2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物及其制备方 法和用途 【技术领域】
本发明属于化学医药技术领域， 特别涉及 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺 衍生物及其制备方法和用途。背景技术
高效安全抗肿瘤药物的开发一直是世界性的难题。近年， 随着对恶性肿瘤发病机 制的深入研究， 针对肿瘤特异性分子靶点设计抗肿瘤治疗药物因其确切疗效和低毒副作用 而成为抗肿瘤药物开发的新方向和热点。
肿瘤血管在实体瘤的发生发展中具有重要的作用， 肿瘤新生血管靶向新药的研发 已成为当今肿瘤研究的热点领域。 目前研究已证实许多与肿瘤血管生成密切相关的细胞因 子， 如 Tie2 就是其中一个典型的受体酪氨酸激酶。 Tie2 是 1992 年在人的内皮细胞表面发现 一种新的受体型酪氨酸激酶， 它是血管生成素 (angiopoietin， Ang)1， 2， 3， 4 的受体。当配 体 Ang1 与 Tie2 结合后， 能通过一系列生化反应， 使基底膜与细胞外基质降解， 促进内皮细 胞迁移， 从而诱导新生血管生成。在多种肿瘤中均可检测到肿瘤组织血管中 Ang-1 和 Tie2 受体的表达增高， 抑制 Tie2 的活性可以破坏肿瘤的血管生成， 从而达到抑制肿瘤生长的目 的。故 Tie2 已经成为近年抗肿瘤药物开发的一个新的靶点， 针对 Tie2 受体的小分子拮抗 剂有可能为肿瘤治疗提供新的希望。
本发明的发明人使用分子对接 (Docking) 技术， 对小分子化合物数据库中进行虚 拟筛选基础上发现了具有 Tie2 抑制效果的新型的骨架结构， 然后通过有机合成获得了实 体化合物， 通过体外抗肿瘤活性测试发现其具有抗肿瘤活性。 发明内容
本发明所要解决的第一个技术问题是提供一类新的化合物， 该类化合物为式 I 所 示的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物 ：
其中， R1 为芳杂环基， 芳杂环基的环骨架含有 2 ～ 6 个碳原子和 1 ～ 3 个杂原子， C1 ～ C4 烷基、 C1 ～ 芳杂环基的环骨架上带有 0 ～ 6 个取代基， 取代基独立的为卤素、 OH、 CF3、 C4 烷氧基 ； 所述杂原子为氮、 氧或硫。
优选的， 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物如式 I 所示， R1 为芳杂环
基， 芳杂环基的环骨架含有 3 ～ 5 个碳原子和 1 ～ 2 个杂原子， 芳杂环基的环骨架上带有 0 ～ 6 个取代基， 取代基独立的为 F、 Cl、 Br、 OH、 CF3、 C1 ～ C4 烷基、 C1 ～ C4 烷氧基 ； 所述杂 原子为氮、 氧或硫。
优选的， 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物如式 I 所示， R1 为芳杂环 基， 芳杂环基的环骨架含有 3 ～ 5 个碳原子和 1 ～ 2 个杂原子， 芳杂环基的环骨架上带有 0 ～ 2 个取代基， 取代基独立的为 Cl、 Br、 OH、 CF3、 CH3、 OCH3 ； 所述杂原子为氮、 氧或硫。更优 的， 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物如式 I 所示， R1 为
最优的， 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物如下所示 ： 2-(6- 氨基 苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-( 吡啶 -2-) 乙酰胺、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(5- 氯吡 啶 -2-) 乙酰胺、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(5- 溴吡啶 -2-) 乙酰胺、 2-(6- 氨基苯 并噻唑 -2- 巯基 )-N-(5- 甲基吡啶 -2-) 乙酰胺、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-( 吡 啶 -3-) 乙酰胺、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(2- 氯吡啶 -4-) 乙酰胺、 2-(6- 氨基苯 并噻唑 -2- 巯基 )N-(2- 氯 -4- 甲基吡啶 -) 乙酰胺、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-( 嘧 啶 -2-) 乙酰胺、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-( 噻唑 -2-) 乙酰胺、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(4- 氯吡啶 -2-) 乙酰胺、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(3- 氯吡 啶 -2-) 乙酰胺、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(6- 氯吡啶 -2-) 乙酰胺、 2-(6- 氨基苯 并噻唑 -2- 巯基 )-N-(4- 溴吡啶 -2-) 乙酰胺、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(3- 溴吡 啶 -2-) 乙酰胺、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(6- 溴吡啶 -2-) 乙酰胺、 2-(6- 氨基苯并 噻唑 -2- 巯基 )-N-(4- 甲基吡啶 -2-) 乙酰胺、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(3- 甲基 吡啶 -2-) 乙酰胺、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(6- 甲基吡啶 -2-) 乙酰胺、 2-(6- 氨 基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(4- 氯 -6- 甲基 - 嘧啶 -2-) 乙酰胺、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯 基 )-N-(4， 6- 二氯 - 嘧啶 -2-) 乙酰胺、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(4， 6- 二羟基 - 嘧 啶 -2-) 乙酰胺或 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-( 恶唑 -2-) 乙酰胺。
本发明所要解决的第二个技术问题是提供上述式 I 所示的 2-(6- 氨基苯并噻 唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物的制备方法， 其反应路线如下所示 ：
即 6- 氨基 -2- 巯基苯并噻唑在碱性条件下与 R1NHCOCH2Cl 进行烷基化反应得到 6- 氨基 -2-(2-N-R1) 氧乙硫基 ) 苯并噻唑。
本发明所要解决的第三个技术问题是提供一类式 II 所示 2-(6- 氨基苯并噻 唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物，
其中， R1 为芳杂环基， 芳杂环基的环骨架含有 2 ～ 6 个碳原子和 1 ～ 3 个杂原子， 芳杂环基的环骨架上带有 0 ～ 6 个取代基， 取代基独立的为卤素、 OH、 CF3、 C1 ～ C4 烷基、 C1 ～ C4 烷氧基 ； 所述杂原子为氮、 氧或硫 ；
R2 为 -COCxH(2x+1)-yFy、 -COCxH(2x+1)-yCly、 -COCxH(2x+1)-yBry、 苯甲酰基或苯环上带有取代 基的苯甲酰基， 取代基为 CF3、 C1 ～ C4 烷氧基或 C1 ～ C4 烷基 ； x ＝ 1 ～ 8， y ＝ 1 ～ 16。
优选的， 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物如式 II 所示， R1 为芳杂环 基， 芳杂环基的环骨架含有 2 ～ 6 个碳原子和 1 ～ 3 个杂原子， 芳杂环基的环骨架上带有 0 ～ 6 个取代基， 取代基独立的为卤素、 OH、 CF3、 C1 ～ C4 烷基、 C1 ～ C4 烷氧基 ； 所述杂原子 为氮、 氧或硫 ；
R2 为 -COCxH(2x+1)-yFy、 -COCxH(2x+1)-yCly、 -COCxH(2x+1)-yBry、 苯甲酰基或苯环上带有取代 基的苯甲酰基， 取代基为 CF3、 C1 ～ C4 烷氧基或 C1 ～ C4 烷基 ； x ＝ 1 ～ 4， y ＝ 1 ～ 8。
进一步优选的， 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物如式 II 所示， R1 为 芳杂环基， 芳杂环基的环骨架含有 3 ～ 5 个碳原子和 1 ～ 2 个杂原子， 芳杂环基的环骨架上 带有 0 ～ 6 个取代基， 取代基独立的为 F、 Cl、 Br、 OH、 CF3、 C1 ～ C4 烷基、 C1 ～ C4 烷氧基 ； 所 述杂原子为氮、 氧或硫 ；
R2 为 -COCxH(2x+1)-yFy、 -COCxH(2x+1)-yCly、 -COCxH(2x+1)-yBry、 苯甲酰基、 苯环上带有取代 基的苯甲酰基， 取代基为 CF3、 C1 ～ C4 烷氧基或 C1 ～ C4 烷基 ； x ＝ 1 ～ 4， y ＝ 1 ～ 8。
进一步优选的， 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物如式 II 所示， R1 为 芳杂环基， 芳杂环基的环骨架含有 3 ～ 5 个碳原子和 1 ～ 2 个杂原子， 芳杂环基的环骨架上 带有 0 ～ 2 个取代基， 取代基独立的为 Cl、 Br、 OH、 CF3、 CH3、 OCH3 ； 所述杂原子为氮、 氧或硫。
R2 为 -COCxH(2x+1)F、 -COCxH(2x+1)Cl、 -COCxH(2x+1)Br、 苯甲酰基或苯环上带有取代基的苯 甲酰基， 取代基为 C1 ～ C4 烷氧基 ； x ＝ 1 ～ 4。
进一步优选的， 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物如式 II 所示， R1 为
R2 为 -COCH2F、 -COCH2Cl、 -COCH2Br 或甲氧基取代苯甲酰基。
最 优 的， 2-(6- 氨 基 苯 并 噻 唑 -2- 巯 基 )- 乙 酰 胺 衍 生 物 如 下 所 示 ： 2- 氯 -N-(2-(2-( 恶唑 -2- 氨基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-) 乙酰胺、 2- 氯 -N-(2-(2-(4，
6- 二羟基嘧啶 -2- 氨基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-) 乙酰胺、 2- 氯 -N-(2-(2-(4， 6- 二 氯嘧啶 -2- 氨基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-) 乙酰胺、 2- 氯 -N-(2-(2-(4， 6- 二甲氧基 嘧啶 -2- 氨基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-) 乙酰胺、 2- 氯 -N-(2-(2-(4- 氯 -6- 甲基嘧 啶 -2- 氨基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-) 乙酰胺、 2- 氯 -N-(2-(2-(6- 甲基吡啶 -2- 氨 基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-) 乙酰胺、 2- 氯 -N-(2-(2-(3- 甲基吡啶 -2- 氨基 )-2- 氧 乙 巯 基 ) 苯 并 噻 唑 -6-) 乙 酰 胺、 2- 氯 -N-(2-(2-(4- 甲 基 吡 啶 -2- 氨 基 )-2- 氧 乙 巯 基 ) 苯 并 噻 唑 -6-) 乙 酰 胺、 N-(3- 溴 吡 啶 -2-)-2-(6-(2- 氯 乙 酰 胺 ) 苯 并 噻 唑 -2- 巯 基 ) 乙 酰 胺、 N-(6- 溴 吡 啶 -2-)-2-(6-(2- 氯 乙 酰 胺 ) 苯 并 噻 唑 -2- 巯 基 ) 乙 酰 胺、 2- 氯 -N-(2-(2-(6- 氯 吡 啶 -2- 氨 基 )-2- 氧 乙 巯 基 ) 苯 并 噻 唑 -6-) 乙 酰 胺、 N-(4- 溴 吡 啶 -2-)-2-(6-(2- 氯 乙 酰 胺 ) 苯 并 噻 唑 -2- 巯 基 ) 乙 酰 胺、 2- 氯 -N-(2-(2-(3- 氯 吡 啶 -2- 氨基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-) 乙酰胺、 N-(2-(2- 氧 -2-( 噻唑 -2- 氨基 ) 乙巯 基 ) 苯并噻唑 -6-)-2- 甲氧基苯甲酰胺、 2- 氯 -N-(2-(2-(4- 氯吡啶 -2- 氨基 )-2- 氧乙巯 基 ) 苯并噻唑 -6-) 乙酰胺、 N-(2-(2-(2- 氯 -4- 甲基吡啶 -3- 氨基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻 唑 -6-)-2- 甲氧基苯甲酰胺、 N-(2-(2- 氧 -2-( 吡啶 -2- 氨基 ) 乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-)-2- 甲 氧 基 苯 甲 酰 胺、 N-(2-(2-(2- 氯 吡 啶 -4- 氨 基 )-2- 氧 乙 巯 基 ) 苯 并 噻 唑 -6-)-2- 甲 氧 基 苯 甲 酰 胺、 N-(2-(2-(5- 甲 基 吡 啶 -2- 氨 基 )-2- 氧 乙 巯 基 ) 苯 并 噻 唑 -6-)-2- 甲 氧 基苯甲酰胺、 2N-(2-(2- 氧 -2-( 吡啶 -3- 氨基 ) 乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-)-2- 甲氧基苯甲 酰 胺、 N-(2-(2-(5- 氯 吡 啶 -2- 氨 基 )-2- 氧 乙 巯 基 ) 苯 并 噻 唑 -6-)-2- 甲 氧 基 苯 甲 酰 胺、 N-(2-(2-(5- 溴吡啶 -2- 氨基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-)-2- 甲氧基苯甲酰胺、 2- 氯 -N-(2-(2- 氧 -2-( 噻唑 -2- 氨基 ) 乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-) 乙酰胺、 N-(2-(2- 氧 -2-( 吡 啶 -2- 氨基 ) 乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-)-2- 甲氧基苯甲酰胺、 2- 氯 -N-(2-(2- 氧 -2-( 吡 啶 -2- 氨 基 ) 乙 巯 基 ) 苯 并 噻 唑 -6-) 乙 酰 胺、 2- 氯 -N-(2-(2-(5- 氯 吡 啶 -2- 氨 基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-) 乙酰胺、 N-(5- 溴吡啶 -2-)-2-(6-(2- 氯乙酰胺 ) 苯 并 噻 唑 -2- 巯 基 ) 乙 酰 胺、 2- 氯 -N-(2-(2-(5- 甲 基 吡 啶 -2- 氨 基 )-2- 氧 乙 巯 基 ) 苯 并 噻 唑 -6-) 乙 酰 胺、 2- 氯 -N-(2-(2- 氧 -2-( 吡 啶 -3- 氨 基 ) 乙 巯 基 ) 苯 并 噻 唑 -6-) 乙 酰 胺、 2- 氯 -N-(2-(2-(2- 氯 吡 啶 -4- 氨 基 )-2- 氧 乙 巯 基 ) 苯 并 噻 唑 -6-) 乙 酰 胺、 2- 氯 -N-(2-(2-(2- 氯 -4- 甲基吡啶 -3- 氨基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-) 乙酰胺或 2- 氯 -N-(2-(2- 氧 -2-( 嘧啶 -2- 氨基 ) 乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-) 乙酰胺。
