牛粪微生物脱臭方法及专用脱臭菌剂.pdf

摘要
申请专利号：	CN200910179624.3	申请日：	2009.10.06
公开号：	CN102030453A	公开日：	2011.04.27
当前法律状态：	撤回	有效性：	无权
法律详情：	发明专利申请公布后的视为撤回IPC(主分类):C02F 11/02申请公布日:20110427\|\|\|公开
IPC分类号：	C02F11/02; B01D53/84; C12N15/01; C12N1/20; C12N1/16; C12N1/14; C12R1/72(2006.01)N; C12R1/865(2006.01)N; C12R1/845(2006.01)N; C12R1/785(2006.01)N; C12R1/66(2006.01)N; C12R1/225(2006.01)N; C12R1/02(2006.01)N; C	主分类号：	C02F11/02
申请人：	黄高宝; 张宗舟; 马旭光
发明人：	黄高宝; 张宗舟; 马旭光; 王淑娟; 曹莉
地址：	730070 甘肃省兰州市安宁区营门村1号甘肃农业大学农学院
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内容摘要

本发明公开了一种牛粪微生物脱臭方法及其专用脱臭菌剂。在湿牛粪中按10％～20％的质量比直接加入脱臭菌剂，拌匀，在温度20℃～25℃条件下堆置3天，晾晒即可；为实现牛粪微生物脱臭，上述脱臭方法要采用专用脱臭菌剂：选择大曲搭载于返回式航天器上，返回地面后，取1g经诱变的大曲于100mL的蒸馏水中制成稀释菌液，向牛粪培养基中接入1mL的所述稀释菌液，20℃～35℃恒温培养24小时～84小时，然后将所得的细菌、霉菌、酵母菌分别在各自的培养基上进行扩大培养，并分别制成1.0×1011～4.0×1011个孢子或细胞/L的菌液，最后按接种量50～100mL/L等量接种到玉米秸秆粉固体培养基上培养即成。

