尤其提及嘧啶基、 吡啶基、 吡咯基、 氮杂吲哚基、 吲 唑基、 吡唑基、 苯并噻唑基或苯并咪唑基基团， 其任选被一个或多个可相同或不同的取代基 取代， 所述取代基如上所述。 式 (I) 产物的羧基基团可以被多种本领域技术人员已知的基团盐化或酯化， 其中 可以提及， 例如 ：
- 盐化化合物， 与无机碱或有机碱形成的盐， 所述无机碱例如钠、 钾、 锂、 钙、 镁或铵 的等价物， 有机碱例如甲基胺、 丙基胺、 三甲基胺、 二乙基胺、 三乙基胺、 N， N- 二甲基乙醇胺、 三 ( 羟基甲基 ) 氨基甲烷、 乙醇胺、 吡啶、 甲基吡啶、 二环己基胺、 吗啉、 苄基胺、 普鲁卡因、 赖 氨酸、 精氨酸、 组氨酸或 N- 甲基葡萄糖胺，
- 酯化化合物， 与形成烷氧基羰基基团的烷基基团形成的酯， 所述烷氧基羰基基团 例如甲氧基羰基、 乙氧基羰基、 叔丁氧基羰基或苄基氧基羰基， 这些烷基基团可被选自例如 下列的基团取代 ： 卤素原子、 和羟基、 烷氧基、 酰基、 酰基氧基、 烷基硫基、 氨基或芳基基团， 例如其为氯甲基、 羟基丙基、 甲氧基甲基、 丙酰基氧基甲基、 甲基硫基甲基、 二甲基氨基乙
基、 苄基或苯乙基基团。
式 (I) 产物与无机或有机酸的加成盐可以为， 例如， 与下列形成的盐 ： 盐酸， 氢溴 酸， 氢碘酸， 硝酸， 硫酸， 磷酸， 丙酸， 乙酸， 三氟乙酸， 甲酸， 苯甲酸， 马来酸， 富马酸， 琥珀酸， 酒石酸， 柠檬酸， 草酸， 乙醛酸， 天门冬氨酸， 抗坏血酸， 烷基单磺酸， 例如甲磺酸， 乙磺酸或 丙磺酸， 烷基二磺酸， 例如、 甲二磺酸或 α， β- 乙二磺酸， 芳基单磺酸如苯磺酸和芳基二磺 酸。
可以理解的是， 立体异构能够以其广义进行定义， 因为化合物的异构体具有相同 的结构式， 但是其多个基团的空间排列不同， 如尤其是在单取代的环己烷中， 其取代基可以 在 a 位或 e 位， 且乙烷衍生物具有多种可能的旋转构型。 然而， 存在其它类型的立体异构， 这 是由于在双键或环上连接的取代基的不同空间排列， 这通常称为几何异构或顺反异构。在 本申请中术语 “立体异构体” 以其最广义的含义使用， 且因此涉及上述所有化合物。
当 NR1R2 或 NR3R4 形成如上定义的环时， 氨化的环可以选自， 尤其是， 吡咯烷基、 吡 唑烷基、 吡唑啉基、 哌啶基、 氮杂卓基、 吗啉基、 高吗啉基、 哌嗪基或高哌嗪基基团， 这些基团 本身任选如上文或下文所述被取代 ： 例如， 被一个或多个可相同或不同的基团取代， 所述取 代基团选自卤素原子和烷基、 羟基、 烷氧基、 苯基和 CH2- 苯基基团， 所述烷基或苯基基团本 身任选被一个或多个可相同或不同的基团取代， 所述取代基团选自卤素原子和烷基、 羟基、 烷氧基、 NH2、 NH 烷基和 N( 烷基 )2 基团。
NR1R2 或 NR3R4 环可尤其选自吡咯烷基基团或吗啉代基团， 其任选被一个或两个 烷基基团基团取代， 或哌嗪基， 所述哌嗪基任选在第二个氮原子上被烷基、 苯基或 CH2- 苯基 基团取代， 所述烷基、 苯基或 CH2- 苯基本身任选被一个或多个可相同或不同的选自下述的 基团取代 ： 卤素原子和烷基、 羟基和烷氧基基团。
本发明的主题为上述或下述定义的式 (I) 产物， 其中 ：
Ra 表示氢原子 ； 碘原子 ； 或任选被卤素原子取代的苯基基团 ；
Rb 表示氢原子、 CO-Rc 基团或 -CO-NRcRd 基团 ；
其中 Rc 表示环丙基基团或烷基基团， 所述烷基基团任选被烷氧基或 NR1R2 基团取 代；
Rd 表示氢原子 ；
NR1R2 如下所述 ： 或者， R1 和 R2 可相同或不同， 表示氢原子或烷基基团 ； 或者， R1 和 R2 与和它们相连的氮原子形成吗啉基或哌嗪基基团， 所述哌嗪基基团任选在第二个氮 原子上被烷基基团取代 ；
上述烷基或烷氧基基团含有 1-4 个碳原子 ；
所述式 (I) 产物为所有可能的外消旋、 对映异构和非对映异构的异构体形式， 且 还为式 (I) 产物与无机和有机酸或与无机或有机碱形成的加成盐。
本发明的主题为最尤其是上述定义的式 (I) 产物， 相应于下式 ：
-N-[6-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基硫基 )-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ] 环丙 烷甲酰胺
-1-[2-( 吗啉 -4- 基 ) 乙基 ]-3-[6-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基硫基 )-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ] 脲
-1-[2-(4- 甲基哌嗪 -1- 基 ) 乙基 ]-3-[6-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基硫基 )-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ] 脲
-1-(2- 甲氧基乙基 )-3-[6-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基硫基 )-1， 3- 苯 并噻唑 -2- 基 ] 脲
-6-[(6- 碘 [1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ) 硫基 ]-1， 3- 苯并噻唑 -2- 胺
-6-{[6-(4- 氟苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻 唑 -2- 胺
-N-{6-[6-(4- 氟苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基硫基 ]-1， 3- 苯并噻 唑 -2- 基 } 环丙烷甲酰胺
-6-{[6-(1- 甲 基 -1H- 吡 唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三 唑 并 [4， 3-a] 吡 啶 -3- 基 ] 硫 基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 胺
-N-(6-{[6-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫 基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺
-N-(6-{[6-(1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺
-N-(6-{[6-((3- 氟 -4- 甲 基 ) 苯 基 )[1， 2， 4] 三 唑 并 [4， 3-a] 吡 啶 -3- 基 ] 硫 基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺
-N-(6-{[6-(3- 氟苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并 噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺
-N-(6-{[6-(1-[2-( 四氢 -2H- 吡喃 -2- 基氧基 ) 乙基 ]-1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺
-N-(6-{[6-(1-(2- 羟 基 乙 基 )-1H- 吡 唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三 唑 并 [4， 3-a] 吡 啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺
-N-(6-{[6-(1- 哌 啶 -4- 基 -1H- 吡 唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三 唑 并 [4， 3-a] 吡 啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺
以及式 (I) 产物与无机和有机酸或与无机或有机碱形成的加成盐。
本发明的主题还为制备如上定义的式 (I) 产物的方法。
根据本发明的产物可以使用常规有机化学方法制备。
式 (I) 化合物的制备
下示流程 1、 2 和 3 阐明了制备式 (I) 产物所用的方法。在该方面， 对于制备所要 求的化合物的方法， 它们不是为了限制本发明的范围。
根据本发明的上述定义的式 (I) 产物由此可尤其根据下示流程 1、 2 和 3 中描述的 方法制备。
因此本发明的主题还为根据如下文定义的流程 1 制备式 (I) 产物的方法。
因此本发明的主题还为根据如下文定义的流程 2 制备式 (I) 产物的方法。
因此本发明的主题还为根据如下文定义的流程 3 制备式 (I) 产物的方法。
流程 1 ：
在上述流程 1 中， 取代基 Ra 和 Rb 具有上述所示的含义。 对于 Ra 和 Rb 具有相同含义的化合物 (I) 可以从其中 Rb ＝ H 的化合物 (I) 获得。
尤其是， 其中 Rb ＝ CORc(Rc 如上定义 ) 的化合物 (I) 可以例如如下获得 ： 在例如溶剂如吡啶的存在下， 在 20℃温度范围， 通过与式 Rc-COCl 的酰氯反应， 在例如溶剂如吡啶的存在下， 在 20℃温度范围， 通过与式 Rc-CO-O-CO-Rc 的酸酐反应， 在下述条件下与式 Rc-COOH 的羧酸反应， 例如， D.DesMarteau 等人 (Chem.Lett.， 2000， 9， 1052) 所述 ： 在 1- 羟基苯并三唑和 1-(3- 二甲基氨基丙基 )-3- 乙基碳二亚胺的存 在下， 且在碱如三乙基胺的存在下， 温度为 20℃至溶剂的回流温度。
尤其是， 其中 Rb ＝ CO-O-Rc(Rc 如上定义 ) 的化合物 (I) 可以如下获得， 例如， 通 过氯甲酸酯 Rc-O-COX(X ＝ Cl) 与其中 Rb ＝ H 的化合物 (I) 反应， 该反应在溶剂如四氢呋
喃中， 在碱如碳酸氢钠的存在下， 或在吡啶中， 在 20℃温度范围进行。
尤其是， 其中 Rb ＝ CON(Rc)Rd(Rc 和 Rd 如上定义 ) 的化合物 (I) 可如下获得 ： 例 如， 其中 R ＝苯基的氨基甲酸酯 (D) 与胺 Rc(Rd)NH(Rc 和 Rd 如上定义 ) 反应， 该反应在非 质子溶剂如四氢呋喃的存在下， 在温度范围 20℃进行。
氨基甲酸酯 (D) 可如下获得， 例如， 通过氯甲酸酯 R-O-COX(X ＝ Cl) 与其中 Rb ＝ H 的化合物 (I) 反应， 该反应在溶剂如四氢呋喃中， 在碱如碳酸氢钠的存在下， 或在吡啶中， 在 20℃温度范围进行。
尤其是， 其中 Rb ＝ Rc(Rc 如上定义 ) 的化合物 (I) 可以如下获得， 例如 ： - 根据本领域技术人员的常用方法将其中 R ＝叔丁基的氨基甲酸酯 (E) 脱保护， 例如使用三氟乙酸， 在溶剂如二氯甲烷中， 在 20℃温度范围进行 ；
- 从其中 Rb ＝ H 的化合物 (I)， 通过使用专利 EP 0408437 或通过 R.AGlennon 等 人 (Journal of Medicinal Chemistry， 1981， 24， 766-769) 的方法进行。
氨基甲酸酯 (E) 可以如下获得， 例如， 通过其中 R ＝叔丁基的氨基甲酸酯 (D) 与卤 化物 Rc-X(Rc 如上定义 ) 反应， 该反应在溶剂如 N， N- 二甲基甲酰胺的存在下， 在碱如氢化 钠的存在下， 在 20℃至 90℃的温度进行。
其中 Rb ＝ H 的化合物 (I) 可以根据本领域技术人员的常用方法通过环化化合物 (C) 获得， 例如通过 H.Masaichi 等人 (Journal of Medicinal Chemistry， 2007， 50(18)， 4453-4470) 描述的方法， 通过与硫氰酸钾和溴反应， 该反应在酸如乙酸的存在下， 在 20℃ 至溶剂的回流温度进行。
化合物 (C) 可以根据本领域技术人员的常用方法通过还原化合物 (B) 获得， 例如 使用氯化锡， 在溶剂如乙醇中， 或使用氢气在催化剂如钯 / 炭或 Raney 镍的存在下进行。
化合物 (B) 可以如下获得 ： 通过使化合物 (A)( 其中 Ra 如上定义 ) 与 4- 硝基苯四 氟硼酸重氮盐 ( 市售产品 ) 偶联， 该反应在例如 M.A.Biamonte 等人 (Journal of Organic Chemistry， 2005， 70， 717-720) 所述条件下， 可能在碱如碳酸氢钠的存在下， 例如在溶剂如 二甲亚砜、 丙酮或乙腈中， 在 20℃至溶剂的回流温度进行。
化合物 (A) 或者市售获得， 或者通过专利 EP 0254623 或专利 US 4244953 中描述 的方法制备， 该方法使用式 (A2) 肼基衍生物， 通过与二硫化碳反应， 该反应在溶剂如吡啶 或氯仿中， 在 20℃至溶剂的回流温度进行。
化合物 (A2) 或者市售获得， 或者通过使用专利 EP 0254623， 美国专利 4244953 或 根据 R.Church 等人 (Journal of Organic Chemistry 1995， 60， 3750-3758) 中所述的方法 获得， 使用 2- 氯吡啶衍生物 (A1)， 通过与肼或水合肼反应。
化合物 (A1) 或者市售获得， 或者可使用 2- 氯 -5- 碘吡啶 ( 市售化合物 ) 如下获 得， 例如 ：
