3氨基3环丁基甲基2羟基丙酰胺盐酸盐的制备.pdf

本发明公开是用于制备3-(氨基)-3-环丁基甲基-2-羟基-丙酰胺盐酸盐的方法，所述盐是用于制备HCV蛋白酶抑制剂(1R，5S)-N-[3-氨基-1-(环丁基甲基)-2，3-二氧代丙基]-3-[2(S)-[[[(1，1-二甲基乙基)氨基]羰基]氨基]-3，3-二甲基-1-氧代丁基]-6，6-二甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-2(S)-甲酰胺的中间体。

1.  一种制备式I化合物的方法，
式I
该方法包括：
(A)使硝基烷(E)与乙醛酸偶联，获得硝基-羟基酸(F)：

其中(E)通过以下方法制备，所述方法包括：
(a)用2，2，6，6-四甲基-1-哌啶基氧基自由基使环丁烷甲醇(A)氧化，获得环丁烷甲醛(B)：

(b)使醛(B)与硝基甲烷偶联，获得硝基-醇(C)：

(c)通过以下方法，使化合物(C)转化为化合物(E)：
(1)第一个方法包括：
(i)使硝基-醇(C)与乙酸酐反应，获得化合物(CC)和(D)的混合物：

(ii)通过选自以下的方法，使在步骤(c)1(i)中获得的(CC)和(D)的混合物转化为硝基烷(E)：

(I)氢化该混合物；或
(II)在PEG-400的存在下，用硼氢化钠还原该混合物；或
(III)在醇的存在下，用硼氢化钠还原该混合物，或
(2)第二个方法包括：
(i)使硝基-醇(C)与CH₃SO₂Cl和三乙胺反应，获得化合物(D)：

(ii)使在步骤(2)(i)方法中获得的(D)还原，从而提供硝基烷(E)；
(B)使由步骤“A”提供的化合物(F)氢化，得到氨基-羟基酸(FA)：

(C)使(FA)与对-甲苯磺酸一起回流并酯化，获得(FF)：

(D)使所述酯转化为酰胺并保护(FF)的氨基，获得(G)，其中Prot是保护基团：

(E)将步骤“D”中制备的(G)在HCl的醇溶液中加热。

2.  权利要求1的方法，该方法包括：
1)使硝基烷(E)与乙醛酸偶联，获得硝基-羟基酸(F)：

其中(E)通过以下方法制备：
(a)用2，2，6，6-四甲基-1-哌啶基氧基自由基使环丁烷甲醇(A)氧化，获得环丁烷甲醛(B)：

(b)使醛(B)与硝基甲烷偶联，获得硝基-醇(C)：

(c)使硝基-醇(C)与乙酸酐反应，获得化合物(CC)和(D)的混合物：

(d)通过以下方法，使(CC)和(D)的混合物转化为硝基烷(E)：

I)氢化烯烃；
II)在PEG-400的存在下，用硼氢化钠使该烯烃还原；或
III)在醇的存在下，用硼氢化钠使烯烃还原；
2)氢化(F)，获得氨基-羟基酸(FA)：