进一步的， 本发明 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物为式 III 所示 ：
其中， R1 为芳杂环基， 芳杂环基的环骨架含有 2 ～ 6 个碳原子和 1 ～ 3 个杂原子， 芳杂环基的环骨架上带有 0 ～ 6 个取代基， 取代基独立的为卤素、 OH、 CF3、 C1 ～ C4 烷基、 C1 ～ C4 烷氧基 ； 所述杂原子为氮、 氧或硫 ；R3 为 -CxH(2x+1)-yFy、 -CxH(2x+1)-yCly、 -CxH(2x+1)-yBry、 苯基或苯环上带有取代基的苯基， 取代基为 CF3、 C1 ～ C4 烷氧基或 C1 ～ C4 烷基 ； x ＝ 1 ～ 8， y ＝ 1 ～ 16。
优选的， 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物如式 III 所示， R1 为芳杂 环基， 芳杂环基的环骨架含有 2 ～ 6 个碳原子和 1 ～ 3 个杂原子， 芳杂环基的环骨架上带有 0 ～ 6 个取代基， 取代基独立的为卤素、 OH、 CF3、 C1 ～ C4 烷基、 C1 ～ C4 烷氧基 ； 所述杂原子 为氮、 氧或硫 ；
R3 为 -CxH(2x+1)-yFy、 -CxH(2x+1)-yCly、 -CxH(2x+1)-yBry、 苯基或苯环上带有取代基的苯基， 取代基为 CF3、 C1 ～ C4 烷氧基或 C1 ～ C4 烷基 ； x ＝ 1 ～ 8， y ＝ 1 ～ 8。
进一步优选的， 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物如式 III 所示， R1 为 芳杂环基， 芳杂环基的环骨架含有 3 ～ 5 个碳原子和 1 ～ 2 个杂原子， 芳杂环基的环骨架上 带有 0 ～ 2 个取代基， 取代基独立的为 Cl、 Br、 OH、 CF3、 CH3、 OCH3 ； 所述杂原子为氮、 氧或硫。
R3 为 -CxH(2x+1)F、 -CxH(2x+1)Cl、 -CxH(2x+1)Br、 苯基或苯环上带有取代基的苯基， 取代基 为 C1 ～ C4 烷氧基 ； x ＝ 1 ～ 4。
进一步优选的， 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物如式 III 所示，
R 为 1
R3 为 -CH2F、 -CH2Cl、 -CH2Br 或 C1 ～ C4 烷氧基取代苯基。 进一步的， 本发明 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物为式 IV 所示 ：其中， R1 为芳杂环基， 芳杂环基的环骨架含有 2 ～ 6 个碳原子和 1 ～ 3 个杂原子， 芳杂环基的环骨架上带有 0 ～ 6 个取代基， 取代基独立的为卤素、 OH、 CF3、 C1 ～ C4 烷基、 C1 ～ C4 烷氧基 ； 所述杂原子为氮、 氧或硫 ；
R4 为 -CxH(2x+1)-yFy、 -CxH(2x+1)-yCly、 -CxH(2x+1)-yBry ； x ＝ 1 ～ 7， y ＝ 1 ～ 14。
优选的， 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物如式 IV 所示， R1 为芳杂环 基， 芳杂环基的环骨架含有 2 ～ 6 个碳原子和 1 ～ 3 个杂原子， 芳杂环基的环骨架上带有 0 ～ 2 个取代基， 取代基独立的为卤素、 OH、 CF3、 C1 ～ C4 烷基、 C1 ～ C4 烷氧基 ； 所述杂原子 为氮、 氧或硫 ；
R4 为 -CxH(2x+1)F、 -CxH(2x+1)Cl、 -CxH(2x+1)Br ； x ＝ 1 ～ 4。
最优的， 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物如式 IX 所示，
R 为 1
R4 为 F、 Cl 或 Br。 进一步的， 本发明 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物为式 V 所示 ：其中， R1 为芳杂环基， 芳杂环基的环骨架含有 2 ～ 6 个碳原子和 1 ～ 3 个杂原子， 芳杂环基的环骨架上带有 0 ～ 6 个取代基， 取代基独立的为卤素、 OH、 CF3、 C1 ～ C4 烷基、 C1 ～ C4 烷氧基 ； 所述杂原子为氮、 氧或硫 ；
R5 ～ R9 独立的为 H、 CF3、 C1 ～ C4 烷基或 C1 ～ C4 烷氧基。
优选的， 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物如式 V 所示， R1 为芳杂环 基， 芳杂环基的环骨架含有 2 ～ 6 个碳原子和 1 ～ 3 个杂原子， 芳杂环基的环骨架上带有 C1 ～ C4 烷基、 C1 ～ C4 烷氧基 ； 所述杂原子 0 ～ 6 个取代基， 取代基独立的为卤素、 OH、 CF3、 为氮、 氧或硫 ；
R5 ～ R9 独立的为 H、 CF3、 C1 ～ C4 烷基或 C1 ～ C4 烷氧基。
最优的， 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物如式 V 所示， R1 为R5 ～ R9 独立的为 H 或 C1 ～ C4 烷氧基。
本发明所要解决的第四个技术问题是提供上述式 II 所示的 2-(6- 氨基苯并噻 唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物的制备方法， 其反应路线如下所示 ：
6- 氨基 -2-(2-N-R1) 氧乙硫基 ) 苯并噻唑 R2Cl 反应得到产物。
本发明所要解决的第五个技术问题是提供上述式 II 所示的 2-(6- 氨基苯并噻 唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物在制备抗肿瘤药物中的用途。
本 发 明 还 提 供 了 一 种 药 物 组 合 物， 是 由 上 述 式 II 所 示 的 2-(6- 氨 基 苯 并 噻 唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物添加药学上可以接受的辅助性成分制备而成的。该药物组合 物可用于制备抗肿瘤药物。
本发明的有益效果为 ： 本 发 明 在 大 量 筛 选 的 基 础 上 得 到 2-(6- 氨 基 苯 并 噻 唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物， 具有抗肿瘤活性， 为抗肿瘤药物的开发和应用提供了新的选 择。 具体实施方式
式 II 所示的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物的制备方法反应路线 如下所示 ：
R1 为芳杂环基， 芳杂环基的环骨架含有 2 ～ 6 个碳原子和 1 ～ 3 个杂原子， 芳杂环 基的环骨架上带有 0 ～ 6 个取代基， 取代基独立的为卤素、 OH、 CF3、 C1 ～ C4 烷基、 C1 ～ C4 烷 氧基 ； 所述杂原子为氮、 氧或硫 ；
R2 为 -COCxH(2x+1)-yFy、 -COCxH(2x+1)-yCly、 -COCxH(2x+1)-yBry、 苯甲酰基或苯环上带有取 代基的苯甲酰基， 取代基为 CF3、 C1 ～ C4 烷氧基或 C1 ～ C4 烷基 ； x ＝ 1 ～ 8， y ＝ 1 ～ 16。 R1NHCOCH2Cl 的合成方法为 ：
冰水浴下在 R1 取代胺、 碱和二氯甲烷混合的反应液中缓慢滴加氯乙酰氯， 滴加完 毕后加热回流， TLC( 薄层色谱 ) 鉴定反应完毕后加水淬灭反应。淬灭， 抽滤， 水洗到白色固 体。
R2Cl 的合成方法为 ：
室温下在 R2OH 与二氯甲烷混合的溶液中滴加数滴 ( 催化量 )DMF， 再缓慢滴加草酰 氯， 室温搅拌， TLC 监测反应完毕后旋干溶剂即得。
2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )- 乙酰胺衍生物的合成方法为 ：
将 6- 氨基 -2- 巯基苯并噻唑、 R1NHCOCH2Cl、 碱和丙酮混合并加热回流， 反应完毕后 减压除去有机溶剂， 残余物用乙酸乙酯溶解后加水分液， 水层用乙酸乙酯萃取， 合并有机相 用饱和食盐水洗， 无水 NaSO4 干燥， 然后再减压除去有机溶剂， 残余物经快速硅胶柱层析纯 化得到。
N-(2-(2- 胺 ) 氧乙硫基苯并噻唑 -6-)-2- 甲酰胺衍生物的合成方法为 ：
将制备好的 R2Cl 用二氯甲烷溶解后， 滴加到上述 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯 基 )- 乙酰胺衍生物和 NaHCO3 的二氯甲烷反应液中， 室温搅拌， TLC 鉴定反应完毕， 饱和 NaHCO3 溶液洗， 二氯甲烷萃取， 合并有机相， 饱和食盐水洗， 硅胶柱层析分离纯化， 得到的样 品经重结晶纯化， HPLC 测定含量＞ 95％后进行药效学实验。
以下结合实施例对本发明作进一步的阐述。实施例仅用于说明本发明， 而不是以 任何方式来限制本发明。
实施例 1、 邻甲氧基苯甲酰氯的合成
室温下在溶有邻甲氧基苯甲酸 (0.152g， 1mmol) 的二氯甲烷 4ml 溶液中滴加数滴 DMF， 再缓慢滴加草酰氯 (0.4ml， 4mmol)， 室温搅拌， 反应完毕后旋干溶剂即得。
实施例 2、 N-( 吡啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰水浴下在溶有 2- 氨基吡啶 (10.42g， 106.26mmol) 和三乙胺 (12.89g， 18.42ml， 127.51mmol) 的二氯甲烷 (150ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (10.14ml， 127.51mmol)， 滴加完毕后室温搅拌， 反应完毕后， 旋干后重结晶， 得黑紫色固体粉末 17.7g， 产率为 98％， 1 产 品 的 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ4.17(s， 2H)， 7.03-7.07(m， 1H)， 7.67-7.72(m， 1H)， + 8.12-8.29(t， 1H)， 9.17(s， 1H) ； ESI-MS m/z ： 171.02(M-H ).
实施例 3、 N-(5- 氯 - 吡啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰 水 浴 下 在 溶 有 5- 氯 -2- 氨 基 吡 啶 (2.04g， 15.87mmol) 和 三 乙 胺 (2.41g， 3.44ml， 23.81mmol) 的二氯甲烷 (50ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (1.89ml， 23.81mmol)， 室温搅拌过夜。反应液用水洗， 干燥， 过滤， 旋干得到灰棕色固 3.07g， 产率为 95.0 ％， 1 产品的结构鉴定数据如下 ： H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ4.37(s， 2H)， 7.93-7.96(dd， 1H)， + 8.08-8.11(d， 1H)， 8.40-8.41(t， 1H)， 11.04(s， 1H).ESI-MS(m/z，％ ) ： 204.9(M-H)
实施例 4、 N-(5- 溴 - 吡啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰水浴下在溶有 5- 溴 -2- 氨基吡啶 (2.05g， 11.56mmol) 和三乙胺 (1.75g， 2.5ml， 17.34mmol) 的二氯甲烷 (50ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (1.38ml， 17.34mmol)， 滴加
完毕后室温搅拌。反应液用水洗， 干燥， 过滤， 旋干得到灰棕色固 2.8g， 产率为 98％， 产品 1 的结构鉴定数据如下 ： H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ4.35(s， 2H)， 8.05(s， 2H)， 8.47(s， 1H)， + 11.01(s， 1H).ESI-MS(m/z，％ ) ： 248.9(M-H) .
实施例 5、 N-(5- 甲基 - 吡啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰 水 浴 下 在 溶 有 5- 甲 基 -2- 氨 基 吡 啶 (2.06g， 18.49mmol) 和 K2CO3(5.1g， 36.99mmol) 的二氯甲烷 (50ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (2.2ml， 27.74mmol)， 室温 1 搅拌过夜， 加水淬灭， 抽滤得滤饼 2.86g， 产率为 87 ％， 产品的结构鉴定数据如下 ： H-NMR (400MHz ， CDCl 3) ： δ 2.32(s ， 3H) ， 4.19(s ， 2H) ， 8.05(s ， 2H) ， 8.47(s ， 1H) ， 8.82(s ， 1H). + ESI-MS(m/z，％ ) ： 184.04(M-H ).
实施例 6、 N-( 吡啶 -3- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰水浴下在溶有 3- 氨基吡啶 (10.18g， 106.27mmol) 和 K2CO3(29.33g， 212.54mmol) 的二氯甲烷 (110ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (10.99ml， 138.15mmol)， 室温搅拌过 夜， 淬灭， 抽滤得滤饼 15.4g， 产率为 85 ％， 产品的结构鉴定数据如下 ： ESI-MS(m/z，％ ) ： + 172.04(M-H ).
实施例 7、 N-(2- 氯 - 吡啶 -4- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰 水 浴 下 在 溶 有 2- 氯 -4- 氨 基 吡 啶 (5.1g， 38.9mmol) 和 K2CO3(10.73g， 77.77mmol) 的二氯甲烷 (100ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (4.7ml， 58.34mmol)， 室温搅 拌过夜， 加水淬灭， 抽滤得滤饼 6.9g， 产率为 88 ％， 产品的结构鉴定数据如下 ： ESI-MS(m/ + z，％ ) ： 205.04(M-H ).
