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用作CCR2受体拮抗剂的巯基咪唑
    本发明涉及具有CCR2受体拮抗特性的巯基咪唑衍生物。此外本发明还涉及它们的制备方法和包含它们的药物组合物。本发明还涉及上述化合物在制备用于预防或治疗CCR2受体(特别是CCR2B受体)活化介导疾病的药物中的用途。

    EP 0,240,050公开了用于控制杂草的1-甲基-1H-咪唑-5-甲酸衍生物。

    US 3,354,173公开了作为催眠药的咪唑羧酸酯。

    US 4,182,624公开了在咪唑环上携带羧基官能团的二苯甲基-咪唑衍生物。该化合物被描述为在农业和园艺中对于植物保护和生长调节有利用价值。

    EP0,000,373涉及了咪唑碳酸衍生物及其在植物保护中的应用。

    WO 01/17974和Organic Process Research and Development，2002，6(5)，674-676涉及了1取代5-(羟甲基)咪唑衍生物的合成。

    WO 00/75135描述了异戊二烯基-蛋白转移酶的联芳抑制剂。

    Arzneimittel-Forschung，1980，30(7)，1051-1056描述了具有潜在生物活性的咪唑衍生物。

    US 4,762,850涉及作为多巴胺β-羟化酶抑制剂的2-巯基-1-(苯基烷基)-1H-咪唑-5-甲酸衍生物。

    EP 294,973涉及作为多巴胺β-羟化酶抑制剂的1-芳烷基-5-(哌嗪甲基)-咪唑-2-硫醇。

    DE 2,618,370涉及咪唑[5，1-c](1，4)-苯并氧杂氮杂庚因及其制备。

    EP 146,228描述了用于制备有治疗益处的苯乙基咪唑衍生物的取代2-巯基-咪唑。

    WO 01/09127、WO 01/09124和WO 99/41248涉及作为法呢基转移酶抑制剂的缩合杂环体系衍生物。

    WO 00/01674涉及从苄胺、羟基酮和硫氰酸酯制备1-苯甲基咪唑。

    WO 92/10182、WO 92/10186、WO 92/10188和EP 437，103涉及在血管紧缩素II受体拮抗剂的制备中作为中间体的咪唑衍生物。

    J.Heterocyclic Chemistry，1982，19(3)，56 1-566涉及具有潜在生物活性的咪唑衍生物的合成。

    WO 02/066458涉及用于治疗免疫系统功能紊乱相关疾病的2-硫代-取代咪唑衍生物。

    FR 1487326和FR 6751公开了作为镇静剂和止痛剂的咪唑衍生物。

    WO 01/05430描述了1-(3-氯苯基)-4-[1-(4-氰苄基)-5-咪唑基甲基]-2-哌嗪酮的制备，作为药物传递装置中的缓释模型药物。

    WO 99/40913提供了为单核细胞趋化蛋白-1抑制剂的取代吡咯，并且WO 01/51466涉及作为MCP-1受体拮抗剂的吲哚衍生物。

    本发明化合物与现有技术的化合物不同，在于其结构、表现药物活性、药理活性和/或药理强度。

    本发明的一个方面涉及下式化合物

    

    及其N-氧化物、药物可接受加成盐、季胺和立体化学异构形式，其中

    R₁表示氢、C_1-6烷基、C_3-7环烷基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基、二-(C_1-6烷基)氨基C_1-6烷基、芳基或杂芳基；

    R₂各自独立表示卤素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷硫基、多卤代C_1-6烷基、多卤代C_1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、氨基、单-或二(C_1-4烷基)氨基、硝基、芳基或芳氧基；

    R₃表示氢、氰基、任选被羟基或C_1-6烷氧基取代的C_1-6烷基、C(＝O)-O-R₆、C(＝O)-NR_7aR_7b、C(＝S)-NR_7aR_7b、S(＝O)₂-NR_7aR_7b或C(＝O)-R₈。

    R₄表示氢、氰基、任选被羟基或C_1-6烷氧基取代的C_1-6烷基、C(＝O)-O-R₆、C(＝O)-NR_7aR_7b、C(＝S)-NR_7aR_7b、S(＝O)₂-NR_7aR_7b或C(＝O)-R₈；

    或R₃和R₄共同形成式-C(＝O)-NH-NH-C(＝O)-的二价基团；

    R₆表示氢、C_1-6烷基、羟基C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、多卤代C_1-6烷基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基、氨基C_1-6烷基、单-或二(C_1-4烷基)氨基C_1-6烷基、氨基羰基C_1-6烷基、单-或二(C_1-4烷基)氨基羰基C_1-6烷基、芳基、吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基；其中吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基可以被C_1-4烷基任选取代；

    R_7a和R_7b各自独立表示氢、C_1-6烷基、氨基、单-或二(C_1-4烷基)氨基、芳基NH-、氨基C_1-6烷基、单-或二(C_1-4烷基)氨基C_1-6烷基、C_1-6烷基羰基氨基、氨基羰基氨基、C_1-6烷氧基、-NH-C(O)-H或羟基C_1-6烷基；或者

    R_7a和R_7b与它们连接的氮共同形成吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基或被C_1-6烷基取代的哌嗪基；

    R₈表示氢、C_1-6烷基、羟基C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、多卤代C_1-6烷基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基、氨基C_1-6烷基、单-或二(C_1-4烷基)氨基C_1-6烷基、氨基羰基C_1-6烷基、单-或二(C_1-4烷基)氨基羰基C_1-6烷基或芳基；

    R₅表示氢或C_1-6烷基；

    n为1、2、3、4或5；

    芳基表示苯基或被1、2、3、4或5个取代基取代的苯基，所述取代基各自独立选自卤素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、多卤代C_1-6烷基、多卤代C_1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、单-或二(C_1-4烷基)氨基羰基、氨基、单或二(C_1-4烷基)氨基、苯氧基或硝基；

    杂芳基表示呋喃基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基，上述杂环各自被1或2个取代基任选取代，所述取代基各自独立选自卤素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、多卤代C_1-6烷基、多卤代C_1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、单-或二(C_1-4烷基)氨基羰基、氨基、单-或二(C_1-4烷基)氨基或硝基；

    前提条件是

    R₃或R₄中至少一个不是氢；且

    如果R₃表示C(＝O)-OH、C(＝O)-O-C_1-6烷基或C(＝O)-O-C_2-6烯基，则R₄不是氢；且

    如果R₃表示CH₂OH并且R₁和R₅表示氢，则R₄不是氢；且

    如果R₃表示C(＝O)-NH-C_1-4烷基-NH₂并且R₁和R₅表示氢，则R₄不是氢；且如果R₃表示

    

    且R₁和R₅表示氢，则R₄不是氢。

    本发明还涉及了用作药物的上述定义式(I)化合物前提条件是

    R₃或R₄中至少一个不是氢；且

    如果R₃表示C(＝O)-OH或C(＝O)-O-C_1-6烷基，R₁表示芳基且n为1，则R₄不是氢；且

    如果R₃表示C(＝O)-NH-C_1-4烷基-NH₂或C(＝O)-OH且R₁和R₅表示氢，则R₄不是氢。

    因此，本发明还涉及了用作药物的化合物，其中该化合物为下式化合物

    

    及其N-氧化物、药物可接受加成盐、季胺和立体化学异构形式，其中

    R₁表示氢、C_1-6烷基、C_3-7环烷基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基、二(C_1-6烷基)氨基C_1-6烷基、芳基或杂芳基；

    R₂各自独立表示卤素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷硫基、多卤代C_1-6烷基、多卤代C_1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、氨基、单-或二(C_1-4烷基)氨基、硝基、芳基或芳氧基；

    R₃表示氢、氰基、被羟基或C_1-6烷氧基任选取代的C_1-6烷基、C(＝O)-O-R₆、C(＝O)-NR_7aR_7b、C(＝S)-NR_7aR_7b、S(＝O)₂-NR_7aR_7b或C(＝O)-R₈；

    R₄表示氢、氰基、被羟基或C_1-6烷氧基任选取代的C_1-6烷基、C(＝O)-O-R₆、C(＝O)-NR_7aR_7b、C(＝S)-NR_7aR_7b、S(＝O)₂-NR_7aR_7b或C(＝O)-R₈；

    或R₃和R₄共同形成式-C(＝O)-NH-NH-C(＝O)-的二价基团；

    R₆表示氢、C_1-6烷基、羟基C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、多卤代C_1-6烷基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基、氨基C_1-6烷基、单-或二(C_1-4烷基)氨基C_1-6烷基、氨基羰基C_1-6烷基、单-或二(C_1-4烷基)氨基羰基C_1-6烷基、芳基、吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基；其中吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基可以被C_1-4烷基任选取代；

    R_7a和R_7b各自独立表示氢、C_1-6烷基、氨基、单-或二(C_1-4烷基)氨基、芳基NH-、氨基C_1-6烷基、单-或二(C_1-4烷基)氨基C_1-6烷基、C_1-6烷基羰基氨基、氨基羰基氨基、C_1-6烷氧基、-NH-C(O)-H或羟基C_1-6烷基；或

    R_7a和R_7b与它们连接的氮共同形成吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基或被C_1-6烷基取代的哌嗪基；

    R₈表示氢、C_1-6烷基、羟基C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、多卤代C_1-6烷基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基、氨基C_1-6烷基、单-或二(C_1-4烷基)氨基C_1-6烷基、氨基羰基C_1-6烷基、单-或二(C_1-4烷基)氨基羰基C_1-6烷基或芳基；

    R₅表示氢或C_1-6烷基；

    n为1、2、3、4或5；

    芳基表示苯基或被1、2、3、4或5个取代基取代的苯基，所述取代基各自独立选自卤素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、多卤代C_1-6烷基、多卤代C_1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、单-或二(C_1-4烷基)氨基羰基、氨基、单或二(C_1-4烷基)氨基、苯氧基或硝基；杂芳基表示呋喃基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基，上述杂环各自可被1或2个取代基任选取代，所述取代基各自独立选自卤素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、多卤代C_1-6烷基、多卤代C_1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、单-或二(C_1-4烷基)氨基羰基、氨基、单-或二(C_1-4烷基)氨基或硝基；

    前提条件是

    R₃或R₄中至少一个不是氢；且

    如果R₃表示C(＝O)-OH或C(＝O)-O-C_1-6烷基，R₁表示芳基且n为1，则R₄不是氢；且

    如果R₃表示C(＝O)-NH-C_1-4烷基-NH₂或C(＝O)-OH且R₁和R₅表示氢，则R₄不是氢。

    本发明的另一方面是上述定义的式(I)化合物在制备用于预防或治疗CCR2受体活化介导疾病的药物中的用途，特别是预防或治疗炎性疾病。

    因此，本发明还涉及化合物在制备预防或治疗CCR2受体活性介导疾病的药物中的用途，特别是预防或治疗炎性疾病，其中所述化合物为式(I)化合物

    

    及其N-氧化物、药物可接受加成盐、季胺和立体化学异构形式，其中

    R₁表示氢、C_1-6烷基、C_3-7环烷基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基、二(C_1-6烷基)氨基C_1-6烷基、芳基或杂芳基；

    R₂各自独立表示卤素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷硫基、多卤代C_1-6烷基、多卤代C_1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、氨基、单-或二(C_1-4烷基)氨基、硝基、芳基或芳氧基；

    R₃表示氢、氰基、被羟基或C_1-6烷氧基任选取代的C_1-6烷基、C(＝O)-O-R₆、C(＝O)-NR_7aR_7b、C(＝S)-NR_7aR_7b、S(＝O)₂-NR_7aR_7b或C(＝O)-R₈；

    R₄表示氢、氰基、被羟基或C_1-6烷氧基任选取代的C_1-6烷基、C(＝O)-O-R₆、C(＝O)-NR_7aR_7b、C(＝S)-NR_7aR_7b、S(＝O)₂-NR_7aR_7b或C(＝O)-R₈；

    或R₃和R₄共同形成式-C(＝O)-NH-NH-C(＝O)-的二价基团；

    R₆表示氢、C_1-6烷基、羟基C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、多卤代C_1-6烷基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基、氨基C_1-6烷基、单-或二(C_1-4烷基)氨基C_1-6烷基、氨基羰基C_1-6烷基、单-或二(C_1-4烷基)氨基羰基C_1-6烷基、芳基、吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基；其中吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基可以被C_1-4烷基任选取代；

    R_7a和R_7b各自独立表示氢、C_1-6烷基、氨基、单-或二(C_1-4烷基)氨基、

    芳基NH-、氨基C_1-6烷基、单-或二(C_1-4烷基)氨基C_1-6烷基、C_1-6烷基羰基氨基、氨基羰基氨基、C_1-6烷氧基、-NH-C(O)-H或羟基C_1-6烷基；或

    R_7a和R_7b与它们连接的氮共同形成吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基或被C_1-6烷基取代的哌嗪基；

    R₈表示氢、C_1-6烷基、羟基C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、多卤代C_1-6烷基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基、氨基C_1-6烷基、单-或二(C_1-4烷基)氨基C_1-6烷基、氨基羰基C_1-6烷基、单-或二(C_1-4烷基)氨基羰基C_1-6烷基或芳基；

