用作法呢基蛋白转移酶抑制剂的 苯并(5.6)环庚并吡啶环脲和内酰胺 背景
1995年4月20日公开的国际公布号WO 95/10516公开下式的化合物：其中R可以是通过杂原子连接于-C(＝Z)-基团的碳上的杂环烷基、取代的哌啶基或取代的哌啶基甲基。据认为该化合物对于抑制法呢基蛋白转移酶是有用的。
本发明概述
本发明的化合物或其N-氧化物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物由式I代表：其中：R和R2独立选自卤代；R1和R3独立选自H和卤代，前提是R1和R3中至少1个为H；当在C-11位存在双键时，W是N、CH或C；R4为-(CH2)n-R5或R5为或R6为R5或Z1和Z2独立选自＝O和＝S；n为1-6；及n1为0或1。
在本发明化合物中，优选R为溴，R2为卤代和R1为卤代；或R为溴，R2为卤代和R3为卤代；或R为溴，R2为卤代及R1和R3各为H。R2优选为溴或氯。当R1或3为卤代时，优选它为溴或氯。Z1优选为＝O。Z2优选为＝O。W优选为CH。n的优选值为1-3。R5和R6优选为和。当R4为时，n1优选为1及生成的哌啶基优选连接在4-位碳环成员的亚甲基上。
本发明的化合物：(i)体外可有效地抑制法呢基蛋白转移酶，但不抑制香叶基香叶基蛋白转移酶I；(ii)阻断为法呢基受体的转化Ras形式诱导的表型的改变，但不阻断改造为香叶基香叶基受体的转化Ras形式诱导的表型的改变；(iii)阻断为法呢基受体的Ras的细胞内加工，但不阻断改造为香叶基香叶基受体地Ras的细胞内加工；及(iv)阻断由转化Ras诱导的异常细胞在培养物中的生长。
本发明的化合物抑制法呢基蛋白转移酶和癌基因蛋白Ras的法呢基化。因此本发明进一步提供通过给予有效量的上述的三环类化合物抑制哺乳动物，尤其是人中的ras法呢基蛋白转移酶的方法。给予患者本发明的化合物以抑制法呢基蛋白转移酶在下述癌症的治疗中是有用的。
本发明提供通过给予有效量的本发明化合物抑制或治疗细胞(包括转化的细胞)异常生长的方法。细胞的异常生长指不依赖于正常调节机制(如接触抑制的丧失)的细胞生长。这包括下列的异常生长：(1)表达激活的Ras癌基因的肿瘤细胞(肿瘤)；(2)其中Ras蛋白因另一种基因的致癌突变而被激活的肿瘤细胞；及(3)其中出现异常的Ras激活的其它增生性疾病的良性和恶性细胞。
本发明也提供通过给予需要此治疗的哺乳动物(如人)有效量的本文所述的三环类化合物抑制或治疗肿瘤生长的方法。具体地说，本发明提供通过给予有效量的本文上述的化合物抑制或治疗表达激活的Ras癌基因的肿瘤生长的方法。可以被抑制或治疗的肿瘤的实例包括(但不限于)乳腺癌、前列腺癌、肺癌(如肺腺癌)、胰癌(如胰腺癌像外分泌性的胰腺癌)、结肠癌(如结肠直肠癌像结肠腺癌和结肠腺瘤)、骨髓性白血病(如急性骨髓性白血病(AML))、甲状腺滤泡癌、脊髓发育不良综合征(MDS)、膀胱癌和表皮癌。
相信本发明也提供通过给予需要此治疗的哺乳动物(如人)本文所述的有效量的三环类化合物抑制或治疗良性和恶性增生性疾病的方法，在这些增生性疾病中，Ras蛋白因其它基因的致癌突变而被异常激活，即所述Ras基因本身不被突变所激活为致癌形式。例如，通过本文所述的三环类化合物可以抑制或治疗良性增生性紊乱神经纤维瘤病或其中Ras因酪氨酸激酶癌基因(如neu、src、abl、lck和fyn)的突变或过度表达而被激活的肿瘤。
用于本发明方法中的三环类化合物可以抑制或治疗细胞的异常生长。不希望受到理论的束缚，相信这些化合物可以通过阻断G-蛋白异戊二烯化而抑制G-蛋白(如ras p21)的功能而起作用，从而使它们用于治疗增生性疾病如肿瘤生长和癌症。不希望受到理论的束缚，相信这些化合物可以抑制ras法呢基蛋白转移酶，从而使它们显示对ras转化的细胞的抗增生活性。
本发明详述
除非另外指明，用于本文的下列术语按如下定义：
MH+代表质谱中分子的分子离子加氢；
Bu代表丁基；Et代表乙基；M代表甲基；Ph代表苯基；和
卤代表示氟代、氯代、溴代和碘代。
下列溶剂和试剂在此用缩写表示：四氢呋喃(THF)；乙醇(EtOH)；甲醇(MeOH)；乙酸(HOAc或AcOH)；乙酸乙酯(EtOAc)；N，N-二甲基甲酰胺(DMF)；三氟乙酸(TFA)；三氟乙酸酐(TFAA)；1-羟基苯并三唑(HOBT)；间-氯代过苯甲酸(MCPBA)；三乙胺(Et3N)；乙醚(Et2O)；氯代甲酸乙酯(ClCO2Et)以及1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(DEC)。
涉及W和任选的双键的代表性的式I结构如下：和
画入环体系的线表明已指定的键可以连接到任何可取代的环碳原子上。
本发明的一些化合物可以以不同的异构体形式(如对映体和非对映异构体)存在。本发明意欲包括所有此类纯形式和混合物的异构体，包括外消旋混合物。也包括烯醇形式。
某些三环化合物应具有酸性，例如具有羧基或酚羟基的那些三环化合物。这些化合物可以形成药学上可接受的盐。此类盐的实例可包括钠盐、钾盐、钙盐、铝盐、金盐和银盐。也考虑了与药学上可接受的胺如氨、烷基胺、羟基烷基胺、N-甲基葡糖胺等形成的盐。
某些碱性的三环化合物也可形成药学上可接受的盐，如酸加成盐。例如，吡啶-氮原子可与强酸形成盐，而具有碱性取代基如氨基的化合物也可与弱酸形成盐。用于形成盐的适合酸的例子为盐酸、硫酸、磷酸、乙酸、柠檬酸、草酸、丙二酸、水杨酸、苹果酸、富马酸、琥珀酸、抗坏血酸、马来酸、甲磺酸和其它本领域熟知的无机酸和羧酸。常规的方法为使游离碱的形式与足量的所需酸接触产生盐来制备所述盐。通过用适当的稀碱水溶液，如稀氢氧化钠、碳酸钾、氨和碳酸氢钠水溶液处理所述盐可以再生所述游离碱形式。这些游离碱形式在某些物理性质，如在极性溶剂中的溶解度方面与它们各自的盐形式有些不同，但对于本发明的目的而言，所述酸和碱的盐与它们各自的游离碱形式却是等同的。
所有这些酸和碱的盐都在本发明药学上可接受的盐的范围内，且对本发明的目的而言，认为所有的酸和碱的盐与相应化合物的游离碱形式是等同的。
根据以下实施例所述方法和通过采用WO95/10516中所述方法，例如制备式400.00化合物的方法可以制备本发明化合物。
其中Z1和Z2为＝O的本发明化合物可通过使式II或III化合物其中所有的其它取代基如式I所定义，分别与式HOOC-(CH2)n-NHR7或HOOC-(CH2)n3-NHR7的酸反应而制备，其中n如上所定义和R7为氨基保护基团，例如叔丁氧基羰基(BOC)。该反应采用标准的酰胺偶合条件进行，例如，该反应可在偶合剂如1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基-碳二亚胺盐酸盐、碱如N-甲基吗啉和活化剂如1-羟基苯并三唑存在下，于室温下，在惰性溶剂，例如DMF中进行。然后，例如，通过用三氟乙酸处理除去R7保护基团，得到相应的式IIA或IIIA的胺：
