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1、(10)申请公布号 CN 102167753 A (43)申请公布日 2011.08.31 CN 102167753 A *CN102167753A* (21)申请号 201110052851.7 (22)申请日 2011.03.04 C08B 37/02(2006.01) A61P 1/02(2006.01) A61P 1/16(2006.01) A61P 3/06(2006.01) A61P 3/10(2006.01) A61P 9/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 37/04(2006.01) A61P 39/06(2006.01) (71)申请人。
2、 大连工业大学 地址 116034 辽宁省大连市甘井子区轻工苑 1 号 (72)发明人 田晶 徐龙权 翟滨 伏萃翠 邹丽萍 (74)专利代理机构 大连东方专利代理有限责任 公司 21212 代理人 毕进 (54) 发明名称 一种燕麦 - 葡聚糖的制备方法 (57) 摘要 本发明涉及一种燕麦 - 葡聚糖的制备方 法。本发明以燕麦麸为原料， 经低温浸提、 高温浸 提、 果胶酶与淀粉酶处理、 一次醇析、 真空干燥、 二 次醇析、 真空干燥得到燕麦-葡聚糖。 本发明所 得产品纯度可达 67.1， 得率为 4.2， 蛋白质含 量 1.7， 其主要优点在于提取纯化工艺简单， 其 特色之处主要表现为工艺中独。
3、有的低温浸提步骤 和果胶酶处理过程。低温浸提去除了原料中大部 分淀粉使后续工艺能够更好的进行。果胶酶的使 用让工艺摒弃了传统的去除蛋白质步骤， 巧妙的 在去除果胶的同时离心除去蛋白质等杂质。最后 工艺中采用二次醇析进一步纯化， 得到了溶解性 好、 性质稳定的产品， 这对大规模生产和开发利用 都具有重要意义。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 3 页 CN 102167757 A1/1 页 2 1. 一种燕麦 - 葡聚糖的制备方法， 其特征是以燕麦麸为原料， 经低温浸提、 高温浸 提、 果胶酶与淀粉酶处理、 一次醇析、。
4、 真空干燥、 二次醇析、 真空干燥得到燕麦 - 葡聚糖， 具体制备工艺为 ： (1) 低温浸提 ： 燕麦麸按 1 8 1 12 的质量比例加入 0.005 0.05mol/L 的 NaOH 溶液， 25 30恒温水浴振荡 1 3h ； 按燕麦麸与水的质量比为 1 10 1 15 加水， 过 100 200 目筛网， 4000 5000rpm 离心离心 15 30min， 倾出上清液于燕麦麸中 ； (2) 高温浸提 ： 调混合液 pH 值为 10.0， 80恒温水浴振荡 3h， 冷却至室温， 4000rpm 离 心 20min， 弃去沉淀 ； (3) 果胶酶与淀粉酶处理 ： 调提取液 pH 值为。
5、 4.5 6.5， 加入果胶酶 0.01 0.1mg/5g 燕麦麸， 5065搅拌530min， 再于100灭酶5min， 冷却至室温， 40005000rpm离心 15 30min， 弃去沉淀 ； 调提取液 pH 值为 5.5 6.5， 加入耐高温 - 淀粉酶 10 20U/5g 燕麦麸， 85 95搅拌 5 30min， 冷却至室温 ； (4)一次醇析 ： 调节提取液pH值为7.0， 加入95乙醇至溶液中乙醇浓度达到70， 静 置过夜 ； (5)真空干燥 ： 将一次醇析后的提取液2000rpm离心10min， 弃去上清液， 用无水乙醇使 沉淀脱水， 2000rpm 离心 10min， 弃去。