    R₅表示氢或C_1-6烷基；

    n为1、2、3、4或5；

    芳基表示苯基或被1、2、3、4或5个取代基取代的苯基，所述取代基各自独立选自卤素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、多卤代C_1-6烷基、多卤代C_1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、单-或二(C_1-4烷基)氨基羰基、氨基、单或二(C_1-4烷基)氨基、苯氧基或硝基；

    杂芳基表示呋喃基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基，上述杂环各自可被1或2个取代基任选取代，所述取代基各自独立选自卤素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、多卤代C_1-6烷基、多卤代C_1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、单-或二(C_1-4烷基)氨基羰基、氨基、单-或二(C_1-4烷基)氨基或硝基；

    前提条件是

    R₃或R₄中至少一个不是氢。

    本文上下文中作为基团或基团部分使用的C_1-4烷基定义为具有1-4个碳原子的直链或支链饱和烃基，如甲基、乙基、丙基、1-甲基乙基，丁基；作为基团或是基团部分的C_1-6烷基定义为具有1-6个碳原子的直链或支链饱和烃基，如C_1-4烷基定义的基团、戊基、己基、2-甲基丁基等；C_3-7环烷基为环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚烯；C_2-6烯基定义为具有2-6个碳原子、包含双键的直链和支链烃基，如乙烯基、丙烯基、丁烯基、戊烯基、己烯基等；C_2-6炔基为具有2-6个碳原子、含有三键的直链或支链烃基，如乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基等。

    本文前面使用的术语(＝O)与碳原子相连时形成羰基部分，与硫原子相连时则形成亚砜部分，2个所述术语与同一硫原子相连时则形成砜基部分。

    术语卤素为氟、氯、溴和碘。本文上下文中作为基团或基团部分使用的多卤代甲基定义为单或多卤素取代的甲基，特别是携带一个或多个氟原子的甲基，例如，二氟代甲基或三氟代甲基；作为基团或基团部分的多卤代C_1-6烷基定义为单或多卤素取代的C_1-6烷基，例如，多卤代甲基中定义的1，1-二氟-乙基等。当多卤代甲基或多卤代C_1-6烷基定义中的烷基上连有一个以上卤原子时，卤原子可以相同或不同。

    R₁定义中的术语杂芳基包括杂环所有可能的异构形式，如包括1H-吡咯基和2H-吡咯基的吡咯基。

    如果不另外说明，本文上下文中提到的式(I)化合物的取代物定义中列出的芳基、杂芳基或杂环体系(参见例如R₁和R₆)可经任何合适的环碳原子或杂原子连接于式(I)分子地剩余部分上。因此，例如，当杂芳基是咪唑基时，其可以是1-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基等。

    当任何变量(例如R_7a、R_7b)在任何成分中出现一次以上时，各定义是独立的。

    从取代基划到环体系中的线表示键可以与连接到任何适合的环原子上。

    对治疗用途来说，式(I)化合物的盐为其中抗衡离子为药物可接受的盐。然而，也可使用非药物可接受的酸和碱的盐，例如，在制备或纯化药物可接受化合物中的用途。所有的盐，不论其是否药物可接受，均包括在本发明的范围之内。

    上文提到的药物可接受加成盐包括由式(I)化合物可形成的治疗活性无毒酸加成盐形式。通过用适当的酸处理碱形式容易得到后者，所述酸如无机酸，例如，氢卤酸如氢氯酸，氢溴酸等；硫酸；硝酸；磷酸等；或有机酸，例如乙酸、丙酸、羟基乙酸、2-羟基丙酸、2-氧代丙酸、草酸、丙二酸、丁二酸、马来酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、2-羟基-1，2，3-丙烷三羧酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、4-甲基苯磺酸、环己氨磺酸、2-羟基苯甲酸、4-氨基-2-羟基苯甲酸等。反之盐形式可用碱处理转化成游离碱形式。

    包括酸性质子的式(I)化合物通过用适当的有机或无机碱处理可以转化为它们的治疗活性无毒金属或铵加成盐形式。适当的碱盐形式包括如铵盐；碱和碱土金属盐，如锂、钠、钾、镁、钙盐等；有机碱的盐，如伯、仲和叔脂肪族和芳胺，如甲胺、乙胺、丙胺、异丙胺、四个丁胺异构体、二甲胺、二乙胺、二乙醇胺、二丙胺、二异丙胺、二正丁胺、吡咯烷、哌啶、吗啉、三甲胺、三乙胺、三丙胺、奎宁环、吡啶、喹啉和异喹啉、二苄基乙二胺、N-甲基-D-葡糖胺、2-氨基-2-(羟甲基)-1，3-丙二醇、海巴胺(hydrabamine)的盐，和氨基酸如精氨酸、赖氨酸等的盐。反之盐形式可通过用酸处理转化成游离酸形式。

    术语加成盐也包括式(I)化合物可形成的水合物和溶剂加成形式。这种形式的实例例如为水合物、醇合物等。

    上文所用的术语“季胺”定义为通过式(I)化合物的碱性氮与适当的季胺化剂(如任选取代的烷基卤、芳基卤或芳烷基卤，如碘化钾、苯甲基碘)之间的反应，式(I)化合物可形成的季铵盐。也可采用具有优良离去基团的反应物，如三氟甲磺酸烷基酯、甲磺酸烷基酯和对甲苯磺酸烷基酯。季胺有带正电的氮。药物可接受抗衡离子包括氯、溴、碘、三氟乙酸根和乙酸根。选择的抗衡离子可用离子交换树脂引入。

    本化合物的N-氧化物形式包括其中一个或多个叔氮原子被氧化成所指的N-氧化物的式(I)化合物。

    应理解的是，某些式(I)化合物和其N-氧化物、加成盐、季胺和立体化学异构形式可包含一个或多个手性中心，以立体化学异构形式存在。

    上文所用的“立体化学异构形式”定义为式(I)化合物及其N-氧化物、加成盐、季胺或生理官能衍生物可能具有的所有立体异构形式。除非另有所指或说明，化合物的化学名称指所有可能的立体化学异构形式的混合物，所述混合物包括所有基本分子结构的非对映异构体和对映异构体，以及式(I)及其N-氧化物、盐、溶剂合物或季胺的大体纯的各种异构形式，即包含少于10％，优选少于5％，特别是少于2％，最优选少于1％的其它异构体。因此，例如当式(I)化合物指定为(E)时，意为该化合物基本没有(Z)异构体。

    具体的说，立体中心可具有R-或S-构型；二价环状(部分)饱和基团上的取代基可具有顺-或反-构型。含双键的化合物在其双键上可具有E(entgegen)或Z(zusammen)-立体化学。术语顺、反、R、S、E和Z为本领域技术人员所熟知。

    式(I)化合物的立体化学异构形式显然包括在本发明范围之内。

    对于某些式(I)化合物，其N-氧化物、盐、溶剂合物、季胺及其制备中使用的中间体的绝对立体构型并非由实验决定。在这种情况下最先被分离的立体异构体命名为“A”，第二个命名为“B”，而不进一步指出实际的立体构型。然而，所述“A”和“B”立体异构形式在“A”和“B”具有对映关系时可通过例如其旋光度明确鉴定。本领域技术人员可利用本领域已知方法来确定这种化合物的绝对构形，如X-射线衍射。当“A”和“B”为立体异构混合物时，它们可进一步分离，其各自的第一级分分别命名为“A1”和“B1”，第二级分为“A2”和“B2”，而不进一步指出实际的立体化学构型。

    某些式(I)化合物也可以互变异构形式存在。尽管这种形式没有明确的表现在上面的式(I)中，但包含于本发明的范围之内。例如，式(I)包括为的互变异构形式。因此，本发明化合物包括

    下式化合物：

     和

    无论何时下文使用的术语“式(I)化合物”也包含其N-氧化物、盐、季胺和立体化学异构形式。特别重要的是立体化学纯的式(I)化合物。

    无论何时上下文使用，取代基可各自独立选自多种定义的列表，例如R_7a或R_7b，包括化学可能的所有可能组合。

    第一组目标化合物由式(I)化合物组成，其中适用下列限制条件中的一条或多条：

    a)R₁表示氢、C_1-6烷基、C_3-7环烷基、芳基或杂芳基；

    b)R₃表示氢、氰基、羟基任选取代的C_1-6烷基、C(＝O)-O-R₆、C(＝O)-NR_7aR_7b、S(＝O)₂-NR_7aR_7b、C(＝O)-R₈；

    c)R₄表示氢、氰基、羟基任选取代的C_1-6烷基、C(＝O)-O-R₆、C(＝O)-NR_7aR_7b、S(＝O)₂-NR_7aR_7b、C(＝O)-R₈；

    d)R_7a和R_7b各自独立表示氢、C_1-6烷基、氨基、单或二(C_1-4烷基)氨基、芳基NH-、氨基C_1-6烷基或者单或二(C_1-4烷基)氨基C_1-6烷基；或R_7a和R_7b与它们连接的氮共同形成吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基；且

    e)R₅表示氢。

    第二组目标化合物由式(I)化合物组成，其中适用下列限制条件中的一条或多条：

    a)R₂各自独立表示卤素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基或多卤代C_1-6烷基；

    b)R₃表示氢、氰基、被羟基取代的C_1-6烷基、C(＝O)-O-R₆、C(＝O)-NR_7aR_7b、C(＝S)-NR_7aR_7b或C(＝O)-R₈；

    c)R₄表示氢、氰基、羟基或C_1-6烷氧基任选取代的C_1-6烷基、C(＝O)-O-R₆或C(＝O)-NR_7aR_7b；

    d)R₃和R₄可共同形成式-C(＝O)-NH-NH-C(＝O)-的二价基团；

    e)R₆表示氢、C_1-6烷基、羟基C_1-6烷基或单-或二(C_1-4烷基)氨基羰基C_1-6烷基；

    f)R_7a和R_7b各自独立表示氢、C_1-6烷基、氨基、C_1-6烷基羰基氨基、氨基羰基氨基、C_1-6烷氧基、-NH-C(O)-H或羟基C_1-6烷基；或R_7a和R_7b与它们连接的氮共同形成吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或C_1-6烷基取代的哌嗪基；

    g)R₈表示C_1-6烷基；且

    h)n为1、2或3。

    第三组目标化合物由式(I)化合物组成，其中适用下列限制条件中的一条或多条：

    a)R₁表示氢、C_1-6烷基、C_3-7环烷基、芳基或杂芳基；

    b)R₂各自独立表示卤素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基或多卤代C_1-6烷基；

    c)_R3表示氢、氰基、羟基取代的C_1-6烷基、C(＝O)-O-R₆、C(＝O)-NR_7aR_7b或C(＝O)-R₈；

    d)R₄表示氢、氰基、羟基任选取代的C_1-6烷基、C(＝O)-O-R₆或C(＝O)-NR_7aR_7b；

    e)R₆表示氢、C_1-6烷基、羟基C_1-6烷基或者单-或二(C_1-4烷基)氨基羰基C_1-6烷基；

    f)R_7a和R_7b各自独立表示氢、C_1-6烷基、氨基；或R_7a和R_7b与它们连接的氮共同形成吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或吗啉基；

    g)R₈表示C_1-6烷基；

    h)n为1、2或3；且

    i)R₅为氢。

    第四组目标化合物由式(I)化合物组成，其中适用下列限制条件中的一条或多条：

    a)R₁表示C_1-6烷基、C_3-7环烷基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基、二(C_1-6烷基)氨基C_1-6烷基、芳基或杂芳基；

    b)R₁表示氢、C_1-6烷基、C_3-7环烷基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基、二(C_1-6烷基)氨基C_1-6烷基或杂芳基；

    c)R₂各自独立表示卤素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷硫基、多卤代C_1-6烷基、多卤代C_1-6烷氧基氨基羰基、氨基、单或二(C_1-4烷基)氨基、硝基、芳基或芳氧基；

    d)R₃表示氢、氰基、C_1-6烷氧基任选取代的C_1-6烷基、C(＝O)-O-R₆、C(＝O)-NR_7aR_7b、C(＝S)-NR_7aR_7b、S(＝O)₂-NR_7aR_7b或C(＝O)-R₈；

    e)如果R₄为氢则R₃表示氰基、C_1-6烷氧基任选取代的C_1-6烷基、C(＝O)-O-R₆、C(＝O)-NR_7aR_7b、C(＝S)-NR_7aR_7b、S(＝O)₂-NR_7aR_7b或C(＝O)-R₈；

    f)R₃和R₄各自独立表示氢、氰基、羟基C_1-6烷基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基、C(＝O)-O-R₆、C(＝O)-NR_7aR_7b、C(＝S)-NR_7aR_7b、S(＝O)₂-NR_7aR_7b或C(＝O)-R₈；

    g)如果R₃表示C(＝O)-O-R₆或C(＝O)-NR_7aR_7b则R₁为氢、C_1-6烷基、C_3-7环烷基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基、二(C_1-6烷基)氨基C_1-6烷基或杂芳基。

