芳基甲基-羰基氨基-噻唑衍生物及其作为抗肿瘤剂的用途 发明背景发明领域：
本发明涉及芳基甲基-羰基氨基噻唑衍生物，更具体地讲，本发明涉及2-(芳基甲基-羰基氨基)-1，3-噻唑衍生物、其制备方法、含有该化合物的药物组合物以及该化合物作为治疗剂、特别是在治疗癌症和细胞增殖性疾病中的用途。背景技术
许多细胞毒药物，例如氟尿嘧啶(5-FU)、阿霉素和喜树碱，可以损伤DNA或影响细胞代谢途径，从而在许多情况下引起对细胞周期的间接的阻断。因此，由于对正常细胞以及肿瘤细胞均会产生不可逆的损伤，这些药物会引起明显的毒性和副作用。
因此，需要能够作为高度特异性的抗肿瘤剂而选择性地引起肿瘤细胞生长停止和编程性细胞死亡的、与目前可以采用的药物效力相当但毒性降低了的化合物。
众所周知，细胞周期的进程受一系列关卡控制点(也可以称其为限制点)的控制，这些限制点受一族称为细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶(cdk)的酶的控制。而cdk本身又在许多水平(例如与细胞周期蛋白的结合)上受到控制。
不同细胞周期蛋白/cdk复合物的协调地激活和失活是正常细胞周期进程所必需的。关键性的G1-S和G2-M转变均受到不同细胞周期蛋白/cdk活性的激活的控制。在G1中，细胞周期蛋白D/cdk4和细胞周期蛋白E/cdk2被认为可以调节S-期的开始。经过S-期的进程需要细胞周期蛋白A/cdk2的活性，而细胞周期蛋白A/cdc2(cdk1)的激活需要细胞周期蛋白B/cdc2来使分裂中期开始。关于细胞周期蛋白和细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶的一般性文献可以参见，例如，Kevin R.Webster等，Exp.Opin.Invest.Drugs，1998，Vol.7(6)，865-887。
肿瘤细胞中地关卡控制点是有缺陷的，部分原因是由于cdk活性的失控所引起的。例如，在肿瘤细胞中观察到了细胞周期蛋白E和cdk表达的改变，并且证实了小鼠cdk抑制剂p27 KIP基因的缺失会引起更高的癌症发病率。
有越来越多的证据支持cdk是细胞周期进程的限速酶的观点，它因此代表了治疗性干预的分子靶点。具体地讲，对cdk/细胞周期蛋白激酶活性的直接抑制将有助于限制失控的肿瘤细胞增殖。
发明概述
本发明的目的是提供可用于治疗与改变的细胞依赖型激酶活性有关的细胞增殖性疾病的化合物。本发明的另一个目的是提供具有cdk/细胞周期蛋白激酶抑制活性的化合物。
本发明的另一个目的是提供可用作抗肿瘤剂但没有以上讨论的现有抗肿瘤药物所存在的缺点、包括毒性和副反应的化合物。
本发明人发现，2-氨基-1，3-噻唑衍生物具有cdk/细胞周期蛋白激酶抑制活性，因此可以用作抗肿瘤剂并且没有已知的抗肿瘤药物所存在的上述缺点、包括毒性和副反应。
更具体地讲，本发明的化合物可用于治疗各种癌症，包括但不仅限于：癌，例如膀胱癌、乳腺癌、结肠癌、肾癌、肝癌、肺癌，包括小细胞肺癌、食道癌、胆囊癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、宫颈癌、甲状腺癌、前列腺癌和皮肤癌，包含鳞状细胞癌；淋巴系的造血系统肿瘤，包括白血病、急性淋巴细胞白血病、急性淋巴母细胞白血病、B细胞淋巴瘤、T细胞淋巴瘤、Hodgkin淋巴瘤、非Hodgkin淋巴瘤、毛细胞淋巴瘤和Burkett淋巴瘤；骨髓系的造血系统肿瘤，包括急性和慢性骨髓性白血病、骨髓增生异常综合征和早幼粒细胞白血病；源于间质的肿瘤，包括纤维肉瘤和横纹肌肉瘤；中枢和外周神经系统的肿瘤，包括星形细胞瘤神经母细胞瘤、神经胶质瘤和神经鞘瘤；其它肿瘤，包括黑色素瘤、精原细胞瘤、畸胎瘤、骨肉瘤、着色性干皮病(xenoderomapigmentosum)、角化棘皮瘤(keratoctanthoma)、甲状腺滤泡癌和卡波济氏肉瘤。
由于cdk在调节细胞增殖中的重要作用，这些2-氨基-1，3-噻唑衍生物还可用于治疗各种细胞增殖性疾病，例如良性前列腺增生、家族性息肉状腺瘤病、神经纤维瘤病、牛皮癣、与动脉粥样硬化有关的血管平滑肌细胞增殖、肺纤维化、关节炎肾小球肾炎以及手术后的狭窄和再狭窄。
由于cdk5与微管相关蛋白的磷酸化有关(J.Biochem.117，741-749，1995)，本发明的化合物还可用于治疗早老性痴呆。
作为细胞编程性细胞死亡的调节剂，本发明的化合物还可用于治疗癌症、病毒感染、在HIV感染的个体中预防AIDS的出现、以及治疗自身免疫疾病和神经变性疾病。
本发明的化合物还可用于抑制肿瘤血管生成和转移。
本发明的化合物还可用作其它蛋白激酶例如蛋白激酶C、her2、rafl、MEK1、MAP激酶、EGF受体、PDGF受体、IGF受体、PI3激酶、weel激酶、Src、Abl的抑制剂，因此可以有效地治疗与这些蛋白激酶有关的疾病。
因此，本发明提供了治疗与改变的细胞依赖型激酶活性有关的细胞增殖性疾病的方法，该方法包括：向需要治疗的哺乳动物施用有效量的式(I)或(II)所示的2-氨基-1，3-噻唑衍生物或其可药用盐：
其中L是苯基或含有一个或多个选自氮、氧和硫的杂原子的5或6元芳香族杂环；
R是(i)卤原子、硝基或选自1-吡咯烷基、4-吗啉基、1-哌嗪基、N-烷基-1-哌嗪基、N-芳基-1-哌嗪基、N-芳基烷基-1-哌嗪基、1-哌啶基和氮杂双环[3.2.2]壬烷的基团；或
(ii)选择性地被一个或多个基团进一步取代的氨基，这些基团可以相同或不同，选自烷基、芳基、芳基烷基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、芳基烷基磺酰基、烷基羰基、芳基羰基和芳基烷基羰基，其中的烷基部分可以选择性地被一个或多个羟基或氨基进一步取代；或
(iii)选择性地被直链或支链C1-C6烷基取代的C3-C6环烷基；或
(iv)直链或支链的C1-C6烷基或芳基烷基，其选择性地被-个或多个选自下列的取代基取代：卤素、氰基、羧基、羟基、硝基、烷硫基、烷氧基、直链或支链的C1-C6烷基、芳硫基、芳氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、芳基烷基氨基、羟基氨基羰基、烷氧基氨基羰基、C2-C4链烯基、C2-C4链炔基、C3-C6环烷基、烷基-C3-C6环烷基、烷基羰基、芳基羰基、芳基烷基羰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、芳基烷基磺酰基、氨基磺酰基、烷基氨基磺酰基、二烷基氨基磺酰基、烷基羰基氨基、芳基烷基羰基氨基、芳基氨基磺酰基、芳基烷基氨基磺酰基、芳基羰基氨基、烷基磺酰基氨基、芳基磺酰基氨基、芳基烷基磺酰基氨基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、氨基羰基、烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、二烷基氨基羰基、芳基烷基氨基羰基、1-吡咯烷基、4-吗啉基、1-哌嗪基、N-烷基-1-哌嗪基、N-芳基-1-哌嗪基、N-芳基烷基-1-哌嗪基、1-哌啶基和氮杂双环[3.2.2]壬烷；或
(v)选择性地被一个或多个选自下列的取代基取代的芳基：卤素、氰基、羧基、羟基、硝基、烷硫基、烷氧基、直链或支链的C1-C6烷基、芳硫基、芳氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、芳基烷基氨基、羟基氨基羰基、烷氧基氨基羰基、C2-C4链烯基、C2-C4链炔基、C3-C6环烷基、烷基C3-C6环烷基、烷基羰基、芳基羰基、芳基烷基羰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、芳基烷基磺酰基、氨基磺酰基、烷基氨基磺酰基、二烷基氨基磺酰基、烷基羰基氨基、芳基烷基羰基氨基、芳基氨基磺酰基、芳基烷基氨基磺酰基、芳基羰基氨基、烷基磺酰基氨基、芳基磺酰基氨基、芳基烷基磺酰基氨基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、氨基羰基、烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、二烷基氨基羰基、芳基烷基氨基羰基、1-吡咯烷基、4-吗啉基、1-哌嗪基、N-烷基-1-哌嗪基、N-芳基-1-哌嗪基、N-芳基烷基-1-哌嗪基、1-哌啶基和氮杂双环[3.2.2]壬烷；
R1是氢原子或选择性地被一个或多个羟基、烷氧基、氨基、烷基氨基或二烷基氨基取代的直链或支链的C1-C4烷基；
R2和R3可以相同或不同，是氢原子、环烷基、直链或支链的C1-C6烷基或芳基，这些基团可以选择性地按照以上关于R的描述被取代；或者
R2和R3与它们所连接的氮原子合在一起形成4-吗啉基、1-哌嗪基、N-烷基-哌嗪基、N-芳基-哌嗪基、N-芳基烷基-哌嗪基、哌啶基、吡咯烷基、2-氧代-1-吡咯烷基、咪唑基或3-氮杂双环[3.2.2]壬基环；
R4是羧基、全氟代烷基、C2-C4链炔基、2-氧代-吡咯烷基、哌啶基或直链或支链的C1-C6烷基或芳基，其选择性地按照以上关于R的描述被取代。
在本发明的一个优选实施方案中，细胞增殖性疾病选自癌症、早老性痴呆、病毒感染、自身免疫疾病和神经变性疾病。
可以进行治疗的具体癌症类型包括癌、鳞状细胞癌、骨髓或淋巴系的造血系统肿瘤、源于间质的肿瘤、中枢和外周神经系统的肿瘤、黑色素瘤、精原细胞瘤、畸胎瘤、骨肉瘤、着色性干皮病、keratoctanthoma、甲状腺滤泡癌和卡波济氏肉瘤。
在上述方法的另一个优选的实施方案中，细胞增殖性疾病选自良性前列腺增生、家族性息肉状腺瘤病、神经纤维瘤病、牛皮癣、与动脉粥样硬化有关的血管平滑肌细胞增殖、肺纤维化、关节炎肾小球肾炎以及手术后的狭窄和再狭窄。
此外，本发明的方法还可以抑制肿瘤血管生成和转移。本发明的方法还可以提供细胞周期抑制作用或cdk/细胞周期蛋白依赖型的抑制。
本发明还提供了式(I)或(II)所示的2-氨基-1，3-噻唑或其可药用盐：
其中L是苯基或含有一个或多个选自氮、氧和硫的杂原子的5或6元芳香族杂环；
R是(i)卤原子、硝基或选自1-吡咯烷基、4-吗啉基、1-哌嗪基、N-烷基-1-哌嗪基、N-芳基-1-哌嗪基、N-芳基烷基-1-哌嗪基、1-哌啶基和氮杂双环[3.2.2]壬烷的基团；或
(ii)选择性地被一个或多个基团选择性取代的氨基，这些基团可以相同或不同，选自烷基、芳基、芳基烷基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、芳基烷基磺酰基、烷基羰基、芳基羰基和芳基烷基羰基，其中的烷基部分可以选择性地被一个或多个羟基或氨基选择性取代；或
(iii)选择性地被直链或支链C1-C6烷基取代的C3-C6环烷基；或