6、上清液， 利用旋转蒸发仪干燥 ； (6) 二次醇析 ： 将干燥后的样品配成 1 5 w/w 的溶液， 加入 95 100乙醇至溶液 中乙醇浓度达到 70 90， 静置过夜 ； (7)真空干燥 ： 将二次醇析后的溶液2000rpm离心10min， 弃去上清液， 用无水乙醇使沉 淀脱水， 2000rpm 离心 10min， 弃去上清液， 利用旋转蒸发仪干燥得到燕麦 - 葡聚糖。 2. 根据权利要求 1 所述的一种燕麦 - 葡聚糖的制备方法， 其特征在于最佳方法如 下 ： (1) 低温浸提 ： 燕麦麸按 1 10 的质量比例加入 0.01mol/L 的 NaOH 溶液， 30恒温水 浴振荡 2h ；。
7、 按燕麦麸与水的质量比为 1 15 加水， 过 180 目筛网， 4000rpm 离心 20min， 倾 出上清液于燕麦麸中， 将淀粉沉淀弃去 ； (2) 高温浸提 ： 调混合液 pH 值为 10.0， 80恒温水浴振荡 3h， 提取燕麦 - 葡聚糖 ； 冷 却至室温， 4000rpm 离心 20min， 弃去沉淀 ； (3) 果胶酶与淀粉酶处理 ： 调提取液 pH 值为 5.5， 加入果胶酶 0.06mg/5g 燕麦麸， 60 搅拌 5min， 水解提取液中的果胶 ； 提取液于 100灭酶 5min， 冷却至室温， 4000rpm 离心 20min， 弃去沉淀， 调提取液 pH 值为 6.5。
8、， 加入耐高温 - 淀粉酶 15U/5g 燕麦麸， 95搅拌 10min， 冷却至室温 ； (4)一次醇析 ： 调节提取液pH值为7.0， 加入95乙醇至溶液中乙醇浓度达到70， 静 置过夜 ； (5)真空干燥 ： 2000rpm离心10min， 弃去上清液， 用无水乙醇使沉淀脱水， 2000rpm离心 10min， 弃去上清液， 利用旋转蒸发仪干燥 ； (6) 二次醇析 ： 将样品配成 1 w/w 的溶液， 加入 95乙醇至溶液中乙醇浓度达到 80， ， 静置过夜 ； (7)真空干燥 ： 2000rpm离心10min， 弃去上清液， 用无水乙醇使沉淀脱水， 2000rpm离心 10min， 。
9、弃去上清液， 利用旋转蒸发仪干燥得到燕麦 - 葡聚糖。 权 利 要 求 书 CN 102167753 A CN 102167757 A1/3 页 3 一种燕麦 - 葡聚糖的制备方法 技术领域 0001 本发明涉及一种从燕麦麸中提取水溶性 - 葡聚糖的研究。 背景技术 0002 燕麦 - 葡聚糖是由单体 -D- 吡喃葡聚糖， 通过 -(1-3) 和 -(1-4) 糖苷键 连接起来， 形成的一种高分子聚合物。通过现代加工工艺， - 葡聚糖大部分集中于碾磨后 的副产品麸皮中。燕麦 - 葡聚糖能够抗衰老、 调节人体免疫功能、 预防和治疗由高血脂引 起的心脑血管疾病， 同时还能控制非胰岛素依赖型糖尿病、。
10、 预防直肠癌、 胆结石、 龋齿等。 0003 目前， 燕麦 - 葡聚糖的制备一般通过等电点法去除蛋白质， 经硫铵沉淀反复纯 化制得。但用等电点法去除蛋白去除率低且不稳定， 硫铵沉淀纯化时间长、 工艺繁琐， 不利 于工业化生产。 发明内容 0004 本发明的目的是提供一种高效制备燕麦 - 葡聚糖的方法。特色之处主要表现为 工艺中独有的低温浸提步骤和果胶酶处理过程。 低温浸提去除了原料中大部分淀粉使后续 工艺能够更好的进行。果胶酶的使用让工艺摒弃了传统的去除蛋白质步骤， 巧妙的在去除 果胶的同时离心除去蛋白质等杂质。最后工艺中采用二次醇析进一步纯化， 得到了溶解性 好、 性质稳定的产品。 0005。
11、 本发明的技术方案 ： 以燕麦麸为原料， 经低温浸提、 高温浸提、 果胶酶与淀粉酶处 理、 一次醇析、 真空干燥、 二次醇析、 真空干燥得到燕麦 - 葡聚糖。 0006 (1) 低温浸提 ： 燕麦麸按 1 8 1 12 的质量比例加入 0.005 0.05mol/L 的 NaOH 溶液， 25 30恒温水浴振荡 1 3h。此时淀粉从燕麦麸中溶出。按燕麦麸与水的 质量比为 1 10 1 15 加水， 过 100 200 目筛网， 4000 5000rpm 离心离心 15 30min， 倾出上清液于燕麦麸中， 将淀粉沉淀弃去。此步骤能够去除原料中的大部分淀粉。 0007 (2) 高温浸提 ： 调混。