    第五组目标化合物由式(I)化合物组成，其中适用下列限制条件中的一条或多条：

    a)R₁表示氢、C_1-6烷基、环丙基、环己基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基、二(C_1-6烷基)氨基C_1-6烷基、苯基或被两个各自独立选自卤素的取代基取代的苯基；尤其是C_1-6烷基；

    b)n为1、2和3；尤其是n为2并且上述两个R₂取代基在3和4位上；

    c)R₂各自独立表示卤素或多卤代C_1-6烷基，尤其是卤素；

    d)R₃表示氢、氰基、C(＝O)-O-R₆、C(＝O)-NR_7aR_7b或C(＝O)-R₈；尤其是C(＝O)-O-R₆；

    e)R₄表示氢、氰基、羟基或C_1-6烷氧基任选取代的C_1-6烷基、C(＝O)-O-R₆或C(＝O)-NR_7aR_7b；尤其是C(＝O)-O-R₆；

    f)R₃和R₄共同形成式-C(＝O)-NH-NH-C(＝O)-的二价基团；

    g)R₆表示氢、C_1-6烷基或羟基C_1-6烷基；尤其是C_1-6烷基；

    h)R_7a表示氢或C_1-6烷基；并且R_7b表示氢、C_1-6烷基、氨基、C_1-6烷基羰基氨基、C_1-6烷氧基或羟基C_1-6烷基；或R_7a和R_7b与它们连接的氮共同形成哌啶基；

    i)R₈表示C_1-6烷基；

    j)R₅为氢。

    第六组目标化合物由式(I)化合物组成，其中适用下列限制条件中的一条或多条：

    a)R₁表示氢、C_1-6烷基、环丙基、环己基、苯基或被两个各自独立选自卤素的取代基取代的苯基；尤其是C_1-6烷基；

    b)n为1、2和3；尤其是n为2并且上述两个R₂取代基在3和4位上；

    c)R₂各自独立表示卤素或多卤代C_1-6烷基，尤其是卤素；

    d)R₃表示氢、氰基、C(＝O)-O-R₆、C(＝O)-NR_7aR_7b或C(＝O)-R₈；尤其是C(＝O)-O-R₆；

    e)R₄表示氢、氰基、羟基任选取代的C_1-6烷基、C(＝O)-O-R₆或C(＝O)-NR_7aR_7b；尤其是C(＝O)-O-R₆；

    f)R₆表示氢、C_1-6烷基或羟基C_1-6烷基；尤其是C_1-6烷基；

    g)R_7a表示氢或C_1-6烷基；并且R_7b表示氢、C_1-6烷基或氨基；或R_7a和R_7b与它们连接的氮共同形成哌啶基；

    h)R₈表示C_1-6烷基；且

    i)R₅为氢。

    第七组目标化合物由式(I)化合物组成，其中R₃和R₄均不为氢。

    第八组目标化合物由式(I)化合物组成，其中R₄为氢并且R₃不为氢；尤其是R₃表示氰基、C(＝O)-O-R₆、C(＝O)-NR_7aR_7b或C(＝O)-R₈。

    第九组目标化合物由式(I)化合物组成，其中R₃为氢并且R₄不为氢；尤其是R₄为氰基、羟基或C_1-6烷氧基任选取代的C_1-6烷基、C(＝O)-O-R₆或C(＝O)-NR_7aR_7b。

    第十组目标化合物由式(I)化合物组成，其中当R₄为氢时R₃不为C(＝O)-O-R₆。

    第十一组目标化合物由式(I)化合物组成，其中R₃为氢。

    一组优选化合物由式(I)化合物组成，其中R₁表示氢、C_1-6烷基、C_3-7环烷基、芳基或杂芳基；R₃表示氢、氰基、羟基任选取代的C_1-6烷基、C(＝O)-O-R₆、C(＝O)-NR_7aR_7b、S(＝O)₂-NR_7aR_7b、C(＝O)-R₈；R₄表示氢、氰基、羟基任选取代的C_1-6烷基、C(＝O)-O-R₆、C(＝O)-NR_7aR_7b、S(＝O)₂-NR_7aR_7b、C(＝O)-R₈；R_7a和R_7b各自独立表示氢、C_1-6烷基、氨基、单-或二(C_1-4烷基)氨基、芳基NH-、氨基C_1-6烷基或单-或二(C_1-4烷基)氨基C_1-6烷基；或R_7a和R_7b与它们连接的氮共同形成吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基；R₅表示氢。

    另一组优选化合物由式(I)化合物组成，其中R₂各自独立表示卤素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基或多卤代C_1-6烷基；R₃表示氢、氰基、羟基取代的C_1-6烷基、C(＝O)-O-R₆、C(＝O)-NR_7aR_7b、C(＝S)-NR_7aR_7b或C(＝O)-R₈；R₄表示氢、氰基、羟基或C_1-6烷氧基任选取代的C_1-6烷基、C(＝O)-O-R₆或C(＝O)-NR_7aR_7b；R₃和R₄共同形成式-C(＝O)-NH-NH-C(＝O)-的二价基团；R₆表示氢、C_1-6烷基、羟基C_1-6烷基或单-或二(C_1-4烷基)氨基羰基C_1-6烷基；R_7a和R_7b各自独立表示氢、C_1-6烷基、氨基、C_1-6烷基羰基氨基、氨基羰基氨基、C_1-6烷氧基、-NH-C(O)-H或羟基C_1-6烷基；或R_7a和R_7b与它们连接的氮共同形成吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或C_1-6烷基取代的哌嗪基；R₈表示C_1-6烷基；并且n为1、2或3。

    另一组优选化合物由式(I)化合物组成，其中R₁表示氢、C_1-6烷基、C_3-7环烷基、芳基或杂芳基；R₂各自独立表示卤素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基或多卤代C_1-6烷基；R₃表示氢、氰基、羟基取代的C_1-6烷基、C(＝O)-O-R₆、C(＝O)-NR_7aR_7b或C(＝O)-R₈；R₄表示氢、氰基、羟基任选取代的C_1-6烷基、C(＝O)-O-R₆或C(＝O)-NR_7aR_7b；R₆表示氢、C_1-6烷基、羟基C_1-6烷基或单-或二(C_1-4烷基)氨基羰基C_1-6烷基；R_7a和R_7b各自独立表示氢、C_1-6烷基、氨基；或R_7a和R_7b与它们连接的氮共同形成吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或吗啉基；R₈表示C_1-6烷基；n为1、2或3；R₅表示氢。

    一组更优选化合物由式(I)化合物组成，其中R₁表示氢、C_1-6烷基、环丙基、环己基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基、二(C_1-6烷基)氨基C_1-6烷基、苯基或被两个各自独立选自卤素的取代基取代的苯基；n为1、2和3；R₂各自独立表示卤素或多卤代C_1-6烷基；R₃表示氢、氰基、C(＝O)-O-R₆、C(＝O)-NR_7aR_7b或C(＝O)-R₈；R₄表示氢、氰基、羟基或C_1-6烷氧基任选取代的C_1-6烷基、C(＝O)-O-R₆或C(＝O)-NR_7aR_7b；R₃和R₄共同形成式-C(＝O)-NH-NH-C(＝O)-的二价基团；R₆表示氢、C_1-6烷基或羟基C_1-6烷基；R_7a表示氢或C_1-6烷基；R_7b表示氢、C_1-6烷基、氨基、C_1-6烷基羰基氨基、C_1-6烷氧基或羟基C_1-6烷基；或R_7a和R_7b与它们连接的氮共同形成哌啶基；R₈表示C_1-6烷基；R₅表示氢。

    一组更优选化合物由式(I)化合物组成，其中R₁表示氢、C_1-6烷基、环丙基、环己基、苯基或被两个各自独立选自卤素的取代基取代的苯基；n为1、2和3；R₃表示氢、氰基、C(＝O)-O-R₆、C(＝O)-NR_7aR_7b或C(＝O)-R₈；R₄表示氢、氰基、羟基任选取代的C_1-6烷基、C(＝O)-O-R₆或C(＝O)-NR_7aR_7b；R₆表示氢、C_1-6烷基或羟基C_1-6烷基；R_7a表示氢或C_1-6烷基；并且R_7b表示氢、C_1-6烷基或氨基；或R_7a和R_7b与它们连接的氮共同形成哌啶基；R₈表示C_1-6烷基，R₅表示氢。

    一组还更优选的化合物由式(I)化合物组成，其中R₁表示C_1-6烷基；n为2；R₂各自独立表示卤素；R₃表示C(＝O)-O-R₆；R₆表示C_1-6烷基；R₅表示氢。

    最优选化合物为化合物37、39和46。

    通常，其中R₃不为氢、所述R₃表示为R_3′且R₄为氢、所述化合物表示为式(I-a)的式(I)化合物，可通过在适当的碱例如NaOCH₃或NaOC(CH₃)₃存在下将式(II)的中间体与HC(＝O)-O-CH₃(甲酸甲酯)反应，再在合适溶剂如四氢呋喃中用适当的酸例如盐酸(36％)等以及KSCN处理，来制备这种化合物。

    

    当从立体异构纯的式(II)中间体开始时，上述反应可制备得到立体异构纯的式(I-a)化合物。

    当式(II)中间体中的R_3′表示CN时，所述中间体表示为式(II-a)，上述反应可得到式(I-a-1)和(I-a-2)的化合物，如下所示。

    

    其中R₃和R₄都不为氢，所述R₃和R₄取代基表示为R_3′和R_4′，所述化合物表示为式(I-b)的式(I)化合物，可通过在适当的碱例如NaOCH₃或NaOC(CH₃)₃存在下，将式(II)中间体与式(III)中间体反应，再在合适溶剂如四氢呋喃中用适当的酸例如盐酸(36％)等以及KSCN处理，来制备这种化合物。

    

    上述反应也可以用R_4′-C(＝O)-Cl或R_4′-C(＝O)-O-C(CH₃)₃代替式(III)的中间体来进行。

    当式(II)和(III)的中间体中R₃和R₄表示C(＝O)-O-C_1-6烷基时，所述中间体表示为式(II-b)和(III-b)，以上反应可得到式(I-b-1)和(I-b-2)的化合物，如下所示。

    

    其中R₃为R_3′、所述化合物表示为式(I-c)的式(I)化合物，也可通过在适当的酸如盐酸等存在下，在适当的溶剂如醇(例如乙醇)中，将式(IV)中间体与KSCN反应来制备。

    

    其中R₃和R₄各自为氰基、R₅为氢、所述化合物表示为式(I-b-3)的式(I)化合物，也可通过在适当的碱如N，N-二乙基乙二胺等存在下，在适当的溶剂如二氯甲烷中，将式(V)中间体与Cl-C(＝S)-Cl反应来制备。

    

    其中R_3′表示C(＝O)-NR_7aR_7b、所述化合物表示为式(I-a-3)的式(I-a)化合物，可在适当的溶剂如丙酮、四氢呋喃、N，N-二甲基甲酰胺等中，将其中W₁表示适当离去基团(如卤素，例如氯等)的式(VI)中间体与式(VII)中间体如NH₃(或乙酸铵盐)、吡咯烷等反应来制备。

    

    其中R_4′表示C(＝O)-NR_7aR_7b、所述化合物表示为式(I-b-4)的式(I-b-2)化合物，可在适当的溶剂如丙酮、四氢呋喃、N，N-二甲基甲酰胺等中，将式(XX)中间体与式(VII)中间体如NH₃(或乙酸铵盐)、吡咯烷等反应来制备。

    

    其中R_3＇表示C(＝O)-O-R_6′、其中R₆表示C_1-6烷基或羟基C_1-6烷基、所述化合物表示为式(I-a-4)的式(I-a)化合物，可通过在适当的溶剂如四氢呋喃中，将式(VI)中间体与合适的式HO-R_6′的醇反应来制备。

    

    其中R_4′表示CH₂-OH、所述化合物表示为式(I-b-5)的式(I-b-2)化合物，可通过在适当的溶剂如四氢呋喃中，将式(XX)中间体与适当的还原剂如NaBH₄反应来制备。

    

    其中R₃为氢且R₄为C(＝O)-O-C_1-6烷基、所述化合物表示为式(I-d)的式(I)化合物，可通过在相应醇C_1-6烷基-OH存在下，将其中W₂为适当离去基团如C_1-6烷硫基、C_1-6烷氧基或C₆H₅-CH₂-S-的式(VIII)中间体与作为醇盐的碱(如NaOC_1-6烷基)反应来制备。

    

    式(I)化合物还可通过根据本领域熟知的基团转化反应将式(I)化合物相互转化来制得。

    式(I)的化合物可按本领域熟知的方法将三价氮转化为其N-氧化物形式来转化为相应N-氧化物形式。所述N-氧化反应通常通过将式(I)原料与合适有机或无机过氧化物反应来进行。合适无机过氧化物包括，例如过氧化氢、碱金属或碱土金属过氧化物如过氧化钠、过氧化钾；合适有机过氧化物可包括过氧酸如过苯甲酸或卤代过苯甲酸例如3-氯过苯甲酸、过氧链烷酸如过氧乙酸、烷基过氧化氢如叔丁基-过氧化氢。适当的溶剂有，例如水、低级醇(如乙醇等)、烃(如甲苯)、酮(如2-丁酮)、卤代烃(如二氯甲烷)以及这种溶剂的混合物。

    其中R_3′和/或R_4′表示C(＝O)-O-C_1-6烷基的式(I-a)、(I-b)或(I-d)化合物，可通过与适当还原剂(如LiHBEt₃)在适当的溶剂(如四氢呋喃)存在下反应，被转化其中R_3′和/或R_4′表示CH₂-OH的式(I-a)、(I-b)或(I-d)化合物。