(iv)直链或支链的C1-C6烷基或芳基烷基，其选择性地被一个或多个卤素、氰基、羧基、羟基、硝基、烷硫基、烷氧基、直链或支链的C1-C6烷基、芳硫基、芳氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、芳基烷基氨基、羟基氨基羰基、烷氧基氨基羰基、C2-C4链烯基、C2-C4链炔基、C3-C6环烷基、烷基-C3-C6环烷基、烷基羰基、芳基羰基、芳基烷基羰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、芳基烷基磺酰基、氨基磺酰基、烷基氨基磺酰基、芳基氨基磺酰基、二烷基氨基磺酰基、烷基羰基氨基、芳基烷基氨基磺酰基、芳基羰基氨基、芳基烷基羰基氨基、烷基磺酰基氨基、芳基磺酰基氨基、芳基烷基磺酰基氨基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、氨基羰基、烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、芳基烷基氨基羰基、1-吡咯烷基、4-吗啉基、1-哌嗪基、N-烷基-1-哌嗪基、N-芳基-1-哌嗪基、N-芳基烷基-1-哌嗪基、1-哌啶基或氮杂双环[3.2.2]壬烷取代基所取代；或
(v)选择性地被一个或多个选自下列的取代基取代的芳基：卤素、氰基、羧基、羟基、硝基、烷硫基、烷氧基、直链或支链的C1-C6烷基、芳硫基、芳氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、芳基烷基氨基、羟基氨基羰基、烷氧基氨基羰基、C2-C4链烯基、C2-C4链炔基、C3-C6环烷基、烷基C3-C6环烷基、烷基羰基、芳基羰基、芳基烷基羰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、芳基烷基磺酰基、氨基磺酰基、烷基氨基磺酰基、芳基氨基磺酰基、二烷基氨基磺酰基、烷基羰基氨基、芳基烷基氨基磺酰基、芳基羰基氨基、芳基烷基羰基氨基、烷基磺酰基氨基、芳基磺酰基氨基、芳基烷基磺酰基氨基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、氨基羰基、烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、芳基烷基氨基羰基、1-吡咯烷基、4-吗啉基、1-哌嗪基、N-烷基-1-哌嗪基、N-芳基-1-哌嗪基、N-芳基烷基-1-哌嗪基、1-哌啶基和氮杂双环[3.2.2]壬烷；
R1是氢原子或选择性地被一个或多个羟基、烷氧基、氨基、烷基氨基或二烷基氨基取代的直链或支链的C1-C4烷基；
R2和R3可以相同或不同，是氢原子、环烷基、直链或支链的C1-C6烷基或芳基，这些基团可以选择性地按照以上关于R的描述被取代；或者
R2和R3与它们所连接的氮原子合在一起形成4-吗啉基、1-哌嗪基、N-烷基-哌嗪基、N-芳基-哌嗪基、N-芳基烷基-哌嗪基、哌啶基、吡咯烷基、2-氧代-1-吡咯烷基、咪唑基或3-氮杂双环[3.2.2]壬基环；
R4是羧基、全氟代烷基、C2-C4链烯基、C2-C4链炔基、2-氧代-吡咯烷基、哌啶基或直链或支链的C1-C6烷基或芳基，其选择性地按照以上关于R的描述被取代。
本发明还提供了如下制备上述2-氨基-1，3-噻唑衍生物或其可药用盐的方法，该方法包括：
将式(III)所示的化合物：
与式(IV)所示的化合物反应：
其中R、L、R1、R2和R3如上所定义，
Z是羟基或适宜的离去基，生成式(I)所示的2-氨基-1，3-噻唑衍生物，其中R、L、R1、R2和R3如上所定义。
本发明还提供了如下制备上述2-氨基-1，3-噻唑衍生物或其可药用盐的方法，该方法包括：
将式(I)所示的化合物：与式(V)所示的化合物反应：
R4-COX (V)其中
R、R1、L和R4如上所定义，
X是羟基或适宜的离去基，例如氯或溴，生成式(II)所示的2-氨基-1，3-噻唑衍生物，其中R、L、R1和R4如上所定义。
本发明还提供了如下制备上述2-氨基-1，3-噻唑衍生物或其可药用盐的方法，该方法包括：
将其中R2和R3同时或者至少有一个是氢原子的式(I)所示的2-氨基-1，3-噻唑衍生物与式(VI)所示的化合物反应：
R’Y (VI)其中
R’具有R2或R3的含义但不是氢，
Y是适宜的离去基，
生成其中R2和R3同时或者至少有一个不是氢的式(I)的2-氨基-1，3-噻唑衍生物；然后，选择性地将式(I)或(II)所示的2-氨基-1，3-噻唑衍生物转化成式(I)或(II)所示的另一种2-氨基-1，3-噻唑衍生物和/或转化成它的盐。
本发明还提供了含有2-氨基-1，3-噻唑衍生物和至少一种可药用载体和/或稀释剂的药物组合物。
参照如下详细描述，可以更完整地理解本发明，并且可以更好地理解本发明所具有的许多优点。
发明详述
有许多2-氨基-1，3-噻唑化合物是已知的杀虫剂、合成中间体或治疗剂。其中包括作为抗过敏剂的2-苯甲酰氨基-1，3-噻唑化合物(EP-A-261503，Valeas S.P.A.)；作为蛋白激酶C抑制剂的5-烷基-2-苯基烷基羰基氨基-1，3-噻唑化合物(WO 98/04536，OtsukaPharmaceutical Co.)；作为抗肿瘤剂的5-芳硫基-2-酰基氨基-1，3-噻唑化合物(EP-A-412404，Fujisawa Pharm.Co.)；作为细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶抑制剂的4-氨基-2-羰基氨基-1，3-噻唑化合物(WO 99/21845，Agouron Pharmaceuticals Inc.)。
若无另外说明，本文中所用的术语卤原子是指氟、氯、溴或碘原子。
若无另外说明，本文中所用的术语烷基和烷氧基包括C1-C6烷基和C1-C6烷氧基。术语直链或支链的包括选自下列的C1-C6烷基或C1-C6烷氧基：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、正己基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基等。
同样，术语N-烷基-哌嗪基、烷基磺酰基、烷基羰基、烷硫基、二烷基氨基、烷氧基氨基、芳基烷基、烷基氨基、烷基-环烷基、烷氧基羰基、烷氧基羰基氨基等，包括其中的烷基和烷氧基部分表示C1-C6烷基或烷氧基的上述基团。
若无另外说明，术语环烷基是指C3-C6环烷基，例如环丙基、环丁基、环戊基和环己基，以及含有最多10个碳原子的环烷基和桥接的环烷基，例如金刚烷基。
术语芳基包括含有1至4个环部分的单环、二环或多环的碳环或杂环烃，其中至少有一个环是芳香族的，这些环可以是稠合的或彼此通过单键连接。因此，这些基团可以含有5至20个碳原子，优选6至20个碳原子。
术语杂环(包括杂芳族环)包括其中的一个或多个碳原子被一个或多个选自氮、氧和硫的原子代替了的5或6元饱和或不饱和的碳环。
优选的芳基的例子是苯基、1-萘基、2-萘基、二氢化茚基、茚基、联苯、苯并环烷基，例如二环[4.2.0]辛-1，3，5，-三烯、苯并杂环基，例如苯并间二氧杂环戊烯基、喹喔啉基、吲哚基、选择性地与苯稠合的吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、噁唑基、异噁唑基、四唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基等。
术语C2-C4链烯基或链炔基包括选自乙烯基、烯丙基、1-丙烯基、异丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、乙炔基、丙炔基、丁炔基等的基团。
术语全氟代烷基和烷氧基是指被一个以上的氟原子取代的C1-C4烷基或烷氧基，例如三氟甲基、2，2，2-三氟乙基、1，1，2，2，2-五氟乙基、三氟甲氧基等。
式(I)或(II)化合物的可药用盐包括与无机或有机酸例如硝酸、盐酸、氢溴酸、硫酸、高氯酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、乙醇酸、乳酸、草酸、丙二酸、苹果酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、羟乙磺酸和水杨酸的酸加成盐，以及与无机或有机碱例如碱金属或碱土金属、特别钠、钾、钙或镁的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐、无环或环状的胺、优选甲胺、乙胺、二乙胺、三乙胺或哌啶的盐。
式(I)或(II)化合物可以含有不对称碳原子，因此可以以外消旋混合物或单个的光学异构体的形式存在。
因此，式(I)或(II)化合物的所有可能的异构体及其混合物以及代谢物和可药用生物前体(也称为前药)作为抗肿瘤剂的用途也包括在本发明的范围内。
优选的本发明的式(I)或(II)的化合物是如下化合物：其中L是苯基、噻唑、咪唑、噁唑、吡唑、异噁唑、噻吩、吡啶或嘧啶；R是(i)卤原子，(ii)选自芳基氨基、烷基氨基或二烷基氨基的基团，其中的烷基部分可以被一个或多个羟基或氨基取代，(iii)选择性地被烷基取代的C3-C6环烷基，(iv)直链或支链的C1-C4烷基或芳基烷基，这些基团选择性地按照以上描述被取代，(v)选择性取代的芳基；R1是氢或选择性地被羟基或氨基取代的C1-C4烷基。
在该类型的化合物中，更优选如下式(I)或(II)的化合物，其中L是苯基或噻唑；R选自烷基氨基或二烷基氨基，其中的烷基部分可以被一个或多个羟基或氨基取代，C3-C6环烷基、选择性地被一个或多个羟基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、1-吡咯烷基、4-吗啉基、N-烷基-1-哌嗪基、氮杂双环[3.2.2]壬烷取代的直链或支链的C1-C4烷基；R1是氢；R2和R3相同或不同，是氢、金刚烷基、选择性地被-个或多个羟基、烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、1-吡咯烷基、4-吗啉基、N-烷基-1-哌嗪基、咪唑、3-氮杂双环[3.2.2]壬烷、氨基羰基、二烷基氨基羰基取代的直链或支链的C1-C6烷基；或者R2和R3与它们所连接的氮原子合在一起形成4-吗啉基、N-烷基-哌嗪基、吡咯烷基、2-氧代-1-吡咯烷基、咪唑基或3-氮杂双环[3.2.2]壬基；R4是羧基、全氟代烷基、C2-C4-链烯基、C2-C4-链炔基、2-氧代吡咯烷基、哌啶基、选择性地被卤素、二烷基氨基、氨基磺酰基、氨基羰基、烷氧基、羟基、烷基羰基氨基、氨基、1-吡咯烷基、N-烷基-1-哌嗪基、4-吗啉基取代的芳基；或者R4是选择性地被卤素、羟基、烷氧基、烷硫基、芳硫基、C3-C6环烷基、氰基、羧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、1-吡咯烷基、4-吗啉基、N-烷基-1-哌嗪基、氮杂双环[3.2.2]壬烷、氨基羰基、烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、芳基取代的直链或支链的C1-C6烷基，其中所述芳基选择性地被卤素、二烷基氨基、氨基磺酰基、氨基羰基、烷氧基、羟基、烷基羰基氨基、氨基、烷基氨基、1-吡咯烷基、N-烷基-1-哌嗪基或4-吗啉基取代。
