用作神经氨酸酶抑制剂的取代环戊烷和环戊烯化合物 【技术领域】
本发明涉及用作神经氨酸酶抑制剂的新型取代环戊烷和环戊烯化合物及其衍生物、用于预防、治疗或减轻病毒、细菌和其它感染的含所述化合物的药物组合物，及使用所述化合物的方法。本发明还涉及用于准备本发明的新型取代环戊烷和环戊烯化合物的新型中间体或母体。
发明的背景
尽管可得到信息财富，但流感仍是人类、低等哺乳动物和鸟类的潜在怯难性疾病。一旦发生感染，无有效的疫苗，也无合用的疗法。
流感病毒由单链RNA8个片段组成，依序包装在病毒颗粒中。每个片段编码一个主要病毒蛋白。复制复合物被包在由基质蛋白和脂质双层组成的膜中。脂质双层中嵌着两个表面糖蛋白刺突，即血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)。所有病毒基因均已被克隆，表面糖蛋白的三个二维结构已被确定。
流感病毒在两个表面抗原HA和NA上持续发生变异，中和抗体即针对这两个表面抗原。因此，疫苗和受治疗者的天然免疫系统不是十分有效。目前致力于发现作用于病毒颗粒其它部位的潜在抗病毒剂。本发明涉及在抑制病毒表面NA酶上有用的新型化合物。
此外，很多其它生物体也携带NA。很多这种具有NA的生物体也是人和/或哺乳动物的主要病原体，包括霍乱弧菌、产气荚膜梭状芽胞杆菌、肺炎链球菌、Arthrobacter sialophilas和其它病毒，如副流感病毒、流行性腮腺炎病毒、新城疫病毒、鸡瘟病毒和仙台病毒。本发明的化合物也针对这些生物体的抑制。
在病毒中，NA以四个大致呈球形的亚单位组成的四聚体和含疏水区的中央附着杆的形式存在，它借助该疏水区包埋在生物体的膜中。已提出NA有几种作用。该酶催化末端唾液酸和邻近糖残基之间α-酮苷键的裂解。唾液酸的除去降低了粘性，使病毒与上皮细胞接近。NA还破坏宿主细胞上地HA受体，使子代病毒颗粒从感染细胞释出。
研究表明，对于大多数流感病毒株而言，流感病毒神经氨酸苷酶活性部位保持基本不变。例如，比较流感A亚型和流感B的序列显示具有关键性结构和功能作用的保守残基。即使序列同源性仅约为30％，催化的残基中很多是保守的。此外，确定了流感A和B神经氨酸苷酶的三个二维结构。病毒结构的重叠表明活性部位明显的结构相似性。由于在目前已测序的所有已知的流感A神经氨酸苷酶中活性部位氨基酸残基是保守的，因此，基于神经氨酸苷酶的三个二维结构可设计出对流感A和/或B神经氨酸苷酶的不同株均有效的抑制剂。
一般说来，病毒进出感染部位移动被认为是NA的作用。抑制神经氨酸苷酶活性的化合物可保护个体免受感染和/或一旦感染则治愈个体。本发明的进一步目的是提供用本发明的化合物治疗和/或治愈病毒感染的方法。
已知神经氨酸的类似物(如2-脱氧-2，3-二脱氢-N-乙酰神经氨酸(DANA)及其衍生物)可体外抑制HA；但是，这些化合物在体内是无活性的(Palese &Schulman，化学预防和上呼吸道病毒感染，第1卷(J.S.Oxford编著)，CRCPress，1977，第189-205页)。
Von Itzstein等描述了用作抗病毒剂的下式所示α-D-神经氨酸的环己烷类似物及其药物盐： 其中：
A在式(a)中为O，C或S，在式(b)中为N或C；
R1为CO2H，PO3H2，NO2，SO2H，SO3H，四唑基-，CH2CHO，CHO或CH(CHO)2；
R2为H，OR6，F，Cl，Br，CN，NHR6，SR6或CH2X，其中X为NHR6卤素或OR6；
R3和R3’为H，CN，NHR6，SR6，=NOR6，OR6，胍基，NR6；
R4为NHR6，SR6，OR6，CO2R6，NO2，C(R6)3，CH2CO2R6，CH2NO2或CH2NHR6；
R5为CH2YR6，CHYR6CH2YR6或CHYR6CHYR6CH2YR6
R6为H，酰基，烷基，烯丙基或芳基；
Y为O，S，NH，或H。
此外，美国专利No.5，453，533提示某些苯衍生物可作为流感病毒神经氨酸苷酶抑制剂，美国专利No.5，602，277中公开了其它各种类型。Yamamoto等在“对神经氨酸苷酶具有抑制活性的唾液酸异构体的合成”一文(Tertrahedron Letters，Vol.33，No.39，pp.5791-5794，1992)中描述了对神经氨酸苷酶具有抑制活性的各种唾液酸异构体。Gilead sciences，Inc.的WO96/26933描述了可能作为神经氨酸苷酶抑制剂的六元环化合物。
但是，这些文献无一揭示本发明的环戊烷和环戊烯衍生物。
发明的概述
本发明的一个方面涉及下式所示化合物及其药学上可接受的盐： 其中
U为CH，O或S；
Z为-C(R2)(R3)，-CH-N(R2)(R3)，C(R3)[(CH2)nR2]，CH-C(R3)(R8)(CH2)nR2，C[(CH2)nR2]-[CH(R3)(R8)]，C[(R3)][CH[(CH2)nR2](R8)]；
R1为H，(CH2)nOH，(CH2)nNH2，(CH2)nNR10R11，(CH2)nOR11，(CH2)nSR11或(CH2)n卤素；
R9为(CH2)nCO2H，(CH2)nSO3H，(CH2)nPO3H2，(CH2)nNO2，CH(SCH3)3，其酯或盐；
或R1R9在一起代表=O，或
R2为H，NHC(O)R5，NHC(S)R5，NHSO2R5，C(O)NHR5，SO2NHR5，CH2S(O)R5，或CH2SO2R5；
R3和R8各自为H，(CH2)nC(O)R10，(CH2)nCO2R10，(CH2)mOR10，CH(OR10)CH(R10)m，C(O)N(R10)m，C(O)N(OR10)R10，(CH2)nN(R10)m，CH(R10)m，(CH2)n(R10)m，CH2CH(OR10)CH2OR10，CH(OR10)CH(OR10)CH2OR10，CH2OR10，CH(OR10)CH2NHR10，CH2CH(OR10)CH2NHR10，CH(OR10)CH(OR10)CH2NHR10，C(=NR10)N(R10)m，NHR10，NHC(=NR10)N(R10)m，(CH2)m-X-W-Y，CH2CH(X-W-Y)CH2OR10，CH(X-W-Y)CH(OR10)CH2OR10，CH(X-W-Y)CH2(OR10)，CH(OR10)CH(X-W-Y)CH2OR10，CH(OR10)CH2(X-W-Y)，CH2CH(X-W-Y)CH2NHR10，CH(X-W-Y)CH(OR10)CH2NHR10，CH(X-W-Y)CH2(NHR10)，CH(OR10)CH(X-W-Y)CH2NHR10或CH(NHR10)CH2(X-W-Y)；
条件为R2，R3和R8中至少一个不是H；
R4为H，(CH2)nOH，(CH2)nOR11，(CH2)nOC(O)R11，(CH2)nNHC(NR11)NHR11，(CH2)nNR10R11，(CH2)nNH2，(CH2)nC(=NH)(NH2)，(CH2)nNHC(=NR11)NH2，(CH2)nNHC(=NR7)NH2，(CH2)nCN，(CH2)nN3，C(=NH)NH2，C(NR7)NH2或C(NR11)NH2；
R5为H，低级烷基，环烷基，卤素取代的烷基，芳基，取代芳基或CF3；
R7为H，(CH2)nOH，(CH2)nCN，(CH2)nNH2或(CH2)nNO2；
R10为H，低级烷基，低级链烯基，支链烷基，环烷基，(CH2)n芳香基，
(CH2)n取代芳香基，或当m为2时两个R10基可互连形成N取代的杂环，或其它五元或六元杂环；
R11为低级烷基，支链烷基，(CH2)m芳香基，SO2R10，C(O)R10，或(O)OR10；
R12和R13为H，(CH2)nOH，(CH2)nNH2，(CH2)nNR10R11，(CH2)nOR11，(CH2)nF，(CH2)nOC(O)R11，(CH2)nNHC(O)R11或X-W-Y；
m为1或2；
n为0-4；
p为0或1；
X为O，S，CH2或NH；
W为1-100个原子的链形成的间隔基，还可任选地包含取代的碳和/或氮原子，可任选地包含氧原子或硫原子；及
Y为H，OH，SH，NH2，CH=O，CH=CH2，CO2H，CONHNH2，或这些末端官能团的一种保护形式。
本发明还涉及用于抑制流感病毒神经氨酸苷酶的组合物，包含药学上可接受的载体和抑制流感病毒神经氨酸苷酶有效量的上面所定义的化合物。
本发明的另一个方面涉及抑制流感病毒的方法，包括：对需要的患者给予抑制流感病毒神经氨酸苷酶有效量的上面所定义的化合物。
本发明的再一个方面涉及治疗流感病毒感染的方法，包括：对需要治疗的患者给予抑制流感病毒神经氨酸苷酶有效量的上面所定义的化合物。
本发明的另一个方面涉及下式表示的中间体、其酯或其盐： 其中R4和R9定义如上；且 其中R14各自为H，O，(CH2)nCO2H，(CH2)nSO3H，(CH2)nPO3H2，(CH2)nNO2，CH(SCH3)3，条件为R14中至少一个为H，R3和R4定义如上。
实施本发明的最佳方式和各种方式
本发明的一个方面涉及下式所示化合物及其药学上可接受的盐： 其中
U为CH，O或S；
Z为-C(R2)(R3)，-CH-N(R2)(R3)，C(R3)[(CH2)nR2]，CH-C(R3)(R8)(CH2)nR2，C[(CH2)nR2]-[CH(R3)(R8)]，C[(R3)][CH[(CH2)nR2](R8)]；R1为H，(CH2)nOH，(CH2)nNH2，(CH2)nNR10R11，(CH2)nOR11，(CH2)nSR11或(CH2)n卤素；
R9为(CH2)nCO2H，(CH2)nSO3H，(CH2)nPO3H2，(CH2)nNO2，CH(SCH3)3，其酯或盐；
或R1R9在一起代表=O，或
R2为H，NHC(O)R5，NHC(S)R5，NHSO2R5，C(O)NHR5，SO2NHR5，CH2S(O)R5，或CH2SO2R5；
R3和R8各自为H，(CH2)nC(O)R10，(CH2)nCO2R10，(CH2)mOR10，CH(OR10)CH(R10)m，C(O)N(R10)m，C(O)N(OR10)R10，(CH2)nN(R10)m，CH(R10)m，(CH2)n(R10)m，CH2CH(OR10)CH2OR10，CH(OR10)CH(OR10)CH2OR10，CH2OR10，CH(OR10)CH2NHR10，CH2CH(OR10)CH2NHR10，CH(OR10)CH(OR10)CH2NHR10，C(=NR10)N(R10)m，NHR10，NHC(=NR10)N(R10)m，(CH2)m-X-W-Y，CH2CH(X-W-Y)CH2OR10，CH(X-W-Y)CH(OR10)CH2OR10，CH(X-W-Y)CH2(OR10)，CH(OR10)CH(X-W-Y)CH2OR10，CH(OR10)CH2(X-W-Y)，CH2CH(X-W-Y)CH2NHR10，CH(X-W-Y)CH(OR10)CH2NHR10，CH(X-W-Y)CH2(NHR10)，CH(OR10)CH(X-W-Y)CH2NHR10或CH(NHR10)CH2(X-W-Y)；
条件为R2，R3和R8中至少一个不是H；
R4为H，(CH2)nOH，(CH2)nOR11，(CH2)nOC(O)R11，(CH2)nNHC(NR11)NHR11，(CH2)nNR10R11，(CH2)nNH2，(CH2)nC(=NH)(NH2)，(CH2)nNHC(=NR11)NH2，(CH2)nNHC(=NR7)NH2，(CH2)nCN，(CH2)nN3，C(=NH)NH2，C(NR7)NH2或C(NR11)NH2；
R5为H，低级烷基，环烷基，卤素取代的烷基，芳基，取代芳基或CF3；
R7为H，(CH2)nOH，(CH2)nCN，(CH2)nNH2或(CH2)nNO2；
R10为H，低级烷基，低级亚烷基，支链烷基，环烷基，(CH2)n芳香基，
(CH2)n取代芳香基，或当m为2时两个R10基可互连形成N取代的杂环，或其它五元或六元杂环；
R11为低级烷基，支链烷基，(CH2)m芳香基，SO2R10，C(O)R10，或(O)OR10；
R12和R13为H，(CH2)nOH，(CH2)nNH2，(CH2)nNR10R11，(CH2)nOR11，(CH2)nF，(CH2)nOC(O)R11，(CH2)nNHC(O)R11或X-W-Y；
m为1或2；
n为0-4；
p为0或1；
X为O，S，CH2或NH；
W为1-100个原子的链形成的间隔基，还可任选地包含取代的碳和/或氮原子，可任选地包含氧原子或硫原子；及
Y为H，OH，SH，NH2，CH=O，CH=CH2，CO2H，CONHNH2，或这些末端官能团的保护形式。
本发明还涉及下式表示的中间体、其酯或其盐： 其中R4和R9定义如上；和 其中R14各自为H，O，(CH2)nCO2H，(CH2)nSO3H，(CH2)nPO3H2，(CH2)nNO2，CH(SCH3)3，
条件为R14中至少一个为H，R3和R4定义如上。
低级烷基包含1至约8个碳原子，较佳为1至约3个碳原子，可以是直链、支链或环状的饱和脂肪烃基。
合适的烷基的例子包括甲基、乙基和丙基。支链烷基的例子包括异丙基和叔丁基。合适的环脂基典型地具有3-8个碳原子，包括环戊基和环己基。芳香基即芳基，较佳为苯基或烷基取代的芳香基(芳烷基)，例如苯基C1-3烷基(如苄基)，或卤素取代的芳基。
取代的环烷基的例子包括环上被典型地含有1-6个碳原子的烷基和/或羟基取代的典型地具有3-8个碳原子的环脂基。通常有1或2个取代基。
酯典型地为具有1至约12个碳原子(较佳为1至约3个碳原子)的低级烷酯和含有6-14个碳原子的芳酯。烷酯可以是直链、支链或环状饱和脂肪烃的酯。
某些烷酯的例子为甲酯、乙酯、丙酯、异丙酯、叔丁酯、环戊酯和环己酯。芳酯较佳为苯基或烷基取代的芳香酯(烷基芳基)，包括C1-3烷基取代的苯基，如苄基。低级亚烷基可以是直链、支链或环状不饱和脂肪烃基，含有2-8个碳原子，较佳为2-3个碳原子。亚烷基的例子为乙烯基、1-丙烯基、烯丙基、异丙烯基、2-甲基-2-丙烯基和环戊烯基。
N-杂环的环上含有3-7个原子。杂环可被诸如低级烷基取代。合适的杂环基的例子为吡咯烷基、氮杂环丁基、哌啶基、3，4-二氢哌啶基、2-甲基哌啶基和2-乙基哌啶基。
合适的间隔基W包括(但不限于)线型肽、寡糖、多元醇、聚乙二醇基、烃基和与氧或硫原子或与羰基、酰氨基、脲或肼官能团连接的烃基。间隔基W还可包括这些不同基团的组合。间隔基可以是直链或支链。
合适的官能团Y的保护基包括(但不限于)OH、SH、CO2H基团的酯，NH2和CONHNH2基的氨基甲酸酯，及CH=O基的缩醛。
本说明书所用的术语“烃基”包括饱和及不饱和直链或支链烃基，包括芳基，以及这些基团的组合。
式(Ⅰ)化合物的药学上可接受的盐包括从药学上可接受的无机和有机酸、碱衍生的盐。合适的酸包括例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、高氯酸、富马酸、马来酸、磷酸、乙醇酸、乳酸、水杨酸、琥珀酸、甲苯-p-磺酸、酒石酸、乙酸、柠檬酸、甲磺酸、甲酸、苯甲酸、丙二酸、萘-2-磺酸、三氟乙酸和苯磺酸。
从合适的碱衍生的盐包括来自诸如钠和氨之类碱的盐。
当然可以理解，本发明的化合物涉及在分子的各种可能的原子上的所有旋光异构体和立体异构体。
本发明范围内一些特殊式子的例子如下：
本发明用于如下类型化合物的命名系统为：
有时，用α和β表示这些基团互为反式。这些情况是在环戊烷环上有两个以上取代基而仅两个固定时。
在稠合环戊(d)异噁唑系统中，序号如下：
本申请的某些特殊化合物和中间体的例子在如下实施例中加以鉴定：实施例2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17，18，19，20，21，22，23，24，25，26，27，28，29，30，31，32，33，34，35，36，37，39，40，41，42，43，44，45，46，47，48，49，50，51，52，53，54，55，56，57，58，59，60，61，62，63，64，65，66，67，68，69，70，71，72，73，74，75，76，77，78，79，80，81，82，83，84，85，86，87，88，89，90，91，92，93，94，95，96，97，98，99，100，101，102，103，104，105，106，107，108，109，110，111，112，113，114，115，116，117，118，119，120，121，122，123，124，125，126，127，128，129，130，131，132，133，134，135，136，137，138，139，140，141，142，143，144，145，146，147，148，149，150，151，152，153，154，155，156，157，158，159，160，161，162，163，164，165，166，167，168，169，170，171，172，173，174，175，176，177，178，179，180，181，182，183，184，185，186，187，188，189，190，191，192，193，194，195，196，197，198，199，200，201，202，203，204，205，206，207，208和209。
下面的流程表示制备本发明化合物的方法。
流程1
流程2
流程3
流程4
流程5
流程6
流程7
流程8
流程9
45，46，53，54，62-64，72，73，76，77，80，81，84，85R=
47，55，56，65，66，74，78，82，86R=
48，57，67，75，79，83，87R=
49，58，68R=
50，59，69R=
51，60，70R=
52，61，71R=
53，55，62，65，72，76，80，84：C-1＇上的异构体A
54，56-61，64，66-71，73-75，77-79，81-83，85-87：C-1＇上的异构体B
63：C-1＇上的异构体A和B的混合物
44，49，50，51，52，58，59，60，61
在如下化合物中X=CH3
43，45，46，47，48，53，54，55，56，57，72，
73，74，75，76，77，78，79，80，81，82，83
在如下化合物中X=C2H5
44，49，50，51，52，58，59，60，61
流程1088-93：C-1＇上的异构体B
流程1180，81，94，95，98，99，102，103R=82，96，100，104R=83，97，101，105R=80，94，98，102：C-1＇上的异构体A81-83，96，97，99-101，103-105：C-1＇上的异构体B
流程1292，106-108：C-1＇上的异构体B
流程13
流程14
流程15
流程16
184，189，194：(-)X=Me，R=
185，190，195：(-)X=Me，R=
186，191，196：(-)X=Et，R=
187，192，197：(-)X=Et，R=
188，193，198：(-)X=Me，R=
199：(-)R=
200：(±)R=
流程17
流程18
此外，本发明的重要中间体化合物125-136可通过如下方法制得：将下式所示环戊烯 与相应的氧化腈(由异氰酸苯酯和硝基烷在三乙胺存在下或由氯肟和三乙胺制得)反应，产生环戊(d)异噁唑系统。然后可将该产物在PtO2存在下在乙醇和HCl中氢化开环，形成相应的氨基化合物。
制备本发明化合物的方法也可见于Chand等1998年5月13日申请的题为“取代的环戊烷和环戊烯化合物及某些中间体的制备”的美国专利No．60/085，252，该专利公开的内容引入本文作为参考。
下面举出非限制性实施例进一步阐述本发明。
实施例1(±)4-叠氮环戊-2-烯-1-酮(2，流程1)
于搅拌下，向冷却于0℃的叠氮化钠(2.12g，32.6mmol)的DMF(15ml)溶液中滴加4-溴环戊-2-烯1-酮(1，3.5g，21.7mmol，用Depuy等.J.Org.Chem.29，3503，1964的方法制得)的DMF(5ml)溶液，历时5分钟。将反应混合物于0℃搅拌30分钟，用乙酸乙酯(20ml)稀释。反应混合物用水(2×20ml)和盐水(2×20ml)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤。滤液真空浓缩，得一油状残渣。用快速柱色谱法(硅胶，10-15％乙酸乙酯己烷溶液)提纯，得到1.9g(71％)化合物2，为一油状物。
1H NMR(CDCl3)：δ2.35(dd，J=18.6和2.4Hz，1H)，2.77(dd，J=18.6和6.6Hz，1H)，4.67(dd，J=4.9和2.6Hz，1H)，6.35(dd，J=5.6和1.5Hz，1H)，7.54(dd，J=5.5和2.4Hz，1H)。
实施例2(±)3β-[1’-乙酰氨基-1’-双(乙氧基羰基)]甲基-4α-叠氮环戊-1-酮(3，流程1)
于氮气下，向乙酰氨基丙二酸二乙酯(1.25g，5.7mmol)的乙醇(10ml)溶液中加入新鲜切断的金属钠(0.03g，1.4mmol)。室温下将反应液搅拌至全部金属钠溶解。将反应混合物冷却至-40℃，滴加化合物2(0.7g，5.7mmol)的乙醇(5ml)溶液。将反应混合物于-40℃搅拌30分钟，用三氟乙酸(0.1ml，1.4mmol)淬灭。真空除去溶剂，得到粗化合物3，为一白色固体。将此固体溶于乙酸乙酯，水洗，干燥和真空浓缩，将所得的固体从乙醚／己烷中结晶析出，得到1.29(63％)化合物3，为一白色固体，熔点121-122℃。