    其中R_3’和/或R_4’表示C(＝O)-O-C_1-6烷基的式(I-a)、(I-b)或(I-d)化合物可通过与适当碱(如NaOH)在适当溶剂(如H₂O、四氢呋喃或合适的醇如甲醇等)存在下反应，转化为其中R_3’和/或R_4’为C(＝O)-OH的式(I-a)、(I-b)或(I-d)化合物。

    其中R_3’和/或R_4’表示C(＝O)-O-C_1-6烷基的式(I-a)、(I-b)或(I-d)化合物可通过与合适的式NHR_7aR_7b的碱在适当溶剂(如H₂O)中反应，转化为其中R_3’和/或R_4’为C(＝O)-NR_7aR_7b的式(I-a)、(I-b)或(I-d)化合物。

    其中R_3’和/或R_4’表示氰基或C(＝O)-O-C_1-6烷基的式(I-a)、(I-b)或(I-d)化合物可通过与NH₄OH反应，转化为其中R_3’和/或R_4’表示氨基羰基的式(I-a)、(I-b)或(I-d)化合物。

    其中R_3’和/或R_4’表示氰基的式(I-a)、(I-b)或(I-d)化合物可通过在适当溶剂(如吡啶)中、N-乙基-N-(1-甲基乙基)-2-丙胺存在下与硫化氢反应，转化为其中R_3’和/或R_4’表示C(＝S)NR_7aR_7b的式(I-a)、(I-b)或(I-d)化合物。

    其中R_3’和/或R_4’表示C(＝O)-NR_7aR_7b的式(I-a)、(I-b)或(I-d)化合物可通过与氯代C_1-6烷基-镁在适当溶剂(如四氢呋喃)中反应，转化为其中R_3’和/或R_4’表示C(＝O)-C_1-6烷基的式(I-a)、(I-b)或(I-d)化合物

    其中R₃和/或R₄表示C(＝O)-C_1-6烷基的式(I-a)、(I-b)或(I-d)化合物可通过与适当还原剂(如NaBH₄)在适当的溶剂(如甲醇)存在下反应，转化为其中R_3’和/或R_4’表示羟基C_1-6烷基的式(I-a)、(I-b)或(I-d)化合物。

    其中R_3’和/或R_4’表示C(＝O)-O-C_1-6烷基的式(I-b)化合物可通过与肼一水合物在适当溶剂(如H₂O)中反应，转化为其中R_3’和/或R_4’共同形成式-C(＝O)-NH-NH-C(＝O)-二价基团的式(I-b)化合物。

    本发明中某些式(I)化合物和某些中间体可包含一个不对称碳原子。所述化合物和中间体的纯立体化学异构形式可利用本领域熟知的方法获得。例如，非立体异构体可用物理方法例如选择性结晶或层析技术来分离，例如，逆流分布、液相色谱等方法。可通过先将外消旋混合物用适当拆分试剂(如手性酸)转化为非对映异构的盐或化合物的混合物；然后通过选择性结晶或层析技术，例如液相色谱等方法物理分离非对映异构的盐或化合物的所述混合物；最后将所述分离后的非对映异构的盐或化合物转化为相应对映异构体，获得对映异构体。倘若中间反应立体特异性进行，纯立体化学异构形式也可从合适中间体和原料的纯立体化学异构形式获得。

    其它分离式(I)化合物和中间体的对映异构体形式的方法包括液相色谱、尤其是利用手性固定相的液相色谱。

    某些中间体和原料为熟知的化合物，并可获得商品或根据本领域已知方法来制备。

    可通过将式(IX)中间体与H-C(＝O)引入试剂(如甲酸或正丁酸)在适当溶剂(例如二甲苯)存在下反应，制备式(II)中间体。

    

    当由式(IX)的立体异构纯中间体起始时，以上反应可得到式(II)的立体异构纯中间体。

    式(IX)中间体可通过将式(X)中间体与其中W₃为适当离去基团(例如卤素如溴等)的式(XI)中间体在适当碱(如N，N-二乙基乙胺或N，N-二异丙基乙胺)存在下、适当溶剂中(如N，N-二甲基甲酰胺)反应制备。

    

    当由式(X)的立体化学纯中间体起始时，以上反应可得到致式(IX)的立体化学纯中间体。

    其中R₅表示氢、本文称为式(X-a)的式(X)中间体可通过在适当还原剂(如H₂)、适当催化剂(如朊内镍)、适当催化剂毒物(如噻吩溶液)以及适当溶剂(例如醇如甲醇)存在下、在适当碱(如NH₃)存在下还原式(XII)的中间体来制备。或者，上述反应也可在Zn和适当酸(如乙酸)存在下进行。

    

    式(XII)的中间体可通过将式(XIII)的中间体与NH₂-OH在适当的碱(如NaOC(＝O)CH₃)存在下、适当的溶剂(例如醇如甲醇)中反应制备。

    

    可代替上述方法的是，式(X)的中间体也可通过在适当溶剂(如四氢呋喃和H₂O)存在下由式(XIV)的叠氮衍生物与三苯基膦的反应制得。

    

    式(X)的中间体也可通过在H₂、适当催化剂(如Pt/C(5％))和适当溶剂(例如醇如甲醇)存在下催化氢化由式(XIV)的中间体来制备。

    式(XIV)的中间体可通过将式(XV)的中间体与磷酰叠氮二苯酯在2，3，4，6，7，8，9，10-八氢嘧啶并[1，2-α]氮杂庚因和适当的溶剂(如甲苯)存在下反应制备。

    

    其中R₁为C_1-6烷基且其中R₅为氢、所述化合物表示为式(XV-a)的式(XV)中间体可通过将其中R₁表示氢、所述中间体表示为式(XIII-

    a)的式(XIII)中间体与(C_1-6烷基)₂Zn、N，N′-1，2-环己烷二基二[1，1，1-三氟]甲磺酰胺、Ti(i-PrO)₄和甲苯反应制备。

    

    式(IV)的中间体可通过将式(X)的中间体与其中W₄表示适当离去基团(例如卤素如氯等)的式(XVI)中间体在适当碱(如N，N-二-乙基乙胺或N，N-二异丙基乙胺)和适当溶剂(如N，N-二甲基甲酰胺或四氢呋喃)存在下反应制备。

    

    式(V)的中间体可通过将式(XVII)的中间体在适当还原剂如NaBH₄和适当溶剂(例如四氢呋喃和醇如乙醇)存在下反应制备。

    

    式(XVII)的中间体可通过将式(XIII)的中间体与2，3-二氨基-2-丁烯二腈在P₂O₅和适当的溶剂存在下反应制备。

    

    其中W₁表示氯、所述中间体表示为式(VI-a)的式(VI)中间体可通过将其中R_3′表示C(＝O)-OH、所述化合物表示为式(I-a-5)的式(I-a)化合物与SOCl₂反应制备。

    

    其中W₁表示氯、所述中间体表示为式(XX-a)的式(XX)中间体可通过将式(I-b-2)化合物与SOCl₂反应制备。

    

    式(VIII)中间体可通过将式(XVIII)中间体与式(XIX)中间体在适当的溶剂(如甲苯)存在下反应制备。

    

    式(XVIII)中间体可通过将式(X)中间体与1，1-二甲氧基-N，N-二甲基甲胺反应制备。

    

    式(I)化合物显示出CCR2受体拮抗特性。

    该C-C趋化因子受体2(CCR2)及其配体单核细胞趋化蛋白(MCP-1；在新趋化因子命名法中也称作CCL2)被识别为涉及急性和慢性炎症过程。

    趋化因子(“趋化性细胞因子”的缩写)是白细胞运输最重要的调节剂。通过相互作用于靶细胞上与异二聚G蛋白偶联的七-跨膜-域受体，产生此生物作用。依据氨基端附近两个保守半胱氨酸残基(表示为C)之间的氨基酸(表示为X)的存在，趋化因子主要被分为2个家族(C-C或C-X-C家族)。通常，来自C-C家族的趋化因子吸引单核细胞、巨噬细胞、T细胞和NK细胞。

    一种通过CCR2受体发挥作用的趋化因子为上述MCP-1。因此，该CCR2受体也称为趋化蛋白-1受体。MCP-2和MCP-3也可，至少是部分，通过该受体发挥作用。

    人们认识到CCR2受体和MCP-1在各种炎性疾病的病理生理学中起作用。因此，阻断CCR2受体的CCR2受体拮抗剂具有用作药物的潜力，来对抗炎性疾病如关节炎、骨关节炎、类风湿性关节炎、肾小球肾炎、肺纤维化、结节病、脉管炎、肝炎、脑部炎性疾病如阿尔兹海默症、再狭窄、肺泡炎、哮喘、动脉粥样硬化、牛皮癣、皮肤迟发型超敏反应、炎症性肠病、多发性硬化、慢性阻塞性肺病(COPD)、葡萄膜炎。CCR2受体拮抗剂可用于治疗自体免疫疾病如糖尿病或移植排斥、中风、再灌注损伤、缺血和心肌梗死等。

    本发明的化合物也可用于抑制人类免疫缺陷病毒(HIV)进入单核细胞和淋巴细胞，因此在AIDS(获得性免疫缺陷综合症)的治疗中具有治疗作用。

    CCR2受体以两种异构型存在，即CCR2A和CCR2B受体。

    由于其CCR2受体拮抗活性，尤其是其CCR2B受体拮抗活性，式(I)化合物、其N-氧化物、药物可接受加成盐、季胺和立体化学异构形式可用于治疗或预防CCR2受体、尤其是CCR2B受体活化介导的疾病和症状。涉及CCR2受体活化的疾病和症状包括关节炎、骨关节炎、类风湿性关节炎、肾小球肾炎、肺纤维化、结节病、脉管炎、肝炎、脑部炎性疾病如阿尔兹海默症、再狭窄、肺泡炎、哮喘、动脉粥样硬化、牛皮癣、皮肤迟发型超敏反应、炎症性肠病、多发性硬化、慢性阻塞性肺病(COPD)、葡萄膜炎、自体免疫疾病(糖尿病、移植排斥)、中风、再灌注损伤、缺血、心肌梗死等。具体的说，式(I)化合物可用于炎性疾病和自体免疫疾病的治疗或预防，尤其是类风湿性关节炎、动脉粥样硬化、多发性硬化、炎症性肠病和慢性阻塞性肺病(COPD)。

    考虑到上述药理学性质，式(I)化合物、其N-氧化物、药物可接受加成盐、季胺和立体化学异构形式可用作药物。具体的说，本发明化合物可用于制备治疗或预防CCR2受体、尤其是CCR2B受体活化介导疾病的药物。更具体的说，本发明的化合物可用于制备治疗或预防炎性疾病，尤其是类风湿性关节炎、动脉粥样硬化、多发性硬化、炎症性肠病和慢性阻塞性肺病(COPD)的药物。

    考虑到式(I)化合物的用途，提供了治疗或预防温血动物(包括人类)遭受CCR2受体尤其是CCR2B受体活化介导疾病的方法。所述方法包括给予温血动物(包括人类)有效量的式(I)化合物、其N-氧化物形式、药物可接受加成盐、季胺或可能的立体化学异构形式。

    本发明式(I)化合物阻断CCR2受体，抑制了MCP-1的正常机能。因此，本化合物也可描述为MCP-1抑制剂，因此可以用于预防或治疗由MCP-1介导的疾病。

    本发明还提供了预防或治疗CCR2受体、尤其是CCR2B受体活化介导疾病的组合物。所述组合物包含治疗有效量的式(I)化合物和药物可接受载体或稀释剂。

    为了给药，本发明的化合物被配制为各种药物形式。合适组合物可指所有常用于系统性给药的组合物。为制备本发明的药物组合物，有效量的具体化合物、任选以加成盐形式作为活性成分与药物可接受的载体组合为紧密的混合物，该载体根据给药所需的制剂形式可采用各种形式。这种药物组合物期望是单剂量形式，尤其适合口服、直肠、经皮或通过胃肠外注射给药。例如，在制备口服给药形式的组合物时，可使用任何常用的药物介质，例如对于口服液体制剂如悬浮剂、糖浆剂、酏剂、乳剂和溶液剂等为水、乙二醇、油、醇等；或者对于散剂、丸剂、胶囊剂和片剂为固体载体如淀粉、糖、高岭土、稀释剂、滑润剂、粘合剂、崩解剂等。由于易服用，片剂和胶囊剂表示最利于口服的剂量单位形式，在该情况中显然使用固体药物载体。对于胃肠外组合物，载体常包含无菌水，至少是大部分，但是也可包含其他成分，如助溶剂。可制备可注射溶液，例如，其中载体包括盐溶液、葡萄糖溶液或盐和葡萄糖的混和溶液。可制备可注射悬浮剂，其中可使用合适的液体载体、悬浮剂等。还包括固体形式的制剂，其在临用前能转化成液体形式制剂。在适合经皮给药的组合物中，载体任选包含渗透促进剂和/或适当润湿剂，任选与少量任何性质的适当添加剂组合，且该添加剂不对皮肤带来明显有害作用。所述添加剂可利于对皮肤给药和/或有助于所需组合物的制备。这些组合物可以各种方式给药，如透皮贴剂、喷滴剂(spot-on)、软膏剂等。

    本发明的化合物也可通过本领域用于吸入或吹入的制剂和方法，通过这种途径给药。因此，通常本发明的化合物可以以溶液、悬浮液或干粉形式给药至肺中。任何开发为通过口或鼻腔吸入或吹入来传递溶液、悬浮液或干粉的系统都适合本发明化合物的给药。