权利要求书

1：一种牛粪微生物脱臭方法，其特征在于，在含水量为 60 ％～ 70 ％的湿牛粪中按 10％～ 20％的质量比直接加入脱臭菌剂，拌匀，在温度 20℃～ 25℃条件下堆置 3 天，晾晒即可。
2：实现权利要求 1 所述牛粪微生物脱臭方法的专用脱臭菌剂，其特征在于，选择大曲搭载于返回式航天器上，使大曲在太空特殊的环境条件发生诱导变异，返回地面后，取 1g 经诱变的大曲于 100mL 的蒸馏水中制成稀释菌液，充分振荡后，向牛粪培养基中接入 1mL 的所述稀释菌液， 20℃～ 35℃恒温培养 24 小时～ 84 小时，然后对培养所得的微生物进行分离并鉴定，对鉴定所得的细菌、霉菌、酵母菌分别在各自的培养基上进行扩大培养，然后将 11 11 其分别用蒸馏水制成 1.0×10 ～ 4.0×10 个孢子或细胞 /L 的菌液，最后按接种量 50 ～ 100mL/L 等量接种到玉米秸秆粉固体培养基上培养即成。
3：根据权利要求 2 所述的专用脱臭菌剂，其特征在于，所述培养所得的微生物用稀释 6 分离法得到的细菌总数为 1.5×10 个 /g 干曲，其中芽孢杆菌占细菌总数的 36.3％，醋酸杆菌占细菌总数的 27.3％，乳酸杆菌占细菌总数的 36.4％；获得的霉菌总数为 0.8×105 个 / g 干曲，其中曲霉占霉菌总数的 50％，毛霉占霉菌总数的 33％，根霉占霉菌总数的 17％；获 4 得的酵母菌总数为 0.5×10 个 /g 干曲，其中啤酒酵母和假丝酵母各占酵母菌总数的 50％。 4. 根据权利要求 2 所述的专用脱臭菌剂，其特征在于，在所述各自的培养基上进行扩大培养时增加生产中常见的假单胞菌进行扩大培养。 5. 根据权利要求 2 所述的专用脱臭菌剂，其特征在于，所述牛粪培养基按质量 kg/ 体积 L 的百分比计，为：牛粪 40％～ 70％，玉米粉 20％～ 50％，磷酸铵 0.5％～ 2％，硫酸镁 0.01％～ 0.05％，磷酸二氢钾 0.002％～ 0.012％，用蒸馏水配制， pH 值为 4.0 ～ 7.0 ； 6. 根据权利要求 2 所述的专用脱臭菌剂，其特征在于，所述对菌株进行扩大培养的培养基为：细菌培养基按质量 kg/ 体积 L 的百分比计，为：牛肉膏 0.1％～ 0.5％，蛋白胨 0.5％～ 1.5％，氯化钠 0.1％～ 0.5％，琼脂为 1.5％～ 2％，用蒸馏水配制，初始 pH 值 5.0 ～ 6.5， 121℃高压灭菌 15 分钟～ 20 分钟，培养条件为： 25℃～ 35℃恒温培养 24 小时～ 108 小时；霉菌培养基按质量 kg/ 体积 L 的百分比计，为：去皮马铃薯 20％～ 30％，葡萄糖 1％～ 3％，琼脂 1.5％～ 2％，用蒸馏水配制，初始 pH 值 5.0 ～ 6.5， 121℃高压灭菌 15 分钟～ 20 分钟，培养条件为： 25℃～ 35℃恒温培养 24 小时～ 108 小时；酵母菌培养基：麦芽汁 6° Bx ～ 12° Bx，用蒸馏水配制，初始 pH 值 5.0 ～ 6.5， 121℃ 高压灭菌 15 分钟～ 20 分钟，培养条件为：摇床振荡 25℃～ 35℃恒温培养 24 小时～ 108 小时，转速为 150 ～ 200r/min。 7. 根据权利要求 2 所述的专用脱臭菌剂，其特征在于，所述玉米秸秆粉固体培养基按质量 kg/ 体积 L 的百分比计，为：玉米秸秆粉 40 ％～ 80 ％，麸皮 20 ％～ 40 ％，磷酸铵 0.5％～ 2％，硫酸镁 0.01％～ 0.05％，磷酸二氢钾 0.002％～ 0.012％，用蒸馏水配制，初始 pH 值 5.0 ～ 6.5， 121℃高压灭菌 15 分钟～ 20 分钟， 20℃～ 35℃恒温浅盘培养 2 天～ 6 天，期间注意倒盘。 8. 根据权利要求 2 所述的专用脱臭菌剂，其特征在于，将所述培养成的菌剂在干燥通风的房间中干燥 2 天，水分控制在 6％左右，然后粉碎成 40 目的粉末。 9. 根据权利要求 2 所述的专用脱臭菌剂，其特征在于，所述大曲是天水四门大曲。
4： 0×10 个孢子或细胞 /L 的菌液，最后按接种量 50 ～ 100mL/L 等量接种到玉米秸秆粉固体培养基上培养即成。 3. 根据权利要求 2 所述的专用脱臭菌剂，其特征在于，所述培养所得的微生物用稀释 6 分离法得到的细菌总数为 1.5×10 个 /g 干曲，其中芽孢杆菌占细菌总数的 36.3％，醋酸杆菌占细菌总数的 27.3％，乳酸杆菌占细菌总数的 36.4％；获得的霉菌总数为 0.8×105 个 / g 干曲，其中曲霉占霉菌总数的 50％，毛霉占霉菌总数的 33％，根霉占霉菌总数的 17％；获 4 得的酵母菌总数为 0.5×10 个 /g 干曲，其中啤酒酵母和假丝酵母各占酵母菌总数的 50％。 4. 根据权利要求 2 所述的专用脱臭菌剂，其特征在于，在所述各自的培养基上进行扩大培养时增加生产中常见的假单胞菌进行扩大培养。