1H NMR(CDCl3)：δ1.26(t，J=7.2 Hz，3H)，1.29(t，J=7.2Hz，3H)，2.05(s，3H)，2.27(m，2H)，2.54(dd，J=18和8Hz，lH)，2.78(dd，J=18和8Hz，1H)，3.26(m，1H)，4.30(m，4H)，4.38(m，1H)，6.78(br s，1H)；IR(KBr)：3331，2981，2107，1744，1605，1525cm-1;mS(ES+)：341.2(100％，M+1)。元素分析：计算值(C14H20N4O6)： C，49.4l；H，5.92；N，16.46 实测值： C，49.47；H，5.95；N，16.48
实施例3(±)3 β-[1'-乙酰氨基-l'-双(乙氧基羰基)]甲基-4α-叔丁氧基羰基氨基环戊-1-酮(4，流程1)
将化合物3(0.5g，1.5mmol)、二碳酸二叔丁酯(0．39g，1/77mmol)和10％Pd/C(0.14g)在乙酸乙酯(25ml)中的混合物于45psi下氢化l小时。滤去催化剂，滤液真空浓缩，得到粗化合物4。从乙醚／己烷中重结晶，得到0.28g(45％)化合物4，为一白色固体，熔点135-136℃。
1H NMR(CDCl3)：δ1.27(m，6H)，1.45(s，9H)，2.10(s，3H)，2.33(m，2H)，2.75(m，2H)，3.25(m，1H)，4.14(m，1H)，4.28(m，4H)，4.83(s，1H)，6.98(s，lH);IR(KBr)3365，2980，1739，1689，1519，1394，1275cm-1：mS(CI-)：413(10％，M-1)。元素分析：计算值(C19H30N2O8)： C，55.06；H，7.30；N，6.76 实测值： C，54.63；H，7.17；N，6.74
实施例4(±)2-{3 β-[1'-乙酰氨基-1'-双(乙氧基羰基)]甲基-4α-叔丁氧基羰基氨基-1-亚环戊基)-1，3-二噻烷(5，流程1)
于氮气下，向0℃的2-三甲基甲硅烷基-1，3-二噻烷(7.88g，41.5mmol)THF(100ml)混合物中滴加正丁基锂(1.6m己烷溶液，28.6ml，45.7mmol)，0℃搅拌45分钟。将阴离子冷却至-40℃，滴加化合物4(4.3g，10.4mmol)的THF(50ml)溶液，反应混合物于-40℃搅拌5小时，升温至-20℃。用饱和NH4Cl(50ml)淬灭反应，升温至室温，加入乙醚，分离有机层。水层用乙醚萃取(2×50ml)。合并有机层，干燥(MgSO4)和浓缩。所得的残渣用快速柱色谱法提纯(硅胶，30-35％乙酸乙酯己烷溶液)，得到3.16g(59％)化合物5，为一无色油状物，放置即固化，熔点66-68C。
1H NMR(CDCl3)：δ1.26(m，6H)，1.44(s，9H)，2.05(s，3H)，2.11(m，2H)，2.22(m，2H)，2.84(m，5H)，2.98(m，2H)，3.77(m，1H)，4.23(m，4H)，4.85(d，1H)，6.95(br s，1H)；IR(KBr)：3388，2979，2934，1743，1690，1512，1368，1242，1169 cm-1；mS(ES+)：517.7(35％，M+1)。元素分析：计算值(C23H36N2O7S2)：C，53.47；H，7.02；N，5.42 实测值： C，53.50；H，7.07；N，5.41
实施例5(±)2-{3β-(1’-乙酰氨基-1’-羧基)甲基-4α-叔丁氧基羰基氨基-1-亚环戊基}-1，3-二噻烷(6，C-1’上的异构体的混合物，流程1) 向化合物5(7.5g，14.53mmol)的乙醇(75ml)和水(25ml)溶液中加入1NNaOH(50.9ml，50.9mmol)，回流加热2小时。用冰醋酸(4.6ml，76.3mmol)淬灭，温和地回流加热2小时。滤集所得固体，水洗，在甲苯回流温度下真空干燥，得到1．63g(27％)化合物6，为一白色固体。滤液用乙酸乙酯萃取(3×100ml)，干燥(MgSO4)，过滤，将滤液真空浓缩，得到3.5g(58％)化合物6。从乙醇中重结晶，得到化合物6，为一白色固体，熔点174-176℃。
1H NMR(CDCl3)：δ1.35和1.36(two s，9H)，1.82(s，3H)，2.08(m，5H)，2.27(m，2H)，2.80(m，4H)，3.54(m，1H)，3.71(m，1H)，4.06(m，0.6H)，4.22(m，0.4H)，6.48(d，J=6Hz，0.6H)，6.98(m，0.4H)7.65(d，J=8Hz，1H)。NHAc碳原子上的异构体比例(A和B)为3∶2；IR(KBr)：3371，2977，1689，1530，1172cm-1。元素分析：计算值 (C18H28N2O5S2.0.75H2O)：C，50.27；H，6.91；N，6.51 实测值： C，50.03；H，6.54；N，6.41
实施例6(±)2-{3β-[1’-乙酰氨基-1’-[(N-甲氧基-N-甲基)氨基羰基]甲基]-4α-叔丁氧基羰基氨基-1-亚环戊基}-1，3-二噻烷(7，C-1’上的异构体的混合物，流程1)
于0℃下，向化合物6(5.13g，12.33mmol)的THF(120ml)溶液中滴加氯甲酸甲酯(1．01ml，13.56mmol)和三乙胺(2.2ml，15.42mmol)，0℃搅拌45分钟。将先搅拌过30分钟的盐酸N，0-二甲基羟胺(3.68g，37mmol)和三乙胺(7ml)的THF(25ml)溶液滴加到上述混合物中。将反应混合物再于室温下搅拌16小时。然后浓缩成残渣，加入0.1 N NaOH(100m1)和乙酸乙酯(100ml)。收集有机层。水层再用乙酸乙酯萃取(2×75ml)。合并有机层并干燥(MgSO4)。过滤后，将滤液浓缩，所得残渣用快速柱色谱法提纯{硅胶，90％乙酸乙酯的己烷溶液和25％(氯仿∶甲醇∶氢氧化铵(80∶18∶2))的二氯甲烷溶液}，得到4.2g(74％)化合物7，为一白色固体，熔点122-126℃。用乙醚-己烷重结晶制得分析样品。
1H NMR(CDCl3)：δ1.44(s，9×0.5H)，1.45(s，9×0.5H)，2.02(s，3×0.5H)，2.03(s，3×0.5H)，2.17(m，4H)，2.35(m，0.5H)，2.58(m，2H)，2.77(m，6H)，3.19(s，3×0.5H)，3.22(s，3×0.5H)，3.57(m，0.5H)，3.77(s，3×0.5H)，3.78(s，3×0.5H)，3.90(m，0.5H)，4.60(d，J=8Hz，0.5H)，4.89(br s，0.5H)，5.01(br s，0.5H)，5.16(m，0.5H)6.34(br s，0.5H)，6.89(br s，0.5H)。在NHAc碳原子上的异构体的比例(A和B)为1∶1；IR(KBr)：3341，3269，2978，2936，1715，1681，1653，1521，1156，1171cm-1。元素分析：计算值(C20H33N3O5S2)：C，52.26；H，7.24；N，9.14 实测值： C，52.34；H，7.20；N，9.09
实施例7(±)2-{3β-(1’-乙酰氨基-1’-甲酰基)甲基-4α-叔丁氧基羰基氨基-1-亚环戊基}-1，3-二噻烷(8，C-1’上的异构体A，和9，C-1’上的异构体B，流程1)
向化合物7(0.23g，0.5mmol)的THF(5ml)溶液中于0℃滴加三叔丁氧基铝氢化锂(1M THF溶液，1.1ml，1.1mmol)，室温搅拌16小时。用1 N HCl(1．0ml，pH 4)小心地将反应混合物淬灭，搅拌5分钟。向反应混合物中加入乙醚(10ml)和1．0M酒石酸钠钾水溶液(10ml)，室温搅拌30分钟。分离有机层，将水层再用乙醚萃取(2×10ml)。合并有机层，干燥(MgSO4)，真空浓缩，得到粗醛，为一白色固体。将粗产物用快速柱色谱法提纯(硅胶，50-80％乙酸乙酯的己烷溶液)，得到0.08g(40％，异构体A)化合物8，为一白色固体，熔点188-192℃(分解)。
1H NMR(CDCl3)：δ1.41(s，9H)，2.10(m，4H)，2.16(s，3H)，2.52(m，1H)，2.69(dd，J=17.5和7.7.Hz，1H)，2.83(m，5H)，3.73(m，1H)，4.54(d，J=8.8Hz，1H)，4.77(dd，J=9.6和2.1Hz，1H)，7.45(d，J=9.6Hz，1H)，9.49(s，1H)；IR(KBr)：3337，2982，1729，16811535，1166cm-1；mS(ES+)：401.4(100％，M+1)。元素分析：计算值(C18H28N2O452)：C，53.97；H，7.05；N，6.99 实测值： C，53.93；H，7.09；N，6.93
再洗脱，得到化合物9(0.07g，35％，异构体B)，mp＞180℃。
1H NMR(CDCl3)：δ1.45(s，9H)，2.08(s，3H)，2.13(m，3H)，2.41(m，1H)，2.55(m，1H)，2.67(dd，J=17.2和8Hz，1H)，2.84(m，5H)，3.70(m，1H)，4.38(m，1H)，4.79(m，1H)，6.76(br s，1H)，9.65(s，1H)；IR(KBr)：3335，2979，1730，1686，1533，1165cm-1；mS(ES+)：401.2(20％，M+1)。元素分析：计算值(C18H28N2O4S2)：C，53.97；H，7.05；N，6.99 实测值： C，54.03；H，7.05；N，6.97
实施例8(±)2-{3β-(1’-乙酰氨基-1’-乙氧基羰基)甲基-4α-叔丁氧基羰基氨基-1-亚环戊基}-1，3-二噻烷(10，C-1’上的异构体的混合物，流程2)
向化合物5(3.06g，5.94mmol)的乙醇(20ml)和水(15ml)溶液中加入1NNaOH(19.29ml，19.29mmol)，室温搅拌16小时。用冰醋酸(1.74ml，28.94mmol)将反应混合物淬灭，80-90℃加热1小时。滤集所得的固体，用水和己烷洗涤，干燥，到1.43g(54％)化合物10，为一白色固体，熔点157-167℃。
1H NMR(CDCl3)：δ1.86(m，3H)，144(s，9H)，2.04(s，1.2H)，2.09(s，1.8H)，2.14(m，3H)，2.57(m，2H)，2.69(m，1H)，2.87(m，5H)，3.67(m，0.4H)，3.87(m，0.6H)，4.19(m，2H)，4.49(d，J=8.6Hz，0.6H)，4.68(m，0.4H)，4.77(dd，J=8.9和3.6Hz，1H)，6.48(br s，0.4H)，6.99(d，J=8.5Hz，0.6H)The ratio of isomers A和B was 3：2；IR(KBr)：3338，2982，1740，1681，1545，1530，1170cm-1；mS(ES+)：445.6(20％，M+1)。元素分析：计算值(C18H28N2O4S2)：C，54.02；H，7.25；N，6.30 实测值： C，54.15；H，7.26；N，6.30
实施例9(±)2-{3β-(1’-乙酰氨基-2’-羟基)乙基-4α-叔丁氧基羰基氨基-1-亚环戊基}-1，3-二噻烷(11，C-1’上的异构体的混合物，流程2)
向化合物10(0.44g，1mmol)的THF(10ml)溶液中滴加氢硼化锂(2M THF溶液，1．0ml，2.0mmol)和锂9-BBN(1M THF溶液，1．0ml，0.1mmol)。将反应混合物室温搅拌16小时，用1 N NaOH(3ml)和盐水(3ml)小心淬灭，搅拌5分钟。用冰醋酸酸化反应液，加入乙醚(10ml)。分离有机层，水层进一步用乙醚萃取(2×10ml)。合并有机层，干燥(MgSO4)，真空干燥，得到粗醇，为一白色固体。将粗产物从乙醇中结晶析出，得到0.09g(22％)化合物11，为一白色固体，熔点222-226℃。滤液用快速柱色谱法提纯(硅胶，75％乙酸乙酯己烷溶液)，得到0.21g(52％)化合物11，为一白色固体。
1H NMR(DMSOd6)：δ1.34(s，9H)，1.81(s，3H)，2.07(m，6H)，2.69(dd，J=17.3和6.9Hz，1H)，2.82(m，4H)，3.62(m，2H)，3.66(t，J=7.4Hz，1H)，3.73(m，1H)，4.59(t，J=5.2Hz，1H)，6.80(d，J=7.1Hz，1H)，7.43(d，J=9.0Hz，1H)；IR(KBr)：3350，1685，1535，1173，1050 cm-1；mS(ES+)：403.5(100％，M+1)。元素分析：计算值(C18H30N2O4S2)：C，53.70；H，7.51；N，6.96 实测值： C，53.69；H，7.56；N，6.88
实施例10(±)2-{3β-(1’-乙酰氨基-2’-乙氧基)乙基-4α-叔丁氧基羰基氨基-1-亚环戊基}-1，3-二噻烷(12，C-1’上的异构体A；和13，C-1’上的异构体的混合物，流程2)
向搅拌下的化合物11(1．5g，3.73mmol)的DMF(20ml)溶液中于0℃加入95％NaH(0.125g，4.95mmol)。搅拌1小时后，滴加乙基碘(0.4ml，6.4mmol)，将反应混合物搅拌3小时。向反应混合物中加入水(20ml)，分离有机层。水层进一步用EtOAc(4×15ml)萃取。合并有机萃取物，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，经Celite过滤，滤液真空浓缩，得粗产物。用辐射状PLC(SiO2，50％EtOAc/己烷)提纯，先提供化合物12(0.75g，47％，异构体A)，为一白色固体，然后是异构体A和B的混合物，化合物13(11％)。
实施例11(±)3β-(1’-乙酰氨基-2’-乙氧基)乙基-4α-叔丁氧基羰基氨基环戊烷-1-羧酸甲酯(14，C-1’上的异构体A；和C-1上的混合物，流程3)和(±)3β-(1’-乙酰氨基-2’-乙氧基)乙基-4α-氨基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(15，C-1’上的异构体A；和C-1上的混合物，流程3)
于室温下，向搅拌中的化合物12(0.7g，1.63mmol)的甲醇(48ml)溶液中加入6 N HCl(4.0ml，24mmol)，将反应混合物搅拌24小时。向此混合物中加入NaOH(1．4g，35mmol)，搅拌1小时。用冰醋酸将反应混合物酸化，过滤，滤液真空浓缩，得到粗产物。用快速柱色谱法提纯(硅胶，75％EtOAc/己烷)，得到0.15g(34％)化合物14，为一棕色油状物。用CHCl3/MeOH/NH4OH(8∶1．8∶0.2)进一步洗脱，得到0.163g(37％)化合物15，为一黄色油状物。
1HNMR(DMSO-d6)：δ1.11(m，3H)，1.58(m，2H)，1.82(s，3H)，2.14-1.83(m，3H)，3.28-2.73(m，3H)，3.49-3.30(m，3H)，3.58(s，3H)，3.84-3.78(m，2H)，4.14(m，1H)，7.79-7.94(m，1H)；IR(NaCl)：3256，3065，2975，1732，1657，1556，1440，1376，1298cm-1；mS(ES+)：273.0(100％，M+1)。元素分析：计算值 (C13H24N2O4)： C，57.33；H，8.88；N，10.29 计算值 (C13H24N2O4·0.2CHCl3)： C，53.52；H，8.23；N，9.45 实测值： C，53.24；H，8.46；N，9.04
实施例12(±)3β-(1’-乙酰氨基-2’-乙氧基)乙基-4α-氨基环戊烷-1-羧酸(16，C-1’上的异构体A；和C-1上的混合物，流程3)
将化合物15(0.124g，0.046mmol)、1N NaOH(0.2ml，0.2mmol)和水(0.2ml)的混合物室温搅拌1小时。用冰醋酸中和反应混合物，用水稀释，得到化合物16，为29.2毫摩尔水溶液。
MS(ES+)：259.0(100％，M+1)。
实施例13(±)3β-(1’-乙酰氨基-2’-乙氧基)乙基-4α-[(氨基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-1-羧酸(17，C-1’上的异构体A；和C-1上的混合物，流程3)
将化合物15(0.0166g，0.0611mmol)、氨基亚氨基甲磺酸(0.1g，0.81mmol)和碳酸钾(0.1g，0.72mmol)在水中的混合物室温搅拌6小时。向此混合物中加入1 N NaOH(2ml，2mmol)，将混合物搅拌45分钟。用冰醋酸中和反应混合物，经棉花垫过滤，用水稀释，得到化合物17，为4.4毫摩尔溶液。
MS(ES+)：301.0(100％，M+1)。
实施例14(±)t-3-[1’-乙酰氨基-1’-双(乙氧基羰基)]甲基-c-4-叔丁氧基羰基氨基-t-1-[(三甲基硫代)甲基]环戊-r-1-醇(18，流程4)
在氮气下，向-78℃的三(甲基硫代)甲烷(1.6ml，12mmol)的THF(20ml)液中滴加正丁基锂(2.5M己烷溶液，5.3ml，13.3mmol)，于-78℃搅拌30分钟。向其中于-78℃滴加化合物4(1.0g，2.4mmol)的THF(15ml)溶液，将反应混合物于-78℃搅拌3小时。然后用饱和NH4Cl(15ml)淬灭，升温至室温。加入乙醚，分离有机层。水层用乙醚萃取(4×10ml)。合并有机层，干燥(MgSO4)，真空浓缩。所得残渣用辐射状PLC(50％乙酸乙酯己烷液)提纯，得到化合物18(0.48g，35％)，为一无色半固体。
1H NMR(CDCl3)：δ1.28(m，6H)，1.43(s，9H)，1.76(d，J=17Hz，1H)，2.03(s，3H)，2.13(m，1H)，2.25(s，9H)，2.42(m，1H)，2.51(m，1H)，2.98(m，1H)，3.17(s，1H)，3.93(m，1H)，4.26(m，4H)，5.40(d，J=9 Hz，1H)，7.57(s，1H)；IR(NaCl)：3383，2981，1738，1688，1526，1369，1274，1206，1168cm-1；mS(ES+)：569.3(100％，M+1)。元素分析：计算值(C23H40N2O8S3)：C，48.57；H，7.09；N，4.93 实测值： C，48.74；H，7.00；N，4.91
实施例15(±)t-3-[1’-乙酰氨基-1’-羧基]甲基-c-4-叔丁氧基羰基氨基-t-1-[(三甲基硫代)甲基]环戊-r-1-醇(19，C-1’上的异构体的混合物，流程4)
将化合物18(3.66g，6.4mmol)进行如关于化合物6所描述的反应，得到2.25g(75％)化合物19，为褐色固体，熔点220-223℃(分解)。
1H NMR(CDCl3)：δ1.36(s，9H)，1.49(m，1H)，1.81(m，5H)，2.16(s，9H)，2.48(m，2H)，2.61(m，1H)，3.66(m，1H)，4.03(m，1H)，4.93(m，1H)，6.40(m，1H)，7.52(m，1H)；IR(KBr)3400，2979，2921，1684，1585，1417，1368，1250，1168cm-1；mS(ES+)：469.3(20％，M+1)。元素分析：计算值(C18H32N2O6S2.1．5H2O)：C，43.62；H，6.71；N，5.65 实测值： C，43.88；H，6.47；N，5.28
实施例16(±)t-3-[1’-乙酰氨基-1’-[(N-甲氧基-N-甲基)氨基羰基]甲基]-c-4-叔丁氧基羰基氨基-t-1-[(三甲基硫代)甲基]环戊-r-1-醇(20，C-1’上的异构体的混合物，流程4)
将化合物19(6.43g，13.5mmol)进行如关于化合物7所描述的反应，得到3.85g(56％)化合物20，为白色固体，熔点142-143℃。
1H NMR(CDCl3)：δ1.41(s，9H)，1.77(m，1H)，2.01(m，5H)，2.39(s，9H)，2.49(m，2H)，3.21(s，3H)，3.36(m，1H)，3.85(s，3H)，4.34(br s，1H)，5.11(br s，1H)，5.51(m，1H)，7.26-7.69(m，1H)；IR(KBr)：3427，3315，1681，1637cm-1；mS(ES+)：512.5(M+1)。元素分析：计算值(C20H37N3O6S3)：C，46.94；H，7.29；N，8.21 实测值： C，47.13；H，7.34；N，8.16
实施例17(±)t-3-[1’-乙酰氨基-1’-甲酰基]甲基-c-4-叔丁氧基羰基氨基-t-1-[(三甲基硫代)甲基]环戊-r-1-醇(21，C-1’上的异构体的混合物，流程4)
将化合物20(1．12g，2.18mmol)进行如关于化合物8和9所描述的反应，得到0.29g(25％)化合物21，为淡黄色固体，熔点78-79℃。