    本发明的化合物也可以滴剂、尤其是滴眼剂形式局部给药。所述滴眼剂可以为溶液或悬浮液形式。任何开发作为滴眼液来传递溶液或悬浮液的系统都适用于本发明化合物的给药。

    将前述药物组合物配制为单位剂量形式特别有利，利于给药和剂量的一致性。本文使用的单位剂量形式将适合的物理不连续单位称为单位剂量，每个单位包含预定量的活性成分和所需药物载体的组合，该活性成分计算为可产生所需疗效。这种单位剂型的实例为片剂(包括刻痕片或包衣片)、胶囊剂、丸剂、散剂包、糯米纸囊剂、栓剂、可注射溶液剂或悬浮剂等，以及其独立倍数。

    给药的准确剂量和频率依赖于所使用的具体式(I)化合物、治疗的具体疾病、治疗疾病的严重程度、年龄、体重、性别、紊乱程度和该具体患者全面的身体状况，以及该个体摄取的其他药物，如本领域技术人员所熟知的。此外，显然所述有效每日用量可根据治疗主体的反应和/或处方本发明化合物的医师的评估减少或增加。

    式(I)化合物也可与其他常规抗炎或免疫抑制药联合使用，例如类固醇、环加氧酶-2抑制剂、非甾体抗炎药、TNF-α抗体，例如乙酰水杨酸、丁苯羟酸、双氯芬酸钾、舒林酸、双氯芬酸钠、酮咯酸氨丁三醇、托美丁、布洛芬、萘普生、萘普生钠片、噻洛芬酸、氟比洛芬、甲芬那酸、尼氟酸、甲氯芬那酸、吲哚美辛、丙谷美辛、酮洛芬、萘丁美酮、对乙酰氨基酚、吡罗昔康、替诺昔康、尼美舒利、fenylbutazon、曲马多、丙酸倍氯米松、倍他米松、倍氯米松、布地奈德、氟替卡松、莫米松、地塞米松、氢化可的松、甲泼尼松龙、泼尼松龙、泼尼松、曲安西龙、塞来考昔、罗非考昔、伐地考昔、英夫利昔单抗、来氟米特、依那西普、CPH 82、甲氨蝶呤、柳胺磺吡啶、抗淋巴细胞免疫球蛋白、抗胸腺细胞免疫球蛋白、硫唑嘌呤、环孢菌素、他克莫司物质、子囊霉素、雷帕霉素、莫罗单抗-CD3等。

    因此，本发明也涉及式(I)化合物与其它抗炎或免疫抑制剂的组合。所述组合可用做药物。本发明也涉及包含(a)式(I)化合物以及(b)其它抗炎或免疫抑制化合物的产品，作为组合制剂同时、单独或依次用于治疗CCR2受体、尤其是CCR2B受体活化介导的疾病。这种产品中不同的药物可与药物可接受载体组合在单一制剂中。或者，这种产品可包含，例如，药盒包括装有含式(I)化合物的适当组合物的容器，以及装有含其它抗炎或免疫抑制化合物的组合物的容器。这种产品有利于医师基于对待治疗患者的诊断来选择每种组分的合适量及其给药顺序和时间。

    下列实施例将举例说明本发明。

     实验部分

    下文中，“DIPE”定义为二异丙基醚，“DMA”定义为N，N-二甲基乙酰胺，“DMF”定义为N，N-二甲基甲酰胺，“THF”定义为四氢呋喃，“SOCl₂”指亚硫酰氯，“EtOH”指乙醇，“EtOAc”指乙酸乙酯，“Et₂O”指二乙醚，“Ti(iPrO)₄”指四(异丙氧基)钛，“P(Ph)₃”指三苯基膦，“Et₃N”指三乙胺。

     A.中间体的制备

     实施例A1

     a.中间体1的制备

    

    甲醇(200ml)中的1-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]-1-丙酮(0.0441mol)在冰浴上搅拌。加入NaOAc(0.0883mol)，再加入盐酸羟胺(0.0574mol)。0℃下搅拌反应混合物90分钟，室温下搅拌18小时。蒸干溶剂，残留物在CH₂Cl₂中搅拌后用10％的NaHCO₃水溶液洗涤。分离有机相，干燥(MgSO₄)，过滤并蒸干溶剂，然后用甲苯(2x)共同蒸干。产出：中间体1。

     b.中间体2的制备

    

    14℃时，在噻吩溶液(1ml)存在下，中间体1(0.044mol)在CH₃OH/NH₃(7N)(250ml)溶液中以阮内镍为催化剂(催化量)氢化。吸收H₂(2当量，气体)后，过滤催化剂并用CH₃OH洗涤。蒸干滤液，然后用甲苯共同蒸干2次。将残留物溶解于2-丙醇(75ml)中，用HCl/2-丙醇(25ml，6N)将其转化为氢氯酸盐(1∶1)。蒸干溶剂，将沉淀物(盐)在DIPE(100ml)中搅拌，过滤，洗涤，然后干燥(真空，50℃)。产量：9.67g中间产物2(85.3％)。

     c.中间体3的制备

    

    在N₂流下搅拌中间体2(0.373mol)和2-溴乙酸甲酯(0.045mol)的DMF(p.a.已在分子筛中干燥)溶液(100ml)，然后加入Et₃N(0.112mol)，将反应混合物在室温下搅拌20小时。再加入2-溴乙酸甲酯(1.25ml)将混合物在室温下搅拌68小时。滤出所得沉淀并用DMF洗涤。过滤沉淀物/DMF混合物并用Et₂O(600ml)处理，再用H₂O洗涤(3次300ml)。分离有机相，干燥(MgSO₄)，过滤并蒸干溶剂，然后用甲苯(2x)共同蒸干。产量：10.94g中间体3。

     d.中间体4的制备

    

    中间体3(0.0372mol)的甲酸(3.75ml)溶液和p.a.二甲苯(110ml)搅拌并回流6小时，然后将反应混合物搅拌过夜，用2次H₂O、饱和NaHCO₃溶液以及盐水洗涤。分离有机相，干燥(MgSO₄)，过滤并蒸干溶剂。产量：11.3g中间体4。

     实施例A2

     a.中间体5的制备

    

    室温下环丙基(3，4-二氯苯基)甲酮肟(0.16mol)和锌(75g)在乙酸(750ml)中的混合物搅拌18小时，然后经celite过滤并蒸干滤液。残留物在H₂O中搅拌溶解，然后溶液用Na₂CO₃处理并用CH₂Cl₂提取。分离有机相，干燥，过滤并蒸干溶剂。将残留物溶解于2-丙醇并用HCl/2-丙醇将其转化为氢氯酸盐(1∶1)。滤除沉淀物，用DIPE洗涤后干燥。产量：26.8g中间体5。

     b.中间体6和7的制备。

    

    中间体6                    中间体7

    室温下(3，4-二氯苯基)苯基甲酮肟(0.132mol)和锌(70g)在乙酸(700ml)中的混合物搅拌18小时，然后反应混合物经decalite过滤后(除去锌)蒸干滤液。将残留物溶解于H₂O(±150ml)转化为乙酸盐(1∶1)。滤出沉淀物并干燥。产量：31g中间体6。用Na₂CO₃处理滤液并用CH₂Cl₂提取。分离有机相，干燥，过滤并蒸干溶剂。将残留物溶解于2-丙醇并用HCl/2-丙醇将其转化为氢氯酸盐(1∶1)。滤出沉淀物并干燥。产量：5g中间体7。

     实施例A3

     中间体8的制备

    

    室温下3，4-二氯-α-乙基苯甲胺(0.0098mol)和2-氯-3-氧代-丁酸甲酯(0.0166mol)的在Et₃N(5ml)中的混合物在DMF(50ml)中搅拌18小时，然后将反应混合物倒入H₂O(200ml)中，用二乙醚(150ml)提取。用H₂O(200ml)洗涤醚相3次，干燥(MgSO₄)，过滤并蒸干溶剂。产出：中间体8。

     实施例A4

     a.中间体9的制备

    

    N，N′-1，2-环己烷二基二[1，1，1-三氟甲磺酰氨](1R-反式)(0.189g)和Ti(iPrO)₄(0.030mol)在甲苯中的混合物进行脱气、置于氩气流下，然后在40℃下搅拌20分钟。将混合物冷却至-78℃后滴加Et₂Zn(0.03mol)。20分钟后，滴加甲苯中的3，4-二氯苯甲醛(0.0250mol)，同时使反应混合物升温至0℃。室温下搅拌该混合物过夜，然后用2NHCl猝灭。用CH₂Cl₂对此混合物提取。洗涤分离后的有机相，干燥，过滤并蒸干溶剂。产量：5.1g中间产物9(S-异构体)。

     b.中间体10的制备

    

    0℃下搅拌中间体9(0.025mol)和磷酰叠氮二苯酯(0.030mol)在甲苯中的混合物(50ml)。加入2，3，4，6，7，8，9，10-八氢嘧啶并[1，2-α]氮杂庚因(0.030mol)，0℃下搅拌反应混合物2小时，然后在室温下搅拌过夜。用水和甲苯稀释反应混合物。分离有机相，用水洗涤一次，用5％的盐酸洗涤一次，蒸干溶剂。产出：中间体10(R-异构体)。

     c.中间体11的制备

    

    室温下中间体10(0.025mol)、P(Ph)₃(0.027mol)在THF(70ml)和水中的混合物搅拌过夜。蒸干溶剂。用10％的盐酸处理残留物。用DIPE洗涤酸相，然后碱化，再用CH₂Cl₂进行提取。干燥分离后的有机相，过滤并蒸干溶剂。残留物经硅胶柱层析纯化。收集产物级分并蒸干溶剂。产量：1.1g中间体11(R-异构体)。

     d.中间体12的制备

    

    冰浴条件下搅拌中间体11(0.0116mol)的Et₃N(0.013mol)和p.a.DMF溶液(20ml)。滴加氯乙腈(0.0128mol)的p.a.DMF溶液(2.5ml)。室温下搅拌反应混合物6小时。再在68小时内加三份氯乙腈直到反应完全。滤出沉淀物。将滤液倒入Et₂O(200ml)，并用H₂O/NaHCO₃(10％；100ml)和H₂O(2x)洗涤。干燥(MgSO₄)分离后的有机相，过滤并蒸干溶剂，用甲苯共同蒸干。剩余物经硅胶柱层析纯化(洗脱液：CH₂Cl₂/MeOH 99∶1)。收集所需级分并蒸干溶剂，用甲苯共同蒸干。产量：2.3g中间体12(81.6％)。

     e.中间体13的制备

    

    中间体12(0.0946mol)和甲酸正丁酯(15ml)搅拌并回流4天。蒸干滤液，然后用甲苯共同蒸干。产量：2.68g中间体13。

     实施例A5

     中间体14的制备

    

    用SOCl₂(20ml)对化合物22(根据B14制备)(0.0107mol)进行处理，并在60℃下搅拌反应混合物2小时。蒸干多余的SOCl₂，然后用甲苯(2×30ml)对残留物共同蒸干2次。产出：中间体14。

     实施例A6

     a.中间体15的制备

    

    N₂气氛下，1-(3，4-二氯苯基)乙酮(0.0278mol)和2，3-二氨基-2-丁烯二腈(0.0278mol)的混合物在EtOH(75ml)中搅拌，然后分次加入P₂O₅(磷酐)(0.0106mol)，将反应混合物搅拌2小时后静置过夜。滤出所得沉淀，用EtOH、DIPE和H₂O洗涤，然后干燥。产量：2.85g中间体15(36.7％)

     b.中间体16的制备

    

    将NaBH₄(0.013mol)分次加入中间体15(0.01mol)的CH₃OH(30ml)和p.a.THF(40ml)的溶液中，然后搅拌反应混合物2小时。用H₂O(275ml)稀释混合物并用CH₂Cl₂提取。分离有机相，干燥(MgSO₄)，过滤并蒸干溶剂。将残留物在CH₂Cl₂/CH₃OH(99.5/0.5)中搅拌，然后滤出沉淀，用CH₂Cl₂、DIPE洗涤后干燥(真空，45℃)。

    产量：0.86g中间体16。

     实施例A7

     a.中间体17的制备

    

    将3，4-二氯-α-乙基苯甲胺(0.04mol)与1，1-二甲氧基-N，N-二甲基甲胺(80ml)的混合物搅拌回流3小时，然后蒸干溶剂并用甲苯共同蒸干2次。产量：中间体17。

     b.中间体18的制备

    

    60℃时中间体17(0.035mol)和2-[(苯甲基)硫基]-5(4H)-噻唑酮(0.035mol)的甲苯溶液p.a.(200ml)搅拌2.5小时后，室温下搅拌过夜，再于60℃下搅拌2小时。蒸干溶剂后将残留物经硅胶(洗脱液：CH₂Cl₂/己烷50/50)过滤纯化。收集产物级分并蒸干溶剂，然后用CH₃OH共同蒸干。产量：5.9g中间体18。

     实施例A8

     a.中间体19的制备

    

    室温下将中间体11(根据A4.c制备)(0.0054mol)、溴-乙酸甲酯(0.0055mol)和Et₃N(0.006mol)在DMF(q.s.)中的混合物搅拌过夜，然后倒入水中。用CH₂Cl₂对此混合物提取。干燥分离后的有机相，过滤并蒸干溶剂。产量：1.3g中间体19(R-异构体)。

     b.中间体20的制备

    

