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1、(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201510832604.7 (22)申请日 2015.11.26 C07F 9/10(2006.01) (71)申请人 青岛康原药业有限公司 地址 266300 山东省青岛市胶州市营海第三 工业园 (72)发明人 刘乃山 曾晓 刘翠珍 (54) 发明名称 一种鸭蛋黄卵磷脂的提取与精制方法 (57) 摘要 该发明首先利用鸭蛋为原料经过酶解离心等 操作得到卵磷脂粗品。再利用有机溶剂无机盐复 合沉淀法精制卵磷脂 , 大大提高卵磷脂纯度。本 发明具有工艺简单， 操作方便， 处理量大， 产率高， 产品纯度高、 成本低、 可控性好、 适应性强、 较。
2、适合 于大规模工业化制备等优点。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书2页 CN 105399766 A 2016.03.16 CN 105399766 A 1/1 页 2 1.一种鸭蛋黄卵磷脂的提取与精制方法， 具体包括如下步骤 ： 第一步， 鸭蛋黄卵磷脂的粗提 ： (1) 蛋黄分离 ： 取 3Kg 左右鸭蛋， 先用清水冲洗干净 ( 蛋壳可用 )， 再将蛋黄与蛋清分 离， 大约能获得 500 g 蛋黄 ( 须将蛋黄和蛋清彻底分离 ) ； （2) 加 0.05% 的一种蛋白酶在 37下水解 2 h ； (3) 乙醇的配制与加。
3、入 ： 配制体积分数为 90的乙醇 4500mL， 分 3 次加入蛋黄液中 ； (4) 离心提取 ： 将配好的溶液进行离心， 离心机的转速为 4000 r min， 温度为 40时 间 60 min， 取上清液 ； (5) 蒸发回收 ： 将 3 次提取的上清液在旋转蒸发仪上回收获得粗卵磷脂 ； (6) 干燥 ： 将粗卵磷脂放人冷冻干燥器中， 得到干物质 ； 第二步， 有机溶剂无机盐复合沉淀法精制鸭蛋黄卵磷脂 ： （1）以 95% 乙醇为溶剂， pH 值为 8.43， 加入卵磷脂质量的 50的 ZnC12乙醇溶液 100mL， 室温搅拌反应 32min， 过滤 ； 在该条件下所得制品中磷脂酰胆碱。
4、的含量为 79.2% ； （2） 将鸭蛋黄卵磷脂 (SPC) 粗品溶于适量无水乙醇中， 滴加 60%ZnC12 水溶液， 得乳白 色沉淀， 分离出沉淀并溶于一定量氯仿 ； （3） 再用 30%( 体积比 ) 乙醇溶液萃取除去 ZnC12 ( 用 AgNO3 鉴别 )， 有机层蒸去氯仿， 用乙醚、 丙酮清洗沉淀 10 次， 蒸去乙醚， 即得大豆卵磷脂产品 ； （4） 用 ZnC12 与卵磷脂生成配合物， 然后用丙酮沉淀， 最终得到卵磷脂纯度为 99.6%。 权 利 要 求 书 CN 105399766 A 2 1/2 页 3 一种鸭蛋黄卵磷脂的提取与精制方法 技术领域 0001 本发明属于生物技。
5、术领域， 具体地涉及到卵磷脂技术领域， 利用有机溶剂无机盐 复合沉淀法精制卵磷脂的方法。 背景技术 0002 卵磷脂被广泛应用于食品、 药品、 保健品、 化妆品和饲料中， 在临床上可用于治疗 动脉粥样硬化、 脂肪肝、 神经衰弱等。它广泛存在于动植物体中， 尤其在蛋黄中含量最高为 8 10， 而鸭蛋黄比鸡蛋黄还高出 05， 所以开发鸭蛋黄卵磷脂更具经济性。 0003 目前， 卵磷脂的提取方法主要为有机溶剂萃取法和超临界 C02 萃取法， 且通常认 为后者较理想， 但其原料需用蛋黄粉， 而蛋黄粉的制备常用喷雾干燥法， 使卵磷脂处于 50 以上的高温环境中， 降低了生物活性。此外， 采用超临界 C0。
6、2 萃取法仅能从蛋黄粉中提取出 中性脂肪， 卵磷脂的提取仍需乙醇作夹带剂才能提取， 本文直接采用乙醇提取法， 成本低， 工艺简单。 发明内容 0004 本发明的目的是领用一种更简便、 快捷、 可大规模工业生产的方法。 并且经专利搜 索没有利用有机溶剂无机盐复合沉淀法精制卵磷脂的专利。 0005 该发明的方案为 ： 鸭蛋清洗打蛋分离蛋黄酶解乙醇提取离心沉淀 进行乙醇 2 次提取第 2 次离心沉淀进行 3 次提取第 3 次离心合并 3 次上清液真 空浓缩冷冻干燥粗卵磷脂提取液加入 ZnCl2 搅拌过滤沉淀物丙酮低温 洗涤。 0006 1、 鸭蛋黄卵磷脂的粗提 ： (1) 蛋黄分离 ： 取 3Kg 。