1H NMR(CDCl3)：δ1.44(s，9H)，1.75-2.18(m，5H)，2.08(s，9H)，2.46(m，2H)，2.58(m，1H)，3.10(s，0.5H)，3.26(s，0.5H)，3.82(m，1H)，4.13(m，0.5H)，4.53(m，0.5H)，5.37(d，J=8.8Hz，0.5H)，5.58(d，J=8.5Hz，0.5H)，8.03(m，1H)，9.42(s，0.5H)，9.61(s，0.5H)；IR(KBr)：3329，2979，2921，1683，1527，1367，1169cm-1；mS(ES+)：453.4(100％，M+1)。元素分析：计算值(C18H32N2O5S3)：C，47.76；H，7.13；N，6.19 实测值 C，47.70；H，7.17；N，6.11
实施例18(±)t-3-[(1’-乙酰氨基-3’-乙基-2’-氧代)戊基]-c-4-叔丁氧基羰基氨基-t-1-[(三甲基硫代)甲基]环戊-r-1-醇(22，C-1’上的异构体的混合物，流程4)
在一干的园底烧瓶中加热干Mg(17.1g，704mmol)和碘(1个结晶)直至碘升华。停止加热，使紫色蒸气沉降在Mg上。向反应混合物中加入THF(250ml)和几滴3-溴戊烷，然后加热引起反应。以维持温和回流的速度将剩下的3-溴戊烷(100ml，805mmol)滴加到反应混合物中。冷却至室温后，将反应液转入一个干净的干烧瓶中。向此混合物中加入化合物21(4.0g，8.84mmol)在干燥THF(100ml)中的混合物，混合物室温搅拌16小时。用水(100ml)淬灭反应混合物，用Et2O(3×50ml)萃取。合并有机层，用盐水(3×50ml)洗涤，干燥(Na2SO4)。真空除去溶剂，得一粗混合物，用快速柱色谱法提纯(硅胶，20％EtOAc/己烷)，得到1.44g(33％)化合物22。
实施例19(±)t-3-[(1’-乙酰氨基-3’-乙基-2’-羟基)戊基]-c-4-叔丁氧基羰基氨基-t-1-[(三甲基硫代)甲基]环戊-r-1-醇(23，C-1’和C-2’上的异构体的混合物，流程4)
将化合物22(1.4g，2.62mmol)与NaBH4(0.2g，5.29mmol)共同放入干甲醇(20ml)中，室温搅拌1小时，用冰醋酸中和。真空除去溶剂，得一残渣，收集在水中，用乙酸乙酯萃取(3×50ml)。合并有机萃取液，干燥(MgSO4)，浓缩得一粗反应混合物，用快速色谱法提纯(硅胶，50％乙酸乙酯/己烷，然后用甲醇/乙酸乙酯洗脱)，得到化合物23(0.75g，53％)。
实施例20(±)c-3-[(1’-乙酰氨基-3’-乙基-2’-羟基)戊基]-t-4-叔丁氧基羰基氨基-t-1-羟基环戊烷-r-1羧酸甲酯(24，C-1’和C-2’上的异构体的混合物，流程4)
将化合物23(0.74g，1．38mmol)的甲醇/水(12∶1，35ml)溶液、HgCl2(1．43g，5.27mmol)和HgO(0.49g，2.26mmol)的混合物室温搅拌2小时。将反应混合物经Celite过滤，用甲醇(25ml)洗涤Celite。滤液真空浓缩，留下白色残渣，将其在水(50ml)和乙酸乙酯(50ml)中分配。分离乙酸乙酯层，水层再用乙酸乙酯(2×50ml)萃取。合并有机层，用盐水洗涤(2×50ml)，干燥(MgSO4)。过滤后，将滤液浓缩，得一粗反应混合物。将此粗反应混合物用快速色谱法提纯(硅胶，60％乙酸乙酯/己烷)，得到化合物24(0.27g，43％)。
实施例21(±)c-3-[(1’-乙酰氨基-3’-乙基-2’-羟基)戊基]-t-4-[(叔丁氧基羰基氨基叔丁氧基羰基亚氨基)甲基]氨基-t-1-羟基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(25，C-1’或C-2’上的一个异构体和其它上的混合物；26，C-1’和C-2’上的混合物，流程5)
将化合物24(0.23g，0.52mmol)在二氯甲烷(10ml)和TFA(1ml)中的混合物室温搅拌16小时。将混合物真空浓缩，与二氯甲烷(2×5ml)共蒸发以除去痕量TFA。残渣在高真空下干燥。向残渣中加入干燥的DMF(5ml)、Et3N(0.5ml，3.6mmol)、双-(叔丁氧基羰基)-2-甲基-2-硫代假脲(0.15g，0.52mmol)和HgCl2(0.15g，0.55mmol)。将混合物室温搅拌4小时。用乙酸乙酯稀释混合物，经Celite过滤。滤液用水(2×50ml)和盐水(2×50ml)洗涤，干燥(NaSO2)。过滤后，将滤液浓缩，得到粗产物，用辐射状PLC(SiO2)提纯，以30％乙酸乙酯/己烷为洗脱液，先得到0.06g(20％)化合物25，接着是0.085g(28％)化合物26。
实施例22(±)c-3-[(1’-乙酰氨基-3’-乙基-2’-羟基)戊基]-t-4-(氨基亚氨基甲基)氨基-t-1-羟基环戊烷-r-1-羧酸(27，C-1’和C-2’上的混合物，流程5)
将化合物26(0.075g，0.13mmol)在二氯甲烷(3ml)中的混合物与TFA(0.5ml)一起室温搅拌16小时。将反应混合物浓缩，在高真空下干燥，得到c-3-[(1’-乙酰氨基-3’-乙基-2’-羟基)戊基]-t-4-(氨基亚氨基甲基)氨基-t-1-羟基环戊烷-r-1-羧酸甲酯；MS(ES+)：373(M+1)。
将上述产物(0.015g，0.04mmol)与1 N NaOH(0.1ml，0.1mmol)和水(0.2ml)一起搅拌16小时。溶液用乙酸中和，经棉花过滤，用水稀释，得到13.2毫摩尔化合物27的溶液。
实施例23(±)c-3-[(1’-乙酰氨基-3’-乙基-2’-羟基)戊基]-t-4-(氨基亚氨基甲基)氨基-t-1-羟基环戊烷-r-1-羧酸(28，C-1’或C-2’上的一个异构体及其它上的混合物，流程5)
将化合物25(0.045g，0.078mmol)如关于化合物27所述进行反应，得到5.37毫摩尔化合物28的溶液。
实施例24(±)2-{3β-(1’-乙酰氨基-3’-乙基)-2’-戊烯基-4α-叔丁氧基羰基氨基-1-亚环戊基}-1，3-二噻烷(29，C-1’上的异构体A；C-2’上的混合物，流程6)
于-78℃向溴化丙基三苯基鏻(0.5g，1．3mmol)的THF(15ml)悬浮液中滴加双(三甲基甲硅烷基)酰胺钠NaHMDS(1M THF溶液，1．3ml，1.3mmol)。搅拌30分钟后，使反应混合物升温至0℃，搅拌30分钟。向此混合物中加入化合物8(0.21g，0.52mmol)的THF(10ml)溶液，将反应混合物搅拌1小时。再滴加另外量的NaHMDS(2.6ml，2.6mmol)，将反应混合物搅拌30分钟，然后滴加乙基溴(0.3ml)。使反应混合物升温至室温，搅拌2小时。加水(20ml)，分层。水层用乙醚萃取(4×15ml)。合并有机萃取液，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，经Celite过滤，滤液真空浓缩，得到粗产物。用辐射状PLC提纯(硅胶，50-75％乙酸乙酯/己烷)，得到化合物29(0.045g，20％)，为一白色固体。
1H NMR(CDCl3)：δ0.99-0.94(m，3H)，1.19-1.12(m，3H)，1.48(s，9H)，1.74-1.52(m，2H)，2.00(s，3H)，2.15-2.02(m，6H)，2.78-2.55(m，2H)，2.99-2.82(m，4H)，3.22-3.16(m，2H)，5.13-4.93(m，1H)，5.49-5.47(m，1H)，5.58-5.57(m，1H)，6.96(bs，1H)；mS(ES+)：455.6(100％，M+1)。元素分析：计算值 (C23H38N2O3S2)： C，60.75；H，8.42；N，6.16 计算值 (C23H38N2O3S2·0.2 CH2Cl2)：C，59.08；H，8.21；N，5.94 实测值 C，58.92；H，8.21；N，6.02
实施例25(±)3β-(1’-乙酰氨基-3’-乙基)-2’-戊烯基-4α-(叔丁氧基羰基)氨基环戊烷-1-羧酸甲酯(30，C-1’上的异构体A；C-1和C-2’上的异构体的混合物，流程6)
于室温下，向搅拌下的化合物29(0.019g，0.042mmol)的甲醇(1ml)溶液中加入6 N HCl(0.1ml，0.6mmol)，将反应混合物搅拌24小时。将反应混合物真空浓缩，得到化合物30棕色残渣，直接用于如下实施例的反应。
实施例26(±)3β-(1’-乙酰氨基-3’-乙基)-2’-戊烯基-4α-氨基环戊烷-1-羧酸甲酯(31，C-1’上的异构体A；C-1和C-2’上的异构体的混合物，流程6)
向化合物30(0.042mmol)在二氯甲烷(1ml)中的混合物中加入三氟乙酸(0.1ml，1.3mmol)，将混合物搅拌4小时，真空浓缩，得到化合物31，为一棕色固体，直接用于如下实施例的反应。
实施例27(±)3β-(1’-乙酰氨基-3’-乙基)-2’-戊烯基-4α-氨基环戊烷-1-羧酸(32，C-1’上的异构体A；C-1和C-2’上的异构体混合物，流程6)
向化合物31(0.042mmol)的甲醇(1ml)溶液中加入NaOH(0.7ml，0.7mmol)，室温搅拌1小时。将反应混合物用冰醋酸中和，用水稀释，得到20毫摩尔的化合物32溶液。
实施例28(±)3β-(1’-乙酰氨基-3’-乙基)-戊基-4α-氨基环戊烷-1-羧酸甲酯(33，C-1’上的异构体A；C-1上的混合物，流程6)
将化合物31(0.2mmol)和PtO2(0.1g)在乙醇(10ml)中的混合物于45psi压力下氢化16小时。滤去催化剂，滤液真空浓缩，得到化合物33(59％)，为黄色油状物。
1H NMR(360mHz，CDCl3)：δ8.40-8.45(bs，2H)，7.73-7.70(m，1H)，3.62(s，3H)，3.28-2.50(m，3H)，2.10-1.87(m，4H)，1.83(s，3H)，1.44-1.24(m，3H)，1.19-1.15(m，8H)，0.85-0.84(m，3H)；IR(NaCl)：3358，2946，2834，1451，1418，1029cm-1；mS(ES+)：299.0(100％，M+1)。元素分析：计算值(C16H30N2O3)： C，64.39；H，10.13；N，9.39 计算值(C16H30N2O3·2.25 CF3CO2H)：C，44.37；H，5.86；N，5.05 实测值： C，44.25；H，6.04；N，5.17
实施例29(±)3β-(1’-乙酰氨基-3’-乙基)戊基-4α-氨基环戊烷-1-羧酸(34，C-1’上的异构体A；C-1上的混合物，流程6)
将化合物33(0.0089g，0.03mmol)和1 N NaOH(0.2ml，0.2mmol)在水(0.4ml)中的混合物室温搅拌1小时。反应混合物用乙酸中和，用水稀释，得到化合物34，为12.1毫摩尔水溶液。
MS(ES+)：285.1(100％，M+1)。
实施例30(±)3β-(1’-乙酰氨基-3’-乙基)-2’-戊烯基-4α-氨基环戊烷-1-羧酸甲酯(35，C-1、C-1’和C-2’上的异构体的混合物，流程7)
按关于化合物29、30和31同样的步骤从化合物8和9(1．74g，4.5mmol)进行制备。得到的为黄色油状物。
实施例31(±)3β-(1’-乙酰氨基-3’-乙基)戊基-4α-氨基环戊烷-1-羧酸甲酯(36，C-1’和C-1上的异构体的混合物，流程7)
按关于化合物33同样的步骤从化合物35进行制备。
1H NMR(360mHz，CDCl3)：δ0.85-0.84(m，3H)，1.15-1.51(m，11H)，1.83(s，3H)，2.10-1.92(m，4H)，3.01-2.86(m，3H)，3.61(s，3H)，7.4-7.71(m，1H)，8.40-8.45(bs，2H)；IR(NaCl)3358，2946，2834，1451，1418，1029cm-1；mS(ES+)：299.0(100％，M+1)。元素分析：计算值(C16H30N2O3)： C，64.39；H，10.13；N，9.39 计算值(C16H30N2O3·3 CF3CO2H·2 H2O)：C，39.05；H，5.51；N，4.41 实测值： C，38.79；H，5.13；N，4.34
实施例32(±)3β-(1’-乙酰氨基-3’-乙基)戊基-4α-氨基环戊烷-1-羧酸(37，C-1和C-1’上的混合物，流程7)
如关于化合物34所述，化合物36(0.010g，0.034mmol)的反应得到9.8毫摩尔化合物37的溶液。
MS(ES+)：285.1(100％，M+1)。
实施例33(±)2-{3β-(1’-乙酰氨基)-2’-戊烯基-4α-叔丁氧基羰基氨基-1-亚环戊基}-1，3-二噻烷(38，C-1’上的异构体A；C-2’上的混合物，流程8)
于-78℃向溴化丙基三苯基鏻(0.28g，0.73mmol)的THF(10ml)悬浮液中滴加NaHMDS(1M THF溶液，0.73ml，0.73mmol)。搅拌10分钟后，使反应混合物升温至0℃，搅拌20分钟，冷却至-78℃。向此混合物中加入化合物8(0.097g，0.24mmol)的THF(6ml)溶液，将反应混合物搅拌1小时。加水(10ml)，分层。水层用乙醚萃取(4×10ml)。合并有机萃取液，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，经Celite过滤，滤液真空浓缩，得到0.16g粗产物。用辐射状PLC提纯(硅胶，50-75％乙酸乙酯/己烷)，得到0.093g(91％)化合物38，为一白色固体，熔点175-177℃。
1H NMR(360mHz，CDCl3)：δ0.95-1.0(m，3H)，1.45(s，9H)，1.97-2.27(m，10H)，2.56-2.72(m，1H)，2.82-2.86(m，5H)，3.82-3.88(m，1H)，4.45(m，1H)，4.71(m，1H)，5.33-5.44(m，1H)，5.58-5.75(m，1H)6.54-6.61(m，1H)；IR(KBr)：3342，2970，2935，1683，1646，1537，1367，1296，1170cm-1；mS(ES+)：427.5(100％，M+1)。元素分析：计算值(C21H34N2O3S2)：C，59.12；H，8.03；N，6.57 实测值： C，59.21；H，8.04；N，6.51
实施例34(±)3β-(1’-乙酰氨基)-2’-戊烯基-4α-叔丁氧基羰基氨基环戊烷-1-羧酸甲酯(39，C-1’上的异构体A和C-2’上的混合物，流程8)
如关于化合物30所述，化合物38(4.0g，9.4mmol)的反应得到2.7g(78％)化合物39，为油状物。
实施例35(±)3β-(1’-乙酰氨基)戊基-4α-叔丁氧基羰基氨基环戊烷-1-羧酸甲酯(40，C-1’上的异构体A和C-1上的混合物，流程8)
如关于化合物33所述，化合物39(0.145g，0.39mmol)的反应得到0.14g(97％)化合物40，为粘稠的油状物。
实施例36(±)3β-(1’-乙酰氨基)戊基-4α-氨基环戊烷-1-羧酸甲酯(41，C-1’上的异构体A和C-1上的混合物，流程8)
将化合物40(0.08g，0.22mmol)和TFA(0.5ml，6.5mmol)在二氯甲烷(8ml)中的混合物室温搅拌16小时。反应混合物真空浓缩，得到0.112g化合物41。
实施例37(±)3β-(1’-乙酰氨基)戊基-4α-氨基环戊烷-1-羧酸(42，C-1’上的异构体A和C-1上的混合物，流程8)
如关于化合物34所述，化合物41(0.112g)的反应得到31．9毫摩尔化合物42的溶液。
MS(ES+)：257.4(100％，M+1)。
实施例38
(±)环戊-3-烯-1-羧酸甲酯(43，流程9)，和
(±)环戊-3-烯-1-羧酸乙酯(44，流程9)
按Depres等，J.Org.Chem.1984，49，928-931的方法，从顺-1，4-二氯-2-丁烯和丙二酸二甲酯制备这些化合物。所得酸按标准方法酯化，得到43或44。
实施例39(±)3-丁基-4，5，6，6a-四氢-3aH-环戊二烯并[d]异噁唑-5-羧酸甲酯(45，流程9，酯基和异噁唑啉环互为顺式)，和(±)3-丁基-4，5，6，6a-四氢-3aH-环戊二烯并[d]异噁唑-5-羧酸甲酯(45，流程9，酯基和异噁唑啉环互为反式)
向回流中的3-环戊烯-1-羧酸甲酯43(10.21g，80.9mmol)和异氰酸苯酯(17.5ml，161mmol)的干苯(50m1)溶液中滴加1-硝基戊烷(10.8ml，87．8mmol)和Et3N(20滴)在干苯(30ml)中的混合物，历时1小时。将混合物再加热回流1小时。滤除固体，用Et2O洗涤。合并滤液，浓缩得到橙色油状物，用快速色谱法将其提纯(硅胶，0-50％乙酸乙酯己烷液)。含所需化合物的流分收集在一起，蒸发，得到化合物46(8.1g，45％)，为黄色油状物。
1H NMR(CDCl3)：δppm 0.83(t，J=7.2Hz，3H)，1.24-1.38(m，2H)，1．39-1.58(m，2H)，1．85-2.20(m，4H)，2.22-2.39(m，2H)，2.62-2.73(m，1H)，3.54-3.67(m，1H)，3.63(s，3H)，4.95-5.03(m，1H)；mS(ES+)：225.9(M+1)。元素分析：计算值(C12H19NO3)：C，63.97；H，8.52；N，6.21 实测值： C，63.77；H，8.46；N，6.25
进一步洗脱，得到化合物45(2.0g，11％)，为黄色油状物。
1H NMR(CDCl3)：δppm 0.90(t，J=15.0Hz，3H)，1.27-1.40(m，2H)，1.41-1.63(m，2H)，1.92-2.05(m，1H)，2.13-2.45(m，5H)，2.78-2.86(m，1H)，3.48-3.58(m，1H)，3.62(s，3H)，4.91-5.03(m，1H)；mS(ES+)：225.8(M+1)。元素分析：计算值(C12H19NO3)：C，63.97；H，8.52；N，6.21 实测值： C，63.80；H，8.54；N，6.16
实施例40(±)3-(1’-乙基丙基)-4，5，6，6a-四氢-3aH-环戊二烯并[d]异噁唑-5-羧酸甲酯(47，流程9，酯基和异噁唑啉环互为反式)
按关于化合物46的制备方法，用1-硝基-2-乙基丁烷(20.3g，0.156mol)和化合物43(20g，0.158mol)进行制备，得率53％，为一黄色油状物。
1H NMR(CDCl3)：δppm 0.8(m，6H)，1.5(m，4H)，1.9(m，2H)，2.0(m，1H)，2.1(m，1H)，2.2(m，1H)，2.5(m，1H)，3.6(s，3H)，3.7(m，1H)，4.8(m，1H)；mS(ES+)：240(100％，M+1)。元素分析：计算值(C13H21NO3)：C，65.28；H，8.78；N，5.85 实测值： C，65.26；H，8.78；N，5.92
实施例41(±)3-(1’-丙基丁基)-4，5，6，6a-四氢-3aH-环戊二烯并[d]异噁唑-5-羧酸甲酯(48，流程9，酯基和异噁唑啉环互为反式)
按关于化合物46的制备方法，用1-硝基-2-丙基戊烷(73.06g，460mmol)和化合物43(63g，515mmol)进行制备，得率45％，为一黄色油状物。
1H NMR(CDCl3)：δppm 0.90(t，J=7.3Hz，6H)，1.24-1.37(m，4H)，1.42-1.55(m，3H)，1.63(m，1H)，1.98(m，2H)，2.06(m，1H)，2.39(m，2H)，2.79(m，1H)，3.61(t，J=8.4Hz，1H)，3.69(s，3H)，5.01(dd，J=8.5和5.3Hz，1H)；mS(ES+)：225.8(M+1)。元素分析：计算值(C15H25NO3)C，67.39；H，9.42；N，5.24 实测值： C，67.25；H，9.36；N，5.17
实施例42(±)3-(环己基甲基)-4，5，6，6a-四氢-3aH-环戊二烯并[d]异噁唑-5-羧酸乙酯(49，流程9，酯基和异噁唑啉环互为反式)
按关于化合物46的制备方法，用1-硝基-2-环己基乙烷(3.3g，21mmol)和化合物44(2.68g，19.1mmol)进行制备，得率31％，为一黄色油状物。
1H NMR(CDCl3)：δppm 0.97(m，2H)，1.22(m，6H)，1.63(m，6H)，2.01(m，4H)，2.23(dd，J=8.9和15Hz，1H)，2.33(dd，J=6.2和14Hz，1H)，2.74(m，1H)，3.62(t，J=8.6Hz，1H)，4.13(m，2H)，5.03(dd，J=5.5和8.6Hz)；mS(ES+)：280.4(M+1)。元素分析：计算值(C16H25NO3)：C，68.79；H，9.02；N，5.01 实测值： C，68.81；H，8.96；N，5.06
实施例43(±)3-(1’-乙基戊基)-4，5，6，6a-四氢-3aH-环戊二烯并[d]异噁唑-5-羧酸乙酯(50，C-1’上的异构体的混合物，流程9，酯基和异噁唑啉环互为反式)