为制备其中R5或R6包含环内酰胺的式I化合物，使式IIA或IIIA的化合物与4-溴代丁酰氯或4-溴代戊酰氯反应，接着用试剂如氢化钠环化。其中R5或R6包含环脲的式I化合物可类似地通过式IIA或IIIA的胺与2-溴代乙基异氰酸酯或3-氯代丙基异氰酸酯反应，接着如前用试剂如氢化钠环化来制备。
或者，在如上所述的标准的酰胺偶合条件下，可使式IIA或IIIA的胺与内酰胺-取代的乙酸酯反应。
当Z1，或Z1和Z2表示硫时，其中Z1，或Z1和Z2为氧的式I化合物可与P2S5、Lawesson’s试剂或另一种能引入硫以取代氧的试剂反应。该反应可在高温下，在吡啶、甲苯或其它合适的溶剂中发生。对于其中Z1和Z2不同的化合物而言，可以先使氧转化为硫，然后使原料(即，式IIIA化合物和链烷酰基氯或异氰酸酯)反应。
三环部分的环I上含有吡啶基N-氧化物的式I化合物可通过本领域熟知的方法制备。例如，在合适的温度下，在合适的有机溶剂，例如二氯甲烷(通常为无水的)中，使其中W为C或CH的式II化合物与MCPBA反应，得到式IIa的N-氧化物
通常，在加入MCPBA之前，将式II化合物的有机溶剂溶液冷却至约0℃。然后在该反应期间，将该反应物温热至室温。经标准分离方法，例如用合适的碱的水溶液如饱和碳酸氢钠或氢氧化钠(例如1N氢氧化钠)洗涤反应混合物，然后经无水硫酸镁干燥。真空浓缩含有该产物的溶液，通过标准方法如采用硅胶层析(如快速柱层析)可以纯化该产物。
式II化合物可以通过本领域已知的方法，例如通过在WO95/10516、U.S.5151423中公开的方法和下述的方法制备。式II化合物(其中在三环结构的吡啶环C-3位被溴取代)，也可通过包括下列步骤的方法制备：
(a)在强碱存在下，使下式的酰胺其中R11a为溴，R5a为氢和R6a为C1-C6烷基、芳基或杂芳基；R5a为C1-C6烷基、芳基或杂芳基和R6a为氢；R5a和R6a独立选自C1-C6烷基和芳基；或R5a和R6a与它们所连接的氮原子一起形成含有4-6个碳原子或含有3-5个碳原子和一个选自-O-和-NR9a的杂部分的环，其中R9a为氢、C1-C6烷基或苯基；与下式化合物反应其中R1a、R2a、R3a和R4a独立选自氢和卤代而R7a为氯或溴，得到下式化合物
(b)使步骤(a)的产物与
(i)POCl3反应得到下式的氰基化合物；或与
(ii)DIBALH反应得到下式的醛
(c)使该氰基化合物或该醛化合物与下式的哌啶衍生物反应其中L为选自氯和溴的离去基团，分别得到下式的醛或醇或
(d)(i)将该醛用CF3SO3H环合得到式II化合物，其中虚线表示双键；或
(d)(ii)将该醇用多磷酸环合获得式II化合物，其中虚线表示单键。
WO95/10516、U.S.5151423公开的及下述的制备式II化合物的方法采用三环酮中间体。下式的此类中间体其中R11b、R1a、R2a、R3a和R4a独立选自氢和卤代，可以通过下列方法制备，包括：
(a)使下式化合物
(i)在钯催化剂和一氧化碳存在下，与式NHR5aR6a的胺反应得到下式的酰胺其中R5a和R6a如上述方法中所定义；或
(ii)在钯催化剂和一氧化碳存在下，与式R10aOH的醇反应得到下式的酯其中R10a为C1-C6低级烷基或C3-C6环烷基，接着使该酯与式NHR5aR6a的胺反应得到该酰胺；
(b)在强碱的存在下，使该酰胺与下式的碘代苄基化合物反应其中R1a、R2a、R3a、R4a和R7a如上所定义，得到下式化合物
(c)将步骤(b)的化合物用式R8aMgL的试剂环合，其中R8a为C1-C8烷基、芳基或杂芳基和L为溴或氯，前提是在环合前，其中R5a或R6a为氢的化合物与合适的N-保护基团反应。
通过采用包括酶催化的酯基转移的方法可以制备具有高度对映体选择性的式II的(+)-异构体化合物，其中X为CH。优选使式II的外消旋化合物(其中X为C，R3不是H且存在双键)与酶如ToyoboLIP-300和酰化剂如异丁酸三氟乙酯反应；然后，将所得的(+)-酰胺通过与酸，例如硫酸回流水解，得到其中X为CH和R3不是H的相应的以(+)-异构体为主的旋光性产物。或者，首先将式II的外消旋化合物(其中X为C，R3不是H且存在双键)还原为相应的式II的外消旋化合物(其中X为CH)，然后用酶(Toyobo LIP-300)和如上所述的酰化剂处理，获得(+)-酰胺，将其水解得到以(+)-异构体为主的旋光性产物。
式III化合物可通过本领域已知的方法，由式II化合物制备，例如，在上述的标准的酰胺偶合条件下，通过1-N-叔丁氧基羰基哌啶基-4-乙酸与式II化合物的反应来制备。
用下面的制备实施例来示范说明用于本发明中的化合物，这些实施例不应构成对本公开范围的限制。在本发明范围内的其它机理途径和类似结构对本领域技术人员来说可以是显而易见的。
制备实施例1步骤A：
于-5℃，将25.86g(55.9mmol)的4-(8-氯代-3-溴代-5，6-二氢-11H-苯并[5，6]环庚并[1，2-b]吡啶-11-亚基]-1-哌啶-1-甲酸乙酯和250ml浓硫酸混合，然后加入4.8g(56.4mmol)硝酸钠并搅拌2小时。将该混合物倾入600g冰中并用浓氢氧化铵(水溶液)碱化。过滤该混合物，用300ml水洗涤，然后用500ml二氯甲烷萃取。用200ml水洗涤萃取物，经硫酸镁干燥，然后过滤并真空浓缩至残留物。残留物经层析(硅胶，10％乙酸乙酯/二氯甲烷)得到24.4g(收率86％)产物。m.p.＝165-167℃，质谱：MH+＝506，508(CI)。元素分析：计算值-C，52.13；H，4.17；N，8.29
实测值-C，52.18；H，4.51；N，8.16步骤B：
于20℃，将20g(40.5mmol)步骤A的产物和200ml浓硫酸混合，然后冷却该混合物至0℃。将7.12g(24.89mmol)1，3-二溴代-5，5-二甲基-乙内酰脲加入该混合物中并于20℃搅拌3小时。冷却至0℃，加入另外的1.0g(3.5mmol)二溴代乙内酰脲并于20℃搅拌2小时。将该混合物倾入400g冰中并于0℃用浓氢氧化铵(水溶液)碱化，过滤收集生成的固体。用300ml水洗涤该固体，在200ml丙酮中制成淤浆，过滤提供19.79g(收率85.6％)产物。m.p.＝236-237℃，质谱：MH+＝586(CI)。元素分析：计算值-C，45.11；H，3.44；N，7.17
实测值-C，44.95；H，3.57；N，7.16步骤C：