使用式 Ra-B(OH)2 的硼酸， 在磷酸钾和四 ( 三苯基膦 ) 合钯的存在下， 在溶剂如二 甲亚砜中， 在 80℃的温度范围， 或使用硼酸酯 Ra-B(OR)2， 在二氯二 ( 三苯基膦 ) 合钯的存 在下， 在溶剂例如 1， 2- 二甲氧基乙烷中， 在碱如 1N 氢氧化钠的存在下， 在 80℃的温度范围 进行。
其中 Rb ＝ H 的化合物 (I) 也可从其中 Rb ＝ H 和 Ra ＝ I 的化合物 (I) 获得， 其如 对于制备化合物 (A1) 所述， 通过与式 Ra-B(OH)2 的硼酸反应， 或通过与硼酸酯 Ra-B(OR)2 反 应。
流程 2 ：
在上述流程 2 中， 取代基 Ra 和 Rb 具有上文所示含义。
化合物 (I)( 其中 Ra 和 Rb 具有上述相同含义 ) 可以通过使其中 Ra 如上所述的化 合物 (A) 与其中 Rb 如上所述的化合物 (H) 偶联获得， 如对于上述化合物 (B) 的制备所述。
化合物 (H)( 其中 Rb 具有上述相同含义 ) 可以根据本领域技术人员的常用方法通 过化合物 (G) 的重氮化获得， 例如， 通过与亚硝酸 (HNO2) 或亚硝酸钠 (NaNO2) 反应， 该反应 在酸如四氟硼酸水溶液的存在下， 在 20℃温度范围进行。
化合物 (G)( 其中 Rb 具有上述相同含义 ) 可以根据本领域技术人员的常用方法通 过还原化合物 (F) 获得， 例如， 使用氢气， 在催化剂如钯 / 炭或 Raney 镍的存在下， 在溶剂如 四氢呋喃， 例如， 在 20℃至溶剂的回流温度进行。
化合物 (F)( 其中 Rb 具有上述相同含义 ) 可以从 2- 氨基 -6- 硝基苯并噻唑 ( 市 售产品 ) 获得， 如从其中 Rb ＝ H 的化合物 (I) 制备化合物 (I) 中所述。
流程 3 ：
在上述流程 3 中， 取代基 Ra 和 Rc 具有上文所示的含义。
化合物 (I)( 其中 Ra 具有上述相同含义， 其中 Rb ＝ CORc) 可以通过其中 Ra 如 上所述的化合物 (L) 与其中 Rc 如上所述的化合物 (K) 在例如 R.Varala 等人 (Chemistry Letters， 2004， 33(12)， 1614-1615)， 或 通 过 M.Winn 等 人 (Journal of Medicinal Chemistry， 2001， 44， 4393-4403) 所述条件下偶联获得， 在碱例如碳酸钾的存在下， 在溶剂 如二甲亚砜中， 在 20℃至溶剂的回流温度进行。该反应也可在微波中进行。
化合物 (K)( 其中 Rc 具有上述相同含义 ) 可以如下获得， 例如， 通过使用 DL- 二硫 苏糖醇还原化合物 (J)， 该反应在碳酸氢钠或磷酸二氢钾的存在下， 在溶剂如乙醇中， 且在 20℃至溶剂的回流温度进行。
化合物 (J)( 其中 Rc 具有上述相同含义 ) 可以从 2- 氨基 -1， 3- 苯并噻唑 -6- 基 硫氰酸酯 ( 市售产品 ) 获得， 如上述从其中 Rb ＝ H 的化合物 (I) 制备其中 Rb ＝ CORc 的化 合物 (I) 所述。
化合物 (L)， 或者市售获得 (Ra ＝ H)， 或者根据本领域技术人员的常用方法通过溴 化化合物 (L1) 制备， 例如根据 E.S.Hand 等人 (Journal of Organic Chemistry， 1980， 45， 3738-3745) 所述的条件， 或使用溴， 在溶剂如乙醇中， 在 20℃至溶剂的回流温度进行。
化合物 (L1)， 或者市售获得 (Ra ＝ H)， 或者可以使用 6- 溴 [1， 2-4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 ( 市售产品 ) 通过偶联反应获得， 通过使用 C.Enguehard 等人 (Helvetica Chimica Acta(2001)， 84， 3610-3614) 所述的方法， 例如 ：
- 使用式 Ra-B(OH)2 的硼酸， 在碳酸氢钠和四 ( 三苯基膦 ) 合钯的存在下， 在溶剂
如二甲亚砜或二烷中， 在 80℃温度范围进行，- 使用溴酸酯 Ra-B(OR)2， 在二氯二 ( 三苯基膦 ) 合钯的存在下， 在溶剂例如 1， 2- 二甲氧基乙烷中， 在碱如 1N 氢氧化钠的存在下， 在 80℃温度范围进行。
在式 (A)， (A1)， (A2)， (F)， (G)， (L) 和 (L1) 的起始产物中， 一些是已知的， 且或者 可市售获得， 或者根据本领域技术人员已知的常规方法， 例如从市售产品获得。
本领域技术人员理解， 为了进行上述本发明的方法， 可能需要引入对于氨基、 羧基 和醇官能团的保护基以避免副反应。
可以提及下述非排他的保护反应性官能团的实例 ：
- 羟基可以如下保护， 例如， 使用烷基基团如叔丁基、 三甲基硅烷基、 叔丁基二甲基 硅烷基、 甲氧基甲基、 四氢吡喃基、 苄基或乙酰基，
- 氨基可以如下保护， 例如， 使用乙酰基、 三苯甲基、 苄基、 叔丁氧基羰基 (BOC)、 苄 基氧基羰基或邻苯二甲酰亚氨基基团或肽化学中已知的其它基团。
酸官能团可以如下保护， 例如， 以酯的形式， 为容易离去的酯如苄基或叔丁基酯或 肽化学中已知的酯。
可以使用的多种保护基的列表见于本领域技术人员已知的书中， 例如， 专利 BF 2 499 995 中。
注意， 如果需要且必须， 能够处理通过上述方法由此获得的中间体产物或式 (I) 产物， 以获得其它中间体或其它式 (I) 产物， 其通过一个或多个对于本领域技术人员已知 的转化反应进行， 例如 ：
a) 酸官能团的酯化反应，
b) 酯官能团得到酸官能团的皂化反应，
c) 游离或酯化的羧基官能团得到醇官能团的还原反应，
d) 将烷氧基官能团转化为羟基官能团， 或将羟基官能团转化为烷氧基官能团的反 应，
e) 加载到被保护的反应性官能团上的保护基的脱除反应，
f) 与无机或有机酸或与碱以得到相应盐的盐化反应，
g) 外消旋形式得到拆分产物的拆分反应，
因此， 所述式 (I) 产物以所有可能的外消旋、 对映异构和非对映异构的异构体形 式获得。
反应 a) 至 g) 可以在本领域技术人员已知的常规条件下进行， 例如下文所示。
a) 视需要， 上述产物可以对于可能的羧基官能团进行酯化反应， 其可以根据本领 域技术人员已知的常规方法进行。
b) 视需要， 酯官能团向上述产物的酸官能团的可能的转化可以在本领域技术人员 已知的常规方法下进行， 尤其是通过酸或碱水解， 例如使用氢氧化钠或氢氧化钾， 在醇介质 中， 例如在甲醇中， 或使用盐酸或硫酸进行。
皂化反应可以根据本领域技术人员已知的常规方法进行， 例如在溶剂如甲醇或乙 醇、 二
烷或二甲氧基乙烷中， 在氢氧化钠或氢氧化钾的存在下进行。c) 视需要， 上述产物的可能的游离或酯化的羧基官能团可以通过本领域技术人员 已知的方法还原， 得到醇官能团 ； 视需要， 可能的酯化的羧基官能团可以通过本领域技术人员已知的方法还原， 得到醇官能团， 且尤其是使用氢化铝锂， 在溶剂例如四氢呋喃， 或二烷或乙醚中。
视需要， 上述产物的可能的游离羧基官能团可以还原， 得到醇官能团， 尤其是使用 硼氢化物。
d) 视需要， 上述产物的可能的烷氧基官能团 ( 如尤其是甲氧基 ) 可以在本领域技 术人员已知的条件下转化为羟基官能团， 例如使用三溴化硼， 在溶剂例如二氯甲烷中， 使用 吡啶盐酸盐或氢溴酸盐， 或使用氢溴酸或盐酸在水或三氟乙酸中回流进行。
e) 保护基的脱除 ( 例如上述那些 ) 可以在本领域技术人员已知的通常条件下进 行， 尤其是通过使用酸如盐酸、 苯磺酸或对 - 甲苯磺酸、 甲酸或三氟乙酸的酸水解进行， 或 通过催化氢化进行。
邻苯二甲酰亚氨基可以用肼脱除。
f) 视需要， 上述产物根据本领域技术人员已知的常规方法进行盐化反应， 例如使 用无机或有机酸或使用无机或有机碱 ： 该盐化反应可如下进行， 例如， 在盐酸， 或酒石酸、 柠 檬酸或甲磺酸的存在下， 在醇例如乙醇或甲醇中。
g) 上述产物的可能的光学活性形式可以根据本领域技术人员已知的常规方法通 过拆分外消旋体制备。
上述定义的式 (I) 产物及其与酸的加成盐表现出有利的药理学性质， 尤其具有如 上所述的它们的激酶抑制特性。
本发明的产物能够尤其用于治疗肿瘤。
本发明的产物由此可增加常用抗肿瘤药物的治疗效果。
这些性质证明了它们的治疗用途， 且本发明的主题尤其为， 作为药物的上述定义 的式 (I) 产物， 所述式 (I) 产物为所有可能的外消旋、 对映异构和非对映异构的异构体形 式， 且还为所述式 (I) 产物与药学可接受的无机或有机酸或与药学可接受的无机或有机碱 形成的加成盐。
本发明的主题最尤其是， 作为药物的相应于下式的该产物 ：
-N-[6-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基硫基 )-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ] 环丙 烷甲酰胺
-1-[2-( 吗啉 -4- 基 ) 乙基 ]-3-[6-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基硫基 )-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ] 脲
-1-[2-(4- 甲基哌嗪 -1- 基 ) 乙基 ]-3-[6-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 硫基 )-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ] 脲
-1-(2- 甲氧基乙基 )-3-[6-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基硫基 )-1， 3- 苯 并噻唑 -2- 基 ] 脲
-6-[(6- 碘 [1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ) 硫基 ]-1， 3- 苯并噻唑 -2- 胺
-6-{[6-(4- 氟苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻 唑 -2- 胺
-N-{6-[6-(4- 氟苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基硫基 ]-1， 3- 苯并噻 唑 -2- 基 } 环丙烷甲酰胺
-6-{[6-(1- 甲 基 -1H- 吡 唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三 唑 并 [4， 3-a] 吡 啶 -3- 基 ] 硫 基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 胺-N-(6-{[6-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫 基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺
-N-(6-{[6-(1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺
-N-(6-{[6-((3- 氟 -4- 甲 基 ) 苯 基 )[1， 2， 4] 三 唑 并 [4， 3-a] 吡 啶 -3- 基 ] 硫 基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺
-N-(6-{[6-(3- 氟苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并 噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺
-N-(6-{[6-(1-[2-( 四氢 -2H- 吡喃 -2- 基氧基 ) 乙基 ]-1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺
-N-(6-{[6-(1-(2- 羟 基 乙 基 )-1H- 吡 唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三 唑 并 [4， 3-a] 吡 啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺
-N-(6-{[6-(1- 哌 啶 -4- 基 -1H- 吡 唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三 唑 并 [4， 3-a] 吡 啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺
以及所述式 (I) 产物与药学可接受的无机或有机酸或与药学可接受的无机或有 机碱形成的加成盐。 本发明还涉及药物组合物， 其含有， 作为活性成分的， 至少一种上述定义的式 (I) 产物或该产物的药学可接受的盐或该产物的前药， 如果适合时， 含有药学可接受的载体。
本发明因此包括药物组合物， 其含有， 作为活性成分的， 至少一种上述药物。
本发明的该药物组合物也可以， 如果适合时， 含有其它抗有丝分裂药物的活性成 分， 例如尤其是， 基于紫杉醇、 顺铂、 DNA 插入试剂等的那些。
这些药物组合物可以口服给药、 胃肠外给药或局部施用到皮肤和粘膜而局部给药 或通过静脉注射或肌内注射。