5：根据权利要求 2 所述的专用脱臭菌剂，其特征在于，所述牛粪培养基按质量 kg/ 体积 L 的百分比计，为：牛粪 40％～ 70％，玉米粉 20％～ 50％，磷酸铵 0.5％～ 2％，硫酸镁 0.01％～ 0.05％，磷酸二氢钾 0.002％～ 0.012％，用蒸馏水配制， pH 值为 4.0 ～ 7.0 ； 6. 根据权利要求 2 所述的专用脱臭菌剂，其特征在于，所述对菌株进行扩大培养的培养基为：细菌培养基按质量 kg/ 体积 L 的百分比计，为：牛肉膏 0.1％～ 0.5％，蛋白胨 0.5％～ 1.5％，氯化钠 0.1％～ 0.5％，琼脂为 1.5％～ 2％，用蒸馏水配制，初始 pH 值 5.0 ～ 6.5， 121℃高压灭菌 15 分钟～ 20 分钟，培养条件为： 25℃～ 35℃恒温培养 24 小时～ 108 小时；霉菌培养基按质量 kg/ 体积 L 的百分比计，为：去皮马铃薯 20％～ 30％，葡萄糖 1％～ 3％，琼脂 1.5％～ 2％，用蒸馏水配制，初始 pH 值 5.0 ～ 6.5， 121℃高压灭菌 15 分钟～ 20 分钟，培养条件为： 25℃～ 35℃恒温培养 24 小时～ 108 小时；酵母菌培养基：麦芽汁 6° Bx ～ 12° Bx，用蒸馏水配制，初始 pH 值 5.0 ～ 6.5， 121℃ 高压灭菌 15 分钟～ 20 分钟，培养条件为：摇床振荡 25℃～ 35℃恒温培养 24 小时～ 108 小时，转速为 150 ～ 200r/min。 7. 根据权利要求 2 所述的专用脱臭菌剂，其特征在于，所述玉米秸秆粉固体培养基按质量 kg/ 体积 L 的百分比计，为：玉米秸秆粉 40 ％～ 80 ％，麸皮 20 ％～ 40 ％，磷酸铵 0.5％～ 2％，硫酸镁 0.01％～ 0.05％，磷酸二氢钾 0.002％～ 0.012％，用蒸馏水配制，初始 pH 值 5.0 ～ 6.5， 121℃高压灭菌 15 分钟～ 20 分钟， 20℃～ 35℃恒温浅盘培养 2 天～ 6 天，期间注意倒盘。 8. 根据权利要求 2 所述的专用脱臭菌剂，其特征在于，将所述培养成的菌剂在干燥通风的房间中干燥 2 天，水分控制在 6％左右，然后粉碎成 40 目的粉末。 9. 根据权利要求 2 所述的专用脱臭菌剂，其特征在于，所述大曲是天水四门大曲。
6： 3％，醋酸杆菌占细菌总数的 2
7： 3％，乳酸杆菌占细菌总数的 36.4％；获得的霉菌总数为 0.8×105 个 / g 干曲，其中曲霉占霉菌总数的 50％，毛霉占霉菌总数的 33％，根霉占霉菌总数的 17％；获 4 得的酵母菌总数为 0.5×10 个 /g 干曲，其中啤酒酵母和假丝酵母各占酵母菌总数的 50％。 4. 根据权利要求 2 所述的专用脱臭菌剂，其特征在于，在所述各自的培养基上进行扩大培养时增加生产中常见的假单胞菌进行扩大培养。 5. 根据权利要求 2 所述的专用脱臭菌剂，其特征在于，所述牛粪培养基按质量 kg/ 体积 L 的百分比计，为：牛粪 40％～ 70％，玉米粉 20％～ 50％，磷酸铵 0.5％～ 2％，硫酸镁 0.01％～ 0.05％，磷酸二氢钾 0.002％～ 0.012％，用蒸馏水配制， pH 值为 4.0 ～ 7.0 ； 6. 根据权利要求 2 所述的专用脱臭菌剂，其特征在于，所述对菌株进行扩大培养的培养基为：细菌培养基按质量 kg/ 体积 L 的百分比计，为：牛肉膏 0.1％～ 0.5％，蛋白胨 0.5％～ 1.5％，氯化钠 0.1％～ 0.5％，琼脂为 1.5％～ 2％，用蒸馏水配制，初始 pH 值 5.0 ～ 6.5， 121℃高压灭菌 15 分钟～ 20 分钟，培养条件为： 25℃～ 35℃恒温培养 24 小时～ 108 小时；霉菌培养基按质量 kg/ 体积 L 的百分比计，为：去皮马铃薯 20％～ 30％，葡萄糖 1％～ 3％，琼脂 1.5％～ 2％，用蒸馏水配制，初始 pH 值 5.0 ～ 6.5， 121℃高压灭菌 15 分钟～ 20 分钟，培养条件为： 25℃～ 35℃恒温培养 24 小时～ 108 小时；酵母菌培养基：麦芽汁 6° Bx ～ 12° Bx，用蒸馏水配制，初始 pH 值 5.0 ～ 6.5， 121℃ 高压灭菌 15 分钟～ 20 分钟，培养条件为：摇床振荡 25℃～ 35℃恒温培养 24 小时～ 108 小时，转速为 150 ～ 200r/min。 7. 根据权利要求 2 所述的专用脱臭菌剂，其特征在于，所述玉米秸秆粉固体培养基按质量 kg/ 体积 L 的百分比计，为：玉米秸秆粉 40 ％～ 80 ％，麸皮 20 ％～ 40 ％，磷酸铵 0.5％～ 2％，硫酸镁 0.01％～ 0.05％，磷酸二氢钾 0.002％～ 0.012％，用蒸馏水配制，初始 pH 值 5.0 ～ 6.5， 121℃高压灭菌 15 分钟～ 20 分钟， 20℃～ 35℃恒温浅盘培养 2 天～ 6 天，期间注意倒盘。
8：根据权利要求 2 所述的专用脱臭菌剂，其特征在于，将所述培养成的菌剂在干燥通风的房间中干燥 2 天，水分控制在 6％左右，然后粉碎成 40 目的粉末。
9：根据权利要求 2 所述的专用脱臭菌剂，其特征在于，所述大曲是天水四门大曲。