按关于化合物46的制备方法，用1-硝基-2-乙基己烷(5.75g，36mmol)和化合物44(4.6g，33mmol)进行制备，得率34％，为一黄色油状物。
实施例44(±)3-(1’-甲基乙基)-4，5，6，6a-四氢-3aH-环戊二烯并[d]异噁唑-5-羧酸乙酯(51，流程9，酯基和异噁唑啉环互为反式)
按关于化合物46的制备方法，用1-硝基-2-甲基丙烷(6.2g，60mmol)和化合物44(0.7g，50mmol)进行制备，得率41.5％，为一黄色油状物。
实施例45(±)3-环己基-4，5，6，6a-四氢-3aH-环戊二烯并[d]异噁唑-5-羧酸乙酯(52，流程9，酯基和异噁唑啉环互为反式)
按关于化合物46的制备方法，用1-硝基-2-丙基戊烷(2.86g，20mmol)和化合物44(2.8g，20mmol)进行制备，得率39.6％，为一黄色油状物。
实施例46(±)t-3-(1’-乙酰氨基戊基)-t-4-羟基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(53，C-1’上的异构体A，流程9)
向化合物46(3.0g，13.3mmol)的THF(10ml)溶液中加入乙酸酐(25ml，27mmol)和阮内镍(3g)。将混合物于35psi下氢化16小时。经Celite滤去催化剂，滤液真空浓缩。粗产物用快速柱色谱法提纯(硅胶，40％-100％乙酸乙酯/己烷)。将所需流分收集在一起并浓缩。残渣溶于甲醇(10ml)，加入钠粒(10mg)，搅拌4小时。用AcOH中和反应混合物，真空浓缩。加水(20ml)后，用乙酸乙酯萃取混合物(2×20ml)。合并有机层，干燥(MgSO4)，真空浓缩。残渣用快速柱色谱法提纯(硅胶，50-80％乙酸乙酯/己烷)。将所需流分收集在一起并浓缩，得到化合物53，得率20％，为一无色油状物。
1H NMR(CDCl3)：δppm 0.90(t，J=6.5Hz，3H)，1.32(m，6H)，1.90(m，4H)，2.05(s，3H)，2.09(m，1H)，3.19(m，1H)，3.67(s，3H)，3.81(m，1H)，4.07(s，1H)，4.52(s，1H，)，5.38(d，J=8.7Hz，1H)；IR(NaCl)3285，2952，1733，1626，1549，1436，1202cm-1；mS(ES+)：272.3(100％，M+1)。元素分析：计算值(C14H25NO4)： C；61．97；H；9.29；N；5.16 计算值(C14H25NO4.0.25H2O)：C；60.96；H；9.31；N；5.08 实测值： C；60.79；H；9.01；N；5.13
实施例47(±)t-3-(1’-乙酰氨基戊基)-t-4-羟基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(54，C-1’上的异构体B，流程9)
向化合物46(3.5g，15.6mmol)的THF(150ml)溶液中加入乙酸酐(29ml，31mmol)和氧化铂(0.8g)。将混合物于50psi下氢化24小时。经Celite滤去催化剂，滤液真空浓缩。粗产物溶于乙酸乙酯(50ml)，用浓NH4OH中和，加水(25ml)。分离有机层，水层进一步用乙酸乙酯萃取(2×20ml)。合并有机层，干燥(MgSO4)。过滤后，将滤液真空浓缩。残渣从乙醚中重结晶，得到化合物54，得率24％，为一白色固体。
1H NMR(CDCl3)：δppm 0.89(t，J=6.5Hz，3H)，1.35(m，5H)，1.97(m，6H)，2.00(s，3H)，2.73(s，1H)，3.10(m，1H)，3.67(s，3H)，4.13(m，1H)，4.28(d，J=2.6Hz，1H)，5.28(d，J=9.2Hz，1H)；IR(KBr)3537，3286，2951，1700，1640，1559，1219cm-1；mS(ES+)：272.4(100％，M+1)。元素分析：计算值(C14H25NO4)：C，61．97；H，9.29；N，5.16 实测值： C，61．78；H，9.09；N，5.08
实施例48(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2-乙基)丁基-t-4-羟基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(55，C-1’上的异构体A，流程9)
向化合物47(0.5g，2mmol)在CH3CN∶H2O(15∶1，50ml)混合物中的溶液中加入Mo(CO)6(0.2g，8mmol)和NaBH4(91mg，2.4mmol)。将反应混合物回流3小时，冷却至室温，蒸发至干。向所得混合物中加入乙酸乙酯(50ml)、乙酸酐(3.78ml，40mmol)，将反应混合物室温搅拌16小时。然后将反应混合物蒸发至干，残渣用快速柱色谱法提纯(硅胶，0-100％乙酸乙酯/己烷)。将所需流分收集在一起，浓缩，得到化合物55，得率20％，为一白色固体。
1H NMR(DMSO-d6)：δppm 0.8(t，J=7.2Hz，3H)，0.9(t，J=7Hz，3H)，1.0(m，1H)1.2(m，2H)，1.4(m，2H)，1.6(m，1H)，1.7(m，2H)，1.8(m，2H)，1.88(s，3H)，3.0(m，1H)，3.6(s，3H)，3.9(m，2H)，4.5(s，1H)，7.5(d，J=9.5Hz，1H)；mS(ES+)：244.13(M+1)。
实施例49(±)t-3-((1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基)-t-4-羟基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(56，C-1’上的异构体B，流程9)
用关于化合物54同样的方法，从化合物47(15g，62.7mmol)制得，为一无色油状物，得率61％。
1H NMR(DMSO-d6)：δppm 0.8(m，6H)，1.0(m，2H)，1.3(m，2H)，1.4(m，1H)，1.7(m，1H)，1.8(s，3H)，1.9(m，3H)，2.0(m，1H)，3.0(m，1H)，3.6(s，3H)，4.0(m，1H)，4.1(dd，J=1.4和10.4Hz，1H)，4.5(d，1H，J=4.3Hz)，7.3(d，J=10.2Hz，1H)；mS(ES+)：286.3(100％m+1)。元素分析：计算值(C15H27NO4 0.75 H2O)：C：60.31；H：9.54；N：4.69 实测值： C：60.24；H：9.51；N：4.59
实施例50(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-丙基)戊基-t-4-羟基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(57，C-1’上的异构体B，流程9)
向化合物48(14g，52mmol)溶于MeOH/H2O／AcOH(12/15/15ml)形成的混合物中加入PrO2(1．4g)，将混合物于50psi下氢化16小时。滤去催化剂，滤液浓缩，得到氨基衍生物。将所述粗产物溶于二氯甲烷(250ml)，加入乙酸酐(55ml，520mmol)，将反应混合物室温搅拌45分钟。向此混合物中加入浓氨水至pH8。分离有机层，用盐水洗涤，干燥，真空浓缩。残油从乙醚/己烷结晶析出，得到化合物57，得率64％，为一白色固体。
1H NMR(CDCl3)：δppm 0.9(m，6H)，1.06(m，1H)，1.14(m，1H)，1.32(m，4H)，1.44(m，2H)，1.52(m，1H)，1.96(m，5H)，2.00(s，3H)，2.59(d，J=3.1HZ，1H)，3.10(m，1H)，3.67(s，3H)，4.21(m，1H)，4.27(m 1H)，5.29(d，J=10Hz，1H)；IR(KBr)：3493，3277，2955，2930，2870，1734，1713，1642，1560，1442，1372，1216cm-1；mS(ES+)：314.5(20％，M+1)。元素分析：计算值(C17H31NO4)：C：65.14；H：9.97；N：4.47 实测值： C：65.19；H：10.04；N：4.50
实施例51(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-环己基)乙基-t-4-羟基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(58，C-1’上的异构体B，流程9)
用关于化合物54同样的方法，从化合物49(0.5g，1.79mmol)制得，为一黄色油状物，得率68.5％。
1H NMR(CDCl3)：δppm 0.82-0.99(m，2H)，1.10-1.23(m，4H)，1.25(t，3H)，1.28-1.42(m，4H)，1.58-1.70(m，4H)，1.97-2.05(m，3H)，2.00(s，3H)，2.80(d，1H)，3.06(m，1H)，4.12(m，3H)，4.26(m，2H)，5.18(d，1H)；mS(ES+)：326.5(M+1)。元素分析：计算值(C18H31NO4.0.25 H2O)：C，65.52；H，9.62；N，4.25 实测值： C，65.48；H，9.63；N，4.27。
实施例52(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)己基-t-4-羟基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(59，C-1’上的异构体B，C-2’-上的混合物，流程9)
用关于化合物54同样的方法，从化合物50(1.0g，3.55mmol)制得，为一油状物，得率34％。
实施例53(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-甲基)丙基-t-4-羟基环戊烷-r-1-羧酸乙酯(60，C-1’上的异构体B，流程9)
用关于化合物54同样的方法，从化合物51(0.98g，4.1mmol)制得，为一油状物，得率15.5％。
MS(ES+)：272.1(M+1)。
实施例54(±)t-3-(1’-乙酰氨基-1’-环己基)甲基-t-4-羟基环戊烷-r-1-羧酸乙酯(61，C-1’上的异构体B，流程9)
用关于化合物54同样的方法，从化合物52(1g，3.77mmol)制得，为一油状物，得率17％。
MS(ES+)：312.0(M+1)。
实施例55(±)t-3-(1’-乙酰氨基-戊基)-t-4-羟基环戊烷-r-1-羧酸(62，C-1’上的异构体A，流程9)
向化合物53(0.1g，0.37mmol)在THF(2ml)和乙醇(2ml)中的混合物中加入1 N NaOH(0.93ml，0.93mmol)和水(2ml)。将混合物搅拌30分钟。除去溶剂，用水收集残渣，用乙酸乙酯(5ml)萃取。将水层酸化(pH4)，用乙酸乙酯萃取(2×5ml)。合并从酸性混合物中得到的有机萃取物，干燥(MgSO4)。过滤后，将滤液浓缩，与乙醚/己烷一起研磨，得到化合物62(84％)，为一白色固体。
1H NMR(DMSO-d6)：δppm 0.85(t，J=5.0Hz，3H)，1.26(m，6H)，1.74(m，5H)，1.86(s，3H)，2.92(m，1H)，3.54(m，1H)，3.90(s，1H)，4.60(s，1H)，7.87(d，J=8.6Hz，1H)，11.96(s，1H)；IR(KBr)：3259，3112，1727，1607，1200cm-1；mS(ES+)258.4(100％，M+1)。元素分析：计算值(C13H23NO4)：C，60.68；H，9.01；N，5.44 实测值： C，60.63；H，9.00；N，5.45
实施例56(±)t-3-(1’-乙酰氨基-戊基)-t-4-羟基环戊烷-r-1-羧酸(63，C-1’上的异构体的混合物，流程9)
向化合物46(3.0g，13.3mmol)在THF(100ml)中的混合物中加入乙酸酐(25ml，270mmol)和阮内镍(3g)。将混合物于35psi下氢化16小时。经Celite滤去催化剂，滤液真空浓缩。粗产物用快速柱色谱法提纯(硅胶，40-100％EtOAc/己烷)。合并合适的流分，浓缩。
向上面得到的酯(0.15g)中加入THF(2ml)、EtOH(2ml)和1 N NaOH(2ml，2mmol)。将反应混合物室温搅拌30分钟，真空浓缩，除去有机溶剂。水层用乙酸乙酯洗涤，用1N HCl酸化至pH4。将水层用氯化钠饱和，乙酸乙酯萃取(2×5ml)。合并从酸层中得到的有机萃取物，干燥(MgSO4)。过滤后，滤液真空浓缩。残渣与乙醚/己烷(1∶1)一起研磨，得到化合物63，为一白色固体。
1H NMR(DMSO-d6)：δ0.83(m，3H)，1．3(m，5H)，1．9(m，6H)，2.9(m，1H)，3.35(s，3H)，3.5(m，0.4H)，3.85(m，0.6H)，3.95(s，0.4H)，4.05(s，0.6H)，4.6(s，0.6H)，4.7(s，0.4H)，7.44(d，J=9.5Hz，0.6H)，8.0(d，J=9.5Hz，0.4H)，12.0(s，1H)；IR(KBr)3303，2951，2934，1726，1688，1650，1550，1202cm-1；mS(ES+)：258.4(100％，M+1)。元素分析：计算值(C13H23NO4)：C，60.68；H，9.01；N，5.44 实测值： C，60.67；H，8.96；N，5.42
实施例57(±)t-3-(1’-乙酰氨基-戊基)-t-4-羟基环戊烷-r-1-羧酸(64，C-1’上的异构体B，流程9)
用关于化合物62同样的制备方法，从化合物54(0.15g，0.48mmol)制得，为吸湿性固体，得率61％。
1H NMR(DMSO-d6)：δppm 0.83(t，J=6.5Hz，3H)，1.26(m，5H)，1.47(m，2H)，1.61(m，1H)，1.71(m，1H)，1.79(s，3H)，1.91(m，1H)，2.02(m，1H)，2.56(m，1H)，3.37(m，1H)，3.68(m，1H)，3.80(dd，J=13.0和6.6Hz，1H)，7.44(d，J=9.5Hz，1H)，11.8(brs，1H)；IR(NaCl)3303，2957，2934，1708，1628，1556，1376和1221cm-1；mS(ES+)：258.3(100％，M+1)。元素分析：计算值(C13H23NO4)： C，60.68；H，9.01；N，5.44 计算值(C13H23NO4.0.33H2O)：C，59.30；H，9.06；N，5.32 实测值： C，59.08；H，8.85；N，5.13
实施例58(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-t-4-羟基环戊烷-r-1-羧酸(65，C-1’上的异构体A，流程9)
将化合物55(8.4mg，0.03mmol)、1N氢氧化钠(0.1ml，0.1mmol)和水(0.2ml)的混合物室温搅拌2小时。用1N盐酸中和混合物，用水稀释，得到29.4毫摩尔溶液。
MS(ES+)：272.2(M+1)。
实施例59(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-t-4-羟基环戊烷-r-1-羧酸(66，C-1’上的异构体B，流程9)
用关于化合物65同样的制备方法，从化合物56(5.3mg，0.0177mmol)制得，为44.2毫摩尔溶液。
MS(ES+)：272.2(M+1)。
实施例60(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-丙基)戊基-t-4-羟基环戊烷-r-1-羧酸(67，C-1’上的异构体B，流程9)
向化合物57(0.15g，0.48mmol)的THF(2ml)和甲醇(2ml)溶液中加入1 NNaOH(1．9ml，1．9mmol)和水(1ml)。室温搅拌1小时后，用6 N HCl将混合物酸化至pH3。滤集固体，真空干燥，得到化合物67，为一白色固体，得率96％。
1H NMR(DMSO-d6)：δppm 0.80(t，J=7.0Hz，3H)，0.88(t，J=7.0Hz，3H)，0.99(m，2H)，1.11(m，1H)，1.22(m，2H)，1.41(m，3H)，1.52(m，1H)，1.66(m，1H)，1.78(s，3H)，1.83(m，3H)，1.92(m，1H)，2.86(m，1H)，3.95(d，J=2.8Hz，1H)，4.07(dt，J=10.8和1.4Hz，1H)，4.42(d，J=4.2Hz，1H)，7.24(d，J=10.3Hz，1H)，11.92(s，1H)；IR(KBr)3369，2962，2934，1695，1596，1548，1217cm-1；mS(ES+)：300.4(100％，M+1)。元素分析：计算值(C16H29NO4)：C，64.19；H，9.76，N；4.68 实测值： C，64.04；H，9.73，N；4.68
实施例61(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-环己基)乙基-t-4-羟基环戊烷-r-1-羧酸(68，C-1’上的异构体B，流程9)
用关于化合物65同样的制备方法，从化合物58(6.5mg，0.02mmol)制得，为50毫摩尔溶液。
MS(ES+)：320.4(M+Na)。
实施例62(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)己基-t-4-羟基环戊烷-r-1-羧酸(69，C-1’上的异构体B和C-2’上的混合物，流程9)
用关于化合物65同样的制备方法，从化合物59(10mg，0.0306mmol)制得，为76毫摩尔溶液。
MS(ES+)：300.5(M+1)。
实施例63(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-甲基)丙基-t-4-羟基环戊烷-r-1-羧酸(70，C-1’上的异构体B，流程9)
用关于化合物65同样的制备方法，从化合物60(10mg，0.032mmol)制得，为80毫摩尔溶液。
MS(ES+)：266.0(M+Na)。
实施例64(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-环己基)甲基-t-4-羟基环戊烷-r-1-羧酸(71，C-1’上的异构体B，流程9)
用关于化合物65同样的制备方法，从化合物61(10mg，0.032mmol)制得，为80毫摩尔溶液。
MS(ES+)：305.9(M+Na)。
实施例65(±)t-3-(1’-乙酰氨基戊基)-t-4-甲磺酰氧基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(72，C-1’上的异构体A，流程9)
将甲磺酰氯(0.3ml，3.87mol)和Et3N(0.75ml，5.38mmol)加到化合物53(0.59g，2.17mmol)和DMAP(30mg，0.24mmol)在干二氯乙烷(10ml)中的冷却至4℃的混合物中。在此温度搅拌过夜后，用水淬灭反应，用二氯乙烷萃取(2×50ml)。合并有机萃取物，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)。过滤后，滤液真空浓缩，得到化合物72(83％)，为一油状物。
实施例66(±)t-3-(1’-乙酰氨基戊基)-t-4-甲磺酰氧基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(73，C-1’上的异构体B，流程9)
用关于化合物72同样的制备方法，从化合物54(2.13g，7.85mmol)制得，得率41％。将其从乙醚/己烷中重结晶，得到所需化合物，为一白色固体。
1H NMR(CDCl3)：δppm 0.91(m，3H)，1.20-1.45(m，4H)，1.53-1.80(m，2H)，1.98(s，3H)，2.01-2.21(m，4H)，2.48-2.51(m，1H)，3.02(s，3H)，3.04-3.10(m，1H)，3.65(s，3H)，4.00-4.15(m，1H)，5.15-5.25(m，2H)；mS(ES+)：350.4(M+1)。元素分析：计算值(C15H27NO6S)：C，51．56；H，7.79；N，4.01 实测值： C，51．44；H，7.75；N，4.25
实施例67(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-t-4-甲磺酰氧基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(74，C-1’上的异构体B，流程9)
用关于化合物72同样的制备方法，从化合物56(5.18g，18.2mmol)制得，为黄色油状物，得率20％。