这些组合物可以为固体或液体， 且可以为人用药物中常用的药物形式， 例如单一 的或糖包衣的片剂、 丸剂、 锭剂、 胶囊、 滴剂、 颗粒剂、 注射剂、 软膏剂、 乳膏剂或凝胶剂 ； 它们 可以根据常规方法制备。其中， 活性成分可以掺入到在这些药物组合物中常规施用的赋形 剂中， 所述赋形剂如滑石， 阿拉伯胶、 乳糖、 淀粉、 硬脂酸镁、 可可脂、 水性或非水性载体、 动 物或植物源的脂质、 石蜡衍生物、 乙二醇、 多种润湿剂、 分散剂或乳化剂和防腐剂。
通常的剂量 ( 其根据所用产物、 所治疗的个体和所关注的病况而改变 )， 可以例 如， 成人 0.05 至 5g/ 天， 或优选 0.1 至 2g/ 天。
本发明的主题还为上述定义的式 (I) 产物或这些产物的药学可接受的盐在制备 用于抑制蛋白激酶活性的药物中的用途。
本发明的主题还为上述定义的式 (I) 产物在制备用于治疗或预防特征在于蛋白 激酶活性失调的疾病的药物中的用途。
该药物可尤其用于治疗或预防哺乳动物的疾病。
本发明的主题还为上述定义的用途， 其中所述蛋白激酶为蛋白酪氨酸激酶。
本发明的主题还为上述定义的用途， 其中所述蛋白酪氨酸激酶为 MET 或其突变体 形式。
本发明的主题还为上述定义的用途， 其中所述蛋白激酶在细胞培养物中。
本发明的主题还为上述定义的用途， 其中所述蛋白激酶在哺乳动物中。
本发明的主题尤其为上述定义的式 (I) 产物在制备用于预防或治疗与不可控的 增殖相关的疾病的药物中的用途。
本发明的主题尤其为上述定义的式 (I) 产物在制备用于治疗或预防选自下列疾 病的药物中的用途 ： 血管增生性病症、 纤维化病症、 ‘肾小球系膜’ 细胞增殖病症、 代谢性病 症、 变态反应、 哮喘、 血栓症、 神经系统疾病、 视网膜病、 牛皮癣、 类风湿性关节炎、 糖尿病、 肌 变性和癌症。
本发明的主题由此最尤其为上述定义的式 (I) 产物在制备用于治疗或预防肿瘤 疾病， 且尤其用于治疗癌症的药物中的用途。
在这些癌症中， 关注的是对于细胞毒剂有抗性的实体瘤或流体瘤的治疗和癌症的 治疗。
本发明所列产物可以尤其用于治疗原发性肿瘤和 / 或转移瘤， 尤其是胃癌、 肝癌、 肾癌、 卵巢癌、 结肠癌、 前列腺癌、 肺癌 (NSCLC 和 SCLC)、 成胶质细胞瘤、 甲状腺癌、 膀胱癌、 乳腺癌、 黑素瘤、 淋巴或骨髓造血肿瘤、 肉瘤、 脑癌、 喉癌、 淋巴系统癌、 骨癌和胰腺癌。
本发明的主题也为上述定义的式 (I) 产物在制备用于癌症化疗的药物中的用途。
该用于癌症化疗的药物可单独使用或组合使用。
本发明的产物可以尤其单独给药或与化疗或放疗组合给药， 或例如， 与其它治疗 药物组合给药。
该治疗药物可以为常用的抗肿瘤药物。
作为激酶抑制剂， 可以提及丁内酯、 夫拉平度 (flavopirido1) 和 2-(2- 羟基乙基 氨基 )-6- 苄基氨基 -9- 甲基嘌呤， 也称为奥罗莫星。
本发明的主题也为， 作为新颖的工业产物的， 上文定义和下文所述的式 (A)、 (B)、 (C)、 (D)、 (E)、 (H)、 (L)、 (L1)、 (J) 和 (K) 的合成中间体 ：
其中 Ra、 Rb 和 Rc 具有上述的含义， 且 R 表示叔丁基或苯基基团。
下述式 (I) 产物的实施例是用于说明本发明而非限制本发明。
实验部分
本发明化合物的命名使用 ACDLABS 软件 10.0 版进行。
400MHz1H NMR 图谱在 Bruker Avance DRX-400 光谱仪上获得， 以化学位移 (δ， ppm) 表示， 在溶剂 d6- 二甲亚砜 (DMSO-d6) 中， 以 2.5ppm 作为参照， 在 303K 的温度进行。
红外 (IR) 光谱在 Nicolet Nexus 傅里叶变换红外光谱仪上获得 ； 光谱范围为 4000 -1 -1 至 400cm ， 分辨率为 2cm 。
质谱 (MS) 通过方法 A 或方法 B 获得 ：
方法 A ：
Waters UPLC-SQD 仪器 ； 离子化 ： 阳离子和 / 或阴离子模式电喷雾 (ES+/-) ； 色谱 条件 ： 柱子 ： Acquity BEH C18 1.7μm-2.1x50mm ； 溶剂 ： A： H2O(0.1％甲酸 )B ： CH3CN(0.1％ 甲酸 ) ； 柱温 ： 50 ℃ ； 流速 ： 1ml/ 分钟 ； 梯度 (2 分钟 ) ： 0.8 分钟内 5-50 ％的 B ； 1.2 分钟 ： 100％的 B ； 1.85 分钟 ： 100％的 B ； 1.95 ： 5％的 B ； 保留时间＝ Tr( 分钟 )。
方法 B ：
Waters ZQ 仪器 ； 离子化 ： 阳离子和 / 或阴离子模式电喷雾 (ES+/-) ； 色谱条件 ： 柱 子： XBridge C18 2.5μm-3x 50mm ； 溶剂 ： A： H2O(0.1 ％甲酸 )B ： CH3CN(0.1 ％甲酸 ) ； 柱温 ： 70℃； 流速 ： 0.9ml/ 分钟 ； 梯度 (7 分钟 ) ： 5.3 分钟内 5-100％的 B ； 5.5 分钟 ： 100％的 B ； 6.3
分钟 ： 5％的 B ； 保留时间＝ Tr( 分钟 )。
实施例 1 ： 6-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基硫基 )-1， 3- 苯并噻唑 -2- 胺
实施例 1a ： 6-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基硫基 )-1， 3- 苯并噻唑 -2- 胺
该化合物能够以下述方法制备 ：
在一步中将 1.84g 的硫氰酸钾加入到 1.15g 的 4-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡 啶 -3- 基硫基 ) 苯胺在 33ml 的冰醋酸中的溶液中。搅拌大约 15 分钟后， 滴加 0.243ml 的 溴 ( 稀释在 5ml 的冰醋酸中 )， 同时保持温度为约 20℃。沉淀逐渐形成， 且将反应混合物在 20℃温度范围搅拌大约 18 小时， 然后倒入 100ml 水中。通过添加碳酸钾将 pH 调节为约 8。 在 20℃温度范围搅拌 3 小时后， 将沉淀旋转 - 过滤 - 干燥 (spin-filter-dried)， 并用 20ml 水洗涤 3 次， 且在干燥器中， 在减压下， 通过五氧化磷干燥。得到 1.31g 的 6-([1， 2， 4] 三唑 并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基硫基 )-1， 3- 苯并噻唑 -2- 胺， 其为黄色固体形式。
熔点 ： 260-266℃ (Büchi)。
MS ： 方法 B ； [M+H]+m/z ＝ 300 ； [M-H]-m/z ＝ 298 ； Tr ＝ 2.38 分钟。 1
H NMR(400MHz ，DMSO-d 6 ) δ ppm 7.10(td ，J ＝ 6.8 ， 1.0Hz ， 1H)7.26(m ， 2H)7.48(ddd， J ＝ 9.3， 6.8， 1.0Hz， 1H)7.61( 宽 s， 2H)7.80(m， 1H)7.88(dt， J ＝ 9.3， 1.0Hz， 1H)8.48(dt， J ＝ 6.8， 1.0Hz， 1H)。
实施例 1b ： 4-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基硫基 ) 苯胺
该化合物能够以下述方法制备 ：
将 1.5g 的 3-[(4- 硝基苯基 ) 硫基 ][1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶添加到 6.21g 氯 化亚锡二水合物在 8ml 乙醇中的溶液中。将所得橙色溶液置于 60℃。在该温度滴加 8.2ml 的 10N 盐酸水溶液， 且在该相同温度将反应混合物搅拌大约 30 分钟。回到 20℃温度范围 后， 加入 200ml 水， 且混悬液的 pH 通过添加 30％氢氧化钠调节至大约 12。产物用 250ml 乙 酸乙酯萃取 3 次。合并的有机相用 200ml 水洗涤 3 次， 然后用 200ml 饱和氯化钠水溶液洗 涤， 经硫酸镁干燥， 过滤， 并在减压下浓缩。得到 1.09g 的 4-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡 啶 -3- 基硫基 ) 苯胺， 其为米色固体形式。
熔点 ： 210℃ ( bench) +
MS ： 方法 A ； [M+H] m/z ＝ 243 ； Tr ＝ 0.42 分钟。 1
H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 5.43( 宽 s， 2H)6.50(d， J ＝ 8.5Hz， 2H)7.08(td， J ＝ 6.9， 1.0Hz， 1H)7.21(d， J ＝ 8.5Hz， 2H)7.45(ddd， J ＝ 9.3， 6.9， 1.0Hz， 1H)7.84(dt， J＝ 9.3， 1.0Hz， 1H)8.47(dd， J ＝ 6.9， 1.0Hz， 1H)。
实施例 1c ： 3-[(4- 硝基苯基 ) 硫基 ][1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶
该化合物能够以下述方法制备 ：
分小份将 1.57g 的 4- 硝基苯四氟硼酸重氮盐加入到 1g 的 [1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 硫醇在 15ml 二甲亚砜中的溶液中。在 20℃温度范围搅拌 4 天后， 将混合物倒入 100ml 水中。将沉淀旋转 - 过滤 - 干燥， 用 20ml 水洗涤 3 次， 并用 10ml 乙醇和 10ml 乙醚洗 涤一次， 然后风干。得到 1.22g 的 3-[(4- 硝基苯基 ) 硫基 ][1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶， 其为黄色固体形式。
熔点 ： 178-180℃ ( bench) +
MS ： 方法 B ； [M+H] m/z ＝ 273 ； Tr ＝ 3.10 分钟。30102159543 A CN 102159549
1说明书23/37 页H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 7.16(td， J ＝ 6.7， 1.1Hz， 1H)7.31(d， J ＝ 9.0Hz， 2H)7.58(ddd， J ＝ 9.3， 6.8， 1.1Hz， 1H)8.01(dt， J ＝ 9.3， 1.1Hz， 1H)8.14(d， J ＝ 9.0Hz， 2H)8.42(dt， J ＝ 6.8， 1.1Hz， 1H)。
实施例2： N-[6-([1， 2， 4] 三 唑 并 [4， 3-a] 吡 啶 -3- 基 硫 基 )-1， 3- 苯 并 噻 唑 -2- 基 ] 环丙烷甲酰胺
实 施 例 2a ： N-[6-([1， 2， 4] 三 唑 并 [4， 3-a] 吡 啶 -3- 基 硫 基 )-1， 3- 苯 并 噻 唑 -2- 基 ] 环丙烷甲酰胺
该化合物能够以下述方法制备 ：
将 0.037ml 的 环 丙 烷 甲 酰 氯 加 入 到 0.1g 的 6-([1， 2， 4] 三 唑 并 [4， 3-a] 吡 啶 -3- 基硫基 )-1， 3- 苯并噻唑 -2- 胺和 2ml 吡啶的混悬液中。在 20℃温度范围过夜后， 加入 0.037ml 环丙烷甲酰氯。在 20℃温度范围过夜后， 再加入 0.037ml 环丙烷甲酰氯。在 20℃温度范围过夜后， 加入 10ml 水， 且将沉淀旋转 - 过滤 - 干燥， 用 2ml 水洗涤 3 次， 2ml 乙 醇洗涤 3 次， 2ml 乙醚洗涤 2 次， 且在 50℃减压下烘箱干燥。得到 0.068g 的 N-[6-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基硫基 )-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ] 环丙烷甲酰胺， 其为固体形式。
熔点 ： 187-190℃ ( bench) +
MS ： 方法 A ； [M+H] m/z ＝ 368 ； [M-H]-m/z ＝ 366 ； Tr ＝ 0.71 分钟。 1
H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 0.94(m， 4H)1.96(m， 1H)7.10(td， J ＝ 6.8， 1.0Hz， 1H)7.35(dd， J ＝ 8.6， 2.2Hz， 1H)7.51(ddd， J ＝ 9.3， 6.8， 1.0Hz， 1H)7.66(d， J ＝ 8.6Hz， 1H)7.91( 宽 d， J ＝ 9.3Hz， 1H)8.05(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)8.47( 宽 d， J ＝ 6.8Hz， 1H)12.67( 宽 s， 1H)。
化合物 N-[6-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基硫基 )-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ] 环丙烷甲酰胺也能够以下述方法制备 ：