说明书

牛粪微生物脱臭方法及专用脱臭菌剂
    技术领域本发明属循环农业中的废物再利用技术，涉及到微生物牛粪脱臭技术及实现该方法的专用脱臭菌剂。
     背景技术随着经济的发展和人民生活水平的提高，人们对工作和生活环境的要求也逐渐提高，恶臭气体作为环境公害之一也越来越受到关注。目前，处理恶臭气体采用的方法主要有吸收、吸附、氧化、掩蔽、稀释扩散、过滤、堆肥等方法。微生物脱臭技术是 20 世纪 50 年代发展起来的新型脱臭技术，它是应用自然界中微生物的生理代谢活动降解恶臭物质，将其氧化成无臭、无害的最终产物，达到脱臭的目的。
     利用太空特殊的环境条件对生物种质材料产生的诱变来培育优良品种成为一种有效新途径。中国对农作物航天育种技术研究较多，已取得了大量成果。中国发明专利 “一种空间育种的方法” (ZL02125223.8) 把航天技术和农业育种技术有机结合在一起，开创了一条崭新的农作物育种新途径，但利用航天技术培育微生物制备脱臭菌剂，并用其进行粪便脱臭的技术尚未见报道。
     发明内容
     本发明所要解决的技术问题是提供一种牛粪微生物脱臭方法，为此，本发明还提供了实现该方法的专用脱臭菌剂。
     为解决上述技术问题，本发明采用技术方案的基本构思是：在含水量为 60 ％～ 70％的湿牛粪中按 10％～ 20％的质量比直接加入脱臭菌剂，拌匀，在温度 20℃～ 25℃条件下堆置 3 天，晾晒即可。
     为实现牛粪微生物脱臭，上述脱臭方法要采用专用脱臭菌剂，该菌剂采用如下方法获得：选择大曲搭载于返回式航天器上，使大曲在太空特殊的环境条件发生诱导变异，返回地面后，取 1g 经诱变的大曲于 100mL 的蒸馏水中成为稀释菌液，充分振荡后，向牛粪培养基中接入 1mL 的所述稀释菌液， 20℃～ 35℃恒温培养 24 小时～ 84 小时，然后对培养所得的微生物进行分离并鉴定，对鉴定所得的细菌、霉菌、酵母菌分别在各自的培养基上进行扩大 11 培养，然后将其分别用蒸馏水制成 1.0×10 ～ 4.0×1011 个孢子或细胞 /L 的菌液，最后按接种量 50 ～ 100mL/L 等量接种到玉米秸秆粉固体培养基上培养即成。
     其中，所述培养所得的微生物用稀释分离法得到的细菌总数为 1.5×106 个 /g 干曲，其中芽孢杆菌占细菌总数的 36.3％，醋酸杆菌占细菌总数的 27.3％，乳酸杆菌占细菌 5 其中曲霉占霉菌总数的 50％，毛霉总数的 36.4％；获得的霉菌总数为 0.8×10 个 /g 干曲， 4 占霉菌总数的 33％，根霉占霉菌总数的 17％；获得的酵母菌总数为 0.5×10 个 /g 干曲，其中啤酒酵母和假丝酵母各占酵母菌总数的 50％。
     较优的，在所述各自的培养基上进行扩大培养时增加生产中常见的假单胞菌进行扩大培养。其中，所述牛粪培养基按质量 kg/ 体积 L 的百分比计，为：牛粪 40 ％～ 70 ％，玉米粉 20 ％～ 50 ％，磷酸铵 0.5 ％～ 2 ％，硫酸镁 0.01 ％～ 0.05 ％，磷酸二氢钾 0.002 ％～ 0.012％，用蒸馏水配制， pH 值为 4.0 ～ 7.0 ；
     其中，所述对菌株进行扩大培养的培养基为：
     细菌培养基按质量 kg/ 体积 L 的百分比计，为：牛肉膏 0.1 ％～ 0.5 ％，蛋白胨 0.5％～ 1.5％，氯化钠 0.1％～ 0.5％，琼脂 1.5％～ 2％，用蒸馏水配制，初始 pH 值 5.0 ～ 6.5， 121℃高压灭菌 15 分钟～ 20 分钟，培养条件为： 25℃～ 35℃恒温培养 24 小时～ 108 小时；
     霉菌培养基按质量 kg/ 体积 L 的百分比计，为：去皮马铃薯 20％～ 30％，葡萄糖 1 ％～ 3 ％，琼脂 1.5 ％～ 2 ％，用蒸馏水配制，初始 pH 值 5.0 ～ 6.5， 121 ℃高压灭菌 15 分钟～ 20 分钟，培养条件为： 25℃～ 35℃恒温培养 24 小时～ 108 小时；
     酵母菌培养基：麦芽汁 6° Bx ～ 12° Bx，用蒸馏水配制，初始 pH 值 5.0 ～ 6.5， 121℃高压灭菌 15 分钟～ 20 分钟，培养条件为：摇床振荡 25℃～ 35℃恒温培养 24 小时～ 108 小时，转速为 150 ～ 200r/min。
     其中，所述玉米秸秆粉固体培养基按质量 kg/ 体积 L 的百分比计，为：玉米秸秆粉 40％～ 80％，麸皮 20％～ 40％，磷酸铵 0.5％～ 2％，硫酸镁 0.01％～ 0.05％，磷酸二氢钾 0.002％～ 0.012％，用蒸馏水配制，初始 pH 值 5.0 ～ 6.5， 121℃高压灭菌 15 分钟～ 20 分钟， 20℃～ 35℃恒温浅盘培养 2 天～ 6 天，期间注意倒盘。较优的，将所述培养成的菌剂在干燥通风的房间中干燥 2 天，水分控制在 6 ％左右，然后粉碎成 40 目的粉末。
