对整联蛋白，特别是ανβ3整联蛋白 具有特异性活性的三环化合物， 它们的制备方法和这种方法的中间体， 它们作为药物的用途以及含有它们的药物组合物 本发明涉及新的三环化合物、它们的制备方法和这种方法的中间体、它们作为药物的用途以及含有它们的药物组合物。
本发明的目的是提供通式(Ⅰ)化合物以及它们的酸和碱加成盐和它们地酯：
其中R1代表-C≡C-[A]-[B]-COR6,-CH=CH-[A]-[B]-COR6,-(CH2)2-[A]-[B]-COR6,-O-[A]-[B]-COR6,-CH2CO-[A]-[B]-COR6基团，-[A]-代表：
-衍生自包含1-12个碳原子和1-6个选自氧、氮或硫原子的杂原子的饱和或不饱和、直链或支链结构的二价烃基，
-或衍生自包含1-12个碳原子的饱和或不饱和、直链或支链无环烃的二价基团，
[B]代表苯基，CH[Z]基，或单键，
Z代表氢原子，下列基团之一：(D)0-6-NRaRb,(D)0-6-NH-SO2-Rc,(D)0-6-NH-CO2-Rc,(D)0-6-NH-CO-Rc,(D)0-6-NH-SO2-NH-Rc,(D)0-6-NH-CO-NH-Rc,(D)0-6-CO2-Rc,(D)0-6-SO2-Rc,(D)0-6-CO-Rc或(D)0-6-Rc，其中(D)0-6表示衍生自含有0-6个碳原子的饱和或不饱和、直链或支链无环烃的二价基团，Ra、Rb和Rc代表：氢原子；(CH2)0-3-Ar基，其中Ar代表含有6-18个碳原子的碳环芳基；(CH2)0-3-Het基，其中Het代表衍生自含有1-9个碳原子和1-5个选自氧，氮或硫原子的杂原子的饱和或不饱和芳族或非芳族杂环的基团；(CH2)0-3-Alk基，其中Alk代表衍生自含有1-12个碳原子的饱和或不饱和直链、支链或环状非芳烃的基团，基团Het、Ar和Alk可以为未取代的或为取代的，或者Ra和Rb还可以与它们所键连的氮原子一起表示任选含有1个或多个选自氧，氮或硫原子的杂原子的饱和或不饱和芳族或非芳族含氮杂环，该基团可以是取代的或未取代的。
-R6代表羟基，O-Alk,O-Ar,NH2,NH-Alk,N(Alk)2基团或L或D氨基酸的剩余部分，Alk和Ar的定义同上，可以为取代的或未取代的。
-R2和R3相同或不同，且代表氢原子，羟基，O-Alk基或O-(CH2)03-Ar基，其中Alk和Ar的定义如上，或者R2与R3一起形成-O-(CRdRe)n-O-型环，其中n为整数1-5,Rd和Re各自独立表示氢原子，含有1-6个碳原子的烷基，或苯基。
-R4代表氢原子，卤原子，下列基团之一：羟基、氨基、硝基、氰基、CF3、含有1-12个碳原子的酰基或酰氧基、烷基、链烯基、炔基、烷硫基、烷氧基、烷基氨基、二烷基氨基、二烷基氨基烷基、二烷基氨基烷氧基，其中术语烷基含1-6个碳原子。
-R5代表氢原子，羟基，卤原子，O-Alk基团或O-(CH2)0-3-Ar基团，其中的Alk和Ar如上定义，
-G代表：
式G1基团：
其中Rh为氢原子或如上所定义的(Alk)基团，且(Het′)代表如下通式的杂环：其中(H)与N=C-NH-单元一起形成含有1-9个碳原子和2-5个选自氧、氮和硫原子的杂原子的饱和或不饱和的单-或二环芳族或非芳族杂环的剩余部分，该基团可以是取代的或未取代的，
-或NRaRb基团(基团G2),Ra和Rb的定义同上，
-或定义同上的(Het)基团(基团G3)，
-或-NRh-C(=X)-NHRc基团(基团G4)，其中X为硫或氧原子或NH，Rh和Rc的定义同上，
-或-NRh-SO2Rc基团(基团G5)，其中Rh和Rc的定义同上，
虚线代表任选的第二条键，以及
R1、R2和R3可以位于三环的8、9或10位上。
式(Ⅰ)化合物指所有可能的单一几何异构体和立体异构体以及它们的混合物形式。
表示衍生自含1-12个碳原子和1-6个选自氧、氮或硫原子的杂原子的饱和或不饱和、直链或支链结构的二价基团的-[A]-基团尤指衍生自链烷烃的基团，其中该链烷烃的一些碳原子被氧或硫原子置换，或者被下列基团置换：C=O,SO,SO2,NH,N(Alk),NH-CO,N(Alk)-CO,CO-NH,CO-N(Alk),SO2-NH,SO2-N(Alk)，其中(Alk)的定义同上。因此，上述-[A]-基团可以为下列基团：-CH2-CH2-O-CH2-CH2-,-CH2-CH2-N(CH3)-CH2-CH2-,-CH2-CH2-C(O)-CH2-CH2-,-CH2-C(O)-C(Me)2-CH2-。
当-[A]-代表衍生自含1-12个碳原子的饱和或不饱和、直链或支链无环烃的二价基团时，尤指式-(CH2)n-亚烷基基团(其中n代表1-12的整数)，如-CH2-,-CH2CH2-,-CH2CH2CH2-或-CH2CH2CH2CH2-，或诸如-CH=CH-CH2-或-C≡C-CH2-之类的亚烯基或亚炔基。
当这些二价基团为支链基团时，它们可以是诸如-CH(CH3)-,-C(Me)2,-CH2-C(Me)2-,-CH(Et)-,-CH(C≡CH)-或-C(C≡CH)(Et)-之类的基团。
当[B]代表-Ph-二价基团时，COR6基团可以位于邻、间或对位上。优选位于对位位置上。
当(D)0-6代表衍生自含有0-6个碳原子的饱和或不饱和、直链或支链无环烃的二价基团时，(D)0-6选自上文[A]中所述的基团。(D)0是指该基团不存在，即再一次具有共价单键。(D)优选为单键或(CH2)n基团，其中n为选自1、2或3的整数。
当Ra,Rb和Rc代表(CH2)0-3-Ar,(CH2)0-3-Het,(CH2)0-3-Alk基团时，(CH2)0-3代表单键(就(CH2)0而言)，或基团-CH2-,-(CH2)2-或-(CH2)3-。
代表含有6-18个碳原子碳环芳基基团的术语“(Ar)”是指衍生自芳族环烃的基团如苯基，萘基，菲基，或者为衍生自含有苯环的稠合二环或三环烃的基团，如2,3-二氢化茚基，茚基，二氢化萘基，四氢萘基或芴基。联接点位于苯环部分。优选苯基。
代表衍生自含有1-9个碳原子和1-5个选自氧，氮或硫原子的杂原子的饱和或不饱和、芳族或非芳族杂环基团的术语“(Het)”尤指：
-单环杂环基，例如，下列基团：噻吩基，呋喃基，吡喃基，吡咯基，咪唑基，吡唑基，吡啶基，吡嗪基，嘧啶基，哒嗪基，噻唑基，噁唑基，呋咱基，吡咯啉基，咪唑啉基，吡唑啉基，噻唑啉基，三唑基，四唑基，
-稠合杂环，例如，苯并呋喃基，苯并噻吩基，苯并咪唑基，苯并噻唑基，萘并[2,3-b]噻吩基，噻蒽基，异苯并呋喃基，苯并吡喃基，呫吨基，吩噁噻基(phenoxathiinyle)，中氮茚基，异吲哚基，3H-吲哚基，吲哚基，吲唑基，嘌呤基，喹嗪基，异喹啉基，喹啉基，2,3-二氮杂萘基，1,5-二氮杂萘基，喹喔啉基，喹唑啉基，噌啉基，喋啶基，咔唑基，β-咔啉基，吖啶基，吩嗪基，吩噻嗪基，吩噁嗪基，二氢吲哚基，异二氢吲哚基，咪唑并吡啶基，咪唑并嘧啶基，或者还可以为上述单环杂环构成的稠合多环体系，例如呋喃并[2,3-b]吡咯或噻吩并[2,3-b]呋喃，
-或饱和杂环基，例如吡咯烷，哌啶，吗啉。
此外，该术语(Het)还包括上述(Het′)中的基团。
代表衍生自饱和或不饱和、直链、支链或环状非芳香烃的基团的术语(Alk)在无环烃情况下是指烷基如甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，异丁基，叔丁基，正戊基，正己基，2-甲基戊基，2,3-二甲基丁基，正庚基，2-甲基己基，2,2-二甲基戊基，3,3-二甲基戊基，3-乙基戊基，正-辛基，2,2-二甲基己基，3,3-二甲基己基，3-甲基-3-乙基戊基，壬基，2,4-二甲基庚基或正-癸基，链烯基如乙烯基，丙烯基，异丙烯基，烯丙基，2-甲基烯丙基，丁烯基或异丁烯基，或炔基如乙炔基，丙炔基，炔丙基，丁炔基或异丁炔基；在环状基团情况下是指环烷基，如环丙基，环丁基，环戊基，环己基或金刚烷基。
当Ra和Rb与它们所键连的氮原子一起代表含氮杂环时，尤为下列饱和杂环：吗啉，哌啶，哌嗪，吡咯烷，或不饱和杂环如嘧啶，吡啶或吡嗪。
当R2,R3,R4和R5代表含1-12个碳原子的O-(Alk)基团时，优选为甲氧基，乙氧基，丙氧基，异丙氧基，丁氧基，烯丙基氧基或炔丙氧基。当R2,R3,R4和R5代表O-(CH2)0-3-Ar基时，优选为苯乙氧基和苯丙氧基。
当R2和R3一起形成-O-(CRdRe)n-O-型环时(n为整数1-5)，尤指-O-CH2-O,O-C(Me2)-O,O-C(Ph2)-O基团。
R2与R3必须相互成邻位关系。
当R6代表O-Alk或O-Ar基团时(其中Alk和Ar为取代或未取代的)，尤为下列基团之一：(C1-C8)烷氧基，(C1-C14)芳基(C1-C8)烷氧基，(C6-Cl4)芳氧基，(C1-C8)烷基羧基氧基，(C1-C8)二烷基氨基羰基甲氧基，(C6-C14)芳基，(C1-C8)二烷基氨基羰基甲氧基。
当R6代表NH-alk,NH(alk)2或NH-Ar基团时，尤为下列基团之一：(C1-C8)烷基氨基，二-(C1-C8)烷基氨基，(C6-C14)芳基(C2-C8)烷基氨基，(C6-C14)芳基氨基。
当R6代表氨基酸的剩余部分时，它可以为L或D氨基酸。
L或D氨基酸可以为天然或非天然的。它们优选为α-氨基酸。例如，Houben-Weyl，有机化学方法(Methoden der organischen Chemie)，Vol.XV/1和2,Georg Thieme Verlag,Stuttgart,1974中所述的氨基酸：Aad, Abu, γAbu, Abz, 2ABz, εAca, Ach, Acp, Adpd, Ahb, Aib,βAib, Ala, βAla, Δala, Alg, All, Ama, Amt, Ape, Apm, Apr,Arg, Asn, Asp, Asu, Aze, Azi, Bai, Bph, Can, Cit, Cys,(Cys)2, Cyta, Daad, Dab, Dadd, Dap, Dapm, Dasu, Djen, Dpa,Dtc, Fel, Gln, Glu, Gly, Guy, hAla, hArg, hCys, hGln, hGlu,His, hlle, hLeu, hLys, hMet, hPhe, hPro, hSer, hThr, hTrp,hTyr, Hyl, Hyp, 3Hyp, Ile, Ise, Iva, Kyn, Lant, Lcn, Leu,Lsg, Lys, βLys, Δlys, Met, Mim, Min, nArg, Nle, Nva, Oly,Orn, Pan, Pec, Pen, Phe, Phg, Pic, Pro, Δpro, Pse, Pya, Pyr,Pza, Qin, Ros, Sar, Sec, Sem, Ser, Thi, βThi, Thr, Thy, Thx,Tia, Tle, Tly, Trp, Trta, Tyr, Val,
Tia,Tle,Tly,Trp,Trta,Tyr,Val，叔丁基甘氨酸(Tbg)，新戊基甘氨酸(Npg)，环己基甘氨酸(Chg)，环己基丙氨酸(Cha),2-噻吩基丙氨酸(Thia),2,2-二苯基氨基乙酸，2-(对-甲苯基)2-苯基氨基乙酸，2-(对-氯苯基)氨基乙酸，
或者还为
2-吡咯烷乙酸，1,2,3,4-四氢异喹啉-3-乙酸，十氢异喹啉-3-乙酸，八氢异吲哚-2-乙酸，十氢喹啉-2-乙酸，八氢环戊二烯并[b]吡咯-2-羧酸，2-氮杂二环[2,2,2]辛烷-3-羧酸，2-氮杂二环[2,2,1]庚烷-3-羧酸，2-氮杂二环[3,1,0]己烷-3-羧酸，2-氮杂螺[4,4]壬烷-3-羧酸，2-氮杂螺[4,5]癸烷-3-羧酸，螺(二环[2,2,1]庚烷)-2,3-吡咯烷-5-羧酸，螺(二环[2,2,2]辛烷)-2,3-吡咯烷-5-羧酸，2-氮杂三环[4,3,0,16,9]癸烷-3-羧酸，十氢环庚并[b]吡咯-2-羧酸，十氢环辛并[c]吡咯-2-羧酸，八氢环戊二烯并[c]吡咯-2-羧酸，八氢异吲哚-1-羧酸，2,3,3a,4,6a-六氢环戊二烯并[b]吡咯-2-羧酸，2,3,3a,4,5,7a-六氢吲哚-2-羧酸，四氢噻唑-4-羧酸，异噁唑烷-3-羧酸，吡唑烷-3-羧酸，羟基吡咯烷-2-羧酸，如果合适的话，这些基团可以是取代的(参见下列结构式)：上述杂环剩余部分是已知的，例如，参见下列专利或专利申请：US-A-4.344.949；US-A-4.374.847；US-A-4.350.704；EP-A-29.488；EP-A-31.741；EP-A-46.953；EP-A-49.605； EP-A-49.658；EP-A-50.800；EP-A-51.020；EP-A-52.870； EP-A-79.022；EP-A-84.164；EP-A-89.637；EP-A-90.341； EP-A-90.362；EP-A-105.102；EP-A-109.020；EP-A-111.873；EP-A-