将 100mg 的 2-[( 环丙基羰基 ) 氨基 ]-1， 3- 苯并噻唑 -6- 重氮四氟硼酸盐添加到 36.44mg 的 [1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 硫醇， 20.25mg 碳酸氢钠和 2ml 乙腈的混 悬液中。在 20℃温度范围搅拌 6 天后， 将混合物倒入 20ml 水中。将沉淀旋转 - 过滤 - 干 燥， 用 10ml 乙醚洗涤 2 次， 然后风干。由此得到 40mg 的 N-[6-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡 啶 -3- 基硫基 )-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ] 环丙烷甲酰胺。
实施例 2b ： 2-[( 环丙基羰基 ) 氨基 ]-1， 3- 苯并噻唑 -6- 重氮 该化合物能够以下述方法得到 ：四氟硼酸盐将 133.1mg 亚硝酸钠和 1.5ml 水添加到 0.5g 的 N-(6- 氨基 -1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺和 2ml 四氟硼酸水溶液 (48％ ) 的溶液中。将反应介质在环境温度持续搅拌 16 小时。滤出形成的沉淀， 用乙醚洗涤， 然后风干。由此得到 566mg 的 2-[( 环丙基羰基 ) 四氟硼酸盐， 其为白色固体形式。 熔点 ： 200℃ ( bench) + MS ： 方法 A ； [M] ： m/z ＝ 245 ； [BF4]- ： m/z ＝ 87 ； Tr ＝ 0.28 分钟。 IR ： 2253cm-1( 芳基 - 重氮 阳离子 ) ； 1150-1000cm-1， 533 和 523cm-1( 四氟硼酸氨基 ]-1， 3- 苯并噻唑 -6- 重氮
根 )。
实施例 2c ： N-(6- 氨基 -1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺该化合物能够以下述方法制备 ：
将 1.5g 的 N-(6- 硝基 -1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺， 150mg 钯 / 炭 (10％ ) 和 150ml 四氢呋喃加入到高压釜中。 然后反应介质在 15 巴的氢气压下搅拌， 并加热至 50℃。 回至常压和环境温度后， 反应介质通过硅藻土过滤， 且滤液在减压下蒸发浓缩。由此得到 1.3g 的 N-(6- 氨基 -1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺， 其为白色固体形式。
熔点＞ 260℃ ( bench) +
MS ： 方法 A ； [M+H] ： m/z 234 ； Tr ＝ 0.34 分钟。
实施例 2d ： N-(6- 硝基 -1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺
该化合物能够以下述方法制备 ：
将 2.3ml 环丙烷甲酰氯滴加至 5g 的 2- 氨基 -6- 硝基苯并噻唑 ( 市售产品 ) 和 50ml 无水吡啶的混悬液中。然后反应混合物在环境温度持续搅拌 24 小时。滤出形成的沉 淀， 用 100ml 水洗涤， 用 10ml 乙醇洗涤 2 次， 并用 20ml 乙醚洗涤 2 次， 然后旋转 - 过滤 - 干 燥并风干。由此得到 5.14g 的 N-(6- 硝基 -1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺， 其为白 色粉末形式。
熔点＞ 260℃ ( bench) H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 0.92-1.05(m， 4H)1.97-2.08(m， 1H)7.86(d， J＝ 8.9Hz， 1H)8.26(dd， J ＝ 8.9， 2.4Hz， 1H)9.01(d， J ＝ 2.4Hz， 1H)13.02( 宽 m， 1H)。
实施例 3 ： 1-[2-( 吗啉 -4- 基 ) 乙基 ]-3-[6-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 硫基 )-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ] 脲
实施例 3a ： 1-[2-( 吗啉 -4- 基 ) 乙基 ]-3-[6-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 硫基 )-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ] 脲
该化合物能够以下述方法制备 ：
将 0.1ml 的 2-( 吗啉 -4- 基 ) 乙胺添加到 0.3g 的 [6-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基硫基 )-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ] 氨基甲酸苯酯在 7ml 四氢呋喃中的混悬液中。
在 20℃温度范围搅拌过夜后， 加入 0.028ml 的 2-( 吗啉 -4- 基 ) 乙胺， 且反应混合 物在 20℃温度范围搅拌过夜。然后将混合物倒入 100ml 二氯甲烷中。有机相用 50ml 的 2N 氢氧化钠水溶液洗涤。水相中加入冰醋酸以调节 pH 至约 4， 并用 100ml 二氯甲烷萃取 3 次， 用 100ml 乙酸乙酯萃取 3 次， 并用 100ml 正丁醇萃取 3 次， 且所得产物经硫酸镁干燥， 过滤， 并在减压下浓缩。得到固体， 并加入到 20ml 水中， 旋转 - 过滤 - 干燥， 用 2ml 水洗涤 2 次， 5ml 乙腈洗涤 3 次， 并用 5ml 乙醚洗涤 3 次， 然后风干。得到 0.13g 的 1-[2-( 吗啉 -4- 基 ) 乙基 ]-3-[6-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基硫基 )-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ] 脲， 其为 白色固体形式。
熔点 ： 204-207℃ ( bench)
MS ：方 法 A ； [M+H]+m/z ＝ 456 ； [M+H-C7H12N2O2]+m/z ＝ 300 ； [C7H13N2O2]+m/z ＝ 157( 基峰 ) ； [M-H]-m/z ＝ 454 ； Tr ＝ 0.45 分钟。 1
H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 2.35-2.44(m， 6H)3.25(m 部分掩蔽的， 2H)3.58(m， 4H)6.88( 宽 m， 1H)7.11( 宽 d， J ＝ 6.8Hz， 1H)7.29(dd， J ＝ 8.3， 2.0Hz， 1H)7.44-7.53(m， 2H)7.90( 宽 d， J ＝ 9.3Hz， 1H)7.95( 宽 s， 1H)8.48( 宽 d， J ＝ 6.8Hz， 1H)11.23( 宽 m， 1H)。
实 施 例 3b ： [[6-([1， 2， 4] 三 唑 并 [4， 3-a] 吡 啶 -3- 基 硫 基 )-1， 3- 苯 并 噻
32唑 -2- 基 ] 氨基甲酸苯酯
该化合物能够以下述方法制备 ：
将 1.68ml 氯甲酸苯酯然后 2.7ml 水和 1.12g 碳酸氢钠添加到 1g 的 6-([1， 2， 4] 三 唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基硫基 )-1， 3- 苯并噻唑 -2- 胺在 27ml 四氢呋喃中的混悬液中。混 合物在 20℃温度范围搅拌大约 48 小时。将沉淀旋转 - 过滤 - 干燥， 用 10ml 四氢呋喃 ( 含 10％水 ) 洗涤， 并用 10ml 乙酸乙酯洗涤 3 次， 并风干。得到 0.59g 的 [[6-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基硫基 )-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ] 氨基甲酸苯酯。
MS ： 方法 B ； [M+H]+m/z ＝ 420 ； [M-H]-m/z ＝ 418 ； Tr ＝ 3.71 分钟。 1
H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 7.11(td， J ＝ 6.8， 1.0Hz， 1H)7.25-7.33(m， 3H)7.36(dd， J ＝ 8.5， 2.0Hz， 1H)7.45(t， J ＝ 7.8Hz， 2H)7.51(ddd， J ＝ 9.3， 6.8， 1.0Hz， 1H)7.66(d， J ＝ 8.5Hz， 1H)7.91( 宽 d， J ＝ 9.3Hz， 1H)8.05( 宽 d， J ＝ 2.0Hz， 1H)8.48( 宽 d， J ＝ 6.8Hz， 1H)12.68( 宽 m， 1H)。
实施例 4 ： 1-[2-(4- 甲基哌嗪 -1- 基 ) 乙基 ]-3-[6-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡 啶 -3- 基硫基 )-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ] 脲
该化合物可以如实施例 3a 中所述制备， 但是使用 0.2g 的 [[6-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基硫基 )-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ] 氨基甲酸苯酯和 75.15mg 的 2-(4- 甲 基哌嗪 -1- 基 ) 乙胺。旋转 - 过滤 - 干燥形成的沉淀后， 用 0.5ml 四氢呋喃洗涤 3 次， 并用 0.5ml 乙醚洗涤 2 次， 并风干， 得到 0.110g 的 1-[2-(4- 甲基哌嗪 -1- 基 ) 乙基 ]-3-[6-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基硫基 )-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ] 脲， 其为白色固体形式。
熔点 ： 180-185℃ ( bench)
MS ： 方法 A ； [M+H]+m/z ＝ 469 ； [M+H-C8H15N3O]+m/z ＝ 300( 基峰 ) ； [C8H16N3O]+m/z ＝ 170 ； [M-H]-m/z ＝ 467 ； Tr ＝ 0.44 分钟。 1
H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 2.15(s， 3H)2.21-2.43(m， 10H)3.25(m 部 分 掩 蔽 的， 2H)6.72( 宽 m， 1H)7.11(td， J ＝ 6.8， 1.0Hz， 1H)7.30(dd， J ＝ 8.3， 2.0Hz， 1H)7.47-7.54(m， 2H)7.90(dt， J ＝ 9.3， 1.0Hz， 1H)7.98(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)8.48(dt， J＝ 6.8， 1.0Hz， 1H)10.91( 宽 m， 1H)。
实施例 5 ： 1-(2- 甲 氧 基 乙 基 )-3-[6-([1， 2， 4] 三 唑 并 [4， 3-a] 吡 啶 -3- 基 硫 基 )-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ] 脲
该化合物可以如实施例 3a 中所述制备， 但是使用 0.2g 的 [[6-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基硫基 )-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ] 氨基甲酸苯酯和 0.05ml 的 2- 甲氧基乙 胺。旋转 - 过滤 - 干燥形成的沉淀后， 用 2ml 二异丙基醚洗涤 3 次， 并在约 50℃减压下烘 箱干燥， 得到 0.143g 的 1-(2- 甲氧基乙基 )-3-[6-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基硫 基 )-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ] 脲， 其为白色固体形式。
熔点 ： 252-257℃ ( bench)
MS ： 方法 A ； [M+H]+m/z ＝ 401 ； [M-H]-m/z ＝ 399 ； Tr ＝ 0.62 分钟。 1
H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 3.27(s， 3H)3.31(m 部分掩蔽的， 2H)3.40(t， J＝ 5.4Hz， 2H)6.83( 宽 t， J ＝ 5.6Hz， 1H)7.11(td， J ＝ 6.8， 1.0Hz， 1H)7.31(dd， J ＝ 8.3， 2.0Hz， 1H)7.50(ddd， J ＝ 9.3， 6.8， 1.0Hz， 1H)7.55(d， J ＝ 8.3Hz， 1H)7.91(dt， J ＝ 9.3， 1.0Hz， 1H)8.01(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)8.49(dt， J ＝ 6.8， 1.0Hz， 1H)10.73( 宽 m， 1H)。实施例 6 ： 6-[(6- 碘 [1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ) 硫基 ]-1， 3- 苯并噻 唑 -2- 胺