于50℃，将25g(447mmol)铁屑、10g(90mmol)氯化钙和20g(34.19mmol)步骤B的产物在700ml的90∶10乙醇/水中的悬浮液混合。于回流下加热该混合物过夜，通过Celite过滤并用2×200ml的热乙醇洗涤滤饼。合并滤液和洗液，真空浓缩至残留物。用600ml二氯甲烷萃取残留物，用300ml水洗涤并经硫酸镁干燥。过滤并真空浓缩至残留物，然后层析(硅胶，30％乙酸乙酯/二氯甲烷)得到11.4g(收率60％)产物。m.p.＝211-212℃，质谱：MH+＝556(CI)。元素分析：计算值-C，47.55；H，3.99；N，7.56
实测值-C，47.45；H，4.31；N，7.49步骤D：
于-10℃，将20g(35.9mmol)步骤C的产物缓慢(分次)加入8g(116mmol)亚硝酸钠在120ml浓盐酸(水溶液)的溶液中。于0℃搅拌生成的混合物2小时，然后于0℃用1小时缓慢加入(滴加)150ml(1.44mol)的50％H3PO2。于0℃搅拌3小时，然后倾入600g冰中并用浓氢氧化铵(水溶液)碱化。用2×300ml二氯甲烷萃取，经硫酸镁干燥萃取物，然后过滤并真空浓缩至残留物。残留物经层析(硅胶，25％乙酸乙酯/己烷)得到13.67g(收率70％)产物。m.p.＝163-165℃，质谱：MH+＝541(CI)。元素分析：计算值-C，48.97；H，4.05；N，5.22
实测值-C，48.86；H，3.91；N，5.18步骤E：
将6.8g(12.59mmol)步骤D的产物和100ml浓盐酸(水溶液)混合并于85℃搅拌过夜。冷却该混合物，将其倾入300g冰中并用浓氢氧化铵(水溶液)碱化。用2×300ml二氯甲烷萃取，经硫酸镁干燥萃取物，过滤并真空浓缩至残留物，然后层析(硅胶，10％甲醇/乙酸乙酯+2％氢氧化铵(水溶液))得到5.4g(收率92％)目标化合物。m.p.＝172-174℃，质谱：MH+＝469(FAB)。元素分析：计算值-C，48.69；H，3.65；N，5.97
实测值-C，48.83；H，3.80；N，5.97
制备实施例2步骤A：
通过溶解于浓盐酸中并于约100℃加热约16小时，将2.42g4-(8-氯代-3-溴代-5，6-二氢-11H-苯并[5，6]环庚并[1，2-b]吡啶-11-亚基]-1-哌啶-1-甲酸乙酯水解。冷却该混合物，并用1M氢氧化钠(水溶液)中和。用二氯甲烷萃取，经硫酸镁干燥萃取物，过滤并真空浓缩得到1.39g (收率69％)产物。步骤B：
将1g(2.48mmol)步骤A的产物和25ml的干燥甲苯混合，加入在甲苯中的2.5ml的1MDIBAL并于回流下加热该混合物。0.5小时后，加入另外2.5ml的1M DIBAL的甲苯液并于回流下加热1小时。(采用50％甲醇/二氯甲烷+氢氧化铵(水溶液)，通过TLC监测该反应)。冷却该混合物至室温，加入50ml的1N盐酸(水溶液)并搅拌5分钟。加入100ml的1N氢氧化钠(水溶液)，然后用乙酸乙酯(3×150ml)萃取。经硫酸镁干燥萃取物，过滤并真空浓缩得到1.1g目标化合物。
制备实施例3
[外消旋及(+)-和(-)-异构体]步骤A：
将16.6g(0.03mol)的制备实施例1步骤D的产物与3∶1的CH3CN和水的溶液(212.65ml CH3CN和70.8ml水)混合并将生成的淤浆于室温下搅拌过夜。加入32.833g(0.153mol)的NaIO4，然后加入0.31g(2.30mmol)的RuO2并于室温下搅拌得到1.39g(收率69％)产物。(加入RuO伴随着放热反应且温度从20℃升至30℃)。搅拌该混合物1.3小时(约30分钟后温度降至25℃)，然后过滤除去固体，并用二氯甲烷洗涤该固体。真空浓缩滤液至残留物并将残留物溶于二氯甲烷中。过滤除去不溶的固体并用二氯甲烷洗涤该固体。用水洗涤滤液，浓缩至约200ml体积，用漂白粉液洗涤，然后用水洗涤。用6N盐酸(水溶液)萃取，冷却该萃取物水溶液至0℃并缓慢加入50％氢氧化钠(水溶液)以调节pH＝4，同时维持温度＜30℃。用二氯甲烷萃取两次，经硫酸镁干燥并真空浓缩至残留物。将该残留物在20ml乙醇中制成淤浆并冷却至0℃。过滤收集生成的固体并真空干燥该固体，得到7.95g产物。1H NMR(CDCl3，200MHz)：8.7(s，1H)；7.85(m，6H)；7.5(d，2H)；3.45(m，2H)，3.15(m，2H)。步骤B：
将21.58g(53.75mmol)步骤A的产物和500ml的乙醇和甲苯的1∶1的无水混合物混合，加入1.43g(37.8mmol)的NaBH4并将该混合物于回流下加热10分钟。将该混合物冷却至0℃，加入100ml水，用1M盐酸(水溶液)调节pH约4-5，同时维持温度＜10℃。加入250ml乙酸乙酯并分离各层。用盐水(3×50ml)洗涤有机层，然后经硫酸钠干燥。真空浓缩至残留物(24.01g)并将该残留物层析(硅胶，30％己烷/二氯甲烷)得到产物。再经层析纯化不纯的部分。得到总量18.57g的产物。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：8.5(s，1H)；7.9(s，1H)；7.5(两个双重峰，2H)；6.2(s，1H)；6.1(s，1H)；3.5(m，1H)，3.4(m，1H)；3.2(m，2H)。步骤C：
将18.57g(46.02mmol)步骤B的产物和500ml氯仿混合，然后加入6.70ml(91.2mmol)的SOCl2，于室温下搅拌该混合物4小时。用5分钟加入在800ml THF中的35.6g(0.413mol)哌嗪溶液，并于室温下搅拌该混合物1小时。于回流下加热该混合物过夜，然后冷却至室温并用1L二氯甲烷稀释该混合物。用水(5×200ml)洗涤，并用氯仿(3×100ml)萃取含水洗液。合并所有的有机溶液，用盐水(3×200ml)洗涤并经硫酸镁干燥。真空浓缩至残留物并层析(硅胶，5％、7.5％、10％的甲醇/二氯甲烷梯度液+氢氧化铵)得到18.49g为外消旋混合物的目标化合物。步骤D：对映体的分离
用制备性手性层析(Chiralpack AD，5cm×50cm柱，流速100ml/min.，20％异丙醇/己烷+0.2％二乙胺)分离步骤C的外消旋的目标化合物，得到9.14g(+)-异构体和9.30g(-)-异构体。
(+)-异构体的理化数据：m.p.＝74.5-77.5℃；质谱MH+＝471.9；[a]＝+97.4°(8.48mg/2ml甲醇)。
(-)-异构体的理化数据：m.p.＝82.9-84.5℃；质谱MH+＝471.8；[a]＝-97.4°(8.32mg/2ml甲醇)。
制备实施例4步骤A：