    将中间体19(0.0054mol)在甲酸(3ml)和二甲苯(50ml)中的混合物搅拌并回流20小时。将反应混合物冷却，用水洗涤，干燥，过滤并蒸干溶剂。产量：1.3g中间体20(R-异构体)。

     实施例A9

     a.中间体21的制备

    

    将Na₂CO₃(0.52mol的一部分)的水溶液(150ml)加入搅拌的1-(3，4-二氯苯基)-1-丙酮(0.345mol)在乙醇p.a.(150ml)中的混合物，然后在剧烈搅拌的同时分次加入Na₂CO₃的剩余部分和盐酸羟胺(0.345mol)。将反应混合物加热至回流温度并再加入水(75ml)(提高无机物的溶解度)，然后搅拌所得混合物并回流6小时。再加入盐酸羟胺(2.4g)并将混合物再回流18小时。再加入盐酸羟胺(3g)；将反应混合物回流24小时并在室温下搅拌2天。滤出固体，用乙醇/水(1/1)洗涤并在56℃干燥(真空，空气流)。产量：71.8g(95.4％)中间体21。

     b.中间体22的制备

    

    14℃时，在噻吩溶液(6ml)存在下，中间体21(0.3mol)在CH₃OH/NH₃7N(500ml)中的混合物以阮内镍为催化剂进行氢化。吸收H₂(2当量)后，滤出催化剂并蒸干溶剂，然后用甲苯共同蒸干2次。将残留物在沸腾的2-丙醇(250ml)中搅拌并趁热过滤混合物。使滤液降至室温，在剧烈搅拌的同时缓慢加入HCl/2-丙醇(6N，150ml)。蒸干溶剂，将残留物在DIPE中搅拌，然后滤出、洗涤并在60℃下干燥(真空)。产量：53g(73.4％)中间体22，分离为氢氯酸盐。

     c.中间体23的制备

    

    在N₂、室温下搅拌中间体22(0.0748mol)和氯乙酸甲酯(0.08mol)的DMF溶液(p.a.，在分子筛(150ml)上干燥)，缓慢加入Et₃N(0.224mol)，然后在室温下搅拌20小时，并再加入氯乙酸甲酯(3.3ml)。室温下再搅拌20小时，并再次加入氯乙酸甲酯(2ml)。将所得的混合物搅拌24小时后滤出固体，用DMF洗涤。加入Et₂O(800ml)并用水(500ml)洗涤3次。分离有机相，干燥(MgSO₄)，过滤并蒸干溶剂，然后用甲苯共同蒸干。经硅胶(洗脱液：CH₂Cl₂/CH₃OH 99/1)滤出残留油状物(23.4g)。收集产物级分并蒸干溶剂，最后用甲苯共同蒸干。产量：20.6g(99.7％)中间体23。

     d.中间体24的制备

    

    将甲酸(7.5ml)和中间体23(0.0746mol)的二甲苯p.a.(225ml)溶液(双相)搅拌并回流4小时，然后使反应混合物降至室温。用水(2×200ml)、饱和NaHCO₃溶液(200ml)和饱和NaCl(200ml)溶液洗涤2次，然后干燥(MgSO₄)分离出的有机相并过滤。最后，蒸干溶剂。产量：21.3g(93.9％)的中间体24。

     实施例A10

     a.中间体25的制备

    

    将N，N’-(1S，2S)-1，2-环己烷二基二[1，1，1-三氟甲磺酰胺(0.060g)和Ti(iPrO)₄(8.5g)在甲苯中的混合物脱气，置于氩气流中，然后在40℃时搅拌20分钟。将混合物冷却至-78℃，并且滴加二乙基锌(q.s.)。20分钟后，滴加3，4-二氯-苯甲醛(0.025mol)的甲苯溶液(q.s.)并使反应混合物升温至0℃，然后在室温下搅拌过夜，用2NHCl猝灭再用CH₂Cl₂提取。洗涤分离后的有机相，干燥，过滤并蒸干溶剂。残留物经硅胶柱层析纯化(洗脱液：CH₂Cl₂/CH₃OH 98/2)。收集产物级分并蒸干溶剂。产量：5g中间体25(R)。

     b.中间体26的制备

    

    将中间体25(0.127mol)和磷酰叠氮二苯酯(0.153mol)在甲苯中(q.s.)的混合物在0℃下搅拌。滴加2，3，4，6，7，8，9，10-八氢嘧啶并[1，2-a]氮杂庚因(0.153mol)，并且在0℃时搅拌1小时，然后在室温下搅拌2小时，在50℃时搅拌3小时。将反应混合物冷却，用水、0.5M HCl、水洗涤，干燥，过滤并蒸干溶剂。残留物通过硅胶快速柱层析纯化(洗脱液：CH₂Cl₂/CH₃OH 99.5/0.5)。收集产物级分并蒸干溶剂。产量：23.5g中间体26，S-(-)。

     c.中间体27的制备

    

    50℃时中间体26(0.122mol)在甲醇(q.s.)中的混合物以Pt/C 5％(5g)为催化剂进行氢化。吸收H₂后，滤出催化剂并蒸干溶剂。产出：中间体27。

     d.中间体28的制备

    

    室温下将中间体27(0.050mol)、溴乙酸甲酯(0.060mol)和Et₃N(15ml)在DMF(100ml)中的混合物搅拌过夜。再加入溴乙酸甲酯，并在室温下搅拌过夜，然后倒入水中。用CH₂Cl₂对此混合物提取。干燥分离后的有机相，过滤并蒸干溶剂。产量：12g中间体28。

     e.中间体29的制备

    

    将中间体28(0.05mol)在甲酸(100ml)和二甲苯(150ml)中的混合物搅拌并回流48小时。反应混合物冷却后倒入水中，然后用甲苯提取。用水洗涤分离后的有机相，用NaHCO₃处理，干燥，过滤并蒸干溶剂。产量：13.2g中间体29。

     实施例A11

     a.中间体30的制备

    

    室温下，3，4-二氯-α，α-二甲基-苯甲胺(0.032mol)在溴乙酸甲酯(6ml)中的混合物、DMF(50ml)和Et₃N(15ml)反应过夜，在部分转化后将反应混合物加热至45℃保持6小时。将混合物过滤，用CH₂Cl₂稀释并用水洗涤5次，然后干燥并蒸发溶剂。产出：中间体30。

     b.中间体31的制备

    

    中间体30(残留物)在甲酸(50ml)和二甲苯(50ml)中的混和物搅拌并回流18小时，然后将反应混合物冷却，并在水和二甲苯之间分配。分离有机相，干燥(MgSO₄)，过滤并蒸干溶剂。残留物经硅胶柱层析纯化(洗脱液：CH₂Cl₂/CH₃OH 95/5)。收集产物级分并蒸干溶剂。不纯残留物通过高效液相色谱纯化。收集纯产物级分并蒸干溶剂。产量：2.1g中间体31。

     B.式(I)最终化合物的制备

     实施例B1

     a.化合物1的制备

    

    N₂下，将中间体4(根据A1.d制备)(0.0177mol)、甲酸甲酯(0.05mol)和THF(p.a.，在分子筛中干燥)(30ml)的溶粮库液进行搅拌，然后加入NaOMe(原位制备，见下列注解)(0.0185mol)并在室温下搅拌20小时。蒸干溶剂，将残留物在H₂O(40ml)中搅拌并用Et₂O洗涤2次。然后依次将MeOH(35ml)和HCl(36％，p.a.)(4.2ml)加入分离的水相。加入KSCN(0.03mol)，在50°时对所得溶液搅拌6小时，然后在室温下搅拌20小时，在80°时搅拌3小时，最后在室温下搅拌过夜。滤出所得沉淀，用CH₃OH/H₂O(1/2)洗涤并干燥(真空，60℃)。产量：4.25g化合物1。

    注解：NaOMe是通过NaH(0.74g，矿物油中60％)和MeOH(0.74ml)在THF(15ml；p.a.，无水)中原位生成的。

     b.化合物2的制备

    

    室温下搅拌(根据A1.d制备)(0.02mol)和甲酸甲酯(0.06mol)在THF(100ml)中的混合物，然后加入2-甲基-2-丙醇钠盐(0.025mol)，室温下搅拌3小时。蒸干溶剂，将残留物在H₂O(±100ml)中搅拌15分钟并用Et₂O洗涤。分离水相，然后加入HCl(浓)(0.06mol)。加入CH₃OH(±100ml)，再加入KSCN(0.03mol)，60℃时将反应混合物搅拌18小时。室温下将混合物搅拌2小时，然后在己烷中搅拌。滤出沉淀物并干燥。产量：6.4g化合物2。

     实施例B2

     a.化合物3的制备

    

    将中间体4(根据A1.d制备)(0.0174mol)、乙二酸二甲酯(0.03mol)和THF(p.a.，在分子筛中干燥)(30ml)溶液进行搅拌，然后加入NaOMe(原位制备；见下列注解)(0.0185mol)，室温下将反应混合物搅拌18小时。蒸干溶剂，将残留物在H₂O(50ml)中搅拌并用Et₂O洗涤2次。然后依次将MeOH(35ml)和HCl(36％，p.a.)(4.2ml)加入分离水相。加入KSCN(0.03mol)，所得溶液在50℃时搅拌18小时。使该混合物降至室温，再加入H₂O，用CH₂Cl₂对混合物提取。分离有机相，干燥(MgSO₄)，过滤并蒸干溶剂。残留物经硅胶柱层析纯化(洗脱液：CH₂Cl₂/CH₃OH 98.5/1.5)。收集纯净产物级分并蒸干溶剂。残留物在Flash Tubes上经快速柱层析进一步纯化(洗脱液：CH₂Cl₂/THF 95/5)。收集产物级分并蒸干溶剂，然后滤出残留物并干燥。产量：0.0186g化合物3。

    注解：NaOMe是通过NaH(0.74g，矿物油中60％)和MeOH(0.74ml)在THF(15ml；p.a.，无水)中原位生成的。

     b.化合物4的制备

    

    室温下，搅拌式(根据A1.d制备)(0.02mol)和乙二酸二甲酯(0.04mol)在THF(100ml)中的混合物，然后一次性加入2-甲基-2-丙醇钠盐(0.025mol)，60℃时搅拌18小时。60℃时再分次加入2-甲基-2-丙醇钠盐(0.025mol)，将反应混合物在60℃下搅拌过夜。60℃时再次加入2-甲基-2-丙醇钠盐(0.005mol)，60℃下再将混合物搅拌3小时。蒸干溶剂，将残留物在水中搅拌后用Et₂O洗涤。分离水相，然后加入HCl(浓)(5mol)。沉淀固体，并加入CH₃OH(直到溶液澄清)，然后加入KSCN(0.03mol)，60℃时将反应混合物搅拌20小时。蒸干有机溶剂(CH₃OH)，用CH₂Cl₂对水浓缩液进行提取。分离有机相，干燥，过滤并蒸干溶剂。残留物经硅胶柱层析纯化(洗脱液：CH₂Cl₂/CH₃OH 98/2)。收集产物级分并蒸干溶剂。将残留物从DIPE中结晶，滤出并干燥。产量：2g化合物4。

     c.化合物5的制备

    

    将中间体13(根据A4.e制备)(0.0136mol)加入NaH(60％)(0.6g)在THF(50ml)中的混合物中，然后加入乙二酸二甲酯(0.0152mol)，室温下将反应混合物搅拌5小时。将混合物倒入H₂O中，用CH₂Cl₂对水相提取。分离有机相并酸化，用CH₂Cl₂提取水相。过滤有机相并蒸干溶剂。用CH₃OH(20ml)、H₂O(20ml)和HCl(5ml，1N)对残留物进行处理。加入KSCN(1g)在H₂O(10ml)中的混合物，60℃时搅拌反应混合物18小时。滤出所得沉淀，经硅胶柱层析纯化(洗脱液：CH₂Cl₂/CH₃OH 90/10)。收集产物级分并蒸干溶剂。产量：0.700g化合物5。

    d.化合物37和68的制备

    

    化合物37                       化合物68

    N₂下将(0.0618mol)和乙二酸二甲酯(0.11mol)在THF(p.a.，在分子筛中干燥)(100ml)中的混合物进行搅拌，然后加入2-甲基-2-丙醇钠盐(0.066mol)，室温下将反应混合物搅拌18小时后再搅拌24小时。最后60℃时搅拌4小时。再加入2-甲基-2-丙醇钠盐(4g)和乙二酸二甲酯(6g)，并在室温下搅拌反应混合物经过周末。蒸干溶剂，将残留物溶解于H₂O(250ml)中并用Et₂O洗涤2次。分离水相并加入CH₃OH(200ml)、KSCN(10g)和HCl(36％，p.a.)(q.s.)，然后在60℃时搅拌18个小时。蒸干部分溶剂，用CH₂Cl₂对浓缩液进行提取。分离有机相，干燥(MgSO₄)，过滤并蒸干溶剂。残留物(5g)经硅胶过滤纯化(洗脱液：CH₂Cl₂/CH₃OH 99/1)。收集产物级分并蒸干溶剂。在己烷中对残留物进行研磨，过滤，洗涤，然后干燥(真空，50℃)。产量：5.2g化合物37。合并包含副产物的级分，同时蒸干溶剂，然后用己烷/DIPE进行共同蒸干。将残留物于Et₂O/己烷中搅拌，滤出所得沉淀，用己烷洗涤，然后干燥(真空，50℃)。产量：0.28g化合物68。