优选的本发明式(I)或(II)化合物(可以是可药用盐例如氢溴酸盐或盐酸盐的形式)的例子包括：N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)丙烯酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-2-甲基丙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-2-萘甲酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)苯甲酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-2-苯基乙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-2-(3-吡啶基)乙酰胺；2，2，3，3，3-五氟-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺，2-[(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙酸；2-氟-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；2-氯-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；2-氰基-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-3-氧代-β-丙氨酸；N’1’-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)丙二酰胺；4-[(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-4-氧代-丁酸；2-[2-(羟乙酰基氨基)-1，3-噻唑-4-基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；3-羟基-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；3-氨基-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；2-氨基-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；4-羟基-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)丁酰胺；4-氨基-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)丁酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-2-(4-甲基-1-哌嗪基)乙酰胺；2-(4-苄基-1-哌嗪基)-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-2-(1-哌啶基)乙酰胺；N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[2-(2-氧代-1-吡咯烷基)-1，3-噻唑-4-基]乙酰胺；2-[4-(二甲基氨基)苯基)-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-2-(1H-1，2，3，4-四唑-1-基)乙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-5-氧代-2-吡咯烷甲酰胺；N’1’-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)琥珀酰胺；3-(1H-苯并咪唑-2-基)-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；1-乙酰基-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-4-哌啶甲酰胺；2-[2-(乙酰基氨基)-1，3-噻唑-4-基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；4-氯-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)丁酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-2-甲氧基乙酰胺；3，3，3-三氟-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；2-(二甲基氨基)-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-(2-{[2-(4-甲基-1-哌嗪基)乙基]氨基}-1，3-噻唑-4-基)乙酰胺；N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-(2-{甲基[2-(4-甲基-1-哌嗪基)乙基]氨基}-1，3-噻唑-4-基)乙酰胺；N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-(2-{[2-(4-吗啉基)乙基]氨基}-1，3-噻唑-4-基)乙酰胺；N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-(2-{甲基[2-(4-吗啉基)乙基)]氨基}-1，3-噻唑-4-基)乙酰胺；2-{2-[(2，3-二羟基丙基)氨基]-1，3-噻唑-4-基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；2-{2-[(2，3-二羟基丙基)(甲基)氨基]-1，3-噻唑-4-基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；2-(2-{[3-(二甲基氨基)-2-羟基丙基]氨基}-1，3-噻唑-4-基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；2-{2-[(2-氨基-2-氧代乙基)氨基]-1，3-噻唑-4-基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；2-(2-{[2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基]氨基}-1，3-噻唑-4-基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；2-[2-(金刚烷基氨基)-1，3-噻唑-4-基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；2-[4-(二甲基氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(4-甲基-1-哌嗪基)苯基]乙酰胺；N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(4-吗啉基)苯基]乙酰胺；N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(1-吡咯烷基)苯基]乙酰胺；N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-(4-{[2-(4-甲基-1-哌嗪基)乙基]氨基}苯基)乙酰胺；N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-(4-{甲基[2-(4-甲基-1-哌嗪基)乙基]氨基}苯基)乙酰胺；N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-(4-{[2-(4-吗啉基)乙基]氨基}苯基)乙酰胺；N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-(4-{甲基[2-(4-吗啉基)乙基]氨基}苯基)乙酰胺；2-{4-[(2，3-二羟基丙基)氨基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；2-{4-[(2，3-二羟基丙基)(甲基)氨基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；2-(4-{[3-(二甲基氨基)-2-羟基丙基]氨基}苯基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；2-[4-(1-金刚烷基氨基)苯基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；2-{4-[(2-氨基-2-氧代乙基)氨基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；2-(4-{[2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基]氨基}苯基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；2-[4-(乙酰基氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)烟酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)-5-甲基-2-吡嗪甲酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)-5-甲基-4-异噁唑甲酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)-3，5-二甲基-4-异噁唑甲酰胺；(二甲基氨基)-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)苯甲酰胺；4-(乙酰基氨基)-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)苯甲酰胺；4-(二甲基氨基)-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)苯甲酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)-1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-甲酰胺；4-(氨基磺酰基)-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)苯甲酰胺；2-氯-2，2-二氟-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)乙酰胺；2-氰基-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)乙酰胺；1-乙酰基-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