实施例68(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-丙基)戊基-t-4-甲磺酰氧基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(75，C-1’上的异构体B，流程9)
用关于化合物72同样的制备方法，从化合物57(1．92g，6.13mmol)制得，得率81％。
实施例69(±)t-3-(1’-乙酰氨基戊基)-c-4-叠氮基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(76，C-1’上的异构体A，流程9)
向化合物72(0.6g，1.72mmol)在干DMF(6ml)中的混合物中加入叠氮化钠(0.47g，7.2mmol)，80℃加热3小时。用水(5ml)淬灭反应，乙酸乙酯萃取(2×10ml)。合并萃取液，水洗(2×5ml)，干燥(MgSO4)。过滤后，滤液浓缩，得到粗油状物，在硅胶快速柱上分离，用8份二氯甲烷和2份(氯仿(80)∶甲醇(18)∶氢氧化铵(2))的混合物作为洗脱剂，得到0.45g(88％)化合物76，为一白色固体。
实施例70(±)t-3-(1’-乙酰氨基戊基)-c-4-叠氮基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(77，C-1’上的异构体B，流程9)
用如化合物76同样的方法，从化合物73(2.4g，6.87mmol)制得，得率85％。
1H NMR(CDCl3)：δppm 0.90(m，3H)，1.20-1.40(m，5H)，1.58-1.69(m，2H)，1.95-2.13(m，3H)，2.01(s，3H)，2.29-2.39(m，1H)，2.75-2.80(m，1H)，3.50-3.61(m，1H)，3.65(s，3H)，4.05-4.10(m，1H)，5.20(d，1H，J=6Hz)；mS(ES+)：297.4(M+1)；IR(KBr)：3200，3085，2091，1737，1645cm-1。元素分析：计算值(C14H24N4O3)：C，56.74；H，8.16；N，18.90 实测值： C，56.83；H，8.14；N，18.81
实施例71(±)t-3-[(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基]-c-4-叠氮基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(78，C-1’上的异构体B，流程9)
用如化合物76同样的方法，从化合物74(1g，2.7mmol)制得，得率74％。
实施例72(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-丙基)戊基-c-4-叠氮基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(79，C-1’上的异构体B，流程9)
用如化合物76同样的方法，从化合物75(0.56g，1.44mmol)制得，得率76％。
1H NMR(CDCl3)：δppm 0.9(m，6H)，1.04(m，1H)，1.17(m，2H)，1.37(m，7H)，1.69(m，1H)，2.01(s，3H)，2.02(m，1H)，2.08(m，1H)，2.37(m，1H)，2.84(m，1H)，3.52(dd，J=15和7.5HZ，1H)，3.69(s，3H)，4.07(m，1H)，5.17(d，J=10Hz，1H)；IR(KBr)：3280，2959，2872，2104，1725，1645，1560，1438，1372cm-1；mS(ES+)：339.5(100％，M+1)。元素分析：计算值(C17H30N4O3)：C，60.33；H，8.93；N，16.55 实测值： C，60.60；H，8.85；N，16.31
实施例73(±)t-3-(1’-乙酰氨基戊基)-c-4-氨基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(80，C-1’上的异构体A，流程9)
向化合物76(0.45g，1．5mmol)在甲醇(10ml)中的混合物中加入PtO2(50mg)，于50psi下氢化12小时。滤除催化剂，用甲醇洗涤，滤液浓缩至干。残渣用柱色谱法提纯(硅胶，用乙酸乙酯、然后用氯仿(80)∶甲醇(18)∶氢氧化铵(2)混合物洗脱)，得到化合物78(27％)。
MS(ES+)：257.4(M+1)。
实施例74(±)t-3-(1’-乙酰氨基戊基)-c-4-氨基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(81，C-1’上的异构体B，流程9)
用如化合物80同样的方法，从化合物77(95g，0.32mmol)制得，得率65％，为盐酸盐。
1H NMR(DMSO-d6)：δppm 0.85(t，3H)，1.10-1.45(m，5H)，1.71-1.90(m，5H)，1.91(s，3H)，2.00-2.09(m，1H)，2.15-2.28(m，1H)，2.75-2.85(m，1H)，2.92-3.05(m，1H)，3.65(s，3H)，3.90-4.01(m，1H)，7.95-8.15(m，3H)；mS(ES+)：271.4(M+1)；IR(KBr)：3400，3240，1733，1645cm-1。元素分析：计算值(C14H26N2O3·HCl)：C，54.80；H，8.87；N，9.11 实测值： C，54.77；H，8.80；N，8.72
实施例75(±)t-3-[(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基]-c-4-氨基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(82，C-1’上的异构体B，流程9)
用如化合物80同样的方法，从化合物78(0.5g，1．6mmol)制得，得率35％，为一白色固体。
1H NMR(DMSO-d6)：δppm 0.75(t，3H，J=7.2Hz)，0.8(t，3H，J=7.2Hz)，1.2(m，2H)，1.3(m，1H)，1.4(m，2H)，1.8(m，3H)，1.9(s，3H)，2.2(m，2H)，2.9(m，2H)，3.6(m，3H)，3.8(m，1H)，8.0(m，3H)。
实施例76(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-丙基)戊基-c-4-氨基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(83，C-1’上的异构体B，流程9)
用如化合物80同样的方法，从化合物79(0.7g，2.1mmol)制得，得率90％，为盐酸盐。
1H NMR(DMSO-d6)：δppm 0.85(m，6H)，1.26(m，8H)，1.4(m，1H)，1.77(m，2H)，1.84(m，1H)，1.88(s，3H)，2.20(m，2H)，2.83(m，1H)，2.92(m，1H)，3.61(s，3H)，3.83(t，J=8.5Hz，1H)，7.92(d，J=9Hz，1H)，7.98(s，2H)；IR(KBr)：3321，2958，2933，2872，1725，1641，1614，1368，1166cm-1；mS(ES+)：313.4(100％，M+1)。元素分析：计算值(C17H32N2O3.HCl)： C，58.52；H，9.53；N，8.03 计算值(C17H32N2O3.HCl.0.75H2O)：C，56.50；H，9.34；N，7.75 实测值： C，56.33；H，9.24；N，7.48
实测值：
实施例77(±)t-3-(1’-乙酰氨基戊基)-c-4-氨基环戊烷-r-1-羧酸(84，C-1’上的异构体A，流程9)
将化合物80(4.6mg，0.0017mmol)、1 N氢氧化钠(0.1ml，0.1mmol)和水(0.2ml)的混合物室温搅拌2小时。用1 N盐酸中和混合物，用水稀释，得到所需化合物，为10.6毫摩尔溶液。
MS(ES+)：257.0(M+1)。
实施例78(±)t-3-(1’-乙酰氨基戊基)-c-4-氨基环戊烷-r-1-羧酸(85，C-1’上的异构体B，流程9)
用如化合物84同样的方法，从化合物81(10.9mg，0.036mmol)制得，为35.4毫摩尔溶液。
MS(ES+)：257.3(M+1)。
实施例79(±)t-3-[(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基]-c-4-氨基环戊烷-r-1-羧酸(86，C-1’上的异构体B，流程9)
用如化合物84同样的方法，从化合物82(10mg，0.036mmol)制得，为35.9毫摩尔溶液。
MS(ES+)：271.4(M+1)。
实施例80(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-丙基)戊基-c-4-氨基环戊烷-r-1-羧酸(87，C-1’上的异构体B，流程9)
用如化合物84同样的方法，从化合物83(10.5mg，0.03mmol)制得，为13.4毫摩尔溶液。
MS(ES+)：299.4(M+1)。
实施例81(±)c-3-(1’-乙酰氨基戊基)-c-4-羟基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(88，C-1’上的异构体B，流程10)
用如化合物54同样的方法，从化合物45(2.0g，8.9mmol)制得，得率88％。将产物从乙醚中重结晶。
实施例82(±)c-3-(1’-乙酰氨基戊基)-c-4-羟基环戊烷-r-1-羧酸(89，C-1’上的异构体B，流程10)
向化合物88(174mg，0.64mmol)在THF／MeOH(4ml，1∶1)中的混合物中加入1 N NaOH(1.6ml，1.6mmol)，将混合物搅拌30分钟。除去溶剂，残渣用水(10ml)收集起来，用乙酸乙酯萃取(2×10ml)。将水层酸化(pH 4)，用乙酸乙酯萃取(2×10ml)。合并从酸化层得到的有机萃取液，干燥(MgSO4)。过滤后将滤液浓缩。残渣与乙醚/己烷一起研磨，得到化合物89，为一白色固体，得率69％。
1H NMR(DMSO-d6)：δppm 0.85(t，3H)，1.13-1.28(m，5H)，1.51-1.87(m，5H)，1.75(s，3H)，1.98-2.07(m，1H)，2.52-2.68(m，1H)，3.75-3.84(m，1H)，3.89(br s，1H)，4.39(br s，1H)，7.41(s，1H)，11.90(s，1H)；mS(ES+)：258.0(M+1)；IR(KBr)：3500-2850，3529，3318，1700，1601，1565cm-1。元素分析：计算值(C13H23NO4)：C，60.68；H，9.01；N，5.44 实测值： C，60.57；H，8.95；N，5.40
实施例83(±)c-3-(1’-乙酰氨基戊基)-c-4-甲磺酰氧基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(90，C-1’上的异构体B，流程10)
用如化合物72同样的方法，从化合物88(1．4g，5.16mmol)制得，得率20％。
1H NMR(CDCl3)：δ0.90(t，3H，J=6.5Hz)，1.21-1.48(m，5H)，1.61-1.75(m，1H)，1.92-2.30(m，7H)，2.50(dd，1H，J=4.0和1.1Hz)，2.81-2.95(m，1H)，3.09(s，3H)，3.68(s，3H)，4.02-4.15(m，1H)，5.10(s，1H)，5.45(d，8.7Hz，1H)；IR(KBr)3327，1725，1648cm-1；mS(ES+)：350.0(M+1)。元素分析：计算值(C15H27NO6S)：C，51．56；H，7.79；N，4.01 实测值： C，51．82；H，7.84；N，4.02
实施例84(±)c-3-(1’-乙酰氨基戊基)-t-4-叠氮基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(91，C-1’上的异构体B，流程10)
用如化合物76同样的方法，从化合物90(0.712g，2.04mmol)制得，得率68％。
实施例85(±)c-3-(1’-乙酰氨基戊基)-t-4-氨基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(92，C-1’上的异构体B，流程10)
用如化合物80同样的方法，从化合物91(50mg，0.17mmol)制得，得率90％。
1H NMR(DMSO-d6)：δppm 0.85(m，3H)，1.3(m，6H)，1.5(m，1H)，1.8(m，4H)，2.1(m，3H)，3.1(m，2H)，3.6(s，3H)，4.0(m，1H)，7.9(m，1H)，8.2(m，3H)；IR(KBr)：3249，2955，2933，2871，2361，1732，1645，1548，1437；mS(ES+)：271.0(100％，M+1)。元素分析：计算值(C14H26N2O3.HCl.0.7H2O)C，52.71；H，8.99；N，8.78 实测值： C，53.09；H，8.59；N，8.20
实施例86(±)c-3-(1’-乙酰氨基戊基)-t-4-氨基环戊烷-r-1-羧酸(93，C-1’上的异构体B，流程10)
用如化合物84同样的方法，从化合物92(9.3mg，0.029mmol)制得，为228.5毫摩尔溶液。
MS(ES+)：257.0(M+1)。
实施例87(±)t-3-(1’-乙酰氨基戊基)-c-4-[(叔丁氧基羰基氨基叔丁氧基羰基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(94，C-1’上的异构体A，流程11)
向化合物80(0.1g，0.38mmol)在干DMF(4ml)中的混合物中加入Et3N(0.19ml，1．32mmol)、1，3-双(叔丁氧基羰基)-2-甲基-2-硫代假脲(0.42g，0.12mmol)和HgCl2(0.11g，0.42mmol)。将反应混合物室温搅拌16小时。混合物用乙酸乙酯(20ml)稀释，经Celite过滤。滤液用水、盐水洗涤，干燥(MgSO4)。过滤后，将滤液真空浓缩。粗产物用快速柱色谱法提纯(硅胶，60-70％乙酸乙酯/己烷)，得到化合物94，为无色油状物，得率34％。
MS(ES+)：513.6(M+1)。
实施例88(±)t-4-(1’-乙酰氨基戊基)-c-4-[(叔丁氧基羰基氨基叔丁氧基羰基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(95，C-1’上的异构体B，流程11)
用如化合物94同样的方法，从化合物81(1.3g，4.81mmol)制得，得率64％。
1H NMR(CDCl3)：δ0.90(m，3H)，1.4(m，6H)，1.48(s，9H)，1.50(s，9H)，1.71-1.85(m，1H)，1.88(s，3H)，2.15-2.30(m，3H)，2.75-2.85(m，1H)，3.70(s，3H)，3.91-4.00(m，1H)，4.42-4.51(m，1H)，7.10(m，1H)，8.25(m，1H)，11.30(m，1H)；IR(KBr)3323，1721，1716，1612cm-1；mS(ES+)：513.7(M+1)。元素分析：计算值(C25H44N4O7)：C，58.57；H，8.65；N，10.93 实测值： C，58.30；H，8.57；N，10.93
实施例89(±)t-3-[(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基]-c-4-[(叔丁氧基羰基氨基叔丁氧基羰基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(96，C-1’上的异构体B，流程11)
用如化合物94同样的方法，从化合物82(0.26g，1mmol)制得，得率50％。
实施例90(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-丙基)戊基-c-4-[(叔丁氧基羰基氨基叔丁氧基羰基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(97，C-1’上的异构体B，流程11)
用如化合物94同样的方法，从化合物83(0.58g，1.87mmol)制得，得率91％。
1H NMR(CDCl3)：δppm 0.88(m，6H)，0.97(m，1H)，1.10-1.46(m，7H)，1.48(s，9H)，1.49(s，9H)，1.70(m，1H)，1.83(m，2H)，1.97(s，3H)，2.06(m，1H)，2.13(m 1H)，2.42(m，1H)，2.87(m，1H)，3.70(s，3H)，3.95(m，1H)，4.43(m，1H)，5.66(d，J=9.9Hz，1H)，8.56(d，J=8.6Hz，1H)，11.44(s，1H)；IR(KBr)：3323，2958，2932，2872，1724，1641，1614，1418，1368，1166，1126，1056cm-1；mS(ES+)：555.8(100％，M+1)。元素分析：计算值(C28H50N4O7)：C，60.63；H，9.09；N，10.10 实测值： C，60.69；H，9.01；N，10.10
实施例91(±)t-3-(1’-乙酰氨基戊基)-c-4-[(氨基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(98，C-1’上的异构体A，流程11)
向化合物94(66mg，0.13mmol)在二氯甲烷(2ml)中的混合物中加入三氟乙酸(0.1ml，1.3mmol)。将反应混合物室温搅拌16小时。然后将反应混合物蒸发至干，得到化合物98(63％)，为吸湿性固体。
MS(ES+)：313.0(100％，M+1)。元素分析：计算值(C15H28N4O3.CF3COOH)： C，47.88：H，6.85；N，13.14 计算值(C15H28N4O3.CF3COOH.0.75H2O)：C，46.41；H，6.99；N，12.74 实测值： C，46.44；H，6.88；N，12.67
实施例92(±)t-3-(1’-乙酰氨基戊基)-c-4-[(氨基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(99，C-1’上的异构体B，流程11)
用如化合物98同样的方法，从化合物95(0.3g，0.59mmol)制得，得率89％。
1H NMR(DMSO-d6)：δppm 0.80(m，3H)，1.2(m，6H)，1.5(m，1H)，1.8(m，6H)，2.2(m，1H)，2.7(m，1H)，3.5(m，1H)，3.6(s，3H)，3.8(m，1H)，7.0(br s，3H)，7.8(m，2H)；IR(KBr)3365，3182，2958，2873，1675，1655，1552cm-1；mS(ES+)：313(100％，M+1)。元素分析：计算值(C15H28N4O3·1.15 CF3CO2H)：C，46.84；H，6.63；N，12.62 实测值： C，47.19；H，6.83；N，12.33
实施例93(±)t-3-[(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基]-c-4-[(氨基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(100，C-1’上的异构体B，流程11)
用如化合物98同样的方法，从化合物96(0.32g，0.55mmol)制得，为白色吸湿性固体，得率85％。
1H NMR(DMSO-d6)：δppm 0.80(m，6H)，1．3(m，5H)，1.6(m，1H)，1.8(m，2H)，1.9(s，3H)，2.2(m，2H)，2.7(m，1H)，3.4(m，1H)，3.6(m，3H)，3.8(m，1H)，7.0(brs，4H)，7.8(m，2H)；MS(ES+)：327.5(100％，M+1)。元素分析： 计算值 (C16H30N4O3·0.75 CF3CO2H)：C，47.40；H，6.43；N，11.34 实测值： C，48.13；H，6.94；N，11.58
实施例94(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-丙基)戊基-c-4-[(叔丁氧基羰基氨基叔丁氧基羰基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-r-1-羧酸(101，C-1’上的异构体B，流程11)
向化合物97(0.3g，0.54mmol)在THF(5ml)和MeOH(5ml)中的混合物中加入1 N NaOH(2.2ml，2.2mmol)，将反应混合物室温搅拌1小时，真空浓缩除去THF和MeOH，水层用冰醋酸酸化，滤集所得固体，用水、己烷洗涤，真空干燥，得到化合物101，为一白色固体，得率87％。