271,865和EP-A-344,682。
另外，氨基酸可以为酯或酰胺形式，例如，甲基酯，乙基酯，异丙基酯，异丁基酯，叔丁基酯，苄基酯，乙基酰胺，氨基脲或ω-氨基酸(C2-C8)-烷基酰胺。
最后，这些氨基酸的官能团可以加以保护。合适的保护基如尿烷保护基，羧基保护基或侧链保护基已记载在Hubbuch,Kontakte(Merck)1979,N°3,p.14-23和Bullesbach,Kontakte(Merck)1980,N°1,p.23-25.中。
例如，可提及的保护基包括下列：Aloc,Pyoc,Fmoc,Tcboc,Z,Boc,Ddz,Bpoc,Adoc,Msc,Moc,Z(NO2),Z(Haln),Bobz,Iboc,Adpoc,Mboc,Acm，叔丁基，Obzl,Onbzl,Ombzl,Bzl,Mob,Pic,Trt。
当G为式G1基团：和(Het′)为下述通式杂环：
其中(H)与N=C-NH-单元一起形成含1-9个碳原子和2-5个选自氧、氮或硫原子的杂原子的饱和或不饱和、单-或二环的芳族或非芳族杂环时，这一基团可以是取代的或未取代的，G1尤其代表下列杂环：
其中p代表整数1-4。
-当G代表-NRaRb基团(称作G2)时，Ra和Rb可以为氢原子，(CH2)0-3-Ar,(CH2)0-3-Het或(CH2)0-3-Alk基团。Ar,Het和Alk基团还可以被定义如下的基团取代。
G2尤为NH2,NH-Alk基团如NHMe,NHET,N(Alk)2基团如NMe2,NEt2,NMeEt,NH-(CH2)0-1-Ar基团如NHPh,NHCH2Ph或NHCH2Het基团如NHCH2-吡咯-2-基。
当Ra为氢原子或(Alk)基团以及Rb为(Het′)基团时，重新可见G1基团的有用性。
当Ra和Rb与它们所键连的氮原子一起形成含氮杂环时，尤为上文所述的杂环基，这些基团可以为取代的或未取代的。
-当G为(Het)基(基团G3)时，该基团可以为取代的或未取代的，尤为上文所列杂环，特别是上文所述的通式(Het′)杂环。当该杂环通过其氮原子位置连接时，还可见其中Ra和Rb与载有它们的氮原子一起形成杂环的G2基团的有用性。
-当G为-NRh-C(=X)-NHRc基(基团G4)，或NRhSO2Rc基(基团G5)时(其中X为硫或氧原子或NH,Rh和Rc的定义同上)，具体为下列基团之一：-NH-C(=NH)-NH2,-NH-C(=O)-NH2或-NH-C(=S)-NH2,-NH-C(=NH)-NHCH2-Ar例如-NH-C(=NH)-NHCH2Ph,-NH-C(=NH)-NHCH2-Het,-NH-C(=NH)-NHCH2-Het′,-NH-C(=NH)-NH-Alk例如-NH-C(=NH)-NHCH3,或-NH-SO2Ph，其中的Ar,Het,Het′或Alk基团为取代或未取代的。
(Alk),(Ar),(Het),(Het′)或形成杂环的NRaRb基团上的可能取代基优选为下列基团：
-卤素：氟，氯，溴，碘，
-含有1-12个碳原子的烷基、链烯基、炔基，例如甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，异丁基，叔丁基，乙烯基或烯丙基；这些基团本身任选被一个或多个卤原子(例如氟)取代，例如三氟甲基，
-氧代，氰基，硝基，甲酰基，羧基和含有1-6个碳原子的羧基烷基，甲酰氨基，
-含有1-12个碳原子的烷氧基如甲氧基，乙氧基，丙氧基，异丙氧基，丁氧基，
-含有1-12个碳原子的烷硫基，如甲硫基，乙硫基，丙硫基，异丙硫基，丁硫基，
-氨基，含有1-12个碳原子的烷基氨基，例如甲氨基或乙氨基，含有2-24个碳原子的二烷基氨基，例如二甲基氨基，二乙基氨基，甲基乙基氨基，这些二烷基氨基可能呈氧化形式，
-含有1-12个碳原子的氨基烷基，例如氨基甲基或氨乙基，
-含有3-25个碳原子的二烷基氨基烷基，例如二甲氨基甲基或乙基，
-含有3-25个碳原子的二烷基氨基烷氧基，例如二甲氨基乙氧基，
-含有1-12个碳原子的可能酰化的羟基，例如乙酰氧基，
-含有1-12个碳原子可能被例如氯、碘或氟原子取代的酰基，例如甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基、异戊酰基、琥珀酰基、新戊酰基、苯甲酰基。还可提及氯乙酰基，二氯乙酰基，三氯乙酰基，溴乙酰基或三氟乙酰基。
-碳环或杂环杂芳基例如苯基，呋喃基，噻吩基，吡啶基或芳烷基如苄基，这些基团本身可能被上文所述的卤素、烷基、烷氧基、烷硫基、氨基烷基或二烷基氨基取代。
当然，可以存在一个或多个相同或不同的取代基。就(Het)来讲，取代基可以位于NH基团或碳原子的位置上。
这些取代基还说明了R4的定义。
应当理解，当R1,R2,R3,R4,R5,R6,Ra,Rb,Rc中包含如上文所述的烷基、芳基或杂环基时，它们彼此独立地相同或不同。
本发明自然扩展到式(Ⅰ)化合物的盐，例如，当式(Ⅰ)化合物包含氨基或氨基胍官能团时，与下列酸所成的盐：盐酸，氢溴酸，硝酸，硫酸，磷酸，乙酸，三氟乙酸，甲酸，丙酸，苯甲酸，马来酸，富马酸，琥珀酸，酒石酸，柠檬酸，草酸，二羟乙酸，天冬氨酸，烷烃磺酸如甲烷-或乙烷磺酸，芳烃磺酸例如苯-或对甲苯磺酸以及芳基羧酸，或者，当式(Ⅰ)化合物含酸官能团时，与碱金属或碱土金属所成的盐，或可能取代的铵盐。
本发明还扩展到式(Ⅰ)化合物的酯。
在第一优选方面中，本发明主题是上文所定义的相应于通式(Ⅰ′)的通式(Ⅰ)化合物及其酸和碱的加成盐和它们的酯
其中R′1代表下列基团之一：-C≡C-[A′]-B′]-COR′6,-CH=CH-[A′]-[B′]-COR′6,-(CH2)2-[A′]-[B′]-COR′6,-O-[A′]-[B′]-COR′6,-CH2CO-[A′]-[B]-COR′6,-[A′]-代表包含1-6个碳原子的二价亚烷基、亚烯基或亚炔基，[B′]代表CH(Z′)基团或单键，
Z′代表氢原子，下列基团之一：(CH2)0-6-NRaRb,(CH2)0-6-NH-SO2-Rc,(CH2)0-6-NH-CO2-Rc,(CH2)0-6-NH-CO-Rc,(CH2)0-6-NH-SO2-NH-Rc,(CH2)0-6-NH-CO-NH-Rc,(CH2)0-6-CO2-Rc,(CH2)0-6-SO2-Rc,
(CH2)0-6-CO-Rc或(CH2)0-6-Rc,Ra,Rb和Rc的定义同上，R′6代表OH，氨基或含有1-8个碳原子且可能被一个或多个选自羟基、氨基、苯基、烷基氨基或二烷基氨基的基团取代的烷氧基，
R′2和R′3代表氢原子或甲氧基，且G的定义同上，虚线表示任选的第二条键。
在第二优选方面中，本发明主题是如上定义的通式(Ⅰ)化合物及其酸和碱的加成盐和它们的酯，其中R6代表下列基团之一：-OH,-OCH3,-OCH2CH3,-O-(CH2)2-OH,
-O-(CH2)2-N-(CH3)2,-NH2或-O-(CH2)-苯基。
在第三优选方面中，本发明主题是如上定义的通式(Ⅰ)化合物及其酸和碱的加成盐和它们的酯，其中R1代表O-(CH2)0-6CH(Z′)-COOH或-(CH2)0-7-CH(Z′)-COOH基团。
在第四优选方面中，本发明主题是如上定义的通式(Ⅰ)化合物及其酸和碱的加成盐和它们的酯，其中(Z′)为氢原子。
在第五优选方面中，本发明主题是如上定义的通式(Ⅰ)化合物及其酸和碱的加成盐和它们的酯，其中(Z′)为(CH2)0-6-NH-CO2-Rc或(CH2)0-6-NHRb基团，且Rb和Rc的定义同上。
在第六优选方面中，本发明主题是如上定义的通式(Ⅰ)化合物及其酸和碱的加成盐和酯，其中Rb和Rc代表(CH2)0-3-Ar基团，Ar的定义同上且可以为取代的或未取代的。
在第七优选方面中，本发明主题是如上定义的通式(Ⅰ)化合物及其酸和碱的加成盐和它们的酯，其中G为式-NH-C(=NH)-NHRc的G4基团，且Rc的定义同上。
在第八优选方面中，本发明主题是如上定义的通式(Ⅰ)化合物及其酸和碱的加成盐和它们的酯，其中G为NH-C(=NH)-NH2的G4基团。
在第九优选方面中，本发明主题是如上定义的通式(Ⅰ)化合物及其酸和碱的加成盐和它们的酯，其中G为如上定义的-NH-Het′基团，特别为：
p为整数2,3或4，这些杂环为取代或未取代的。
在第十优选方面中，本发明主题是如上定义的通式(Ⅰ)化合物及其酸和碱的加成盐和它们的酯，其中G为基团：
p为整数2,3或4。
在第十一优选方面中，本发明提供了下列如上定义的通式(Ⅰ)化合物：
-4-((4-((氨基亚氨基甲基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸，
-5-((4-((氨基亚氨基甲基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)-戊酸，
-5-((4-((氨基亚氨基甲基)亚肼基)-8,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-9-苯并(e)薁基)氧基)-戊酸，
-6-((4-((氨基亚氨基甲基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)-己酸，
-7-((4-((氨基亚氨基甲基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)-庚酸，
-5-((9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-4-((4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基)-8-苯并(e)薁基)氧基)-戊酸，
-5-((4-((氨基亚氨基甲基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)-戊酸乙酯盐酸盐，
-4-((4-((氨基亚氨基甲基)亚肼基)-8,9-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-10-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸，
-5-((4-((氨基亚氨基甲基)亚肼基)-8,9-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-10-苯并(e)薁基)氧基)-戊酸，
-5-((4-(((氨基)羰基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)-戊酸，
-5-((4-(((氨基)硫代羰基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)-戊酸，
-4-((4-((氨基亚氨基甲基)亚肼基)-8,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-9-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸，
-6-((4-((4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)-己酸，
-5-((4-((氨基亚氨基甲基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)-3,3-二甲基-4-氧代-戊酸，
-5-((4-((4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)-3,3-二甲基-4-氧代-戊酸，
-5-((4-((氨基亚氨基甲基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)-戊酸盐酸盐，
-4-((4-((4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸，
-5-((8-((氨基亚氨基甲基)亚肼基)-6,7,8,9,10,11-六氢-薁并(5,6-d)-1,3-苯并二氧杂环戊烯-4-基)氧基)-戊酸，
-5-((8-((氨基亚氨基甲基)亚肼基)-2,2-二苯基-6,7,8,9,10,11-六氢-薁并(4,5-e)-(1,3)-苯并二氧杂环戊烯-4-基)氧基)-戊酸，
-4-((9,10-二甲氧基-4-((1,4,5,6-四氢-2-嘧啶基)亚肼基)-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸，
