一种EM简易、快速繁殖的方法.pdf

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摘要
申请专利号:

CN201210034445.2

申请日:

20120215

公开号:

CN103255074B

公开日:

20141203

当前法律状态:

有效性:

有效

法律详情:

IPC分类号:

C12N1/20,C12N1/16

主分类号:

C12N1/20,C12N1/16

申请人:

何寒

发明人:

何寒

地址:

531500 广西壮族自治区百色市田东县东宁西路合恒巷253号

优先权:

CN201210034445A

专利代理机构:

代理人:

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内容摘要

本发明涉及一种微生物制剂领域,具体涉及到一种EM简易、快速繁殖的方法。具体包括液体培养基的优化配制、培养容器的选用、菌种的选择、EM培养的方法及过程。本发明的特点是利用廉价易得的大米粉、红砂糖、玉米粉作为主要营养源,制备出营养合理、全面的液体培养基;通过合理的选择白色塑料、玻璃桶(瓶)作为培养容器,再调整培育环境的温度及光照强度,仅需要3~4天的时间即可培育出优质、活力强的EM产品。通过本发明生产出来的EM产品细菌量高、质量好,可广泛应用于种植业、养殖业、食品加工、环保等领域。

权利要求书

1.一种EM繁殖的方法,其特征包括:液体培养基的优化配制;培养容器的选用;菌种的选择;培养的方法及过程; 所述的液体培养基的各种原料配比如下: (1)大米粉:1公斤; (2)玉米粉:0.5公斤; (3)红砂糖:2公斤; (4)酵母粉:0.5公斤; (5)蛋白胨:100克; (6)磷酸二氢钾:150克; (7)D-异抗坏血酸:75克; (8)水:50公斤; 所述的液体培养基的配制方法如下: (1)稀释大米粉:用10公斤冷水将大米粉进行稀释; (2)稀释玉米粉:用5公斤冷水将玉米粉进行稀释; (3)稀释红砂糖:用25公斤50~60℃的热水将红砂糖进行稀释; (4)稀释酵母粉:用5公斤50~60℃热水将酵母粉进行稀释; (5)稀释蛋白胨:用3公斤50~60℃的热水将蛋白胨进行稀释; (6)稀释磷酸二氢钾:用1公斤50~60℃的热水将磷酸二氢钾进行稀释。 (7)稀释D-异抗坏血酸:用1公斤50~60℃的热水将D-异抗坏血酸进行稀释; (8)组料:将上述已分别稀释过的各种原料依次混装入培养容器内,再次搅拌均匀即得液体培养基; 所述的培养容器选用可密封的非金属容器; 所述的菌种的选择及用量如下: (1)菌种的选择:有效活菌数为≥5×100/ml的高纯度EM原种; (2)用量:1000ml; 所述的EM培养的方法及过程如下: (1)接种:将1000ml EM原种倒入液体培养基里并搅拌均匀; (2)发酵培养:接种后将培养容器口封紧,进行厌氧发酵培养; (3)温度:培育环境的温度要控制在20℃以上、38℃以下,温度低于20℃会延长培育时间,温度高于38℃会加速微生物的老化甚至死亡; (4)培育的环境:培养容器要放置在光照强度较强的环境,光照强度一天要有8个小时以上的2000~3000勒克斯(LX),却又不可完全暴露在太阳光下培育; (5)培养时间:在25~30℃的温度环境下培养3~4天,即繁殖成成品。 

说明书

技术领域

本发明涉及一种微生物制剂领域,具体涉及到一种EM简易、快速繁殖的方 法。

技术背景

EM是英文(Effective Microorganisms)的缩写语,中文译为:“有效微生物群”。 它是光合细菌、乳酸菌群、酵母菌群、放线菌群、丝状菌群等5科10属80余 种微生物组成的,是由世界著名应用微生物学家日本琉球大学比嘉照夫教授等 研究成功的。EM技术是目前世界上应用范围最大的一项生物工程技术,和一般 生物制剂相比,它具有结构复杂、性能稳定、功能齐全的优势,表现出前所未 有的高科技水平。据有关资料报道,EM适用于种植业、养殖业、环保、人体保 健等多种领域。

