含有胃促胰酶抑制剂作为有效成分的预防或治疗纤维变性的药物.pdf

实施本发明的最佳方式

在本说明书中，与细胞外基质代谢障碍有关的纤维变性包括由于细胞
外基质代谢障碍的发生而引发的疾病，其症状因细胞外基质代谢障碍的
发生而加剧的疾病，和其治愈因细胞外基质代谢障碍的发生而延迟的疾
病。例如，这些疾病包括硬皮病、肺纤维变性、良性前列腺肥大、心肌
梗塞后心肌纤维生成、心肌纤维变性、骨骼肌纤维变性、术后粘连、肥
大性瘢痕和瘢痕疙瘩、硬变、肝纤维变性、肾纤维变性、纤维性血管病
及糖尿病并发症，如由于纤维性微脉管炎导致的视网膜炎、神经官能症、
肾病和外周动脉炎或者与这些有关的病症。

通过本领域普通专业人员可使用的方法，选择能够表现出抑制胃促胰
酶活性作用的物质作为本发明的胃促胰酶抑制剂。作为选择方法，可提
及例如后面描述的实施例1的方法。以此方式获得的化合物包括以前已
经报道作为胃促胰酶抑制剂的已知化合物，例如低分子量胃促胰酶抑制
剂，如教科书中给出的(Protease Inhibitors；Barrett等编著；
Elssevier Science B.V.；Amsterdam，1996)；报道为肤类抑制剂的α-
酮酸衍生物(WO 93-25574，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，1995，92，
6738)；α，α-二氟-β-酮酸衍生物(日本未审专利申请(公开)9-124691)；
三肽抑制剂(WO 93-03625)；磷酸衍生物(Oleksyszyn等，生物化学
(Biochemistry)30，485，1991)；肽样抑制剂，如三氟甲基酮衍生物
(WO 96-33974，日本未审专利申请(公开)10-53579)和乙酰胺衍生物
(日本未审专利申请(公开)10-7661，日本未审专利申请(公开)10-
53579，日本未审专利申请(公开)11-246437，WO 99-41277，WO98-18794，
WO96-39373)；非肽类抑制剂，如三嗪衍生物(日本未审专利申请(公开)
8-208654和日本未审专利申请(公开)10-245384)；苯酚酯衍生物(日
本未审专利申请(公开)10-87567)；头孢烯衍生物(日本未审专利申请
(公开)10-87493)；异噁唑衍生物(日本未审专利申请(公开)11-1479)；
咪唑烷衍生物(WO96-04248)；乙内酰脲衍生物(日本未审专利申请(公
开)9-31061)；喹唑啉衍生物(WO97-11941)等，但是作为优选胃促胰
酶抑制剂的代表性实例，可提及下式I化合物及其可药用盐。

其中，A环表示芳基；

R¹表示羟基、氨基、可被羧酸基取代的C₁-C₄低级烷基氨基、可被羧
酸基取代的C₇-C₁₀低级芳烷基氨基、可被羧酸基取代的C₁-C₄低级脂肪
酸酰化的氨基、可被羧酸基取代的芳环羧酸酰化的氨基、可被羧酸基取
代的杂芳环羧酸酰化的氨基、可被羧酸基取代的C₁-C₄低级链烷磺酸磺
酰化的氨基、可被羧酸基取代的芳环磺酸磺酰化的氨基、可被羧酸基取
代的杂芳环磺酸磺酰化的氨基、可被羧酸基取代的C₁-C₄低级烷基或者可
被羧酸基取代的C₂-C₄链烯基；

R²和R³可以相同或不同，并且表示氢原子、未取代的或取代的C₁-C₄
低级烷基、卤原子、羟基、C₁-C₄低级烷氧基、氨基、未取代的或取代的
C₁-C₄低级烷基氨基、未取代的或取代的C₇-C₁₀芳烷基氨基、可被羧酸
基取代的C₁-C₄低级脂肪酸酰化的氨基、可被羧酸基取代的芳环羧酸酰
化的氨基、可被羧酸基取代的杂芳环羧酸酰化的氨基、可被羧酸基取代
的C₁-C₄低级链烷磺酸磺酰化的氨基、可被羧酸基取代的芳环磺酸磺酰
化的氨基、可被羧酸基取代的杂芳环磺酸磺酰化的氨基，或者羧酸基，
或者

当A环是苯环时，R¹和R²可与该取代的苯环一起形成可被羧基取代
的稠合杂环，其中环中的碳原子可形成羰基并且R³定义如上；并且

X表示氢原子、C₁-C₄低级烷基、C₁-C₄低级烷氧基、卤原子、羟基、
氨基或硝基。

在通式(I)中，A环表示的芳基的优选实例是苯环和萘环。

R¹表示的可被羧酸基取代的C₁-C₄低级烷基氨基和可被羧酸基取代的
C₇-C₁₂低级芳烷基氨基的优选实例是甲氨基、乙氨基、丙氨基、丁氨基、
羧甲基氨基、羧乙基氨基、羧丙基氨基、羧丁基氨基、苄氨基、苯乙氨
基、苯丙基氨基、苯丁基氨基、羧基苄氨基、羧基苯乙氨基、羧基苯丙
基氨基、羧基苯丁基氨基等。

R¹表示的可被羧酸基取代的C₁-C₄低级脂肪酸酰化的氨基、可被羧酸
基取代的芳环羧酸酰化的氨基和可被羧酸基取代的杂芳环羧酸酰化的氨
基的优选实例是甲酰氨基、乙酰氨基、丙酰氨基、丁酰氨基、苯甲酰氨
基、萘甲酰氨基、吡啶甲酰氨基、吡咯甲酰氨基、羧基乙酰氨基、羧基
丙酰氨基、羧基丁酰氨基、羧基苯甲酰氨基、羧基萘甲酰氨基、羧基吡
啶甲酰氨基、羧基吡咯甲酰氨基等。

R¹表示的可被羧酸基取代的C₁-C₄低级链烷磺酸磺酰化的氨基、可被
羧酸基取代的芳环磺酸磺酰化的氨基和可被羧酸基取代的杂芳环磺酸磺
酰化的氨基的优选实例是甲磺酰氨基、乙磺酰氨基、丙磺酰氨基、丁磺
酰氨基、苯磺酰氨基、萘磺酰氨基、吡啶磺酰氨基、吡咯磺酰氨基、羧
基甲磺酰氨基、羧基乙磺酰氨基、羧基丙磺酰氨基、羧基丁磺酰氨基、
羧基苯磺酰氨基、羧基萘磺酰氨基、羧基吡啶磺酰氨基、羧基吡咯磺酰
氨基等。

R¹表示的可被羧酸基取代的C₁-C₄低级烷基的优选实例是乙酸基、丙
酸基、丁酸基、戊酸基等。

R¹表示的可被羧酸基取代的C₂-C₄链烯基的优选实例是丙烯酸基、巴
豆酸基等。

R²或R³表示的未取代的或取代的C₁-C₄低级烷基的优选实例是直链
烷基，如甲基、乙基、正丙基和正丁基；以及支链烷基，如异丙基、仲
丁基和叔丁基。

C₁-C₄低级烷基的取代基的优选实例是羧酸基；卤原子，如氟原子和
氯原子；C₁-C₄低级烷氧基；氨基；甲氨基；二甲氨基、羧甲基氨基、羧
乙基氨基等。

R²或R³表示的卤原子的优选实例是氟原子、氯原子、溴原子和碘原
子。

R²或R³表示的C₁-C₄低级烷氧基的优选实例是直链烷氧基，如甲氧
基、乙氧基、正丙氧基和正丁氧基；以及支链烷氧基，如异丙氧基、仲
丁氧基和叔丁氧基。

R²或R³表示的未取代的或取代的C₁-C₄低级烷基氨基的优选实例是
甲氨基、乙氨基、丙氨基、丁氨基等。

C₁-C₄低级烷基氨基的取代基的优选实例是羧酸基；卤原子，如氟原
子和氯原子；C₁-C₄低级烷氧基等。

R²或R³表示的未取代的或取代的C₇-C₁₂低级芳烷基氨基的优选实例
是苄氨基、苯乙氨基、苯丙基氨基、苯丁基氨基等。

芳烷基氨基的取代基的优选实例是羧酸基；卤原子，如氟原子和氯原
子；C₁-C₄低级烷氧基等。

R²或R³表示的可被羧酸基取代的C₁-C₄低级脂肪酸酰化的氨基、可
被羧酸基取代的芳环羧酸酰化的氨基和可被羧酸基取代的杂芳环羧酸酰
化的氨基的优选实例是甲酰氨基、乙酰氨基、丙酰氨基、丁酰氨基、苯
甲酰氨基、萘甲酰氨基、吡啶甲酰氨基、吡咯甲酰氨基、羧基乙酰氨基、
羧基丙酰氨基、羧基丁酰氨基、羧基苯甲酰氨基、羧基萘甲酰氨基、羧
基吡啶甲酰氨基、羧基吡咯甲酰氨基等。