1H NMR(DMSO-d6)：δppm 0.80(m，6H)，0.95(m，2H)，1.06(m，2H)，1.28(m，5H)，1.37(s，9H)，1.46(s，9H)，1.58(m，1H)，1.70(m，1H)，1.78(s，3H)，1.93(m，1H)，2.16(m 2H)，2.70(m，1H)，3.81(m，1H)，4.19(m，1H)，7.35(d，J=9.9Hz，1H)，8.42(d，J=8.7Hz，1H)，11.48(s，1H)，12.19(s，1H)；IR(KBr)：3317，2958，2933，2872，1724，1641，1614，1418，1368，1156，1127，1056cm-1；MS(ES+)：541.7(100％，M+1)。元素分析： 计算值 (C27H48N4O7)：C，59.97；H，8.95；N，10.36 实测值： C，59.54；H，8.81；N，10.29
实施例95(±)t-3-(1’-乙酰氨基戊基)-c-4-[(氨基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-r-1-羧酸(102，C-1’上的异构体A，流程11)
将化合物98(4.2mg，0.0095mmol)、1N氢氧化钠(0.1ml，0.1mmol)和水(0.2ml)的混合物室温搅拌2小时。用1N盐酸中和混合物，用水稀释，得到化合物102，为9.5毫摩尔溶液。
MS(ES+)：299.2(M+1)。
实施例96(±)t-3-(1’-乙酰氨基戊基)-c-4-[(氨基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-r-1-羧酸(103，C-1’上的异构体B，流程11)
用如化合物102同样的方法，从化合物99(13mg，0.042mmol)制得，为19.5毫摩尔溶液。
MS(ES+)：299.2(M+1)。
实施例97(±)t-3-[(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基]-c-4-[(氨基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-r-1-羧酸(104，C-1’上的异构体B，流程11)
用如化合物102同样的方法，从化合物100(10.9mg，0.029mmol)制得，为33.4毫摩尔溶液。
MS(ES+)：313.4(M+1)。
实施例98(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-丙基)戊基)-c-4-[(氨基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-r-1-羧酸(105，C-1’上的异构体B，流程11)
用如化合物98同样的方法，从化合物101(0.2g，0.37mmol)制得，与乙醚一起研磨后得到化合物105，为白色固体，得率65％。
1H NMR(DMSO-d6)：δppm 0.82(m，6H)，1.22(m，9H)，1.62(m，2H)，1.82(m，1H)，1.87(s，3H)，2.11(m，2H)，3.38(m，1H)，3.76(m，1H)，7.43(br s，4H)，7.67(d，J=9.7Hz，1H)，8.43(s，1H)，12.5(s，1H)；IR(KBr)：3318，2959，2933，2872，1724，1641，1615，1419，1369，1156，1126，1056cm-1；MS(ES+)：341.5(100％，M+1)。元素分析：计算值(C17H32N4O3.0.5CF3COOH)： C，54.39；H，8.24；N，14.10 计算值(C17H32N4O3.0.5CF3COOH.0.25H2O：C，53.78；H，8.27；N，13.94 实测值： C，53.89；H，8.00；N，13.92
实施例99(±)c-3-(1’-乙酰氨基戊基)-t-4-[(叔丁氧基羰基氨基叔丁氧基羰基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(106，C-1’上的异构体B，流程12)
用如化合物94同样的方法，从化合物92(0.4g，1．48mmol)制得，为一白色固体，得率60％。
实施例100(±)c-3-(1’-乙酰氨基戊基)-t-4-[(氨基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(107，C-1’上的异构体B，流程12)
用如化合物98同样的方法，从化合物106(0.35g，0.68mmol)制得，为褐色固体，得率80％。
1H NMR(DMSO-d6)：δppm 0.80(m，3H)，1．3(m，6H)，1.6(m，2H)，1.8(s，3H)，1.9(m，2H)，2.1(m，1H)，2.9(m，1H)，3.5(m，1H)，3.6(s，3H)，3.9(m，2H)，7.2(brs，3H)，7.8(m，2H)；MS(ES+)：313.1(100％，M+1)。元素分析：计算值(C15H28N4O3·1.15 CF3CO2H)：C，46.84；H，6.64；N，12.62 实测值： C，46.83；H，6.74；N，12.4
实施例101(±)c-3-(1’-乙酰氨基戊基)-t-4-[(氨基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-r-1-羧酸(108，C-1’上的异构体B，流程12)
用如化合物102同样的方法，从化合物107(11mg，0.0248mmol)制得，为24.8毫摩尔溶液。
MS(ES+)：299.5(M+1)。
实施例102(1S，4R)-(-)-4-氨基环戊-2-烯-1-羧酸盐酸盐(112，流程13)
将(-)-(1R，4S)-2-氮杂双环并[2.2.1]庚-5-烯-3-酮(109，15g，137mmol)和lN HCl(375ml)的混合物加热回流1小时。将混合物浓缩，残渣真空干燥，得到112，得率95％，直接用于下一步。
实施例103(1R，4S)-(+)-4-氨基环戊-2-烯-1-羧酸盐酸盐(113，流程13)
按用于化合物112的方法，从(+)-(1S，4R)-2-氮杂双环并[2.2.1]庚-5-烯-3-酮(110，4.9g)制得。
实施例104(±)cis-4-氨基环戊-2-烯-1-羧酸盐酸盐(114，流程13)
按用于化合物112的方法，从(±)-2-氮杂双环并[2.2.1]庚-5-烯-3-酮(111，3.2g)制得。
实施例105(1S，4R)-(-)4-氨基环戊-2-烯-1-羧酸甲酯盐酸盐(115，流程13)
将(-)-(1R，4S)-2-氮杂双环并[2.2.1]庚-5-烯-3-酮(109，600g，5.51mmol)和1N盐酸甲醇溶液(12L)的混合物加热回流10小时。减压蒸去溶剂，向残渣中加入乙醚(800ml)，冷却。滤集所得固体，用乙醚洗涤，干燥，得到956g(98％)化合物115，为白色结晶形固体，熔点106-108℃。
1H NMR(DMSO-d6)：δ1.98(m，1H)，2.52(m，1H)，3.6(s，3H)，3.68(m，1H)，4.15(m 1H)，5.88(d，1H)，6.08(d，1H)，8.40(m，2H)；MS(ES+)：142.11(100％，M+1)；IR(KBr)：3004，1722，1239，1217cm-1元素分析：计算值(C7H9NO2)：C，47.33；H，6.81；N，7.89 实测值： C，47.12；H，7.12；N，7.85
实施例106(1S，4R)-(-)4-氨基环戊-2-烯-1-羧酸乙酯盐酸盐(116，流程13)
方法A：按用于化合物115的方法，从(-)-(1R，4S)-2-氮杂双环并[2.2.1]庚-5-烯-3-酮(109，4.9g)和盐酸乙醇溶液制得。
方法B：按用于化合物115的方法，也从化合物112和盐酸乙醇溶液制得。
实施例107(1R，4S)-(+)4-氨基环戊-2-烯-1-羧酸乙酯盐酸盐(117，流程13)
按用于化合物116的方法B，从化合物113(7.3g)制得。
实施例108(±)cis 4-氨基环戊-2-烯-1-羧酸甲酯盐酸盐(118，流程13)
按用于化合物115的方法，从(±)-2-氮杂双环并[2.2.1]庚-5-烯-3-酮(111，11.2g)和盐酸甲醇液制得。
实施例109(±)cis-4-氨基环戊-2-烯-1-羧酸乙酯盐酸盐(119，流程13)
按用于化合物116的方法B，从化合物114(4.9g)和盐酸乙醇液制得。
实施例110(1S，4R)-(-)4-叔丁氧基羰基氨基环戊-2-烯-1-羧酸甲酯(120，流程13)
向化合物115(950g，5.35mol)和碳酸二叔丁酯(1226g，5.62mol)在二氯甲烷(12L)中的混合物中，于0℃加入三乙胺，历时2.5小时，将反应混合物再搅拌1小时。用水(2×8L)和盐水(2×4L)洗涤反应混合物，分离有机层，用MgSO4干燥。过滤后，将滤液浓缩，剩下的稠厚糖浆从己烷中结晶，三次得到1196g(92％)化合物120。
1H NMR(CDCl3)：δ1.44(s，9H)，1.85(m，1H)，2.51(m 1H)，3.47(m，1H)，3.71(s，3H)，4.78(m，1H)，4.88(br s，1H)，5.86(m，2H)；MS(ES+)：242.25(80％，M+1)。元素分析：计算值(C12H19NO4)：C，59.73；H，7.94；N，5.80 实测值： C，59.57；H，7.86；N，5.79
实施例111(1S，4R)-(-)-4-叔丁氧基羰基氨基环戊-2-烯-1-羧酸乙酯(121，流程13)
按用于化合物120的方法，从116(17.5g)制得。
实施例112(1R，4S)-(+)-4-叔丁氧基羰基氨基环戊-2-烯-1-羧酸乙酯(122，流程13)
按用于化合物120的方法，从117(8.4g)制得。
实施例113(±)cis-4-叔丁氧基羰基氨基环戊-2-烯-1-羧酸甲酯(123，流程13)
按用于化合物120的方法，从118(17.8g)制得。
实施例114(±)cis-4-叔丁氧基羰基氨基环戊-2-烯-1-羧酸乙酯(124，流程13)
按用于化合物120的方法，从119(20.8g)制得。
实施例115(3aR，4R，6S，6aS)-(+)4-叔丁氧基羰基氨基-3-(1’-乙基丙基)-4，5，6，6a-四氢-3aH-环戊二烯并[d]异噁唑-6-羧酸甲酯(125，流程13)
方法A：将化合物120(949g，3.93mol)和异氰酸苯酯(1．5L，13.8mol)在苯(10L)中的混合物加热回流。向此混合物中加入2-乙基-1-硝基丁烷(918g，5.92mol，1H NMR纯度85％)和三乙胺(55ml，0.40mol)在苯(2L)中的混合物，历时5小时。再将反应混合物于回流下搅拌24小时。冷却，滤去固体，将滤液浓缩，残渣中加入乙醚(2L)。令混合物静置过夜，再滤去固体，滤液真空浓缩，得到1．991kg深棕色糖浆。
将上面得到的产物溶于THF(5.0L)和乙醇(7.5L)。向此混合物中加入氢氧化钠(454g，于5L冷水中)，将混合物室温搅拌3小时。然后将混合物真空浓缩。残渣溶于水(10L)中，用乙醚萃取(2×2L)，弃去有机层。水层用乙酸酸化，用乙酸乙酯萃取(2×7L)。合并有机萃取液，干燥(MgSO4)，有机层浓缩，得到1．75kg粗酸。
将上述产物置于甲醇(19.5L)中，加入浓盐酸(162ml)，混合物室温搅拌16小时。用氢氧化铵中和混合物，真空蒸去溶剂，得到1．422kg粗酯。将此粗产物溶于乙酸乙酯(5L)，用水(5L)和盐水(5L)洗涤，干燥(MgSO4)。过滤后，将滤液浓缩，残渣通过硅胶柱提纯，用己烷/乙酸乙酯(95/5至85/5)混合物作为洗脱剂，将合适的流分收集在一起浓缩得到984g(70.5％)化合物125，熔点66℃。元素分析：计算值 (C18H30N2O5)：C，61.00；H，8.53；N，7.90 实测值： C，61.13；H，8.45；N，7.84
1H NMR(CDCl3)：δppm 0.87-0.95(m，6H)，1.44(s，9H)，1.58-1.78(m，4H)，2.0-2.15(m，2H)，2.51 (b s，1H)，3.21(d，J=8.1Hz，1H)，3.58(d，J=8.8Hz，1H)，3.76(s，3H)，4.23(b s，1H)，5.21(d，1H，J=8.8Hz)，5.59(b s，1H)；MS(ES+)：355.64(M+1)。
方法B：如方法A中所述同样的方法进行环戊烯化合物120与1-硝基-2-乙基丁烷和异氰酸苯酯的反应。反应完成(24小时回流)后，滤集固体，将滤液浓缩。残渣经硅胶柱提纯两次，用乙酸乙酯∶己烷混合物作为洗脱剂。
方法C：将化合物120(1.08kg，4.46mol)和2-乙基丁羟肟酰氯(从2-乙基丁醛肟和N-氯琥珀酰亚胺制得，614g，4.1mol)在THF(8L)中的混合物加热回流。向此混合物中加入三乙胺(340ml，2.4mol)在THF中的混合物，历时1．5小时。加入另一个量的氯肟(550g，3.7mol)，然后加入三乙胺(340ml，2.4mol)在THF(340ml)中的混合物，历时1小时。这种精确的添加重复两次。30分钟内再加入三乙胺(100ml，0.7mol)。将反应混合物再加热回流16小时。将反应混合物冷却，滤去不溶性固体。滤液浓缩，残渣用方法A和方法B中所述的色谱法或经酸碱处理加以提纯。
实施例116(3aR，4R，6S，6aS)-(+)4-叔丁氧基羰基氨基-3-(1’-丙基丁基)-4，5，6，6a-四氢-3aH-环戊二烯并[d]异噁唑-6-羧酸甲酯(126，流程13)
按用于化合物125同样的方法(方法A)，从120(171g)制得。
实施例117(3aR，4R，6S，6aS)-(+)4-叔丁氧基羰基氨基-3-(1’-乙基丙基)-4，5，6，6a-四氢-3aH-环戊二烯并[d]异噁唑-6-羧酸乙酯(127，流程13)
按用于化合物125同样的方法(方法B)从121(5.64g)制得。
实施例118 (3aR，4R，6S，6aS)-(+)4-叔丁氧基羰基氨基-3-(1’-丙基丁基)-4，5，6，6a-四氢-3aH-环戊二烯并[d]异噁唑-6-羧酸乙酯(128，流程13)
按用于化合物125同样的方法(方法B)，从121(16.1g)制得。
实施例119(3aS，4S，6R，6aR)-(-)4-叔丁氧基羰基氨基-3-(1’-乙基丙基)-4，5，6，6a-四氢-3aH-环戊二烯并[d]异噁唑-6-羧酸乙酯(129，流程13)
按用于化合物125同样的方法(方法B)，从122(5.1g)制得。
实施例120 (±)4-叔丁氧基羰基氨基-3-(1’-乙基丙基)-4，5，6，6a-四氢-3aH-环戊二烯并[d]异噁唑-6-羧酸甲酯(NHBoc和酯基互为顺式，但与异噁唑啉环成反式，130，流程13)
按用于化合物125同样的方法(方法B)，从123(4.8g)制得。
实施例121(±)4-叔丁氧基羰基氨基-3-(1’-丙基丁基)-4，5，6，6a-四氢-3aH-环戊二烯并[d]异噁唑-6-羧酸甲酯(NHBoc和酯基互为顺式，但与异噁唑啉环成反式，131，流程13)
按用于化合物125同样的方法(方法B)，从123(4.0g)制得。
实施例122(±)4-叔丁氧基羰基氨基-3-(2’-乙基丁基)-4，5，6，6a-四氢-3aH-环戊二烯并[d]异噁唑-6-羧酸甲酯(NHBoc和酯基互为顺式，但与异噁唑啉环成反式，132，流程13)
按用于化合物125同样的方法(方法B)，从123(1.18g)制得。
实施例123(±)4-叔丁氧基羰基氨基-3-正丁基-4，5，6，6a-四氢-3aH-环戊二烯并[d]异噁唑-6-羧酸甲酯(NHBoc和酯基互为顺式，但与异噁唑啉环成反式，133，流程13)
按用于化合物125同样的方法(方法B)，从123(1.2g)制得。
实施例124(±)4-叔丁氧基羰基氨基-3-(1’-乙基丙基)-4，5，6，6a-四氢-3aH-环戊二烯并[d]异噁唑-6-羧酸乙酯(NHBoc和酯基互为顺式，但与异噁唑啉环成反式，134，流程13)
按用于化合物125同样的方法(方法B)，从124(4.8g)制得。
实施例125(±)4-叔丁氧基羰基氨基-3-(1’-甲基丁基)-4，5，6，6a-四氢-3aH-环戊二烯并[d]异噁唑-6-羧酸乙酯(C-1’上的混合物，NHBoc和酯基互为顺式，但与异噁唑啉环成反式，135，流程13)
按用于化合物125同样的方法(方法B)，从124(3.5g)制得。
实施例126(±)4-叔丁氧基羰基氨基-3-(1’-甲基乙基)-4，5，6，6a-四氢-3aH-环戊二烯并[d]异噁唑-6-羧酸乙酯(NHBoc和酯基互为顺式，但与异噁唑啉环成反式，136，流程13)
按用于化合物125同样的方法(方法B)，从124(2.9g)制得。
实施例127(1S，2S，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基环戊烷-1-羧酸甲酯(137，流程14)
向化合物125(80g，0.226mol)与甲醇(1．6L)的混合物中加入浓盐酸(18.8ml，0.226mol)和Adam’s催化剂(PtO2，8.0g)，将混合物于100psi氢气压力下非常激烈地搅拌4小时。滤去催化剂，将滤液浓缩，得到82.7g(93％)(1S，2S，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-氨基-2’-乙基)丁基-4-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基环戊烷-1-羧酸甲酯，直接用于乙酰化。
将上面所得胺的盐酸盐(66.2g，0.168mol)置于二氯甲烷(600ml)中，于室温下加入三乙胺(23.4ml，0.168mol)和乙酸酐(17.5ml，0.184mol)，搅拌2小时。反应混合物用水(600ml)洗涤。水层再用二氯甲烷(200ml)萃取。合并有机层，用水(300ml)和盐水(300ml)洗涤，经MgSO4干燥。过滤后，将滤液浓缩，残渣经硅胶柱提纯，用己烷/乙酸乙酯(1∶1)作为洗脱剂。将合适的流分收集在一起，浓缩，得到45g(67％)化合物137。元素分析：计算值(C20H36N2O6)：C，59.98；H，9.06；N，6.99 实测值： C，59.89；H，8.91；N，6.94
1H NMR(CDCl3)：δppm 0.77-0.87(m，6H)，1.19-1.44(m，15H)，1.66-1.72(m，1H)，1.96-2.00(m，1H)，2.08(s，3H)，2.45-2.53(m，1H)，2.80-2.84(m，1H)，3.70(s，3H)，3.99-4.04(m，1H)，4.11-4.15(m，1H)，4.23(d，5=5.2Hz，1H)，4.78(d，J=9．3Hz，1H)，7.55(d，J=10.0Hz，1H)；MS(ES+)：401.75(M+1)。
实施例128(1S，2S，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-丙基)戊基-4-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基环戊烷-1-羧酸甲酯(138，流程14)
按用于化合物137同样的方法，从126(77g)制得。
实施例129(1S，2S，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基环戊烷-1-羧酸乙酯(139，流程14)
按用于化合物137同样的方法，从127(5g)制得。
实施例130(1S，2S，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-丙基)戊基-4-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基环戊烷-1-羧酸甲酯(140，流程14)
按用于化合物137同样的方法，从128(15g)制得。
实施例131(1R，2R，3S，4S，1’R)(+)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基环戊烷-1-羧酸乙酯(141，流程14)
按用于化合物137同样的方法，从129(5．9g)制得。
实施例132(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-c-4-叔丁氧基羰基氨基-t-2-羟基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(142，C-1’上的异构体A，流程14) 按用于化合物137同样的方法，从130(2.6g)制得。
实施例133(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-丙基)戊基-c-4-叔丁氧基羰基氨基-t-2-羟基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(143，C-1’上的异构体A，流程14)