于-5℃，将15g(38.5mmol)的4-(8-氯代-3-溴代-5，6-二氢-11H-苯并[5，6]环庚并[1，2-b]吡啶-11-亚基)-1-哌啶-1-甲酸乙酯和150ml浓硫酸混合，然后加入3.89g(38.5mmol)硝酸钾并搅拌4小时。将该混合物倾入3L冰中并用50％氢氧化钠(水溶液)碱化。用二氯甲烷萃取，经硫酸镁干燥，然后过滤并真空浓缩至残留物。将残留物从丙酮中重结晶得到6.69g产物。1H NMR(CDCl3，200MHz)：8.5(s，1H)；7.75(s，1H)；7.6(s，1H)；7.35(s，1H)；4.15(q，2H)；3.8(m，2H)，3.5-3.1(m，4H)；3.0-2.8(m，2H)；2.6-2.2(m，4H)；1.25(t，3H)。步骤B：
将6.69g(13.1mmol)步骤A的产物和100ml的85％乙醇/水混合，加入0.66g(5.9mmol)的氯化钙和6.56g(117.9mmol)铁并将该混合物于回流下加热过夜。通过Celite过滤热的反应混合物并用热乙醇漂洗滤饼。真空浓缩滤液得到7.72g产物。质谱：MH+＝478.0步骤C：
将7.70g步骤B的产物和35ml乙酸混合，然后加入45ml溴的乙酸溶液并于室温下搅拌该混合物过夜。加入300ml的1N氢氧化钠(水溶液)，然后加入75ml的50％氢氧化钠(水溶液)，用乙酸乙酯萃取。经硫酸镁干燥萃取物，并真空浓缩至残留物。残留物经层析(硅胶，20％-30％乙酸乙酯/己烷)得到3.47g产物(伴有另外1.28g部分纯化的产物)。
质谱：MH+＝555.9。
1H NMR(CDCl3，300MHz)：8.5(s，1H)；7.5(s，1H)；7.15(s，1H)；4.5(s，2H)；4.15(m，3H)；3.8(brs，2H)，3.4-3.1(m，4H)；9-2.75(m，1H)；2.7-2.5(m，2H)；2.4-2.2(m，2H)；1.25(m，3H)。步骤D：
将0.557g(5.4mmol)亚硝酸叔丁酯和3ml DMF混合，将该混合物加热至60℃-70℃。缓慢加入(滴加)2.00g(3.6mmol)步骤C的产物和4ml DMF的混合物，然后将该混合物冷却至室温。于40℃加入另外的0.64ml亚硝酸叔丁酯并再次将该混合物加热至60℃-70℃达0.5小时。冷却该混合物至室温并将该混合物倾入150ml水中。用二氯甲烷萃取，经硫酸镁干燥并真空浓缩至残留物。残留物经层析(硅胶，10％-20％乙酸乙酯/己烷)得到0.74g产物。质谱：MH+＝541.0。1HNMR(CDCl3，200MHz)：8.52(s，1H)；7.5(d，2H)；7.2(s，1H)；4.15(q，2H)；3.9-3.7(m，2H)，3.5-3.1(m，4H)；3.0-2.5(m，2H)；2.4-2.2(m，2H)；2.1-1.9(m，2H)；1.26(t，3H)。步骤E：
将0.70g(1.4mmol)步骤D的产物和8ml浓盐酸(水溶液)混合并于回流下加热该混合物过夜。加入30ml的1N氢氧化钠(水溶液)，然后加入5ml 50％氢氧化钠(水溶液)并用二氯甲烷萃取。经硫酸镁干燥萃取物并真空浓缩得到0.59g目标化合物。质谱：M+＝468.7。m.p.＝123.9℃-124.2℃。
制备实施例5
[外消旋及(+)-和(-)-异构体]步骤A：
制备8.1g制备实施例4的目标化合物的甲苯溶液并加入17.3ml的1MDIBAL的甲苯溶液。于回流下加热该混合物并用40分钟缓慢加入(滴加)另外的21ml的1MDIBAL/甲苯溶液。冷却该反应混合物至约0℃并加入700ml的1M盐酸(水溶液)。分离并弃去有机相。用二氯甲烷洗涤含水相，弃去萃取物，然后通过加入50％氢氧化钠(水溶液)碱化水相。用二氯甲烷萃取，经硫酸镁干燥萃取物并真空浓缩，得到7.30g目标化合物，其为对映体的外消旋混合物。步骤B：对映体的分离：
用制备性手性层析(Chiralpack AD，5cm×50cm柱，用20％异丙醇/己烷+0.2％二乙胺)分离步骤A的外消旋的目标化合物，得到目标化合物的(+)-异构体和(-)-异构体。
(+)-异构体的理化数据：m.p.＝148.8℃；质谱MH+＝469；[a]＝+65.6°(mg/2ml甲醇)
(-)-异构体的理化数据：m.p.＝112℃；质谱MH+＝469；[a]＝-65.2°(mg/2ml甲醇)
制备实施例6
[外消旋及(+)-和(-)-异构体]步骤A：
将40.0g(0.124mol)原料酮和200ml硫酸混合并冷却至0℃。用1.5小时缓慢加入13.78g(0.136mol)硝酸钾，然后温热至室温并搅拌过夜。采用与制备实施例1步骤A中所述基本相同的方法处理该反应物。层析(硅胶，乙酸乙酯/己烷的20％、30％、40％、50％的梯度液，然后100％乙酸乙酯)得到28g的9-硝基产物，伴有少量7-硝基产物以及19g 7-硝基和9-硝基化合物的混合物。步骤B：
采用与制备实施例1步骤C中所述基本相同的方法，使28g(76.2mmol)步骤A的9-硝基产物、400ml 85％乙醇/水、3.8g(34.3mmol)氯化钙和38.28g(0.685mol)铁反应，得到24g产物。步骤C：
将13g(38.5mmol)步骤B的产物、140ml乙酸混合并用20分钟缓慢加入2.95ml(57.8mmol)溴在10ml乙酸中的溶液。于室温下搅拌该反应混合物，然后真空浓缩至残留物。加入二氯甲烷和水，然后，用50％氢氧化钠(水溶液)调节至pH＝8-9。用水洗涤有机相，然后用盐水洗涤并经硫酸钠干燥。真空浓缩得到11.3g产物。步骤D：
将100ml浓盐酸(水溶液)冷却至0℃，然后加入5.61g(81.4mmol)亚硝酸钠并搅拌10分钟。缓慢加入(分次)11.3g(27.1mmol)步骤C的产物并于0-3℃搅拌该混合物2.25小时。缓慢加入(滴加)180ml 50％H3PO2(水溶液)并于0℃使该混合物静置过夜。用30分钟缓慢加入(滴加)150ml 50％的氢氧化钠，调节至pH＝9，然后用二氯甲烷萃取。用水洗涤萃取物，然后用盐水洗涤并经硫酸钠干燥。真空浓缩至残留物并层析(硅胶，2％乙酸乙酯/二氯甲烷)得到8.6g产物。步骤E：
将8.6g(21.4mmol)步骤D的产物和300ml甲醇混合并冷却至0℃-2℃。加入1.21g(32.1mmol)硼氢化钠并于约0℃搅拌1小时。加入另外0.121g(3.21mmol)硼氢化钠，于0℃搅拌2小时，然后于0℃静置过夜。真空浓缩至残留物，然后使残留物在二氯甲烷和水之间分配。分离有机相并真空(50℃)浓缩得到8.2g产物。步骤F：