)-4-哌啶甲酰胺；N’1’-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)琥珀酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)-2-甲氧基乙酰胺；3，3，3-三氟-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)丙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)-2-苯基乙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)-2-甲氧基-2-苯基乙酰胺；2-[4-(二甲基氨基)苯基]-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)乙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)-2-(3-吡啶基)乙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)-2-(3-噻吩基)乙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)-2-[5-(1-吡咯烷基)-2H-1，2，3，4-四唑-2-基]乙酰胺；2-环丙基-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-5-甲基-2-吡嗪甲酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-丙炔酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-5-甲基-1，3-噁唑-4-甲酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-3，3-二甲基丁酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-3-甲基-2-丁烯酰胺；3-环戊基-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-2-(3-噻吩基)乙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-2-(3-吡啶基)乙酰胺；2，2，2-三氟-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-3-(2-噻吩基)丙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-2-(4-吡啶基硫基)乙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-2-(3-吡啶基)-1，3-噻唑-4-甲酰胺；2-[2-(乙酰基氨基)-1，3-噻唑-4-基]-N-(5-环丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；2-[2-(乙酰基氨基)-1，3-噻唑-4-基]-N-{5-[(3-羟基丙基)(甲基)氨基]-1，3-噻唑-基}乙酰胺；2-[2-(乙酰基氨基)-1，3-噻唑-4-基]-N-{5-[(2-羟基乙基)(甲基)氨基]-1，3-噻唑-2-基}乙酰胺；2-[4-(二甲基氨基)苯基]-N-{5-[(2-羟基乙基)(甲基)氨基]-1，3-噻唑-2-基}乙酰胺；2-[4-(二甲基氨基)苯基]-N-{5-[(3-羟基丙基)(甲基)氨基]-1，3-噻唑-2-基}乙酰胺；和N-(5-环丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(二甲基氨基)苯基]乙酰胺。
式(I)或(II)的化合物及其盐可以通过例如包括如下步骤的方法制得：
(a)将式(III)化合物：与式(IV)化合物反应：其中R、L、R1、R2和R3如上所定义，Z是羟基或适宜的离去基，由此得到式(I)化合物，其中R、L、R1、R2和R3如上所定义；或者
(b)将式(I)化合物：与式(V)化合物反应：
R4-COX (V)其中R、R1、L和R4如上所定义，X是羟基或适宜的离去基例如氯或溴，由此得到式(II)化合物，其中R、L、R1和R4如上所定义；或者
(c)将其中R2和R3同时或者至少有一个是氢原子的如上式(I)化合物与式(VI)化合物反应：
R’Y (VI)其中R’具有R2或R3的含义但不是氢，Y是适宜的离去基例如溴、氯、甲磺酰基、甲苯磺酰基、羟基或甲酰基(CHO)，由此得到其中R2和R3同时或者至少有一个不是氢的式(I)化合物；然后，选择性地将式(I)或(II)的化合物转化成式(I)或(II)的另一种化合物和/或转化成它的盐。
本领域技术人员很容易理解，如果按照上述方法制备的式(I)或(II)的化合物是以异构体的混合物形式得到的，将其按照常规方法分离成单个的式(I)或(II)的异构体也包括在本发明的范围之内。同样，按照本领域公知的方法将相应的盐转化成游离的化合物(I)或(II)也包括在本发明的范围之内。
上述方法(a)、(b)、(c)是类似的方法，可以按照本领域公知的方法进行。
按照方法(a)进行的式(III)化合物与其中Z是羟基的式(IV)化合物之间的反应，或者按照方法(b)进行的其中R2和R3均表示氢原子的式(I)化合物与其中X是羟基的式(V)的羧酸之间的反应，可以在偶联剂例如碳二亚胺，即1，3-二环己基碳二亚胺、1，3-二异丙基碳二亚胺或1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺的存在下，或使用聚合物负载的碳二亚胺例如N-环己基碳二亚胺，N’-甲基聚苯乙烯，在适宜的溶剂例如二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、乙醚、1，4-二氧六环、乙腈、甲苯或N，N-二甲基甲酰胺中、在约-10℃至回流的温度下进行，反应时间为约30分钟至约8天。
式(III)化合物和其中Z是羟基的式(IV)化合物之间的反应，或者其中R2和R3是氢原子的式(I)化合物和其中X是羟基的式(V)化合物之间的反应，还可以通过例如混合酸酐法，用氯甲酸烷基酯例如氯甲酸乙酯、异丁酯或异丙酯在叔碱例如三乙胺、N，N-二异丙基乙基胺或吡啶的存在下、在适宜的溶剂例如甲苯、二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、乙腈、乙醚、1，4-二氧六环或N，N-二甲基甲酰胺中、在约-30℃至室温的温度下进行。
按照方法(a)进行的式(III)化合物和其中Z是适宜离去基的式(IV)的羧酸衍生物之间的反应，或者按照方法(b)进行的其中R2和R3均是氢原子的式(I)化合物和其中X是适宜离去基的式(V)的羧酸衍生物之间的反应，可以在叔碱例如三乙胺、N，N-二异丙基乙基胺或吡啶的存在下、在适宜的溶剂例如甲苯、二氯甲烷、氯仿、乙醚、四氢呋喃、乙腈或N，N-二甲基甲酰胺中、在约-10℃至回流的温度下进行。
按照方法(c)进行的式(I)化合物和其中Y是适宜离去基的式(VI)化合物之间的反应可以在适宜的碱例如碳酸钾、三乙胺、N，N-二异丙基乙基胺或吡啶的存在下、在适宜的溶剂例如乙醇、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺、1，4-二氧六环或四氢呋喃中、在室温至回流的温度下进行。
按照方法(c)进行的式(I)化合物和其中Y是羟基的式(VI)化合物之间的反应可以在Mitsunobu’s条件下、在三苯基膦和叠氮基二羧酸二乙酯的存在下、在适宜的溶剂例如四氢呋喃中、在0℃至室温的温度下进行。
按照方法(c)进行的式(I)化合物和其中Y是CHO的式(VI)化合物之间的反应可以在常规还原剂例如硼氢化钠、氰基硼氢化钠或三乙酰氧基硼氢化钠的存在下、在适宜的溶剂例如甲醇或乙醇中、在约0℃至回流的温度下进行。
选择性地将式(I)或(II)的化合物转化成式(I)或(II)的另一种化合物也可以按照已知的方法进行。
例如，可将上述方法c)看作是将一种本发明化合物转化成另一种本发明化合物的可能的转化反应。
选择性地将式(I)或(II)的化合物成盐或将盐转化成游离化合物以及将异构体的混合物分离成单个的异构体也可以通过常规的方法来完成。
根据本发明的方法，式(III)、(IV)、(V)和(VI)的化合物是已知化合物，或者可以按照已知方法制得。
其中Z或X是如上所定义的离去基的式(IV)或式(V)的化合物可以按照常规方法从其中Z或X是羟基的相应的式(IV)或(V)的羧酸制得。
其中的R如上所定义的式(III)化合物可以通过例如，将(VII)化合物：其中R如上所定义并且W是溴或氯，与硫脲在适宜的溶剂例如甲醇、乙醇、四氢呋喃、1，4-二氧六环或甲苯中、在室温至回流的温度下反应约1小时至约24小时来制备。
在某些情况下，式(IV)至(VII)的化合物是可以购买到的产品，或者可以通过本领域熟知的方法制得。
在按照本发明的方法制备式(I)化合物时，在原料或其中间体中存在的可以引起不利副反应的选择性的功能基需要按照常规方法进行适当的保护。
同样，将这些保护的化合物转化成游离的脱保护的化合物也可以按照公知的方法来进行。药理学
式(I)或(II)的化合物具有cdk/细胞周期蛋白抑制剂活性，因为它们在按照如下方法进行的试验中具有阳性的结果。
推定的cdk/细胞周期蛋白抑制剂的抑制活性和选定化合物的效力通过基于MultiScreen-PH 96孔板(Millipore)的测定方法来测定，其中，将磷酸纤维素滤纸置于各孔的底部，使带正电荷的底物在经过洗涤/过滤步骤后可以结合。
当放射标记的磷酸酯部分被ser/threo激酶转移到滤纸结合的组蛋白上时，在闪烁计数器中测定发射光。
cdk2/细胞周期蛋白A活性的抑制试验按照如下方法进行：
激酶反应：将1.5M组蛋白H1底物、25M ATP(0.5uCiP33g-ATP)、100ng细胞周期蛋白A/cdk2复合物、在最终体积为100μl的缓冲液(TRIS HCl 10mM pH7.5，MgCl2 10mM，7.5mM DTT)中的10M的抑制剂加入到96孔U型底的平板中。于37℃下保温10分钟后，用20μl EDTA 120mM终止反应。
收集：从MultiScreen平板的各孔中转移出100l，使底物结合在磷酸纤维素滤纸上。然后将平板用150pi/孔不合Ca++/Mg++的PBS洗涤3次，然后通过MultiScreen过滤系统过滤。
检测：将滤纸于37℃下干燥，然后加入100l/孔的闪烁剂并通过在Top-Count仪中进行放射性计数来测定33P标记的组蛋白H1。
结果：将数据进行分析并用相对于酶的总活性(＝100％)的抑制％来表示。
将所有显示抑制＞50％的化合物进行进一步的分析，以便通过Ki计算研究和确定抑制剂的动力学特性。
除了ATP和底物的浓度外，所用的试验方法与以上描述的相同。对ATP和组蛋白H1的浓度均进行了改变：在含或不含两种不同的、适当选择的抑制剂浓度下，使用浓度为4、8、12、24、48AM(含有按比例稀释的P33g-ATP)的ATP和浓度为0.4、0.8、1.2、2.4、4.8AM的组蛋白。