实施例 8、 N-(2- 氯 -4- 甲基 - 吡啶 -3- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰水浴下在溶有 2- 氯 -3- 氨基 -4- 甲基吡啶 (5g， 35.07mmol) 和 K2CO3(9.68g， 70.13mmol) 的二氯甲烷 (100ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (4.2ml， 52.6mmol)， 室温 搅拌过夜， 抽滤得滤饼 6.9g， 产率为 90 ％， 产品的结构鉴定数据如下 ： ESI-MS(m/z，％ ) ： + 219.02(M-H ).实施例 9、 N-( 嘧啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成冰 水 浴 下 在 溶 有 2- 氨 基 嘧 啶 (2.07g， 21.03mmol) 和 三 乙 胺 (2.55g， 3.65ml， 25.24mmol) 的二氯甲烷 (60ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (2ml， 25.24mmol)， 室温搅拌过 夜， 加水淬灭， 抽滤得滤饼 3.3g， 产率为 90％， 产品的结构鉴定数据如下 ： ESI-MS(m/z， ％)： + 172.02(M-H ).
实施例 10、 N-( 噻唑 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰水浴下在溶有 2- 氨基噻唑 (2g， 19.97mmol) 和三乙胺 (2.4g， 3.5ml， 23.97mmol) 的 二 氯 甲 烷 (50ml) 反 应 液 中 缓 慢 滴 加 氯 乙 酰 氯 (2ml， 24mmol)， 室 温 搅 拌 过 夜， 加水 淬 灭， 抽 滤 得 滤 饼 3.2g， 产 率 为 90 ％， 产品的结构鉴定数据如下 ： ESI-MS(m/z， ％ ) ： + 176.99(M-H ).
实施例 11、 N-( 吡啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成冰水浴下在溶有 2- 氨基吡啶 (10.42g， 106.26mmol) 和三乙胺 (12.89g， 18.42ml， 127.51mmol) 的二氯甲烷 (150ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (10.14ml， 127.51mmol)， 室温搅拌过夜。反应完毕后旋干， 得黑紫色固体粉末 16.3g， 产率为 89 ％， 产品的结构鉴 1 定数据如下 ： H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ4.17(s， 2H)， 7.03-7.07(m， 1H)， 7.67-7.72(m， 1H)， + 8.12-8.29(t， 1H)， 9.17(s， 1H) ； ESI-MS m/z ： 171.02(M-H ).
实施例 12、 N-(5- 氯 - 吡啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰 水 浴 下 在 溶 有 5- 氯 -2- 氨 基 吡 啶 (2.04g， 15.87mmol) 和 三 乙 胺 (2.41g， 3.44ml， 23.81mmol) 的二氯甲烷 (50ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (1.89ml， 23.81mmol)， 室温搅拌过夜。反应液用水洗干燥， 过滤， 旋干得到灰棕色固 3.07g， 产率为 95.0 ％， 产 1 品的结构鉴定数据如下： H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ4.37(s， 2H)， 7.93-7.96(dd， ， 1H)， + 8.08-8.11(d， 1H)， 8.40-8.41(t， ， 1H)， 11.04(s， 1H).ESI-MS(m/z，％ ) ： 204.9(M-H)
实施例 13、 N-(5- 溴 - 吡啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰水浴下在溶有 5- 溴 -2- 氨基吡啶 (2.05g， 11.56mmol) 和三乙胺 (1.75g， 2.5ml， 17.34mmol) 的二氯甲烷 (50ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (1.38ml， 17.34mmol)， 室温搅 拌过夜。反应液用水洗， 干燥， 过滤， 旋干得到灰棕色固 2.8g， 产率为 98％， 产品的结构鉴定 1 数据如下 ： H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ4.35(s， 2H)， 8.05(s， 2H)， 8.47(s， 1H)， 11.01(s， 1H). + ESI-MS(m/z，％ ) ： 248.9(M-H) .
实施例 14、 N-(5- 甲基 - 吡啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰 水 浴 下 在 溶 有 5- 甲 基 -2- 氨 基 吡 啶 (2.06g， 18.49mmol) 和 K2CO3(5.1g， 36.99mmol) 的二氯甲烷 (50ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (2.2ml， 27.74mmol)， 室温 搅拌过夜， 加水淬灭， 抽滤， 水洗得滤饼 3.06g， 产率为 90 ％， 产品的结构鉴定数据如下 ：1H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ2.32(s， 3H)， 4.19(s， 2H)， 8.05(s， 2H)， 8.47(s， 1H)， 8.82(s， 1H). + ESI-MS(m/z，％ ) ： 184.04(M-H ).
实施例 15、 N-( 吡啶 -3- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰水浴下在溶有 3- 氨基吡啶 (10.18g， 106.27mmol) 和 K2CO3(29.33g， 212.54mmol) 的二氯甲烷 (110ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (10.99ml， 138.15mmol)， 室温搅拌过夜， 加水淬灭， 抽滤， 水洗得滤饼 16.3g， 产率为 91 ％， 产品的结构鉴定数据如下 ： ESI-MS(m/ + z，％ ) ： 172.04(M-H ).
实施例 16、 N-(2- 氯 - 吡啶 -4- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰 水 浴 下 在 溶 有 2- 氯 -4- 氨 基 吡 啶 (5.1g， 38.9mmol) 和 K2CO3(10.73g， 77.77mmol) 的二氯甲烷 (100ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (4.7ml， 58.34mmol)， 室温 搅拌过夜， 加水淬灭， 抽滤， 水洗得滤饼 7.1g， 产率为 90 ％， 产品的结构鉴定数据如下 ： ESI-MS(m/z，％ ) ： 205.04(M-H+).
实施例 17、 N-(2- 氯 -4- 甲基 - 吡啶 -3- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰水浴下在溶有 2- 氯 -3- 氨基 -4- 甲基吡啶 (5g， 35.07mmol) 和 K2CO3(9.68g， 70.13mmol) 的二氯甲烷 (100ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (4.2ml， 52.6mmol)， 室温 搅拌过夜， 加水淬灭， 抽滤， 水洗得滤饼 6.9g， 产率为 89 ％， 产品的结构鉴定数据如下 ： + ESI-MS(m/z，％ ) ： 219.02(M-H ).
实施例 18、 N-( 嘧啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰 水 浴 下 在 溶 有 2- 氨 基 嘧 啶 (2.07g， 21.03mmol) 和 三 乙 胺 (2.55g， 3.65ml， 25.24mmol) 的二氯甲烷 (60ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (2ml， 25.24mmol)， 室温搅拌过 夜， 加水淬灭， 抽滤， 水洗得滤饼 3.3g， 产率为 90％， 产品的结构鉴定数据如下 ： ESI-MS(m/ + z，％ ) ： 172.02(M-H ).
实施例 19、 N-( 噻唑 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰水浴下在溶有 2- 氨基噻唑 (2g， 19.97mmol) 和三乙胺 (2.4g， 3.5ml， 23.97mmol) 的二氯甲烷 (50ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (2ml， 24mmol)， 室温搅拌过夜， 加水淬 灭， 抽滤， 水洗得滤饼 2.7g， 产率为 80 ％， 产品的结构鉴定数据如下 ： ESI-MS(m/z，％ ) ： + 176.99(M-H ).
实施例 20、 N-(4- 氯 - 吡啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰 水 浴 下 在 溶 有 4- 氯 -2- 氨 基 吡 啶 (2.04g， 15.87mmol) 和 三 乙 胺 (2.41g， 3.44ml， 23.81mmol) 的二氯甲烷 (50ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (1.89ml， 23.81mmol)， 室温搅拌过夜。淬灭， 抽滤， 水洗后得到产物 3.0g， 产率为 93.0 ％， 产品的结构鉴定数 1 据 如 下： H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ4.37(s， 2H)， 7.93-7.96(dd， ， 1H)， 8.08-8.11(d， 1H)， + 8.40-8.41(t， ， 1H)， 11.04(s， 1H).ESI-MS(m/z，％ ) ： 204.8(M-H)
实施例 21、 N-(3- 氯 - 吡啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰 水 浴 下 在 溶 有 3- 氯 -2- 氨 基 吡 啶 (2.04g， 15.87mmol) 和 三 乙 胺 (2.41g， 3.44ml， 23.81mmol) 的二氯甲烷 (50ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (1.89ml， 23.81mmol)， 室 温 搅 拌 过夜， 加 水 淬灭， 抽滤， 水 洗滤 饼， 重结 晶得 到固 体 3.07g， 产率 为 95.0 ％， 产 1 品的结构鉴定数据如下： H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ4.37(s， 2H)， 7.93-7.96(dd， ， 1H)， + 8.08-8.11(d， 1H)， 8.40-8.41(t， ， 1H)， 11.04(s， 1H).ESI-MS(m/z，％ ) ： 204.9(M-H)
实施例 22、 N-(6- 氯 - 吡啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰 水 浴 下 在 溶 有 6- 氯 -2- 氨 基 吡 啶 (2.04g， 15.87mmol) 和 三 乙 胺 (2.41g， 3.44ml， 23.81mmol) 的二氯甲烷 (50ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (1.89ml， 23.81mmol)， 室 温 搅 拌 过夜， 加 水 淬灭， 抽滤， 水 洗滤 饼， 重结 晶得 到固 体 3.07g， 产率 为 95.0 ％， 产 品的结构鉴定数据如下： 1H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ4.37(s， 2H)， 7.93-7.96(dd， ， 1H)， + 8.08-8.11(d， 1H)， 8.40-8.41(t， ， 1H)， 11.04(s， 1H).ESI-MS(m/z，％ ) ： 204.9(M-H)
实施例 23、 N-(4- 溴 - 吡啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成冰水浴下在溶有 3- 溴 -2- 氨基吡啶 (2.05g， 11.56mmol) 和三乙胺 (1.75g， 2.5ml， 17.34mmol) 的二氯甲烷 (50ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (1.38ml， 17.34mmol)， 室温 搅拌过夜。淬灭， 抽滤， 水洗到灰棕色固 2.8g， 产率为 98 ％， 产品的结构鉴定数据如下 ： 1 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ4.35(s， 2H)， 8.05(s， 2H)， 8.47(s， 1H)， 11.01(s， 1H).ESI-MS(m/ + z，％ ) ： 248.9(M-H) .
实施例 24、 N-(3- 溴 - 吡啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰 水 浴 下 在 溶 有 3- 溴 -2- 氨 基 吡 啶 (2.05g， 11.56mmol) 和 三 乙 胺 (1.75g， 2.5ml， 17.34mmol) 的二氯甲烷 (50ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (1.38ml， 17.34mmol)， 室温搅拌过夜。淬灭， 抽滤， 水洗得到固体 2.73g， 产率为 97％， 产品的结构鉴定数据如下 ： 1 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ4.35(s， 2H)， 8.05(s， 2H)， 8.47(s， 1H)， 11.01(s， 1H).ESI-MS(m/ + z，％ ) ： 248.9(M-H) .
实施例 25、 N-(6- 溴 - 吡啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰水浴下在溶有 6- 溴 -2- 氨基吡啶 (2.05g， 11.56mmol) 和三乙胺 (1.75g， 2.5ml， 17.34mmol) 的二氯甲烷 (50ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (1.38ml， 17.34mmol)， 室温 搅拌过夜。淬灭， 抽滤， 水洗得到固体 2.83g， 产率为 98.7 ％， 产品的结构鉴定数据如下 ： 1 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ4.35(s， 2H)， 8.05(s， 2H)， 8.47(s， 1H)， 11.01(s， 1H).ESI-MS(m/ + z，％ ) ： 248.9(M-H) .
实施例 26、 N-(4- 甲基 - 吡啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰 水 浴 下 在 溶 有 4- 甲 基 -2- 氨 基 吡 啶 (2.06g， 18.49mmol) 和 K2CO3(5.1g， 36.99mmol) 的二氯甲烷 (50ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (2.2ml， 27.74mmol)， 室温 搅拌过夜， 加水淬灭， 抽滤， 水洗得滤饼 2.7g， 产率为 80 ％， 产品的结构鉴定数据如下 ： 1 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ2.32(s， 3H)， 4.19(s， 2H)， 8.05(s， 2H)， 8.47(s， 1H)， 8.82(s， 1H). + ESI-MS(m/z，％ ) ： 184.04(M-H ).
实施例 27、 N-(3- 甲基 - 吡啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成冰 水 浴 下 在 溶 有 3- 甲 基 -2- 氨 基 吡 啶 (2.06g， 18.49mmol) 和 K2CO3(5.1g， 36.99mmol) 的二氯甲烷 (50ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (2.2ml， 27.74mmol)， 室温 搅拌过夜， 加水淬灭， 抽滤， 水洗得滤饼 3.06g， 产率为 90 ％， 产品的结构鉴定数据如下 ： 1 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ2.32(s， 3H)， 4.19(s， 2H)， 8.05(s， 2H)， 8.47(s， 1H)， 8.82(s， 1H). ESI-MS(m/z，％ ) ： 184.04(M-H+).
实施例 28、 N-(6- 甲基 - 吡啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰 水 浴 下 在 溶 有 6- 甲 基 -2- 氨 基 吡 啶 (2.06g， 18.49mmol) 和 K2CO3(5.1g， 36.99mmol) 的二氯甲烷 (50ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (2.2ml， 27.74mmol)， 室温 搅拌过夜， 加水淬灭， 抽滤， 水洗得滤饼 3.06g， 产率为 91 ％， 产品的结构鉴定数据如下 ： 1 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ2.32(s， 3H)， 4.19(s， 2H)， 8.05(s， 2H)， 8.47(s， 1H)， 8.82(s， 1H). + ESI-MS(m/z，％ ) ： 184.04(M-H ).
实施例 29、 N-(4- 氯 -6- 甲基 - 嘧啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰水浴下在溶有 4- 氯 -6- 甲基 -2- 氨基嘧啶 (3g， 21.03mmol) 和三乙胺 (2.55g， 3.65ml， 25.24mmol) 的二氯甲烷 (60ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (2ml， 25.24mmol)， 室温搅拌过夜， 加水淬灭， 抽滤， 水洗得滤饼 4.2g， 产率为 92％， 产品的结构鉴定数据如下 ： + ESI-MS(m/z，％ ) ： 220.02(M-H ).