将8.2g(20.3mmol)步骤E的产物和160ml二氯甲烷混合，冷却至0℃，然后用30分钟缓慢加入(滴加)14.8ml(203mmol)SOCl2。将该混合物温热至室温并搅拌4.5小时，然后真空浓缩至残留物，加入二氯甲烷并用1N氢氧化钠(水溶液)和盐水顺序洗涤并经硫酸钠干燥。真空浓缩至残留物，然后加入干燥THF和8.7g(101mmol)哌嗪并于室温下搅拌过夜。真空浓缩至残留物，加入二氯甲烷，并用0.25N氢氧化钠(水溶液)、水和盐水顺序洗涤。经硫酸钠干燥并真空浓缩得到9.46g粗产物。层析(硅胶，5％甲醇/二氯甲烷+氨)得到为外消旋的目标化合物3.59g。1H NMR(CDCl3，200MHz)：8.43(d，1H)；7.55(d，1H)；7.45(d，1H)；7.11(d，1H)；5.31(s，1H)，4.86-4.65(m，1H)；3.57-3.40(m，1H)；2.98-2.55(m，6H)；2.45-2.20(m，5H)。步骤G对映体的分离：
根据制备实施例3步骤D中所述，用30％异丙醇/己烷+0.2％二乙胺，层析得自步骤F的外消旋的目标化合物(5.7g)，得到目标化合物的2.88g R-(+)-异构体和2.77gS-(-)-异构体。
R-(+)-异构体的理化数据：质谱MH+＝470；[a]＝+12.1°(10.9mg/2ml甲醇)。
S-(-)-异构体的理化数据：质谱MH+＝470；[a]＝-13.2°(11.51mg/2ml甲醇)。
制备实施例7
[外消旋及(+)-和(-)-异构体]步骤A：
于20℃，将13g(33.3mmol)得自制备实施例1步骤D的目标化合物和300ml甲苯混合，然后加入32.5ml(32.5mmol)的1M DIBAL的甲苯溶液。于回流下加热该混合物1小时，冷却至20℃，加入另外的32.5ml的1MDIBAL溶液，于回流下加热1小时。冷却该混合物至20℃并倾入400g冰、500ml乙酸乙酯和300ml 10％氢氧化钠(水溶液)的混合物中。用二氯甲烷(3×200ml)萃取水层，经硫酸镁干燥有机层，然后真空浓缩至残留物。层析(硅胶，12％甲醇/二氯甲烷+4％氢氧化铵)得到为外消旋体的目标化合物10.4g。质谱：MH+＝469(FAB)；部分1H NMR(CDCl3，400MHz)：8.38(s，1H)；7.57(s，1H)；7.27(d，1H)；7.06(d，1H)；3.95(d，1H)。步骤B对映体的分离：
用制备性手性层析(Chiralpack AD，5cm×50cm柱，用5％异丙醇/己烷+0.2％二乙胺)分离步骤A的外消旋的目标化合物，得到目标化合物的(+)-异构体和(-)-异构体。
(+)-异构体的理化数据：质谱MH+＝470.9(FAB)；[a]＝+43.5°(c＝0.402，乙醇)；部分1H NMR(CDCl3，400MHz)：8.38(s，1H)；7.57(s，1H)；7.27(d，1H)；7.05(d，1H)；3.95(d，1H)。
(-)-异构体的理化数据：质谱MH+＝470.9(FAB)；[a]＝-41.8°(c＝0.328，乙醇)；部分1H NMR(CDCl3，400MHz)：8.38(s，1H)；7.57(s，1H)；7.27(d，1H)；7.05(d，1H)；3.95(d，1H)。
制备实施例8
[外消旋体及R-(+)-和S-(-)-异构体]
通过基本上与制备实施例3步骤A-D中所述相同的方法，处理4-(8-氯代-3-溴代-5，6-二氢-11H-苯并[5，6]环庚并[1，2-b]吡啶-11-亚基)-1-哌啶-1-甲酸乙酯，得到如步骤C的产物，即外消旋的目标化合物，及如步骤D的产物，即目标化合物的R-(+)-异构体和S-(-)-异构体。
R-(+)-异构体的理化数据：13C NMR(CDCl3)：155.8(C)；146.4(CH)；140.5(CH)；140.2(C)；136.2(C)；135.3(C)；133.4(C)；132.0(CH)；129.9(CH)；125.6(CH)；119.3(C)；79.1(CH)；52.3(CH2)；52.3(CH)；45.6(CH2)；45.6(CH2)；30.0(CH2)；29.8(CH2)。[a]＝+25.8°(8.46mg/2ml甲醇)。
S-(-)-异构体的理化数据：13C NMR(CDCl3)：155.9(C)；146.4(CH)；140.5(CH)；140.2(C)；136.2(C)；135.3(C)；133.3(C)；132.0(CH)；129.9(CH)；125.5(CH)；119.2(C)；79.1(CH)；52.5(CH2)；52.5(CH)；45.7(CH2)；45.7(CH2)；30.0(CH2)；29.8(CH2)。[a]＝-27.9°(8.90mg/2ml甲醇)。
制备实施例9步骤A：
将9.90g(18.9mmol)制备实施例4步骤B的产物溶解在150ml二氯甲烷和200ml乙腈中并加热至60℃。加入2.77g(20.8mmol)的N-氯代琥珀酰亚胺并加热至回流3小时，通过TLC(30％乙酸乙酯/水)监测该反应。加入另外的2.35g(10.4mmol)的N-氯代琥珀酰亚胺并回流另外45分钟。将该反应混合物冷却至室温并用1N氢氧化钠和二氯甲烷萃取。经硫酸镁干燥二氯甲烷层，过滤并经快速层析纯化(1200ml正相硅胶，用30％乙酸乙酯/水洗脱)得到为6.24g所需产物。M.p.193-195.4℃。步骤B：
于-10℃将2.07g(30.1mmol)亚硝酸钠加入160ml浓盐酸中并搅拌10分钟。加入5.18g(10.1mmol)步骤A的产物并将该反应混合物由-10℃温热至0℃2小时。冷却该反应物至-10℃，加入100ml H3PO2并静置过夜。为萃取该反应混合物，将其倾入碎冰中并用50％氢氧化钠/二氯甲烷碱化。经硫酸镁干燥有机层，过滤并浓缩至干。经快速层析纯化(600ml正相硅胶，用20％乙酸乙酯/己烷洗脱)得到3.98g产物。质谱MH+＝497.2。步骤C：
将3.9g步骤B的产物溶于100ml浓盐酸中并回流过夜。冷却该混合物，用50％w/w氢氧化钠碱化并用二氯甲烷萃取生成的混合物。经硫酸镁干燥二氯甲烷层，蒸发溶剂并减压干燥，得到3.09g所需产物。质谱MH+＝424.9。步骤D：
采用制备实施例5所述的类似方法，得到1.73g所需产物。m.p.169.6-170.1℃；[a]＝+48.2°(c＝1，甲醇)。
制备实施例10步骤A：
将1.33g制备实施例5步骤B的化合物的(+)-对映体在无水DMF中与1.37g 1-N-叔丁氧基-羰基哌啶基-4-乙酸，及与DEC、HOBT和N-甲基吗啉混合。于室温下搅拌该混合物过夜。真空浓缩除去DMF并加入50ml饱和碳酸氢钠(水溶液)。用二氯甲烷(2×250ml)提取，用50ml盐水洗涤提取物并经硫酸镁干燥。真空浓缩至残留物并层析(硅胶，用2％甲醇/二氯甲烷+10％氢氧化铵洗脱)得到2.78g产物。质谱：MH+＝694.0(FAB)；[α]＝+34.1°(5.45mg/2ml，甲醇)。步骤B：