将实验数据通过计算机程序“SigmaPlot”进行分析来测定Ki，采用随机双试剂系统方程式：其中A＝ATP，B＝组蛋白H1。
例如，所报道的是用IC50值表示的本发明的化合物、即2-[2-(乙酰基氨基)-1，3-噻唑-4-基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺对CDk2/细胞周期蛋白A复合物的抑制活性[0.5(M)]。
此外，还用基于SPA(闪烁近似测定法)96孔平板测定的测定方法测定了推定的cdk/细胞周期蛋白抑制剂的抑制活性和选定化合物的效力。该测定法是基于链霉抗生物素蛋白包衣的SPA珠捕获从组蛋白的磷酸化位点衍生的生物素化的肽的能力。
当放射标记的磷酸酯部分被ser/threo激酶转移到生物素化的组蛋白肽上时，在闪烁计数器中测定发射光。
cdk5/p25活性的抑制试验按照如下方法进行：
激酶反应：将在最终体积为100l的缓冲液(Hepes 20mM pH7.5，MgCl2 15mM，1mM DTT)中的1.0M生物素化的组蛋白肽底物、0.25uCiP33g-ATP、4nM cdk2/p25复合物、0-100M的抑制剂加入到96孔U型底平板的各孔中。于37℃下保温20分钟后，通过加入在含有0.1％Triton X-100、50μM ATP和5mM EDTA的磷酸盐缓冲盐水中的500ugSPA珠来终止反应。使小珠沉降，在Top-Count闪烁计数器中检测掺入到33P标记的肽中的放射性。
结果：用如下方程式对数据进行分析并用抑制％来表示：
100x(1-(未知-背景)/(酶对照-背景))用四参数对数方程的改变形式计算IC50：
Y＝100/[1+10^{(LogEC50-X)*斜率}]其中X＝log(uM)，Y＝抑制％。
因此，式(I)或(II)的化合物可用于限制失控的肿瘤细胞增殖，从而可用于治疗各种肿瘤，例如癌症，例如乳腺癌、肺癌、膀胱癌、结肠癌、卵巢和子宫内膜肿瘤、肉瘤，例如软组织和骨肉瘤，以及血液系统的恶性肿瘤例如白血病。
此外，式(I)或(II)的化合物还可用于治疗其它细胞增殖性疾病例如牛皮癣、与动脉粥样硬化有关的血管平滑肌增殖和手术后的狭窄和再狭窄，并可用于治疗早老性痴呆。
适于向哺乳动物、例如人给药的本发明的式(I)或(II)的化合物可以根据患者的年龄、体重、病症以及给药途径通过常规的途径和剂量给药。
例如，适于口服给药的式(I)或(II)的化合物的适宜剂量可以是约10至约500mg/剂，每天给药1至5次。
本发明的化合物可以作为单一的活性剂进行给药，或者与已知的抗癌疗法结合，例如放疗或者与细胞抑制剂或细胞毒药物、抗生素类药物、烷化剂、抗代谢剂、激素类药物、免疫学药物、干扰素类型的药物、环加氧酶抑制剂(例如COX-2抑制剂)、金属基质蛋白酶抑制剂、端粒酶抑制剂、酪氨酸激酶抑制剂、抗生长因子受体剂、抗-HER剂、抗-EGFR剂、抗血管生成剂、法尼基转移酶抑制剂、ras-raf信号传导通路抑制剂、细胞周期抑制剂、其它cdks抑制剂、微管蛋白结合剂、拓扑异构酶I抑制剂、拓扑异构酶II抑制剂等联合的化疗方案。
例如，可将本发明的化合物与一种或多种化疗剂例如紫杉烷、紫杉烷衍生物、包封的紫杉烷类、CPT-11、喜树碱衍生物、蒽环霉素(anthracycline)糖甙例如阿霉素、伊达比星、表阿霉素、依托泊甙、navelbine、长春碱、卡铂、顺铂、雌莫司汀、celecoxib、SugenSU-5416、Sugen SU-6668、Herceptin等联合给药，并且可以选择性地在脂质体制剂中给药。
如果以固定的剂量给药，该联合形式的产品采用在上述剂量范围内的本发明化合物和认可的剂量范围内的其它药物活性剂。
当联合制剂不适用时，可将式(I)化合物与已知的抗癌剂顺序给药。
可将本发明的化合物以各种剂型给药，例如，以片剂、胶囊、糖或薄膜包衣片、液体的溶液或混悬液的形式口服给药；以栓剂的形式直肠给药；胃肠外给药，例如肌肉内或静脉内和/或鞘内和/或脊柱内注射或输液。
本发明还包括含有式(I)或(II)的化合物或其可药用盐以及可药用赋形剂的药物组合物，所述赋形剂可以是载体或稀释剂。
含有本发明化合物的药物组合物通常按照常规方法制备并以适宜的药物形式给药。
例如，固体口服剂型可以含有活性化合物以及稀释剂，例如乳糖、葡萄糖、蔗糖、纤维素、玉米淀粉或土豆淀粉；润滑剂，例如二氧化硅、滑石、硬脂酸、硬脂酸镁或硬脂酸钙和/或聚乙二醇；粘合剂，例如淀粉、阿拉伯树胶、明胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素或聚乙烯吡咯烷酮；崩解剂，例如淀粉、藻酸、藻酸盐或淀粉甘醇酸钠；泡腾混合物；染料；甜味剂；湿润剂，例如卵磷脂、聚山梨醇酯、十二烷基硫酸盐；以及药物制剂中使用的无毒和无药理学活性的物质。这些药物制剂可以通过已知的方式，例如混合、制粒、压片、糖包衣或薄膜包衣过程进行生产。
用于口服给药、用于制备片剂的液体分散体可以是例如糖浆、乳剂和混悬剂。
糖浆可以含有载体，例如蔗糖或蔗糖加甘油和/或甘露醇和/或山梨醇。
混悬剂和乳剂可以含有载体，例如天然树胶、琼脂、藻酸钠、果胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素或聚乙烯醇。
用于肌肉内注射的混悬液或溶液可以含有活性化合物以及可药用的载体，例如无菌水、橄榄油、油酸乙酯、二醇，例如丙二醇，并且，如需要，还可含有适宜量的利多卡因盐酸盐。
用于静脉内注射或输液的溶液可以含有例如无菌水作为载体，或者优选是无菌的等渗盐水溶液的形式，或者可以含有丙二醇作为载体。
栓剂可以含有活性化合物以及可药用载体，例如可可脂、聚乙二醇、聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯表面活性剂或卵磷脂。
如下实施例对本发明进行了说明，但并不限定本发明。
实施例
以上对本发明进行了总的描述，通过参照具体的实施例可以进一步理解本发明，本文中提供这些实施例的目的仅仅是为了说明而并非想要进行限定，除非另有说明。实施例12-氨基-5-异丙基-1，3-噻唑的制备
将2ml(18.6mmol)3-甲基丁醛溶于15ml 1，4-二氧六环。于0℃下向其中滴加40.4ml(18.6mmol)2％(v/v)溴的1，4-二氧六环溶液。将该混合物室温搅拌2小时，然后加入2.83g(37.2mmol)硫脲和5ml乙醇。
室温下6小时后，将溶液蒸发至干，将残余物溶于CH2Cl2并将产物用1M盐酸萃取；用30％氨水将水层调至碱性并再次用CH2Cl2萃取。将有机相用硫酸钠干燥然后真空蒸发。将残余物进行硅胶柱色谱，用环己烷-乙酸乙酯洗脱得到1.1g(42％收率)标题化合物。
1H-NMR(DMSO-d6)ppm：6.6(s，2H，NH2)；6.58(s，1H，噻唑CH)；2.9(m，1H，CHMe2)；1.18(s，3H，MeCHMe)；1.17(s，3H，MeCHMe)。
类似地，用相应的醛作为原料，可以制得如下产物：2-氨基-5-环丙基-1，3-噻唑。实施例24-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基氨基甲酸叔丁酯的制备
将EDCI(20.6g，107mmol)在用冰冷却下加入到2-{2-[(叔丁氧羰基)氨基]-1，3-噻唑-4-基}乙酸(25g，97mmol)的CHCl3(200ml)溶液中。
搅拌1小时后，滴加2-氨基-5-异丙基-1，3-噻唑(13.7g，97mmol)的CHCl3(150ml)溶液，将该混合物保持在0℃下1小时，然后在室温下过夜。
将溶液用水、5％柠檬酸、水、饱和碳酸氢钠和盐水洗涤。
用硫酸钠干燥然后蒸发得到固体，将其进行硅胶色谱，用CH2Cl2∶MeOH 95∶5作为洗脱剂，得到无色固体状的标题化合物(22g；59％)。
m.p.196-197℃
1H-NMR(DMSO-d6)ppm：12(s，宽峰，1H，NH)；11.4(s，宽峰，1H，NHBoc)；7.14(s，1H，H4-噻唑)；6.9(s，1H，H5-噻唑)；3.7(s，2H，CH2)；3.08(m，1H，CHMe2)；1.42(s，9H，t-Bu)；1.22(d，6H，CHMe2)。
类似地，用相应的羧酸作为原料，可以制得如下产物：
4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基氨基甲酸叔丁酯；m.p.179-180℃
1H-NMR(DMSO-d6)ppm：12.1(s，宽峰，1H，NH)；9.22(s，宽峰，1H，NHBoc)；7.35(d，2H，Ph)；7.19(s，1H，H4-噻唑)；7.15(d，2H，Ph)；3.6(s，2H，CH2)；3.08(m，1H，CHMe2)；1.43(s，9H，t-Bu)；1.11(d，6H，CHMe2)。实施例32-(2-氨基-1，3-噻唑-4-基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺的制备
将三氟乙酸(168ml)在用冰冷却下加入到4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基氨基甲酸叔丁酯(22g，57.51mmol)的CH2Cl2(750ml)和茴香醚(9.33ml，86.27mmol)溶液中。
于0℃下搅拌2小时后，将溶液保持在室温下过夜然后蒸发。将残余物溶于CH2Cl2然后蒸除溶剂(500ml×3)。
然后将残余物在CH2Cl2和水之间进行分配。将有机层进一步用水、饱和碳酸氢钠和盐水洗涤。
用硫酸钠干燥然后蒸发得到固体，将其用异丙基醚/环己烷研磨得到米色固体状的标题化合物(13g；81％)m.p.201-203℃
1H-NMR(DMSO-d6)ppm：11.98(s，宽峰，1H，NH)；7.13(s，宽峰，1H，NHBoc)；7-6.6(m，4，Ph)；5.9(s，宽峰，2H，NH2)；3.55(s，2H，CH2)；3.08(m，1H，CHMe2)；1.12(d，6H，CHMe2)。
类似地，可以制得如下产物：2-(4-氨基苯基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺
m.p.165-166℃
1H-NMR(DMSO-d6)ppm：11.98(s，宽峰，1H，NH)；7.13(s，1H，H4-噻唑)；7-6.6(m，4H，Ph)；5.9(s，宽峰，2H，NH2)；3.55(s，2H，CH2)；3.08(m，1H，CHMe2)；1.12(d，6H，CHMe2)；4-氨基-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)丁酰胺；3-氨基-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；和2-氨基-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺。实施例42-氯-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺的制备