     较优的，所述大曲是天水四门大曲。
     本发明的有益效果是，脱臭效率高，无二次污染，操作费用低，设备要求简单，采用不包括假单胞菌的专用脱臭菌剂的脱臭方法可使牛粪中 NH3 的去除率达 40.8％，使牛粪中 H2S 的去除率达 55.3％，牛粪气味的感官鉴定为微臭；采用包括假单胞菌的专用脱臭菌剂的脱臭方法可使牛粪中 NH3 的去除率达 80.2％，使牛粪中 H2S 的去除率达 82.0％，牛粪气味的感官鉴定为不臭。
     具体实施方式
     实施例 1
     1、专用脱臭菌剂的制备
     (1) 选择大曲搭载于返回式航天器上，使大曲在太空特殊的环境条件诱导下发生变异，返回式航天器返回地面后，取 1g 经诱变的大曲于 100mL 的蒸馏水中，充分振荡后，向牛粪培养基中接入 1mL 的稀释液， 20℃～ 35℃恒温培养 24 小时～ 84 小时，其中，牛粪培养基的组分为：牛粪 40％～ 70％，玉米粉 20％～ 50％，磷酸铵 0.5％～ 2％，硫酸镁 0.01％～ 0.05％，磷酸二氢钾 0.002％～ 0.012％，用蒸馏水配制， pH 值为 4.0 ～ 7.0 ；大曲选用天水四门大曲，通过商业途径从市场上购买得到。
     (2) 将对培养所得的微生物菌群利用稀释分离方法，在平板培养基上得到纯菌株，并对其鉴定，所述培养所得的微生物用稀释分离法得到的细菌总数为 1.5×106 个 /g 干曲，其中芽孢杆菌占细菌总数的 36.4％，醋酸杆菌占细菌总数的 27.3％，乳酸杆菌占细菌总数的 36.4％；获得的霉菌总数为 0.8×105 个 /g 干曲，其中曲霉占霉菌总数的 50％，毛霉占霉 4 菌总数的 33％，根霉占霉菌总数的 17％；获得的酵母菌总数为 0.5×10 个 /g 干曲，其中啤酒酵母和假丝酵母各占酵母菌总数的 50％。
     (3) 对细菌、霉菌、酵母菌分别在各自的培养基上进行扩大培养，将其分别制备成 11 11 1.0×10 ～ 4.0×10 个孢子或细胞 /L 的菌液，其中：
     细菌培养基：牛肉膏 0.1 ％～ 0.5 ％，蛋白胨 0.5 ％～ 1.5 ％，氯化钠 0.1 ％～ 0.5％，琼脂 1.5％～ 2％，用蒸馏水配制，初始 pH 值 5.0 ～ 6.5， 121℃高压灭菌 15 分钟～ 20 分钟，培养条件为： 25℃～ 35℃恒温培养 24 小时～ 108 小时。
     霉菌培养基：去皮马铃薯 20％～ 30％，葡萄糖 1％～ 3％，琼脂 1.5％～ 2％，用蒸馏水配制，初始 pH 值 5.0 ～ 6.5， 121 ℃高压灭菌 15 分钟～ 20 分钟，培养条件为： 25 ℃～ 35℃恒温培养 24 小时～ 108 小时。
     酵母菌培养基：麦芽汁 6° Bx ～ 12° Bx，用蒸馏水配制，初始 pH 值 5.0 ～ 6.5， 121℃高压灭菌 15 分钟～ 20 分钟，培养条件为： 25℃～ 35℃恒温培养 24 小时～ 108 小时。
     (4) 按接种量 50 ～ 100mL/L 等量接种到玉米秸秆粉固体培养基上培养，其中：
     玉米秸秆粉固体培养基：玉米秸秆粉 40 ％～ 80 ％，麸皮 20 ％～ 40 ％，磷酸铵 0.5％～ 2％，硫酸镁 0.01％～ 0.05％，磷酸二氢钾 0.002％～ 0.012％，用蒸馏水配制，初始 pH 值 5.0 ～ 6.5， 121℃高压灭菌 15 分钟～ 20 分钟， 20℃～ 35℃恒温浅盘培养 2 天～ 6 天，期间注意倒盘。
     (5) 将所述培养成的菌剂在干燥通风的房间中干燥 2 天，水分控制在 6％左右，然后粉碎成 40 目的粉末。
     2、牛粪微生物脱臭方法
     在含水量为 60％～ 70％的湿牛粪中按 10％～ 20％的质量比直接加入脱臭菌剂，拌匀，在温度 20℃～ 25℃条件下堆置 3 天，晾晒即可。
     实施例 2
     1、专用脱臭菌剂的制备
     其中，对应于实施例 1 的各个步骤，下面仅列出不同的步骤，步骤 (1)、 (2)、 (4)、 (5) 与实施例 1 中相同，在此不再赘述。
     (3) 对细菌、霉菌、酵母菌分别在各自的培养基上进行扩大培养，将其分别制备成 11 11 1.0×10 ～ 4.0×10 个孢子或细胞 /L 的菌液，同时，增加生产中常见的假单胞菌进行扩大培养，其中：
     细菌培养基、霉菌培养基和酵母菌培养基的配方、培养条件和培养方法与实施例 1 中相同。
     2、牛粪微生物脱臭方法
     与实施例 1 中相同，在此不再赘述。5