3)使(FA)与对-甲苯磺酸一起回流并酯化，获得(FF)：

4)使所述酯转化为酰胺并保护(FF)的氨基，获得(G)，其中Prot是保护基团：

5)在HCl的醇溶液中加热(G)。

3.  权利要求1的方法，该方法包括
1)使硝基烷(E)与乙醛酸偶联，获得硝基-羟基酸(F)：

其中(E)通过以下方法制备：
(a)用2，2，6，6-四甲基-1-哌啶基氧基自由基使环丁烷甲醇(A)氧化，获得环丁烷甲醛(B)：

(b)使醛(B)与硝基甲烷偶联，获得硝基-醇(C)：

(e)使硝基-醇(C)与CH₃SO₂Cl和三乙胺反应，获得化合物(D)：

(f)使(D)还原，获得硝基烷(E)
2)使(F)氢化，获得氨基-羟基酸(FA)：

3)使(FA)与对-甲苯磺酸一起回流并酯化，获得(FF)：

4)使所述酯转化为酰胺并保护(FF)的氨基，获得(G)，其中Prot是保护基团：

5)在HCl的醇溶液中加热(G)。

4.  权利要求2的方法，该方法包括
1)在甲苯中的TEA的存在下，使硝基烷(E)与乙醛酸偶联，获得硝基-羟基酸(F)；
其中(E)通过以下方法制备：
(a)用2，2，6，6-四甲基-1-哌啶基氧基自由基使环丁烷甲醇(A)氧化，获得环丁烷甲醛(B)；
(b)在甲苯中的TEA的存在下，使醛(B)与硝基甲烷偶联，获得硝基-醇(C)；
(c)使硝基-醇(C)与乙酸酐和催化量的DMAP反应，获得化合物(CC)和(D)的混合物；
(d)通过以下步骤使(CC)和(D)的混合物转化为硝基烷(E)：
I)用醇中的Pd/C氢化；
II)在PEG-400的存在下，用硼氢化钠使该烯烃还原；或
III)在醇的存在下，用硼氢化钠使烯烃还原；
2)用在醇中的Pd/C氢化(F)，获得氨基-羟基酸(FA)；
3)使(FA)与对-甲苯磺酸一起回流并通过在醇中回流使之酯化，获得(FF)；
4)通过用NH₄OH处理，使酯转化为酰胺并通过用碱和保护基团处理，保护(FF)的氨基，获得(G)；和
5)在HCl的醇溶液中加热(G)。

5.  权利要求4的方法，其中在步骤1，部分(d)中的还原是通过方法III实施的。

6.  权利要求3的方法，该方法包括
1)在甲苯中的TEA的存在下，使硝基烷(E)与乙醛酸偶联，获得硝基-羟基酸(F)；
其中(E)通过以下方法制备：
(a)用2，2，6，6-四甲基-1-哌啶基氧基自由基使环丁烷甲醇(A)氧化，获得环丁烷甲醛(B)；
(b)在甲苯中的TEA的存在下，使醛(B)与硝基甲烷偶联，获得硝基-醇(C)；
(e)使硝基-醇(C)与CH₃SO₂Cl和三乙胺反应，获得化合物(D)：
(f)通过用Pd/C氢化使(D)还原，获得硝基烷(E)
2)用在醇中的Pd/C氢化(F)，获得氨基-羟基酸(FA)；
3)使(FA)与对-甲苯磺酸一起回流和通过在醇中回流酯化，获得(FF)；
4)通过用NH₄OH处理使酯转化为酰胺，并通过用碱和保护基团处理，保护(FF)的氨基，获得(G)；和
5)在HCl的醇溶液中加热(G)。

7.  一种制备下式化合物的方法

所述方法包括：
使(E)与乙醛酸和三乙胺，随后是苄胺反应，形成单一的非对映异构体，F-BA苄胺盐：

使(F)酸化和还原，获得胺(FA)，然后酯化并转化为(FF)的HCl盐：

使(FF-HCl)转化为酰胺，去保护，和保护氨基，获得(G)：

和在HCl的醇溶液中加热(G)。

8.  一种制备下式化合物的方法

该方法包括：
使(E)与乙醛酸和三乙胺，随后与二环己基胺反应，形成单一的非对映异构体F二环己基胺盐：

使(F)酸化并还原为胺(FA)，然后酯化并转化为(FF)的HCl盐：

使(FF-HCl)转化为酰胺，去保护，并保护氨基，获得(G)：

和在HCl的醇溶液中加热(G)。

9.  任何下式的化合物：


10.  权利要求1至7中任一项的方法，其中在实施后续步骤前使用选自二环己基胺和苄胺的胺获得作为胺盐沉淀物的化合物F，当选择DCHA时，所述沉淀物含有的主要异构体对次要异构体的比例为约1∶9至约1∶14，而当选择苄胺时，所述比例为约1∶13至约1∶20。