按用于化合物137同样的方法，从131(6.2g)制得。
实施例134(±)t-3-(1’-乙酰氨基-3’-乙基)戊基-c-4-叔丁氧基羰基氨基-t-2-乙酰氧基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(144，C-1’上的异构体A，流程14)
除了乙酰化时用过量乙酸酐(2.5当量)和三乙胺(2.5当量)外，按用于化合物137同样的方法，从132(2.4g)制得。
实施例135(±)t-3-(1’-乙酰氨基正丁基)-c-4-叔丁氧基羰基氨基-t-2-乙酰氧基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(145，C-1’上的异构体A，流程14)
除了乙酰化时用过量乙酸酐(2.5当量)和三乙胺(2.5当量)外，按用于化合物137同样的方法，从133(0.45g)制得。
实施例136(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-c-4-叔丁氧基羰基氨基-t-2-羟基环戊烷-r-1-羧酸乙酯(146，C-1’上的异构体A，流程14)
按用于化合物137同样的方法，从134(2.6g)制得。
实施例137(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-甲基)丁基-c-4-叔丁氧基羰基氨基-t-2-羟基环戊烷-r-1-羧酸乙酯(147，C-1’上的异构体A，C-2’上的混合物，流程14)
按用于化合物137同样的方法，从135(1.3g)制得。
实施例138(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-甲基)丙基-c-4-叔丁氧基羰基氨基-t-2-羟基环戊烷-r-1-羧酸乙酯(148，C-1’上的异构体A，流程14)
按用于化合物137同样的方法，从136(1．39g)制得。
实施例139(1S，2S，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-氨基-2-羟基环戊烷-1-羧酸甲酯盐酸盐(149，流程14)
向化合物137(150g，0.375mol)与乙醚(800ml)的混合物中加入1 N HCl乙醚液(1170ml，1．17mol)，室温搅拌24小时，然后回流加热2小时。冷却后，滤集固体，用乙醚洗涤，真空干燥，得到126g化合物149。该化合物直接用于下一步。
实施例140(1S，2S，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-丙基)戊基-4-氨基-2-羟基环戊烷-1-羧酸甲酯盐酸盐(150，流程14)
按用于化合物149同样的方法，从138(10.4g)制得。
实施例141(1S，2S，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-氨基-2-羟基环戊烷-1-羧酸乙酯三氟乙酸盐(151，流程14)
向化合物139(1．3g，3.14mmol)在二氯甲烷(20ml)中的混合物中加入三氟乙酸(4.0ml)，室温搅拌6小时。浓缩，与二氯甲烷共蒸发2次，与乙醚共蒸发2次。残渣真空干燥，得化合物151，直接用于下一步。
实施例142(1R，2R，3S，4S，1’R)(+)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-氨基-2-羟基环戊烷-1-羧酸乙酯三氟乙酸盐(152，流程14)
按用于化合物151同样的方法，从141(0.6g)制得。
实施例143(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-c-4-氨基-t-2-羟基环戊烷-r-1-羧酸甲酯三氟乙酸盐(153，C-1’上的异构体A，流程14)
按用于化合物151同样的方法，从142(0.8g)制得。
实施例144(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-丙基)戊基-c-4-氨基-t-2-羟基环戊烷-r-1-羧酸甲酯三氟乙酸盐(154，C-1’上的异构体A，流程14)
按用于化合物151同样的方法，从143(0.39g)制得。
实施例145(±)t-3-(1’-乙酰氨基-3’-乙基)戊基-c-4-氨基-t-2-乙酰氧基环戊烷-r-1-羧酸甲酯三氟乙酸盐(155，C-1’上的异构体A，流程14)
按用于化合物151同样的方法，从144(0.47g)制得。
实施例146(±)t-3-(1’-乙酰氨基正丁基)-c-4-氨基-t-2-乙酰氧基环戊烷-r-1-羧酸甲酯三氟乙酸盐(156，C-1’上的异构体A，流程14)
按用于化合物151同样的方法，从145(0.27g)制得。
实施例147(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-c-4-氨基-t-2-羟基环戊烷-r-1-羧酸乙酯三氟乙酸盐(157，C-1’上的异构体A，流程14)
按用于化合物151同样的方法，从146(0.8g)制得。
实施例148(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-甲基)丁基-c-4-氨基-t-2-羟基环戊烷-r-1-羧酸乙酯三氟乙酸盐(158，C-1’上的异构体A，C-2’上的混合物，流程14)
按用于化合物151同样的方法，从147(0.74g)制得。
实施例149(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-甲基)丙基-c-4-氨基-t-2-羟基环戊烷-r-1-羧酸乙酯三氟乙酸盐(159，C-1’上的异构体A，流程14)
按用于化合物151同样的方法，从148(1．0g)制得。
实施例150(1S，2S，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-氨基-2-羟基环戊烷-1-羧酸(160，流程14)
将化合物151(14mg，0.0327mmol)在1 N NaOH(0.1ml)和水(0.2ml)中的混合物室温搅拌2小时。用1 N HCl中和反应混合物，用水稀释，得到32.7毫摩尔溶液。
MS(ES+)：287.4(100％，M+1)。
实施例151(1R，2R，3S，4S，1’R)(+)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-氨基-2-羟基环戊烷-1-羧酸(161，流程14)
用关于化合物160所述的同样方法，从化合物152(100mg，0.234mmol)制得，为93.6毫摩尔溶液。
MS(ES+)：287.4(100％，M+1)。
实施例152(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-c-4-氨基-t-2-羟基环戊烷-r-1-羧酸(162，C-1’上的异构体A，流程14)
用关于化合物160所述的同样方法，从化合物153(12.5mg，0.030mmol)制得，为30.0毫摩尔溶液。
MS(ES+)：287.4(100％，M+1)。
实施例153(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-丙基)戊基-c-4-氨基-t-2-羟基环戊烷-r-1-羧酸(163，C-1’上的异构体A，流程14)
用关于化合物160所述的同样方法，从化合物154(7.5mg，0.017mmol)制得，为7.7毫摩尔溶液。
MS(ES+)：315.5(100％，M+1)。
实施例154(±)t-3-(1’-乙酰氨基-3’-乙基)戊基-c-4-氨基-t-2-羟基环戊烷-r-1-羧酸(164，C-1’上的异构体A，流程14)
用关于化合物160所述的同样方法，从化合物155(10.6mg，0.0225mmol)制得，为21．5毫摩尔溶液。
MS(ES+)：301.4(100％，M+1)。
实施例155(±)t-3-(1’-乙酰氨基正丁基)-c-4-氨基-t-2-羟基环戊烷-r-1-羧酸(165，C-1’上的异构体A，流程14)
用关于化合物160所述的同样方法，从化合物156(5.0mg，0.011mmol)制得，为11.0毫摩尔溶液。
MS(ES+)：273.0(100％，M+1)。
实施例156(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-甲基)丁基-c-4-氨基-t-2-羟基环戊烷-r-1-羧酸(166，C-1’上的异构体A，C-2’上的混合物，流程14)
用关于化合物160所述的同样方法，从化合物158(9.5mg，0.0229mmol)制得，为9.36毫摩尔溶液。
MS(ES+)：273.5(100％，M+1)。
实施例157(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-甲基)丙基-c-4-氨基-t-2-羟基环戊烷-r-1-羧酸(167，C-1’上的异构体A，流程14)
用关于化合物160所述的同样方法，从化合物159(9.5mg，0.0237mmol)制得，为12.9毫摩尔溶液。
MS(ES+)：259.4(100％，M+1)。
实施例158(1S，2S，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-[(叔丁氧基羰基氨基叔丁氧基羰基亚氨基)甲基]氨基-2-羟基环戊烷-1-羧酸乙酯(168，流程15)
按用于化合物94同样的方法，从151(0.65g)制得。
实施例159(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-c-4-[(叔丁氧基羰基氨基叔丁氧基羰基亚氨基)甲基]氨基-t-2-羟基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(169，C-1’上的异构体，流程15)
按用于化合物94同样的方法，从153(0.6g)制得。
实施例160(±)t-3-(1’-乙酰氨基-3’-乙基)戊基-c-4-[(叔丁氧基羰基氨基叔丁氧基羰基亚氨基)甲基]氨基-t-2-乙酰氧基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(170，C-1’上的异构体A，流程15)
按用于化合物94同样的方法，从155(0.25g)制得。
实施例161(±)t-3-(1’-乙酰氨基正丁基)-c-4-[(叔丁氧基羰基氨基叔丁氧基羰基亚氨基)甲基]氨基-t-2-乙酰氧基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(171，C-1’上的异构体A，流程15)
按用于化合物94同样的方法，从156(0.26g)制得。
实施例162(1S，2S，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-[(N-叔丁氧基羰基-N-甲基氨基-N’-叔丁氧基羰基亚氨基)甲基]氨基-2-羟基环戊烷-1-羧酸乙酯(172，流程15)
用关于化合物94所述的同样方法，从151(0.46g)制得。所用的试剂为1，3-双(叔丁氧基羰基)-N-甲基-2-(2，4-二硝基苯基)-2-硫代假脲，代替1，3-双(叔丁氧基羰基)-2-甲基-2-硫代假脲，且不需要HgCl2。
实施例163(1S，2S，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-[(氨基亚氨基)甲基]氨基-2-羟基环戊烷-1-羧酸乙酯(173，流程15)
用关于化合物151所述的同样方法，从168(0.1g)制得。
实施例164(±)t-3-(1’-乙酰氨基-3’-乙基)丁基-c-4-[(氨基亚氨基)甲基]氨基-t-2-乙酰氧基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(174，C-1’上的异构体A，流程14)
用关于化合物151所述的同样方法，从169(0.38g)制得。
实施例165(±)t-3-(1’-乙酰氨基-3’-乙基)戊基-c-4-[(氨基亚氨基)甲基]氨基-t-2-乙酰氧基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(175，C-1’上的异构体A，流程15)
用关于化合物151所述的同样方法，从170(0.1g)制得。
实施例166(±)t-3-(1’-乙酰氨基正丁基)-c-4-[(氨基亚氨基)甲基]氨基-t-2-乙酰氧基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(176，C-1’上的异构体A，流程15)
用关于化合物151所述的同样方法，从171(0.08g)制得。
实施例167(1S，2S，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-[(N-甲基氨基亚氨基)甲基]氨基-2-羟基环戊烷-1-羧酸乙酯(177，流程15)
用关于化合物151所述的同样方法，从172(0.3g)制得。
实施例168(1S，2S，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-[(氨基亚氨基)甲基]氨基-2-羟基环戊烷-1-羧酸(178，流程15)
方法A：用关于化合物160所述的同样方法，从173(7.8mg，0.0166mmol)制得，为7.2毫摩尔溶液。
MS(ES+)：329.5(M+1)。
方法B：向化合物149(3.0g，8.9mmol)在DMF(20ml)中的混合物中加入盐酸吡唑甲脒(1.56g，10.6mmol)和二异丙基乙胺(3.9ml，22.4mmol)，于60℃加热36小时。再加盐酸吡唑甲脒(0.65g)和二异丙基乙胺(1ml)，于60℃再加热12小时。减压蒸去溶剂。在残渣中加入1 N NaOH(22ml，22mmol)，室温搅拌5小时。用乙酸乙酯萃取反应混合物(3×25ml)，将水层浓缩。滤集得到的固体，干燥，得到1．22g(39％)化合物178。
1H NMR(D2O)：1H NMR(D2O)：δppm 0.90(m，3H)，0.95(m，3H)，1.05(m，2H)，1.5(m，3H)，1.8(m，1H)，2.0(s，3H)，2.3(m，1H)，2.55(m，1H)，2.75(m，1H)，3.9(m，1H)，4.4(m，2H)。元素分析：计算值(C15H28N4O4.H2O)：C，52.01；H，8.73；N，16.17 实测值： C，51.64；H，8.57；N，16.14
实施例169(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-c-4-[(氨基亚氨基)甲基]氨基-t-2-羟基环戊烷-r-1-羧酸(179，C-1’上的异构体A，流程15)
用关于化合物160所述的同样方法(方法A)，从174(12.0g，0.0263mmol)制得，为26.3毫摩尔溶液。
MS(ES+)：329.5(M+l)。
实施例170(±)t-3-(1’-乙酰氨基-3’-乙基)戊基-c-4-[(氨基亚氨基)甲基]氨基-t-2-羟基环戊烷-r-1-羧酸(180，C-1’上的异构体A，流程15)
用关于化合物160所述的同样方法(方法A)，从174(9.0g，0.0176mmol)制得，为17.6毫摩尔溶液。
MS(ES+)：343.5(M+1)。
实施例171(±)t-3-(1’-乙酰氨基正丁基)-c-4-[(氨基亚氨基)甲基]氨基-t-2-羟基环戊烷-r-1-羧酸(181，C-1’上的异构体A，流程15)
用关于化合物160所述的同样方法(方法A)，从176(4.9g，0.010mmol)制得，为10.0毫摩尔溶液。
MS(ES+)：315.0(M+1)。
实施例172(1S，2S，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-[(N-甲基氨基亚氨基)甲基]氨基-2-羟基环戊烷-1-羧酸(182，C-1’上的异构体A，流程15)
用关于化合物160所述的同样方法(方法A)，从177(10.4g，0.0203mmol)制得，为20.3毫摩尔溶液。
MS(ES+)：343.6(M+1)。
实施例173(1S，2S，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-丙基)戊基-4-[(氨基亚氨基)甲基]氨基-2-羟基环戊烷-1-羧酸(183，流程15)
用关于化合物178所述的同样方法(方法B)，从150(8.7g)制得。
实施例174(1S，2S，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-叔丁氧基羰基氨基-2-(N-咪唑基-硫代羰基氧基)环戊烷-1-羧酸甲酯(184，流程16)
将化合物137(100g，0.25mol)和1，1’-硫代羰基二咪唑(90g，0.5mol)在无水THF(1．3L)中的混合物于回流温度下加热16小时。减压除去溶剂，将残渣溶于乙酸乙酯(1L)，用0.5 N HCl洗涤(3×1L)。乙酸乙酯层用MgSO4干燥，过滤后，将滤液浓缩。残渣从乙酸乙酯/己烷中重结晶，得到76g(59.6％)化合物184。将滤液浓缩，残渣通过硅胶柱提纯，用乙酸乙酯/己烷为洗脱剂，又得到14g(11％)化合物184。
1H NMR(CDCl3)：δ0.75(m，3H)，0.9(m，3H)，1.15(m，3H)，1．4(m，9H)，1．9(m，2H)，2.0(s，3H)，2.5(m，2H)，3.1(m，1H)，3.75(s，3H)，4.25(m，1H)，4.5(m，1H)，5.0(m，1H)6.0(m，1H)，6.4(m，1H)，7.05(s，1H)，7.7(s，1H)，8.4(s，1H)元素分析：计算值(C24H38N4O6S)：C，56.45；H，7.50；N，10.97 实测值： C，56.40；H，7.50；N，10.98
实施例175(1S，2S，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-丙基)戊基-4-叔丁氧基羰基氨基-2-(N-咪唑基-硫代羰基氧基)环戊烷-1-羧酸甲酯(185，流程16) 按用于化合物184的同样方法，从138(17.1g)制得。
实施例176(1S，2S，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-叔丁氧基羰基氨基-2-(N-咪唑基-硫代羰基氧基)环戊烷-1-羧酸乙酯(186，流程16)
按用于化合物184的同样方法，从139(2.8g)制得。
实施例177(1S，2S，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-丙基)戊基-4-叔丁氧基羰基氨基-2-(N-咪唑基-硫代羰基氧基)环戊烷-1-羧酸甲酯(187，流程16)
按用于化合物184的同样方法，从140(3.43g)制得。
实施例178(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-叔丁氧基羰基氨基-t-2-(N-咪唑基-硫代羰基氧基)环戊烷-r-1-羧酸甲酯(188，C-1’上的异构体A，流程16)
按用于化合物184的同样方法，从142(0.4g)制得。
实施例179(1R，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-叔丁氧基羰基氨基环戊烷-1-羧酸甲酯(189，流程16)
向化合物184(50g，0.098mol)在甲苯(1．3L)中的混合物于70℃加入氢化三丁基锡(34ml，0.126mol)，然后加入偶氮二异丁腈(AIBN，0.1g，0.06mmol)，将混合物于70℃搅拌10分钟。真空除去溶剂，将残渣溶于乙腈(1L)，用己烷洗涤(3×1L)。将乙腈层浓缩，残渣通过硅胶柱提纯，用乙酸乙酯∶己烷(0-50％混合物)为洗脱剂。将适当的流分收集在一起，浓缩得到36g(95％)化合物189。
1H NMR(DMSO-d6)：δ0.8(m，6H)，1.2(m，5H)，1.4(s，9H)，1.6(m，2H)，1.85(s，3H)，1.9(m，1H)，2.1(m，2H)，2.7(m，1H)，3.55(s，3H)，3.7(m，1H)，3.8(m，1H)，6.72(d，J=7.5Hz，1H)，7.20(d，J=9.9Hz，1H)元素分析：计算值(C20H36N2O50.75H2O)：C，60.35；H，9.50；N，7.04 实测值： C，60.60；H，9.49；N，7.05
实施例180(1R，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-丙基)戊基-4-叔丁氧基羰基氨基环戊烷-1-羧酸甲酯(190，流程16)