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1、10申请公布号CN102030453A43申请公布日20110427CN102030453ACN102030453A21申请号200910179624322申请日20091006C02F11/02200601B01D53/84200601C12N15/01200601C12N1/20200601C12N1/16200601C12N1/14200601C12R1/72200601C12R1/865200601C12R1/845200601C12R1/785200601C12R1/66200601C12R1/225200601C12R1/02200601C12R1/0720060171申请人黄高宝。

2、地址730070甘肃省兰州市安宁区营门村1号甘肃农业大学农学院申请人张宗舟马旭光72发明人黄高宝张宗舟马旭光王淑娟曹莉54发明名称牛粪微生物脱臭方法及专用脱臭菌剂57摘要本发明公开了一种牛粪微生物脱臭方法及其专用脱臭菌剂。在湿牛粪中按1020的质量比直接加入脱臭菌剂，拌匀，在温度2025条件下堆置3天，晾晒即可；为实现牛粪微生物脱臭，上述脱臭方法要采用专用脱臭菌剂选择大曲搭载于返回式航天器上，返回地面后，取1G经诱变的大曲于100ML的蒸馏水中制成稀释菌液，向牛粪培养基中接入1ML的所述稀释菌液，2035恒温培养24小时84小时，然后将所得的细菌、霉菌、酵母菌分别在各自的培养基上进行扩大培养，。

3、并分别制成101011401011个孢子或细胞/L的菌液，最后按接种量50100ML/L等量接种到玉米秸秆粉固体培养基上培养即成。51INTCL19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书3页CN102030456A1/1页21一种牛粪微生物脱臭方法，其特征在于，在含水量为6070的湿牛粪中按1020的质量比直接加入脱臭菌剂，拌匀，在温度2025条件下堆置3天，晾晒即可。2实现权利要求1所述牛粪微生物脱臭方法的专用脱臭菌剂，其特征在于，选择大曲搭载于返回式航天器上，使大曲在太空特殊的环境条件发生诱导变异，返回地面后，取1G经诱变的大曲于100ML的蒸馏水中制成稀释菌液，。

4、充分振荡后，向牛粪培养基中接入1ML的所述稀释菌液，2035恒温培养24小时84小时，然后对培养所得的微生物进行分离并鉴定，对鉴定所得的细菌、霉菌、酵母菌分别在各自的培养基上进行扩大培养，然后将其分别用蒸馏水制成101011401011个孢子或细胞/L的菌液，最后按接种量50100ML/L等量接种到玉米秸秆粉固体培养基上培养即成。3根据权利要求2所述的专用脱臭菌剂，其特征在于，所述培养所得的微生物用稀释分离法得到的细菌总数为15106个/G干曲，其中芽孢杆菌占细菌总数的363，醋酸杆菌占细菌总数的273，乳酸杆菌占细菌总数的364；获得的霉菌总数为08105个/G干曲，其中曲霉占霉菌总数的50。

5、，毛霉占霉菌总数的33，根霉占霉菌总数的17；获得的酵母菌总数为05104个/G干曲，其中啤酒酵母和假丝酵母各占酵母菌总数的50。4根据权利要求2所述的专用脱臭菌剂，其特征在于，在所述各自的培养基上进行扩大培养时增加生产中常见的假单胞菌进行扩大培养。5根据权利要求2所述的专用脱臭菌剂，其特征在于，所述牛粪培养基按质量KG/体积L的百分比计，为牛粪4070，玉米粉2050，磷酸铵052，硫酸镁001005，磷酸二氢钾00020012，用蒸馏水配制，PH值为4070；6根据权利要求2所述的专用脱臭菌剂，其特征在于，所述对菌株进行扩大培养的培养基为细菌培养基按质量KG/体积L的百分比计，为牛肉膏01。