R²或R³表示的可被羧酸基取代的C₁-C₄低级链烷磺酸磺酰化的氨基、
可被羧酸基取代的芳环磺酸磺酰化的氨基和可被羧酸基取代的杂芳环磺
酸磺酰化的氨基的优选实例是甲磺酰氨基、乙磺酰氨基、丙磺酰氨基、
苯磺酰氨基、萘磺酰氨基、吡啶磺酰氨基、吡咯磺酰氨基、羧基甲磺酰
氨基、羧基乙磺酰氨基、羧基丙磺酰氨基、羧基苯磺酰氨基、羧基萘磺
酰氨基、羧基吡啶磺酰氨基、羧基吡咯磺酰氨基等。

当A环是苯环时，R¹和R²与该取代的苯环一起形成的可被羧酸基取
代的稠合杂环(其中环中的碳原子可形成羰基)的优选实例是四氢喹啉
环和苯并噁嗪环，如四氢喹啉、苯并噁嗪、喹喔啉、苯并二噁烷、羧基
四氢喹啉、羧基苯并噁嗪、羧基喹喔啉、羧基苯并二噁烷等。

X表示的C₁-C₄低级烷基的优选实例是直链烷基，如甲基、乙基、正
丙基和正丁基；以及支链烷基，如异丙基、仲丁基和叔丁基。

X表示的C₁-C₄低级烷氧基的优选实例是直链烷基，如甲氧基、乙氧
基、正丙氧基和正丁氧基；以及支链烷基，如异丙氧基、仲丁氧基和叔
丁氧基。

X表示的卤原子的优选实例是氟原子、氯原子、溴原子和碘原子。

此外，可药用的实例是酸盐，如盐酸盐、甲磺酸盐和三氟乙酸盐；及
碱金属盐，如钠盐和钾盐。

本发明的式(I)的喹唑啉衍生物可，例如通过下列(A)和(B)的
合成方法合成。

合成方法(A)

采用，例如JP-A-6-199839中描述的方法，使式(I-1)的化合物：

其中A环定义如上并且R^1’、R^2’和R^3’分别表示R¹、R²和R³，它们可被保
护基保护，并且R¹、R²和R³定义如上

与式(I-2)的邻氨基苯甲酸衍生物反应

其中X’表示X，该基团可被保护基保护，并且X定义如上

获得式(I-3)的磺酰脲衍生物：

其中A、R^1’、R^2’、R^3’和X’定义如上，

然后使用缩合试剂，例如1，1’-羰基二咪唑(下文称之为CDI)，获
得喹唑啉环，如果需要，脱去R¹、R²、R³和X的保护基。

在该反应中，当R¹、R²或R³表示含羟基、氨基或羧基的基团时，R¹、
R²或R³可任选地用保护基保护，所述保护基是，例如苄氧羰基、叔丁氧
羰基、苄基、烯丙基、叔丁基等。当X表示羟基或氨基时，X可任选地用
保护基保护，所述保护基是，例如苄氧羰基、叔丁氧羰基、苄基、烯丙
基、叔丁基等。

用于该反应的式(I-1)化合物包括市售的或已知化合物或者可采用已
知方法合成的化合物。例如，可使用按照欧洲专利说明书0269141中描
述的合成方法，用氯磺酰异氰酸酯，由相应的磺酰胺衍生物合成的化合
物。例如，可使用3-烯丙氧羰基-甲基苯磺酰基异氰酸酯、4-烯丙氧羰基
-甲基苯磺酰基异氰酸酯和4-烯丙氧基苯磺酰基异氰酸酯等。

用于该反应的式(I-2)的邻苯甲酸衍生物可使用市售的或已知化合物
或者通过已知方法合成的化合物。例如，可使用4-氯邻氨基苯甲酸、4-
甲氧基邻氨基苯甲酸、5-氯邻氨基苯甲酸、4-羟基邻氨基苯甲酸等。

由式(I-3)的磺酰脲衍生物获得喹唑啉环的反应可在质子惰性的溶剂
中于-50-50℃，优选在-20℃-室温下进行，溶剂是，例如醚类溶剂，
如四氢呋喃和二噁烷；含卤原子的溶剂，如二氯甲烷；或者二甲基甲酰
胺等。此外，对于该环合反应，可使用常规的缩合试剂，包括，例如CDI、
二环己基碳二亚胺(DCC)及类似的碳二亚胺化合物；混合酸酐等。脱保
护反应可用常规方法进行，如用酸或碱水解，还原或氧化等。

合成方法(B)

使其中A环、R^1’、R^2’和R^3’定义如上的式(I-4)化合物：

与式(I-5)的邻氨基苯甲酸衍生物缩合

其中X’定义如上，Ph表示苯基，并且R⁴表示羧基的保护基，羧基是可通
过水解或氢解被释放出的特定基团，例如甲基、乙基或苄基，

使用，例如1，8-二氮杂双环[5，4，0]-7-十一碳烯(下文称之为DBU)
形成式(I-6)的磺酰脲衍生物：

其中A环、R^1’、R^2’、R^3’、R^4’和X’定义如上，

然后用碱水解或氢解得到式(I-3)的相应羧酸，再得到喹唑啉环并任
选地以与合成方法(A)中相同的方法，脱去R¹、R²、R³和X的保护基。
在该反应中，当R¹、R²、R³表示含羟基、氨基或羧基的基团时，R¹、R²或
R³可任选地用保护基，例如苄氧羰基、叔丁氧羰基、苄基、烯丙基、叔
丁基等保护。当X表示羟基或氨基时，X可任选地用保护基，例如苄氧羰
基、叔丁氧羰基、苄基、烯丙基、叔丁基等保护。

作为用于该反应的式(I-4)化合物，可使用市售的或已知化合物或者
通过已知方法合成的化合物。例如，可使用3-羟基苯磺酰胺，2-氨基苯
磺酰胺，3-氨基苯磺酰胺，4-氨基苯磺酰胺，(±)-2-(4-氨基磺酰基苯基)
丁酸，3-苄氧羰基氨基-4-氯苯磺酰胺，4-苄氧羰基氨基-3-氯苯磺酰胺，
4-氨基-3，5-二氯苯磺酰胺，3-苄氧羰基氨基-4-甲基苯磺酰胺，4-叔丁
氧羰基-3-羟基苯磺酰胺，3-苄氧羰基氨基-4-叔丁氧羰基苯磺酰胺，4-
叔丁氧羰基-3-羟基苯磺酰胺，3-叔丁氧羰基-4-羟基苯磺酰胺，3-乙酰
胺-4-甲氧基苯磺酰胺，3-(3-氨基磺酰基)苯基丙烯酸叔丁基酯，3-氨基
-4-甲氧基苯磺酰胺，4-甲氧基-3-甲基磺酰氨基苯磺酰胺，3-羧基-4-羟
基-2-萘磺酰胺，4-苄氧羰基氨基-3-叔丁氧羰基苯磺酰胺，(±)-3-叔丁
氧羰基-2-氧代-1H，3H-喹啉-7-磺酰胺，(±)-2-叔丁氧羰基-3-氧代-1，4-
苯并噁嗪-6-磺酰胺等。

作为用于该反应的式(I-5)邻氨基苯甲酸，可使用市售的或已知化合
物或者通过已知方法合成的化合物。例如，可使用4-氯-2-N-苯氧羰基邻
氨基苯甲酸甲酯，4-氯-2-N-苯氧羰基邻氨基苯甲酸乙酯，4-氯-2-N-苯
氧羰基邻氨基苯甲酸苄基酯，5-氯-2-N-苯氧羰基邻氨基苯甲酸乙酯，5-
氯-2-N-苯氧羰基邻氨基苯甲酸苄基酯，4-甲氧基-2-N-苯氧羰基邻氨基
苯甲酸甲酯，4-甲氧基-2-N-苯氧羰基邻氨基苯甲酸乙酯，4-甲氧基-2-N-
苯氧羰基邻氨基苯甲酸苄基酯，4-羟基-2-N-苯氧羰基邻氨基苯甲酸甲
酯，4-羟基-2-N-苯氧羰基邻氨基苯甲酸乙酯，4-羟基-2-N-苯氧羰基邻
氨基苯甲酸苄基酯等。

获得式(I-4)化合物和式(I-5)的邻氨基苯甲酸衍生物缩合得到式(I-
6)的磺酰脲衍生物的反应可用质子惰性溶剂在-50-50℃，优选-20-室
温下进行，所述溶剂是，例如醚类溶剂，如四氢呋喃或二噁烷；含卤溶
剂，如二氯甲烷；或者二甲基甲酰胺等。此外，作为该缩合反应可使用
的有机强碱，可使用例如DBU；无机碱是，例如碳酸钾、碳酸钠、氢氧化
钾和氢氧化钠；或者金属碱，如氢化钠。

对于在碱水解或氢解由此得到的式(I-6)的磺酰脲衍生物获得式(I-3)
磺酰脲衍生物的反应，可采用用于酯的常规水解条件和氢化条件。

注意到上述反应可在被保护的官能团不参与反应的情况下进行。依据
保护基的类型，可通过化学还原或者其它常规脱保护反应脱除保护。例
如，当保护基是叔丁基时或者叔丁氧羰基时，可使用三氟乙酸；当保护
基是烯丙基时，可使用钯催化剂，如四(三苯基膦)钯(O)。