实施例 30、 N-(4， 6- 二甲氧基 - 嘧啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰水浴下在溶有 4， 6- 二甲基 -2- 氨基嘧啶 (3.3g， 21.03mmol) 和三乙胺 (2.55g， 3.65ml， 25.24mmol) 的二氯甲烷 (60ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (2ml， 25.24mmol)， 室温搅拌过夜， 加水淬灭， 抽滤， 水洗得滤饼 4.4g， 产率为 89％， 产品的结构鉴定数据如下 ： + ESI-MS(m/z，％ ) ： 232.02(M-H ).
实施例 31、 N-(4， 6- 二氯 - 嘧啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰水浴下在溶有 4， 6- 二氯 -2- 氨基嘧啶 (3.4g， 21.03mmol) 和三乙胺 (2.55g， 3.65ml， 25.24mmol) 的二氯甲烷 (60ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (2ml， 25.24mmol)， 室 温搅拌过夜， 加水淬灭， 抽滤， 水洗得滤饼 4.5g， 产率为 90 ％， 产品的结构鉴定数据如下 ： + ESI-MS(m/z，％ ) ： 239.92(M-H ).
实施例 32、 N-(4， 6- 二羟基 - 嘧啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰水浴下在溶有 4， 6- 二羟基 -2- 氨基嘧啶 (2.7g， 21.03mmol) 和三乙胺 (2.55g， 3.65ml， 25.24mmol) 的二氯甲烷 (60ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (2ml， 25.24mmol)， 室温搅拌过夜， 加水淬灭， 抽滤， 水洗得滤饼 4.0g， 产率为 95％， 产品的结构鉴定数据如下 ： + ESI-MS(m/z，％ ) ： 203.02(M-H ).
实施例 33、 N-( 恶唑 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺的合成
冰 水 浴 下 在 溶 有 恶 唑 -2- 氨 基 (1.7g， 19.97mmol) 和 三 乙 胺 (2.4g， 3.5ml， 23.97mmol) 的二氯甲烷 (50ml) 反应液中缓慢滴加氯乙酰氯 (2ml， 24mmol)， 室温搅拌过 夜， 加水淬灭， 抽滤， 水洗得滤饼 2.9g， 产率为 90％， 产品的结构鉴定数据如下 ： ESI-MS(m/ + z，％ ) ： 161.01(M-H ).
实施例 34、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-( 吡啶 -2-) 乙酰胺的合成
6- 氨基 -2- 巯基苯并噻唑 1g(5.48mmol)、 反应一制备的 N-( 吡啶 -2- 氨基 )-2- 氯 乙 酰 胺 1.08g(6.3mmol) 和 三 乙 胺 (0.68g， 0.96ml， 6.58mmol) 加 入 60ml 丙 酮 中， 回 流， 1 旋 丙 酮， 水 洗， 干 燥 得 到 固 体 1.56g， 产 率 为 91 ％。 产 品 的 结 构 鉴 定 数 据 如 下 ： H-NMR (400MHz， CDCl3) ： δ4.36(s， 2H)， 5.46(s， 2H)， 6.70-6.72(d， J ＝ 8.8， 2.0Hz， 1H)， 7.00(s， 1H)， 7.20-7.28(m， 5H)， 7.46-7.48(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 7.90-7.92(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 8.06-8.08(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 8.34(s， 1H)， 10.84(s， 1H) ； ESI-MS(m/z， ％) ： 317.05(M-H)+.
实施例 35、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(5- 氯吡啶 -2-) 乙酰胺的合成
6- 氨基 -2- 巯基苯并噻唑 2.57g(14.1mmol)、 反应一制备的 N-(5- 氯 - 吡啶 -2- 氨 基 )-2- 氯 乙 酰 胺 3.17g(15.5mmol) 和 K2CO3 3.89g(28.2mmol) 加 入 120ml 丙 酮 中， 回 1 流， 旋干， 水洗后得到固体 4.4g， 产率为 91 ％。产品的结构鉴定 ： H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ4.33(s， 2H)， 5.38(s， 2H)， 6.70-6.72(d， J ＝ 8.8， 2.0Hz， 1H)， 7.00(s， 1H)， 7.20-7.28(m， 5H)， 7.46-7.48(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 7.90-7.92(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 8.06-8.08(d， J ＝ 8.8Hz， + 1H)， 8.39(s， 1H)， 11.04(s， 1H)， ESI-MS(m/z，％ ) ： 351.0(M-H) .
实施例 36、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(5- 溴吡啶 -2-) 乙酰胺的合成6- 氨基 -2- 巯基苯并噻唑 0.728g(4mmol)、 反应一制备的 N-(5- 溴 - 吡啶 -2- 氨 基 )-2- 氯 乙 酰 胺 2.82g(11.37mmol) 和 K2CO3 2.62g(18.96mmol) 加 入 120ml 丙 酮 中， 回 流， 旋干， 水洗， 干燥后得到固体 3.5g， 产率为 92％。产品的结构鉴定数据如下 ： ESI-MS(m/ + z，％ ) ： 394.9(M-H) .
实施例 37、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(5- 甲基吡啶 -2-) 乙酰胺的合成6- 氨 基 -2- 巯 基 苯 并 噻 唑 2.69g(14.77mmol)、 反 应 一 制 备 的 N-(5- 甲 基 - 吡 啶 -2- 氨 基 )-2- 氯 乙 酰 胺 3g(16.25mmol) 和 K2CO3 3.06g(22.16mmol) 加 入 150ml 丙 酮中， 回流， 旋干， 水洗， 干燥后得到固体 4.4g， 产率为 91 ％。产品的结构鉴定数据如下 ： + ESI-MS(m/z，％ ) ： 330.4(M-H ).
实施例 38、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-( 吡啶 -3-) 乙酰胺的合成
6- 氨 基 -2- 巯 基 苯 并 噻 唑 2.92g(15.99mmol)、 反 应 一 制 备 的 N-( 吡 啶 -3- 氨 基 )-2- 氯乙酰胺 3g(17.58mmol) 和 K2CO3 4.41g(31.97mmol) 加入 120ml 丙酮中， 回流， 旋 干， 水洗， 干燥后得到固体 4.4g， 产率为 87％。 产品的结构鉴定数据如下 ： ESI-MS(m/z， ％) ： + 317.04(M-H ).
实施例 39、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(2- 氯吡啶 -4-) 乙酰胺的合成
6- 氨基 -2- 巯基苯并噻唑 2.84g(15.6mmol)、 反应一制备的 N-(2- 氯 - 吡啶 -4- 氨 基 )-2- 氯乙酰胺 3.5g(17.16mmol) 和 K2CO3 4.31g(31.2mmol) 加入 150ml 丙酮中， 回流， 旋 干， 水洗， 干燥后得到固体 5g， 产率为 92％。产品的结构鉴定数据如下 ： ESI-MS(m/z，％ ) ： + 351.01(M-H ).
实施例 40、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(2- 氯 -4- 甲基吡啶 -) 乙酰胺的合成
6- 氨 基 -2- 巯 基 苯 并 噻 唑 2.28g(13.76mmol)、 反 应 一 制 备 的 N-(2- 氯 -4- 甲 基 - 吡啶 -3- 氨基 )-2- 氯乙酰胺 3g(12.51mmol) 和 K2CO3 3.45g(25.02mmol) 加入 120ml 丙酮中回流 4 小时， 旋干， 水洗， 干燥后得到固体 3.6g， 产率为 80％。产品的结构鉴定数据
如下 ： ESI-MS(m/z，％ ) ： 365.02(M-H+).
实施例 41、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-( 嘧啶 -2-) 乙酰胺的合成
6- 氨 基 -2- 巯 基 苯 并 噻 唑 2.28g(13.76mmol)、 反 应 一 制 备 的 N-( 嘧 啶 -2- 氨 基 )-2- 氯 乙 酰 胺 3.02g(17.6mmol) 和 三 乙 胺 (1.05g， 1.5ml， 19.2mmol) 加 入 150ml 丙 酮中， 回流， 旋干， 水洗， 干燥后得到固体 5.2g， 产率为 93 ％。产品的结构鉴定数据如下 ： + ESI-MS(m/z，％ ) ： 318.04(M-H ).
实施例 42、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-( 噻唑 -2-) 乙酰胺的合成
6- 氨基 -2- 巯基苯并噻唑 1g(5.48mmol)、 反应一制备的 N-( 噻唑 -2- 氨基 )-2- 氯 乙酰胺 1.1g(6.3mmol) 和三乙胺 (0.66g， 0.95ml， 6.58mmol) 加入 60ml 丙酮中， 回流， 旋干， 水洗， 干燥后得到固体 1.7g， 产率为 92％。产品的结构鉴定数据如下 ： ESI-MS(m/z，％ ) ： + 323.00(M-H ).
实施例 43、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-( 吡啶 -2-) 乙酰胺的合成
6- 氨基 -2- 巯基苯并噻唑 1g(5.48mmol)、 反应一制备的 N-( 吡啶 -2- 氨基 )-2- 氯 乙酰胺 1.08g(6.3mmol) 和三乙胺 (0.68g， 0.96ml， 6.58mmol) 加入 60ml 丙酮中， 回流， 反应 完毕后旋干丙酮， 再用乙酸乙酯溶解并水洗， 萃取， 饱和食盐水洗， 无水 NaSO4
干燥， 过滤， 旋干后用乙醇重结晶， 得到固体 1.56g， 产率为 91％。产品的结构鉴 1 定数据如下 ： H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ4.36(s， 2H)， 5.46(s， 2H)， 6.70-6.72(d， J ＝ 8.8， 2.0Hz， 1H)， 7.00(s， 1H)， 7.20-7.28(m， 5H)， 7.46-7.48(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 7.90-7.92(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 8.06-8.08(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 8.34(s， 1H)， 10.84(s， 1H) ； ESI-MS(m/z， ％)： + 317.05(M-H) .
实施例 44、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(5- 氯吡啶 -2-) 乙酰胺的合成
6- 氨基 -2- 巯基苯并噻唑 2.57g(14.1mmol)、 反应一制备的 N-(5- 氯 - 吡啶 -2- 氨 基 )-2- 氯乙酰胺 3.17g(15.5mmol) 和 K2CO3 3.89g(28.2mmol) 加入 120ml 丙酮中， 回流， 1 旋干， 水洗， 干燥后得到固体 4.4g， 产率为 91％。产品的结构鉴定 ： H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ4.33(s， 2H)， 5.38(s， 2H)， 6.70-6.72(d， J ＝ 8.8， 2.0Hz， 1H)， 7.00(s， 1H)， 7.20-7.28(m， 5H)， 7.46-7.48(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 7.90-7.92(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 8.06-8.08(d， J ＝ 8.8Hz， + 1H)， 8.39(s， 1H)， 11.04(s， 1H)， ESI-MS(m/z，％ ) ： 351.0(M-H) .
实施例 45、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(5- 溴吡啶 -2-) 乙酰胺的合成
6- 氨基 -2- 巯基苯并噻唑 0.728g(4mmol)、 反应一制备的 N-(5- 溴 - 吡啶 -2- 氨 基 )-2- 氯 乙 酰 胺 2.82g(11.37mmol) 和 K2CO3 2.62g(18.96mmol) 加 入 120ml 丙 酮 中， 回 流， 旋干， 水洗， 干燥后得到固体 3.6g， 产率为 94％。产品的结构鉴定数据如下 ： ESI-MS(m/ + z，％ ) ： 394.9(M-H) .
实施例 46、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(5- 甲基吡啶 -2-) 乙酰胺的合成6- 氨 基 -2- 巯 基 苯 并 噻 唑 2.69g(14.77mmol)、 反 应 一 制 备 的 N-(5- 甲 基 - 吡 啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺 3g(16.25mmol) 和 K2CO3 3.06g(22.16mmol) 加入 150ml 丙酮中， 回流， 旋干， 水洗， 干燥后得到固体 4.5g， 产率为 92％。产品的结构鉴定 ： ESI-MS(m/z， ％)： + 330.4(M-H ).
实施例 47、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-( 吡啶 -3-) 乙酰胺的合成
6- 氨 基 -2- 巯 基 苯 并 噻 唑 2.92g(15.99mmol)、 反 应 一 制 备 的 N-( 吡 啶 -3- 氨 基 )-2- 氯乙酰胺 3g(17.58mmol) 和 K2CO3 4.41g(31.97mmol) 加入 120ml 丙酮中， 回流， 旋 干， 水洗， 干燥后得到固体 4.7g， 产率为 92％。 产品的结构鉴定数据如下 ： ESI-MS(m/z， ％) ： + 317.04(M-H ).
实施例 48、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(2- 氯吡啶 -4-) 乙酰胺的合成
6- 氨基 -2- 巯基苯并噻唑 2.84g(15.6mmol)、 反应一制备的 N-(2- 氯 - 吡啶 -4- 氨 基 )-2- 氯乙酰胺 3.5g(17.16mmol) 和 K2CO3 4.31g(31.2mmol) 加入 150ml 丙酮中， 回流， 旋 干， 水洗， 干燥后得到固体 4.9g， 产率为 90％。 产品的结构鉴定数据如下 ： ESI-MS(m/z， ％) ： + 351.01(M-H ).
实施例 49、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(2- 氯 -4- 甲基吡啶 -) 乙酰胺的合 成
6- 氨 基 -2- 巯 基 苯 并 噻 唑 2.28g(13.76mmol)、 反 应 一 制 备 的 N-(2- 氯 -4- 甲 基 - 吡啶 -3- 氨基 )-2- 氯乙酰胺 3g(12.51mmol) 和 K2CO3 3.45g(25.02mmol) 加入 120ml 丙酮中回流
4 小时， 旋干， 水洗， 干燥后得到固体 4.2g， 产率为 92％。产品的结构鉴定数据如 + 下： ESI-MS(m/z，％ ) ： 365.02(M-H ).