-2-((4-((4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)-乙酸，
-3-((4-((4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)-丙酸，
-4-((4-((4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基)-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸，
-4-((4-((4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基)-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸，
-0-[4-[(4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并[e]薁基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-DL-高丝氨酸，
-0-[4-[(4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基]-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并[e]薁基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-DL-高丝氨酸，
-0-[4-[(1,2,3,4-四氢-6-嘧啶基)亚肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并[e]薁基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-DL-高丝氨酸，
-0-(9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-4-[(1,4,5,6-四氢2-嘧啶基)亚肼基]]-8-苯并[e]薁基]N-[(苯基甲氧基)羰基]DL-高丝氨酸的(2,3-二羟基丙基)酯，
-0-[4-[(4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基]-N-[(8-喹啉基)磺酰基]-DL-高丝氨酸，
-0-[4-[(4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基]-N-[[3-[4-(3-吡啶基)-1H-咪唑-1-基]丙氧基]羰基]-DL-高丝氨酸的一盐酸盐，
-5-[[4-[(4,5-二氢-4-氧代-1H-咪唑-2-基)亚肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基]氧基]戊酸，
-0-[9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-4-[(4,5,6,7-四氢-1H-1,3-二氮杂-2-基)亚肼基]-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]DL-高丝氨酸，
-0-[9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-4-[(3a,4,5,6,7,7a-六氢-1H-苯并咪唑-2-基)亚肼基]-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]DL-高丝氨酸，
本发明主题同样是通式(Ⅰ)化合物的制备方法，其特征在于使式(Ⅱ)化合物：其中R2,R3,R4和R5如上所述，但不为羟基，在碱存在下与式(F1)化合物反应：
Hal-[A]-[B]-COR6 (F1)或在膦和偶氮二羧酸二乙酯存在下与式(F′1)化合物反应：
HO-[A]-[B]-COR6 (F′1)其中Hal为卤原子，[A],[B]和R6定义同上，[B]还可以代表基团
其中P为胺官能团保护基，
以得到式(Ⅲa)化合物：
或者先与活化剂反应，然后在催化剂存在下与式(F2)化合物反应：以得到式(Ⅲb)化合物：随后使式(Ⅲa)或(Ⅲb)化合物与式(F3)化合物反应：
H2N-G (F3)其中G定义同上，以得到相应于某些式(Ⅰ)产物的式(Ⅳa)和(Ⅳb)化合物：
随后，如果合适的话，以合适的次序使这些化合物进行下列反应：
-与碱或酸反应以断裂酯，获得相应的酸，
-与适合于部分或完全还原R1基团中不饱和键的还原剂反应，
-与三键水化剂反应，
-与脱烷基化剂反应，
-当[B]代表CH-NHP基团时，与CO-R6的β位置上的NH-P官能团的脱保护剂反应，
-由CO-R6的β位置上的相应胺形成NH-SO2Rc,NH-CO2Rc,NHCORC,NH-SO2-NH-RC,NH-CO-NHRC基团，以得到相应的式(Ⅰ)化合物，如果合适的话，这些化合物可与酸或碱作用以得到相应的盐，或者与酯化剂作用以得到相应的酯。
与式Hal-[A]-[B]-COR6(F1)化合物的反应优选在有无机碱如碳酸钾或碳酸钠存在下在诸如二甲基甲酰胺之类的非质子偶极溶剂中进行。Hal优选为氯或溴原子。
与式HO-[A]-[B]-COR6(F′1)化合物的反应在诸如三苯膦之类的膦和反应剂如偶氮二羧酸二乙酯(DEAD)存在下于对质子溶剂如二氯甲烷中进行。
与式H-C≡C-[A]-[B]-COR6(F2)化合物的反应首先在碱如吡啶存在下与活化剂如式(CF3SO2)2O三氟甲磺酸酐反应，以得到相应的式(OSO2CF3)三氟甲磺酸酯，然后在钯衍生物(Pd0)如Pd(PPh3)4存在下进行。
与NH2-G(F3)的反应可以在无溶剂条件下或者在醇类溶剂如乙醇或丁醇中进行。合成子(Synthon)NH2-G任选以盐形式使用，如盐酸盐或氢溴酸盐。
酯官能团的皂化反应通过例如与碱金属碱如苏打或碳酸钾在四氢呋喃或低级醇如甲醇或乙醇中进行。酯的裂解也可以根据本领域技术人员已知的方法在酸性介质中进行。
不饱和键的还原可以通过在催化剂如钯-炭或铑催化剂如Wilkinson试剂存在下与氢气作用完全还原，或者还可以通过与中毒催化剂如被吡啶或三乙胺毒化的钯或硫酸钡作用部分还原(亚炔基还原成亚烯基)。
由-C≡C-[A]-[B]-COR6得到-CH2CO-[A]-[B]-COR6基团的水合反应优选通过在硫酸汞存在下与水作用来进行。
得到其中R2,R3,R4或R5代表羟基的式(Ⅰ)化合物的脱烷基化反应在氯化铝或三溴化硼存在下进行。
COR6的α位上的NH2([B]代表CH-NH2或CH-NH2,HCl)的官能化反应按照有机化学中已知的标准方法进行。
由相应的胺形成NHSO2RC的反应优选通过在碱例如三乙胺存在下与RCSO2Hal作用来进行。
由相应的胺形成NHCO2RC的反应优选按下所述进行：首先在碳酸氢钠存在下与三光气反应以得到中间体异氰酸酯，然后按照有机化学杂志(J.Org.Chem),61,3929-3934中记载的方法与RCOH反应。
成盐反应可以在常规条件下进行。例如，为成盐R1的末端CO2H基团，在钠盐如碳酸钠或碳酸氢钠或碳酸氢钾存在下进行操作。
同样，可以用G表示的胺或氨基胍与酸的成盐反应也在常规条件下进行。例如，用氢氯酸(例如其醚溶液)进行操作。
产物的任选酯化反应在本领域技术人员已知的标准条件下进行。
操作通常通过使式(Ⅰ)酸或其官能衍生物与能够导入酯基的试剂反应来进行，其中所述酯基的非穷举实例见上文R6的定义中所述。
通式(F1),(F′1),(F2),(F3)化合物是已知的或者按照本领域技术人员已知的方法制备。
不同反应试剂的连接次序还可以改变。也就是说，可以将式(Ⅱ)化合物先与式F3化合物反应，以得到中间体式(Ⅲc)产物：
然后再将所得式(Ⅲc)化合物与式(F1),(F′1)或(F2)反应以得到相应的式(Ⅳa)和(Ⅳb)产物。
在这种情形下，有必要对式(Ⅲc)产物中的G基团加以保护，然后在加入(F1),(F′1)或(F2)之后再按照本领域技术人员公知的方法脱保护(T.W.Greene有机合成中的保护基(Protective Group inOrganic Synthesis),John,Wiley and Sons Inc.1991)。
CO-R6的β位上的NH-P([B]代表CH-NHP基团)的脱保护反应还可以按照本领域技术人员公知的方法进行，特别是当P代表CO2tBu基团时，可以通过脱羧反应例如与盐酸作用来进行。
骨不断进行着包括骨吸收和骨形成在内的动力学过程。这些过程通过特定细胞介导。骨形成是成骨细胞引起矿质基质沉积的结果，而骨的吸收则是破骨细胞溶解这种骨基质的结果。骨指疏松症的特征在于这种骨基质干性脱失。活化成熟的破骨细胞在粘连于骨基质后通过在粘连区内分泌蛋白水解酶和质子而吸收骨质，结果当破骨细胞脱离骨后，在骨的表面形成凹陷或洞穴。
式(Ⅰ)化合物及其可药用加成盐具有有用的药理性质。这些化合物抑制通过破骨细胞介导的骨吸收。
因此，本发明化合物可用于治疗骨基质脱失所致的疾病，特别是骨质疏松症，噁性血钙过多症，起因于骨转移的骨质减少，牙周炎，甲状旁腺机能亢进，风湿关节炎关节周围侵蚀，佩吉特病，由于静止不动、糖皮质激素治疗或者雄性或雌性性激素缺乏诱发的骨质减少。
它们还可用于治疗炎症，癌症和包括动脉粥样硬化，再狭窄复发在内的心血管病。
最后，本发明化合物还可用作血管生成抑制剂，因而可用于治疗肿瘤(通过抑制它们的新血管生成作用)，糖尿病性视网膜病和肾病。
近年来的研究已经表明，破骨细胞在骨上的固定由受体整联蛋白介导。
整联蛋白是受体介导细胞/细胞，尤其是为细胞/基质粘连过程的超家族受体，特别包括作为血小板受体(血纤维蛋白原)的α2bβ3和作为玻连蛋白受体的ανβ3，以及骨涎蛋白如骨桥蛋白和血小板反应蛋白。
这些由两种亚单位α和β组成的异二聚体蛋白受体对二价离子如特别是Ca2+具有固定位点，并对由其亚单位性质预先确定的配体具有识别位点。
ανβ3受体是一种在许多细胞，包括内皮细胞，平滑肌细胞，破骨细胞和癌细胞在内的细胞中都有表达的跨膜糖蛋白，因此本发明化合物具有多种潜在用途。
ανβ3受体在破骨细胞膜上的表述是粘连/吸收过程的基础，有助于细胞骨架的组构，并与骨质疏松有关(ROSS等，生物化学杂志(J.Biol.Chem.),1987,262,7703)。
ανβ3受体在动脉平滑肌细胞中的表达能够刺激它们朝新内膜方向迁移，进而导致形成动脉粥样硬化和血管成形术后再狭窄(Btown等，心血管研究(Cardiovascular Res.)(1994),28,1815)。
内皮细胞分泌生长因子，它们促使内皮进行有丝分裂，有助于形成新血管(血管生成)。血管原刺激引起新血管形成。因此，整联蛋白ανβ3的拮抗剂通过诱导血管原血管编程性细胞死亡能引起癌症肿瘤消退。(Brook等，细胞(Cell)(1994)79,1157)。
整联蛋白ανβ3的天然配体全都包含有RGD单元(Arg-Gly-Asp)。包含这种RGD单元的肽以及抗ανβ3抗体以其抑制牙齿吸收、防止破骨细胞粘连在矿化基质上的能力而为人所知(Horton等，实验细胞研究(Exp.Cell.Res.)(1991),195,368)。
分离自蛇毒的锯鳞血抑肽也含有RGD单元，这种肽据说为破骨细胞粘连于骨的抑制剂，因此是体外组织培养(Sato等，细胞生物学杂志(J.Cell.Biol.)(1990),111,1713)和大鼠活体(Fisher等，内分泌学(Endocrionlogy)(1993),132,1441)骨吸收的强效抑制剂。
特别是，式(Ⅰ)化合物及其可药用加成盐和它们的酯通过抑制与它们的天然配体的结合而对玻连蛋白受体αν63或含有玻连蛋白作为配体(ανβ1,ανβ5,α2bβ3)的其它整联蛋白具有亲和性。
因此，这种性质使得本发明化合物可用于预防或治疗一些疾病，这些疾病的病理基础是由能够与玻连蛋白受体相互作用的配体或细胞所致。
这些化合物还对能够通过RGD三肽序列与其配体相互作用的其它整联蛋白具有活性。这样使得本发明化合物具有可用于治疗与这些受体有关的病理学病症的药理性质。
因此，这种对整联蛋白的活性使得本发明化合物适于治疗多种疾病，例如上文或杂志Dermot Cox DN&P8(4)1995年5月，197-205中所述的病症(该文章的内容纳入本申请中)。
因此，本发明主题是提供用作药物的式(Ⅰ)化合物及其可药用加成盐和其酯。
在本发明的药物中，特别值得提及的是实验部分所述的化合物。
在这些产物中，本发明主题特别是作为药物，上文所列的式(Ⅰ)化合物。
剂量根据受治疗的病症，给药途径而变化：例如，对成人来说口服途径给药剂量可以为1mg-1000mg/天。