其中R¹表示被可被羧酸取代的C₁-C₄低级脂肪酸酰化的氨基，被可
被羧酸取代的芳环羧酸酰化的氨基，和被可被羧酸取代的杂芳环羧酸酰
化的氨基的式(I)化合物可使用常规方法，由其中R¹表示氨基的式(I)化
合物通过用羧酸、酰氯、酸酐酰化得到。

其中R¹表示被可被羧酸取代的C₁-C₄低级链烷磺酸磺酰化的氨基，
被可被羧酸取代的芳环磺酸磺酰化的氨基和可被羧酸取代的杂芳环磺酸
磺酰化的氨基的式(I)化合物可采用常规方法，由其中R¹表示氨基的式(I)
化合物通过用磺酸或磺酰氯磺酰化得到。

按照上述方法获得的产物可通过例如重结晶或柱色谱方法纯化。

如果需要，通过上述方法获得的式(I)化合物可通过使其与各种类型
的酸或碱反应转化为盐。可用于将式(I)化合物转化为盐的酸可提及，例
如无机酸，如氢氯酸、氢溴酸、硝酸、硫酸或磷酸；以及有机酸，如甲
磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、三氟乙酸、柠檬酸、乳酸、马来酸、富马
酸、酒石酸、乙酸、己二酸、棕榈酸和鞣酸。可用于将式(I)化合物转化
为盐的碱可提及，例如氢氧化钠、氢氧化锂和氢氧化钾。

此外，本发明的式(I)化合物包括含不对称中心的那些化合物。外消
旋混合物可通过一种或多种方法分离，由此获得旋光活性单体。可使用
的方法包括，例如

(1)使用旋光活性柱的分离方法。

(2)通过旋光活性酸或碱转化为盐，然后重结晶的分离方法。

(3)(1)和(2)的结合分离方法。

可按照下面实施例4或7的方法评价这些化合物改善(疾病)异常
加重的作用。

为使用本发明的有效成分作为预防或治疗与细胞外基质代谢障碍有关
的纤维变性的药物，作为预防或治疗与细胞外基质代谢障碍有关的纤维
变性的药物组合物，和缓解细胞外基质代谢障碍的药物，可将一种或多
种本发明化合物混合形成适于按照常规方法给药的形式。口服制剂形式
的实例包括胶囊、片剂、颗粒、细颗粒、糖浆、干糖浆和其它制剂；非
口服给药制剂的实例包括注射剂和栓剂，如直肠栓剂和阴道栓剂；经鼻
制剂，例如喷雾剂和软膏；及透皮制剂，如透皮吸收带剂。

本发明化合物的临床剂量可根据疾病症状、严重程度、年龄、存在的
并发症等变化，以及根据制剂形式变化。在口服给药的情况下，有效成
分的成人剂量一般为1-1000mg天。在非口服给药的情况下，施用1/10
-1/2口服剂量的量足以。这些剂量范围可根据患者的年龄、症状等进行
适宜调整。

在本发明中，胃促胰酶抑制剂可不与其它有效成分混合而单独给药，
但考虑到有关疾病、症状、并发症等，也可施用含有其它有效成分的药
物制剂。此外，也可与其它有效成分联合。对其它有效成分的用量没有
特别限制，但应考虑其单独产生作用的最低量、产生的副作用等来确定。

在治疗中，包括仅含胃促胰酶抑制剂作为活性成分的制剂以及还含有
其它有效成分的制剂联合治疗的制剂形式和方法宜由医师按照患者的年
龄、症状等选择。

本发明化合物的毒性较低。给5周龄雄性小鼠口服给药后24小时时
的急性毒性值LD₅₀为1g/kg或更高。

实施例

通过下列非限制性实施例进一步描述本发明，但无需赘述，本发明的
范围不限于这些实施例。

为证明胃促胰酶抑制剂对纤维变性的有用性，下面提供了用Tsk小
鼠作为硬皮病小鼠模型，以及用博来霉素诱发的小鼠肺纤维变性作为纤
维变性模型得到的试验结果。

制备实施例1：7-氯-3-(3-羟基苯磺酰基)-2，4(1H，3H)-喹唑啉二酮
(化合物1)的合成

按照合成方法(B)，将938mg(5.42mmol)3-羟基苯磺酰胺溶于40ml
四氢呋喃中，然后滴加892μl(5.96mmol)1，8-氮杂双环[5.4.0]-7-十
一碳烯(下文称之为DBU)。将该反应溶液在室温搅拌15分钟，然后加入
1.66g(5.42mmol)4-氯-2-N-苯氧羰基邻氨基苯甲酸甲酯并将该混合物
在室温搅拌过夜。将过量水到入该反应溶液中，然后用盐酸使该混合物
呈酸性并用乙酸乙酯萃取。有机层用水和饱和盐水洗涤，经无水硫酸镁
干燥并浓缩。如此获得的粗产物经硅胶柱色谱(0-5％甲醇/二氯甲烷)
纯化，得到1.32g(产率59％)的4-氯-2-{[(3-羟基苯磺酰氨基)羰基]
氨基}苯甲酸甲酯。性质：无色非晶形物，PMR(δppm，DMSO-d₆)：
3.91(3H，s)，7.02(1H，m)，7.09(1H，m)，7.34(1H，t)，
7.57(2H，m)，7.89(1H，d)，8.38(1H，d)，10.94(1H，s).
接下来，将如此获得的1.23g(3.2mmol)该化合物溶于20ml甲醇，
然后滴加10ml 2N氢氧化钠水溶液。将该反应溶液在室温下搅拌15分
钟，然后加入过量的水并用盐酸使该混合物呈酸性。然后搅拌，产生结
晶沉淀，然后过滤并干燥得到羧酸。将如此获得的产物溶于50ml四氢
呋喃中，在冰冷却下加入434mg(2.68mmol)CDI并将该混合物搅拌30
分钟。该反应溶液用乙酸乙酯稀释，用水和饱和盐水洗涤，经无色硫酸
镁干燥，然后浓缩得到粗产物。该粗产物经硅胶柱色谱(乙酸乙酯∶正己
烷＝1∶2)，得到230mg(2步产率为20％)标题化合物。性质：无色结晶，
熔点：＞200℃(分解)，PMR(δppm，DMSO-
d₆)：7.12(2H，s)，7.24(1H，d)，7.48(1H，t)，7.58(2H，
s)，7.85(1H，d)，10.28(1H，s)，11.63(1H，s).

制备实施例2：3-(2-氨基苯磺酰基)-7-氯-2，4(1H，3H)-喹唑啉二酮
(化合物2)的合成

以与制备实施例1相同的方式处理2.7g(15.7mmol)2-氨基苯磺
酰胺和4.8g(15.7mmol)4-氯-2-N-苯氧羰基邻氨基苯甲酸甲酯，得
到3.2g(3步产率为58％)的标题化合物。性质：无色结晶，熔点：＞200
℃(分解)，
PMR(δppm，DMSO-d₆)：6.46(2H，s)，6.65(1H，t)，6.81
(1H，d)，7.12(1H，s)，7.23(1H，d)，7.34(1H，t)，7.76
(1H，d)，7.86(1H，d).

制备实施例3：7-氯-3-(2-甲磺酰氨基苯磺酰基)-2，4(1H，3H)-喹唑
啉二酮(化合物3)的合成

将22mg(0.06mmol)化合物2溶于200μl1吡啶，滴加1.6μl(0.15
mmol)甲磺酰氯，然后将所得混合物在室温搅拌过夜。往该反应溶液中加
入过量水，该混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用1N盐酸水溶液和饱和盐
水洗涤，然后经无水硫酸镁干燥并浓缩，得到粗产物。该粗产物经乙醚
结晶，得到16mg(0.04mmol)标题化合物。性质：无色结晶，熔点：＞200
℃(分解)，PMR(δppm，DMSO-d₆)：3.61(3H，
s)，7.10(1H，d)，7.20(1H，d)，7.74(1H，d)，7.82-7.90
(4H，m)，8.34(1H，d)，11.70(1H，s).

制备实施例4：3-(4-氨基苯磺酰基)-7-氯-2，4(1H，3H)-喹唑啉二酮
(化合物4)的合成

以与制备实施例1相同的方式处理2.7g(15.7mmol)4-氨基苯磺
酰胺和4.8g(15.7mmol)4-氯-2-N-苯氧羰基邻氨基苯甲酸甲酯，得
到7.9g(产率94％)2-{[(4-氨基苯磺酰氨基)羰基]氨基}-4-氯苯甲酸
甲酯。性质：无色非晶形物，PMR(δ
ppm，DMSO-d₆)：3.59(3H，s)，5.37(2H，s)，6.45(2H，d)，
6.83(1H，dd)，7.41(2H，d)，7.81(1H，d)，8.66(1H，d)，
9.64(1H，s).