实施例 6a ： 6-[(6- 碘 [1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ) 硫基 ]-1， 3- 苯并噻 唑 -2- 胺
该化合物可以如实施例 1a 中所述制备， 使用 230mg 的 4-[(6- 碘 [1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ) 硫基 ] 苯胺、 13ml 乙酸、 0.24g 硫氰酸钾和 32μl 溴。由此得到 0.25g 的 6-[(6- 碘 [1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ) 硫基 ]-1， 3- 苯并噻唑 -2- 胺， 其为橙 色粉末形式。
熔点～ 190℃ ( bench). +
MS ： 方法 B ； [M+H] m/z ＝ 426 ； [M-H]-m/z ＝ 424 ； Tr ＝ 2.98 分钟。 1
H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 7.27(d， J ＝ 8.6Hz， 1H)7.31(dd， J ＝ 8.6， 2.0Hz， 1H)7.61( 宽 s， 2H)7.65(dd， J ＝ 9.5， 1.4Hz， 1H)7.73(d， J ＝ 9.5Hz， 1H)7.81(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)8.71( 宽 s， 1H)。
实施例 6b ： 4-[(6- 碘 [1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ) 硫基 ] 苯胺
该化合物可以如实施例 1b 中所述制备， 使用 4.02g 氯化亚锡二水合物、 60ml 乙醇 和 1.89g 的 6- 碘 -3-[(4- 硝基苯基 ) 硫基 ][1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶和 4.45ml 的 12N 盐酸水溶液。由此得到 0.23g 的 4-[(6- 碘 [1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ) 硫基 ] 苯胺， 其为橙 - 褐色固体形式。
MS ： 方法 B ； [M+H]+m/z ＝ 369 ； Tr ＝ 3.06 分钟。
实施例 6c ： 6- 碘 -3-[(4- 硝基苯基 ) 硫基 ][1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶
该化合物可以如实施例 1c 中所述制备， 使用 1.18g 的 6- 碘 -[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 硫醇、 10ml 二甲亚砜和 1.21g 的 4- 硝基苯四氟硼酸重氮盐。由此得到 1.89g 的 6- 碘 -3-[(4- 硝基苯基 ) 硫基 ][1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶， 其为橙色粉末形式。 +
MS ： 方法 B ； [M+H] ： m/z 399 ； Tr ＝ 3.74 分钟。
实施例 6d ： 6- 碘 -[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 硫醇
该化合物能够以下述方法制备 ：
将 1.37g 的 2- 肼基 -5- 碘吡啶、 40ml 四氢呋喃和 1.25g 的 N， N′ - 硫代羰基二咪 唑的溶液加热至回流， 保持 1 小时。冷却后， 反应介质在减压下蒸发浓缩， 然后所得粉末在 冰冷的条件下在 25ml 水的存在下搅拌。滤出所得沉淀， 用 10ml 水洗涤 2 次， 并风干。得到 1.40g 的 6- 碘 -[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 硫醇。
熔点＞ 264℃ ( bench). +
MS ： 方法 A ； [M+H] ： m/z 278 ； [M-H]- ： m/z 276 ； Tr ＝ 0.57 分钟。
实施例 6e ： 2- 肼基 -5- 碘吡啶
该化合物可以如专利 WO 2006/114213， 实施例 32A， 第 40 页中所述获得。
实施例 7 ： 6-{[6-(4- 氟苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 胺
实施例 7a ： 6-{[6-(4- 氟苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 胺
该化合物能够以实施例 1a 中所述制备， 使用 0.24g 的 4-{[6-(4- 氟苯基 )[1， 2，4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 } 苯胺、 10ml 乙酸、 0.28g 硫氰酸钾和 37μl 溴 ( 稀 释在 2ml 冰醋酸中 )。由此得到 0.14g 的 6-{[6-(4- 氟苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡 啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 胺， 其为淡粉色固体形式。
熔点 ： ＞ 264℃ ( bench) +
MS ： 方法 B ； [M+H] m/z ＝ 394 ； [M-H]-m/z ＝ 392 ； Tr ＝ 3.47 分钟。 1
H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 7.27(d， J ＝ 8.3Hz， 1H)7.31-7.38(m， 3H)7.60( 宽 s， 2H)7.77(dd， J ＝ 8.6， 5.4Hz， 2H)7.82(dd， J ＝ 9.8， 1.5Hz， 1H)7.87(d， J ＝ 1.7Hz， 1H)7.98(d， J ＝ 9.9Hz， 1H)8.59( 宽 s， 1H)。
化合物 6-{[6-(4- 氟苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯 并噻唑 -2- 胺也能够以下述方法得到 ：
将 35mg 磷酸钾、 80mg 4- 氟苯基硼酸和 3mg 四 ( 三苯基膦 ) 合钯添加到 20mg 的 6-[(6- 碘 [1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ) 硫基 ]-1， 3- 苯并噻唑 -2- 胺和 1ml 二甲 亚砜的溶液中。反应介质于 80℃加热 18 小时。然后加入 5mg 四 ( 三苯基膦 ) 合钯， 且反应 介质再次加热至 80℃， 保持 2 天。 用冰浴冷却反应介质后， 加入 15ml 水， 且反应介质在冰冷 条件下持续搅拌 1 小时， 然后于环境温度搅拌 18 小时。水相用 30ml 乙酸乙酯萃取 3 次， 且 合并的有机相经硫酸钠干燥， 过滤， 并在减压下蒸发浓缩。由此得到 20mg 的 6-{[6-(4- 氟 苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 胺。
实施例 7b ： 4-{[6-(4- 氟苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 } 苯胺
该化合物能够以实施例 1b 中所述制备， 使用 1.88g 氯化亚锡二水合物、 25ml 乙醇、 0.61g 的 6-(4- 氟苯基 )-3-[(4- 硝基苯基 ) 硫基 ][1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶和 2.06ml 的 10N 盐酸水溶液。由此得到 0.24g 的 4-{[6-(4- 氟苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡 啶 -3- 基 ] 硫基 } 苯胺， 其为黄色固体形式。
熔点 ： 217℃ ( bench) +
MS ： 方法 A ； [M+H] ： m/z 337( 基峰 ) ； [2M+Na]+ ： m/z 695 ； Tr ＝ 0.81 分钟。
实施例 7c ： 6-(4- 氟苯基 )-3-[(4- 硝基苯基 ) 硫基 ][1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡 啶
该化合物如实施例 1c 制备， 使用 0.83g 的 6-(4- 氟苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 硫醇、 8ml 二甲亚砜和 0.80g 的 4- 硝基苯四氟硼酸重氮盐。由此得到 0.61g 的 6-(4- 氟苯基 )-3-[(4- 硝基苯基 ) 硫基 ][1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶， 其为褐色泡沫形 式。
MS ： 方法 A ； [M+H]+ ： m/z ＝ 367 ； Tr ＝ 0.98 分钟。
实施例 7d ： 6-(4- 氟苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 硫醇
该化合物能够以下述方法制备 ：
将 1.2g 的 5-(4- 氟苯基 )-2- 肼基吡啶、 15ml 二硫化碳和 50ml 氯仿的溶液加热 至回流， 保持 18 小时。然后加入 15ml 二硫化碳， 且将反应介质保持回流 4 小时， 然后加入 15ml 二硫化碳， 且将反应介质保持回流 2 小时， 然后加入 20ml 二硫化碳， 且将反应介质保持 回流 24 小时。然后反应介质于环境温度搅拌 24 小时。加入 20ml 乙醇后， 将反应介质回流 29 小时。冷却后， 反应介质在减压下蒸发浓缩， 且所得黄色粉末在氩气压下， 通过硅胶色谱 纯化 ( 洗脱液 ： 97/3 二氯甲烷 / 甲醇 )。由此得到 0.63g 的 6-(4- 氟苯基 )[1， 2， 4] 三唑并[4， 3-a] 吡啶 -3- 硫醇， 其为黄色粉末形式。
熔点 ： 249℃ ( bench) +
MS ： 方法 A ； [M+H] ： m/z ＝ 246 ； [M-H]- ： m/z ＝ 244 ； Tr ＝ 0.77 分钟。
实施例 7e ： 5-(4- 氟苯基 )-2- 肼基吡啶
该 化 合 物 能 够 通 过 R.Church 等 人 Journal of Organic Chemistry(1995)， 60(12)， 3750-8 所述制备。
实施例 8 ： N-{6-[6-(4- 氟苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基硫基 ]-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 } 环丙烷甲酰胺
该化合物能够以实施例 2 中所述制备， 使用 0.13g 的 6-{[6-(4- 氟苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 胺、 0.081ml 环丙烷甲酰氯和 5ml 吡 啶。 由此得到 0.11g 的 N-{6-[6-(4- 氟苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基硫基 ]-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 } 环丙烷甲酰胺， 其为黄色固体形式。 +
MS ： 方法 B ； [M+H] m/z ＝ 462 ； [M-H]-m/z ＝ 460 ； Tr ＝ 0.97 分钟。 1
H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 0.92(m， 4H)1.96(m， 1H)7.34(t， J ＝ 8.8Hz， 2H)7.45(dd， J ＝ 8.4， 2.0Hz， 1H)7.66(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)7.77(dd， J ＝ 8.8， 5.5Hz， 2H)7.84(dd， J ＝ 9.6， 1.7Hz， 1H)8.01(dd， J ＝ 9.6， 1.0Hz， 1H)8.11(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)8.61( 宽 s， 1H)12.57( 宽 m， 1H)。
实施例 9 ： 6-{[6-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 胺
该化合物能够以下述方法制备 ：