本发明还扩展到作为活性成分，至少含有一种上文所述药物的药物组合物。
式(Ⅰ)化合物可通过消化，胃肠外或局部途径(例如经皮途径)使用。它们可以配制成简单的或糖包衣片剂，胶囊剂，颗粒剂，栓剂，阴道栓，注射剂，软膏剂，霜剂，凝胶剂，微球剂，纳球剂，移植剂，斑贴剂，它们均按照常规复发制备。
一种或多种活性成分可以与这些药物组合物中通常使用的赋形剂一同掺合，所述赋形剂如滑石，阿拉伯胶，乳糖，淀粉，硬脂酸镁，椰子油，含水或无水赋形剂，动物或植物源脂肪物质，石蜡衍生物，甘醇，各种湿润剂，分散剂或乳化剂，防腐剂。
式(Ⅱ)中羟基位于位置10上，且位于位置8上的R2和位于位置9上的R3代表O-(Alk)或O-(CH2)0-3-Ar基团，R4与R5均为氢原子的化合物按照欧洲专利申请N°0729933和下文实验部分(制备例2)中所述方法制备。
两种其它位置异构体可按照下述方式制备：
使式(ⅡA)化合物：与脱烷基化剂反应，以得到式(ⅡB)化合物：
随后使式(ⅡB)化合物：
或者在碱性介质中与二醇保护剂反应，以便选择性得到式(ⅡC)化合物：
其中P表示二醇保护剂的剩余部分，
接着使该化合物依次与酚保护剂、二醇的脱保护剂、烷基化剂以及酚的脱保护剂反应，以得到式(ⅡD)化合物，即OH位于8位上的三取代式(Ⅱ)化合物：
或者依次与酚保护剂、烷基化剂和脱保护剂反应，以得到式(ⅡE)化合物，即OH位于9位上的三取代式(Ⅱ)化合物：
脱烷基化剂优选指诸如三溴化硼或氯化铝之类的试剂。
与式(ⅡB)产物反应的二醇保护剂可以是硼衍生物如硼酸，硼酸三烷基酯(例如硼酸三甲酯或三乙酯)，或者还可以为硼砂。
酚保护剂具体指卤化物，如甲磺酰氯或溴或甲苯磺酰氯或溴，或者还指苄化衍生物如甲苯磺酸苄酯或甲磺酸苄酯。
二醇脱保护剂具体指强酸如盐酸，硫酸或对甲苯磺酸，用硼衍生物保护的情况下，或者还有氧化剂，例如过氧化氢。
烷基化剂是指用于烷基化酚类化合物的本领域技术人员已知的任何标准试剂。例如，可提及的包括烷基卤如甲基或乙基氯，硫酸烷基酯如硫酸甲基或乙基酯，或重氮甲烷。
脱保护剂是指诸如苏打，碳酸钾或碳酸钠或碳酸钾之类的碱。
式(Ⅱ)中R2、R3、R4和R5代表氢原子的单取代产物按照欧洲专利申请N°0729933中所述的类似方法制备：
(ⅰ)使式(a)化合物：其中O-(Alk)位于烷基羧基的间或对位，(Alk)的定义同上，与卤化剂反应，以得到相应的酰基卤，(ⅱ)将所得酰基卤与式(b)试剂反应：
其中R(Ⅰ)和R(Ⅱ)相同或不同且代表含1-6个碳原子的烷基，或者R(Ⅰ)和R(Ⅱ)与它们所键连的氮原子一起表示任选含有另一个选自O和N杂原子的5或6元饱和或不饱和杂环，
以得到式(c)化合物：(ⅲ)使所得式(c)化合物与卤化剂反应，得到式(d)化合物：其中Hal1代表卤原子，(ⅳ)将所得式(d)化合物与路易斯酸反应，得到式(e)化合物：
(ⅴ)将所得式(e)化合物与脱烷基化剂反应，以得到式(ⅡF)产物，即预期的式(Ⅱ)单取代产物：
其中R2代表O-(Alk)或0-(CH2)0-3-Ar,R3,R4和R5为氢原子和OH,且R2位于8,9或10位上的式(Ⅱ)双取代产物可按照上文所述方法以式(a′)化合物为起始物质制备：
其中O-(Alk)和R2位于烷基羧基的间或对位上，R2为O-(Alk)或-(CH2)0-3-Ar基团。将上述起始物质依次进行反应(ⅰ),(ⅱ),(ⅲ),(ⅳ)和(ⅴ)，最终得到式(ⅡG)产物，即预期的式(Ⅱ)双取代产物：
与式(a)或(a′)化合物反应的卤化剂为例如亚硫酰氯，草酰氯或为制备酰基卤用的本领域技术人员熟知的任何其它试剂。
式(b)试剂由环戊酮和仲胺(例如二乙胺，哌啶，哌嗪或者且优选吗啉)制备。操作在强酸催化剂(例如对甲苯磺酸)存在下进行。
式(b)烯胺与酰基卤的反应优选在叔胺如三乙胺或吡啶存在下进行。
与式(c)化合物或其式(c′)二取代等同物反应的卤化剂可以为例如亚硫酰氯，光气，磷酰氯或(优选)草酰氯。
用于环化式(d)化合物或其式(d′)二取代等同物的路易斯酸为例如氯化铝，四氯化钛，或优选氯化铁，或四氯化锡。如同前述反应一样，该反应也可以在例如有卤化溶剂(例如二氯甲烷，氯仿或二氯乙烷)存在下进行。
用于脱烷基化式(e)化合物或其式(e′)二取代等同物以得到相应酚类化合物的试剂优选为氯化铝或三溴化硼。
其中R4不为氢原子的式(Ⅱ)产物按照本领域技术人员公知的芳香亲电和亲核取代标准方法制备。
其中R5不为氢原子的式(Ⅱ)产物按照本领域技术人员已知的方法，特别是欧洲专利申请N°0729933中所述的方法制备，即先进行卤化反应，随后与水和合适的醇反应。
其中R5为氢原子且位置1-2间存在双键的式(Ⅱ)产物按照本领域技术人员公知的方法，特别是欧洲专利申请N°0729933中所述的方法制备，即通过在无水酸性介质中进行脱水或脱烷氧基化作用来制备。
其中位置5处的环与位置7处的环之间的连接处为饱和的式(Ⅱ)产物可按照标准氢化方法特别是在钯-炭存在下氢化相应的双键而制备。
R4、R5的导入以及氢化反应优选在式(ⅡA),(ⅡD),(ⅡE),(ⅡF)或(ⅡG)化合物上进行。
其中相互成邻位关系的R2和R3形成如上所述-O-(CRdRe)n-O型环的式(Ⅱ)产物也可以按照本领域技术人员公知的方法，特别是下文实验部分所述的方法制备。
本发明主题还涉及作为中间产物的式(Ⅲa),(Ⅲb),(Ⅲc)和(Ⅱ)产物，当然，式(Ⅱc)化合物和下列化合物是排除在外的：
-2,3,5,6-四氢-9,10-二甲氧基-8-羟基-苯并[e]薁-4(1H)-酮，
和
2,3,5,6-四氢-8,9-二甲氧基-10-羟基-苯并[e]薁-4(1H)-酮。
这两个化合物的制备见下文实验部分。
下列实施例用于说明本发明，但本发明并不局限于此。
制备例1:2,3,5,6-四氢-8,9,10-三羟基-苯并[e]-薁-4(1H)-酮
步骤A:3,4,5-三甲氧基-苯丙酸
取6.8g碳酸钾加到21.44g3,4,5-三甲氧基苯基丙烯酸和45ml水的溶液中，然后在1.8g含10％钯的活性炭存在下在1200-1300毫巴压力下氢化1小时，吸收2.11氢气。过滤反应介质，继之用水洗涤，并用50ml盐酸(2N)酸化。分离后，将残留物用水洗涤，然后在室温下减压干燥。这样得到19.8g预期产物(M.P.=102-103℃).
IR光谱(CHCl3)羰基：{1712cm-1(max) 芳香骨架：{1592cm-1
{1740cm-1(sh) {1510cm-1NMR光谱(CDCl3)
2,69(t)}=C-CH2-CH2-CO 3,83(s)}3H3CO-C-
2,91(t)} | 3,85(s)}
6.43(s)芳香质子2H
10.50(m)活动性的质子1H
步骤B:3,4,5-三甲氧基-苯丙酰氯
将6g步骤A所得产物在21ml二氯甲烷中的溶液用1.5g硫酸镁干燥，过滤后，冷却反应混合物至5℃，加入2.2ml亚硫酰氯，然后在室温下搅拌所得溶液20小时。减压蒸发至干，继续用环己烷夹带两次，这样收集到6.46g预期产物。(M.P.=60℃).
步骤C:2-[3-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1-氧代丙基]-环戊酮
在+5℃下，于1小时30分钟内向冷却到5℃的包含2.4ml1-(N-吗啉基)环戊烯(其制备见下文所述)，2.31ml三乙胺和15ml二氯甲烷的溶液内加入4.27g步骤B所得产物在15ml二氯甲烷中的溶液。在+5℃下搅拌反应介质1小时，然后在升温反应介质的同时加入10ml2N盐酸，接着在环境温度下搅拌1小时，滗析，用水和碳酸氢钠饱和溶液依次洗涤，干燥，过滤并减压蒸发至干，得到5g预期产物。该粗产物按下所述方式纯化：溶于10体积乙酸乙酯，用N苏打溶液提取，碱相用乙酸乙酯洗涤，然后用浓盐酸酸化至pH1，继之用二氯甲烷提取，干燥并减压蒸发至干。收集到2.75g纯化产物。
IR光谱(CHCl3)：
羰基：{1741cm-1 芳族骨架：{1592cm-1
{1709cm-1 {1509cm-1
羰基：{1658cm-1
+C=C {1610cm-1包含螯合形式的OH
NMR光谱(CDCl3)
6.41(s)芳香质子，2H(积分基线)
3.81(s)3.82(s)}共9H3.83(s)3.85(s)}4种类型CH3O-C=1.86(m)CH2-CH2-CH2 -1.5H1.95-2,95(m)共～7.5H，包括数种类型的=C-CH23.26(t)～0.40
11.2(m宽)活动性的H
步骤C中所用的1-(N-吗啉基)-环戊烯的制备
将100ml环己烷、20ml环戊酮、50ml吗啉以及100mg对-甲苯磺酸构成的溶液在回流状态下搅拌4小时30分钟，同时除去所形成的水。减压蒸发溶剂后，在12-13毫巴压力下进行蒸馏，收集到27.44g所需产物(B.P.=83℃).
步骤D:1-(2-氯-1-环戊烯-1-基)-3-(3,4,5-三甲氧基苯基)丙-1-酮
室温下，在23g步骤C所得产物和230ml氯仿形成的溶液内加入13ml草酰氯。反应混合物在室温下搅拌3小时，然后减压浓缩，并继续用环己烷夹带两次。得到28g粗产物。然后在50ml环己烷和50ml二异丙基醚混合物中经部分浓缩后重结晶上述粗产物。析出结晶，用二异丙醚洗涤，减压干燥后得到16.24g预期产物。(M.P.=93℃)。
IR光谱(CHCl3):
1659cm-1：羰基
1599cm-1
1586cm-1:C=C+芳香骨架
1508cm-1
NMR光谱CDCl3
1.93(m)：中心CH2
2.69(m)-2.81(m)：环戊烯的C-CH2-C=质子
2.85(t,J=7.5)-3.08(t,J=7.5)：其余=C-CH2-C质子
2.44:CH3-C=
3.68-3.81：所有OCH3质子
6.59-6.68(d,j=2)：间位偶合的芳香CH=
7.31-7.80(d,j=8)：芳香质子
步骤E:2,3,5,6-四氢-8,9,10-三甲氧基-苯并[e]薁-4(1H)-酮
将900mg步骤D所得产物、9ml1,2-二氯乙烷和0.9ml氯化锡在室温下一同搅拌20小时。然后加入9ml冰水，滗析混合物，并用水洗涤，然后再用二氯甲烷提取一次，继之用硫酸镁干燥，过滤并减压蒸发至干，得到1g预期(粗制)产物。通过硅胶色谱纯化所得粗产物，依次采用含10％和25％乙酸乙酯的环己烷洗脱。浓缩后，收集到700mg产物，在5ml正己烷中结晶，接着冷却到0℃，分离，用少量正己烷洗涤，然后在室温下减压干燥，得到630mg预期产物。
(M.P.=101-102 ℃).
NMR光谱(CDCl3):
1.86(m)中心CH2
2.65(dd)2H} 3.84}
2.72(t) 2H}其余CH2质子 3.86}OMe质子
2.84(dd)2H} 3.90}
3.06 2H}
6.59(s)芳香H
步骤F:2,3,5,6-四氢-8,9,10-三羟基-苯并[e]薁-4(1H)-酮
如制备例1a的步骤B所述进行操作，得到预期的脱甲基产物。
制备例1a:2,3,5,6-四氢-8,9,10-三羟基-苯并[e]薁-4(1H)-酮
步骤A:2,3,5,6-四氢-8,9,10-三甲氧基-苯并[e]薁-4(1H)-酮
将60g制备例2所得的产物，600ml1,2-二氯乙烷，342ml2N苏打，1.2g丁基溴化铵和33ml硫酸二甲酯在20℃下一起搅拌2小时30分钟。然后加入39ml三乙胺以分解过量的硫酸二甲酯，并在20℃±2℃下搅拌1小时。随后加入342ml软化水，再在20℃+2℃下搅拌15分钟，然后滗析，将水相用1,2-二氯乙烷(2×120ml)提取。合并1,2-二氯乙烷相，依次用4×240ml软化水、1×300ml N盐酸、3×240ml软化水洗涤(直至为中性为止)。合并的有机相用硫酸钠干燥，过滤并在83℃下常压浓缩至480ml残留体积。
步骤B:2,3,5,6-四氢-8,9,10-三羟基-苯并[e]薁-4(1H)-酮
将步骤(A)中所得的480ml溶液与102.3g无水氯化铝一起加热回流1小时。冷却介质到0℃±2℃，然后在2小时内加入预先冷却到大约0℃的600ml软化水和192ml纯硫酸(浓)混合物，期间保持反应介质温度低于20℃。在20℃±2℃下于5分钟内加入300ml软化水，并在20℃±2℃下搅拌16小时，继之分离，用1,2-二氯乙烷洗涤两次，每次60ml，然后用软化水洗涤，减压干燥，得到52.2g预期产物。
制备例2:8,9-二甲氧基-10-羟基-2,3,5,6-四氢-苯并[e]薁-4(1H)-酮
步骤A:3,4-二甲氧基-5-[[(4-甲基苯基)-磺酰基]氧基]-苯丙酸
如制备例1步骤A所述，采用29.76g 3,4-二甲氧基-5-[[[(4-甲基苯基)-磺酰基]氧基]苯基]-肉桂酸(其制备见下文所述)，43.5g碳酸钾，60ml甲醇和1.48g活性炭(含10％钯)进行操作。得到28.33g预期产物，为无色结晶(M.P.=48-149℃).