然后，以相同方式，由所得的7.9g(14.8mmol)磺酰脲产物，获得
4.3g(2步产率83％)的标题化合物。性质：无色结晶，熔点：＞200℃(分
解)，
PMR(δppm，DMSO-d₆)：6.39(2H，s)，6.63
(2H，d)，7.09(1H，s)，7.22(1H，d)，7.76(2H，d)，7.83
(1H，d)，11.51(1H，s).

制备实施例5：3-(3-羧甲基-苯磺酰基)-7-氯-2，4(1H，3H)-喹唑啉
二酮(化合物5)的合成

按照合成方法(A)，将3.27g(11.6mmol)3-烯丙氧羰基甲基苯磺
酰基异氰酸酯溶于100ml无水THF中，然后加入1.98g(11.5mmol)4-
氯邻氨基苯甲酸并将该混合物在室温搅拌2小时。该反应溶液用冰水冷
却后，加入1.87g(11.5mmol)CDI并将所得混合物在并冷却下搅拌30
分钟。将过量水加到反应溶液中，然后用乙酸乙酯萃取该混合物。将有
机层洗涤，干燥并用少量乙酸乙酯使其结晶，得到2.0g(产率40％)3-
(3-烯丙基氧羰基-苯磺酰基)-7-氯-2，4(1H，3H)-喹唑啉二酮。如此获得
的烯丙基产物溶于100ml甲酸-THF(1∶9)混合物中，加入700mg三苯基
膦。使反应器避光并保持在氮气氛下，然加入700mg四(三苯基膦)钯(O)
并将所得混合物在室温避光条件下搅拌过夜。将反应溶液真空浓缩，所
得固体用二氯甲烷洗涤，得到1.47g(产率81％)标题化合物。性质：无
色结晶，熔点：＞200℃(分解)，PMR(δ
ppm，DMSO-d₆)：3.76(2H，s)，7.13(1H，s)，7.24(1H，d)，
7.61-7.69(2H，m)，7.86(1H，d)，8.05(2H，s)，12.50(1H，
br).

制备实施例6：3-(4-羧甲基-苯磺酰基)-7-氯-2，4(1H，3H)-喹唑啉
二酮(化合物6)的合成

以与实施例5相同的方式处理1.10g(3.95mmol)4-烯丙氧羰基甲
基-苯磺酰基异氰酸酯和678mg(3.95mmol)4-氯邻氨基苯甲酸，获得
657mg(产率38％)3-(4-烯丙氧羰基苯磺酰基)-7-氯-2，4-(1H，3H)-喹
唑啉二酮。以相同方式处理538mg(1.24mmol)该化合物，得到342mg(产
率70％)的标题化合物。性质：无色结晶，熔点：＞200℃(分解)，
PMR(δppm，DMSO-
d₆)：3.75(2H，s)，7.13(1H，s)，7.23(1H，d)，7.61-7.69
(2H，m)，7.86(1H，d)，8.05(2H，s)，12.07(2H，br).

制备实施例7：(±)-2-{4-[(7-氯-2，4(1H，3H)-喹唑啉-3-基)磺酰基]
苯基}丁酸(化合物7)的合成

以与制备实施例1相同的方式处理1.02g(3.41mmol)(±)-2-4-
氨基磺酰基苯基)丁酸叔丁基酯和1.04g(3.41mmol)4-氯-2-N-苯氧
羰基邻氨基苯甲酸甲酯，得到1.46g(产率84％)1-[({4-[1-(叔丁氧羰
基)丙基]苯磺酰氨基}羰基)氨基]-4-氯苯甲酸甲酯。性质：无色非晶形
物，PMR
(δppm，CDCl₃)：0.89(3H，t)，1.38(9H，s)，1.69-1.76
(1H，m)，2.03-2.10(1H，m)，3.42(1H，t)，3.94(3H，s)，
7.04(1H，d)，7.47(2H，d)，7.93(1H，d)，8.01(2H，d)，
8.45(1H，br)，11.04(1H，br).

接下来，用4.3ml(8.6mmol)2N氢氧化钠水溶液类似地形成1.43g
羧酸，再用463mg(2.86mmol)CDI得到970mg(2步产率71％)(±)-
2-{4-[(7-氯-2，4(1H，3H)-喹唑啉-3-基)磺酰基]苯}丁酸叔丁基酯。

将如此获得的叔丁基酯溶于5ml二氯甲烷中，然后加入5ml三氟
乙酸并将所得混合物在室温搅拌40分钟。将该反应溶液真空浓缩并将所
得粗产物用少量乙醚洗涤，得到820mg(产率96％)的标题化合物。性质：
无色结晶，熔点：＞200℃(分解)，PMR(δppm，DMSO-
d₆)：0.84(3H，t)，1.67-1.75(1H，m)，1.98-2.05(1H，m)，
3.62(1H，t)，7.11(1H，s)，7.24(1H，d)，7.61(2H，d)，
7.86(1H，d)，8.13(2H，d)，11.62(1H，s).

制备实施例8：3-(3-氨基-4-氯苯磺酰基)-7-氯-2，4(1H，3H)-喹唑
啉二酮(化合物8)的合成

以与制备实施例1相同的方式处理1.0g(2.93mmol)3-苄氧羰基
氨基-4-氯苯磺酰胺和1.18g(2.93mmol)4-氯-2-N-苯氧羰基邻氨基
苯甲酸苄基酯，得到1.43g(产率78％)2-{[(3-苄氧羰基氨基-4-氯苯
磺酰氨基)羰基]氨基}-4-氯苯甲酸苄基酯。性质：无色非晶形物，PMR(δ
ppm，DMSO-d₆)：5.19(2H，s)，5.36(2H，s)，7.21(1H，dd)，
7.34-7.48(10H，m)，7.72-7.76(2H，m)，7.97(1H，d)，8.25
(1H，d)，8.30(1H，d)，9.53(1H，s)，10.30(1H，s).

将1.38g(2.20mmol)该化合物溶于50ml THF中，然后加入200mg
钯-碳(10％)并将该混合物在氢气流下搅拌2小时。将反应混合物滤过硅
藻土以除去钯-碳，然后真空浓缩滤液，得到羧酸。将如此获得的产物悬
浮于50ml THF中，然后在冰冷却下加入356mg(2.20mmol)CDI并以
与制备实施例1相同的方式处理该所得混合物，获得560mg(2步产率66％)
的标题化合物。性质：无色结晶，熔点：＞200℃(分解)，
PMR(δppm，DMSO-d₆)：6.00(2H，s)，7.12(1H，s)，7.26
(2H，t)，7.48(1H，d)，7.66(1H，s)，7.86(1H，d)，11.76
(1H，br).

制备实施例9：3-(4-氨基-3，5-二氯苯磺酰基)-7-氯-2，4(1H，3H)-
喹唑啉二酮(化合物9)的合成

以与制备实施例1相同的方式处理1.06g(4.40mmol)4-氨基-3，5-
二氯苯磺酰胺和1.34g(4.40mmol)4-氯-2-N-苯氧羰基邻氨基苯甲酸
甲酯，得到905mg(产率44％)2-{[(4-氨基-3，5-二氯苯磺酰氨基)羰基]
氨基}-4-氯苯甲酸甲酯。性质：无色非晶形物，PMR(δ
ppm，DMSO-d₆)：3.87(3H，s)，6.59(2H，br)，7.22(1H，
dd)，7.72(2H，s)，7.93(1H，d)，8.24(1H，d)，10.17(1H，
s).

然后，以相同方式处理905mg(2.0mmol)所得磺酰脲产物，得到660
mg(2步产率82％)的标题化合物。性质：无色结晶，熔点：＞200℃(分
解)，PMR(δppm，DMSO-d₆)：6.80(2H，s)，7.12
(1H，s)，7.24(1H，d)，7.86(1H，d)，7.92(2H，s)，11.63
(1H，br).

制备实施例10：3-(3-氨基-4-甲基苯磺酰基)-7-氯-2，4(1H，3H)-喹
唑啉二酮(化合物10)的合成

以与制备实施例8相同的方式处理960mg(3.00mmol)3-苄氧羰基
氨基-4-甲基苯磺酰胺和1.14g(3.00mmol)4-氯-2-N-苯氧羰基邻氨
基苯甲酸苄基酯，得到1.14g(产率62％)2-{[(3-苄氧羰基氨基-4-甲
基苯磺酰氨基)羰基]氨基}-4-氯苯甲酸苄基酯。性质：无色非晶形物，PMR
(δppm，DMSO-d₆)：2.30(3H，s)，5.17(2H，s)，5.36(2H，s)，
7.20(1H，dd)，7.33-7.48(11H，m)，7.63(1H，d)，7.97
(1H，d)，8.11(1H，s)，8.25(1H，s)，9.27(1H，s)，10.30
(1H，s)，12.20(1H，br).

然后，以相同方式处理1.14g(1.87mmol)所得磺酰脲产物，得到
190mg(2步产率27％)的标题化合物。性质：无色结晶，熔点：＞200℃
(分解)，              PMR(δppm，DMSO-d₆)：2.12(3H，s)，5.47
(2H，s)，7.12(1H，s)，7.16-7.25(3H，m)，7.38(1H，s)，
7.85(1H，d)，11.58(1H，s).