将2.78g步骤A的产物和二氯甲烷混合，然后冷却至0℃并加入TFA，于0℃搅拌该混合物3小时，然后再加入1N氢氧化钠(水溶液)，接着加入50％氢氧化钠(水溶液)。用二氯甲烷提取，经硫酸镁干燥并真空浓缩得到1.72g产物。M.p.104.1℃；质谱：MH+＝594；[α]＝+53.4°(11.42mg/2ml，甲醇)。
制备实施例11(+)-1-(氨基乙酰基)-4-(3-二溴代-8-氯代-6，11-二氢-5H-苯并[5，6]环-庚并[1，2-b]吡啶-11-基)哌啶步骤1：(+)-1，1-二甲基乙基[2-[4-(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氢-5H-苯并[5，6]环-庚并[1，2-b]吡啶-1 1-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙基]-氨基甲酸酯
将制备实施例5的产物，(+-异构体)(0.4g，0.85mmol)溶于DMF(10ml)中并冷却至约4℃。然后加入BOC-甘氨酸(0.19g，1.1mmol)，接着加入DEC(0.2g，1.1mmol)、HOBT(0.15g，1.1mmol)和4-甲基吗啉(0.11g，0.12μl，1.1mmol)。于室温下搅拌该反应物过夜，然后真空浓缩至残留物并使之在二氯甲烷和饱和碳酸氢钠(水溶液)之间分配。用二氯甲烷进一步提取水相，经硫酸镁干燥合并的二氯甲烷部分并真空浓缩得到残留物，将其经硅胶柱层析，用5％(氨饱和的甲醇)/二氯甲烷作为洗脱剂得到为白色固体的标题化合物：0.52g，收率99％，m.p.＝95-96℃，MH+＝628。步骤2：
将步骤1的产物(2.65g，4.2mmol)溶于二氯甲烷(20ml)中并冷却至0℃。然后加入三氟乙酸(10ml)。于室温下搅拌该反应混合物4小时，然后倾入冰中并用50％(w/v)氢氧化钠水溶液将pH调至10。用二氯甲烷提取该反应混合物，用水和盐水洗涤合并的二氯甲烷提取物，经硫酸镁干燥。通过旋转蒸发除去溶剂得到为白色固体的标题化合物：2.18g，收率98％，m.p.＝150-152℃，MH+＝528。
制备实施例12(+)-1-(3-氨基-1-氧代丙基)-4-(3-二溴代-8-氯代-6，11-二氢-5H-苯并[5，6]环-庚并[1，2-b]吡啶-11-基)哌啶步骤1：(+)-1，1-二甲基乙基[3-[4-(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氢-5H-苯并[5，6]环-庚并[1，2-b]吡啶-11-基)-1-哌啶基]-2-氧代丙基]-氨基甲酸酯
按照与制备实施例11步骤1所述基本相同的方法制备标题化合物，但用BOC-β-丙氨酸代替BOC-甘氨酸，得到白色固体。收率＝99％，MH+＝642。步骤2：
按照与制备实施例11步骤2所述基本相同的方法制备标题化合物，得到白色固体。收率＝100％，m.p.＝136-137℃，MH+＝642。
制备实施例13(+)-4-(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氢-5H-苯并[5，6]环-庚并[1，2-b]吡啶-11-基)-1-[4-氨基]-1-氧代丁基]哌啶步骤1：(+)-1，1-二甲基乙基[4-[4-(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氢-5H-苯并[5，6]环-庚并[1，2-b]吡啶-11-基)-1-哌啶基]-2-氧代丁基]-甲酰胺
按照与制备实施例11步骤1所述基本相同的方法制备标题化合物，但用BOC-α-氨基丁酸代替BOC-甘氨酸，得到白色固体。收率＝79％，m.p.＝102-103℃，MH+＝781。步骤2：
按照与制备实施例11步骤2所述基本相同的方法制备标题化合物，得到白色固体。收率＝94％，m.p.＝114-115℃，MH+＝681。
制备实施例14(+)-1-(氨基乙酰基)-4-[2-[4-(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氢-5H-苯并[5，6]环-庚并[1，2-b]吡啶-11-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙基]哌啶步骤1：(+)-1，1-二甲基乙基[2-[4-[2-[4-(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氢-5H-苯并[5，6]环-庚并[1，2-b]吡啶-11-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙基]-1-哌啶基]-2-氧代乙基]氨基甲酸酯
按照与制备实施例11步骤1所述基本相同的方法制备标题化合物，但用制备实施例10的化合物-(+-异构体)代替得自制备实施例5的化合物，得到白色固体。收率＝82％，m.p.＝98-99℃，MH+＝753。步骤2：按照与制备实施例11步骤2所述基本相同的方法制备标题化合物，得到白色固体。收率＝89％，m.p.＝130-131℃，MH+＝653。
制备实施例15(+)-1-(3-氨基-1-氧代丙基)-4-[2-[4-(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氢-5H-苯并[5，6]环-庚并[1，2-b]吡啶-11-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙基]哌啶步骤1：(+)-1，1-二甲基乙基[3-[4-[2-[4-(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氢-5H-苯并[5，6]环-庚并[1，2-b]吡啶-11-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙基]-1-哌啶基]-3-氧代丙基]氨基甲酸酯
按照与制备实施例12步骤1所述基本相同的方法制备标题化合物，但用制备实施例10的化合物代替制备实施例5的化合物，得到白色固体。收率＝84％，m.p.＝87-88℃，MH+＝767。步骤2：按照与制备实施例11步骤2所述基本相同的方法制备标题化合物，得到白色固体。收率＝84％，m.p.＝120-121℃，MH+＝667。