0.25g 的 6-[(6- 碘 [1， 2， 4] 三 唑 并 [4， 3-a] 吡 啶 -3- 基 ) 硫 基 ]-1， 3- 苯 并 噻 唑 -2- 胺、 5ml 的 1， 2- 二甲氧基乙烷、 1.2ml 的 NaOH(1N 水溶液 ) 和 0.14g 的 (1- 甲基 -1H- 吡 唑 -4- 基 ) 硼酸的溶液在氩气下搅拌 30 分钟。然后加入 20mg 二氯二 ( 三苯基膦 ) 合钯， 且 将反应介质置于 65℃， 保持 30 分钟。然后加入 20mg 二氯二 ( 三苯基膦 ) 合钯， 且将反应介 质回流过夜。 再加入 20mg 二氯二 ( 三苯基膦 ) 合钯和 0.61g 的 (1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 硼酸。 反应介质回流 4 小时， 然后在 20℃温度范围搅拌 2 天。 然后加入 10ml 二 烷、 1ml 水 和 20mg 二氯二 ( 三苯基膦 ) 合钯， 且将反应介质转移至密封管， 并微波加热至 150℃， 保持 15 分钟。回至 20℃温度范围后， 反应介质在减压下蒸发浓缩。由此得到的残余物在氩气压 下， 通过硅胶色谱纯化 ( 洗脱液 ： 95/5 二氯甲烷 / 甲醇 )。由此得到 0.14g 的 6-{[6-(1- 甲 基 -1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 胺， 其为橙 - 褐色固体形式。 MS ： 方法 A ； [M+H]+m/z ＝ 380 ； [M-H]-m/z ＝ 378 ； Tr ＝ 0.5 分钟。 1
H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 3.88(s， 3H)7.27(d， J ＝ 8.3Hz， 1H)7.35(dd， J＝ 8.3， 2.0Hz， 1H)7.60(s， 2H)7.75(dd， J ＝ 9.5， 1.3Hz， 1H)7.87(d， J ＝ 2Hz， 1H)7.91(d， J＝ 9.5Hz， 1H)8.02(s， 1H)8.33(s， 1H)8.57(s， 1H)。
实 施 例 10 ： N-(6-{[6-(1- 甲 基 -1H- 吡 唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三 唑 并 [4， 3-a] 吡 啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺
该化合物能够以实施例 2 中所述制备， 使用 0.13g 的 6-{[6-(1- 甲基 -1H- 吡 唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 胺、 0.034ml 环
丙烷甲酰氯和 2ml 吡啶。由此得到 0.1g 的 N-(6-{[6-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺， 其为淡黄色固 体形式。
熔点～ 196℃ ( bench)。 +
MS ： 方法 B ； [M+H] m/z ＝ 448 ； [M-H]-m/z ＝ 446 ； Tr ＝ 3.32 分钟。 1
H NMR(400MHz ， DMSO-d 6) δ ppm 0.89-1.00(m ， 4H)1.94-2.01(m ， 1H)3.87(s ， 3H)7.43(dd， J ＝ 8.5， 2.0Hz， 1H)7.67(d， J ＝ 8.5Hz， 1H)7.77(dd， J ＝ 9.5， 1.5Hz， 1H)7.94(d ，J ＝ 9.5Hz ， 1H)8.01(s ， 1H)8.12(d ，J ＝ 2Hz ， 1H)8.33(s ， 1H)8.58(s ， 1H)12.62( 宽 s.， 1H)。
实施例 11 ： N-(6-{[6-(1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫 基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺
实施例 11a ： N-(6-{[6-(1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺
该化合物能够以下述方法制备 ：
将 104mg 的 3- 溴 -6-(1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶、 100mg 的 (6- 硫基 -1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺、 110mg 碳酸钾和 1ml 二甲亚砜装入密封 的玻璃管中。反应介质于 185℃微波加热 12 分钟。回至 20℃温度范围后， 将反应介质倒 入 60ml 水中， 且通过烧结玻璃滤出由此得到的沉淀， 用水洗涤， 旋转 - 过滤 - 干燥， 并干燥。 由此得到的固体在氩气压下， 通过硅胶色谱纯化 ( 洗脱液 ： 85/15 然后 90/10 二氯甲烷 / 甲 醇 )。由此得到固体， 并将其用 2ml 乙醇研磨， 过滤， 用 1ml 乙醇洗涤 2 次， 然后用 1ml 乙醚 洗涤 3 次， 并干燥。由此得到 82mg 的 N-(6-{[6-(1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺， 其为淡黄色固体形式。
熔点＞ 260℃ ( bench). +
MS ： 方法 A ； [M+H] m/z ＝ 434 ； Tr ＝ 0.65 分钟。 1
H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 0.89-0.99(m， 4H)1.94-2.03(m， 1H)7.45(dd， J＝ 8.5， 2.0Hz， 1H)7.67(d， J ＝ 8.5Hz， 1H)7.83(dd， J ＝ 9.5， 1.7Hz， 1H)7.94(dd， J ＝ 9.5， 1.0Hz， 1H)8.08( 宽 s， 1H)8.15(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)8.39( 宽 s， 1H)8.59-8.65(m， 1H)12.66( 宽 s， 1H)13.11( 宽 s， 1H)。
实施例 11b ： (6- 硫基 -1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺
该化合物能够以下述方法制备 ：
于 20℃将 33.6mg 磷酸二氢钾在 8ml 水中的溶液添加到 2g 的 (6- 氰硫基 -1， 3- 苯 并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺和 70ml 乙醇的混悬液中， 然后加入 3.2g 的 DL- 二硫苏糖醇。 反应介质于回流搅拌 5 小时， 然后置于 20℃温度范围。然后加入 400ml 水， 且通过烧结玻 璃滤出形成的沉淀， 用水完全洗涤， 旋转 - 过滤 - 干燥， 然后干燥。由此得到 1.5g 的 (6- 硫 基 -1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺， 其为淡黄色固体形式 +
MS ： 方法 B ； [M+H] m/z ＝ 251 ； [M-H]-m/z ＝ 249 ； Tr ＝ 3.77 分钟。
实施例 11c ： (6- 氰硫基 -1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺
该化合物能够以下述方法制备 ：
将 5.3ml 环丙烷甲酰氯添加到 10g 的 2- 氨基 -1， 3- 苯并噻唑 -6- 基硫氰酸酯 ( 市售产品 ) 和 100ml 吡啶的溶液中， 同时保持温度在 20℃范围。将反应介质搅拌 4 小时， 然后 加入 500ml 水。通过烧结玻璃滤出形成的沉淀， 用水完全洗涤， 旋转 - 过滤 - 干燥， 然后干 燥。由此得到 13g 的 (6- 氰硫基 -1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺， 其为淡黄色固体 形式， 所述化合物以原样用于下一步骤中。
实施例 11d ： 3- 溴 -6-(1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶
该化合物能够以下述方法制备 ：
将 0.058ml 溴和 2ml 水的溶液添加到 170mg 的 6-(1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑 并 [4， 3-a] 吡啶在 4ml 乙醇中的溶液中。反应混合物在 20℃温度范围搅拌大约 2 天， 然后 加入 20ml 饱和碳酸氢钠水溶液。搅拌 30 分钟后， 通过烧结玻璃滤出形成沉淀， 用 5ml 水洗 涤 3 次， 旋转 - 过滤 - 干燥， 然后干燥。 所得固体残余物在氩气压下， 通过硅胶色谱纯化 ( 洗 脱液 ： 85/15 乙酸乙酯 / 甲醇 )。由此得到 110mg 的 3- 溴 -6-(1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三 唑并 [4， 3-a] 吡啶， 其为白色固体形式。
MS ： 方法 A ； [M+H]+m/z ＝ 264 ； [M-H]-m/z ＝ 262 ； Tr ＝ 0.35 分钟。
实施例 11e ： 6-(1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶
该化合物能够以下述方法制备 ： 将 272mg 的 (1H- 吡唑 -4- 基 ) 硼酸添加到 400mg 的 6- 溴 [1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 ( 市售产品 )、 8ml 二甲亚砜、 69mg 四 ( 三苯基膦 ) 合钯和 424mg 碳酸钠的 2ml 水溶液 的混合物中。反应介质于 150℃微波加热 20 分钟。回至 20℃温度范围后， 反应介质在减压 下蒸发浓缩， 然后加入到 40ml 水中。水相用 20ml 乙酸乙酯萃取 3 次。水相中所得沉淀通 过烧结玻璃滤出， 用水洗涤， 旋转 - 过滤 - 干燥， 然后干燥。由此得到 200mg 的 6-(1H- 吡 唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶， 其为白色固体形式。 +
MS ： 方法 A ； [M+H] m/z ＝ 186 ； [M-H]-m/z ＝ 184 ； Tr ＝ 0.21 分钟。
实 施 例 12 ： N-(6-{[6-((3- 氟 -4- 甲 基 ) 苯 基 )[1， 2， 4] 三 唑 并 [4， 3-a] 吡 啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺
实 施 例 12a ： N-(6-{[6-((3- 氟 -4- 甲 基 ) 苯 基 )[1， 2， 4] 三 唑 并 [4， 3-a] 吡 啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺
化合物能够以实施例 11a 中所述制备， 使用 348mg 的 3- 溴 -6-((3- 氟 -4- 甲基 ) 苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶、 250mg 的 (6- 硫基 -1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲 酰胺、 280mg 碳酸钾和 4ml 二甲亚砜。由此得到 146mg 的 N-(6-{[6-((3- 氟 -4- 甲基 ) 苯 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺， 其为白色固体形式。
熔点＝ 191℃ ( bench). +
MS ： 方法 A ； [M+H] m/z ＝ 476 ； [M-H]-m/z ＝ 474 ； Tr ＝ 1.04 分钟。 1
H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 0.89-0.96(m， 4H)1.93-2.00(m， 1H)2.28(d， J＝ 1.5Hz， 3H)7.40-7.49(m， 3H)7.57(dd， J ＝ 11.2， 1.5Hz， 1H)7.67(d， J ＝ 8.5Hz， 1H)7.87(dd， J ＝ 9.5， 1.5Hz， 1H)7.99(dd， J ＝ 9.5， 1.5Hz， 1H)8.13(d， J ＝ 1.7Hz， 1H)8.61-8.66(m， 1H)12.65( 宽 s， 1H)。
实施例 12b ： 3- 溴 -6-((3- 氟 -4- 甲基 ) 苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 该化合物能够以下述方法制备 ：450mg 的 6-((3- 氟 -4- 甲基 ) 苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶、 10ml 氯仿和 356mg 的 N- 溴琥珀酰亚胺的混合物回流过夜。将反应介质冷却至 20℃温度范围， 然后在减 压下蒸发浓缩。由此所得残余物在氩气压下通过硅胶色谱纯化 ( 洗脱液 ： 80/20 乙酸乙酯 / 甲醇 )。由此得到 534mg 的 3- 溴 -6-((3- 氟 -4- 甲基 ) 苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡 啶， 其为米色固体形式。
MS ： 方法 A ； [M+H]+m/z ＝ 306 ； Tr ＝ 0.88 分钟。