11.  权利要求10的方法，其中使用沉淀的化合物F后产生的化合物FF-HCl、G和H的非对映异构体的比例，反映沉淀的化合物F的异构体的比例。

3-氨基-3-(环丁基甲基)-2-(羟基)-丙酰胺盐酸盐的制备
发明领域
本发明涉及3-(氨基)-3-环丁基甲基-2-羟基-丙酰胺盐酸盐的制备方法，所述盐是用于制备HCV蛋白酶抑制剂(1R，5S)-N-[3-氨基-1-(环丁基甲基)-2，3-二氧代丙基]-3-[2(S)-[[[(1，1-二甲基乙基)氨基]羰基]氨基]-3，3-二甲基-1-氧代丁基]-6，6-二甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-2(S)-甲酰胺的中间体。
发明背景
丙型肝炎病毒(HCV)是(+)-义单链RNA病毒，其作为非甲、非乙型肝炎的主要病原因子被涉及；对于多肽加工和病毒复制必需的HCV蛋白酶被鉴定。US 7,012,066公开一类HCV蛋白酶抑制剂，其包括具有以下结构式的(1R，5S)-N-[3-氨基-1-(环丁基甲基)-2，3-二氧代丙基]-3-[2(S)-[[[(1，1-二甲基乙基)氨基]-羰基]氨基]-3，3-二甲基-1-氧代丁基]-6，6-二甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-2(S)-甲酰胺，
式II
2005年3月17日公布的US2005/0059800和2007年12月20日提交的美国临时申请号60/876,447，各自公开了制备式II化合物的方法，它们各自通过全文引用结合于本文。另外，已公布的2006年11月13日提交的美国专利申请号2007/0149459公开了制备式II化合物的氧化方法。用于制备式II化合物的非对映异构体的方法在已公布的2005年11月10日提交的美国专利申请号2005/0249702中公开。
2005年1月27日提交的已公布的美国专利申请号2005/0020689，公开了从(二苯基亚甲基)甘氨酸乙酯制备3-(氨基)-3-环丁基甲基-2-羟基-丙酰胺盐酸盐的方法。
通常，依据流程I的方法制备式II化合物，
流程I

其中式III化合物偶联至式I化合物的盐(I-盐)上。参考流程I，所需要的是用于提供中间体式I化合物的改良的方法。
发明简述
在一个方面，本发明包括用于制备3-(氨基)-3-环丁基甲基-2-羟基-丙酰胺盐酸盐，即式I的中间体化合物(其代表所有的非对映异构体)的方法，

该方法包括：
(A)使硝基烷(E)与乙醛酸偶联，获得硝基-羟基酸(F)：

其中(E)是通过包括以下步骤的方法制备的：
(1)用2，2，6，6-四甲基-1-哌啶基氧基自由基氧化环丁烷甲醇(A)，获得环丁烷甲醛(B)：

(2)使醛(B)与硝基甲烷偶联，获得硝基-醇(C)：
和
(3)通过以下方法，使化合物“C”转化为化合物“E”：
(a)第一个方法包括：
(i)使硝基-醇(C)与乙酸酐反应，获得化合物(CC)和(D)的混合物：
和
(ii)通过选自以下的方法，使在步骤(a)(i)中获得的(CC)和(D)的混合物转化为硝基烷(E)：

(I)氢化该混合物；或
(II)在PEG-400的存在下，用硼氢化钠还原该混合物；或
(III)在醇的存在下，用硼氢化钠还原该混合物，或
(b)第二个方法包括：
(i)使硝基-醇(C)与CH₃SO₂Cl和三乙胺反应，获得化合物(D)：
和
(ii)使在第二个方法的步骤(b)(i)中获得的(D)还原，从而提供硝基烷(E)；
(B)使由步骤“A”提供的化合物(F)氢化，得到氨基-羟基酸(FA)：

3)使(FA)与对-甲苯磺酸一起回流并酯化，获得(FF)：

4)使酯转化为酰胺并保护(FF)的氨基，获得(G)，其中Prot是保护基团：
和
5)在HCl的醇溶液中加热(G)。
在另一个实施方案中，制备包含式F化合物的分离的对映体对的外消旋沉淀物，其通过使分离的式(E)化合物与乙醛酸和三乙胺，随后是苄胺反应来进行，形成式F’-BA对映体对的苄胺盐，即式F化合物的RS和SR非对映异构体(其为对映体)的苄胺盐，以下显示为F’对映体对。
F’对映体对。
在该实施方案中，式F’-BA化合物的对映体对的苄胺盐优选从包含所有式F化合物的非对映异构体的溶液中析出。在一些实施方案中，优选使用足量的苄胺与式F化合物的外消旋混合物，使一定量的盐的SR和RS形式沉淀，所述一定量超过存在于所有非对映异构体的平衡溶液中的SS和RR异构体的量，并在这样的条件下实施SR和RS异构体的沉淀，其中条件是以SS和RR形式的混合物存在的非对映异构体在原位互变为SR或RS形式，且后续地，选择性地沉淀为苄胺盐(F’-BA)(动态析出)。

使包含式(F’-BA)沉淀物的对映体对酸化并还原为相应的胺(F’A)，然后酯化，得到对映体对(F’F)，其转化为相应的HCl盐，化合物(F’F-HCl)：

后续地，使沉淀的对映体对(F’F HCl)的酯官能团转化为相应的酰胺，得到氨基-羟基-酰胺中间体，和保护得到的氨基-羟基-酰胺的氨基官能团的氮原子，获得式(G’)的对映体对：

在醇的HCl溶液中，使式(G’)的对映体对的外消旋混合物加热，使氨基官能团去保护，得到式IA的对映体对，即具有以下结构的对映体化合物
式IA，
为方便起见，其有时在本文表示为：