     实施例B3

     化合物6的制备

    

    80℃时将中间体8(根据A3制备)(0.0079mol)和KSCN(0.031mol)在HCl(1N)(5ml)中的混合物在EtOH(50ml)中搅拌4小时。将反应混合物倒入H₂O中并用CH₂Cl₂提取。分离有机相，干燥(MgSO₄)，过滤并蒸干溶剂。残留物经反相色谱纯化。收集该产物级分并蒸发溶剂至少于最初体积的50％。用CH₂Cl₂提取残留物，然后分离有机相，干燥，过滤并蒸干溶剂。产量：0.3g化合物6。

     实施例B4

     化合物7和8的制备

    

    化合物7                    化合物8

    N₂下对中间体13(根据A4.e制备)(0.0094mol)，甲酸甲酯(0.027mol)和THF(p.a.，在分子筛中干燥)(15ml)的溶液进行搅拌。加入NaOMe(原位制备；见注解)(0.01mol)并在室温下搅拌20小时。蒸干溶剂。将残留物溶于H₂O(20ml)并用Et₂O(2x20ml)洗涤。将MeOH(15ml)加入分离后的水相。加入HCl(36％，p.a.)(2.25ml)。加入KSCN(1.52g)且在50℃时搅拌反应混合物5小时，在室温下搅拌16小时且回流5小时。然后使其冷却至室温。倾去液相。将油相溶于CH₂Cl₂/MeOH(95∶5)且用H₂O洗涤。干燥(MgSO₄)分离后的有机相，过滤并蒸干溶剂。残留物经硅胶快速柱层析纯化(洗脱液：CH₂Cl₂/MeOH梯度)。收集所需级分并蒸干溶剂。产出级分1：0.065g化合物7和产出级分2：0.063g化合物8。

    注解：NaOMe是通过NaH(0.4g，矿物油中60％)和MeOH(0.4ml)在THF(10ml；p.a.无水)中原位生成的

     实施例B5

     a.化合物9的制备

    

    室温下将中间体14(根据A5制备)(0.00158mol)和乙酸铵盐(0.00649mol)的混合物在丙酮(q.s.)中搅拌2小时，然后蒸干溶剂。残留物经反相色谱纯化。收集该产物级分并蒸发水相至少于最初体积的50％。用CH₂Cl₂提取所得浓缩液，然后分离有机相，干燥(MgSO₄)，过滤并蒸干溶剂。产量：0.27g化合物9

     b.化合物10的制备

    

    将3-[1-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)丙基]-2-巯基-3H-咪唑-4-甲酰氯(根据A5制备)(0.0003mol)的THF溶液(p.a.，在分子筛中干燥)(1ml)一次性加入到搅拌的NH₃(1ml)溶液中，搅拌过夜。加入H₂O且用CH₂Cl₂提取混合物。分离有机相，然后蒸干。将残留物溶于丙酮(5ml)且用SO₂气流处理15分钟。蒸干溶剂，残留物经反相高效液相色谱纯化。收集产物级分并蒸干溶剂。加入CH₂Cl₂(6ml)和K₂CO₃水溶液(1ml，10％)，然后搅拌5分钟，经过ISOLUTE HM-N筒过滤。蒸干滤液。产量：0.0289g化合物10。

     实施例B6

     化合物11的制备

    

    室温下中间体14(根据A5制备)(0.00126mol)在吡咯烷中的混合物(0.00599mol)在DMF(q.s.)中搅拌4小时。蒸干溶剂且残留物在丙酮(50ml)中搅拌，然后用SO₂处理10分钟。蒸干丙酮且将浓缩液经反相色谱纯化。收集该产物级分并蒸发溶剂至少于最初体积的50％。用CH₂Cl₂提取所得浓缩液，然后分离有机相，干燥(MgSO₄)，过滤并蒸干溶剂。产量：0.180g化合物11。

     实施例B7

     a.化合物12的制备

    

    将3-[1-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)丙基]-2-巯基-3H-咪唑-4-甲酰氯(根据A5制备)(0.0003mol)的THF溶液(p.a.，在分子筛中干燥)(1ml)一次性加入到搅拌的EtOH p.a.(1ml)中，反应混合物搅拌过夜。蒸干溶剂且残留物在CH₂Cl₂/H₂O中搅拌。分离有机相，然后蒸干。将残留物溶于丙酮(5ml)且用SO₂气体流处理15分钟。蒸干溶剂，残留物经反相高效液相色谱纯化。收集产物级分并蒸干溶剂。加入K₂CO₃水溶液(1ml，10％)和CH₂Cl₂(6ml)，然后搅拌混合物5分钟，经过ISOLUTEHM-N筒过滤。蒸干滤液。产量：0.0369g化合物12

     b.化合物61的制备

    

    将3-[1-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)丙基]-2-巯基-3H-咪唑-4-甲酰氯(根据A5制备)(0.0003mol)的THF溶液(p.a.，在分子筛中干燥)(1ml)一次性加入到1，2-乙二醇(1ml)中，反应混合物搅拌过夜。加入H₂O且用CH₂Cl₂提取混合物。分离有机相，然后蒸干。将残留物溶于丙酮(5ml)且用SO₂气体流处理15分钟。蒸干溶剂，残留物经反相高效液相色谱纯化。收集产物级分并蒸干溶剂。加入CH₂Cl₂(6ml)和K₂CO₃水溶液(1ml，10％)，然后搅拌5分钟，经过ISOLUTE HM-N筒过滤。蒸干滤液。产量：0.0215g化合物61。

     实施例B8

     化合物13的制备

    

    在氮气流下搅拌中间体16(根据A6.b制备)(0.000356mol)在CH₂Cl₂ p.a.(2ml)中的混和物，然后依次加入2-硫代碳酰二氯(carbonothioic dichloride)(0.00045mol)和N，N-二乙基乙胺(0.125ml)，反应混合物在室温下搅拌1.5小时。用H₂O猝灭混合物且用CH₂Cl₂提取。分离有机相，过滤并蒸干溶剂。残留物经反相高效液相色谱纯化。收集产物级分并蒸干有机溶剂。用CH₂Cl₂提取水浓缩液，然后分离有机相，干燥，过滤并蒸干溶剂。产量：0.0072g化合物13。

     实施例B9

     化合物14的制备

    

    将MeOH(0.4ml)中的NaOMe加入至中间体18(根据A7.b制备)(0.0001mol)的甲醇溶液p.a.(1.5ml)中，在室温下氮气流中搅拌反应混合物18小时。用酸性水猝灭混合物且用CH₂Cl₂提取。分离有机相，干燥(MgSO₄)，过滤并蒸干溶剂。残留物经Flash Tube(洗脱液：CH₂Cl₂)过滤纯化，然后收集产物级分，用CH₂Cl₂/CH₃OH吸收且蒸干溶剂。产量：0.0136g化合物14。

     实施例B10

     化合物16和17的制备

    

    (R)化合物16                   (S)化合物17

    分离化合物15(根据B1.a或B1.b制备)(0.001mol)，用手性柱层析经ProChrom D.A.C.柱(I.D.5cm；500g AD手性相；注射：1×35ml乙醇中360mg；洗脱液：乙醇(恒溶剂))纯化。收集2组产物级分且蒸干其溶剂。产量：0.156g化合物16((A)＝(+)-(R))和0.153g化合物17((B)＝(-)-(S))。

     实施例B11

     化合物16的制备

    

    将NaH、CH₃OH(0.005mol)加入至中间体20(根据A8.b制备)(0.00427mol)和甲酸甲酯(1g)在THF(20ml)中的混合物中。室温下搅拌混合物24小时。通过蒸发浓缩混合物，用水稀释浓缩液并用Et₂O洗涤。将HCl(5ml)和KCN(1g)在甲醇(25ml)中的混合物也加入至水相，搅拌并回流所得反应混合物过夜。从水相中分离胶状固体且用CH₂Cl₂吸收。干燥有机溶液，过滤并蒸干溶剂。残留物经硅胶柱层析纯化。收集产物级分并蒸干溶剂。产量：0.50g化合物16(R-异构体)。

     实施例B12

     化合物18的制备

    

    室温下，化合物15(根据B1.a或B1.b制备)(0.00032mol)在LiBEt₃、1M(superhydride)(2.5ml)和THF(2ml)中的混和物搅拌2小时。加入甲醇，再蒸干。残留物经反相HPLC(梯度洗脱)纯化。收集产物级分并蒸干溶剂。产量：0.0142g化合物18。

     实施例B13

     化合物19和20的制备

    

    化合物19                                    化合物20

    100℃时，化合物5(根据B2.c制备)(0.00054mol)与NH₄OH(q.s.)在密闭容器中反应18小时，然后蒸干溶剂，残留物经反相高效液相色谱纯化。收集2组产物级分且蒸干其溶剂。组1级分产出：0.075g化合物19。组2级分产出：0.080g化合物20。

     实施例B14

     a.化合物22的制备

    

    化合物21(根据B1.a或B1.b制备)(0.0128mol)的NaOH(25％)(50ml)的混和物搅拌36小时，然后在0℃时用HCl(浓)处理溶液。滤出所得沉淀且干燥(真空)。产量：3.2g化合物22。

     b.化合物23的制备

    

    室温下化合物15(根据B1.a或B1.b制备)(0.004mol)的NaOH(1N)(7.5ml)、CH₃OH，p.a.(10ml)和THF，p.a.(20ml)溶液搅拌20小时，然后在75℃时搅拌5天。再加入NaOH(1N)(7.5ml)且在75℃时搅拌1小时，然后使混合物降至室温。先加入H₂O(45ml)，然后加入Et₂O(50ml)且搅拌反应混合物30分钟。分离水相，用EtOAc/己烷(2×50ml，1/1)洗涤，用HCl(1N)酸化至pH为3。用CH₂Cl₂/CH₃OH(95/5)提取，然后分离有机相，干燥(MgSO₄)，过滤且蒸干溶剂。将残留物溶于Et₂O/己烷/CH₂Cl₂(1/1/1)且60℃时(非真空)浓缩至开始结晶，然后静置30分钟。滤出沉淀，用己烷/Et₂O(3/1)洗涤，干燥(真空，50℃)，然后用真空泵干燥5小时。产量：0.55g化合物23(41.5％)

     实施例B15

     化合物69的制备

    

    100℃时，密闭容器中搅拌化合物46(根据B2.a/B2.b制备)(0.00072mol)在CH₃NH₂(水溶液)中的混合物(5ml)18小时，然后冷却反应混合物且在氮气流下蒸干溶剂。残留物经反相高效液相色谱纯化。收集该产物级分并蒸发溶剂至少于最初体积的50％。用CH₂Cl₂提取浓缩液，分离有机相，干燥并蒸干溶剂。产量：0.180g化合物69。

     实施例B16

     化合物77的制备

    

    100℃时，密闭容器中，化合物4(0.0005mol)在一水合肼(1ml)和H₂O(4ml)中的混和物搅拌20小时。蒸干溶剂，则所得残留物即可利用。产量：0.108g化合物77。

     实施例B17

     化合物78的制备

    

    氮气下，搅拌中间体13(0.0158mol)的THF p.a.(60ml，在分子筛中干燥)溶液，然后加入乙二酸二(1，1-二甲基乙基)酯(0.0238mol)，接着加入2-甲基-2-丙醇钠盐(0.019mol)。室温下搅拌反应混合物4小时且再加入2-甲基-2-丙醇钠盐(0.4g)。室温下搅拌混合物2小时且蒸干溶剂。将残留物溶于CH₃OH(40ml)且加入硫氰酸钾盐(0.0474mol)的H₂O(20ml)溶液，然后加入HCl 36％(2ml)，反应混合物在室温下搅拌18小时。50℃时混合物再搅拌24小时，倒入冰水(150ml)中且用CH₂Cl₂提取。分离有机相，干燥(MgSO₄)，过滤并蒸干溶剂。残留物经硅胶柱层析纯化(洗脱液：CH₂Cl₂/CH₃OH 99.5/0.5)。收集产物级分并蒸干溶剂。残留物经反相高效液相色谱纯化(标准梯度)。收集产物级分并蒸干有机溶剂。产生沉淀，因此过滤水浓缩液。用CH₂Cl₂提取滤液，干燥(MgSO₄)，过滤并蒸干溶剂。残留物在DIPE中搅拌，然后过滤出所得固体，洗涤且在50℃时干燥(真空)。产量：0.28g化合物78，熔点172.7-175.2℃。

     实施例B18

     化合物79的制备

    

    0℃下将2-甲基-2-丙醇钾盐(0.039mol)分次加入至中间体29(0.0263mol)和甲酸甲酯(10ml)在THF(150ml)中的混和物中。混合物0℃时搅拌30分钟。加入硫氰酸钾盐(3g)。加入浓HCl溶液直到反应混合物的pH＝1。搅拌回流48小时，然后冷却，用水稀释，且用CH₂Cl₂提取。用水洗涤分离后的有机相，干燥，过滤并蒸干溶剂。残留物经硅胶柱层析纯化(洗脱液：CH₂Cl₂/CH₃OH 98/2)。收集产物级分并蒸干溶剂。产量：6.4g化合物79(70％)(S(-)-异构体)，旋光度：[α]₂₀^D＝-251.6°(c＝0.26 CHCl₃)。