将EDCI(0.49g，2.54mmol)在用冰冷却下加入到2-氯乙酸(0.24g，2.54mmol)的CHCl3(10ml)溶液中。
于0℃下搅拌1小时后，滴加2-(2-氨基-1，3-噻唑-4-基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺(0.6g，2.12mmol)的CHCl3(10ml)溶液，将该混合物保持在0℃下1小时，然后保持在室温下过夜。
将溶液用水、5％柠檬酸、水、饱和碳酸氢钠和盐水洗涤。
用硫酸钠干燥然后蒸发得到固体，将其进行硅胶色谱，用CH2Cl2→CH2Cl2∶MeOH 99∶1作为洗脱剂得到无色固体状标题化合物(0.49g；65％)。
m.p.176-178℃
1H-NMR(CDCl3)ppm：11(s，宽峰，2H，2NH)；7.01(s，1H，H4-噻唑)；6.83(s，1H，H5-噻唑)；4.23(s，2H，CH2Cl)；3.83(s，2H，CH2CO)；3.1(m，1H，CHMe2)；1.35(d，6H，CHMe2)。
类似地，可以制得如下产物：
2-[2-(乙酰基氨基)-1，3-噻唑-4-基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺
m.p.174-176℃
1H-NMR(DMSO-d6)ppm：12.1(2s，宽峰，2H，2NH)；7.15(s，1H，H4-噻唑)；6.93(s，1H，H5-噻唑)；3.77(s，2H，CH2)；3.3(s，3H，CH3)；3.1(m，1H，CHMe2)；1.22(d，6H，CHMe2)；4-氯-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)丁酰胺
m.p.170-172℃
1H-NMR(DMSO-d6)ppm：12.15(s，宽峰，1H，NH)；12.05(s，宽峰，1H，NH)；7.12(s，1H，H4-噻唑)；6.95(s，1H，H5-噻唑)；3.76(s，2H，CH2CO)；3.62(t，2H，CH2CH2CH2Cl)；3.08(m，1H，CHMe2)；2.55(t，2H，CH2CH2CH2Cl)；2(tt，2H，CH2CH2CH2Cl)；1.1(d，6H，CHMe2)。N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-2-甲氧基乙酰胺
m.p.147-149℃
1H-NMR(DMSO-d6)ppm：12.03(s，宽峰，1H，NH)；7.11(s，1H，H4-噻唑)；6.98(s，1H，H5-噻唑)；4.09(s，3H，OMe)；3.79(s，2H，CH2)；3.1(m，1H，CHMe2)；1.21(d，6H，CHMe2)；3，3，3-三氟-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺
m.p.214-216℃
1H-NMR(DMSO-d6)ppm：12.5(s，宽峰，1H，NH)；12.1(s，宽峰，1H，NH)；7.15(s，1H，H4-噻唑)；7.02(s，1H，H5-噻唑)；3.79(s，2H，CH2)；3.6(q，2H，CH2CF3)；3.1(m，1H，CHMe2)；1.11(d，6H，CHMe2)；2-[4-(二甲基氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-乙酰胺；
m.p.136-137℃
1H-NMR(DMSO-d6)ppm：12(s，宽峰，1H，NH)；7.11(s，1H，H4-噻唑)；7.1(d，2H，Ph)；6.65(d，2H，Ph)；3.55(s，2H，CH2)；3.1(m，1H，CHMe2)；2.82(s，6H，NMe2)；1.21(d，6H，CHMe2)；2-[4-(乙酰基氨基)苯基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-乙酰胺
m.p.186-187℃
1H-NMR(DMSO-d6)ppm：12.09(s，宽峰，1H，NH)；9.9(s，宽峰，1H，NH)；7.6-7.2(m，4H，Ph)；7.15(s，1H，H4-噻唑)；3.62(s，2H，CH2)；3.08(m，1H，CHMe2)；2-(s，3H，CH3)；1.21(d，6H，CHMe2)；2-[(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基氨基甲酸叔丁酯；3-[(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)氨基]-3-氧代丙基氨基甲酸叔丁酯；和4-[(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)氨基]-4-氧代丁基氨基甲酸叔丁酯；2-[4-(二甲基氨基)苯基]-N-(5-硝基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；2-[2-(乙酰基氨基)-1，3-噻唑-4-基]-N-(5-硝基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；和N-(5-环丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(二甲基氨基)苯基]乙酰胺。实施例5N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-2-甲基丙酰胺的制备
向异丁酸(49μl，0.53mmol)的CH2Cl2(1.5ml)溶液中，加入N-环己基碳二亚胺、N’-甲基聚苯乙烯(0.4g，负载量2mmol/g，0.798mmol)、N-羟基苯并三唑(0.072g，0.53mmol)和2-(2-氨基-1，3-噻唑-4-基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺(0.075g，0.266mmol)的CH2Cl2/DMF(0.4ml/0.6ml)溶液。将反应混合物室温搅拌约8天。然后，加入PS-Trisamine(三甲醇氨基甲烷)(0.44g，负载量3.62mmol/g，1.596mmol)，继续搅拌约6小时然后将混合物过滤。将树脂用CH2Cl2(1ml×5)洗涤，将有机层合并然后蒸发至干，在用二异丙基醚研磨后得到标题化合物。
类似地，用相应的羧酸作为原料，可以制得如下化合物：N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)丙烯酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-2-萘甲酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)苯甲酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-2-苯基乙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-2-(3-吡啶基)乙酰胺；2，2，3，3，3-五氟-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；2-氟-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；2-氰基-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-2-(4-甲基-1-哌嗪基)乙酰胺；2-(4-苄基-1-哌嗪基)-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-2-(1-哌啶基)乙酰胺；2-[4-(二甲基氨基)苯基)-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-2-(1H-1，2，3，4-四唑-1-基)乙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-5-氧代-2-吡咯烷甲酰胺；N’1’-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)丙二酰胺；N’1’-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)琥珀酰胺；3-(1H-苯并咪唑-2-基)-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；和1-乙酰基-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-4-哌啶甲酰胺；2-环丙基-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-5-甲基-2-吡嗪甲酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-2-丙炔酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-5-甲基-1，3-噁唑-4-甲酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-3，3-二甲基丁酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-3-甲基-2-丁烯酰胺；3-环戊基-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-2-(3-噻吩基)乙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-2-(3-吡啶基)乙酰胺；2，2，2-三氟-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-3-(2-噻吩基)丙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-2-(4-吡啶基硫基)乙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-2-(3-吡啶基)-1，3-噻唑-4-甲酰胺；2-[2-(乙酰基氨基)-1，3-噻唑-4-基]-N-(5-环丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺。实施例62-[(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙酸乙酯的制备
将乙基草酰氯(1.2ml，10.6mmol)的CHCl3(3ml)溶液滴加到2-(2-氨基-1，3-噻唑-4-基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺(2.5g，8.85mmol)和三乙胺(1.85ml，13.28mmol)的CHCl3/DMF(50ml/15ml)溶液中并同时在0℃下冷却。将反应混合物于0℃下搅拌约1小时然后室温搅拌过夜，然后用水、5％柠檬酸、饱和碳酸氢钠、盐水洗涤，用硫酸钠干燥然后蒸发至干得到标题化合物(1.2g)，其不经任何纯化直接使用。