其中+/-符号表示包含RS和SR对映体两者的外消旋物。
式IA化合物是在制备式II化合物中有用的中间体
式II。
在本发明的另一个方面，用二环己基胺(DCHA)代替苄胺，提供包含具有以下结构的式F”对映体对的DCHA盐的沉淀物：
式F”对映体
因而，本发明另一个方面提供包含式F”对映体对的外消旋沉淀物。
式F”对映体也可用于以上描述的制备包含式I化合物的RR和SS形式的对映体对的方法中。在与式F’的对映体对一起时，式F”对映体对有时为了方便起见也被表示为：

其中+/-符号表示外消旋物，即该沉淀物包含等量的式I化合物的SS和RR异构体。因此，一旦分离，使化合物(F”-DCHA)(通过用DCHA处理式F”化合物制备)酸化并还原为胺(F”A)，然后酯化和转化为酯(F”F)的HCl盐：

(F”F-HCl)被转化为酰胺，并保护氨基，获得(G”)：

在一些实施方案中，优选在醇的HCl溶液中加热异构体(G”)对，使氨基去保护，以获得式IB的非对映异构体对，即具有以下结构的化合物
式IB的非对映异构体，
其也可用于提供式II化合物。
式II。
在一个方面，本发明是具有以下结构的化合物和制备那些化合物中的每一个的方法：
F’和
F’F和
G’和