UV光谱(EtOH)
对于M=380.4
max 226nm ε=22100
infl 263nm ε=2000
infl 269nm ε=2400
max 274nm ε=2800
infl 279nm ε=2500
infl 307nm ε=450
NMR光谱(CDCl3)
2,45(s)CH3-
2,61(m)=C-CH2-CH2-C= 3,68(s)2 CH3O-C=
2,86(m) 3,81(s)
6,61(d,j=2) 7,32(dl)H3 H5
6,65(d,j=2)H4 H6 7,80(dl)H2 H6
步骤B:3,4-二甲氧基-5-[[(4-甲基苯基)-磺酰基]氧基]-苯丙酰卤
如制备例1步骤B所述，用1.9g步骤A所得产物，9.5ml二氯甲烷和0.7ml亚硫酰氯进行操作。得到2.2.4g预期产物，该产物直接用于下一步骤中。
步骤C:2-[3-[3,4-二甲氧基-5-[[(4-甲氧基苯基)磺酰基]氧基]苯基]-1-氧代丙基]-环戊酮
如制备例1步骤C所述，以2.24g步骤B所得的酰氯为起始原料，并使用770mg1-(N-吗啉基)-环戊烯(制备例1步骤C中所制)，6ml二氯甲烷和0.77ml三乙胺进行操作。经用二异丙醚重结晶后，得到1.27g预期产物(M.p.=84℃).
IR光谱(CHCl3)
羰基：{1742cm-1 O-SO2{1374cm-1
{1709cm-1 1178cm-1 1658cm-1
C=C+芳香骨架{1608cm-1 1599cm-1 1586cm-1 1508cm-1
NMR光谱(CDCl3)
2.44(s)CH3-O
3.67(s) }2OCH3
3.79(s) 3.81(s)}
6.59-6.65(m)芳香2H(O的邻位)
7.32(wd) H3 H5
7.89(wd) H2 H6
13.58(宽m)烯醇形式OH
1.8-3.4(m)10-11H其它质子
UV光谱
1-EtOH(+二噁烷)对于M=446.52
max 225nm ε=23000
max 282nm ε=7900
infl 270,277,290,300,313nm
2-EtOH(0.1N NaOH)
mzx 310nm ε=21600
infl 268,272,276nm
步骤D:1-(2-氯-1-环戊烯-1-基)-3-[3,4-二甲氧基-5-[[(4-甲基苯基)磺酰基]氧基]-苯基]-丙-1-酮
如制备例1步骤D所述，采用8.7g步骤C所得产物，70ml氯仿和3.5ml草酰氯进行操作。用二异丙醚结晶后，得到7.75g预期产物(M.P.=73℃)。该产物直接用于下一步骤中。
通过用2.5体积二氯甲烷和5体积二异丙醚重结晶，继之浓缩到3体积，分离，用二异丙醚洗涤并在室温下减压干燥得到分析样品(M.P.=77-78℃)。
IR光谱(CHCl3)
羰基：{1659cm-1
芳香C=C:{1599cm-1-1586cm-1-1508cm-1
UV光谱(EtOH)
max 227nm ε=26100
infl 248nm ε=12800
infl 272nm ε=5300
infl 280nm ε=3200
infl 320nm
NMR光谱(CDCl3)
1.93(m)中心-C-CH2-C-}
2.69(m)}C-CH2-C= }
2.81(m)} }
2.85(t,J=7.5)} 其余的=C-CH2-C质子
3.08(t,J=7.5)}
2.44 CH3-C=
3.68}OCH3质子
3.81}
6.59(d,J=2)芳香CH
6.68(d,J=2)间位偶合
7.31(d,J=8)}
7.80(d,J=8)}
步骤E:8,9-二甲氧基-10-[[(4-甲基苯基)磺酰基]氧基]-2,3,5,6-四氢-苯并[e]薁-4(1H)-酮
室温下，在2.32g步骤C所得产物的50ml1,2-二氯乙烷溶液内加入1.65g98％氯化铁。混合物在室温下搅拌48小时，然后倾入冰水混合物内，剧烈搅拌15分钟，然后用二氯甲烷提取。提取液用水和氯化钠饱和水溶液依次洗涤。干燥及减压蒸发至干后，得到2.15g粗产物，硅胶层析，用含50％乙酸乙酯的环己烷洗脱，收集到1.8g产物，将它们再次层析并用氯仿/二异丙醚混合物重结晶，得到720mg预期产物(M.P.=138℃)。
IR光谱(CHCl3)
羰基： {1650cm-1
{1599cm-1
C=C+ {1556cm-1
芳香骨架 {1512cm-1-1498cm-1
UV光谱(EtOH)
max 230nm ε=25300
infl 254nm ε=9400
max 323nm ε=10300
NMR光谱(CDCl3)
～1.61(m) (2H)中心CH2
～2.41 Ph-CH3
～2.50-2.80
3.88(s)}OCH3质子
3.90(s)}
6.74 H4
7.21(d)}C-Ph-SO2
7.64(d)}
步骤F:8,9-二甲氧基-10-羟基-2,3,5,6-四氢-苯并[e]薁-4(1H)-酮
将350g上面步骤E所得产物，1750ml甲醇，350ml软化水和350ml纯净苛性苏打碱水(浓缩)的混合物加热回流2小时。冷却反应介质到大约2℃±2℃，然后在45分钟内加入467ml浓盐酸，期间保持温度为2℃±2℃。随后在10分钟内加入1645ml软化水，并维持温度为2℃±2℃。析出所形成的结晶，在20℃下每次用700ml软化水进行澄清洗涤5次，然后在40℃下减压干燥，以得到199.1g预期产物。
制备例2开头使用的3,4-二甲氧基-5-[[(4-甲基苯基)磺酰基]氧基]-肉桂酸的制备
步骤A:3,4-二甲氧基-5-[[(4-甲基苯基)磺酰基]氧基]苯甲酸甲酯
在室温及搅拌下，于10分钟内在200g五倍子酸甲酯和2升二氯甲烷的混合物中加入303ml三乙胺。溶解后，冷却反应介质到0-5℃，然后在此温度下于1小时内加入130ml二氯二甲基硅烷，接着在此温度下进一步搅拌30分钟。在保持0-5℃下，于25分钟内加入303.2ml三乙胺，然后在15分钟内加入227.6g甲苯磺酰氯。在0-5℃下继续搅拌1小时，然后在搅拌下于10分钟内先加入200ml乙酸，然后加入500ml软化水，期间温度升至20-22℃，并在20℃下续搅拌15分钟。减压下以恒定体积(3.3l)蒸除二氯甲烷，并用软化水替代它们，在20℃下搅拌2小时，然后分离，用软化水洗涤，得到523g(湿重)3,4-二羟基-5[[(4-甲基苯基)磺酰基]氧基]苯甲酸甲酯(3-甲苯磺酰基倍酸甲酯)。将所得潮湿产物溶于2.17l苏打(2N)和2.17l二氯甲烷中。在20℃搅拌至溶解，然后在20℃下加入18g四丁基溴化铵，随后再在20℃下于15分钟内加入237ml硫酸二甲酯。反应介质在20-22℃下搅拌1.5小时。在20-22℃下加入78ml三乙胺并在20-22℃下搅拌过夜，继之滗析并用400ml软化水洗涤。往有机相中加入20ml纯净乙酸，继之搅拌15分钟，加入400ml软化水，尔后滗析。首先在常压下浓缩，然后在60℃外部温度下于40mmHg下减压浓缩合并的有机相至干。用400ml甲醇进行夹带，然后将所得的无水提取物溶于600ml甲醇，加热回流至产物完全溶解，继之冷却到0-5℃，在这一温度下搅拌1小时。分离后，用200ml甲醇在-10℃下洗涤两次，然后在40℃下减压干燥，得到330.4g 3,4-二甲氧基-5-[[(4-甲基苯基)磺酰基]氧基]苯甲酸甲酯。将此粗产物用330ml甲苯重结晶。在-10℃下搅拌2小时后，进行分离，继之用82ml甲苯洗涤两次，冷却到-15℃，然后在40℃下减压干燥，得到230.3g纯净预期产物。
步骤B:3,4-二甲氧基-5-[[(4-甲基苯基)磺酰基]氧基]肉桂酸
a)将600ml甲苯冷却到0℃，然后在0℃下加入202ml70％Vitride的甲苯溶液，并在0-2℃下于1小时内加入67.6ml吗啉，温度升至18℃。将如此得到的溶液立刻用于下一步骤中。
b)将200g步骤A中所得的3,4-二甲氧基-5-[[(4-甲基苯基)磺酰基]氧基]苯甲酸甲酯和1400ml甲苯在20-22℃一起搅拌10分钟至完全溶解为止。在10℃下于1小时内加入上面所得的试剂溶液。续搅拌1小时，温度升至18℃。在10℃下于1小内加入预冷却到10℃的200ml浓硫酸和1000ml软化水的溶液。在20℃搅拌16小时，然后滗析有机相，用5×200ml软化水洗涤，干燥，过滤并用3×100ml二氯甲烷洗涤。如此得到的中间体醛溶液直接用于下一步骤中。
c)将上面得到的中间体醛溶液，200ml2-甲基吡啶，120g丙二酸和20ml哌啶在70℃±2℃下一起加热16小时(同时在常压下除去二氯甲烷)。冷却反应介质到20-22℃，在保持这一温度下，于15分钟内加入200ml浓盐酸和400ml软化水溶液。在20-22℃搅拌2小时后，冷却到0℃，析出所形成的结晶，用软化水洗涤，并在40℃下减压干燥，得到171.7g预期产物3,4-二甲氧基-5-[[(4-甲基苯基)磺酰基]氧基]-肉桂酸。
制备例3:9,10-二甲氧基-8-羟基-2,3,5,6-四氢-苯并[e]薁-4(1H)-酮
步骤A:9,10-二羟基-8-[[(4-甲基苯基)磺酰基]氧基]-2,3,5,6-四氢-苯并[e]薁-4(1H)-酮
将30g按照制备例1或1a制得的2,3,5,6-四氢-8,9,10-三羟基-苯并[e]薁-4(1H)-酮，300ml四氢呋喃，60ml三乙胺和12.9ml硼酸三甲酯一起在20℃±2℃下搅拌1小时30分钟。加入30g甲苯磺酰氯并在20℃±2℃下搅拌16小时，然后在20℃±2℃搅拌10分钟，将反应介质倾入到搅拌着的900ml软化水和159ml浓盐酸的混合物中，然后加入90ml四氢呋喃和60ml二氯甲烷。在20℃搅拌所得溶液1小时，然后加入150ml二氯甲烷，并继续搅拌15分钟，继之滗析，用2×75ml二氯甲烷再提取。合并的有机相用4×150ml软化水洗涤，滗析并用75ml二氯甲烷再提取，在20毫巴压力下减压浓缩至蒸馏至50℃时停止，得到47.6g预期产物。
步骤B:9,10-二甲氧基-8-[[(4-甲基苯基)磺酰基]氧基]-2,3,5,6-四氢-苯并[e]薁-4(1H)-酮
将47.6g上步所得产物，300ml二氯甲烷，300ml苏打(2N),0.6g四丁基溴化铵和30ml硫酸二甲酯在20℃下一起搅拌16小时。然后加入30ml三乙胺以分解过量的硫酸二甲酯，在20℃±2℃下进一步搅拌反应介质1小时，然后加入150ml软化水，继续搅拌15分钟，随后滗析。水相用2×75ml二氯甲烷再提取，合并的有机相依次用3×120ml软化水和120ml N盐酸以及3×120ml软化水洗涤，合并有机相并用硫酸钠干燥，然后在20℃±2℃及搅拌下于1小时内加入120g硅胶(60目)，并在20℃下进一步搅拌1小时，接着过滤，用二氯甲烷洗涤并在50℃减压浓缩至干，得到47.4g预期产物。该粗产物通过用390ml乙醇重结晶纯化，蒸馏出90ml乙醇后，在0℃±2℃下搅拌3小时。使之干燥，用30ml乙醇在0℃下洗涤，然后在40℃减压干燥，得到41.1g预期产物(M.P.=129℃).