制备实施例11：3-[(3-羧甲基氨基苯基)磺酰基]-7-氯-2，4(1H，3H)-
喹唑啉二酮(化合物11)的合成

以与制备实施例7相同的方式处理1.62g(5.65mmol)3-叔丁氧羰
基甲氨基苯磺酰胺和1.73g(5.65mmol)4-氯-2-N-苯氧羰基邻氨基苯
甲酸甲酯，得到209mg(4步产率9％)标题化合物。性质：无色结晶，熔
点：＞200℃(分解)，       PMR(δppm，DMSO-d₆)：3.86(2H，
s)，6.88(1H，s)，7.12(1H，s)，7.24(1H，d)，7.30-7.38
(3H，m)，7.86(1H，d)，11.61(1H，br).

制备实施例12：3-(3-氨基苯磺酰基)-7-氯-2，4(1H，3H)-喹唑啉二
酮(化合物12)的合成

以与制备实施例7相同的方式处理3.5g(12.9mmol)3-叔丁氧羰
基氨基苯磺酰胺和3.9g(12.8mmol)4-氯-2-N-苯氧羰基邻氨基苯甲
酸甲酯，得到2.2g(4步产率49％)标题化合物。性质：无色结晶，熔点：
＞200℃(分解)，PMR(δppm，DMSO-d₆)：5.72(2H，s)，6.87
(1H，d)，7.12(1H，s)，7.23-7.27(2H，m)，7.33(1H，s)，
7.86(1H，d)，11.61(1H，s).

制备实施例13：2-{3-[(7-氯-2，4(1H，3H)-喹唑啉二酮-3-基)磺酰
基]苯氨基羰基}丙酸(化合物13)的合成

将100mg(0.28mmol)化合物12溶于5ml THF中，加入100mg(1.0
mmol)琥珀酸酐并将所得混合物加热回流3小时。将反应溶液真空浓缩，
如此获得的粗产物用乙酸乙酯-乙醚结晶，得到120mg(产率96％)标题
化合物。性质：无色结晶，熔点：187-188℃，
PMR(δppm，DMSO-d₆)：2.54(2H，d)，2.59(2H，d)，7.12
(1H，s)，7.24(1H，d)，7.59(1H，t)，7.80(1H，d)，7.86
(1H，d)，7.96(1H，d)，8.41(1H，s)，10.40(1H，s)，11.63
(1H，br)，12.10(1H，br).

制备实施例14：3-{3-[(7-氯-2，4(1H，3H)-喹唑啉二酮-3-基)磺酰
基]苯基}丙烯酸(化合物14)的合成

以与制备实施例7相同的方式处理1.54g(5.44mmol)3-(3-氨基
磺酰基)苯基丙烯酸叔丁基酯和1.66g(5.44mmol)4-氯-2-N-苯氧羰
基邻氨基苯甲酸甲酯，得到2.18g(产率81％)2-({[3-(3-叔丁氧基-3-
氧代-1-丙烯基)苯磺酰氨基]羰基}氨基)-4-氯苯甲酸甲酯。性质：无色
非晶形物，PMR(δ
ppm，CDCl₃)：1.53(9H，s)，3.95(3H，s)，6.46(1H，d)，
7.05(1H，d)，7.55(1H，m)，7.57(1H，d)，7.72(1H，m)，
7.93(1H，m)，8.04(1H，m)，8.27(1H，s)，8.46(1H，d)，
11.05(1H，br).

然后，以相同方式处理2.18g(4.4mmol)所得磺酰脲产物，得
到698mg(3步产率37％)标题化合物。性质：无色结晶，熔点：＞200℃
(分解)，          PMR(δppm，DMSO-d₆)：6.65(1H，d)，7.12
(1H，s)，7.25(1H，d)，7.69(1H，d)，7.72(1H，t)，7.87
(1H，d)，8.12(2H，q)，8.37(1H，s)，11.64(1H，s).

制备实施例15：4-[(7-氯-2，4(1H，3H)-喹唑啉二酮-3-基)磺酰基]
水杨酸(化合物15)的合成

以与制备实施例7相同的方式处理1.0g(3.66mmol)4-叔丁氧羰
基-3-羟基苯磺酰胺和1.12g(3.66mmol)4-氯-2-N-苯氧羰基邻氨基
苯甲酸甲酯，得到1.79g(产率100％)2-([(4-叔丁氧羰基-3-羟基苯磺
酰氨基)羰基]氨基}-4-氯苯甲酸甲酯。性质：无色非晶形物，PMR(δ
ppm，DMSO-d₆)：1.57(9H，s)，3.87(3H，s)，7.14(1H，d)，
7.40-7.45(2H，m)，7.85(1H，d)，7.92(1H，d)，8.32(1H，
d)，10.13(1H，s)，10.82(1H，s).

然后，以相同方式处理1.78g(3.66mmol)所得磺酰脲产物，得到
370mg(3步产率25％)的标题化合物。性质：无色结晶，熔点：＞200℃
(分解)，        PMR(δppm，DMSO-d₆)：7.13(1H，s)，7.26
(1H，d)，7.69(1H，d)，7.87(1H，d)，8.01(1H，d)，11.67
(1H，s).

制备实施例16：4-[(7-氯-2，4(1H，3H)-喹唑啉二酮-3-基)磺酰基]水
杨酸一钠盐(化合物16)的合成

将50mg(0.13mmol)化合物15悬浮于约1ml THF中，然后滴加126
μl 1N氢氧化钠水溶液。证实该溶液达到均匀后，加入30ml水并将该混
合物冻干，定量地得到52mg非晶形标题化合物。性质：无色非晶形物，
PMR(δppm，CD₃OD)：7.11(1H，s)，
7.19(1H，d)，7.58(1H，d)，7.63(1H，s)，7.92(1H，d)，
8.03(1H，d).

制备实施例17：4-[(7-氯-2，4(1H，3H)-喹唑啉二酮-3-基)磺酰基]
邻氨基苯甲酸(化合物17)的合成

以与制备实施例8相同的方式处理2.84g(6.9mmol)3-苯氧羰基
氨基-4-叔丁氧羰基苯磺酰胺和2.67g(6.99mmol)4-氯-2-N-苯氧羰
基邻氨基苯甲酸苄基酯，得到3.74g(产率77％)2-{[(3-苯氧羰基氨基-
4-叔丁氧羰基苯磺酰氨基)羰基]氨基}-4-氯苯甲酸苄基酯。性质：无色
非晶形物，PMR(δ
ppm，DMSO-d₆)：1.54(9H，s)，5.19(2H，s)，5.34(2H，s)，
7.05(1H，m)，7.34-7.58(10H，m)，7.60(1H，d)，7.90(1H，
d)，7.98(1H，d)，8.50(1H，br)，8.62(1H，s)，10.00(1H，
br)，10.41(1H，s).

然后，以相同方式处理3.74g(5.39mmol)所得磺酰脲，得到690mg
(2步产率30％)的4-[(7-氯-2，4(1H，3H)-喹唑啉二酮-3-基)磺酰基]邻氨
基苯甲酸叔丁基酯，然后进行类似的脱丁基反应，得到503mg(产率84％)
标题化合物。性质：无色结晶，熔点：＞200℃(分解)，
PMR(δppm，DMSO-
d₆)：7.14(1H，s)，7.18(1H，d)，7.25(1H，d)，7.59(1H，
s)，7.87(1H，d)，7.89(1H，d)，11.62(1H，s).

制备实施例18：4-[(7-氯-2，4(1H，3H)-喹唑啉二酮-3-基)磺酰基]邻
氨基苯甲酸一钠盐(化合物18)的合成

将50mg(0.13mmol)化合物17悬浮于约1ml THF中，然后滴加126
μl 1N氢氧化钠水溶液。证实该溶液达到均匀后，加入30ml水并将该混
合物冻干，定量地得到52mg非晶形标题化合物。性质：无色非晶形物，
PMR(δppm，DMSO-d₆)：7.11-7.22(3H，
m)，7.37(1H，s)，7.83(1H，d)，7.91(1H，d).

制备实施例19：3-(4-羟基苯磺酰基)-7-氯-2，4(1H，3H)-喹唑啉二
酮(化合物19)的合成

以与制备实施例5相同的方式处理1.50g(7.03mmol)4-烯丙氧基
苯磺酰基异氰酸酯和1.2g(7.03mmol)4-氯邻氨基苯甲酸，得到1.5g
(53％)3-(4-烯丙氧基苯磺酰基)-7-氯-2，4(1H，3H)-喹唑啉二酮。类似地
处理500mg(1.27mmol)该产物，得到405mg(产率90％)的标题化合
物。性质：无色结晶，熔点：＞200℃(分解)，PMR(δ
ppm，DMSO-d₆)：6.98(2H，d)，7.11(1H，s)，7.23(1H，d)，
7.85(1H，d)，8.00(2H，d)，11.25(1H，br).