12、合液 pH 值为 10.0， 80恒温水浴振荡 3h， 冷却至室温， 4000rpm 离心 20min， 弃去沉淀。 0008 (3) 果胶酶与淀粉酶处理 ： 调提取液 pH 值为 4.5 6.5， 加入果胶酶 0.01 0.1mg/5g 燕麦麸， 50 65搅拌 5 30min， 水解提取液中的果胶， 同时降低蛋白质的稳定 性， 使蛋白质易于分离。提取液于 100灭酶 5min， 冷却至室温， 4000 5000rpm 离心 15 30min， 弃去沉淀， 其中的沉淀包括蛋白质等杂质。 调提取液pH值为5.56.5， 加入耐高温 - 淀粉酶 10 20U/5g 燕麦麸， 85 95搅拌 5 。
13、30min， 冷却至室温。在去除提取液中 果胶的同时离心除去蛋白质等杂质， 比传统的去除蛋白质的方法更加简便、 有效。 0009 (4) 一次醇析 ： 调节提取液 pH 值为 7.0， 加入 95乙醇至溶液中乙醇浓度达到 70， 静置过夜。 0010 (5)真空干燥 ： 将一次醇析后的提取液2000rpm离心10min， 弃去上清液， 用无水乙 醇使沉淀脱水， 2000rpm 离心 10min， 弃去上清液， 利用旋转蒸发仪干燥。 说 明 书 CN 102167753 A CN 102167757 A2/3 页 4 0011 (6) 二次醇析 ： 将干燥后的样品配成 1 5 w/w 的溶液， 。
14、加入 95 100乙醇至 溶液中乙醇浓度达到 70 90， 静置过夜， 进一步纯化产品。 0012 (7)真空干燥 ： 将二次醇析后的溶液2000rpm离心10min， 弃去上清液， 用无水乙醇 使沉淀脱水， 2000rpm 离心 10min， 弃去上清液， 利用旋转蒸发仪干燥得到燕麦 - 葡聚糖。 0013 本发明摒弃了传统去除蛋白质的步骤， 巧妙的在去除果胶的同时离心除去蛋白 质等杂质， 并运用低温浸提步骤去除原料中大部分淀粉， 二次醇析后得到的产品纯度可达 67.1， 得率为 4.2， 蛋白质含量 1.7， 溶解性好， 性质稳定， 有利于大规模生产、 利用。 具体实施方式 0014 实施。
15、例 1 的具体制备方法如下 ： 0015 (1) 低温浸提 ： 燕麦麸按 1 10 的质量比例加入 0.01mol/L 的 NaOH 溶液， 30恒 温水浴振荡2h。 按燕麦麸与水的质量比为115加水， 过180目筛网， 4000rpm离心20min， 倾出上清液于燕麦麸中。 0016 (2) 高温浸提 ： 调混合液 pH 值为 10.0， 80恒温水浴振荡 3h。冷却至室温， 4000rpm 离心 20min， 弃去沉淀。 0017 (3) 果胶酶与淀粉酶处理 ： 调提取液 pH 值为 5.5， 加入果胶酶 0.06mg/5g 燕麦麸， 60搅拌 5min， 再于 100灭酶 5min， 冷。
16、却至室温， 4000rpm 离心 20min， 弃去沉淀。调提取 液 pH 值为 6.5， 加入耐高温 - 淀粉酶 15U/5g 燕麦麸， 95搅拌 10min， 冷却至室温。 0018 (4) 一次醇析 ： 调节提取液 pH 值为 7.0， 加入 95乙醇至溶液中乙醇浓度达到 70， 静置过夜。 0019 (5) 真空干燥 ： 2000rpm 离心 10min， 弃去上清液， 用无水乙醇使沉淀脱水， 2000rpm 离心 10min， 弃去上清液， 利用旋转蒸发仪干燥。 0020 (6) 二次醇析 ： 将样品配成 1 w/w 的溶液， 加入 95乙醇至溶液中乙醇浓度达到 80， 静置过夜。 。