近些年来,由于人类使用化肥、农药,使得土壤有益菌遭到严重破坏,土 壤肥力退化,如果不是一年比一年多地施放化肥农药就不会有好收成。而EM 菌却含有大量的对土壤有益的微生物,施入土壤后,通过繁殖等可使土壤重新 进入良性循环。土壤环境变好了,作物也就增产了;同样,畜牧、水产、人体 保健的机理也大致如此。

由于EM功能广泛,在种植、养殖、环境净化等方面都有着显著的作用。 它在市场上也就有很强的优势,现在市场上各种EM的技术产品也应运而生; 这些EM产品中,生产技术工艺呈多样化,申请号为201010618454.7的“EM 菌简易培养方法”,该发明包括如下步骤A、配制培养液、装入配透气盖的塑料 方桶中;B、接种芽孢杆菌;C、密闭培养24小时;D、接种复合乳酸菌、酵母 菌、光合菌;E、密闭培养。该发明名为简易,其实工艺步骤多且繁杂。

申请号为2002.11.05的“一种适用于EM活菌生产的培养液的制备方法”, 该发明以马铃薯为主要原料,制成马铃薯蔗糖、或葡萄糖培养液,在此培养液 中按一定比例加入蜂蜜、食用小苏打(NaHCO2)混合搅匀,之后按1∶1的体积 比加入EM活菌混合搅匀置于密封容器中在室温、大于或小于室温下发酵。该 发明的培养液制备繁琐,工艺中所应用菌种竟然与培养液一样多的量,导致生 产成本过高。

申请号为200610019753.2的“一种微生物组合物EM活菌剂的生产方法”, 该发明是用洗米水经调节pH值和中性蛋白酶处理后,按比例加入适量废糖蜜或 赤沙糖或淀粉糖化浆液、磷酸盐、食盐、硫酸盐、酵母膏,混合搅匀,加热100 ℃、5分钟,冷却后,按10~20%的比例接种EM活菌液,发酵培养而得。该 发明如果在工厂化生产时,培养液的主要载体——洗米水是很难收集的;另外 工艺中所述的接入EM活菌液的量也达到10~20%,生产成本亦无形中增加。

申请号为200910115498.5的“EM原露及其生产方法”,该发明是通过优化 培养基,将好氧菌和兼性厌氧菌分别接入培养基进行好氧发酵和兼性厌氧发酵 后,再混合均匀后接入培养基进行厌氧发酵,使EM菌种均衡生产繁殖。该发 明在实施的过程中需要特定的发酵罐,应用的原料种类繁多;培养过程亦分多 级,使工艺步骤多且繁杂。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足而提供全新的一种EM简易、快速繁殖 的方法。具体包括液体培养基的优化配制、培养容器的选用、菌种的选择、EM 培养的方法及过程。

本发明的特点是利用廉价易得的大米粉、红砂糖、玉米粉作为主要营养源, 制备出营养合理、全面的液体培养基;再通过合理的选择培养容器,调整培育 环境的温度及光照强度,仅需要3~4天的时间即可培育出优质、活力强的EM 产品。

本发明是通过以下技术方案来实现的:

1、一种EM简易、快速繁殖的方法,技术方案包括:液体培养基的优化配 制;培养容器的选用;菌种的选择;培养的方法及过程。

2、一种EM简易、快速繁殖的方法,技术方案中液体培养基的各种原料配 比如下:

(1)大米粉:1公斤。

(2)玉米粉:0.5公斤。

(3)红砂糖:2公斤。

(4)酵母粉:0.5公斤。

(5)蛋白胨:100克。

(6)磷酸二氢钾:150克。

(7)微生素C(D-异抗坏血酸)75克。

(8)水:50公斤。

3、一种EM简易、快速繁殖的方法,技术方案中液体培养基的配制方法如 下:

(1)稀释大米粉:用10公斤冷水将大米粉进行稀释。

(2)稀释玉米粉:用5公斤冷水将玉米粉进行稀释。

(3)稀释红砂糖:用25公斤50~60℃的热水将红砂糖进行稀释。

(4)稀释酵母粉:用5公斤50~60℃热水将酵母粉进行稀释。

(5)稀释蛋白胨:用3公斤50~60℃的热水将蛋白胨进行稀释。

(6)稀释磷酸二氢钾:用1公斤50~60℃的热水将磷酸二氢钾进行稀释。

(7)稀释微生素C(D-异抗坏血酸):用1公斤50~60℃的热水将微生素C (D-异抗坏血酸)进行稀释。

(8)组料:将上述已分别稀释过的各种原料依次混装入培养容器内,再次 搅拌均匀即得液体培养基。

4、一种EM简易、快速繁殖的方法,技术方案中培养容器选用可密封的白 色塑料桶、玻璃瓶等非金属容器。

5、一种EM简易、快速繁殖的方法,技术方案中菌种的选择及用量如下:

(1)菌种的选择:有效活菌数为≥5×100/ml的高纯度EM原种。

(2)用量:1000ml。

6、一种EM简易、快速繁殖的方法,技术方案中EM培养的方法及过程如下:

(1)接种:将1000ml EM原种倒入液体培养基里并搅拌均匀。

(2)发酵培养:接种后将培养容器口封紧,进行厌氧发酵培养。

(3)温度:培育环境的温度要控制在20℃以上、38℃以下,温度低于20 ℃会延长培育时间,温度高于38℃会加速微生物的老化甚至死亡。

(4)培育的环境:培养容器要放置在光照强度较强的环境,光照强度一天 要有8个小时以上的2000~3000勒克斯(LX),却又不可完全暴露在太阳光下 培育。

(5)培养时间:在25~30℃的温度环境下培养3~4天,即繁殖成成品。

与现有的技术相比,本发明既有如下优点:

1、本发明是利用廉价易得的大米粉、红砂糖、玉米粉作为主要营养源,制 备出营养合理、全面的液体培养基。

2、本发明中液体培养基的主要载体只需普通水,制备时无需高温灭菌,无 需使用纯净水设备。

3、本发明应用菌种量少,培育周期短,仅需要3~4天的时间即可培育出 优质、活力强的EM产品。

4、通过本发明生产出来的EM产品细菌量高、质量好,可广泛应用于种植 业、养殖业、食品加工、环保等领域。

5、本发明的实施无需照价昂贵的专用发酵设备,仅利用普通的塑料桶即可 工厂化、批量生产。

6、实施本发明工艺简单、生产灵活方便,产品生产成本低、效果佳,值得 大力推广。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的方法进一步说明。

一种EM简易、快速繁殖的方法,具体实施方法是:

1、一种EM简易、快速繁殖的方法,技术方案包括:液体培养基的优化配 制;培养容器的选用;菌种的选择;培养的方法及过程。

2、一种EM简易、快速繁殖的方法,技术方案中液体培养基的各种原料配 比如下:

(1)大米粉:1公斤。

(2)玉米粉:0.5公斤。

(3)红砂糖:2公斤。

(4)酵母粉:0.5公斤。

(5)蛋白胨:100克。

(6)磷酸二氢钾:150克。

(7)微生素C(D-异抗坏血酸)75克。

(8)水:50公斤。

3、一种EM简易、快速繁殖的方法,技术方案中液体培养基的配制方法如 下:

(1)稀释大米粉:用10公斤冷水将大米粉进行稀释。

(2)稀释玉米粉:用5公斤冷水将玉米粉进行稀释。

(3)稀释红砂糖:用25公斤50~60℃的热水将红砂糖进行稀释。

(4)稀释酵母粉:用5公斤50~60℃热水将酵母粉进行稀释。

(5)稀释蛋白胨:用3公斤50~60℃的热水将蛋白胨进行稀释。

(6)稀释磷酸二氢钾:用1公斤50~60℃的热水将磷酸二氢钾进行稀释。

(7)稀释微生素C(D-异抗坏血酸):用1公斤50~60℃的热水将微生素C (D-异抗坏血酸)进行稀释。

(8)组料:将上述已分别稀释过的各种原料依次混装入培养容器内,再次 搅拌均匀即得液体培养基。

4、一种EM简易、快速繁殖的方法,技术方案中培养容器选用可密封的白 色塑料桶、玻璃瓶等非金属容器。

5、一种EM简易、快速繁殖的方法,技术方案中菌种的选择及用量如下:

(1)菌种的选择:有效活菌数为≥5×100/ml的高纯度EM原种。

(2)用量:1000ml。

6、一种EM简易、快速繁殖的方法,技术方案中EM培养的方法及过程如下:

(1)接种:将1000ml EM原种倒入液体培养基里并搅拌均匀。

(2)发酵培养:接种后将培养容器口封紧,进行厌氧发酵培养。

(3)温度:培育环境的温度要控制在20℃以上、38℃以下,温度低于20 ℃会延长培育时间,温度高于38℃会加速微生物的老化甚至死亡。

(4)培育的环境:培养容器要放置在光照强度较强的环境,光照强度一天 要有8个小时以上的2000~3000勒克斯(LX),却又不可完全暴露在太阳光下 培育。

(5)培养时间:在25~30℃的温度环境下培养3~4天,即繁殖成成品。

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1、(10)授权公告号 CN 103255074 B (45)授权公告日 2014.12.03 CN 103255074 B (21)申请号 201210034445.2 (22)申请日 2012.02.15 C12N 1/20(2006.01) C12N 1/16(2006.01) (73)专利权人 何寒 地址 531500 广西壮族自治区百色市田东县 东宁西路合恒巷 253 号 (72)发明人 何寒 (54) 发明名称 一种 EM 简易、 快速繁殖的方法 (57) 摘要 本发明涉及一种微生物制剂领域, 具体涉及 到一种 EM 简易、 快速繁殖的方法。具体包括液体 培养基的优化配制、 培养容器的。

2、选用、 菌种的选 择、 EM 培养的方法及过程。本发明的特点是利用 廉价易得的大米粉、 红砂糖、 玉米粉作为主要营养 源, 制备出营养合理、 全面的液体培养基 ; 通过合 理的选择白色塑料、 玻璃桶 ( 瓶 ) 作为培养容器, 再调整培育环境的温度及光照强度, 仅需要34 天的时间即可培育出优质、 活力强的 EM 产品。通 过本发明生产出来的 EM 产品细菌量高、 质量好, 可广泛应用于种植业、 养殖业、 食品加工、 环保等 领域。 (51)Int.Cl. 审查员 王溯铭 权利要求书 1 页 说明书 4 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书1页 说明书4页 (。

3、10)授权公告号 CN 103255074 B CN 103255074 B 1/1 页 2 1. 一种 EM 繁殖的方法, 其特征包括 : 液体培养基的优化配制 ; 培养容器的选用 ; 菌种 的选择 ; 培养的方法及过程 ; 所述的液体培养基的各种原料配比如下 : (1) 大米粉 : 1 公斤 ; (2) 玉米粉 : 0.5 公斤 ; (3) 红砂糖 : 2 公斤 ; (4) 酵母粉 : 0.5 公斤 ; (5) 蛋白胨 : 100 克 ; (6) 磷酸二氢钾 : 150 克 ; (7)D- 异抗坏血酸 : 75 克 ; (8) 水 : 50 公斤 ; 所述的液体培养基的配制方法如下 : (。

4、1) 稀释大米粉 : 用 10 公斤冷水将大米粉进行稀释 ; (2) 稀释玉米粉 : 用 5 公斤冷水将玉米粉进行稀释 ; (3) 稀释红砂糖 : 用 25 公斤 50 60的热水将红砂糖进行稀释 ; (4) 稀释酵母粉 : 用 5 公斤 50 60热水将酵母粉进行稀释 ; (5) 稀释蛋白胨 : 用 3 公斤 50 60的热水将蛋白胨进行稀释 ; (6) 稀释磷酸二氢钾 : 用 1 公斤 50 60的热水将磷酸二氢钾进行稀释。 (7) 稀释 D- 异抗坏血酸 : 用 1 公斤 50 60的热水将 D- 异抗坏血酸进行稀释 ; (8) 组料 : 将上述已分别稀释过的各种原料依次混装入培养容器内。

5、, 再次搅拌均匀即 得液体培养基 ; 所述的培养容器选用可密封的非金属容器 ; 所述的菌种的选择及用量如下 : (1) 菌种的选择 : 有效活菌数为 5100/ml 的高纯度 EM 原种 ; (2) 用量 : 1000ml ; 所述的 EM 培养的方法及过程如下 : (1) 接种 : 将 1000ml EM 原种倒入液体培养基里并搅拌均匀 ; (2) 发酵培养 : 接种后将培养容器口封紧, 进行厌氧发酵培养 ; (3) 温度 : 培育环境的温度要控制在 20以上、 38以下, 温度低于 20会延长培育时 间, 温度高于 38会加速微生物的老化甚至死亡 ; (4) 培育的环境 : 培养容器要放置。