实施例 12c ： 6-((3- 氟 -4- 甲基 ) 苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶
该化合物能够以实施例 11e 中所述制备， 使用 400mg 的 6- 溴 [1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 ( 市售产品 )、 8ml 二甲亚砜、 69mg 四 ( 三苯基膦 ) 合钯、 424mg 碳酸钠的 2ml 水溶 液和 370mg 的 ((3- 氟 -4- 甲基 ) 苯基 ) 硼酸。由此得到 456mg 的 6-((3- 氟 -4- 甲基 ) 苯 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶， 其为白色固体形式。
熔点＝ 236℃ ( bench). +
MS ： 方法 A ； [M+H] m/z ＝ 228 ； Tr ＝ 0.71 分钟。
实施例 13 ： N-(6-{[6-(3- 氟苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺
实 施 例 13a ： N-(6-{[6-(3- 氟 苯 基 )[1， 2， 4] 三 唑 并 [4， 3-a] 吡 啶 -3- 基 ] 硫 基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺
该化合物能够以实施例 11a 中所述制备， 使用 480mg 的 3- 溴 -6-(3- 氟苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶、 411mg 的 (6- 硫基 -1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺、 454mg 碳酸钾和 10ml 二甲亚砜。由此得到 148mg 的 N-(6-{[6-(3- 氟苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺， 其为米色固体形式。
熔点＞ 260℃ ( bench). +
MS ： 方法 A ； [M+H] m/z ＝ 462 ； [M-H]-m/z ＝ 460 ； Tr ＝ 0.98 分钟。 1
H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 0.92( 宽 s， 4H)1.95( 宽 s， 1H)7.23-7.31(m， 1H)7.46(d， J ＝ 8.6Hz， 1H)7.50-7.70(m， 4H)7.88(dd， J ＝ 9.5， 1.5Hz， 1H)8.01(dd， J＝ 9.5， 1.5Hz， 1H)8.13( 宽 s， 1H)8.69( 宽 s， 1H)。
实施例 13b ： 3- 溴 -6-(3- 氟苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶
该化合物以实施例 12b 中所述制备， 使用 360mg 的 6-(3- 氟苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶、 10ml 氯仿和 300mg 的 N- 溴琥珀酰亚胺。由此得到 480mg 的 3- 溴 -6-(3- 氟 苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶， 其为赭色固体形式。 +
MS ： 方法 A ； [M+H] m/z ＝ 292 ； Tr ＝ 0.77 分钟。
实施例 13c ： 6-(3- 氟苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶
该化合物能够以实施例 12c 中所述制备， 使用 400mg 的 6- 溴 [1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 ( 市售产品 )、 8ml 二甲亚砜、 69mg 四 ( 三苯基膦 ) 合钯、 424mg 碳酸钠的 2ml 水溶 液和 345mg 的 (3- 氟苯基 ) 硼酸。由此得到 361mg 的 6-(3- 氟苯基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶， 其为白色固体形式。
熔点＝ 210℃ ( bench). +
MS ： 方法 A ； [M+H] m/z ＝ 214 ； Tr ＝ 0.59 分钟。
实 施 例 14 ： N-(6-{[6-(1-[2-( 四 氢 -2H- 吡 喃 -2- 基 氧 基 ) 乙 基 ]-1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲 酰胺
实 施 例 14a ： N-(6-{[6-(1-[2-( 四 氢 -2H- 吡 喃 -2- 基 氧 基 ) 乙 基 ]-1H- 吡 唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲 酰胺
该 化 合 物 能 够 以 实 施 例 11a 中 所 述 制 备， 使 用 240mg 的 3- 溴 -6-(1-[2-( 四 氢 -2H- 吡喃 -2- 基氧基 ) 乙基 ]-1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶、 170mg 的 (6- 硫基 -1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺、 170mg 碳酸钾和 4ml 二甲亚砜。由此得到 240mg 的 N-(6-{[6-(1-[2-( 四氢 -2H- 吡喃 -2- 基氧基 ) 乙基 ]-1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺， 其为白色固体 形式。
熔点～ 110℃ ( bench). +
MS ： 方法 A ； [M+H] m/z ＝ 562 ； [M-H]-m/z ＝ 560 ； Tr ＝ 0.84 分钟。 1
H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 0.90-0.98(m， 4H)1.27-1.67(m， 6H)1.91-2.01(m， 1H)3.32-3.39(m， 1H)3.52(ddd， J ＝ 11.5， 8.6， 3.4Hz， 1H)3.70-3.80(m， 1H)3.89-3.98(m， 1H)4.23-4.36(m， 2H)4.51(t， J ＝ 3.3Hz， 1H)7.42(dd， J ＝ 8.6， 2.0Hz， 1H)7.66(d， J ＝ 8.6Hz， 1H)7.78(dd， J ＝ 9.5， 1.5Hz， 1H)7.94(dd， J ＝ 9.5， 1.0Hz， 1H)8.05(s， 1H)8.11(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)8.36(s， 1H)8.58(s， 1H)12.65( 宽 s， 1H)。
实施例 14b ： 3- 溴 -6-(1-[2-( 四氢 -2H- 吡喃 -2- 基氧基 ) 乙基 ]-1H- 吡唑 -4- 基 ) [1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶
该化合物能够以实施例 12b 中所述制备， 使用 440mg 的 6-(1-[2-( 四氢 -2H- 吡 喃 -2- 基氧基 ) 乙基 ]-1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶、 10ml 氯仿和 226mg 的 N- 溴琥珀酰亚胺。由此得到 245mg 的 3- 溴 -6-(1-[2-( 四氢 -2H- 吡喃 -2- 基氧基 ) 乙 基 ]-1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶， 其为无色漆形式。 +
MS ： 方法 A ； [M+H] m/z ＝ 392 ； Tr ＝ 0.64 分钟。
实施例 14c ： 6-(1-[2-( 四氢 -2H- 吡喃 -2- 基氧基 ) 乙基 ]-1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶
该化合物能够以实施例 9 中所述制备， 使用 320mg 的 6- 溴 -[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 ( 市售产品 )、 15ml 的 1， 2- 二甲氧基乙烷、 69mg 的二氯二 ( 三苯基膦 ) 合钯、 3.2ml 的 NaOH(1N 水溶液 ) 和 990mg 的 1-[2-( 四氢 -2H- 吡喃 -2- 基氧基 ) 乙基 ]-4-(4， 4， 5， 5- 四甲基 -1， 3， 2- 二氧杂硼杂环戊烷 -2- 基 )-1H- 吡唑。由此得到 445mg 的 6-(1-[2-( 四 氢 -2H- 吡喃 -2- 基氧基 ) 乙基 ]-1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶， 其为黄 色油状形式， 将其结晶。
MS ： 方法 A ； [M+H]+m/z ＝ 314 ； Tr ＝ 0.49 分钟。
实施例 14d ： 1-[2-( 四氢 -2H- 吡喃 -2- 基氧基 ) 乙基 ]-4-(4， 4， 5， 5- 四甲基 -1， 3， 2- 二氧杂硼杂环戊烷 -2- 基 )-1H- 吡唑
该化合物以专利 US2007/0265272， 第 39 页中所述制备。
实施例 15 ： N-(6-{[6-(1-(2- 羟基乙基 )-1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺该化合物能够以下述方法制备 ：
将 45mg 的 Amberlyst 15 型 H+ 树 脂 添 加 到 215mg 的 N-(6-{[6-(1-[2-( 四 氢 -2H- 吡喃 -2- 基氧基 ) 乙基 ]-1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺和 10ml 甲醇的溶液中， 反应介质在 20℃温度 范围搅拌 16 小时。加入 5ml 二氯甲烷后， 再次加入树脂使反应完全 ( 通过 LC/MS 监测 )， 即 连续加入 45mg、 40mg 然后 150mg 的树脂， 同时在 20℃温度范围搅拌 4 天。然后过滤反应介 质， 且树脂用 15ml 的 CH2Cl2/MeOH/NH4OH 以 28％ (12/3/0.5， 体积 ) 混合物洗涤 4 次。所得 滤液在减压下蒸发浓缩。由此得到 65mg 的 N-(6-{[6-(1-(2- 羟基乙基 )-1H- 吡唑 -4- 基 ) [1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺， 其为 白色固体形式。
熔点～ 182℃ ( bench). +
MS ： 方法 A ； [M+H] m/z ＝ 478 ； [M-H]-m/z ＝ 476 ； Tr ＝ 0.63 分钟。 1
H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 0.88-1.00(m， 4H)1.91-2.03(m， 1H)3.75(q， J ＝ 5.5Hz， 2H)4.16(t， J ＝ 5.6Hz， 2H)4.95(t， J ＝ 5.3Hz， 1H)7.44(dd， J ＝ 8.6， 2.0Hz， 1H)7.67(d， J ＝ 8.3Hz， 1H)7.81(dd， J ＝ 9.5， 1.5Hz， 1H)7.95(d， J ＝ 9.3Hz， 1H)8.06(s， 1H)8.12(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)8.38(s， 1H)8.62(s， 1H)。
实施例 16 ： N-(6-{[6-(1- 哌啶 -4- 基 -1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺
实施例 16a ： N-(6-{[6-(1- 哌啶 -4- 基 -1H- 吡唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺
该化合物能够以下述方法制备 ：
102mg 的 4-{4-[3-({2-[( 环丙基羰基 ) 氨基 ]-1， 3- 苯并噻唑 -6- 基 } 硫基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -6- 基 ]-1H- 吡唑 -1- 基 } 哌啶 -1- 羧酸 2- 甲基丙 -2- 基酯和 1.52ml 盐酸 (4N 的二 烷溶液 ) 的混合物在 20℃温度范围搅拌过夜， 然后在减压下蒸发浓 缩。由此得到的残余物加入到 5ml 二异丙基醚中， 然后通过烧结玻璃过滤， 用 2ml 二异丙基 醚洗涤 2 次， 旋转 - 过滤 - 干燥， 然后干燥。 得到 101mg 的 N-(6-{[6-(1- 哌啶 -4- 基 -1H- 吡 唑 -4- 基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -3- 基 ] 硫基 }-1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲 酰胺盐酸盐， 其为赭色固体形式。