实施例 50、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-( 嘧啶 -2-) 乙酰胺的合成
6- 氨 基 -2- 巯 基 苯 并 噻 唑 2.28g(13.76mmol)、 反 应 一 制 备 的 N-( 嘧 啶 -2- 氨 基 )-2- 氯乙酰胺 3.02g(17.6mmol) 和三乙胺 (1.05g， 1.5ml， 19.2mmol) 加入 150ml 丙酮中， 回流， 旋干， 水洗， 干燥后得到固体 5g， 产率为 91％。产品的结构鉴定数据如下 ： ESI-MS(m/ + z，％ ) ： 318.04(M-H ).
实施例 51、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-( 噻唑 -2-) 乙酰胺的合成
6- 氨基 -2- 巯基苯并噻唑 1g(5.48mmol)、 反应一制备的 N-( 噻唑 -2- 氨基 )-2- 氯 乙酰胺 1.1g(6.3mmol) 和三乙胺 (0.66g， 0.95ml， 6.58mmol) 加入 60ml 丙酮中， 回流， 旋干， 水洗， 干燥后得到固体 1.6g， 产率为 90％。产品的结构鉴定数据如下 ： ESI-MS(m/z，％ ) ：
323.00(M-H+).
实施例 52、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(4- 氯吡啶 -2-) 乙酰胺的合成
6- 氨基 -2- 巯基苯并噻唑 2.57g(14.1mmol)、 反应一制备的 N-(4- 氯 - 吡啶 -2- 氨 基 )-2- 氯乙酰胺 3.17g(15.5mmol) 和 K2CO3 3.89g(28.2mmol) 加入 120ml 丙酮中， 回流， 1 旋干， 水洗， 干燥后得到固体 4.5g， 产率为 92％。产品的结构鉴定 ： H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ4.33(s， 2H)， 5.38(s， 2H)， 6.70-6.72(d， J ＝ 8.8， 2.0Hz， 1H)， 7.00(s， 1H)， 7.20-7.28(m， 5H)， 7.46-7.48(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 7.90-7.92(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 8.06-8.08(d， J ＝ 8.8Hz， + 1H)， 8.39(s， 1H)， 11.04(s， 1H)， ESI-MS(m/z，％ ) ： 351.2(M-H) .
实施例 53、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(3- 氯吡啶 -2-) 乙酰胺的合成
6- 氨基 -2- 巯基苯并噻唑 2.57g(14.1mmol)、 反应一制备的 N-(3- 氯 - 吡啶 -2- 氨 基 )-2- 氯乙酰胺 3.17g(15.5mmol) 和 K2CO3 3.89g(28.2mmol) 加入 120ml 丙酮中， 回流， 1 旋干， 水洗， 干燥后得到固体 4.5g， 产率为 92％。产品的结构鉴定 ： H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ4.33(s， 2H)， 5.38(s， 2H)， 6.70-6.72(d， J ＝ 8.8， 2.0Hz， 1H)， 7.00(s， 1H)， 7.20-7.28(m， 5H)， 7.46-7.48(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 7.90-7.92(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 8.06-8.08(d， J ＝ 8.8Hz， + 1H)， 8.39(s， 1H)， 11.04(s， 1H)， ESI-MS(m/z，％ ) ： 351.2(M-H) .
实施例 54、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(6- 氯吡啶 -2-) 乙酰胺的合成
6- 氨基 -2- 巯基苯并噻唑 2.57g(14.1mmol)、 反应一制备的 N-(6- 氯 - 吡啶 -2- 氨 基 )-2- 氯乙酰胺 3.17g(15.5mmol) 和 K2CO3 3.89g(28.2mmol) 加入 120ml 丙酮中， 回流， 1 旋干， 水洗， 干燥后得到固体 4.5g， 产率为 93％。产品的结构鉴定 ： H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ4.33(s， 2H)， 5.38(s， 2H)， 6.70-6.72(d， J ＝ 8.8， 2.0Hz， 1H)， 7.00(s， 1H)， 7.20-7.28(m， 5H)， 7.46-7.48(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 7.90-7.92(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 8.06-8.08(d， J ＝ 8.8Hz， + 1H)， 8.39(s， 1H)， 11.04(s， 1H)， ESI-MS(m/z，％ ) ： 351.3(M-H) .
实施例 55、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(4- 溴吡啶 -2-) 乙酰胺的合成
6- 氨基 -2- 巯基苯并噻唑 0.728g(4mmol)、 反应一制备的 N-(4- 溴 - 吡啶 -2- 氨 基 )-2- 氯 乙 酰 胺 2.82g(11.37mmol) 和 K2CO3 2.62g(18.96mmol) 加 入 120ml 丙 酮 中， 回 流， 旋干， 水洗， 干燥后得到固体 3.4g， 产率为 90％。产品的结构鉴定数据如下 ： ESI-MS(m/ z，％ ) ： 394.9(M-H)+.
实施例 56、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(3- 溴吡啶 -2-) 乙酰胺的合成
6- 氨基 -2- 巯基苯并噻唑 0.728g(4mmol)、 反应一制备的 N-(3- 溴 - 吡啶 -2- 氨 基 )-2- 氯 乙 酰 胺 2.82g(11.37mmol) 和 K2CO3 2.62g(18.96mmol) 加 入 120ml 丙 酮 中， 回 流， 旋干， 水洗， 干燥后得到固体 3.5g， 产率为 92％。产品的结构鉴定数据如下 ： ESI-MS(m/ + z，％ ) ： 394.9(M-H) .
实施例 57、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(6- 溴吡啶 -2-) 乙酰胺的合成
6- 氨基 -2- 巯基苯并噻唑 0.728g(4mmol)、 反应一制备的 N-(6- 溴 - 吡啶 -2- 氨 基 )-2- 氯乙酰胺 2.82g(11.37mmol) 和 K2CO3 2.62g(18.96mmol) 加入 120ml 丙酮中， 回 流， 旋干， 水洗， 干燥后得到固体 3.4g， 产率为 91％。产品的结构鉴定数据如下 ： ESI-MS(m/ + z，％ ) ： 394.9(M-H) .
实施例 58、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(4- 甲基吡啶 -2-) 乙酰胺的合成
6- 氨 基 -2- 巯 基 苯 并 噻 唑 2.69g(14.77mmol)、 反 应 一 制 备 的 N-(4- 甲 基 - 吡 啶 -2- 氨基 )-2
氯乙酰胺 3g(16.25mmol) 和 K2CO3 3.06g(22.16mmol) 加入 150ml 丙酮中， 回流， 旋干， 水洗， 干燥后得到固体 4.2g， 产率为 86 ％。产品的结构鉴定 ： ESI-MS(m/z，％ ) ： + 330.4(M-H ).实施例 59、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(3- 甲基吡啶 -2-) 乙酰胺的合成6- 氨 基 -2- 巯 基 苯 并 噻 唑 2.69g(14.77mmol)、 反 应 一 制 备 的 N-(3- 甲 基 - 吡 啶 -2- 氨 基 )-2- 氯 乙 酰 胺 3g(16.25mmol) 和 K2CO3 3.06g(22.16mmol) 加 入 150ml 丙 酮中， 回流， 旋干， 水洗， 干燥后得到固体 4.3g， 产率为 88 ％。产品的结构鉴定数据如下 ： + ESI-MS(m/z，％ ) ： 330.4(M-H ).
实施例 60、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(6- 甲基吡啶 -2-) 乙酰胺的合成
6- 氨 基 -2- 巯 基 苯 并 噻 唑 2.69g(14.77mmol)、 反 应 一 制 备 的 N-(6- 甲 基 - 吡 啶 -2- 氨 基 )-2- 氯 乙 酰 胺 3g(16.25mmol) 和 K2CO3 3.06g(22.16mmol) 加 入 150ml 丙 酮中， 回流， 旋干， 水洗， 干燥后得到固体 4.5g， 产率为 93 ％。产品的结构鉴定数据如下 ： + ESI-MS(m/z，％ ) ： 330.4(M-H ).
实施例 61、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(4- 氯 -6- 甲基 - 嘧啶 -2-) 乙酰胺 的合成
6- 氨 基 -2- 巯 基 苯 并 噻 唑 2.28g(13.76mmol)、 反 应 一 制 备 的 N-(4- 氯 -6- 甲 基 - 嘧啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺 3.9g(17.6mmol) 和三乙胺 (1.05g， 1.5ml， 19.2mmol) 加 入 150ml 丙酮中， 回流， 旋干， 水洗， 干燥后得到固体 4.5g， 产率为 91％。产品的结构鉴定数 + 据如下 ： ESI-MS(m/z，％ ) ： 366.04(M-H ).
实施例 62、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(4， 6- 二甲氧基 - 嘧啶 -2-) 乙酰胺 的合成
6- 氨 基 -2- 巯 基 苯 并 噻 唑 2.28g(13.76mmol)、 反 应 一 制 备 的 N-(4， 6- 二 甲 氧基 - 嘧啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺 4.1g(17.6mmol) 和三乙胺 (1.05g， 1.5ml， 19.2mmol) 加 入 150ml 丙酮中， 回流， 旋干， 水洗， 干燥后得到固体 4.9g， 产率为 93％。产品的结构鉴定数 + 据如下 ： ESI-MS(m/z，％ ) ： 378.05(M-H ).
实施例 63、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(4， 6- 二氯 - 嘧啶 -2-) 乙酰胺的合 成
6- 氨基 -2- 巯基苯并噻唑 2.28g(13.76mmol)、 反应一制备的 N-(4， 6- 二氯 - 嘧 啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺 4.2g(17.6mmol) 和三乙胺 (1.05g， 1.5ml， 19.2mmol) 加入 150ml 丙酮中， 回流， 旋干， 水洗， 干燥后得到固体 4.8g， 产率为 92％。产品的结构鉴定数据如下 ： + ESI-MS(m/z，％ ) ： 385.95(M-H ).
实施例 64、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(4， 6- 二羟基 - 嘧啶 -2-) 乙酰胺的 合成
6- 氨基 -2- 巯基苯并噻唑 2.28g(13.76mmol)、 反应一制备的 N-(4， 6- 二羟基 - 嘧 啶 -2- 氨基 )-2- 氯乙酰胺 3.55g(17.6mmol) 和三乙胺 (1.05g， 1.5ml， 19.2mmol) 加入 150ml 丙酮中， 回流， 旋干， 水洗， 干燥后得到固体 4.4g， 产率为 93％。产品的结构鉴定数据如下 ： + ESI-MS(m/z，％ ) ： 350.05(M-H ).
实施例 65、 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-( 恶唑 -2-) 乙酰胺的合成
6- 氨基 -2- 巯基苯并噻唑 1g(5.48mmol)、 反应一制备的 N-( 恶唑 -2- 氨基 )-2- 氯 乙酰胺 1.0g(6.3mmol) 和三乙胺 (0.66g， 0.95ml， 6.58mmol) 加入 60ml 丙酮中， 回流， 旋干， 水洗， 干燥后得到固体 1.53g， 产率为 92％。产品的结构鉴定数据如下 ： ESI-MS(m/z，％ ) ： + 307.02(M-H ).
实施例 66、 2- 氯 -N-(2-(2-( 恶唑 -2- 氨基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-) 乙酰 胺
氮气保护下， 反应制备的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-( 恶唑 -2-) 乙酰胺 1.41g(4.60mmol)、 碳酸氢钠 0.77g(9.14mmol) 和二氯甲烷 45ml 混合后， 冰水浴下滴加氯乙 酰氯 0.55ml(6.9mmol)。室温搅拌， 淬灭， 抽滤， 水洗， 干燥后得到固体 1.51g， 产率为 86％。 + 产品的结构鉴定数据如下 ： ESI-MS m/z ： 383.07(M-H )
实施例 67、 2- 氯 -N-(2-(2- 氧 -2-( 吡啶 -2- 氨基 ) 乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-) 乙酰 胺
氮 气 保 护 下， 制 备 的 2-(6- 氨 基 苯 并 噻 唑 -2- 巯 基 )-N-( 吡 啶 -2-) 乙 酰 胺 1.04g(3.3mmol)、 碳酸氢钠 0.6g(6.6mmol) 和二氯甲烷 30ml 搅拌溶解后， 冰水浴下滴加氯 乙酰氯 0.4ml(4.95mmol)。 室温搅拌， 淬灭， 抽滤， 水洗， 干燥后得到固体 117g。 产率为 90％。 1 产品的 H-NMR(DMSO-d6)δ ： 4.29(s， 2H)， 4.45(s， 2H)， 7.54-7.58(m， 2H)， 7.77-7.79(d， J＝ 8.8Hz， 1H)， 8.18-8.19(m， 2H)， 8.35-8.39(d， J ＝ 16.0Hz， 1H)， 8.89(s， 1H)， 10.35(s， 1H)， 13 10.54(s， 1H) ；C-NMR(DMSO-d6)δ ： 39.46， 43.49， 111.69， 113.46， 118.75， 119.69， 121.12， 135.42， 135.57， 138.32， 148.02， 148.91， 151.59， 164.63， 164.79， 166.20 ； ESI-MS m/z ： + 393.0241(M-H ).