6、05，蛋白胨0515，氯化钠0105，琼脂为152，用蒸馏水配制，初始PH值5065，121高压灭菌15分钟20分钟，培养条件为2535恒温培养24小时108小时；霉菌培养基按质量KG/体积L的百分比计，为去皮马铃薯2030，葡萄糖13，琼脂152，用蒸馏水配制，初始PH值5065，121高压灭菌15分钟20分钟，培养条件为2535恒温培养24小时108小时；酵母菌培养基麦芽汁6BX12BX，用蒸馏水配制，初始PH值5065，121高压灭菌15分钟20分钟，培养条件为摇床振荡2535恒温培养24小时108小时，转速为150200R/MIN。7根据权利要求2所述的专用脱臭菌剂，其特征在于，所述玉。

7、米秸秆粉固体培养基按质量KG/体积L的百分比计，为玉米秸秆粉4080，麸皮2040，磷酸铵052，硫酸镁001005，磷酸二氢钾00020012，用蒸馏水配制，初始PH值5065，121高压灭菌15分钟20分钟，2035恒温浅盘培养2天6天，期间注意倒盘。8根据权利要求2所述的专用脱臭菌剂，其特征在于，将所述培养成的菌剂在干燥通风的房间中干燥2天，水分控制在6左右，然后粉碎成40目的粉末。9根据权利要求2所述的专用脱臭菌剂，其特征在于，所述大曲是天水四门大曲。权利要求书CN102030453ACN102030456A1/3页3牛粪微生物脱臭方法及专用脱臭菌剂技术领域0001本发明属循环农业中的。

8、废物再利用技术，涉及到微生物牛粪脱臭技术及实现该方法的专用脱臭菌剂。背景技术0002随着经济的发展和人民生活水平的提高，人们对工作和生活环境的要求也逐渐提高，恶臭气体作为环境公害之一也越来越受到关注。目前，处理恶臭气体采用的方法主要有吸收、吸附、氧化、掩蔽、稀释扩散、过滤、堆肥等方法。微生物脱臭技术是20世纪50年代发展起来的新型脱臭技术，它是应用自然界中微生物的生理代谢活动降解恶臭物质，将其氧化成无臭、无害的最终产物，达到脱臭的目的。0003利用太空特殊的环境条件对生物种质材料产生的诱变来培育优良品种成为一种有效新途径。中国对农作物航天育种技术研究较多，已取得了大量成果。中国发明专利“一种空。

9、间育种的方法”ZL021252238把航天技术和农业育种技术有机结合在一起，开创了一条崭新的农作物育种新途径，但利用航天技术培育微生物制备脱臭菌剂，并用其进行粪便脱臭的技术尚未见报道。发明内容0004本发明所要解决的技术问题是提供一种牛粪微生物脱臭方法，为此，本发明还提供了实现该方法的专用脱臭菌剂。0005为解决上述技术问题，本发明采用技术方案的基本构思是在含水量为6070的湿牛粪中按1020的质量比直接加入脱臭菌剂，拌匀，在温度2025条件下堆置3天，晾晒即可。0006为实现牛粪微生物脱臭，上述脱臭方法要采用专用脱臭菌剂，该菌剂采用如下方法获得选择大曲搭载于返回式航天器上，使大曲在太空特殊的。

10、环境条件发生诱导变异，返回地面后，取1G经诱变的大曲于100ML的蒸馏水中成为稀释菌液，充分振荡后，向牛粪培养基中接入1ML的所述稀释菌液，2035恒温培养24小时84小时，然后对培养所得的微生物进行分离并鉴定，对鉴定所得的细菌、霉菌、酵母菌分别在各自的培养基上进行扩大培养，然后将其分别用蒸馏水制成101011401011个孢子或细胞/L的菌液，最后按接种量50100ML/L等量接种到玉米秸秆粉固体培养基上培养即成。0007其中，所述培养所得的微生物用稀释分离法得到的细菌总数为15106个/G干曲，其中芽孢杆菌占细菌总数的363，醋酸杆菌占细菌总数的273，乳酸杆菌占细菌总数的364；获得的霉。

11、菌总数为08105个/G干曲，其中曲霉占霉菌总数的50，毛霉占霉菌总数的33，根霉占霉菌总数的17；获得的酵母菌总数为05104个/G干曲，其中啤酒酵母和假丝酵母各占酵母菌总数的50。0008较优的，在所述各自的培养基上进行扩大培养时增加生产中常见的假单胞菌进行扩大培养。说明书CN102030453ACN102030456A2/3页40009其中，所述牛粪培养基按质量KG/体积L的百分比计，为牛粪4070，玉米粉2050，磷酸铵052，硫酸镁001005，磷酸二氢钾00020012，用蒸馏水配制，PH值为4070；0010其中，所述对菌株进行扩大培养的培养基为0011细菌培养基按质量KG/体积。

12、L的百分比计，为牛肉膏0105，蛋白胨0515，氯化钠0105，琼脂152，用蒸馏水配制，初始PH值5065，121高压灭菌15分钟20分钟，培养条件为2535恒温培养24小时108小时；0012霉菌培养基按质量KG/体积L的百分比计，为去皮马铃薯2030，葡萄糖13，琼脂152，用蒸馏水配制，初始PH值5065，121高压灭菌15分钟20分钟，培养条件为2535恒温培养24小时108小时；0013酵母菌培养基麦芽汁6BX12BX，用蒸馏水配制，初始PH值5065，121高压灭菌15分钟20分钟，培养条件为摇床振荡2535恒温培养24小时108小时，转速为150200R/MIN。0014其中，。