制备实施例16(+)-1-(4-氨基-1-氧代丁基)-4-[2-[4-(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氢-5H-苯并[5，6]环-庚并[1，2-b]吡啶-11-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙基]哌啶步骤1：(+)-1，1-二甲基乙基[4-[4-[2-[4-(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氢-5H-苯并[5，6]环-庚并[1，2-b]吡啶-11-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙基]-1-哌啶基]-4-氧代丁基]氨基甲酸酯
按照与制备实施例13步骤1所述基本相同的方法制备标题化合物，但用制备实施例10的化合物代替制备实施例5的化合物，得到白色固体。收率＝79％，m.p.＝102-103℃，MH+＝782。步骤2：按照与制备实施例11步骤2所述基本相同的方法制备标题化合物，得到白色固体。收率＝94％，m.p.＝114-115℃，MH+＝681。
制备实施例17
将2g(12.7mmol)2-氧代-1-吡咯烷乙酸甲酯溶于20ml乙醇中，然后加入20ml 1M氢氧化锂。于室温下搅拌该反应混合物16小时。除去溶剂，将生成的物质溶于水中并将pH调至约4。浓缩该反应混合物得到产物：质谱MH+＝144。
实施例1(+)-4-(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氢-5H-苯并[5，6]环庚并[1，2-b]吡啶-11-基)-1-[(2-氧代-1-吡咯烷基)乙酰基]哌啶
将制备实施例15的产物(0.15g，0.32mmol)溶于DMF(5ml)中，然后冷却至约4℃。然后加入制备实施例17的化合物(0.06g，0.4mmol)，接着加入DEC(0.08g，0.4mmol)、HOBT(0.6g，0.4mmol)和4-甲基吗啉(0.04g，50μl，.4mmol)并于室温下搅拌该反应物过夜。然后真空浓缩该反应混合物至残留物并使之在二氯甲烷和饱和碳酸氢钠(水溶液)之间分配。用二氯甲烷进一步提取水相，经硫酸镁干燥合并的二氯甲烷部分并真空浓缩得到残留物，将其经硅胶柱层析，用5％(氨饱和的甲醇)/二氯甲烷作为洗脱剂得到为白色固体的标题化合物：0.11g，收率61％，m.p.＝118-119℃，MH+＝596。
实施例2(+)-4-(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氢-5H-苯并[5，6]环庚并[1，2-b]吡啶-11-基)-1-[1-氧代-3-(2-氧代-1-吡咯烷基)丙基]哌啶
将制备实施例12的标题化合物(0.4g，0.74mmol)溶于二氯甲烷(10ml)中，然后加入4-溴代丁酰氯(0.2g，0.13ml，1.11mmol)和三乙胺(0.164g，0.23ml，1.62mmol)。于室温下搅拌该反应混合物16小时。使该反应混合物在饱和碳酸氢钠和二氯甲烷之间分配。用二氯甲烷提取水相，经硫酸镁干燥合并的二氯甲烷提取物并通过旋转蒸发除去溶剂。将生成的产物溶于THF(10ml)中，冷却至-10℃，加入氢化钠(0.09g，3.79mmol)并搅拌该反应混合物16小时，使温度上升至室温。然后使该反应混合物在饱和碳酸氢钠和乙酸乙酯之间分配。经硫酸镁干燥有机相并经硅胶快速层析纯化，用3％甲醇(用氨饱和)/二氯甲烷洗脱，得到为白色固体的标题化合物(0.07g)，m.p.＝128-129℃，MH+＝610。
实施例3(+)-4-(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氢-5H-苯并[5，6]环庚并[1，2-b]吡啶-11-基)-1-[1-氧代-4-(2-氧代-1-吡咯烷基)丁基]哌啶
按照与实施例2所述基本相同的方法，由制备实施例13的产物制备标题化合物，得到白色固体。m.p.＝127-128℃，MH＝624。
实施例4(+)-4-(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氢-5H-苯并[5，6]环庚并[1，2-b]吡啶-1 1-基)-1-[(2-氧代-1-哌啶基)乙酰基]哌啶
按照与实施例2所述基本相同的方法，但用4-溴代戊酰氯代替4-溴代丁酰氯，由制备实施例11的产物制备标题化合物，得到白色固体。收率＝50％，m.p.＝138-139℃，MH＝610。
实施例5(+)-4-(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氢-5H-苯并[5，6]环庚并[1，2-b]吡啶-11-基)-1-[1-氧代-3-(2-氧代-1-哌啶基)丙基]哌啶
按照与实施例2所述基本相同的方法，但用4-溴代戊酰氯代替4-溴代丁酰氯，由制备实施例12的产物制备标题化合物，得到白色固体。收率＝50％，m.p.＝138-139℃，MH＝610。
实施例6(+)-4-(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氢-5H-苯并[5，6]环庚并[1，2-b]吡啶-11-基)-1-[1-氧代-4-(2-氧代-1-哌啶基)丁基]哌啶
按照与实施例2所述基本相同的方法，但用4-溴代戊酰氯代替4-溴代丁酰氯，由制备实施例13的产物制备标题化合物，得到白色固体。收率＝81％，m.p.＝101-102℃，MH＝638。
实施例7(+)-4-(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氢-5H-苯并[5，6]环庚并[1，2-b]吡啶-11-基)-1-[(2-氧代-1-咪唑烷基)乙酰基]哌啶
将制备实施例11的产物(2.08g，3.9mmol)溶于二氯甲烷(20ml)中并加入2-溴代乙基异氰酸酯(0.8g，0.5ml，7.9mmol)。于室温下搅拌该反应混合物16小时。使该反应混合物在饱和碳酸氢钠和二氯甲烷之间分配。用二氯甲烷提取水相，经硫酸镁干燥合并的二氯甲烷提取物并通过旋转蒸发除去溶剂。将生成的产物溶于THF(20ml)中，冷却至-10℃，加入氢化钠(0.46g，19.5mmol)并搅拌该反应混合物16小时，使温度上升至室温。然后使该反应混合物在饱和碳酸氢钠和乙酸乙酯之间分配。经硫酸镁干燥有机相并经硅胶快速层析纯化，用5％甲醇(用氨饱和)/二氯甲烷洗脱，得到为白色固体的标题化合物：1.95g，收率80％，m.p.＝167-168℃，MH+＝597。
实施例8(+)-4-(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氢-5H-苯并[5，6]环庚并[1，2-b]吡啶-11-基)-1-[3-(2-氧代咪唑烷基)-1-氧代丙基]哌啶
按照与实施例7所述基本相同的方法，由制备实施例12的产物制备标题化合物，得到白色固体。收率＝45％，m.p.＝202-203℃，MH+＝611。