6、在光照强度较强的环境, 光照强度一天要有 8 个小时 以上的 2000 3000 勒克斯 (LX), 却又不可完全暴露在太阳光下培育 ; (5) 培养时间 : 在 25 30的温度环境下培养 3 4 天, 即繁殖成成品。 权 利 要 求 书 CN 103255074 B 2 1/4 页 3 一种 EM 简易、 快速繁殖的方法 技术领域 0001 本发明涉及一种微生物制剂领域, 具体涉及到一种 EM 简易、 快速繁殖的方法。 技术背景 0002 EM 是英文 (Effective Microorganisms) 的缩写语, 中文译为 :“有效微生物群” 。 它是光合细菌、 乳酸菌群、 酵母菌群、。

7、 放线菌群、 丝状菌群等 5 科 10 属 80 余种微生物组成 的, 是由世界著名应用微生物学家日本琉球大学比嘉照夫教授等研究成功的。EM 技术是目 前世界上应用范围最大的一项生物工程技术, 和一般生物制剂相比, 它具有结构复杂、 性能 稳定、 功能齐全的优势, 表现出前所未有的高科技水平。 据有关资料报道, EM适用于种植业、 养殖业、 环保、 人体保健等多种领域。 0003 近些年来, 由于人类使用化肥、 农药, 使得土壤有益菌遭到严重破坏, 土壤肥力退 化, 如果不是一年比一年多地施放化肥农药就不会有好收成。而 EM 菌却含有大量的对土壤 有益的微生物, 施入土壤后, 通过繁殖等可使土。

8、壤重新进入良性循环。土壤环境变好了, 作 物也就增产了 ; 同样, 畜牧、 水产、 人体保健的机理也大致如此。 0004 由于 EM 功能广泛, 在种植、 养殖、 环境净化等方面都有着显著的作用。它在市场上 也就有很强的优势, 现在市场上各种 EM 的技术产品也应运而生 ; 这些 EM 产品中, 生产技术 工艺呈多样化, 申请号为201010618454.7的 “EM菌简易培养方法” , 该发明包括如下步骤A、 配制培养液、 装入配透气盖的塑料方桶中 ; B、 接种芽孢杆菌 ; C、 密闭培养24小时 ; D、 接种复 合乳酸菌、 酵母菌、 光合菌 ; E、 密闭培养。该发明名为简易, 其实工。

9、艺步骤多且繁杂。 0005 申请号为 2002.11.05 的 “一种适用于 EM 活菌生产的培养液的制备方法” , 该发明 以马铃薯为主要原料, 制成马铃薯蔗糖、 或葡萄糖培养液, 在此培养液中按一定比例加入蜂 蜜、 食用小苏打 (NaHCO2) 混合搅匀, 之后按 1 1 的体积比加入 EM 活菌混合搅匀置于密封 容器中在室温、 大于或小于室温下发酵。 该发明的培养液制备繁琐, 工艺中所应用菌种竟然 与培养液一样多的量, 导致生产成本过高。 0006 申请号为 200610019753.2 的 “一种微生物组合物 EM 活菌剂的生产方法” , 该发明 是用洗米水经调节 pH 值和中性蛋白酶。

10、处理后, 按比例加入适量废糖蜜或赤沙糖或淀粉糖 化浆液、 磷酸盐、 食盐、 硫酸盐、 酵母膏, 混合搅匀, 加热 100、 5 分钟, 冷却后, 按 10 20 的比例接种EM活菌液, 发酵培养而得。 该发明如果在工厂化生产时, 培养液的主要载体 洗米水是很难收集的 ; 另外工艺中所述的接入 EM 活菌液的量也达到 10 20, 生产成本 亦无形中增加。 0007 申请号为 200910115498.5 的 “EM 原露及其生产方法” , 该发明是通过优化培养基, 将好氧菌和兼性厌氧菌分别接入培养基进行好氧发酵和兼性厌氧发酵后, 再混合均匀后接 入培养基进行厌氧发酵, 使 EM 菌种均衡生产繁。