步骤C:9,10-二甲氧基-8-羟基-2,3,5,6-四氢苯并[e]薁-4(1H)-酮
向含10g步骤B所得的9,10-二甲氧基-8-(((4-甲基苯基)磺酰基)氧基)-2,3,5,6-四氢-苯并[e]薁-4(1H)-酮和100ml甲醇的悬浮液中依次加入4.5g碳酸钾和10ml三乙胺。加热回流反应介质1小时，加20ml乙酸酸化，然后加入20ml水。用二氯甲烷进行提取，水洗提取液，在40℃下减压蒸除溶剂，得到5.7g预期产物。
制备例4:2,3,5,6-四氢-8-羟基-9-甲氧基-苯并[e]薁-4(1H)-酮和2,3,5,6-四氢-9-羟基-8-甲氧基-苯并[e]薁-4(1H)-酮
以与制备例2步骤B、C、D、E和F等同的方式进行操作，但采用3-(3,4-二甲氧基-苯基)丙酸为起始原料，得到1.08g包含单羟基化产物混合物(8-OH/9-OMe和9-OH/8-OMe)的粗产物，将其通过硅胶色谱分离，使用环己烷/乙酸乙酯混合物(7/3)为洗脱剂。从而得到下述两种位置异构体：
8-OH/9-OMe O.494g Rf(环己烷/乙酸乙酯6/4)=0.42
8-OMe/9-OH 0.041g Rg(环己烷/乙酸乙酯6/4)=0.33
制备例5:2,3,5,6-四氢-8-羟基-10-甲氧基-苯并[e]薁-4(1H)-酮和2,3,5,6-四氢-10-羟基-8-甲氧基-苯并[e]薁-4(1H)-酮
以与制备例2步骤B、C、D、E和F等同的方式进行操作，但采用3-(3,5-二甲氧基苯基)丙酸为起始原料，得到1.428g包含单羟基化产物(8-OH/10-OMe和10-OH/8-OMe)和二羟基化产物(8-OH/10-OH)的混合物，然后通过硅胶色谱进行分离，使用环己烷/乙酸乙酯混合物(7/3)洗脱。
制备例6:2,3,5,6-四氢-9-羟基-苯并[e]薁-4(1H)-酮
以与制备例2步骤B、C、D、E和F等同的方式进行操作，但采用3-(4-甲氧基苯基)丙酸为起始原料，得到0.448g预期产物。随后采用三溴化硼进行脱甲基反应。
(Rf=0.15环己烷/乙酸乙酯7/3).
制备例7:2,3,5,6-四氢-8-羟基-苯并[e]薁-4(1H)-酮
以与制备例2步骤B、C、D、E和F等同的方式进行操作，但采用10.0g3-(3-甲氧基苯基)丙酸为起始原料。得到2.9g预期产物。随后采用三溴化硼进行脱甲基反应。
(Rf=0.15二氯甲烷/乙酸乙酯95/5).
制备例8:(DL)-4-溴-2-(苯基甲氧羰基氨基)丁酸甲酯
将25g2-氨基-4-丁内酰胺氢溴酸盐的200ml乙酸溶液与24％气态氢溴酸在密封容器中于120℃下一起搅拌18小时。冷却反应介质到室温，并恢复到大气压环境，然后减压浓缩。将残留物溶于200ml甲醇，然后通氢氯酸气流2小时，期间保持温度低于35℃。减压蒸除溶剂，并将得到的2-氨基-4-溴丁酸甲酯再溶于250ml丙酮和100ml水中，随后将此溶液用2N苏打中和，然后缓慢加入35ml氯甲酸苄酯。搅拌48小时，继之过滤，用乙酸乙酯提取，并减压蒸除溶剂，残留物通过硅胶层析(洗脱剂：环己烷-乙酸乙酯7-3)，回收27.9g预期产物。M.P.=90℃.
制备例9:4-溴-2-(叔丁氧基羰基氨基)丁酸甲酯
取5.7g制备例8制备的2-氨基-4-溴丁酸甲酯在120ml甲醇中与24ml三乙胺和9g二碳酸二叔丁酯一起室温下搅拌48小时。蒸除溶剂，将残留物溶于水和二氯甲烷，继之过滤，用二氯甲烷提取，再次蒸除溶剂，并硅胶层析所得残留物(洗脱剂：环己酮-ACOEt-TEA7-3-0.5)，得到1.575g预期产物，Rf=0.52。
制备例10:4-(3-嘧啶基)-1H-咪唑-1-丙醇
将505mg乙醇钠于12.5ml二甲基甲酰胺中混合，然后依次加入1g3-(1H-咪唑-4-基)嘧啶和0.64ml氯丙醇，并在55℃下搅拌16小时。随后减压蒸除溶剂，并层析所得残留物(洗脱剂：CH2Cl2-MeOH98-2),回收1.015g预期产物。
IR光谱(CHCl3)
OH 3626cm-1+缔合峰
杂环1601,1578,1551,1499cm-1
制备例11：六氢-2H-1,3-二氮杂-2-酮腙
将包含3.3g硝基胍，7ml水，3.47g碳酸钾和5g二胺二盐酸盐的悬浮液在65-70℃下加热1小时；加入10.5g锌，然后在室温下搅拌30分钟，随后加入2ml乙酸，再于40℃加热全部反应物1小时，继之过滤，然后依次加入3g氯化铵和4g碳酸氢钠。用二氯甲烷进行提取，减压蒸除溶剂，并通过硅胶层析所得残留物(洗脱剂：CH2Cl2-MeOH-NH4OH8-4-2)，回收1.650g预期产物。
制备例12:3a,4,5,6,7,7a-六氢-2-(丙硫基)-1H-苯并咪唑一氢溴酸盐
将1g八氢-2H-苯并咪唑-2-硫酮和1.3ml溴丙烷在20ml乙醇中加热回流至完全溶解。减压蒸除溶剂，并将残留物溶于少量二氯甲烷。然后加入异丙醚，再次减压蒸除溶剂，并在异丙醚中重结晶，使脱水，并加以干燥(收率95％)。
M.P.=136℃.
实施例1:7-((4-(((氨基)亚氨基甲基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢苯并(e)薁-8-基)氧基)-庚酸
步骤A；7-(4-氧代)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢苯并(e)薁-8-基)氧基)-庚酸甲酯
将含0.684g 2,,3,5,6-四氢-8-羟基-9,10-二甲氧基-苯并[e]薁-4(1H)-酮(制备例3),12ml二甲基甲酰胺(DMF),12ml四氢呋喃(THF),0.7g碳酸钾和0.835g 7-溴庚酸甲酯的悬浮液在40℃下搅拌4小时。减压蒸发之后，通过硅胶层析所得粗产物，使用二氯甲烷(CH2Cl2)/丙酮混合物(95/5)洗脱。得到1.000g精制产物，为黄色油状物。
Rf CH2Cl2/丙酮95/5:0.5
IR(CHCl3)
C=O 1732cm-1
OMe 1438cm-1
共轭酮1641cm-1
C=C 1592cm-1,1557cm-1,1492cm-1
+芳香骨架
步骤B:7-((4-(((氨基)亚氨基甲基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-苯并(e)薁-8-基)氧基)-庚酸甲酯
将含0.5g上一步骤A产物、5ml乙醇和0.330g氨基胍盐酸盐的悬浮液在室温下搅拌48小时，减压蒸除溶剂，将所得粗产物通过硅胶色谱纯化，用CH2Cl2/甲醇(MeOH)/氢氧化铵混合物(80/20/4)洗脱。从而得到0.466g纯化产物，为白色泡沫形式。
Rf CH2Cl2/甲醇(MeOH)/氢氧化铵80/20/4:0.8
IR(Nujol)
NH/NH2 3495cm-1,3155cm-1+缔合峰
C=O 1731cm-1
C=N 1674cm-1
C=C 1625cm-1
芳香骨架：1595cm-1(F)
NH/NH2 1534cm-1,1491cm-1
步骤C:7-((4-(((氨基)亚氨基甲基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢苯并(e)薁-8-基)氧基)-庚酸
将含0.44g上一步所得产物、5ml乙醇和2ml1N苏打的溶液在室温下搅拌3小时，然后用2ml1N盐酸中和。减压蒸发后，将所得粗产物通过硅胶色谱纯化，用CH2Cl2/甲醇(MeOH)/氢氧化铵混合物(80/20/4)洗脱。得到0.192g精制用甲醇重结晶的产物。
RfCH2Cl2/甲醇(MeOH)/氢氧化铵80/20/4:0.17
NMR(D2O+1滴1N苏打)
3.92wt 2H CH2-O
2.17t 2H CH2-COOH
1.34m 4H
1.55m 2H 中心CH2+CH2-C=
1.70m 4H
2.50-2.90m8H
6.62s 1H芳香H7
3.64s,3H OCH3
3.73s 3H OCH3
微量分析
％计算值C 62.86 H 7.47 N 12.21
％实测值C 62.9 H 7.5 N 12.1
以与实施例1步骤A、B和C等同的方式，采用2,3,5,6-四氢-8-羟基-9,10-二甲氧基苯并[e]薁-4(1H)-酮(制备例3)和不同的烷基化剂和G-NH2为起始原料进行操作，制备下列式(Ⅰ)产物：
实施例2:4-((4-(((氨基)亚氨基甲基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢苯并(e)薁-8-基)氧基)丁酸
实施例3:4-((4-(((氨基)亚氨基甲基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢苯并(e)薁-8-基)氧基)戊酸
实施例4:5-((4-(((氨基)羰基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)戊酸
实施例5:6-((4-(((氨基)亚氨基甲基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)己酸
实施例6:5-(9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-4-(4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基)-8-苯并(e)薁基)氧基)-戊酸
实施例7:5-((4-(((氨基)硫代羰基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)戊酸
实施例8:6-(4-((4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)-己酸
实施例9:5-((4-(((氨基)亚氨基甲基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)-3,3-二甲基-4-氧代戊酸
实施例10:5-(4-((4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)-3,3-二甲基-4-氧代戊酸
实施例11:4-(4-((4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸
实施例12:4-((9,10-二甲氧基-4-((1,4,5,6-四氢-2-嘧啶基)亚肼基)-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸
实施例13:2-(4-((4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)-乙酸
实施例14:3-(4-((4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)-丙酸(1)二氯甲烷/甲醇/氨80/20/4
实施例15:5-((4-(((氨基)亚氨基甲基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢苯并(e)薁-8-基)氧基)戊酸盐酸盐
取86mg实施例3产物与2ml水和410.1N盐酸混合，数分钟后，冻干介质，得到91mg预期盐。
实施例16:4-((4-(((氨基)亚氨基甲基)亚肼基)-8,9-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-10-苯并(e)薁基)氧基)丁酸
实施例17:5-((4-(((氨基)亚氨基甲基)亚肼基)-8,9-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-10-苯并(e)薁基)氧基)戊酸
如实施例1步骤A,B和C所述进行操作，但以2,3,5,6-四氢-10-羟基-8,9-二甲氧基-苯并[e]薁-4-(1H)-酮(制备例2)为起始物料。实施例起始物料烷基化产物G-NH2附注16(Ⅱ)ABr-(CH2)3-CO2Et H2N-NH-C(=NH)NH2.HCl0,0717(Ⅱ)ABr-(CH2)4-CO2Et H2N-NH-C(=NH)-NH2.HCl0,07
实施例18:4-((4-(((氨基)亚氨基甲基)亚肼基)-8,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-9-苯并(e)薁基)氧基)丁酸
实施例19:5-((4-(((氨基)亚氨基甲基)亚肼基)-8,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-9-苯并(e)薁基)氧基)戊酸
如实施例1步骤A,B和C所述进行操作,但以2,3,5,6-四氢-9-羟基-8,10-二甲氧基-苯并[e]薁-4-(1H)-酮为起始物料。实施例起始物料烷基化产物G-NH2附注18(Ⅱ)E1Br-(CH2)3-CO2EtH2N-NH-C(-NH)-NH2.HCl0,1019(Ⅱ)E1Br-(CH2)4-CO2EtH2N-NH-C(=NH)-NH2.HCl0,07
实施例20:4-((4-((4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基)-1,2,3,4,5,6-六氢-9-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸
步骤A:4-(4-氧代)-1,2,3,4,5,6-六氢苯并(e)薁-9-基)氧基)-丁酸
将含0.6g2,3,5,6-四氢-9-羟基-苯并[e]薁-4(1H)-酮(制备例6),12ml二甲基甲酰胺(DMF),12ml四氢呋喃(THF),0.7g碳酸钾和0.7ml溴丁酸乙酯的悬浮液在室温下搅拌过夜。减压蒸发后，硅胶层析所得粗产物，使用二氯甲烷混合物(二氯甲烷/丙酮95/5)洗脱。这样得到0.608mg纯化产物，为黄色油状物形式。
IR(CHCl3)
C=O 1728cm-1
共轭酮 1641cm-1
芳香C=C 1610cm-1,1590cm-1,1569cm-1,1449cm-1
步骤B:4-((4-((4,5-二氢-1H-味唑啉-2-基)亚肼基)-1,2,3,4,5,6-六氢苯并(e)薁-9-基)氧基)-丁酸乙酯
将608mg上述步骤A的产物，l0ml丁醇和600mg下述环状氨基胍氢溴酸盐：(4,5-二氢-1H-咪唑啉-2-基)-肼，一同搅拌回流24小时，减压蒸除溶剂，并将所得粗产物通过硅胶色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(MeOH)/氢氧化铵混合物(80/20/4)洗脱。得到0.604g预期产物。
IR(CHCl3)
=C-NH- 3451cm-1
C=O 1728cm-1(酯)
C=N +C=C+芳香基： 1627cm-1(F),1568cm-1,1548cm-1,1497cm-1,1488cm-1
步骤C:7-((4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基)-1,2,3,4,5,6-六氢苯并(e)薁-9-基)氧基)-丁酸
将含0.604g前一步产物，8ml乙醇，5ml四氢呋喃和2ml 2N苏打的溶液在室温下搅拌4小时，然后加2ml盐酸中和。减压蒸发后，将粗产物通过硅胶色谱纯化，用二氯甲烷(CH2Cl2)/甲醇(MeOH)/氢氧化铵混合物(80/20/4)洗脱。得到0.298g用甲醇重结晶的纯化产物。
Rf(二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵80/20/4):0.2
NMR(D2O+1滴1N苏打)
1.71(w)2H O-CH2-CH2-CH2-CO
1.96(m)2H 位置2(环戊烯)的CH2
2.30(t)2H CH2-CO
2.50-2.75 8H CH2-C