熔点＞ 260℃ ( bench). MS ： 方法 B ； [M+H]+m/z ＝ 517 ； [M-H]-m/z ＝ 515 ； Tr ＝ 2.66 分钟。 1
H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 0.85-1.01(m， 4H)1.93-2.05(m， 1H)2.05-2.30(m， 4H)3.02-3.18(m ， 2H)3.33-3.44(m ， 2H)4.42-4.57(m ， 1H)7.44(dd ， J ＝ 8.7 ， 1.6Hz ， 1H)7.68(d， J ＝ 8.6Hz， 1H)7.86(d， J ＝ 9.5Hz， 1H)7.98(d， J ＝ 9.8Hz， 1H)8.13(s， 2H)8.48(s， 1H)8.67(s， 1H)12.70(s， 1H)。
实施例 16b ： 4-{4-[3-({2-[( 环丙基羰基 ) 氨基 ]-1， 3- 苯并噻唑 -6- 基 } 硫基 ) [1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -6- 基 ]-1H- 吡唑 -1- 基 } 哌啶 -1- 羧酸 2- 甲基丙 -2- 基酯
该化合物能够以实施例 11a 中所述制备， 使用 134mg 的 4-{4-[(3- 溴 [1， 2， 4] 三 唑并 [4， 3-a] 吡啶 )-6- 基 ]-1H- 吡唑 -1- 基 } 哌啶 -1- 羧酸 2- 甲基丙 -2- 基酯、 83mg 的 (6- 硫基 -1， 3- 苯并噻唑 -2- 基 ) 环丙烷甲酰胺、 83mg 碳酸钾和 3.5ml 二甲亚砜。由此得
到 103mg 的 4-{4-[3-({2-[( 环丙基羰基 ) 氨基 ]-1， 3- 苯并噻唑 -6- 基 } 硫基 )[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -6- 基 ]-1H- 吡唑 -1- 基 } 哌啶 -1- 羧酸 2- 甲基丙 -2- 基酯， 其为米 色固体形式。
MS ： 方法 A ； [M+H]+m/z ＝ 617 ； [M-H]-m/z ＝ 615 ； Tr ＝ 0.99 分钟。
实 施 例 16c ： 4-{4-[(3- 溴 [1， 2， 4] 三 唑 并 [4， 3-a] 吡 啶 )-6- 基 ]-1H- 吡 唑 -1- 基 } 哌啶 -1- 羧酸 2- 甲基丙 -2- 基酯
该化合物能够以实施例 12b 中所述制备， 使用 120mg 的 4-[4-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -6- 基 )-1H- 吡唑 -1- 基 ] 哌啶 -1- 羧酸 2- 甲基丙 -2- 基酯、 5ml 氯仿和 58mg 的 N- 溴琥珀酰亚胺。由此得到 134mg 的 4-{4-[(3- 溴 [1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡 啶 )-6- 基 ]-1H- 吡唑 -1- 基 } 哌啶 -1- 羧酸 2- 甲基丙 -2- 基酯， 其为绿色固体形式。 +
MS ： 方法 B ； [M+H] m/z ＝ 447 ； [M-H] +HCOOH m/z ＝ 491 ； Tr ＝ 3.71 分钟。
实施例 16d ： 4-[4-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 -6- 基 )-1H- 吡唑 -1- 基 ] 哌 啶 -1- 羧酸 2- 甲基丙 -2- 基酯
该化合物能够以实施例 9 中所述制备， 使用 180mg 的 6- 溴 -[1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡啶 ( 市售产品 )、 10ml 的 1， 2- 二甲氧基乙烷、 35mg 二氯二 ( 三苯基膦 ) 合钯、 1.8ml 的 NaOH(1N 水溶液 ) 和 377mg 的 4-[4-(4， 4， 5， 5- 四甲基 -1， 3， 2- 二氧杂硼杂环戊烷 -2- 基 ) 吡唑 -1- 基 ] 哌啶 -1- 羧酸叔丁酯。由此得到 120mg 的 4-[4-([1， 2， 4] 三唑并 [4， 3-a] 吡 啶 -6- 基 )-1H- 吡唑 -1- 基 ] 哌啶 -1- 羧酸 2- 甲基丙 -2- 基酯， 其为无色漆形式。 +
MS ： 方法 B ； [M+H] m/z ＝ 369 ； [M-H] +HCOOH m/z ＝ 413 ； Tr ＝ 3.25 分钟。
实 施 例 16e ： 4-[4-(4， 4， 5， 5- 四 甲 基 -1， 3， 2- 二 氧 杂 硼 杂 环 戊 烷 -2- 基 ) 吡 唑 -1- 基 ] 哌啶 -1- 羧酸叔丁酯
该化合物能够以专利 WO2007/066187， 第 34 页中所述制备。
实施例 17 ： 药物组合物
制备相应于下式的片剂 ：
实施例 7 的产物 ..........................0.2g
用于完成片剂的赋形剂 ...................1g
( 赋形剂详细说明 ： 乳糖、 滑石、 淀粉、 硬脂酸镁 )。
实施例 7 作为药物制剂的实例， 该制剂能够， 视需要， 使用本发明实施例中的其它 产物进行。
药理学部分 ：
实验方案
I)MET 表达和纯化， 胞浆区
在杆状病毒中表达 ：
将 pFastBac(Invitrogen) 中的 His-Tev-MET(956-1390) 重组 DNA 转染到昆虫细 胞中， 且在一些病毒扩增步骤后， 检测最终杆状病毒毒株中所关注蛋白的表达。
在 27℃用重组病毒感染 72 小时后， 离心收集 SF21 细胞培养物并将细胞沉淀储存 于 -80℃。
纯化 ：
将细胞沉淀重悬于裂解缓冲液中 ( 缓冲液 A[50mM HEPES， pH 7.5， 250mM NaCl，10％甘油， 1mM TECP] ； + 蛋白酶抑制剂的鸡尾酒疗法， Roche Diagnostics， 不含 EDTA， ref 1873580) 中， 在 4℃搅拌， 直到混合物均匀， 然后使用 “Dounce” 型仪器机械裂解。
离心后， 裂解上清液用镍螯合树脂 (His-Trap 6 Fast FlowTM， GE HealthCare) 在 4℃孵育 2 小时。用 20 倍体积的缓冲液 A 洗涤后， 将混悬液加到柱子中， 且用缓冲液 B( 缓 冲液 A+290mM 咪唑 ) 的梯度洗脱蛋白质。
对于电泳分析 (SDS PAGE)， 合并含有所关注蛋白质的级份， 通过超滤 (10kDa 截 TM 点 ) 浓缩， 并注入到在缓冲液 A 中平衡的排阻色谱柱 (Superdex 200， GE HealthCare) 上。
经组氨酸标记的酶裂解后， 将蛋白质再注入到新的用缓冲液 A 平衡的 IMAC 镍螯合 TM 色谱柱 (His-Trap 6 Fast Flow ， GE HealthCare) 上。电泳 (SDS PAGE) 后， 最终合并用缓 冲液 B 的梯度洗脱且含有所关注蛋白的级份， 并储存于 -80℃。
对于自磷酸化的蛋白的产生， 在加入 2mM ATP、 2mM MgCl2 和 4mMNa3VO4 后， 将先前级 份在环境温度孵育 1 小时。 反应用 5mM 的 EDTA 停止后， 将反应混合物注入到在缓冲液 A+4mM Na3VO4 中预平衡的 HiPrep 脱盐柱 (GE HealthCare) 上， 并且合并含有所关注的蛋白的级份 (SDS PAGE 分析 )， 然后存储于 -80℃。通过质谱 (LC-MS) 和肽谱法检验磷酸化程度。
II) 检测 A 和 B A) 检测 A ： 在 96- 孔板中的 HTRF MET 实验
在检测分子 ( 终浓度范围 0.17nM-10μM， 3 ％ DMSO 终浓度 ) 的存在下， 在 10mM MOPS 缓冲液中， pH 7.4， 1mM DTT， 0.01％ Tween 20， 终浓度为 5nM 的 MET 在最终体积 50μl 酶反应中孵育。 该反应用底物溶液起始以获得终浓度为 1μg/ml 的聚 -(GAT)， 10μM ATP 和 5mM MgCl2。在环境温度孵育 10 分钟后， 在每孔 80ng 链亲和素 61SAXLB Cis-Bio Int. 和 18ng 抗 - 磷酸酪氨酸 Mab PT66-Europium Cryptate 的存在下， 反应用 30μl 混合物 (mix) 停止以得到 50mM 的 Hepes， pH 7.5， 500mM 氟化钾， 0.1％ BSA 和 133mMEDTA 的终浓度。在环 境温度孵育 2 小时后， 在 2 个波长 620nm 和 665nm 下， 以 TRACE/HTRF 技术在读数器上读数， 且从 665/620 比例计算％抑制。
从实验部分实施例中式 (I) 产物的检测 A 获得的结果例如为 IC50 小于 500nM， 且 尤其小于 100nM。
B) 检测 B ： MET 自磷酸化的抑制 ； ELISA 技术 (pppY1230， 1234， 1235)
a) 细胞裂解产物 ： 在 200μl 的 RPMI 培养基 +10 ％ FCS+1 ％ L- 谷氨酰胺中， 以 20000 个细胞 / 孔将 MKN45 细胞接种于 96- 孔板 ( 细胞包被 (cell coat)BD 聚赖氨酸 ) 中。 在孵育器中使它们贴壁 24 小时。
在接种 ( 一式两份 ) 后第二天， 用 6 种浓度的产物处理细胞 1 小时。至少 3 个对 照孔用相同最终量的 DMSO 处理。
产物稀释 ： 将在纯 DMSO 中的 10mM 储备液 ( 范围为 10mM 至 30μM， 在纯 DMSO 中以 3 倍递增 ) 在培养介质中中间稀释至 1/50， 然后移出 10μl 直接添加到细胞中 (200μl) ： 最终范围为 10000 至 30nM。
在孵育的最后， 小心移出上清液， 并用 200μl 的 PBS 洗涤。 然后， 将 100μl 裂解缓 冲液直接加入到冰上的孔中， 并在 4℃孵育 30 分钟。裂解缓冲液 ： 10mM Tris HCl， pH 7.4，
100mM NaCl， 1mM EDTA， 1mM EGTA， 1％ Triton X-100， 10％甘油， 0.1％ SDS， 0.5％脱氧胆酸， 20mM NaF， 2mMNa3VO4， 1mM PMSF 和抗蛋白酶的鸡尾酒。将 100μl 裂解产物转移至 V 形底的聚丙烯板中， 立即进行 ELISA， 或将板于 -80℃冷冻。 b) 磷酸 MET ELISA BioSource 试剂盒 KHO0281
将 70μl 试剂盒稀释缓冲液 +30μL 细胞裂解产物， 或用于空白组的 30μl 裂解缓 冲液， 添加到试剂盒板的每孔中。在环境温度进行孵育 2 小时， 同时轻微摇动。
孔用 400μl 试剂盒洗涤缓冲液洗涤 4 次。在环境温度用 100μl 抗 - 磷酸 MET 抗 体孵育 1 小时。
孔用 400μl 试剂盒洗涤缓冲液洗涤 4 次。在环境温度用 100μl 抗 - 兔 HRP 抗体 孵育 30 分钟 ( 仅有色原体的孔除外 )。
孔用 400μl 试剂盒洗涤缓冲液洗涤 4 次。在黑暗中于环境温度加入 100μL 色原 体并孵育 30 分钟。
反应用 100μl 停止溶液停止。立即将板于 450nM 在 Wallac Victor 酶标仪上读 数 0.1 秒。
C) 检测 C ： 通过 14C- 胸苷脉冲 (14C-thymidine pulse) 检测细胞增殖
将 细 胞 以 180μl 接 种 于 Cytostar 96- 孔 板 中， 于 37 ℃， 5 ％ CO2 保 持 4 小 时 ： HCT116 细胞以每孔 2500 细胞的比例接种于 DMEM 培养基 +10％胎牛血清 +1％ L- 谷氨酰胺 中， 且 MKN45 以每孔 7500 细胞的比例接种于 RPMI 培养基 +10％胎牛血清 +1％ L- 谷氨酰胺 中。孵育 4 小时后， 加入 10μl 对于 ELISA 所述的稀释方法的 20- 倍浓缩溶液的产物。以 10 种浓度检测产物， 一式两份， 从 10000nM 至 0.3nM， 以 3 倍递增。 14
处理 72 小时后， 加入 10μl 的 C- 胸苷 (10μCi/m1) 以得到每孔 0.1μCi。脉冲 24 小时并处理 96 小时后， 在 Micro-Beta 仪器 (Perkin-Elmer) 上检测 14C- 胸苷的掺入。
在 BIOMEK 2000 或 TECAN 工作站上自动化进行实验的所有步骤。
从实验部分实施例中式 (I) 产物的检测 B 获得的结果例如为 IC50 小于 10μM， 且 尤其小于 1μM。
对于实验部分实施例的产物所得结果示于下述药理学结果表中， 如下所示 ：
对于检测 A， 符号 + 相应于小于 500nM， 且符号 ++ 相应于小于 100nM ；
对于检测 B， 符号 + 相应于小于 500nM， 且符号 ++ 相应于小于 100nM ；
对于 C， 符号 + 相应于小于 10μM， 且符号 ++ 相应于小于 1μM。
药理学结果表 ：
实施例 1 2 3 4 检测 A + ++ ++ ++ + ++ ++ ++ ++ ++ 检测 B 检测 C44102159543 A CN 102159549 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++说明++书++ ++37/37 页++ ++ + ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++45