制备实施例20：4-[(2，4(1H，3H)-喹唑啉二酮-3-基)磺酰基]水杨酸
(化合物20)的合成

以与制备实施例17相同的方式处理618mg(2.26mmol)4-叔丁氧
羰基-3-羟基苯磺酰胺和613mg(2.26mmol)2-N-苯氧羰基邻氨基苯甲
酸甲酯，得到792mg(产率78％)2-{[(4-叔丁氧羰基-3-羟基苯磺酰氨
基)羰基]氨基}苯甲酸甲酯。性质：无色非晶形物，
PMR(δppm，CDCl₃)：1.60
(9H，s)，3.97(3H，s)，7.09(1H，t)，7.49-7.52(2H，m)，
7.65(1H，d)，7.90(1H，d)，8.01(1H，dd)，8.33(1H，d)，
10.98(1H，s)，11.18(1H，s).

然后，以相同方式处理790mg(1.75mmol)所得磺酰脲产物，得到
100mg(3步产率8％)的标题化合物。性质：无色结晶，熔点：＞200℃(分
解)，

            PMR(δppm，DMSO-d₆)：7.13(1H，d)，7.22
(1H，t)，7.63-7.69(3H，m)，7.87(1H，d)，8.01(1H，d)，
11.57(1H，s).

制备实施例21：5-[(7-氯-2，4(1H，3H)-喹唑啉二酮-3-基)磺酰基]
水杨酸(化合物21)的合成

以与制备实施例17相同的方式处理320mg(1.17mmol)3-叔丁氧
羰基-4-羟基苯磺酰胺和447mg(1.17mmol)4-氯-2-N-苯氧羰基邻氨
基苯甲酸苄基酯，得到611mg(产率93％)2-{[(3-叔丁氧羰基-4-羟基
苯磺酰氨基)羰基]氨基)-4-氯苯甲酸甲酯。性质：无色非晶形物，PMR(δ
ppm，CDCl₃)：1.62(9H，s)，5.35(2H，s)，7.01-7.05(2H，
m)，7.37-7.41(5H，m)，7.96(1H，d)，8.10(1H，dd)，8.46-
8.48(2H，m)，10.99(1H，s)，11.66(1H，s).

然后，以相同方式处理611mg(1.09mmol)所得磺酰脲产物，得到
114mg(3步产率33％)的标题化合物。性质：无色结晶，熔点：＞200℃
(分解)，         PMR(δppm，DMSO-d₆)：7.11(1H，s)，7.19
(1H，d)，7.24(1H，d)，7.86(1H，d)，8.20(1H，d)，8.56
(1H，s)，11.57(1H，s).

制备实施例22：3-(3-乙酰胺基-4-甲氧基苯磺酰基)-7-氯-
2，4(1H，3H)-喹唑啉二酮(化合物22)的合成

以与制备实施例8相同的方式处理500mg(2.19mmol)3-乙酰氨基
-4-甲氧基苯磺酰胺和836mg(2.19mmol)4-氯-2-N-苯氧羰基邻氨基
苯甲酸苄基酯，得到812mg(产率70％)2-{[(3-乙酰氨基-4-甲氧基苯
磺酰氨基)羰基]氨基}-4-氯苯甲酸苄基酯。性质：无色非晶形物，PMR(δ
ppm，DMSO-d₆)：2.12(3H，s)，3.93(3H，s)，5.3 6(2H，s)，
7.20(1H，d)，7.24(1H，d)，7.36-7.48(5H，m)，7.69(1H，
d)，7.96(1H，d)，8.24(1H，s)，8.67(1H，s)，9.39(1H，
s)，10.25(1H，s)，12.11(1H，br).

然后，以相同方式处理611mg(1.09mmol)所得磺酰脲产物，得到
250mg(2步产率39％)的标题化合物。性质：无色结晶，熔点：＞200℃
(分解)，         PMR(δppm，DMSO-d₆)：2.12(3H，s)，3.95
(3H，s)，7.12(1H，s)，7.23(1H，d)，7.30(1H，d)，7.85
(1H，d)，7.89(1H，d)，8.80(1H，s)，9.42(1H，s)，11.59
(1H，br).

制备实施例23：3-(3-氨基-4-甲氧基苯磺酰基)-7-氯-2，4(1H，3H)-
喹唑啉二酮(化合物23)的合成

以与制备实施例17相同的方式处理400mg(1.40mmol)3-叔丁氧
羰基氨基-4-甲氧基苯磺酰胺和533mg(1.40mmol)4-氯-2-N-苯氧羰
基邻氨基苯甲酸苄基酯，得到86mg(4步产率16％)的标题化合物。性质：
无色结晶，熔点：＞200℃(分解)，PMR(δppm，DMSO-d₆)：3.81(3H，
s)，7.26-7.37(5H，m)，7.77(1H，s)，7.90(1H，d)，7.94
(1H，d)，11.73(1H，s).

制备实施例24：7-氯-3-(4-甲氧基-3-甲基磺酰氨基苯磺酰基)-
2，4(1H，3H)-喹唑啉二酮(化合物24)的合成

以与制备实施例8相同的方式处理500mg(1.89mmol)4-甲氧基-3-
甲磺酰氨基苯磺酰胺和722mg(1.89mmol)4-氯-2-N-苯氧羰基邻氨基
苯甲酸苄基酯，得到888mg(产率83％)2-({[(4-甲氧基-3-甲磺酰氨基)
苯磺酰氨基]羰基}氨基)-4-氯苯甲酸苄基酯。性质：无色非晶形物，
PMR(δppm，DMSO-d₆)：
2.12(3H，s)，3.93(3H，s)，5.36(2H，s)，7.20(1H，d)，
7.24(1H，d)，7.36-7.48(5H，m)，7.69(1H，d)，7.96(1H，
d)，8.24(1H，s)，8.67(1H，s)，9.39(1H，s)，10.25(1H，
s)，12.11(1H，br).

然后，以相同方式处理880mg(1.55mmol)所得磺酰脲产物，得到
620mg(2步产率85％)的标题化合物。性质：无色结晶，熔点：＞200℃
(分解)，          PMR(δppm，DMSO-d₆)：3.04(3H，s)，3.94
(3H，s)，7.11(1H，s)，7.23(1H，d)，7.34(1H，d)，7.86
(1H，d)，7.99(1H，d)，8.10(1H，s).

制备实施例25：4-[(7-氯-2，4(1H，3H)-喹唑啉二酮-3-基)磺酰基]-
1-羟基萘-2-甲酸(化合物25)的合成

以与制备实施例17相同的方式处理323mg(1.00mmol)3-叔丁氧
羰基-4-羟基-1-萘磺酰胺和381mg(1.00mmol)4-氯-2-N-苯氧羰基邻
氨基苯甲酸苄基酯，得到447mg(产率73％)4-({[(2-苯氧羰基-5-氯苯
氨基)羰基]氨基}磺酰基)-1-羟基-2-萘甲酸叔丁基酯。性质：无色非晶
形物，            PMR(δppm，DMSO-d₆)：1.66(9H，s)，
5.34(3H，s)，6.98(1H，d)，7.35-7.48(5H，m)，7.66(1H，
m)，7.81(1H，m)，7.89(1H，d)，8.37(2H，m)，8.44(1H，
s)，8.71(1H，d)，10.02(1H，br)，12.52(1H，br).

然后，以相同方式处理445mg(0.72mmol)所得磺酰脲产物，得到
56mg(3步产率18％)的标题化合物。性质：无色结晶，熔点：＞200℃(分
解)，

            PMR(δppm，DMSO-d₆)：7.08(1H，s)，7.20
(1H，d)，7.63(1H，t)，7.77(1H，t)，7.84(1H，d)，8.42
(1H，d)，8.51(1H，d)，8.75(1H，s)，11.57(1H，s).

制备实施例26：5-[(7-氯-2，4(1 H，3H)-喹唑啉二酮-3-基)磺酰基]
邻氨基苯甲酸(化合物26)的合成

以与制备实施例17相同的方式处理834mg(2.05mmol)4-苯氧羰
基氨基-3-叔丁氧羰基苯磺酰胺和783mg(2.05mmol)4-氯-2-N-苯氧
羰基邻氨基苯甲酸苄基酯，得到1.18g(产率83％)2-{[(4-苄氧羰基-3-
叔丁氧羰基苯磺酰氨基)羰基]氨基}-4-氯苯甲酸苄基酯。性质：无色非
晶形物，PMR(δ
ppm，CDCl₃)：1.56(9H，s)，5.22(2H，s)，5.37(2H，s)，
7.04(1H，dd)，7.33-7.42(10H，m)，7.97(1H，d)，8.14
(1H，d)，8.45(1H，d)，8.60(1H，d)，8.65(1H，d)，11.01
(1H，s)，11.11(1H，s).

然后，以相同方式处理1.17g(1.69mmol)所得磺酰脲产物，得到
404mg(3步产率60％)的标题化合物。性质：无色结晶，熔点：＞200℃
(分解)，          PMR(δppm，DMSO-d₆)：6.89(1H，d)，7.11
(1H，s)，7.23(1H，d)，7.85(1H，d)，7.98(1H，d)，8.51
(1H，s)，11.51(1H，s).