实施例9(+)-4-(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氢-5H-苯并[5，6]环庚并[1，2-b]吡啶-11-基)-1-[1-氧代-4-(2-氧代-1-咪唑烷基)丁基]哌啶
按照与实施例7所述基本相同的方法，由制备实施例13的产物制备标题化合物，得到白色固体。收率＝52％，m.p.＝120-123℃，MH+＝625。
实施例10(+)-4-(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氢-5H-苯并[5，6]环庚并[1，2-b]吡啶-11-基)-1-[(六氢-2-氧代-1-嘧啶基)乙酰基]哌啶
按照与实施例7所述基本相同的方法，用3-氯代丙基异氰酸酯代替2-溴代乙基异氰酸酯，由制备实施例11的产物制备标题化合物，得到白色固体。收率＝56％，m.p.＝155-156℃，MH+＝611。
实施例11(+)-4-(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氢-5H-苯并[5，6]环庚并[1，2-b]吡啶-11-基)-1-[1-氧代-3-(六氢-2-氧代-1-嘧啶基)-氧代丙基]哌啶
按照与实施例10所述基本相同的方法，由制备实施例12的产物制备标题化合物，得到白色固体。收率＝40％，m.p.＝135-136℃，MH+＝625。
实施例12(+)-4-(3，10-二溴代-8-氯代-6，11-二氢-5H-苯并[5，6]环庚并[1，2-b]吡啶-11-基)-1-[4-(六氢-2-氧代-1-嘧啶基)氧代丁基]哌啶
按照与实施例10所述基本相同的方法，由制备实施例13的产物制备标题化合物，得到白色固体。收率＝63％，m.p.＝157-158℃，MH+＝639。
采用上述原料和合适的方法，制备以下结构的化合物
根据WO95/10516公开的测定方法测定FPTIC50(法呢基蛋白转移酶的抑制，体外酶测定)、COS细胞IC50(细胞-基测定)、GGPTIC50(香叶基香叶基蛋白转移酶抑制，体外酶测定)、细胞垫分析和抗肿瘤活性(体内抗肿瘤研究)。用于测定抑制人肿瘤细胞生长的试验方案，软琼脂测定如下：
无贴壁依赖性生长是致瘤细胞系的特征。将人肿瘤细胞悬浮于含0.3％琼脂糖和标明浓度的法呢基转移酶抑制剂的生长培养基中。将该溶液涂于含相同浓度法呢基转移酶抑制剂的0.6％琼脂糖固化的生长培养基上作为顶层。顶层固化后，将平板于37℃下，5％二氧化碳中孵育10-16天，以使集落突起。孵育后，通过用MTT(3-[4，5-二甲基噻唑-2-基]-2，5-二苯基-四唑鎓溴化物，噻唑蓝)溶液(1mg/ml在PBS中)涂布所述琼脂对该集落染色。Ras突变状态通过ELISA (OncogeneScience)测定。对该集落计数并确定IC50的值。
对本发明化合物而言，测定的FPTIC50值的范围为0.0014-0.085μM。
对本发明化合物而言，抑制ras在COS细胞中的ras加工的IC50值的范围为＜0.010-0.16μM。
对本发明化合物而言，用肿瘤细胞系激活的H ras NIH 3T3的软琼脂分析的范围为0.145-＞0.500。
在由本发明所述的化合物制备药用组合物时，惰性的、药学上可接受的载体可以为固体或液体。固体制剂包括粉剂、片剂、分散颗粒剂、胶囊剂、扁囊剂和栓剂。粉剂和片剂可含有约5-约70％的活性组分。适当的固体载体是本领域已知的，如碳酸镁、硬脂酸镁、滑石粉、蔗糖、乳糖。片剂、粉剂、扁囊剂和胶囊剂为适合口服给药的固体剂型。
制备栓剂时，首先将低熔点的蜡如脂肪酸甘油酯或可可脂的混合物融化，搅拌下将活性组分均匀分散其中。然后将融化的均匀混合物倾至方便大小的模中，使其冷却并因此固化。
液体制剂包括溶液、悬浮液和乳剂。适合胃肠外注射的实例为水或水-丙二醇溶液。
液体制剂也可以包括供鼻内给药的溶液。
适合吸入的气雾制剂可包括溶液和粉末形式的固体，它们可以与药学上可接受的载体例如惰性压缩气体混合。
也包括在临用前将其转化为供口服或胃肠外给药的液体制剂的固体形式制剂。此类液体制剂包括溶液、悬浮液和乳剂。
也可以将本发明的化合物透皮给药。透皮组合物可以为霜剂、洗剂、气雾剂和/或乳剂，包括为此目的的本领域常用的基质型或储库型的透皮贴剂。
优选该化合物口服给药。
优选该药用制剂为单位剂型。为此类剂型时，该制剂可以分成含有适当量(如达到所需目的的有效量)的活性组分的单位剂量。
制剂的单位剂量中活性化合物的量可以根据具体的使用情况在约0.1mg-1000mg、更优选在约1mg-300mg之间变化或调整。
根据病人的需要和待治疗疾病的严重程度可以改变使用的实际剂量。本领域技术人员可以容易地决定具体情况下的合适剂量。一般而言，治疗以比该化合物的最佳剂量稍低的较低剂量开始。此后，逐渐增加剂量至在特定情况下达到最佳效果。为方便起见，可以将每日总剂量分开，并根据需要在全天中分次给药。
在考虑了各种因素如病人的年龄、身体状况和身高体重以及治疗的症状的严重程度后，根据医师的判断调整本发明的化合物及其药学上可接受的盐的给药量和给药频率。一般口服给药的推荐剂量方案为每天10mg-2000mg、优选每天10-1000mg，在全天分2-4次给药以阻断肿瘤生长。当在该剂量范围内给药时，所述化合物是无毒性的。
下列为含有本发明化合物的药用剂型的实施例。本发明的药用组合物方面的范围不受所提供的实施例的限制。
药物剂型实施例
实施例A
片剂序号成分 mg/片 mg/片 1活性化合物 100 500 2乳糖USP 122 113 3玉米淀粉，食用级，为纯水中10％的糊 30 40 4玉米淀粉，食用级 45 40 5硬脂酸镁 3 7合计 300 700
制备方法
将序号1和2的成分在适合的混合器中混合10-15分钟。将该混合物与序号3成分一起制粒。如果需要可通过粗筛(如1/4”，0.63cm)磨碎湿颗粒。干燥湿颗粒。如果需要，过筛干燥的颗粒并使其与序号4的成分混合10-15分钟。加入序号5的成分并混合1-3分钟。在合适的压片机上将该混合物压片成适当的大小和重量。
实施例B
胶囊序号成分mg/胶囊mg/胶囊 1活性化合物 100 500 2乳糖USP 106 123 3玉米淀粉，食用级 40 70 4硬脂酸镁NF 7 7合计 253 700
制备方法
将序号1、2和3的成分在适合的混合器中混合10-15分钟。加入序号4的成分并混合1-3分钟。在合适的装胶囊机上将该混合物填入合适的两节-硬明胶胶囊中。
尽管结合以上提出的具体的实施方案介绍了本发明，它的许多另外的改变、修改和变化对本领域普通技术人员来说应是显而易见的。所有这些改变、修改和变化都将认为是在本发明的精神和范围内。