13、所述玉米秸秆粉固体培养基按质量KG/体积L的百分比计，为玉米秸秆粉4080，麸皮2040，磷酸铵052，硫酸镁001005，磷酸二氢钾00020012，用蒸馏水配制，初始PH值5065，121高压灭菌15分钟20分钟，2035恒温浅盘培养2天6天，期间注意倒盘。0015较优的，将所述培养成的菌剂在干燥通风的房间中干燥2天，水分控制在6左右，然后粉碎成40目的粉末。0016较优的，所述大曲是天水四门大曲。0017本发明的有益效果是，脱臭效率高，无二次污染，操作费用低，设备要求简单，采用不包括假单胞菌的专用脱臭菌剂的脱臭方法可使牛粪中NH3的去除率达408，使牛粪中H2S的去除率达553，牛粪气味。

14、的感官鉴定为微臭；采用包括假单胞菌的专用脱臭菌剂的脱臭方法可使牛粪中NH3的去除率达802，使牛粪中H2S的去除率达820，牛粪气味的感官鉴定为不臭。具体实施方式0018实施例100191、专用脱臭菌剂的制备00201选择大曲搭载于返回式航天器上，使大曲在太空特殊的环境条件诱导下发生变异，返回式航天器返回地面后，取1G经诱变的大曲于100ML的蒸馏水中，充分振荡后，向牛粪培养基中接入1ML的稀释液，2035恒温培养24小时84小时，其中，牛粪培养基的组分为牛粪4070，玉米粉2050，磷酸铵052，硫酸镁001005，磷酸二氢钾00020012，用蒸馏水配制，PH值为4070；大曲选用天水四门。

15、大曲，通过商业途径从市场上购买得到。00212将对培养所得的微生物菌群利用稀释分离方法，在平板培养基上得到纯菌株，并对其鉴定，所述培养所得的微生物用稀释分离法得到的细菌总数为15106个/G干曲，其中芽孢杆菌占细菌总数的364，醋酸杆菌占细菌总数的273，乳酸杆菌占细菌总数说明书CN102030453ACN102030456A3/3页5的364；获得的霉菌总数为08105个/G干曲，其中曲霉占霉菌总数的50，毛霉占霉菌总数的33，根霉占霉菌总数的17；获得的酵母菌总数为05104个/G干曲，其中啤酒酵母和假丝酵母各占酵母菌总数的50。00223对细菌、霉菌、酵母菌分别在各自的培养基上进行扩大培。

16、养，将其分别制备成101011401011个孢子或细胞/L的菌液，其中0023细菌培养基牛肉膏0105，蛋白胨0515，氯化钠0105，琼脂152，用蒸馏水配制，初始PH值5065，121高压灭菌15分钟20分钟，培养条件为2535恒温培养24小时108小时。0024霉菌培养基去皮马铃薯2030，葡萄糖13，琼脂152，用蒸馏水配制，初始PH值5065，121高压灭菌15分钟20分钟，培养条件为2535恒温培养24小时108小时。0025酵母菌培养基麦芽汁6BX12BX，用蒸馏水配制，初始PH值5065，121高压灭菌15分钟20分钟，培养条件为2535恒温培养24小时108小时。00264按。

17、接种量50100ML/L等量接种到玉米秸秆粉固体培养基上培养，其中0027玉米秸秆粉固体培养基玉米秸秆粉4080，麸皮2040，磷酸铵052，硫酸镁001005，磷酸二氢钾00020012，用蒸馏水配制，初始PH值5065，121高压灭菌15分钟20分钟，2035恒温浅盘培养2天6天，期间注意倒盘。00285将所述培养成的菌剂在干燥通风的房间中干燥2天，水分控制在6左右，然后粉碎成40目的粉末。00292、牛粪微生物脱臭方法0030在含水量为6070的湿牛粪中按1020的质量比直接加入脱臭菌剂，拌匀，在温度2025条件下堆置3天，晾晒即可。0031实施例200321、专用脱臭菌剂的制备0033其中，对应于实施例1的各个步骤，下面仅列出不同的步骤，步骤1、2、4、5与实施例1中相同，在此不再赘述。00343对细菌、霉菌、酵母菌分别在各自的培养基上进行扩大培养，将其分别制备成101011401011个孢子或细胞/L的菌液，同时，增加生产中常见的假单胞菌进行扩大培养，其中0035细菌培养基、霉菌培养基和酵母菌培养基的配方、培养条件和培养方法与实施例1中相同。00362、牛粪微生物脱臭方法0037与实施例1中相同，在此不再赘述。说明书CN102030453A。

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