11、殖。该发明在实施的过程中需要特定的发酵 罐, 应用的原料种类繁多 ; 培养过程亦分多级, 使工艺步骤多且繁杂。 发明内容 说 明 书 CN 103255074 B 3 2/4 页 4 0008 本发明的目的是克服现有技术的不足而提供全新的一种 EM 简易、 快速繁殖的方 法。 具体包括液体培养基的优化配制、 培养容器的选用、 菌种的选择、 EM培养的方法及过程。 0009 本发明的特点是利用廉价易得的大米粉、 红砂糖、 玉米粉作为主要营养源, 制备出 营养合理、 全面的液体培养基 ; 再通过合理的选择培养容器, 调整培育环境的温度及光照强 度, 仅需要 3 4 天的时间即可培育出优质、 活力强。

12、的 EM 产品。 0010 本发明是通过以下技术方案来实现的 : 0011 1、 一种 EM 简易、 快速繁殖的方法, 技术方案包括 : 液体培养基的优化配制 ; 培养容 器的选用 ; 菌种的选择 ; 培养的方法及过程。 0012 2、 一种 EM 简易、 快速繁殖的方法, 技术方案中液体培养基的各种原料配比如下 : 0013 (1) 大米粉 : 1 公斤。 0014 (2) 玉米粉 : 0.5 公斤。 0015 (3) 红砂糖 : 2 公斤。 0016 (4) 酵母粉 : 0.5 公斤。 0017 (5) 蛋白胨 : 100 克。 0018 (6) 磷酸二氢钾 : 150 克。 0019 (。

13、7) 微生素 C(D- 异抗坏血酸 )75 克。 0020 (8) 水 : 50 公斤。 0021 3、 一种 EM 简易、 快速繁殖的方法, 技术方案中液体培养基的配制方法如下 : 0022 (1) 稀释大米粉 : 用 10 公斤冷水将大米粉进行稀释。 0023 (2) 稀释玉米粉 : 用 5 公斤冷水将玉米粉进行稀释。 0024 (3) 稀释红砂糖 : 用 25 公斤 50 60的热水将红砂糖进行稀释。 0025 (4) 稀释酵母粉 : 用 5 公斤 50 60热水将酵母粉进行稀释。 0026 (5) 稀释蛋白胨 : 用 3 公斤 50 60的热水将蛋白胨进行稀释。 0027 (6) 稀释。

14、磷酸二氢钾 : 用 1 公斤 50 60的热水将磷酸二氢钾进行稀释。 0028 (7) 稀释微生素 C(D- 异抗坏血酸 ) : 用 1 公斤 50 60的热水将微生素 C(D- 异 抗坏血酸 ) 进行稀释。 0029 (8) 组料 : 将上述已分别稀释过的各种原料依次混装入培养容器内, 再次搅拌均 匀即得液体培养基。 0030 4、 一种 EM 简易、 快速繁殖的方法, 技术方案中培养容器选用可密封的白色塑料 桶、 玻璃瓶等非金属容器。 0031 5、 一种 EM 简易、 快速繁殖的方法, 技术方案中菌种的选择及用量如下 : 0032 (1) 菌种的选择 : 有效活菌数为 5100/ml 的。

15、高纯度 EM 原种。 0033 (2) 用量 : 1000ml。 0034 6、 一种 EM 简易、 快速繁殖的方法, 技术方案中 EM 培养的方法及过程如下 : 0035 (1) 接种 : 将 1000ml EM 原种倒入液体培养基里并搅拌均匀。 0036 (2) 发酵培养 : 接种后将培养容器口封紧, 进行厌氧发酵培养。 0037 (3) 温度 : 培育环境的温度要控制在 20以上、 38以下, 温度低于 20会延长培 育时间, 温度高于 38会加速微生物的老化甚至死亡。 0038 (4) 培育的环境 : 培养容器要放置在光照强度较强的环境, 光照强度一天要有 8 个 说 明 书 CN 1。

16、03255074 B 4 3/4 页 5 小时以上的 2000 3000 勒克斯 (LX), 却又不可完全暴露在太阳光下培育。 0039 (5) 培养时间 : 在 25 30的温度环境下培养 3 4 天, 即繁殖成成品。 0040 与现有的技术相比, 本发明既有如下优点 : 0041 1、 本发明是利用廉价易得的大米粉、 红砂糖、 玉米粉作为主要营养源, 制备出营养 合理、 全面的液体培养基。 0042 2、 本发明中液体培养基的主要载体只需普通水, 制备时无需高温灭菌, 无需使用 纯净水设备。 0043 3、 本发明应用菌种量少, 培育周期短, 仅需要 3 4 天的时间即可培育出优质、 活 。