17、0021 (7) 真空干燥 ： 2000rpm 离心 10min， 弃去上清液， 用无水乙醇使沉淀脱水， 2000rpm 离心 10min， 弃去上清液， 利用旋转蒸发仪干燥得到燕麦 - 葡聚糖。 0022 实施例 1 所得产品与市售产品溶解性与其它成分含量对比见表 1 和表 2。 0023 表 1、 所得产品与市售产品溶解性对比表 ： 0024 0025 表 2、 所得产品与市售产品其它成分含量对比表 ： 0026 说 明 书 CN 102167753 A CN 102167757 A3/3 页 5 0027 实施例 2 的具体制备方法如下 ： 0028 (1) 低温浸提 ： 燕麦麸按 1 。
18、8 的质量比例加入 0.01mol/L 的 NaOH 溶液， 30恒 温水浴振荡 3h ； 按燕麦麸与水的质量比为 1 10 加水， 过 100 目筛网， 4000rpm 离心离心 30min， 倾出上清液于燕麦麸中 ； 0029 (2) 高温浸提 ： 调混合液 pH 值为 10.0， 80恒温水浴振荡 3h， 冷却至室温， 4000rpm 离心 20min， 弃去沉淀 ； 0030 (3) 果胶酶与淀粉酶处理 ： 调提取液 pH 值为 5， 加入果胶酶 0.01mg/5g 燕麦麸， 65搅拌 30min， 再于 100灭酶 5min， 冷却至室温， 5000rpm 离心 25min， 弃去沉。
19、淀 ； 调提取 液 pH 值为 5.5， 加入耐高温 - 淀粉酶 20U/5g 燕麦麸， 95搅拌 10min， 冷却至室温 ； 0031 (4) 一次醇析 ： 调节提取液 pH 值为 7.0， 加入 95乙醇至溶液中乙醇浓度达到 70， 静置过夜 ； 0032 (5)真空干燥 ： 将一次醇析后的提取液2000rpm离心10min， 弃去上清液， 用无水乙 醇使沉淀脱水， 2000rpm 离心 10min， 弃去上清液， 利用旋转蒸发仪干燥 ； 0033 (6) 二次醇析 ： 将干燥后的样品配成 1 w/w 的溶液， 加入 95乙醇至溶液中乙醇 浓度达到 70， 静置过夜 ； 0034 (7)。
20、真空干燥 ： 将二次醇析后的溶液2000rpm离心10min， 弃去上清液， 用无水乙醇 使沉淀脱水， 2000rpm 离心 10min， 弃去上清液， 利用旋转蒸发仪干燥得到燕麦 - 葡聚糖。 0035 实施例 3 的具体制备方法如下 ： 0036 (1) 低温浸提 ： 燕麦麸按 1 12 的质量比例加入 0.05mol/L 的 NaOH 溶液， 25恒 温水浴振荡 1h ； 按燕麦麸与水的质量比为 1 15 加水， 过 200 目筛网， 5000rpm 离心离心 15min， 倾出上清液于燕麦麸中 ； 0037 (2) 高温浸提 ： 调混合液 pH 值为 10.0， 80恒温水浴振荡 3h。
21、， 冷却至室温， 4000rpm 离心 20min， 弃去沉淀 ； 0038 (3)果胶酶与淀粉酶处理 ： 调提取液pH值为6， 加入果胶酶0.1mg/5g燕麦麸， 65 搅拌 5min， 再于 100灭酶 5min， 冷却至室温， 4000rpm 离心 15 30min， 弃去沉淀 ； 调提取 液 pH 值为 6.5， 加入耐高温 - 淀粉酶 10U/5g 燕麦麸， 85搅拌 5min， 冷却至室温 ； 0039 (4) 一次醇析 ： 调节提取液 pH 值为 7.0， 加入 95乙醇至溶液中乙醇浓度达到 70， 静置过夜 ； 0040 (5)真空干燥 ： 将一次醇析后的提取液2000rpm离心10min， 弃去上清液， 用无水乙 醇使沉淀脱水， 2000rpm 离心 10min， 弃去上清液， 利用旋转蒸发仪干燥 ； 0041 (6) 二次醇析 ： 将干燥后的样品配成 5 w/w 的溶液， 加入 99乙醇至溶液中乙醇 浓度达到 90， 静置过夜 ； 0042 (7)真空干燥 ： 将二次醇析后的溶液2000rpm离心10min， 弃去上清液， 用无水乙醇 使沉淀脱水， 2000rpm 离心 10min， 弃去上清液， 利用旋转蒸发仪干燥得到燕麦 - 葡聚糖。 说 明 书 CN 102167753 A 。