制备实施例27：4-[(7-甲氧基-2，4(1H，3H)-喹唑啉二酮-3-基)磺酰
基]邻氨基苯甲酸(化合物27)的合成

以与制备实施例17相同的方式处理500mg(1.23mmol)3-苄氧羰
基氨基-4-叔丁氧羰基苯磺酰胺和460mg(1.22mmol)4-甲氧基-2-N-
苯氧羰基邻氨基苯甲酸苄基酯，得到15mg(4步产率3.1％)标题化合物。
性质：无色结晶，熔点：＞200℃(分解)，       PMR(δppm，DMSO-
d₆)：3.82(3H，s)，6.58(1H，s)，6.80(1H，d)，7.16(1H，
d)，7.56(1H，s)，7.80(1H，d)，7.90(1H，d)，11.49(1H，
s).  

制备实施例28：(±)-7-[(7-氯-2，4(1H，3H)-喹唑啉二酮-3-基)磺酰
基]-2-氧代-1H，3H-喹啉-3-甲酸(化合物28)的合成

以与制备实施例17相同的方式处理400mg(1.23mmol)(±)-3-叔
丁氧羰基-2-氧代-1H，3H-喹啉-7-磺酰胺和468mg(1.23mmol)4-氯-
2-N-苯氧羰基邻氨基苯甲酸苄基酯，得到649mg(产率86％)8-({[(2-
苄氧羰基-5-氯苯氨基)羰基]氨基}磺酰基)-2-氧代-1，2，3，4-四氢-3-喹
啉甲酸叔丁基酯。性质：无色非晶形物，PMR(δppm，CDCl₃)：1.32
(9H，s)，3.18-3.30(2H，m)，3.54(1H，m)，5.35(2H，s)，
6.85(1H，m)，7.00(1H，m)，7.35-7.39(5H，m)，7.87-7.96
(3H，m)，8.47(1H，m)，8.78(1H，br)，10.92(1H，br).

然后，以相同方式处理640mg(1.04mmol)所得磺酰脲产物，得到
258mg(3步产率55％)的标题化合物。性质：无色结晶，熔点：＞200℃
(分解)，        PMR(δppm，DMSO-d₆)：3.23-3.31(2H，m)，
3.59(1H，t)，7.07(1H，d)，7.12(1H，s)，7.25(1H，d)，
7.86(1H，d)，7.96(1H，d)，7.98(1H，d)，10.84(1H，s)，
11.60(1H，s).

制备实施例29：(±)-6-[(7-氯-2，4(1H，3H)-喹唑啉二酮-3-基)磺酰
基]-3-氧代-1，4-苯并噁嗪-2-甲酸(化合物29)的合成

以与制备实施例17相同的方式处理300mg(0.91mmol)(±)-2-叔
丁氧羰基-3-氧代-1，4-苯并噁嗪-6-磺酰胺和349mg(0.91mmol)4-氯
-2-N-苯氧羰基邻氨基苯甲酸苄基酯，得到417mg(产率74％)5-({[(2-
苄氧羰基-5-氯苯氨基)羰基]氨基}磺酰基)-3-氧代-3，4-二氢-2H-1，4-苯
并噁嗪-2-甲酸叔丁基酯。性质：无色非晶形物，PMR(δppm，DMSO-d₆)：
1.29(9H，s)，5.37(2H，s)，5.42(2H，s)，7.19-7.26(2H，
m)，7.37-7.57(7H，m)，7.97(1H，d)，8.25(1H，d)，10.27
(1H，s)，11.25(1H，s)，12.22(1H，br).

然后，以相同方式处理417mg(0.68mmol)所得磺酰脲产物，得到
100mg(3步产率32％)的标题化合物。性质：无色结晶，熔点：＞200℃
(分解)，
PMR(δppm，DMSO-d₆)：5.47(1H，s)，7.11
(1H，s)，7.24(1H，d)，7.29(1H，d)，7.76(1H，s)，7.78
(1H，d)，7.86(1H，d)，11.25(1H，s)，11.62(1H，s).

制备实施例30：4-[(7-羟基-2，4(1H，3H)-喹唑啉二酮-3-基)磺酰基]
邻氨基苯甲酸(化合物30)的合成

以与制备实施例17相同的方式处理620mg(1.53mmol)3-苄氧羰
基氨基-4-叔丁氧羰基苯磺酰胺和550mg(1.51mmol)4-羟基-2-N-苯
氧羰基邻氨基苯甲酸苄基酯，得到25mg(4步产率4％)标题化合物。性
质：无色结晶，熔点：＞200℃(分解)，
PMR(δppm，DMSO-d₆)：6.48(1H，
s)，6.61(1H，d)，7.14(1H，d)，7.51(1H，s)，7.70(1H，
d)，7.90(1H，d)，10.80(1H，s)，11.39(1H，s).

制备实施例31：4-[(7-氯-2，4(1H，3H)-喹唑啉二酮-3-基)磺酰基]-
2-N-丙酰基邻氨基苯甲酸(化合物31)的合成

将840mg(1.86mmol)化合物17溶于8ml 1，4-二噁烷中，加入240
μl(2.79mmol)丙酰氯，然后将所得混合物在60℃下搅拌过夜。往该反
应溶液中加入过量水并用乙酸乙酯萃取该混合物。将如此得到的有机层
洗涤，干燥并浓缩，得到粗产物4-[(7-氯-2，4(1H，3H)-喹唑啉二酮-3-
基)磺酰基]-2-N-丙酰基邻氨基苯甲酸叔丁基酯。将所得该粗产物在室温
下在3ml三氟乙酸中搅拌1小时，然后真空浓缩该反应溶液，得到粗产
物。该产物经乙醚洗涤，得到400mg(2步产率48％)的标题化合物。性
质：无色结晶，熔点：＞200℃(分解)，PMR(δppm，DMSO-
d₆)：1.10(3H，t)，2.45(2H，dd)，7.11(1H，s)，7.24(1H，
d)，7.85(1H，d)，7.88(1H，d)，8.17(1H，d)，9.18(1H，
s)，11.07(1H，s)，11.63(1H，s).

制备实施例32：4-[(6-氯-2，4(1H，3H)-喹唑啉二酮-3-基)磺酰基]
邻氨基苯甲酸(化合物32)的合成

以与制备实施例17相同的方式处理300mg(0.74mmol)3-苄氧羰
基氨基-4-叔丁氧羰基苯磺酰胺和310mg(0.81mmol)5-氯-2-N-苯氧
羰基邻氨基苯甲酸苄基酯，得到75mg(4步产率26％)标题化合物。性质：
无色结晶，熔点：＞200℃(分解)，PMR(δppm，DMSO-d₆)：7.13-7.20
(2H，m)，7.56(1H，s)，7.72(1H，d)，7.82(1H，s)，7.90  
(1H，d)，11.68(1H，s).

制备实施例33：4-[(7-氯-2，4(1H，3H)-喹唑啉二酮-3-基)磺酰基]-
2-N-甲磺酰基邻氨基苯甲酸(化合物33)的合成

以与制备实施例3相同的方式处理200mg(0.44mmol)化合物17，
得到81mg 4-[(7-氯-2，4(1H，3H)-喹唑啉二酮-3-基)磺酰基]-2-N-甲磺
酰基邻氨基苯甲酸叔丁基酯。对该产物进行相同的脱丁基反应，得到53mg
(2步产率25％)的标题化合物。性质：无色结晶，熔点：＞200℃(分解)，
PMR(δppm，DMSO-d₆)：3.24(3H，
s)，7.11(1H，s)，7.25(1H，d)，7.85-7.91(2H，m)，8.23
(1H，d)，8.39(1H，s)，11.05(1H，br)，11.70(1H，s).

制备实施例34：3-(3-氨基苯磺酰基)-7-氯-2，4(1H，3H)-喹唑啉二
酮甲磺酸盐(化合物34)的合成

将2.15g(6.10mmol)化合物12溶于65ml THF中并滴加0.4ml
甲磺酸。往该溶液中，加入200ml乙醚并将过滤所得沉淀，得到2.59 g(产
率95％)的标题化合物。性质：无色非晶形物，
PMR(δppm，DMSO-d₆)：2.35(3H，s)，
6.98(1H，d)，7.12(1H，m)，7.25(1H，m)，7.34(2H，s)，
7.43(1H，m)，7.86(1H，s)，11.64(1H，s).