类似地，用相应的酰氯作为原料，可以制得如下化合物并将其以粗品物质的形式使用：
3-[(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)氨基]-3-氧代丙酸乙酯；和
4-[(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)氨基]-4-氧代丁酸乙酯。实施例72-[(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙酸的制备
将实施例6制得的粗品物质(0.5g；1.31mmol)溶于1，4-二氧六环/甲醇(10ml/5ml)并用1N NaOH(1.5ml，1.5mmol)处理约48小时。在用冰浴冷却的同时加入1N HCl(1.5ml)并将形成的物质过滤，用甲醇洗涤然后干燥得到无色固体状的化合物(0.25g，54％)。
m.p.214-215℃
1H-NMR(DMSO-d6)ppm：12.65(s，宽峰，1H，NH)；12.1(s，宽峰，1H，NH)；7.15(s，1H，H4-噻唑)；7.1(s，1H，H5-噻唑)；4.8(s，2H，CH2)；3.1(m，1H，CHMe2)；1.21(d，6H，CHMe2)；
类似地，可以制得如下化合物：N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)-3-氧代-B-丙氨酸
m.p.186-188℃
1H-NMR(DMSO-d6)ppm：12.77(s，宽峰，1H，COOH)；12.22(s，宽峰，1H，NH)；12.05(s，宽峰，1H，NH)；7.25(s，1H，H4-噻唑)；6.98(s，1H，H5-噻唑)；3.8(s，2H，CH2COOH)；3.42(s，2H，CH2)；3.2(m，1H，CHMe2)；1.22(d，6H，CHMe2)；和4-[(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)氨基]-4-氧代丁酸。实施例82-[2-(羟乙酰基氨基)-1，3-噻唑-4-基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺的制备
将实施例6中制得的粗品物质(0.7g，1.8mmol)部分溶于乙醚/四氢呋喃(65ml/30ml)并用甲醇(0.13ml，3.15mmol)和LiBH4(0.07g，3.15mmol)处理。将反应混合物于45℃搅拌约20分钟，加入四氢呋喃(20ml)，再经过1小时后，补加甲醇(0.03ml)和LiBH4(0.018g)。继续搅拌1小时，将该悬浮液用1N HCl处理，用水稀释并用CH2Cl2萃取。将有机层用1N HCl、盐水洗涤，干燥然后蒸发。将残余物用二异丙基醚研磨然后进行硅胶色谱，用CHCl3∶MeOH∶30％ NH4OH 97∶3∶0.3作为洗脱剂，得到无色固体状的标题化合物(0.154g，28％)。
m.p.173-175℃
1H-NMR(CDCl3)ppm：6.95(s，1H，H4-噻唑)；6.7(s，1H，H5-噻唑)；4.26(s，2H，CH2OH)；3.8(s，2H，CH2)；3.1(m，1H，CHMe2)；1.21(d，6H，CHMe2)；
类似地，用相应的酯衍生物作为原料，可以制得如下化合物：3-羟基-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)丙酰胺；和4-羟基-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)丁酰胺。实施例92-(二甲基氨基)-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺的制备
将2-氯-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺(0.5g，1.4mmol)、2M二甲胺的甲醇溶于(3.5ml，7mmol)和碘化钾(0.116g，0.7mmol)的混合物回流约6小时。冷却后，将溶液用水稀释，用1N HCl酸化然后用乙醚萃取以除去未反应的产物。然后将水溶液用1N NaOH碱化并用乙醚萃取。将有机层用硫酸钠干燥然后蒸发。将残余物通过硅胶色谱纯化，用CH2Cl2∶MeOH97∶3→95∶5作为洗脱剂。以20％的收率(0.1g)得到浅黄色固体状的标题化合物。
m.p.70-71℃
1H-NMR(DMSO-d6)ppm：12.1(s，宽峰，1H，NH)；11.8(s，宽峰，1H，NH)；7.17(s，1H，H4-噻唑)；6.95(s，1H，H5-噻唑)；3.75(s，2H，CH2NMe2)；3.17(s，2H，CH2)；3.1(m，1H，CHMe2)；2.12(s，6H，NMe2)；1.22(d，6H，CHMe2)；实施例10(2-(2-{[2-二甲基氨基)-2-氧代乙基氨基}-1，3-噻唑-4-基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺的制备
将2-(2-氨基-1，3-噻唑-4-基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺(0.6g，2.12mmol)、2-氯-N，N-二甲基乙酰胺(0.27ml，1.96mmol)和干燥的碳酸钾(0.54g，3.92mmol)在干燥DMF(5ml)中的混合物于60℃下搅拌约4小时。冷却后，将溶液用水稀释，用CHCl3萃取。将有机层用盐水洗涤，干燥然后蒸发。将残余物通过硅胶色谱纯化，用CH2Cl2→CH2Cl2∶MeOH 95∶5作为洗脱剂。以62％的收率(0.5g)得到无色固体状的标题化合物。m.p.211-213℃。
1H-NMR(DMSO-d6)ppm：7.02(s，1H，H4-噻唑)；6.75(s，1H，H5-噻唑)；5(s，2H，NHCH2)；3.43(s，2H，NHCOCH2)；3.55(s，2H，CH2)；3.1(s，3H，NMe)；2.98(m，1H，CHMe2)；2.82(s，3H，NMe)；1.2(d，6H，CHMe2)；
类似地，用相应的烷基卤化物作为原料，可以制得如下产物：2-{2-[2-氨基-2-氧代乙基)氨基]-1，3-噻唑-4-基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺
m.p.172-174℃
1H-NMR(DMSO-d6)ppm：7.6(s，宽峰，1H，NHCO)；7.2(s，宽峰，1H，NH)；7.09(s，1H，H4-噻唑)；6.72(s，1H，H5-噻唑)；4.7(s，2H，NHCH2)；3.45(s，2H，NHCOCH2)；2.95(m，1H，CHMe2)；1.2(d，6H，CHMe2)；N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-(2-{[2-(4-吗啉基)乙基]氨基}-1，3-噻唑-4-基)乙酰胺；2-{2-[(2，3-二羟基丙基)氨基]-1，3-噻唑-4-基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；2-[2-(1-金刚烷基氨基)-1，3-噻唑-4-基]-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-(2-{[2-(4-甲基-1-哌嗪基)乙基]氨基}-1，3-噻唑-4-基)乙酰胺；2-(2-{[3-(二甲基氨基)-2-羟基丙基]氨基}-1，3-噻唑-4-基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(4-甲基-1-哌嗪基)苯基]乙酰胺；N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(4-吗啉基)苯基]乙酰胺；N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[4-(1-吡咯烷基)苯基]乙酰胺；N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-(4-{[2-(4-甲基-1-哌嗪基)乙基]氨基}苯基)乙酰胺；N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-(4-{[2-(4-吗啉基)乙基]氨基}苯基)乙酰胺；2-{4-[(2，3-二羟基丙基)氨基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；2-(4-{[3-(二甲基氨基)-2-羟基丙基]氨基}苯基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；2-[4-(1-金刚烷基氨基)苯基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；2-{4-[(2-氨基-2-氧代乙基)氨基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；和2-(4-{[2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基]氨基}苯基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺。实施例11N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-(2-{甲基[2-(4-甲基-1-哌嗪基)乙基]氨基}-1，3-噻唑-4-基)乙酰胺的制备
将N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-(2-{[2-(4-甲基-1-哌嗪基)乙基]氨基}-1，3-噻唑-4-基)乙酰胺(1g，2.45mmol)和40％甲醛水溶液(0.17ml，2.45mmol)在CHCl3(10ml)中混合然后用三乙酰氧基硼氢化钠(0.727g，3.43mmol)处理。将该混合物在氮气氛下室温搅拌约5小时。向反应混合物中加入饱和碳酸氢钠水溶液终止反应并将产物用CHCl3萃取。将有机层用盐水洗涤，干燥然后蒸发。经色谱纯化后以75％的收率得到标题化合物。