实施例 68、 2- 氯 -N-(2-(2-(5- 氯吡啶 -2- 氨基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-) 乙酰胺
氮气保护下， 反应二制备的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(5- 氯吡啶 -2-) 乙 酰胺 1.84g(5.26mmol)、 碳酸氢钠 0.88g(6.3mmol) 和二氯甲烷 35ml 混合后， 冰水浴下滴加 氯乙酰氯 0.7ml(7.9mmol)。室温搅拌， 反应完毕后加水淬灭， 抽滤， 水洗滤饼后干燥得到淡 1 黄色粉末 1.5g， 产率为 70％。产品的结构鉴定 ： H-NMR(DMSO-d6)δ ： 4.29(s， 2H)， 4.44(s， 2H)， 7.50-7.54(m， 1H)， 7.75-7.78(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 8.41(s， 1H)， 7.50-8.41(m， 3H)， 13 10.54(s， 1H)， 11.10(s， 1H) ；C-NMR(DMSO-d6)δ ： 39.48， 43.54， 111.80， 114.52， 118.77， 121.16， 125.38， 135.49， 135.61， 138.01， 148.79， 148.94， 150.27， 164.62， 165.37， 166.35 ； + ESI-MS m/z ： 426.9822(M-H ).
实施例 69、 N-(5- 溴吡啶 -2-)-2-(6-(2- 氯乙酰胺 ) 苯并噻唑 -2- 巯基 ) 乙酰胺氮气保护下， 反应二制备的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(5- 溴吡啶 -2-) 乙 酰胺 1.8g(4.57mmol)、 碳酸氢钠 0.77g(9.14mmol) 和二氯甲烷 40ml 混合后， 冰水浴下滴加 氯乙酰氯 0.6ml(7.13mmol)。室温搅拌。反应完毕后加水淬灭， 抽滤， 水洗滤饼。最终得到 1 橙黄色固体 1.72g， 产率为 80％。产品的结构鉴定数据如下 ： H-NMR(DMSO-d6)δ ： 4.29(s， 2H)， 4.43(s， 2H)， 7.52-7.54(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 7.75-7.78(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 8.47(s， 1H)， 13 8.38(s， 1H)， 8.02(m， 2H)， 10.54(s， 1H)， 11.09(s， 1H) ；C-NMR(DMSO-d6)δ ： 39.98， 44.05， 112.29， 114.26， 115.56， 119.26， 121.66， 135.79， 135.99， 141.22， 149.12， 149.44， 151.07， + 165.11， 165.23， 166.88 ； ESI-MS m/z ： 472.9353(M-H ).
实施例 70、 2- 氯 -N-(2-(2-(5- 甲基吡啶 -2- 氨基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-) 乙酰胺
氮气保护下， 反应二制备的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(5- 甲基吡啶 -2-) 乙酰胺 1.5g(4.60mmol)、 碳酸氢钠 0.77g(9.14mmol) 和二氯甲烷 40ml 混合后， 冰水浴下 滴加氯乙酰氯 0.6ml(6.9mmol)。室温搅拌， 反应完毕后加水淬灭， 抽滤， 水洗滤饼。最 1 终得到淡黄色固体 1.42g， 产率为 76 ％。产品的结构鉴定数据如下 ： H-NMR(DMSO-d6)δ ： 2.25(s， 3H)， 4.29(s， 2H)， 4.41(s， 2H)， 7.51-7.54(dd， J ＝ 4.4， 4.6Hz， 1H)， 7.60-7.62(dd， J ＝ 4.2， 4.4Hz， 1H)， 7.76-7.78(d， J ＝ 9.2Hz， 1H)， 7.93-7.95(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 8.18(s， 13 1H)， 8.37-8.38(d， J ＝ 1Hz， 1H)， 10.54(s， 1H)， 10.82(s， 1H) ；C-NMR(DMSO-d6)δ ： 17.22， 39.46， 43.53， 111.75， 113.13， 118.74， 121.14， 128.73， 135.30， 135.47， 139.06， 147.22， + 148.95， 149.20， 164.70， 164.74， 166.02 ； ESI-MS m/z ： 407.0397(M-H ).
实施例 71、 2- 氯 -N-(2-(2- 氧 -2-( 吡啶 -3- 氨基 ) 乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-) 乙酰 胺
氮 气 保 护 下， 制 备 的 2-(6- 氨 基 苯 并 噻 唑 -2- 巯 基 )-N-( 吡 啶 -3-) 乙 酰 胺1.04g(3.3mmol)、 碳酸氢钠 1.4g(17mmol) 和二氯甲烷 30ml 混合后， 冰水浴下滴加氯乙酰 氯 0.4ml(5.0mmol)。室温搅拌， 反应完毕后洗涤， 干燥， 旋干后结晶， 最终得到固体 1.2g。 1 产率为 90 ％。产品的结构鉴定数据如下 ： H-NMR(DMSO-d6)δ ： 4.29(s， 2H)， 4.45(s， 2H)， 7.54-7.56(d， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 7.68-7.72(t， J ＝ 6.6Hz， 1H)， 7.77-7.79(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 8.28-8.31(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 8.39(1H， s)， 8.46-8.47(d， J ＝ 4.4Hz， 1H)， 8.99(s， 1H)， 13 10.66(s， 1H)， 11.20(s， 1H) ；C-NMR(DMSO-d6)δ ： 39.43， 43.50， 111.67， 118.52， 118.72， 121.18， 130.46， 135.43， 135.51， 140.30， 148.83， 148.89， 164.36， 164.80， 166.47 ； ESI-MS + m/z ： 393.0247(M-H ).
实施例 72、 2- 氯 -N-(2-(2-(2- 氯吡啶 -4- 氨基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-) 乙酰胺
氮气保护下， 反应二制备的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(2- 氯吡啶 -4-) 乙酰胺 1.84g(5.26mmol)、 碳酸氢钠 0.88g(6.3mmol) 和二氯甲烷 35ml 混合后， 冰水浴下滴 加氯乙酰氯 0.6ml(7.89mmol)。室温搅拌， 反应完毕后加水淬灭， 抽滤， 水洗滤饼。最终得 1 到固体 1.60g， 产率为 74％。产品的结构鉴定数据如下 ： H-NMR(DMSO-d6)δ ： 4.29(s， 2H)， 4.43(s， 2H)， 7.47-7.54(m， 2H)， 7.75-7.78(m， 2H)， 8.29-8.30(d， J ＝ 5.6Hz， 1H)， 8.39(s， 13 1H) ， 10.55(s ， 1H) ， 11.08(s ， 1H) ； C-NMR(DMSO-d 6) δ ： 39.48 ， 43.53 ， 111.81 ， 112.46 ， 112.62， 118.76， 121.15， 135.34， 135.49， 147.83， 148.85， 150.47， 151.02， 164.34， 164.75， + 166.93 ； ESI-MS m/z ： 426.9883(M-H ).
实施例 73、 2- 氯 -N-(2-(2-(2- 氯 -4- 甲基吡啶 -3- 氨基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻 唑 -6-) 乙酰胺
氮气保护下， 反应制备的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(2- 氯 -4- 甲基吡啶 -) 乙酰胺 1.824g(5mmol)、 碳酸氢钠 0.88g(6.3mmol) 和二氯甲烷 35ml 混合后， 冰水浴下滴加 氯乙酰氯 0.8ml(10mmol)。 室温搅拌， 反应完毕后加水淬灭， 抽滤， 水洗滤饼。 最终得到黄绿 1 2.22(s， 3H)， 4.29(s， 2H)， 4.41(s， 色晶体 1.7g， 产率为 80％。产品的 H-NMR(DMSO-d6)δ ： 2H)， 7.34-7.35(d， J ＝ 4.8Hz， 1H)， 7.63-7.70(t， J ＝ 8.8Hz， 2H)， 8.19-8.20(d， J ＝ 4.8Hz， 13 1H)， 8.55(s， 1H)， 10.24(s， 1H)， 10.37(s， 1H) ；C-NMR(DMSO-d6)δ ： 17.81， 39.54， 43.53， 111.87， 118.83， 121.08， 125.10， 130.49， 135.30， 135.56， 147.02， 148.67， 148.77， 148.99，
164.43， 164.76， 165.62 ； ESI-MS m/z ： 440.9992(M-H+).
实施例 74、 2- 氯 -N-(2-(2- 氧 -2-( 嘧啶 -2- 氨基 ) 乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-) 乙酰 胺
氮气保护下， 反应制备的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-( 嘧啶 -2-) 乙酰 胺 1.824g(5mmol)、 三乙胺 0.9ml(6.0mmol) 和二氯甲烷 35ml 混合后， 冰水浴下滴加氯乙 酰氯 0.8ml(10mmol)。室温搅拌， 反应完毕后淬灭， 水洗， 旋干后重结晶得到固体 1.61g， 1 产率为 82 ％。产品的结构鉴定数据如下 ： H-NMR(DMSO-d6)δ ： 4.29(s， 2H)， 4.59(s， 2H)， 7.21-7.23(t， J ＝ 4.8Hz， 1H)， 7.53-7.56(d， J ＝ 4.4Hz， 1H)， 7.77-7.79(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 13 8.38(s， 1H)， 8.68-8.70(d， J ＝ 2.4Hz， 2H)， 10.58(s， 1H)， 11.04(s， 1H) ；C-NMR(DMSO-d6) δ： 39.46， 43.52， 109.98， 117.43， 121.60(2C)， 136.22， 147.29(2C)， 157.33， 157.66(2C)，158.40， 166.22 ； ESI-MS m/z ： 394.0009(M-H+).
实施例 75、 2- 氯 -N-(2-(2- 氧 -2-( 噻唑 -2- 氨基 ) 乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-) 乙酰 胺
氮气保护下， 反应制备的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-( 噻唑 -2-) 乙酰 胺 1.61g(5mmol)、 碳酸氢钠 0.88g(6.3mmol) 和二氯甲烷 35ml 混合后， 冰水浴下滴加氯乙 酰氯 0.8ml(10mmol)。室温搅拌， 反应完毕后淬灭， 水洗， 旋干后重结晶得到固体 1.73g， 1 产率为 88 ％。产品的结构鉴定数据如下 ： H-NMR(DMSO-d6)δ ： 4.29(s， 2H)， 4.46(s， 2H)， 7.25-7.26(d， J ＝ 3.6Hz， 1H)， 7.50-7.55(m， 2H)， 7.75-7.78(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 8.38(s， 13 1H) ， 10.55(s ， 1H) ， 12.53(s ， 1H) ； C-NMR(DMSO-d 6) δ ： 39.46 ， 43.54 ， 111.81 ， 113.79 ，
118.77， 121.18， 135.33， 135.52， 137.71， 148.87， 157.75， 164.32， 164.74， 165.64 ； ESI-MS + m/z ： 398.9816(M-H ).
实施例 76、 N-(2-(2- 氧 -2-( 吡啶 -2- 氨基 ) 乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-)-2- 甲氧基 苯甲酰胺
氮 气 保 护 下， 制 备 的 2-(6- 氨 基 苯 并 噻 唑 -2- 巯 基 )-N-( 吡 啶 -2-) 乙 酰 胺 1.04g(3.3mmol)、 碳酸氢钠 0.6g(6.6mmol) 和二氯甲烷 50ml 混合后， 滴加实施例 4 制备的 邻甲氧基苯甲酰氯 1ml(6.6mmol)。室温搅拌， 反应完毕。用饱和碳酸氢钠溶液洗涤收得的 反应溶液， 再用二氯甲烷萃取， 合并有机相， 饱和食盐水洗涤， 硅胶柱层析分离纯化， 最终得 1 到固体 1.34g。产率为 90％。产品的结构鉴定数据如下 ： H-NMR(DMSO-d6)δ ： 3.90(s， 3H)， 4.45(s， 2H)， 7.06-7.10(t， J ＝ 7.4Hz， 1H)， 7.12-7.15(t， J ＝ 6.0Hz， 1H)， 7.18-7.20(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.49-7.54(m， 1H)， 7.63-7.69(m， 2H)， 7.77-7.82(dd， J ＝ 8.0， 8.4Hz， 2H)， 8.35-8.36(d， J ＝ 3.6Hz， 1H)， 8.03-8.05(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 8.54(s， 1H)， 10.35(s， 1H)， + 10.91(s， 1H) ； ESI-MS m/z ： 451.0787(M-H ).
实施例 77、 N-(2-(2-(5- 氯吡啶 -2- 氨基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-)-2- 甲氧 基苯甲酰胺
氮气保护下， 反应二制备的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(5- 氯吡啶 -2-) 乙酰胺 1.84g(5.26mmol)、 碳酸氢钠 0.88g(6.3mmol) 和二氯甲烷 50ml 混合后， 滴加实施 例 4 制备的邻甲氧基苯甲酰氯 1.6ml(10.52mmol)。室温搅拌， 反应完毕后加水淬灭， 分 1 液， 水洗最终得到固体 1.96g， 产率为 77 ％。产品的结构鉴定数据如下 ： H-NMR(DMSO-d6) δ： 3.90(s， 3H)， 4.45(s， 2H)， 7.18-7.20(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.50-7.53(t， J ＝ 7.4Hz， 2H)， 7.63-7.75(m， 2H)， 7.76-7.78(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 7.91-7.93(dd， J ＝ 4.4Hz， 1H)， 8.07-8.09(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 8.41-8.42(d， J ＝ 2.4Hz， 1H)， 8.54(s， 1H)， 10.35(s， 1H)， 13 11.11(s， 1H) ；C-NMR(DMSO-d6)δ ： 39.46， 55.84， 111.83， 111.93， 114.52， 119.17， 120.46， 120.99， 124.68， 125.38， 129.66， 132.09， 135.41， 135.95， 137.99， 146.43， 148.73， 150.28， + 156.46， 164.17， 164.53， 166.37 ； ESI-MS m/z ： 485.0521(M-H ).