实施例1：胃促胰酶抑制活性的测定

按照Urata等的方法(J.Biol.Chem.，1990，265，22348)纯化
人心脏胃促胰酶。如下测定本发明喹唑啉衍生物对胃促胰酶的抑制活性。
将纯化的酶用0.01M Tris-盐酸缓冲液(pH＝7.5)、1M氯化钠和0.01％
Triton X-100稀释到适宜浓度得到酶溶液。将Suc-Ala-Ala-Pro-Phe-
MCA(Peptide Institute Inc.)溶于10mM二甲亚砜(下文称DMSO)中
并用含1M氯化钠和0.01％Triton X-100的0.1M Tris-盐酸缓冲液
(pH＝7.5)稀释20倍，得到底物溶液。

将5μl试验样品的DMSO溶液加到75μl酶溶液中并在30℃预先保
温10分钟。然后，将20μl底物溶液加到该试验样品-酶混合物中并于30
℃保温。10分钟后，加入50μl 30％的乙酸以使酶反应停止。用荧光光
度计定量测定产生的AMC的量。同时，用5μl DMSO代替试验样品溶液
并同时进行反应，作为对照。根据对照值计算对人胃促胰酶的抑制活性，
然后确定抑制百分数和50％抑制浓度(IC₅₀)表示。

表I显示了代表性化合物的IC₅₀值。

              表1

实施例2：胃促胰酶抑制剂对小鼠中胃促胰酶活性的影响

将胃促胰酶抑制剂(化合物18)腹膜内使用于ICR小鼠(8周龄，n＝3)。
12小时和24小时后，从小鼠的小肠、舌、背部皮肤、前腿和后腿提取胃
促胰酶并测定其酶活性。用含2M KCl和0.1％聚亚乙基辛基苯基醚(Triton
X-100)的10mM从组织提取胃促胰酶。通过测量合成底物Suc-Phe-
Pro-Phe-对硝基苯胺的水解率测定胃促胰酶活性。对照组中，在24小时
中施用盐水。

结果

与施用盐水组相比，施用化合物18对小肠中胃促胰酶活性的抑制率
约为80％，而化合物18对舌、背部皮肤和腿中的抑制率为约50％(见
附图1)。这些结果表明即使在体内，化合物18也具有抑制胃促胰酶的作
用。

实施例3：测定Tsk小鼠-硬皮病模型中胃促胰酶的活性

测定5、10和20周龄的Tsk小鼠皮肤中的胶原含量、皮下纤维层厚
度、肥大细胞数量、胃促胰酶活性和胃促胰酶mRNA，并将它们与对照小
鼠(pallid小鼠)进行比较(n＝6)(北美风湿病临床(Rheum.Dis.Clin.
North Am.)16，153，1990)。用HPLC测量羟基脯氨酸-胶原指示剂，
测定胶原含量；用成像分析系统测量纤维层的面积，然后以偶氮卡红染
色进行学组织分析来测定纤维层厚度。通过计数用甲苯胺蓝染色的颗粒
的细胞数量计算肥大细胞的密度。按照先前已知的方法(Arch.Dermatol.
Res.290，553，1998)，从皮肤中提取胃促胰酶，并如实施例2所述测
定活性。用竞争性RT-PCR方法(生物技术(Biotechniques)21，268，
1996)，仅测定10周龄组皮肤胃促胰酶(MMCP-4)的mRNA。

结果

5周龄Tsk小鼠中皮肤羟基脯氨酸的量与对照pallid小鼠大致相同，
但在10周和20周龄组，该含量显著高于对照小鼠(附图2)(学生t检
验)。组织学分析揭示，将5周龄组与对照组相比，Tsk小鼠的纤维层明
显肥厚，并且这种差异随着年龄的增加而增大(附图3)。在5-20周龄，
Tsk小鼠皮肤中肥大细胞的密度以及皮肤胃促胰酶活性均高于对照小鼠
(附图4和5)。此外，测定10周龄小鼠胃促胰酶MMCP-4的mRNA。结果，
MMCP-4的mRNA量明显高于对照小鼠(附图6)。

实施例4：胃促胰酶抑制剂对Tsk小鼠-硬皮病模型的作用

给13周龄Tsk小鼠(n＝5)以50mg/kg/天的剂量腹膜内施用胃促胰
酶抑制剂(化合物18)，每日一次，施用2周。最后一次施用后5小时，
测定皮下纤维层肥厚的程度和皮肤胃促胰酶活性并将其与施用盐水的组
相比。以与实施例3相同的方式测量这些参数。

结果

病理组织学分析揭示，施用化合物18的Tsk小鼠皮下纤维层厚度约
为施用盐水组的60％(附图7)。另一方面，施用化合物18的组的胃促
胰酶活性为施用盐水组的57％(附图8)。这些结果表明胃促胰酶抑制剂
使各种纤维化疾病中结缔组织的异常累积正常化，因此可用于预防或治
疗纤维生成。

实施例5：博来霉素诱发的肺纤维变性模型中肺部羟基脯氨酸含量的
变化

通过在麻醉下，对10周龄雄性ICR小鼠(Charles River Japan)
气管内施用博来霉素(Nippon Kayaku)诱发肺纤维变性(n＝10)。即，
将博来霉素(0.04mg或0.08mg)悬浮于50μl盐水中并用100μl注
射器(Hamilton Co.制造)施用于呼吸道中。施用博来霉素两周后，切
取肺部并按照先前描述的方法(Anal.Biochem.19，249，1967)分析
羟基脯氨酸-组织胶原的指示剂。此外，羟基脯氨酸的量以每个肺中的
量表示。另外，以类似方式施用盐水代替博来霉素的小鼠作为对照组
(n＝10)。

结果

博来霉素的施用以剂量依赖方式增加肺部中羟基脯氨酸的含量(附
图9)。在0.04mg/小鼠和0.08mg/小鼠的剂量下，与盐水组相比的羟基
脯氨酸含量分别为1.15倍和1.25倍(p分别＜0.05和＜0.01，Dunnett
检验)。该结果表明气管内施用博来霉素诱发肺纤维变性。在下列试验中，
博来霉素的剂量为0.08mg。

实施例6：博来霉素诱发的肺纤维变性中肺部胃促胰酶活性的变化

按照实施例5中描述的方法，向小鼠呼吸道施用0.08mg博来霉素
诱发肺纤维变性(n＝3)。施用后2周切取肺，并如实施例3中描述的方
法测定胃促胰酶活性。注意，以类似施用盐水代替博来霉素的小鼠作为
对照组(n＝3)。

结果

施用博来霉素小鼠的肺胃促胰酶活性显著地高于施用盐水的小鼠(附
图10)。施用博来霉素组的活性是施用盐水组的约4.5倍(p＜0.05，学生
t检验)。在肺纤维变性模型中胃促胰酶活性增高的上述发现表明胃促胰
酶与肺纤维变性的发病机理有关。

实施例7：胃促胰酶抑制剂在博来霉素诱发的肺纤维变性模型中的作
用

按照实施例5中描述的方法诱发肺纤维变性(n＝10)，为研究胃促胰
酶(化合物34)对肺纤维变性的作用，采用与实施例5相同的方法分析
肺组织中羟基脯氨酸的量。另外，将胃促胰酶抑制剂悬浮于含0.5％羟丙
基纤维素的盐水(HPC/盐水)中并在施用博来霉素后立即开始以10mg/kg
或50mg/kg剂量腹膜内施用，每天一次，每周施用五天，共施用2周。
此外，同样施用博来霉素，但用HPC/盐水代替化合物34的组作为对照组。

结果

50mg/kg剂量的胃促胰酶抑制剂(化合物34)明显抑制由于施用博
来霉素引发的肺中羟基脯氨酸量的增高(p＜0.05，Dunnett检验)。该抑
制率为约46％(附图11)。化合物34在10mg/kg剂量下对该模型几乎
没有作用。

总之，为阐明胃促胰酶抑制剂对各类纤维变性的作用，用硬皮病(皮
肤纤维变性)和肺纤维变性模型进行研究。结果表明与对照小鼠相比，Tsk
小鼠中的肥大细胞数量和胃促胰酶活性及其mRNA随着皮肤纤维层增厚而
增高(实施例3)。施用胃促胰酶抑制剂化合物18抑制胃促胰酶活性并且
显著抑制皮肤纤维层的增厚(实施例4)。此外，在博来霉素性肺纤维变
性模型中，作为肺纤维变性标志的肺中羟基脯氨酸量(实施例5)和肺中
胃促胰酶活性(实施例6)都增高了。施用胃促胰酶抑制剂化合物34抑
制羟基脯氨酸量的增高(实施例7)。这些结果表明胃促胰酶抑制剂缓解
细胞外基质代谢障碍，可用于预防或治疗各类纤维变性，包括硬皮病和
肺纤维变性。

制剂实施例1：片剂的制备

将100.0g化合物1与22.5g微晶纤维素和2.5g硬脂酸镁混合，
然后用直接压片机压片，制备直径为9mm的含200mg化合物1的片剂，
每片重250mg。

制剂实施例2：颗粒剂的制备

将30g化合物1与265g乳糖和5g硬脂酸镁混合。将该混合物压
模后粉碎，制粒并过筛得到10％的20-50目颗粒。

制剂实施例3：栓剂的制备

将Vitepsol H-15(Dynamite Nobel Co.)温热融化。往其中加入化
合物1使其达到12.5mg/ml的浓度。将其均匀混合后，加到2ml直肠
栓剂模型中并使其冷却，得到含25mg化合物1的直肠栓剂。