17、力强的 EM 产品。 0044 4、 通过本发明生产出来的 EM 产品细菌量高、 质量好, 可广泛应用于种植业、 养殖 业、 食品加工、 环保等领域。 0045 5、 本发明的实施无需照价昂贵的专用发酵设备, 仅利用普通的塑料桶即可工厂 化、 批量生产。 0046 6、 实施本发明工艺简单、 生产灵活方便, 产品生产成本低、 效果佳, 值得大力推广。 具体实施方式 0047 下面结合实施例对本发明的方法进一步说明。 0048 一种 EM 简易、 快速繁殖的方法, 具体实施方法是 : 0049 1、 一种 EM 简易、 快速繁殖的方法, 技术方案包括 : 液体培养基的优化配制 ; 培养容 器的选。

18、用 ; 菌种的选择 ; 培养的方法及过程。 0050 2、 一种 EM 简易、 快速繁殖的方法, 技术方案中液体培养基的各种原料配比如下 : 0051 (1) 大米粉 : 1 公斤。 0052 (2) 玉米粉 : 0.5 公斤。 0053 (3) 红砂糖 : 2 公斤。 0054 (4) 酵母粉 : 0.5 公斤。 0055 (5) 蛋白胨 : 100 克。 0056 (6) 磷酸二氢钾 : 150 克。 0057 (7) 微生素 C(D- 异抗坏血酸 )75 克。 0058 (8) 水 : 50 公斤。 0059 3、 一种 EM 简易、 快速繁殖的方法, 技术方案中液体培养基的配制方法如下。

19、 : 0060 (1) 稀释大米粉 : 用 10 公斤冷水将大米粉进行稀释。 0061 (2) 稀释玉米粉 : 用 5 公斤冷水将玉米粉进行稀释。 0062 (3) 稀释红砂糖 : 用 25 公斤 50 60的热水将红砂糖进行稀释。 0063 (4) 稀释酵母粉 : 用 5 公斤 50 60热水将酵母粉进行稀释。 0064 (5) 稀释蛋白胨 : 用 3 公斤 50 60的热水将蛋白胨进行稀释。 0065 (6) 稀释磷酸二氢钾 : 用 1 公斤 50 60的热水将磷酸二氢钾进行稀释。 0066 (7) 稀释微生素 C(D- 异抗坏血酸 ) : 用 1 公斤 50 60的热水将微生素 C(D-。

20、 异 抗坏血酸 ) 进行稀释。 0067 (8) 组料 : 将上述已分别稀释过的各种原料依次混装入培养容器内, 再次搅拌均 说 明 书 CN 103255074 B 5 4/4 页 6 匀即得液体培养基。 0068 4、 一种 EM 简易、 快速繁殖的方法, 技术方案中培养容器选用可密封的白色塑料 桶、 玻璃瓶等非金属容器。 0069 5、 一种 EM 简易、 快速繁殖的方法, 技术方案中菌种的选择及用量如下 : 0070 (1) 菌种的选择 : 有效活菌数为 5100/ml 的高纯度 EM 原种。 0071 (2) 用量 : 1000ml。 0072 6、 一种 EM 简易、 快速繁殖的方法。

21、, 技术方案中 EM 培养的方法及过程如下 : 0073 (1) 接种 : 将 1000ml EM 原种倒入液体培养基里并搅拌均匀。 0074 (2) 发酵培养 : 接种后将培养容器口封紧, 进行厌氧发酵培养。 0075 (3) 温度 : 培育环境的温度要控制在 20以上、 38以下, 温度低于 20会延长培 育时间, 温度高于 38会加速微生物的老化甚至死亡。 0076 (4) 培育的环境 : 培养容器要放置在光照强度较强的环境, 光照强度一天要有 8 个 小时以上的 2000 3000 勒克斯 (LX), 却又不可完全暴露在太阳光下培育。 0077 (5) 培养时间 : 在 25 30的温度环境下培养 3 4 天, 即繁殖成成品。 说 明 书 CN 103255074 B 6 。

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