7、左右鸭蛋， 先用清水冲洗干净 ( 蛋壳可用 )， 再将蛋黄与蛋清分 离， 大约能获得 500 g 蛋黄 ( 须将蛋黄和蛋清彻底分离 ) ； （2) 加 0.05% 的一种蛋白酶在 37下水解 2 h ； (3) 乙醇的配制与加入 ： 配制体积分数为 90的乙醇 4500mL， 分 3 次加入蛋黄液中 ； (4) 离心提取 ： 将配好的溶液进行离心， 离心机的转速为 4 000 r min， 温度为 40 时间 60 min， 取上清液 ； (5) 蒸发回收 ： 将 3 次提取的上清液在旋转蒸发仪上回收获得粗卵磷脂 ； (6) 干燥 ： 将粗卵磷脂放人冷冻干燥器中， 得到干物质。 0007 2、。
8、 有机溶剂无机盐复合沉淀法精制鸭蛋黄卵磷脂 （1）以 95% 乙醇为溶剂， pH 值为 8.43， 加入卵磷脂质量的 50的 ZnC12乙醇溶液 100mL， 室温搅拌反应 32min， 过滤。在该条件下所得制品中磷脂酰胆碱的含量为 79.2% ； （2） 将鸭蛋黄卵磷脂 (SPC) 粗品溶于适量无水乙醇中， 滴加 60%ZnC12 水溶液， 得乳白 色沉淀， 分离出沉淀并溶于一定量氯仿 ； （3） 再用 30%( 体积比 ) 乙醇溶液萃取除去 ZnC12 ( 用 AgNO3 鉴别 )。有机层蒸去氯仿， 说 明 书 CN 105399766 A 3 2/2 页 4 用乙醚、 丙酮清洗沉淀 10。
9、 次， 蒸去乙醚， 即得大豆卵磷脂产品 ； （4） 用 ZnC12 与卵磷脂生成配合物， 然后用丙酮沉淀， 最终得到卵磷脂纯度为 99.6%。 0008 具体实施方式 ： 下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。 0009 实例一 ： 1、 鸭蛋黄卵磷脂的粗提 (1) 蛋黄分离 ： 取 3Kg 左右鸭蛋， 先用清水冲洗干净 ( 蛋壳可用 )， 再将蛋黄与蛋清分 离， 大约能获得 500 g 蛋黄 ( 须将蛋黄和蛋清彻底分离 ) ； （2) 加 0.05% 的一种蛋白酶在 37下水解 2 h ； (3) 乙醇的配制与加入 ： 配制体积分数为 90的乙醇 4500mL， 分 3 次加入蛋黄液中 ；。
10、 (4) 离心提取 ： 将配好的溶液进行离心， 离心机的转速为 4 000 r min， 温度为 40 时间 60 min， 取上清液 ； (5) 蒸发回收 ： 将 3 次提取的上清液在旋转蒸发仪上回收获得粗卵磷脂 ； (6) 干燥 ： 将粗卵磷脂放人冷冻干燥器中， 得到干物质。 0010 2、 有机溶剂无机盐复合沉淀法精制鸭蛋黄卵磷脂 （1）以 95% 乙醇为溶剂， pH 值为 8.43， 加入卵磷脂质量的 50的 ZnC12乙醇溶液 100mL， 室温搅拌反应 32min， 过滤。在该条件下所得制品中磷脂酰胆碱的含量为 79.2% ； （2） 将鸭蛋黄卵磷脂 (SPC) 粗品溶于适量无水乙。
11、醇中， 滴加 60%ZnC12 水溶液， 得乳白 色沉淀， 分离出沉淀并溶于一定量氯仿 ； （3） 再用 30%( 体积比 ) 乙醇溶液萃取除去 ZnC12 ( 用 AgNO3 鉴别 )。有机层蒸去氯仿， 用乙醚、 丙酮清洗沉淀 10 次， 蒸去乙醚， 即得大豆卵磷脂产品 ； （4） 用 ZnC12 与卵磷脂生成配合物， 然后用丙酮沉淀， 最终得到卵磷脂纯度为 99.6%。 0011 以上所述， 仅是本发明的较佳实施例而已， 并非是对本发明作其它形式的限制， 任 何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等 效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容， 依据本发明的技术实质对以上实施例所 作的任何简单修改、 等同变化与改型， 仍属于本发明技术方案的保护范围。 说 明 书 CN 105399766 A 4 。