3.45(ws)4H CH2-N=
3.89(wt)2H Ph-O-CH2-C
6.70(m)2H H10和H8
7.00(d,J=8) H7
实施例21:4-(4-((4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基)-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸
操作如实施例20所述进行，但以0.856g 2,3,5,6-四氢-8-羟基-苯并[e]薁-4(1H)-酮(制备例7)为起始原料，得到0.299g预期产物。
Rf(二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵80/20/4):0.27
实施例22:5-((8-(((氨基)亚氨基甲基)亚肼基)-6,7,8,9,10,11-六氢-薁并(5,6-d)-1,3-苯并二氧杂环戊烯-4-基)氧基)-戊酸
步骤A:5-(((4-氧代)-9,10-二羟基-1,2,3,4,5,6-六氢-苯并(e)薁-9-基)氧基)戊酸乙酯
1)保护
惰性气氛下，在10g2,3,5,6-四氢-8,9,10-三羟基-苯并[e]薁-4(1H)-酮(制备例1)的100ml四氢呋喃溶液内加入4.42ml三甲氧基硼酸酯和20.4ml三乙胺，期间保持温度在37-39℃之间，然后在室温下搅拌反应混合物3小时。
2)烷基化和脱保护
接着，加入9.7ml5-溴戊酸乙酯，100ml二甲基甲酰胺和8.4g碳酸钾，并在60℃下搅拌2天。然后加120ml水和50ml36N浓盐酸处理反应混合物，再搅拌1小时，然后加入乙酸乙酯，分离有机相和水相。随后洗涤有机相，干燥并减压蒸发。所得粗产物通过硅胶色谱纯化，用环己烷/乙酸乙酯混合物(70/30)洗脱。得到5.2g预期纯净产物。
Rf(二氯甲烷/甲醇95/5)=0.82
Rf(环己烷/乙酸乙酯70/30)=0.23
步骤B:5-(((8-氧代)-6,7,8,9,10,11-六氢薁并(5,6-d)-1,3-苯并二氧杂环戊烯-4-基)氧基))-戊酸乙酯
60℃下，将2.5g上一步产物，17ml二甲基甲酰胺，3.6g CsF和1.4ml二溴甲烷在惰性气氛下一同混合1小时。过滤和甲醇冲洗后，进行减压蒸发，并将所得粗产物通过硅胶色谱纯化，用环己烷/乙酸乙酯混合物(85/15)洗脱。得到1.73g预期纯净产物。
(M.P.=118℃)
Rf(环己烷/乙酸乙酯80/20)=0.25
步骤C:5-((8-((氨基)亚氨基甲基)亚肼基)-6,7,8,9,10,11-六氢-薁并(5,6-d)-1,3-苯并二氧杂环戊烯-4-基)氧基)-戊酸乙酯
将551mg上步所得产物和467mg氨基胍盐酸盐在120℃一同混合过夜，然后进行色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵混合物(80/20/4)洗脱。得到174mg预期产物。
Rf(二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵80/20/4)0.98
步骤D:5-((8-(((氨基)亚氨基甲基)亚肼基)-6,7,8,9,10,11-六氢-薁并(5,6-d)-1,3-苯并二氧杂环戊烯-4-基)氧基)戊酸
将274mg上步所得产物和1.86ml1N苏打溶液在室温下一同混合1小时30分钟，然后用1N盐酸溶液中和混合物，并减压蒸发。粗产物通过色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵混合物(80/20/4)洗脱。得到141mg预期产物。
Rf(二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵80/20/4)0.23
NMR(DMSO)
1.55-1.9(m)4H O-CH2-CH2-CH2-CH2-CO
1.55-1.9(m)2H 位置2(环戊烯)的CH2
2.26(t)2H CH2-CO
2.65-3.00(m)8H CH2-C=
4.07(t) 2H O-CH2-CH2-
5.95(s)2H -O-CH2-O
6.61(m) 1H H8
活动的H(m，宽) NH-C(=NH)-NH2
实施例23:5-((8-(((氨基)亚氨基甲基)亚肼基)-2,2-二苯基-6,7,8,9,10,11-六氢-薁并(4,5-e)-1,3-苯并二氧杂环戊烯-4-基)氧基)-戊酸
如上一实施例所述进行操作，但以374mg上一实施例步骤A所得产物和0.19ml二苯基二氯甲烷为起始原料。得到198mg预期产物。
Rf(二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵80/20/4)=0.17
实施例24:O-[4-[(4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高丝氨酸
步骤A:0-[(4-氧代)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高丝氨酸甲酯
室温下，将0.6g2,3,5,6-四氢-8-羟基-9,10-二甲氧基-苯并[e]薁-4(1H)-酮(制备例3),10ml二甲基甲酰胺(DMF),10ml四氢呋喃，1g碳酸钾和0.867g如制备例8所述制得的(DL)-4-溴-2-(苯基甲氧基羰基氨基)丁酸甲酯一起搅拌过夜。减压蒸发之后，硅胶层析粗产物，用二氯甲烷(CH2Cl2)/丙酮混合物(95/5)洗脱。由此得到1.166g精制产物，为黄色油状物。
IR(CHCl3)
C=O 1740cm-1(sh.),1721cm-1
共轭酮1642cm-1
芳香C=C 1593cm-1,1559cm-1,1508cm-1,1493cm-1
步骤B:O-[4-[(4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基)--9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高丝氨酸甲酯
将539mg步骤A产物，15ml丁醇和600mg下述环状氨基胍氢溴酸盐：(4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)-肼，在120℃下一起搅拌24小时，然后减压蒸除溶剂，并将粗产物通过硅胶色谱纯化，用CH2Cl2/甲醇(MeOH)/氢氧化铵混合物(80/20/4)洗脱。由此得到0.641g预期产物。
IR(CHCl3)
=C-NH-3451cm-1+缔合峰
C=O 1740cm-1(sh.),1720cm-1(max)
C=N+C=C+芳香骨架+酰胺Ⅱ:1667cm-1(F),1606cm-1,1508cm-1,1490cm-1.
步骤C:O-[4-[(4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高丝氨酸
将含0.6g上一步所得产物、10ml乙醇和2ml2N苏打的溶液在室温下搅拌2小时，然后用2ml盐酸中和。减压蒸发之后，将粗产物通过硅胶色谱纯化，用CH2Cl2/甲醇(MeOH)/氢氧化铵混合物(80/20/4)洗脱。这样在用甲醇重结晶后得到0.349g精制产物。
Rf CH2Cl2/甲醇(MeOH)/氢氧化铵80/20/4:0.37
实施例25:O-[4-[(4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基)-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高丝氨酸
按与实施例24等同的方法进行操作，但其中使用0.428g2,3,5,6-四氢-9-羟基-苯并[e]薁-4(1H)-酮(制备例7)为起始原料。得到245mg预期产物。
Rf CH2Cl2/甲醇(MeOH)/氢氧化铵80/20/4:0.5
实施例26:O-[4-[(1,2,3,4-四氢-6-嘧啶基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高丝氨酸
步骤A:O-[9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-4-[(1,4,5,6-四氢-2-嘧啶基)亚肼基]-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高丝氨酸甲酯的一氢溴酸盐
如实施例24步骤B所述，以200mg如实施例24步骤A所述得到的产物在2ml丁醇中的溶液和74.5mg四氢-2(1H)-嘧啶酮腙一氢溴酸盐为原料进行操作，并加热回流16小时。随后使反应介质恢复到室温，用二氯甲烷进行提取，干燥提取液，然后减压蒸除溶剂，得到152mg预期产物。
步骤B:O-[4-[(1,2,3,4-四氢-6-嘧啶基)亚肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高丝氨酸
如实施例24步骤C所述，采用131mg上面步骤A所得产物在1.3ml乙醇和0.43ml N苏打中的溶液进行操作。加入N盐酸中和反应介质，然后蒸除溶剂。经过滤和干燥后，得到78mg预期产物。M.P.=172℃.
NMR光谱(CDCl3)
1.90(m) (2H) 位置9的CH2
2.03(m) 中心CH2
2.36(m) (2H)
2.60-3.00(8H) =C-CH2质子
3.48(wm) (4H) =N-CH2质子
3.77(s)3.78(s)(9H)=C-OMe质子
4.01(m)(1H)4.17 φ-O-CH2
4.67(p) =C-CH-N-C=
514(ws) COO-CH2-φ
6.13(d) =C-NH-CH
6.49(ws) H4
≈7.36(m)(5H) φ-C
实施例27:O-(9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-4-[(1,4,5,6-四氢-2-嘧啶基]亚肼基]-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高丝氨酸(2,3-二羟基丙基)酯
步骤A:O-[9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-4-[(1,4,5,6-四氢-2-嘧啶基)亚肼基]-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高丝氨酸[(2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲基]酯
将0.3g如实施例26所述制得的产物在1ml二甲基甲酰胺和1ml二氯甲烷中的溶液、96mg1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和68mg1-羟基苯并三唑水合物冷却到0℃。室温下搅拌混合物30分钟，加入0.06ml solketal，并继续搅拌3小时30分钟。加水稀释反应介质，用二氯甲烷进行提取，将所得的0.6g粗产物进行硅胶色谱纯化(洗脱剂：CHCl2-MeOH 90-10)回收。得到0.352g预期产物。
IR光谱(CHCl3)
NH 3400cm-1
C=O 1745(sh),1719cm-1
C=N,C=C }
芳香骨架，酰胺Ⅱ} 1672(F),1645,1597,1565(f),1507,1492cm-1
步骤B:O-(9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-4-[(1,4,5,6-四氢-2-嘧啶基)亚肼基]-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高丝氨酸(2,3-二羟基丙基)酯
将0.320g步骤A所得产物在3ml乙醇和1ml2N盐酸中于室温下搅拌6小时。蒸发溶剂后，进行硅胶层析(洗脱剂：CH2Cl2-MeOH-NH4OH80-20-4)，得到0.112g预期产物。
NMR光谱(CDCl3)
1.88(m) (2H) }
1.98 } 中心CH2和位置9的CH2
2.36 }
2.60-3.10(8H) =C-CH2
3.43(m)(4H) =N-N-CH2
3.79(s) }
3.81 } φ-OMe
3.60-3.90 O-CH2-CH-O
≈4.00-4.30 } COO-CH2-CH
} φ-O-CH2-CH2
4.64(m)(1H) =C-CH-N-C=
5.13(s) COO-CH2-φ
6.53(s) H4
7.20-7.38 φ-C质子
实施例28:O-[4-[(4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基]-N-[(8-喹啉基)磺酰基]-DL-高丝氨酸
步骤A:O-(9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-4-氧代-8-苯并(e)薁基)-N-[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]-DL-高丝氨酸甲酯
将4.1g按制备例3所述制得的产物和5g按制备例9所述制得的产物在50ml二甲基甲酰胺和50ml四氢呋喃中，于5g碳酸钾和二甲氨基吡啶存在下，在室温下搅拌65小时。然后减压蒸除溶剂，残留物通过硅胶色谱纯化(洗脱剂：CH2Cl2-丙酮95-5)，得到7.3g预期产物。
IR光谱(CDCl3)
=C-NH 3430cm-1
C=O 1744cm-1(甲酯)
1710cm-1(NH-BOC)
1648cm-1(共轭酮)
芳香骨架+酰胺Ⅱ 1593,1559,1493 cm-1
步骤B:O-(9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-四氢-4-氧代-8-苯并(e)薁基)-DL-高丝氨酸甲酯的一盐酸盐
将10ml氢氯酸的乙酸乙酯溶液分三批加到6g步骤A所制产物的10ml乙酸乙酯溶液中，然后在室温下搅拌16小时。减压蒸除溶剂，得到0.656g预期产物，该产物直接用于下一步骤中。
步骤C:O-(9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-4-氧代-8-苯并(e)薁基)-N-[(8-喹啉基)磺酰基]-DL-高丝氨酸
将上步所得的0.656g产物溶于5ml二氯甲烷，加入1ml三乙胺和0.638g8-氯磺酰基喹啉，并在室温下搅拌2小时。减压蒸发溶剂后，进行硅胶层析(洗脱剂：CHCl2-MeOH95-5)，得到0.956g预期产物。
步骤D:O-[4-[(4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基]-N-[(8-喹啉基)磺酰基]-DL-高丝氨酸甲酯
将0.9g前一步骤A的产物，5ml丁醇和0.6g下述环状氨基胍氢溴酸盐：(4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)肼，一起在120℃搅拌16小时，然后减压蒸除溶剂，得到0.786g预期产物，该产物直接用于下一步骤中。
步骤E:O-[4-[(4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基]-N-[(8-喹啉基)磺酰基]-DL-高丝氨酸
将含0.786g上一步骤所得产物，5ml甲醇与2ml2N苏打的溶液在室温下搅拌2小时，然后加2ml2N盐酸中和，并继续搅拌10分钟。减压蒸发后，将所得粗产物通过硅胶色谱纯化，使用CH2Cl2-甲醇-氢氧化铵混合物(80-20-4)洗脱。在经甲醇重结晶后得到0.438g预期产物。
Rf=0.40(CH2Cl2-MeOH-NH40H80-20-4).