按用于化合物189的同样方法，从185(16.0g)制得。
实施例181(1R，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-叔丁氧基羰基氨基环戊烷-1-羧酸乙酯(191，流程16)
按用于化合物189的同样方法，从186(1．9g)制得。
实施例182(1R，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-丙基)戊基-4-叔丁氧基羰基氨基环戊烷-1-羧酸甲酯(192，流程16)
按用于化合物189的同样方法，从187(1．2g)制得。
实施例183(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-叔丁氧基羰基氨基环戊烷-1-羧酸甲酯(193，C-1’上的异构体A，流程16)
按用于化合物189的同样方法，从188(0.2g)制得。
实施例184(1R，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-氨基环戊烷-1-羧酸甲酯盐酸盐(194，流程16) 按用于化合物149的同样方法，从189(10.0g)制得。
实施例185(1R，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-丙基)戊基-4-氨基环戊烷-1-羧酸甲酯盐酸盐(195，流程16)
按用于化合物149的同样方法，从190(10.0g)制得。
实施例186(1R，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-氨基环戊烷-1-羧酸乙酯三氟乙酸盐(196，流程16)
按用于化合物151的同样方法，从191(1．4g)制得。
实施例187(1R，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-丙基)戊基-4-氨基环戊烷-1-羧酸乙酯三氟乙酸盐(197，流程16)
按用于化合物151的同样方法，从192(0.84g)制得。
实施例188(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-c-4-氨基环戊烷-1-羧酸甲酯三氟乙酸盐(198，C-1’上的异构体A，流程16)
按用于化合物151的同样方法，从193(5.7mg)制得。
实施例189(1R，3R，4R，1’S)(-)-3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-氨基环戊烷-1-羧酸(199，流程16)
用关于化合物160所述同样的方法，从196(8.3mg，0.0233mmol)制得，为23.3毫摩尔溶液。
MS(ES+)：271.4(M+1)。
实施例190(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-c-4-氨基环戊烷-1-羧酸(200，C-1’上的异构体A，流程16)
按用于化合物160的同样方法，从198(4.21mg，0.0148mmol)制得，为14.8毫摩尔溶液。
MS(ES+)：271.4(M+1)。
实施例191(1R，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-[(叔丁氧基羰基氨基叔丁氧基羰基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-1-羧酸乙酯(201，流程17)
按用于化合物94同样的方法，从196(1．52g)制得。
实施例192(1R，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-丙基)戊基-4-[(叔丁氧基羰基氨基叔丁氧基羰基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-1-羧酸乙酯(202，流程17)
按用于化合物94同样的方法，从197(0.87g)制得。
实施例193(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-c-4-[(叔丁氧基羰基氨基叔丁氧基羰基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-r-1-羧酸甲酯(203，C-1’上的异构体A，流程17)
按用于化合物94同样的方法，从198(0.093g)制得。
实施例194(1R，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-[(N-叔丁氧基羰基-N-甲基氨基-N’-叔丁氧基羰基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-1-羧酸乙酯(204，流程17)
用关于化合物94所述同样的方法，从196(0.33g)制得。代替1，3-双(叔丁氧基羰基)-2-甲基-2-硫代假脲，所用的试剂为1，3-双(叔丁氧基羰基)-N-甲基-2-(2，4-二硝基苯基)-2-硫代假脲。
实施例195(1R，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-[(氨基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-1-羧酸乙酯三氟乙酸盐(205，流程17)
用关于化合物151所述同样的方法，从201(0.9g)制得。
实施例196(1R，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-丙基)戊基-4-[(氨基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-1-羧酸乙酯三氟乙酸盐(206，流程17)
用关于化合物151所述同样的方法，从202(0.8g)制得。
实施例197(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-[(氨基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-r-1-羧酸甲酯三氟乙酸盐(207，C-1’上的异构体A，流程17)
用关于化合物151所述同样的方法，从203(0.055g)制得。
实施例198(1R，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-[(N-甲基氨基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-1-羧酸乙酯三氟乙酸盐(208，流程17)
用关于化合物151所述同样的方法，从204(0.35g)制得。
实施例199(1R，3R，4R，1’S)(-)-3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-[(氨基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-1-羧酸(209，流程17)
方法A：用关于化合物160所述同样的方法，从205(7.6mg，0.0167mmol)制得，为16.7毫摩尔溶液。
MS(ES+)：313.4(100％，M+1)。
方法B：用关于化合物178所述同样的方法(方法B)，从194(15.02g)制得。
1H NMR(D2O)：δ0．90(m，6H)，1．1(m，2H)，1．4(m，1H)，1．5(m，2H)，1．75(m，2H)，2．05(s，3H)，2．15(m，1H)，2．35(m，2H)，2．8(m，1H)，3．65(m，1H)，4．0(m，1H)。
实施例200(1R，3R，4R，1’S)(-)-3-(1’-乙酰氨基-2’-丙基)戊基-4-[(氨基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-1-羧酸(210，流程17)
方法A：用关于化合物160所述同样的方法，从206(9.69mg，0.0197mmol)制得，为14.9毫摩尔溶液。
MS(ES+)：341.7(100％，M+1)。
方法B：用关于化合物178所述同样的方法(方法B)，从153(8.4g)制得。
1H NMR(D2O)：δ0．90(m，6H)，1．1(m，2H)，1．4(m，6H)，1．6(m，1H)，1．75(m，2H)，2．05(s，3H)，2．15(m，1H)，2．3(m，1H)，2．4(m，1H)，2．78(m，1H)，3．6(m，1H)，3．9(m，1H)
实施例201(±)t-3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-[(氨基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-r-1-羧酸(211，C-1’上的异构体A，流程17)
用关于化合物160所述同样的方法，从207(18mg，0.0342mmol)制得，为34.2毫摩尔溶液。
MS(ES+)：313.4(100％，M+1)。
实施例202(1R，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-[(N-甲基氨基亚氨基)甲基]氨基环戊烷-1-羧酸(212，流程17)
用关于化合物160所述同样的方法，从208(10.7mg，0.0235mmol)制得，为30.18毫摩尔溶液。
MS(ES+)：327.6(100％，M+1)。
实施例203(1S，2S，3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-叔丁氧基羰基氨基-2-甲磺酰氧基环戊烷-1-羧酸甲酯(213，流程18)
于4℃，向化合物137(1.0g，2.4mmol)在二氯甲烷(40ml)中的混合物中加入甲磺酰氯(0.37ml，4.8mmol)和三乙胺(1.0ml，7.2mmol)。将反应混合物于4℃搅拌16小时。向混合物中加水(10ml)，用二氯甲烷萃取(3×10ml)。合并有机萃取液，用盐水(20ml)洗涤、MgSO4干燥。过滤后，将滤液浓缩，残渣经硅胶柱提纯，得到0.8g(68％)化合物213。
MS(ES+1)：493.8(M+1)。
实施例204(3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-叔丁氧基羰基氨基环戊-1-烯-1-羧酸甲酯(214，流程18)
向化合物213(0.4g，0.81mmol)在THF(5ml)中的混合物中于4℃加入新鲜制备的乙醇钠(2.43mmol)乙醇液(1.5ml)，搅拌30分钟。将混合物用乙酸中和并浓缩。残渣用二氯甲烷(20ml)收集，用水和盐水洗涤，MgSO4干燥。过滤后，将滤液浓缩，残渣经硅胶柱提纯，得到0.11g(37％)化合物214。
MS(ES+)：397.8(M+1)。
实施例205(3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-氨基环戊-1-烯-1-羧酸甲酯盐酸盐(215，流程18)
按用于化合物149的方法，从化合物214(23mg，0.81mmol)制得，直接用于下一步。
MS(ES+)：297.5(M+1)。
实施例206(3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-氨基环戊-1-烯-1-羧酸(216，流程18)
将上面所得的混合物216用与化合物160同样的方法进行处理，得到58毫摩尔溶液。
实施例207(3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-[(叔丁氧基羰基氨基-叔丁氧基羰基亚氨基)甲基]氨基环戊-1-烯-1-羧酸甲酯(217，流程18)
将化合物215(4.23g，13.6mmol)、N-叔丁氧基羰基-N’-叔丁氧基羰基-N″-三氟甲磺酰基胍(5.87g，15mmol)和三乙胺(4.1ml，29.2mmol)在二氯甲烷(70ml)中的混合物室温搅拌16小时。将反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液、水和盐水洗涤涤，MgSO4干燥。过滤后，滤液浓缩，残渣经硅胶柱提纯，得到3.9g(60％)化合物217。
MS(ES+)：526.08(M+1)。
实施例208(3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-[(叔丁氧基羰基氨基-叔丁氧基羰基亚氨基)甲基]氨基环戊-1-烯-1-羧酸(218，流程18)
将化合物217(1.8g，3.4mmol)、THF(10ml)、乙醇(10ml)、水(10ml)和1NNaOH(10ml)的混合物室温搅拌8小时。将反应混合物浓缩，残留的水层用乙醚(20ml)洗涤，用乙酸酸化。滤集固体，水洗，干燥，得1.6g(92％)化合物218。
MS(ES+)：512.0(M+1)。
实施例209(3R，4R，1’S)(-)3-(1’-乙酰氨基-2’-乙基)丁基-4-[(氨基-亚氨基)甲基]氨基环戊-1-烯-1-羧酸盐酸盐(219，流程18)
将化合物218(1．52g，2.98mmol)和3N HCl(20ml，60mmol)的混合物搅拌24小时。将反应混合物浓缩、干燥。残渣用乙醇/乙醚结晶，得到0.84g(83％)化合物219。
MS(ES+)：311.4(M+1)。元素分析：计算值(C15H26N4O3HCl)：C，51.94；H，7.56；N，16.15 实测值： C，51.84；H，7.75；N，16.03
生物化学
体外试验基于von Itzstein等(欧洲专利申请92309634.6)报告的方法。用Laver等在Virology 1984，137，p.314-323中描述的方法从H1N9流感株得到神经氨酸酶。经采用荧光发生物质2’-(4-甲基-2，4-二羟肉桂基)-α-D-乙酰基神经氨酸的荧光光谱测定技术测得IC50值。将此物质用神经氨酸酶裂解，得到可定量的荧光产物。试验混合物包含各种浓度的抑制剂(4-6点)，和以32.5mM MES((2-(N-吗啉代)乙磺酸)缓冲液，4mM CaCl2，pH=6.5(总体积=80μl))配制的酶。加入20μl底物使其终浓度为75μM，开始反应。在37℃10分钟后，加入150μl 0.2M甘氨酸/氢氧化钠(pH10.2)以同样的底物溶液但不含酶为空白对照。用荧光光谱测定仪(激发波长：360nm；发射波长：450nm)读取荧光，将底物空白读数从样品读数中扣除。将NA活性抑制百分率对抑制剂浓度作图，计算出IC50，每个点测定两次。
生物学数据
下表提供神经氨酸酶抑制数据(IC50值)。
+＞100μM；++1-100μM；+++＜1μM。
化合物编号 FluA FluB
65 ++ ++
86 ++ ++
160 +++ +++
162 +++ +++
163 +++ +++
165 ++ ++
166 +++ ++
178 +++ +++
179 +++ +++
180 +++ +++
181 +++ +++
182 +++ +++
183 +++ +++
199 +++ +++
200 +++ +++
209 +++ +++
210 +++ +++
211 +++ +++
212 +++ +++
219 +++ +++
晶体学
将H1N9神经氨酸酶结晶转移到已溶解了抑制剂的2ml磷酸盐缓冲液中，制成神经氨酸酶和抑制剂分子之间的复合物。将抑制剂化合物的浓度调节成2mM。使结晶在缓冲液中平衡约1天，然后从溶液中取出，装在玻璃毛细管中，用于X-射线衍射数据收集。用Siemens X-100多线区域检测器(multiwire areadetector)记录在100mA和50KV的条件下工作的Rigaku RU-300旋转阳极发生器(rotating anodegenerator)和铜阳极上记录所有X-射线强度测定值。结晶到检测器距离是160mm，检测器偏移2.2埃。强度数据在0.1°振动架(oscillation frame)上测定，每幅照片曝光240秒。每个结晶得到600-700幅数据，然后结晶受到辐射损伤，不能再收集到数据。
用XENGEN程序包处理强度数据。测量和，合并积分强度产生只含独特反射的一组最终数据。所有加工过程均用XPLOR程序进行。起始加工模式是2.0埃加工的天然N9结构。用加工模式计算相(calculated phases from therefined model)计算差值傅里叶偏差图(difference Fourier maps)至2.2埃。用QUANTA图形程序在Silicon Graphics Indigo Extreme 2计算机作图工作站分析电子强度图。理想化的抑制剂分子模式是手工拟合偏差电子强度而成的。这些抑制剂模式以后包括在XPLOR加工程序中。
剂量和制剂
本发明的抗病毒化合物可用各种方法给药，作为对病毒感染的治疗，这些方法在人、哺乳动物、鸟或其它动物体内使活性剂作用部位与病毒的神经氨酸酶接触。本发明的化合物可用与药物(无论是各个治疗剂或治疗剂的联合使用)使用有关的常规方法给药，它们可单独给药，但一般与药物载体一起给药，这些药物载体在所选给药途径和标准药物实践基础上加以选择。
给药剂量当然根据已知的因素而变化，例如特定药物的药代动力学特性及其给药方式和途径；接受治疗者的年龄、健康状况和体重；症状的性质和程度；同时进行的治疗的种类；治疗频率；及所需的效应。活性成分的每天剂量可预期约为0.001-1000mg/kg体重，较佳剂量为0.1-30mg/kg。
剂型(适于给药的组合物)包含活性成分约1-500mg/单位。这些药物组合物中，活性成分的量通常为组合物总重量的约0.5-95％。
活性成分可以固体剂型(如胶囊、片剂和粉剂)或液体剂型(如酏剂、糖浆剂、悬浮液)口服给药。它还可以灭菌液体剂型胃肠外给药。活性成分还可以滴鼻剂或通过吸入药粉雾作鼻内给药。其它剂型亦是潜在可能的，诸如经皮给药，如经药物贴片机制或软膏给药。
明胶胶囊包含活性成分和粉状载体，如乳糖、淀粉、纤维素衍生物、生物相容性聚合物、硬脂酸镁、硬脂酸等。类似的稀释剂可用于制备压制片剂。片剂和胶囊均可制成缓释产品，使药物在数小时的时间内持续释放药物。压制片剂可包糖衣或包薄膜，以掩蔽任何令人不快的味道，并保护片剂免受潮气影响，或包肠溶衣，以在胃肠道选择性崩解。口服给药的液体剂型可包含着色剂和调味剂，利于患者接受。它们还可含缓冲剂、表面活性剂和防腐剂。液体口服产品可开发成具有缓释性质。它们还可包含环糊精衍生物，以增加活性成分的溶解度，促进其经口摄取。
一般说来，水、合适的油、盐水、右旋糖(葡萄糖)水溶液和有关的糖溶液及二元醇(如丙二醇或聚乙二醇)是适用于胃肠外溶液的载体。胃肠外给药的溶液以含有活性成分的水溶性盐、合适的稳定剂为佳，需要时可含有缓冲剂。抗氧化剂(如亚硫酸氢钠、亚NaSO2或抗坏血酸)单用或合用，是合适的稳定剂。还可使用的是柠檬酸及其盐和EDTA钠。另外，胃肠外溶液可含有防腐剂，如苯扎氯铵、羟苯甲酯或羟苯丙酯，及三氯叔丁醇。
合适的药物载体在如下文献中有描述：Remington’s PharmaceuticalSciences，Mack Publishing Company和Handbook of PharmaceuticalsExcipients，American Pharmaceutical Association，两者在本领域是标准参考书。
本发明化合物给药的有用剂型可阐述如下：
硬壳胶囊
通过充填标准的两段硬明胶胶囊，每段充填100mg粉状活性成分、150mg乳糖、50mg纤维素和6mg硬脂酸镁，制成大量单位胶囊。
软明胶胶囊
制备活性成分在可消化油(如豆油、棉籽油或橄榄油)中的混合物，通过排液泵注入熔融的明胶，形成含100mg活性成分的软明胶胶囊。将胶囊洗涤、干燥。可将活性成分溶于聚乙二醇、甘油和山梨醇的混合物中，制成可溶和于水的药物混合物。
片剂
用常规方法制备大量片剂，剂量单位为100mg活性成分、0.2mg胶态二氧化硅、5mg硬脂酸镁、275mg微晶纤维素、11mg淀粉和98.8mg乳糖。可使用合适的水性和非水性包衣以增加可口性，改善外观和稳定性或延缓吸收。
即刻释放片剂/胶囊
用常规方法和新方法制备这些固体口服剂型。不用水而口服摄入这些剂量单位，以即刻溶解和输送药物。将活性成分混合于含诸如糖、明胶、果胶和增甜剂的液体中。用冷冻干燥和固态提取技术将这些液体固化成固体片剂或胶囊。将药物化合物与粘弹性和热弹性糖和聚合物或泡腾成分一起压制，产生拟用于即刻释放(无需用水)的多孔基质。
此外，本发明的化合物可以滴鼻剂、或计量的鼻或粘膜吸入剂的形式给药。药物从鼻用溶液以细雾状或从粉剂以气溶胶的形式输送药物。
除了本说明书所揭示和描述的内容外，本领域技术人员从上述描述中会明了本发明的各种变动。这样的变动也都落在所附权利要求的范围内。
前面揭示的内容包括被认为使本领域技术人员能实施本发明所必需的所有信息。由于引用的申请可进一步提供有用的信息，因此所引用的这些材料全文引入本文作为参考。