类似地，可以制得如下产物：2-{2-[(2，3-二羟基丙基)(甲基)氨基]-1，3-噻唑-4-基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺，N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-(2-{甲基[2-(4-吗啉基)乙基]氨基}-1，3-噻唑-4-基)乙酰胺；N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-(4-{甲基[2-(4-吗啉基)乙基]氨基}苯基)乙酰胺；N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-(4-{甲基-1-哌嗪基)乙基]氨基}苯基)乙酰胺；2-{4-[(2，3-二羟基丙基)(甲基)氨基]苯基}-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺；乙酸3-[[2-({2-[4-(二甲基氨基)苯基]乙酰基}氨基)-1，3-噻唑-5-基](甲基)氨基]丙酯；乙酸2-[[2-({2-[4-(二甲基氨基)苯基]乙酰基}氨基)-1，3-噻唑-5-基](甲基)氨基]乙酯；乙酸2-[[2-({2-[2-(乙酰基氨基)-1，3-噻唑-4-基]乙酰基}氨基)-1，3-噻唑-5-基](甲基)氨基]乙酯；和乙酸3-[[2-({2-[2-(乙酰基氨基)-1，3-噻唑-4-基]乙酰基}氨基)-1，3-噻唑-5-基](甲基)氨基]丙酯。实施例12N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)-2-甲氧基乙酰胺的制备
向2-甲氧基乙酸(41μl，0.53mmol)的CH2Cl2(1.5ml)溶液中加入N-环己基碳二亚胺、预先用CH2Cl2(5ml×3)洗涤过的N’-甲基聚苯乙烯(0.53g，负载量2mmol/g，1.064mmol)、4-DMAP(0.032g，0.266mmol)和2-(4-氨基苯基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺(0.076g，0.266mmol)的CH2Cl2/DMF(0.4ml/0.6ml)溶液。将反应混合物室温搅拌约72小时，将树脂过滤，用CH2Cl2(10ml×3)洗涤，将滤液合并，用水、5％盐酸、水、饱和碳酸氢钠和水洗涤，干燥然后蒸发。
类似地，用相应的羧酸作为原料，可以制得如下化合物：N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)烟酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)-5-甲基-2-噻吩甲酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)-5-甲基-2-吡嗪甲酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)-5-甲基-4-异噁唑甲酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)-3，5-二甲基-4-异噁唑甲酰胺；(二甲基氨基)-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)苯甲酰胺；4-(乙酰基氨基)-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)苯甲酰胺；4-(二甲基氨基)-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)苯甲酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)-1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-甲酰胺；4-(氨基磺酰基)-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)苯甲酰胺；2-氯-2，2-二氟-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)乙酰胺；2-氰基-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)乙酰胺；1-乙酰基-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)-4-哌啶甲酰胺；N’1’-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)琥珀酰胺；3，3，3-三氟-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)丙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)-2-苯基乙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)-2-甲氧基-2-苯基乙酰胺；2-[4-(二甲基氨基)苯基]-N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)乙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)-2-(3-吡啶基)乙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)-2-(3-噻吩基)乙酰胺；N-(4-{2-[(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)氨基]-2-氧代乙基}苯基)-2-[5-(1-吡咯烷基)-2H-1，2，3，4-四唑-2-基]乙酰胺。实施例13N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)-2-[2-(2-氧代-1-吡咯烷基)-1，3-噻唑-4-基]乙酰胺的制备
将2.8g(0.01mol)2-(2-氨基-1，3-噻唑-4-基)-N-(5-异丙基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺、4.84g(0.02mol)γ-碘代丁酸乙酯和2.76g(0.02mol)碳酸钾在50ml无水乙醇中的混合物回流搅拌5小时。将混合物冷却然后过滤，将盐用2×20ml乙醇洗涤。减压蒸除乙醇，将残余物溶于100ml CH2Cl2。将溶液用30ml水洗涤，干燥然后蒸除溶剂。将残余物通过硅胶色谱纯化，用CH2Cl2∶MeOH 95∶5作为洗脱剂，以30％的收率(1.05g)得到标题化合物。实施例141-(2，2-二乙氧基乙基)环丙烷的制备
将重氮甲烷(6.17g，147mmol)在剧烈搅拌下于0℃滴加到3.02g(21mmol)3-丁烯醛二乙缩醛的10ml干燥乙醚溶液中。然后一次性加入70mg(0.312mmol)乙酸钯(II)的50ml干燥乙醚溶液。然后于0℃下继续搅拌直至N2的溢出停止(10分钟)。蒸除乙醚使反应混合物的体积减少至约10ml。将沉淀过滤在烧结的玻璃漏斗上然后将滤液蒸发。粗产物(2.57g)含有97％的标题化合物(GC)，其不经进一步的纯化直接使用。实施例152-环丙基乙醛的制备
将1-(2，2-二乙氧基乙基)环丙烷(2.57g，16mmol)悬浮在HCl水溶液(0.1M，120ml)中并室温搅拌30小时，此时的TLC显示已完成转化为产物，形成混浊的溶液。然后将反应混合物用乙醚萃取。将乙醚溶液用水洗涤，干燥然后蒸除溶剂。将残余物通过硅胶色谱纯化，用石油醚∶乙酸乙酯95∶5作为洗脱剂，得到油状的标题化合物(1.07g，80％)。实施例162-[2-(乙酰基氨基)-1，3-噻唑-4-基]-N-(5-氨基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺的制备
将2-[2-(乙酰基氨基)-1，3-噻唑-4-基]-N-(5-硝基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺(1g，3.23mmol)的乙醇(150ml)溶液在10％Pd/C(0.1g，10％w/w)的存在下室温氢化约5小时。将反应混合物过滤然后蒸发。将残余物用二异丙基醚研磨，以89％的收率(0.8g)得到标题化合物。
类似地，用相应的硝基衍生物作为原料，可以制得如下化合物：2-[4-(二甲基氨基)苯基]-N-(5-氨基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺。实施例17乙酸3-{[2-({2-[2-(乙酰基氨基)-1，3-噻唑-4-基]乙酰基}氨基)-1，3-噻唑-5-基]氨基}丙酯的制备
将2-[2-(乙酰基氨基)-1，3-噻唑-4-基]-N-(5-氨基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺(0.5g，1.79mmol)、乙酸3-溴丙酯(0.4g，2.15mmol)、2，6-二甲基吡啶(0.25ml，2.15mmol)的DMF(10ml)溶液于70℃加热约72小时。将反应混合物用水稀释，用0.5N HCl酸化然后用CH2Cl2萃取。将水层用0.5N NaOH调至pH7/8然后用CH2Cl2萃取。将有机层用盐水洗涤，干燥然后蒸发。将残余物进行硅胶色谱，用CH2Cl2∶MeOH 95∶5作为洗脱剂，45％的收率得到标题化合物。
类似地，可以制得如下化合物：乙酸2-{[2-({2-[2-(乙酰基氨基)-1，3-噻唑-4-基]乙酰基}氨基)-1，3-噻唑-5-基]氨基}乙酯；乙酸2-{[2-({2-[4-(二甲基氨基)苯基]乙酰基}氨基)-1，3-噻唑-5-基]氨基}乙酯；和乙酸3-{[2-({2-[4-(二甲基氨基)苯基]乙酰基}氨基)-1，3-噻唑-5-基]氨基}丙酯。实施例182-[2-(乙酰基氨基)-1，3-噻唑-4-基]-N-{5-[(3-羟基丙基)(甲基)氨基]-1，3-噻唑-2-基}乙酰胺的制备
将乙酸3-[[2-({2-[2-(乙酰基氨基)-1，3-噻唑-4-基]乙酰基}氨基)-1，3-噻唑-5-基](甲基)氨基]丙酯(0.5g，1.27mmol)溶于甲醇(50ml)并用1N NaOH(1.4ml，1.4mmol)于0℃下处理约24小时。蒸除溶剂并将残余物溶于CH2Cl2/水。将有机层用水、盐水洗涤，干燥然后蒸发。将残余物进行硅胶色谱，用CH2Cl2∶MeOH 95∶5作为洗脱剂，以40％的收率得到标题化合物。
类似地，可以制得如下化合物：2-[2-(乙酰基氨基)-1，3-噻唑-4-基]-N-{5-[(3-羟基丙基)氨基]-1，3-噻唑-2-基}乙酰胺；2-[2-(乙酰基氨基)-1，3-噻唑-4-基]-N-{5-[(2-羟基乙基)(甲基)氨基]-1，3-噻唑-2-基}乙酰胺；2-[2-(乙酰基氨基)-1，3-噻唑-4-基]-N-{5-[(2-羟基乙基)氨基]-1，3-噻唑-2-基}乙酰胺；和2-[4-(二甲基氨基)苯基]-N-{5-[(2-羟基乙基)氨基]-1，3-噻唑-2-基}乙酰胺；2-[4-(二甲基氨基)苯基]-N-{5-[(2-羟基乙基)(甲基)氨基]-1，3-噻唑-2-基}乙酰胺；2-[4-(二甲基氨基)苯基]-N-{5-[(3-羟基丙基)(甲基)氨基]-1，3-噻唑-2-基}乙酰胺；和2-[4-(二甲基氨基)苯基]-N-{5-[(3-羟基丙基)氨基]-1，3-噻唑-2-基}乙酰胺。
显然，可以根据以上的教导对本发明进行多种修饰和改变。因此，应当理解，在所附权利要求的范围之内，还可以通过除文中具体描述之外的其它方式来实践本发明。