NMR光谱(DMSO):
1.81(ws) 位置9的CH2
2.40-3.20 =C-CH2质子
3.35(w) =N-CH2质子，
3.55(ws) =C-OMe质子
6.63(ws) H4
7.58(dd) H′3
7.67(t) H′6
8.19(d),8.29(d) H′5和H′7
8.45(d) H4
8.90(d) H2
7.31(ws) }
7.97 } 活动的H
10.40(f) }
12.62 }
实施例29:O-[4-[(4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基]-N-[[3-[4-(3-吡啶基)-1H-咪唑-1-基]丙氧基]羰基]-DL-高丝氨酸的一盐酸盐
步骤A:4-[[9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-4-氧代-8-苯并(e)薁基]氧基]-2-异氰酸基丁酸甲酯
0℃下，将450mg实施例28步骤B所得的胺在10.2ml碳酸氢钠饱和溶液和10.2ml二氯甲烷中搅拌10分钟。然后在反应介质的有机相中加入204mg三光气的2ml二氯甲烷溶液，搅拌10分钟，然后用二氯甲烷提取，干燥提取液，减压蒸除溶剂，得到430mg预期产物，该产物直接用于下一步骤中。
步骤B:O-[9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-4-氧代-8-苯并(e)薁基]-N-[[3-[4-(3-吡啶基)-1H-咪唑-1-基]丙氧基]羰基]-DL-高丝氨酸
将430mg步骤A所得产物的20ml二氯甲烷溶液冷却到0℃，加入414mg如制备例10所制醇的10ml二氯甲烷溶液。使反应介质温度恢复到室温，搅拌48小时，然后减压蒸除溶剂，残留物通过氧化铝层析(洗脱剂：CH2Cl2-MeOH)，回收298mg预期产物。
步骤C:O-[4-[(4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)亚肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基]-N-[[3-[4-(3-吡啶基)-1H-咪唑-1-基]丙氧基]羰基]-DL-高丝氨酸的一氢溴酸盐
如实施例24步骤B所述，以277mg上面步骤B所得产物和164mg环状氨基胍氢溴酸盐的13ml丁醇的溶液为起始原料进行操作。经氧化铝层析(洗脱剂：CH2Cl2-MeOH95-5)后，得到289mg预期产物。
TR光谱(CHCl3)
C=O 1746(sh)1723(max)cm-1
共轭体系 }
+芳香骨架}1668,1625(F),1599(sh),1551,1509,1489 cm-1
+酰胺Ⅱ }
OH 3618cm-1
步骤D:0-[4-[(4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基]-N-[[3-[4-(3-吡啶基)-1H-咪唑-1-基]丙氧基]羰基]-DL-高丝氨酸的一盐酸盐
在277mg上面步骤C所得产物的10ml乙醇中的溶液内加入0.3ml N苏打溶液，搅拌30分钟，再加10ml水，然后使用N盐酸酸化反应介质到pH2.5，减压蒸除溶剂，残留物通过硅胶层析(洗脱剂：CH2Cl2-MeOH-NH4OH40-10-2)，减压蒸发滤液，将残留物溶于异丙醚，滤出沉淀，干燥后得到126mg预期产物。
NMR光谱(DMSO)
1.78(m) (2H) }
1.90-2.30(m)(2H)} 3-CH2
1.60-2.90(m)(8H) CH2-C=
3.53(ws) (≈4H) N-CH2-CH2-N
3.69(s),3.71(s) CH3O-C=
3.90-4.20(m)(7-8H) CH2和CH
6.73(s) H4
7.20(d，宽) CO-NH-CH-
7.35 (dd) H′5
8.04(d) H′4
8.37(wd) H′6
8.94(ws) H′2
7.72(s),7.80(s) CH=咪唑
实施例30:5-[[4-[(4,5-二氢-4-氧代-1H-咪唑-2-基)亚肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-8-苯并(e)薁基]氧基]戊酸
室温下，将300mg实施例3步骤A所得产物的6ml乙醇的溶液与61mg碳酸氢钠和0.7ml溴乙酸乙酯混合。蒸除溶剂，硅胶层析残留物(洗脱剂：CH2Cl2-MeOH95-5)，得到139mg中间体乙基酯。取110mg该酯与1ml乙醇在0.5ml2N苏打存在下室温混合2小时。采用2N盐酸中和反应介质后，滤出所形成的沉淀物，干燥，回收44mg预期产物。
NMR光谱(DMSO)
≈1.73(m)(6H) 中心CH2和位置9的CH2
2.30(t)(2H) =C-CH2(链)
2.30-3.20 =C-CH2
3.73(s),3.75(s) φ-OMe
3.83(ws) =C-N-CH2-C=
4.02(t) φ-O-CH2
6.76(s) H4
7.20(ws) (1H) }
8.28(ws)(1H) }活动的H
12.04 (1H) }
实施例31:O-[9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-4-[(4,5,6,7-四氢-1H-1,3-二氮杂-2-基)亚肼基]-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-D-高丝氨酸
将1g实施例24步骤A所制产物的5ml丁醇溶液与0.9g制备例11所制的环状氨基胍在130℃下一同混合16小时。减压蒸发溶剂，残留物通过硅胶层析(洗脱剂：CH2Cl2-MeOH90-10)，得到0.8g中间体酯。然后将该产物在3ml甲醇中与2ml2N苏打在室温下一起搅拌1小时30分钟。采用2N盐酸中和反应介质后，减压蒸发溶剂，残留物再通过硅胶层析(洗脱剂：CH2Cl2-MeOH-NH4OH90-15-2)，回收0.22g预期产物。
实施例32:0-[9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氢-4-[(3a,4,5,6,7,7a-六氢-1H-苯并咪唑-2-基)亚肼基]-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高丝氨酸
如实施例24步骤B和C所述，以200mg实施例24步骤A所制产物和176mg如制备例12所制的环状氨基胍为原料进行操作。回收102mg中间体酯，其中取100mg该中间体进行皂化反应，得到59mg预期产物。
Rf=0.24(CH2Cl2-MeOH-NH4OH 85-15-3).
药物组合物
制备相应含下列组分的片剂：
-实施例1产物 50mg
-片剂用赋型剂(滑石，淀粉，硬脂酸镁)SQ
补加至 120mg
本发明产物的药理学研究
1-研究本发明产物对玻连蛋白/玻连蛋白受体(ανβ3)结合的抑制作用：
方案
用100μl人玻连蛋白溶液(2μg/ml)(参见Yatohgo等，Cell.,Structure and fraction 13:281-292(1988))(用涂布缓冲液稀释)在4℃下涂布MaxiSorp 96-孔板过夜。
第二天，吸去孔内物，然后在温和搅拌下室温固定配体(玻连蛋白)1小时(参见固定缓冲液)。
洗涤孔内物六次(参见洗涤缓冲液)，然后依次向各孔中加入：
-40μl培养缓冲液，
-10μl受试产物稀释液，
(产物用50/50DMSO-H2O稀释)
-50μl人ανβ3受体(参见Pyteal等酶方法(Methods Enzymol)(1987)144:475)(用培养缓冲液稀释，稀释度根据受体组以及配体调整)。
在温和搅拌下，将配体，人ανβ3受体和受试产物在室温下培养3小时。
再次洗涤孔六次，然后在100μl抗体4B12-HRP，偶联于过氧化物酶的抗体存在下于室温温和搅拌培养2小时(其中的4B12-HRP抗体用培养缓冲液稀释，稀释度根据受体组加以调整)。
洗涤孔六次，然后借助过氧化物酶展示药盒(TMB MicrowellPeroxidase Substrate System Kirkegaard:Ref.Cat.50-76-00)测试配体-受体结合。
这种药盒包含一瓶底物(3,3′,5,5′-四甲基联苯胺，0.4g/l)和一瓶B(0.02％H2O2的柠檬酸盐/柠檬酸缓冲液溶液)。临用时将一体积A液与一体积B液混合，然后以100μl/孔量分配反应混合物。对于玻连蛋白/ανβ3进行12小时酶促反应，然后加入100μl1M磷酸终止培养。在450nm处测量光密度。
缓冲液：
-涂布缓冲液：碳酸盐0.05M,NaOH pH9.6
-固定缓冲液：含0.5％BSA的PBS(pH7.4)
-洗涤缓冲液：含0.05％吐温20的PBS(pH7.4)
-培养缓冲液：
·50mM TRIS pH 7.4
·0.5％BSA
·0.05％吐温20
·1mM MnCl2
·50μM CaCl2
·50μM MgCl2
·100mM NaCl.
结果表示：
绘制人玻连蛋白结合的百分数作为每一受试产物浓度对数的函数曲线。
对于每一产物，按下式求出其IC50:
IC50=(BO+Bmin)/2
BO=无任何产物存在下的最大结合
Bmin=在最高浓度产物存在下的最小结合。
2．-小鼠颅盖试验
原理
对妊娠雌性小鼠注射示踪物剂量45Ca(CaCl2)，以便通过测量新生小鼠颅骨盖释放的45C来研究骨吸收。
目的
体外研究分子对骨吸收的活性。
产物
1)受试产物：
赋型剂：DMSO,H2O/BSA(0.1％)
剂量：可变(筛选10μM).
2)对比产物：
锯鳞血抑肽(参见．H-9010-BACHEM)
赋型剂：H2O/BSA
剂量：10μM
3)放射性示踪物：
CaCl2水溶液形式45Ca-参见CES3AMWESHAM或NEZ-013NEN.
赋型剂：生理血清
剂量：25μCi/小鼠/0.4ml
培养基
补加有0.1％BSA和盘尼西林/链霉素的含酚红(参见041-01535M/GIBCO)CMRL1066。
方法
1)对妊娠小鼠(OF1，品系：瑞士)注射45Ca
a)制备标记溶液：
将190μl钙母液(2mci/ml)加到6ml生理血清中。
b)注射：
在如妊娠的第17天，通过静脉途径对小鼠注射400μl上述溶液，即25μCi/小鼠。
2)去除组织(颅骨盖)
新生小鼠出生后第6天，断头处死，然后取头颅，沿着后颈到前额切开皮肤。用剪刀剪切出颅骨盖，并利用凿沿顶骨将颅骨切成两个完全等同的半颅盖(一个位于左面，另一个位于右面)。将其中的一个用作对照，而另一个则用于测试受研究产物。
3) “冲洗”相
将每一半颅盖置于24孔板(其中孔内含有1ml培养基)的孔内100μm聚乙烯和nylex支持体上，以避免与孔底部完全接触。24小时后，将载有颅盖的聚乙烯支持体移入到含1ml新鲜培养基和受试产物或它们的溶剂的新24-孔板中。从第一块板的各孔中取出200μl培养基，进行第一次放射性计数(A值)。
这种培养基变化使得与移出有关的机械应力消除。
4)再“吸收”相
将组织与研究产物接触48小时后，从每孔中取出200μl培养基进行计数(B值)，以测定在所谓的再吸收相期间从培养基中释出的45Ca量。
然后将颅盖在1ml5％三氯乙酸中完全脱去矿物质。消化后再移出200μl进行计数以测定骨中剩余的钙量(C值)。
结果表示
按照下式方程，计算每半颅盖的骨吸收百分数：
％骨吸收=dpm B/dpm(A+B+C)×100
dpm A+B+C的总和表示移出当天每块骨部分中45Ca的掺入量。
为测量产物的效果，对于每一点，计算处理孔与相应的对照孔的骨吸收百分数之比。如果产物抑制骨吸收，则会发现称作吸收指数的数值在0到1之间，反之，如果产物加强骨吸收，则上述数值＞1。然后计算每种产物的6个指数的平均值(因每组6个点)，得到每种产物的一个指数。如果用1减去此指数值，便得到产物的抑制率，也可以表示成百分率形式。
此外，通过比较点/点再吸收指数，进行统计学处理(Student T-检验)。
结果实施例竞争性Vn/VR((ανβ3)结合试验IC50(μM)小鼠颅盖抑制率(10μM浓度)％实施例20.4519实施例32.1实施例60.117.5实施例82.79-实施例100.88实施例110.057实施例222.36-实施例120.3512实施例140.7514实施例240 0318实施例200.07911实施例210.037-实施例250.01326实施例260.00630实施例270.17039实施例280.01527实施例290.02818实施例310.05520实施例320.035-