实施例 78、 N-(2-(2-(5- 溴吡啶 -2- 氨基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-)-2- 甲氧 基苯甲酰胺
氮气保护下， 反应二制备的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(5- 溴吡啶 -2-) 乙 酰胺 1.8g(4.57mmol)、 碳酸氢钠 0.77g(9.14mmol) 和二氯甲烷 60ml 混合后， 滴加实施例 4 制备的邻甲氧基苯甲酰氯 1.4ml(9.14mmol)。 室温搅拌， 反应完毕后加水淬灭， 分液， 水洗最 1 终得到固体最终得到固体 2.18g， 产率为 90％。 产品的结构鉴定数据如下 ： H-NMR(DMSO-d6) δ： 3.90(s， 3H)， 4.45(s， 2H)， 7.05-7.09(t， J ＝ 7.4Hz， 1H)， 7.17-7.20(d， J ＝ 8.4Hz，1H)， 7.49-7.53(t， J ＝ 7.8Hz， 1H)， 7.63-7.69(d， J ＝ 10.8Hz， 2H)， 7.76-7.78(d， J ＝ 8.8Hz ， 1H) ， 7.95-8.03(m ， 2H) ， 8.48(s ， 1H) ， 8.54(s ， 1H) ， 10.35(s ， 1H) ， 11.10(s ， 1H) ； 13 C-NMR(DMSO-d 6) δ ： 39.49 ， 55.87 ， 111.86 ， 111.95 ， 113.78 ， 115.08 ， 119.19 ， 120.48 ， 121.01， 124.69， 129.68， 132.11， 135.41， 135.96， 148.63， 148.74， 150.59(2C)， 156.48， + 164.17， 164.54， 166.41 ； ESI-MSm/z ： 529.0070(M-H ).
实施例 79、 N-(2-(2-(5- 甲基吡啶 -2- 氨基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-)-2- 甲 氧基苯甲酰胺
氮气保护下， 反应二制备的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(5- 甲基吡啶 -2-) 乙酰胺 1.5g(4.60mmol)、 碳酸氢钠 0.77g(9.14mmol) 和二氯甲烷 40ml 混合后， 滴加实施例 4 制备的邻甲氧基苯甲酰氯 1.4ml(9.2mmol)。室温搅拌， 反应完毕后加水淬灭， 分液， 水洗。 1 最终得到淡黄色固体 1.88g， 产率为 88 ％。产品的结构鉴定数据如下 ： H-NMR (DMSO-d6)δ： 2.28(s， 3H)， 3.90(s， 3H)， 4.45(s， 2H)， 7.06-7.10(t， J ＝ 7.6Hz， 1H)， 7.18-7.20(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.50-7.62(m， 2H)， 7.65-7.70(t， J ＝ 10.2Hz， 2H)， 7.77-7.79(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 7.95(s， 1H)， 8.18(s， 1H)， 8.52-8.53(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)， 10.31(s， 1H)， 10.76(s， 13 1H) ；C-NMR(DMSO-d6)δ ： 17.24， 39.49， 55.86， 111.84， 111.96， 112.99， 119.18， 120.47， 121.00， 124.71， 128.61， 129.67， 132.10， 135.41， 135.95， 138.57， 147.80， 148.79， 149.49， + 156.48， 164.33， 164.55， 165.90 ； ESI-MS m/z ： 465.1071(M-H ).
实施例 80、 2N-(2-(2- 氧 -2-( 吡啶 -3- 氨基 ) 乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-)-2- 甲氧基 苯甲酰胺
氮 气 保 护 下， 制 备 的 2-(6- 氨 基 苯 并 噻 唑 -2- 巯 基 )-N-( 吡 啶 -3-) 乙 酰 胺 1.04g(3.3mmol)、 碳酸氢钠 0.6g(6.6mmol) 和二氯甲烷 30ml 混合后， 滴加实施例 4 制备的 邻甲氧基苯甲酰氯 1ml(6.6mmol)。室温搅拌， 反应完毕后加水淬灭， 旋干， 水洗最终得到固 1 体 1.27g。 产率为 85％。 产品的 H-NMR(DMSO-d6)δ ： 3.90(s， 3H)， 4.45(s， 2H)， 7.06-7.10(t， J ＝ 7.6Hz， 1H)， 7.18-7.20(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.50-7.62(m， 2H)， 7.54-7.56(d， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 7.68-7.72(t， J ＝ 6.6Hz， 1H)， 7.77-7.79(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 8.28-8.31(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 8.46-8.47(d， J ＝ 4.4Hz， 1H)， 8.39(s， 1H)， 8.95(s， 1H)， 10.36(s， 1H)， 11.12(s， 13 1H) ；C-NMR(DMSO-d6)δ ： 39.44， 55.62， 111.90， 112.33， 11921， 119.95， 120.99， 121.24， 124.69， 126.23， 129.67， 132.97， 135.41， 135.96， 140.75， 144.51， 148.75， 156.47， 158.03，
164.19， 164.57， 167.32 ； ESI-MS m/z ： 451.0533(M-H+).
实施例 81、 N-(2-(2-(2- 氯吡啶 -4- 氨基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-)-2- 甲氧 基苯甲酰胺
氮气保护下， 反应二制备的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(2- 氯吡啶 -4-) 乙 酰胺 1.84g(5.26mmol)、 碳酸氢钠 0.88g(6.3mmol) 和二氯甲烷 35ml 混合后， 滴加实施例 4 制备的邻甲氧基苯甲酰氯 1.6ml(10.52mmol)。室温搅拌， 反应完毕后淬灭， 水洗， 旋干后重 1 结晶得到固体 2.0g， 产率为 80 ％。产品的 H-NMR(DMSO-d6)δ ： 3.90(s， 3H)， 4.44(s， 2H)， 7.06-7.09(t， J ＝ 7.4Hz， 1H)， 7.18-7.20(d， J ＝ 8Hz， 1H)， 7.47-7.53(m， 2H)， 7.53-7.62(m， 2H)， 7.75-7.76(t， J ＝ 5.8Hz， 1H)， 7.78(s， 1H)， 8.29-8.30(d， J ＝ 5.6Hz， 1H)， 8.55(s， 1H)， 13 10.35(s， 1H)， 11.06(s， 1H) ；C-NMR(DMSO-d6)δ ： 39.44， 55.84， 111.90， 111.93， 112.47，112.62， 119.20， 120.46， 120.99， 124.67， 129.65， 132.11， 135.41， 135.97， 148.65， 150.47， + 151.03， 156.45， 163.91， 164.57， 166.95 ； ESI-MS m/z ： 485.0491(M-H ).
实 施 例 82、 N-(2-(2-(2- 氯 -4- 甲 基 吡 啶 -3- 氨 基 )-2- 氧 乙 巯 基 ) 苯 并 噻 唑 -6-)-2- 甲氧基苯甲酰胺
氮气保护下， 反应制备的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(2- 氯 -4- 甲基吡啶 -) 乙酰胺 1.824g(5mmol)、 碳酸氢钠 0.88g(6.3mmol) 和二氯甲烷 55ml 混合后， 滴加实施例 4 制备的邻甲氧基苯甲酰氯 1.5ml(10mmol)。 室温搅拌， 反应完毕后加水淬灭， 分液， 水洗。 最 1 终得到黄色固体 2.30g， 产率为 92％。 产品的 H-NMR(DMSO-d6)δ ： 2.22(s， 3H)， 3.90(s， 3H)， 4.41(s， 2H)， 7.06-7.10(t， J ＝ 7.2Hz， 1H)， 7.19-7.21(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.34-7.35(d， J ＝ 4.8Hz， 1H)， 7.50-7.54(t， J ＝ 7.8Hz， 1H)， 7.63-7.65(d， J ＝ 7.2Hz， 1H)， 7.68-7.70(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 7.78-7.81(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 8.19-8.20(d， J ＝ 4.8Hz， 1H)， 8.55(s， 1H)， 13 10.24(s， 1H)， 10.37(s， 1H) ；C-NMR(DMSO-d6)δ ： 17.84， 39.51， 55.87， 111.91， 111.97， 119.22， 120.49， 120.92， 124.76， 129.65， 130.51， 132.11， 135.47， 135.96， 147.05， 148.70， + 148.76， 156.48， 164.03， 164.61， 165.67 ； ESI-MS m/z ： 500.0624(M-H ).
实施例 83、 N-(2-(2- 氧 -2-( 吡啶 -2- 氨基 ) 乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-)-2- 甲氧基 苯甲酰胺
氮气保护下， 反应制备的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-( 嘧啶 -2-) 乙酰 胺 1.824g(5mmol)、 碳酸氢钠 0.88g(6.3mmol) 和二氯甲烷 85ml 混合后， 滴加实施例 4 制 备的邻甲氧基苯甲酰氯 1.5ml(10mmol)。室温搅拌， 反应完毕后加水淬灭， 分液， 水洗。最 1 终得到橙黄色固体 1.74g， 产率为 77 ％。产品的结构鉴定数据如下 ： H-NMR(DMSO-d6)δ ： 3.90(s， 3H)， 4.46(s， 2H)， 7.06-7.10(t， J ＝ 7.4Hz， 1H)， 7.18-7.24(m， 2H)， 7.50-7.54(t， J ＝ 7.6Hz ， 1H) ， 7.64-7.69(m ， 2H) ， 7.77-7.79(d ，J ＝ 8.8Hz ， 1H) ， 8.54(s ， 1H) ， 13 8.68-8.70(d， J ＝ 8.4Hz， 2H)， 10.35(s， 1H)， 11.04(s， 1H) ；C-NMR(DMSO-d6)δ ： 39.46， 55.86 ， 111.84 ， 111.95 ， 119.17 ， 120.48 ， 121.00(2C) ， 124.67 ， 129.68 ， 132.12 ， 135.38 ， 135.90 ， 148.80(2C) ， 156.48 ， 157.37 ， 158.41 ， 164.45 ， 164.55 ， 166.18 ； ESI-MS m/z ： + 452.0421(M-H ).
实施例 84、 N-(2-(2- 氧 -2-( 噻唑 -2- 氨基 ) 乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-)-2- 甲氧基 苯甲酰胺
氮气保护下， 反应制备的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-( 噻唑 -2-) 乙酰 胺 1.61g(5mmol)、 碳 酸 氢 钠 0.88g(6.3mmol) 和 二 氯 甲 烷 80ml 混 合 后， 滴加氯乙酰氯 1.5ml(10mmol)。室温搅拌， 反应完毕后加水淬灭， 分液， 水洗。最终得到黄色固体 2.05g， 1 产率为 90 ％。产品的结构鉴定数据如下 ： H-NMR(DMSO-d6)δ ： 3.90(s， 3H)， 4.47(s， 2H)， 7.06-7.10(t， J ＝ 7.4Hz， 1H)， 7.18-7.20(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.25-7.26(d， J ＝ 3.6Hz， 1H)， 7.50-7.53(t， J ＝ 6.4Hz， 2H)， 7.64-7.69(m， 2H)， 7.76-7.78(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 8.54(s， 13 1H) ， 10.36(s ， 1H) ， 12.55(s ， 1H) ； C-NMR(DMSO-d 6) δ ： 39.37 ， 56.37 ， 112.39 ， 112.47 ， 114.32， 119.71， 120.98， 121.54， 125.24， 130.15， 132.60， 135.95， 136.50， 138.24， 149.19， + 156.97， 158.27， 164.38， 165.07， 166.18 ； ESI-MS m/z ： 457.0457(M-H ).
实施例 85、 2- 氯 -N-(2-(2-(4- 氯吡啶 -2- 氨基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-)乙酰胺
氮气保护下， 反应二制备的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(4- 氯吡啶 -2-) 乙 酰胺 1.84g(5.26mmol)、 碳酸氢钠 0.88g(6.3mmol) 和 ； 氯甲烷 35ml 混合后， 冰水浴下滴加 氯乙酰氯 0.6ml(7.89mmol)。 室温搅拌， 反应完毕后加水淬灭， 抽滤， 水洗滤饼。 纯化后最终 1 得到固体 1.61g， 产率为 75％。 产品的结构鉴定数据如下 ： H-NMR(DMSO-d6)δ ： 4.29(s， 2H)， 4.44(s， 2H)， 7.50-7.54(m， 1H)， 7.75-7.78(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 8.41(s， 1H)， 7.50-8.41(m， + 3H)， 10.54(s， 1H)， 11.10(s， 1H) ； ESI-MS m/z ： 426.99(M-H )
实施例 86、 2- 氯 -N-(2-(2-(3- 氯吡啶 -2- 氨基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-) 乙酰胺
氮气保护下， 反应二制备的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(3- 氯吡啶 -2-) 乙 酰胺 1.84g(5.26mmol)、 碳酸氢钠 0.88g(6.3mmol) 和二氯甲烷 35ml 混合后， 冰水浴下滴加 氯乙酰氯 0.6ml(7.89mmol)。 室温搅拌， 反应完毕后加水淬灭， 抽滤， 水洗滤饼。 最终得到黄 1 色固体 1.56g， 产率为 73％。产品的结构鉴定数据如下 ： H-NMR(DMSO-d6)δ ： 4.29(s， 2H)， 4.45(s， 2H)， 7.50-7.54(m， 1H)， 7.75-7.78(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 8.42(s， 1H)， 7.50-8.41(m， + 3H)， 10.54(s， 1H)， 11.10(s， 1H) ； ESI-MS m/z ： 426.98(M-H )
实施例 87、 2- 氯 -N-(2-(2-(6- 氯吡啶 -2- 氨基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-) 乙酰胺
氮气保护下， 反应二制备的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(6- 氯吡啶 -2-) 乙 酰胺 1.84g(5.26mmol)、 碳酸氢钠 0.88g(6.3mmol) 和二氯甲烷 35ml 混合后， 冰水浴下滴加 氯乙酰氯 0.6ml(7.89mmol)。 室温搅拌， 反应完毕后加水淬灭， 抽滤， 水洗滤饼。 最终得到黄 13 色固体 1.63g， 产率为 76％。 产品的结构鉴定数据如下 ：C-NMR(DMSO-d6)δ ： 39.48， 43.54， 111.81， 114.50， 118.77， 121.18， 125.38， 135.49， 135.61， 138.03， 148.79， 148.94， 150.27， + 164.65， 165.37， 166.35 ； ESI-MS m/z ： 427.01(M-H )
实施例 88、 N-(4- 溴吡啶 -2-)-2-(6-(2- 氯乙酰胺 ) 苯并噻唑 -2- 巯基 ) 乙酰胺
氮气保护下， 反应二制备的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(4- 溴吡啶 -2-) 乙 酰胺 1.8g(4.57mmol)、 碳酸氢钠 0.77g(9.14mmol) 和二氯甲烷 40ml 混合后， 冰水浴下滴加 氯乙酰氯 0.55ml(6.86mmol)。室温搅拌， 反应完毕后加水淬灭， 抽滤， 水洗滤饼。最终得到 1 橙黄色固体 1.59g， 产率为 74％。产品的结构鉴定数据如下 ： H-NMR(DMSO-d6)δ ： 4.29(s， 2H)， 4.43(s， 2H)， 7.52-7.54(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 7.75-7.78(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 8.47(s， 1H)， 8.38(s， 1H)， 8.02(m， 2H)， 10.54(s， 1H)， 11.09(s， 1H) ； ESI-MS m/z ： 470.94(M-H+).