     实施例B19

     化合物80的制备

    

    0℃时将2-甲基-2-丙醇钠盐(2.5g)分次加入至中间体31(0.0066mol)在乙酸甲酯(5ml)和THF(q.s)的混和物中，在室温下将反应混合物静置过夜，然后用醚和水稀释。用硫氰酸钾盐(q.s.)、HCl(q.s.)和CH₃OH(q.s)处理水相，所得混合物加热20小时，冷却且蒸干溶剂。残留物经反相高效液相色谱纯化。收集纯级分并蒸干溶剂。产出化合物80。

     实施例B20

     化合物81的制备

    

    0-5℃时在冰浴中搅拌化合物106(根据B6制备)(0.0008mol)在THF(10ml)中的混和物，滴加THF中的氯甲基-镁(20％)(0.002mol)，然后反应混合物搅拌1小时，再滴加THF中的氯甲基-镁(20％)(0.0044mol)。反应混合物搅拌1小时，再滴加THF中的氯甲基-镁(20％)(0.002mol)，然后搅拌1小时且在冰冷却条件下滴加1N HCl(10ml)溶液。加入水且用CH₂Cl₂提取混合物。分离有机相，干燥(MgSO₄)，滤出并蒸干溶剂。将残留物溶于2-丙酮(p.a.)且通入SO₂ 20分钟。蒸干溶剂且残留物经快速柱层析纯化(洗脱液：EtOAc)。收集产物级分且溶于CH₂Cl₂/CH₃OH(90/10)，然后过滤混合物且蒸干滤液溶剂。产出：0.060g化合物81。

     实施例B21

     化合物82的制备

    

    80℃时，在油浴中搅拌化合物7(0.0024mol)和N-乙基-N-(1-甲基乙基)-2-丙胺(0.005mol)在嘧啶(25ml)中的混合物，并向溶液中通入硫化氢(气体)90分钟，然后通入N₂ 2小时以除去硫化氢。蒸干溶剂且残留物溶于CH₂Cl₂。用H₂O和1N HCl洗涤溶液。分离有机相，干燥(MgSO₄)，过滤并蒸干溶剂。残留物经硅胶柱层析纯化(洗脱液：CH₂Cl₂/MeOH 95/5)。收集产物级分并蒸干溶剂。残留物在DIPE中搅拌，然后滤出所得沉淀且干燥。产量：0.340g化合物82。

     实施例B22

     化合物83的制备

    

    室温下搅拌化合物81(0.0003mol)在CH₃OH(3ml)中的混合物且加入硼氢化钠(0.0003mol)，然后室温下搅拌过夜。用1N HCl溶液酸化所得混合物且蒸干溶剂。残留物溶于CH₂Cl₂且用H₂O洗涤。分离有机相，干燥(MgSO₄)，滤出并蒸干溶剂。残留物经反相(NaHCO₃)高效液相色谱纯化(标准梯度)。收集产物级分并蒸干溶剂。产出：化合物83。

     实施例B23

     a)化合物84的制备

    

    室温下化合物68(0.000257mol)在SOCl₂(5ml)中的混和物搅拌过夜，然后蒸干溶剂且用甲苯(p.a.)共同蒸干。所得残留物即用于下一反应步骤。产出：化合物84。

     b)化合物85的制备。

    

    室温、氮气下，搅拌化合物84(0.000257mol)的THF溶液(p.a.，在分子筛(10ml))中干燥，然后分次加入硼氢化钠(0.00077mol)且反应混合物室温下搅拌1小时。加入水(15ml)然后加入HCl(1N)直到pH为2。用CH₂Cl₂提取混合物且分离有机相，然后干燥(MgSO₄)且过滤。蒸干溶剂，残留物通过反相高效液相色谱纯化。收集产物级分并蒸干有机溶剂。用CH₂Cl₂提取水浓缩液，然后分离有机相，干燥(MgSO₄)，滤出并蒸干溶剂。产量：0.028g化合物85。

     实施例B24

     化合物86的制备

    

    氮气下化合物84(0.000196mol)溶于THF(p.a.，在分子筛(1ml)中干燥)，将该溶液加入至剧烈搅拌的NH₃水溶液(1ml)中，然后搅拌反应混合物1小时且加入水(5ml)。加入CH₂Cl₂/CH₃OH(95/5，5ml)，然后加入碎冰，滴加浓HCl直到获得澄清两相溶液。蒸干有机相，残留物在2-丙酮(5ml，p.a.)中搅拌。用SO₂(气体)处理混和液10分钟，蒸干溶剂。残留物经反相高效液相色谱纯化。收集产物级分并蒸干有机溶剂。用CH₂Cl₂提取水浓缩液，分离有机相，最后蒸干溶剂。产量：0.025g化合物86。

     实施例B25

     化合物87的制备

    

    氮气下化合物84(0.000196mol)溶于THF(p.a.，在分子筛(1ml)中干燥)，将该溶液加入至搅拌的甲胺溶液(40％，1ml)中，然后搅拌反应混合物1小时且加入冰水(5ml)。加入CH₂Cl₂/CH₃OH(95/5)(5ml)，然后滴加浓HCl溶液直到获得澄清两相溶液。蒸干分离后的有机相，残留物在2-丙酮(5ml)中搅拌。用SO₂(气体)处理混和液10分钟，蒸干溶剂。残留物经反相高效液相色谱纯化。合并产物级分并蒸干有机溶剂。用CH₂Cl₂提取水浓缩液，蒸干分离后的有机层。产量：0.0122g化合物87。

     实施例B26

     化合物88的制备

    

    将三氟乙酸(2ml)加入至搅拌中的化合物78(0.0015mol)的CH₂Cl₂溶液p.a.(25ml)中，室温下搅拌反应混合物18小时(沉淀)，静置24小时。滤出所得沉淀，用少量CH₂Cl₂和足量DIPE洗涤，最后在50℃时干燥(真空)。产量：0.45g化合物88。

     实施例B27

     化合物89的制备

    

    将中间体24(0.003mol)滴加至冷(-78℃)N-(1-甲基乙基)-2-丙胺锂盐(0.0036mol)的THF(5ml)溶液，30分钟后向混合物中加入甲氧基-乙酰氯(0.006mol)，室温下搅拌1小时。用NH₄Cl的水溶液猝灭混合物，用EtOAc提取。分离有机相，干燥(MgSO₄)，滤出并蒸干溶剂。用甲醇(50ml)、硫氰酸钾盐(1g)和浓HCl(1ml)吸收残留物，70℃时加热所得混和液18小时。蒸干溶剂，用CH₂Cl₂提取残留物，干燥分离后的有机相，蒸干溶剂。残留物经反相高效液相色谱纯化，收集产物级分，蒸干溶剂。产量：0.250g化合物89。

     实施例B28

     化合物90、91和92的制备

    

    化合物90                     化合物91                 化合物92

    100℃时，在密闭容器中搅拌化合物55(0.0015mol)(根据B2.a/B2.b制备)在NH₃/H₂O(12ml)中的混合物18小时，蒸干溶剂。110℃时，在密闭容器中，残留物在NH₃/H₂O(12ml)中再搅拌18小时。残留物(0.6g)经反相高效液相色谱纯化。收集产物级分并蒸干溶剂。产出化合物92、91和90。

    表1、2和3列出了根据上述实施例(Ex.No.)中的一个制备的式(I)化合物。

    标题为“物理数据”的右列中显示了化合物的质量以及保留时间。所述数据的生成如下：

    将柱加热器设定为40℃，通过Waters Alliance HT 2790系统提供HPLC梯度。将来自色谱柱的流分至Waters 996光电二极管阵列(PDA)探测器和电喷雾电离源以正电离和负电离模式操作的Waters-Micromass ZQ质量光谱计。在Xterra MS C18柱上(3.5μm，4.6×100mm)(12分钟柱)以1.6ml/分的流速进行反相HPLC。利用三种流动相(流动相A：95％25mM乙酸铵+5％乙腈；流动相B：乙腈；流动相C：甲醇)形成梯度条件，6.5分钟内从100％A到50％B和50％C、1分钟内到100％B、100％B保持1分钟，用100％A再次平衡1.5分钟。注射体积为10μl。

    使用0.1秒采样时间，通过1秒内从100扫描到1000获得质谱。毛细管针电压为3kV，源温度保持在140℃。氮用作喷雾器气体。正电离模式的锥体电压为10V，负电离模式为20V。利用Waters-Micromass MassLynx-Openlynx数据系统获得数据。

    表1

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

     ^*[M⁺]定义化合物质量

     ^**保留时间在18分钟柱上获得

     ^***质量-1，只在负模式中响应。

     ¹[α]₂₀^D在CHCl₃中浓度为2.40g/100ml；²[α]₂₀^D在CHCl₃中浓度为3.42g/100ml；³[α]₂₀^D在CH₃OH中浓度为0.2152g/100ml；⁴[α]₂₀^D在CHCl₃中浓度为0.2216g/100ml。

    表2

    

    

     ^*[M⁺]定义化合物质量

    表3

    

    

     Co.no.Ex.no.R₁R_2aR_2bR_2c      物理数据[M⁺]^*保留时间(分)其它163 B16乙基Cl H Cl 373 4.24164 B16乙基ClCl H 371 4.38165 B16乙基FF H 339 3.69

     ^*[M⁺]定义化合物质量

     C.药理学实施例

    人类THP-1细胞中MCP-1诱导钙流的抑制

    在某些细胞系中MCP-1与CCR2受体的结合诱导快速和短暂的细胞内Ca²⁺(第二信使)释放(Charo等，PNAS 1994)。游离Ca²⁺水平可用Ca²⁺敏感染料测定。当CCR2受体被CCR2受体拮抗剂阻断时，MCP-1诱导的Ca²⁺释放被抑制。

    人类THP-1细胞(单核细胞系，ATCC TIB-202)培养在加入10％胎牛血清(FCS)、1％L-谷氨酸、青霉素(50U/ml)和链霉素(50μg/ml)(所有GIBCO BRL，Gent)的RPMI 1640培养基中。离心后，用Ca²⁺敏感荧光染料Fluo-3 AM(Molecular Probes，Leiden，Netherlands)装载细胞30分钟(在包含4μM Pluo-3 AM、20mM HEPES、0.1％牛血清白蛋白(BSA)和5mM丙磺舒的RPMI培养基中为2×10⁶细胞/ml)。用3倍缓冲液(5mM HEPES，140mM NaCl，1mM MgCl₂，5mM KCl，10mM葡萄糖，2.5mM丙磺舒，1.25mM CaCl₂，0.1％BSA；在此缓冲液中完成所有进一步孵育)洗涤除去过量染料。细胞以150000细胞/孔置于黑壁96-孔板(Costar，Cambridge，MA)，离心沉降(1分钟)。用待测化合物预孵育细胞20分钟。然后，加入10^-7M hMCP-1(Bachem，Bubendorf，Switserland)。细胞内游离Ca²⁺浓度的变化用荧光图像板读数器(FLIPR，Molecular Devices，Munchen，Germany)测定。从加入MCP-1前10秒钟开始每秒记录一次荧光性，直到加入后2分钟(第一分钟：以一秒间隔记录60次，第二分钟以3秒间隔记录20次)。在该时间框中获得的最大荧光用于进一步计算。

    表4报导了待测式(I)化合物进行上述试验所获得的pIC₅₀值。pIC₅₀定义为-logIC₅₀，其中IC₅₀是待测试化合物抑制50％特异性MCP-1诱导Ca²⁺流的摩尔浓度。

    表4    CoNo    pIC50    24    6.05    25    5.45    31    5.43    32    6.59    33    8.58    34    6.66    23    5.48    35    6.86    21    5.99    16    5.89    17    7.06    15    6.72    76    6.59    36    5.65    6    6.58    37    8.014    74    5.47    7    6.155    75    6.58    8    7.456    39    8.14    40    5.86    1    6.03    3    7.76    9    6.333    66    6.125    43    5.7    44    5.505    45    5.605    46    8.005    47    7.45    67    5.63    14    6.45    5    7.4    48    7.05    12    6.46    61    6.64    CoNo    pIC50    49    5.64    10    6.69    62    5.99    19    6.92    20    7.245    50    7.53    63    5.99    51    5.75    52    5.09    54    5.96    55    7.9    56    6.693    69    6.405    57    6.775    70    6.59    59    7.363    60    5.61    2    5.67    68    6.075    73    6.357    4    7.555    94    6.515    77    6.48    160    6.16    161    5.19    162    5.55    95    6.61    96    6.73    98    5.69    91    5.09    90    6.877    99    6.465    100    7.49    104    7.067    105    6.887    106    5.75    81    6.88    85    6.815    86    7.302    87    7.48    107    6.45    108    6.95    109    5.94    110    6.95    89    6.97    113    6.62    114    5.75    115    5.92    118    5.08    CoNo    pIC50    119    6.06    120    5.98    123    5.33    124    7.19    80    5.32    130    5.78    135    5.37    137    5.6    138    6.755    142    7.23    143    6.78    148    7.475    164    6.28    165    6.145    149    7.49    150    6.33    151    6.525    159    5.78    88    6.76    78    6.09