实施例 89、 N-(3- 溴吡啶 -2-)-2-(6-(2- 氯乙酰胺 ) 苯并噻唑 -2- 巯基 ) 乙酰胺
氮气保护下， 反应二制备的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(3- 溴吡啶 -2-) 乙 酰胺 1.8g(4.57mmol)、 碳酸氢钠 0.77g(9.14mmol) 和二氯甲烷 40ml 混合后， 冰水浴下滴加 氯乙酰氯 0.55ml(6.86mmol)。室温搅拌， 反应完毕后加水淬灭， 抽滤， 水洗滤饼。最终得到 1 橙黄色固体 1.77g， 产率为 82％。产品的结构鉴定数据如下 ： H-NMR(DMSO-d6)δ ： 4.29(s， 2H)， 4.45(s， 2H)， 7.52-7.54(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 7.75-7.78(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 8.48(s， 1H)， + 8.38(s， 1H)， 8.05(m， 2H)， 10.54(s， 1H)， 11.09(s， 1H) ； ESI-MS m/z ： 470.97(M-H ).
实施例 90、 N-(6- 溴吡啶 -2-)-2-(6-(2- 氯乙酰胺 ) 苯并噻唑 -2- 巯基 ) 乙酰胺
氮气保护下， 反应二制备的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(6- 溴吡啶 -2-) 乙酰胺 1.8g(4.57mmol)、 碳酸氢钠 0.77g(9.14mmol) 和二氯甲烷 40ml 混合后， 冰水浴下 滴加氯乙酰氯 0.55ml(6.86mmol)。室温搅拌， 反应完毕后加水淬灭， 抽滤， 水洗滤饼。最 1 终得到固体 1.68g， 产率为 78％。产品的结构鉴定数据如下 ： H-NMR(DMSO-d6)δ ： 4.29(s， 2H)， 4.45(s， 2H)， 7.52-7.54(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 7.75-7.78(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 8.47(s， 1H)， + 8.39(s， 1H)， 8.05(m， 2H)， 10.54(s， 1H)， 11.09(s， 1H) ； ESI-MS m/z ： 471.03(M-H ).
实施例 91、 2- 氯 -N-(2-(2-(4- 甲基吡啶 -2- 氨基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-) 乙酰胺
氮气保护下， 反应二制备的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(4- 甲基吡啶 -2-) 乙酰胺 1.5g(4.60mmol)、 碳酸氢钠 0.77g(9.14mmol) 和二氯甲烷 40ml 混合后， 冰水浴下滴 加氯乙酰氯 0.55ml(6.9mmol)。室温搅拌， 反应完毕后加水淬灭， 抽滤， 水洗滤饼。最终得 1 到黄色固体 1.50g， 产率为 80％。产品的结构鉴定数据如下 ： H-NMR(DMSO-d6)δ ： 2.25(s， 3H)， 4.29(s， 2H)， 4.43(s， 2H)， 7.51-7.54(dd， J ＝ 4.4， 4.6Hz， 1H)， 7.60-7.65(dd， J ＝ 4.2， 4.4Hz， 1H)， 7.76-7.78(d， J ＝ 9.2Hz， 1H)， 7.93-7.95(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 8.16(s， 1H)， + 8.37-8.38(d， J ＝ 1Hz， 1H)， 10.54(s， 1H)， 10.82(s， 1H) ； ESI-MS m/z ： 407.05(M-H ).
实施例 92、 2- 氯 -N-(2-(2-(3- 甲基吡啶 -2- 氨基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-) 乙酰胺
氮气保护下， 反应二制备的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(3- 甲基吡啶 -2-) 乙酰胺 1.5g(4.60mmol)、 碳酸氢钠 0.77g(9.14mmol) 和二氯甲烷 40ml 混合后， 冰水浴下滴 加氯乙酰氯 0.55ml(6.9mmol)。室温搅拌， 反应完毕后加水淬灭， 抽滤， 水洗滤饼。最终得 1 到黄色固体 1.46g， 产率为 78％。产品的结构鉴定数据如下 ： H-NMR(DMSO-d6)δ ： 2.25(s， 3H)， 4.29(s， 2H)， 4.43(s， 2H)， 7.51-7.56(dd， J ＝ 4.4， 4.6Hz， 1H)， 7.60-7.62(dd， J ＝ 4.2， 4.4Hz， 1H)， 7.76-7.78(d， J ＝ 9.2Hz， 1H)， 7.93-7.95(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 8.18(s， 1H)， + 8.37-8.38(d， J ＝ 1Hz， 1H)， 10.54(s， 1H)， 10.83(s， 1H) ； ESI-MS m/z ： 407.13(M-H )
实施例 93、 2- 氯 -N-(2-(2-(6- 甲基吡啶 -2- 氨基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻唑 -6-) 乙酰胺
氮气保护下， 反应二制备的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(6- 甲基吡啶 -2-) 乙酰胺 1.5g(4.60mmol)、 碳酸氢钠 0.77g(9.14mmol) 和二氯甲烷 40ml 混合后， 冰水浴下滴 加氯乙酰氯 0.55ml(6.9mmol)。室温搅拌， 反应完毕后加水淬灭， 抽滤， 水洗滤饼。最终得 1 H-NMR(DMSO-d6)δ ： 2.25(s， 到黄色固体 1.53g， 产率为 82％。产品的结构鉴定数据如下 ： 3H)， 4.29(s， 2H)， 4.43(s， 2H)， 7.51-7.54(dd， J ＝ 4.4， 4.6Hz， 1H)， 7.60-7.62(dd， J ＝4.2， 4.4Hz， 1H)， 7.76-7.78(d， J ＝ 9.2Hz， 1H)， 7.93-7.95(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 8.20(s， 1H)， + 8.37-8.38(d， J ＝ 1Hz， 1H)， 10.54(s， 1H)， 10.84(s， 1H) ； ESI-MS m/z ： 407.08(M-H ).
实施例 94、 2- 氯 -N-(2-(2-(4- 氯 -6- 甲基嘧啶 -2- 氨基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻 唑 -6-) 乙酰胺
氮气保护下， 反应制备的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(4- 氯 -6- 甲基吡 啶 -2-) 乙酰胺 1.68g(4.60mmol)、 碳酸氢钠 0.77g(9.14mmol) 和二氯甲烷 40ml 混合后， 冰 水浴下滴加氯乙酰氯 0.55ml(6.9mmol)。室温搅拌， 反应完毕后加水淬灭， 抽滤， 水洗滤饼。 + 最终得到淡黄色固体 1.65g， 产率为 81％。产品的 ESI-MS m/z ： 441.98(M-H )
实施例 95、 2- 氯 -N-(2-(2-(4， 6- 二甲氧基嘧啶 -2- 氨基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻 唑 -6-) 乙酰胺
氮气保护下， 反应制备的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(4， 6- 二甲氧基嘧 啶 -2-) 乙酰胺 1.74g(4.60mmol)、 碳酸氢钠 0.77g(9.14mmol) 和二氯甲烷 45ml 混合后， 冰 水浴下滴加氯乙酰氯 0.55ml(6.9mmol)。室温搅拌， 反应完毕后加水淬灭， 抽滤， 水洗滤饼。 + 最终得到淡黄色固体 1.69g， 产率为 81％。产品的 ESI-MS m/z ： 454.15(M-H )
实 施 例 96、 2- 氯 -N-(2-(2-(4， 6- 二 氯 嘧 啶 -2- 氨 基 )-2- 氧 乙 巯 基 ) 苯 并 噻 唑 -6-) 乙酰胺
氮气保护下， 反应制备的 2-(6- 氨基苯并噻唑 -2- 巯基 )-N-(4， 6- 二氯嘧啶 -2-) 乙酰胺 1.78g(4.60mmol)、 碳酸氢钠 0.77g(9.14mmol) 和二氯甲烷 40ml 混合后， 冰水浴下滴 加氯乙酰氯 0.55ml(6.9mmol)。 室温搅拌， 反应完毕后加水淬灭， 抽滤， 水洗滤饼。 最终得到 + 灰白色固体 1.87g， 产率为 88％。产品的 ESI-MS m/z ： 462.02(M-H )实施例 97、 2- 氯 -N-(2-(2-(4， 6- 二羟基嘧啶 -2- 氨基 )-2- 氧乙巯基 ) 苯并噻 唑 -6-) 乙酰胺
氮 气 保 护 下， 反 应 制 备 的 2-(6- 氨 基 苯 并 噻 唑 -2- 巯 基 )-N-(4， 6- 二 羟 基 嘧 啶 -2-) 乙酰胺 1.61g(4.60mmol)、 碳酸氢钠 0.77g(9.14mmol) 和二氯甲烷 40ml 混合后， 冰 水浴下滴加氯乙酰氯 0.55ml(6.9mmol)。室温搅拌， 反应完毕后加水淬灭， 抽滤， 水洗滤饼。 + 最终得到橙黄色固体 1.67g， 产率为 85％。产品的 ESI-MS m/z ： 425.98(M-H )
效学实验部分
试验例 细胞增殖抑制实验
1、 实验材料
DMEM、 胎牛血清、 胰酶等购自 Gibco BRL 公司 (Invitrogen Corporation， USA)， 溴 化噻唑蓝四唑 (MTT)、 二甲亚砜 (DMSO) 为 Sigma 公司 (USA) 产品。实施例 8 ～ 13 制备得到 的化合物在体外实验时用 DMSO 配制成 10mM 储存液， 置于 4℃冰箱避光保存备用， 临用时再 用培养基稀释至所需浓度。
细胞系及培养 ： 本实验所用的人肝癌细胞株 (HepG2)、 人结肠癌细胞株 (HCT116) 均购于美国 ATCC 公司。
人肝癌细胞株 (HepG2)， 用含 10％胎牛血清、 100U/mL 青霉素、 100μg/mL 链霉素的 DMEM 完全培养基、 5％ CO2、 37℃培养。
人结肠癌细胞株 (SW480) 用含 10％胎牛血清、 100U/mL 青霉素、 100μg/mL 链霉素 的 DMEM 完全培养基、 5％ CO2、 37℃培养。
人子宫颈癌细胞株 (HeLa) 用含 10％胎牛血清、 100U/mL 青霉素、 100μg/mL 链霉素 的 DMEM 完全培养基、 5％ CO2、 37℃培养。
2、 实验方法 (MTT 法 )
用完全培养液调整细胞浓度为 3×103/mL， 接种于 96 孔板， 每孔 200μL， 培养过 夜， 次日分别用不同剂量的实施制备得到的化合物 ( 终浓度分别为 20， 10， 5， 2.5， 1.25， 0.625， 0.312μM) 处理细胞作为实验组， 同时用等体积的空白溶剂作为对照组， 对照组的 DMSO 浓度为 0.1％ (0.1％的 DMSO 对细胞增殖无影响 )。每个组设 5 个复孔， 37℃， 5％ CO2 培养。 分别于培养 48、 72 小时后， 取 1 个培养板， 每孔加入 5mg/mL MTT 试剂 20μL， 继续培养 2h， 弃上清， 再加 DMSO 150μL， 振荡混匀 15min， 用酶标仪 (λ ＝ 570nm) 测定吸光度 (A) 值 (A 值与活细胞数成正比 )， 取其平均值。 相对细胞增殖抑制率 (％ ) ＝ ( 溶剂对照组 A570- 实 验组 A570)/ 溶剂对照组 A570×100％。同时， 根据相对细胞增殖抑制率计算出半数抑制浓度 (IC50) 来表示化合物对肿瘤细胞增殖抑制作用。
3、 实验结果
实施制备得到的化合物处理 HepG2、 SW480 和 HeLa 细胞 48h 的半数抑制浓度 (IC50)
见表 1。 表 1 中的数据说明了实施例 67 ～ 84 制备得到的化合物作用于人肝癌细胞株 HepG2、 人结肠癌细胞株 SW480 和人宫颈癌细胞株 HeLa 后， 实施例均显示出良好的抗肿瘤效 果， 其中实施例 67 ～ 75， 实施例 78 ～ 79 和实施例 82 ～ 83 有明显的抑制肿瘤细胞增殖作 用， 具有很好的广谱抗肿瘤活性。 各剂量组与溶剂对照组相比， 相对细胞增殖抑制率差异均 有统计学意义 (P ＜ 0.05)。其中尤其以实施例 67 ～ 75 制得的化合物的体外抑制效果明 显。
表 1 体外抑制 HepG2、 SW480 和 HeLa 细胞增殖试验
续表 152