发明详述
在一个方面，本发明的方法，开始于采用在以下示意性显示的流程1的反应制备硝基烷(E)。
流程1

在另一个方面，本发明的方法，开始于采用在以下示意性显示的流程2的反应制备硝基烷(E)。
流程2

在本发明的简述中和在以上显示的反应流程中，括号表示中间体在继续下一步骤前未被分离。应该认识到，中间体化合物可被分离的，但是在一些实施方案中，优选在每一步骤中不分离产物。
US2005/0020689，其通过全文引用结合于本文，公开了从(二苯基亚甲基)-甘氨酸乙酯制备3-(氨基)-3-环丁基甲基-2-羟基-丙酰胺盐酸盐的另外的方法。此外，在US 7,012,066中公开了使用式I中间体化合物制备式II化合物的方法。在已公布的美国专利申请号2005/0059800、已公布？？和US2005/0249702、已公布？？和2007年6月8日提交的美国申请号11/792,770和2006年11月13日提交的11/598,528中(它们各自通过全文引用结合于本文)公开了从式I中间体制备式II化合物的另外的方法。
下列缩写用于以下的说明书和实施例中：TEMPO(2，2，6，6-四甲基-1-哌啶基氧基，自由基)；RT(室温)；TEA(三乙胺)；DMAP(N，N-二甲基氨基吡啶)；EtOAc(乙酸乙酯)；IPA(异丙醇)；Ac(乙酰基)；Et(乙基)；THF(四氢呋喃)；eq(当量)；MTBE(甲基叔-丁基醚)；Boc(叔-丁氧基羰基)。符号(±)插在具有至少一个手性中心的结构前面，表示在结构上与其对映体一起存在的化合物，作为外消旋混合物存在，因此，存在等量的各对映体。
从商业上可获得的环丁烷甲醇(A)，通过氧化，优选通过采用已知的TEMPO氧化过程，制备环丁烷甲醛，式(B)化合物。在溶剂，诸如CH₂Cl₂、EtOAc、甲苯或MTBE中，优选CH₂Cl₂(约5-15x体积，优选约10x)，向其中加入KBr(约20-30％，优选约24％的水溶液)和NaHCO₃(优选饱和水溶液)中实施TEMPO反应。加入约0.005-0.2eq，优选约0.02eq的TEMPO试剂，且将该混合物冷却至约-10至10℃，优选约-5至0℃，随后加入1-1.3eq，优选约1.15eq的次氯酸钠(漂白)。反应后，加入KH₂PO₄或Na₂S₂O₃(约0.2-0.4eq，优选约0.25eq)，并回收产物。
在TEA的存在下，通过与硝基甲烷的Henry偶联，使式(B)化合物转化为相应的硝基-醇(C)。将TEA(约0.1-1eq，优选约0.3eq)加入至1-5eq，优选1.2eq的硝基甲烷于溶剂，诸如甲苯、CH₂Cl₂、CH₃OH、乙醇、THF、2-甲基-THF、乙二醇二甲醚、MTBE、EtOAc、CH₃CN、乙酸异丙酯或其混合物中，优选甲苯中。加入TEA和搅拌该混合物。使加液过程中的温度维持在约0℃至约40℃，优选约15℃至约25℃，并且使在搅拌中的温度维持在从约0℃至约40℃的温度，优选从约20℃至约25℃的温度。产物优选直接用于下一步骤。
通过在催化量的DMAP的存在下与乙酸酐反应，使如此制备的式(C)化合物转化为式(CC)和(D)化合物的1∶1的混合物。将催化量的DMAP加入至含式(C)化合物的溶液中，并加入约1-2eq，优选约1.35eq的乙酸酐。使加液过程中的温度维持在约0℃至约40℃，优选约15℃，并且使在搅拌中的温度维持在约0℃至约40℃，优选从约15℃至约20℃的温度。产物优选直接用于下一步骤。
使用以下三个不同方法中的一个，将以上制备的含式(CC)和(D)化合物的溶液转化为相应的式(E)硝基-链烷化合物：方法I-在氢化催化剂的存在下，用氢使含式(CC)和(D)化合物的溶液氢化；方法II-在PEG-400的存在下，用NaBH₄使式CC和D化合物还原；和方法III-在叔-丁醇的存在下，用NaBH₄使式CC和D化合物还原。得到的包含式(E)化合物的粗溶液可用于在下一步骤中制备式(F)化合物，在实施转化为式(F)化合物前，任选用蒸馏步骤。
当采用方法I使式(CC)和(D)化合物转化时，向包含式(CC)和(D)化合物的溶液中加入溶剂，例如，CH₃OH，碱，例如，三乙胺(TEA)(约0.1-1eq，优选约0.6eq)和催化量的氢化催化剂，例如，8族金属催化剂，例如，任何形式的载于活性炭上的Pd和Ru，优选Pd/C和更优选5％Pd/C，自Degussa的E101R在一些实施方案中，优选使用氢气压，范围从约1-100psi，更优选，约5psi的氢气压是优选的。在一些实施方案中，于从约(-10)℃至约(+20)℃的温度，优选于约0℃温度下，优选实施氢化反应，以获得式(E)化合物。
当采用方法II使式(CC)和(D)化合物转化时，向包含式(CC)和(D)化合物的溶液中填充聚乙二醇(PEG)类似物，优选PEG-400，以基于存在的起始原料的克重量数的最高至2倍的溶剂体积mL数范围填充。即，例如，如果使用100g的式B化合物，使用最高至200mL的PEG400。优选地，使用起始原料的克数的1倍mL体积。以1-4eq的范围，优选2eq加入固体NaBH₄。在从约(-10)℃至约(+40)℃的温度范围内，优选在从约(+5)℃至约(+20)℃的温度下进行加液。或者，于从约0℃至约40℃，优选从约10℃至约20℃的温度下，通过将(CC)和(D)溶液加至于溶剂，例如，甲苯中的约1-4eq，优选约2.5eq的NaBH₄浆状物中，可实施方法II。
当采用方法III使式(CC)和(D)化合物转化为式(E)化合物时，向包含式(CC)和(D)化合物的溶液中填充醇，例如，叔-丁醇、异丙醇(IPA)、乙醇(EtOH)和甲醇(CH₃OH)。在一些实施方案中，优选使用以所用的起始原料的克数重量的最高至3倍mL计的一定量体积，优选以所用的起始原料的克数重量的约1.89倍mL计体积的叔-丁醇。例如，如果使用100g的式B化合物，则使用最高至300mL的叔-丁醇。在一些实施方案中，优选于约0-40℃，优选约15-25℃的温度范围，将式(CC)和(D)化合物的醇溶液加至包含溶剂，例如，甲苯中的约1至约4当量，优选约1.5当量的NaBH₄的浆状物中。
为了获得式(F)化合物，向于甲苯中的式(E)化合物的溶液中，加入甲醇(约1-5X，基于(E)的重量，优选约3X)。以约1-3eq的范围，优选约2eq加入于水中的50％乙醛酸，或乙醛酸一水合物，同时维持反应混合物的温度从约0℃至约40℃，优选从约0℃至约20℃的温度。加入以提供基于存在的式(E)化合物的量的从约1当量至约4当量，优选约2.7当量的三乙胺(TEA)，并搅拌该混合物，同时维持温度于从约0℃至约50℃，优选约25℃至约35℃。用碱，然后用酸提取后，回收如此制备的作为在有机溶剂中的溶液的式(F)化合物。在一些实施方案中，优选不用进一步纯化在下一步骤中使用包含式(F)化合物的溶液。
通过将在之前步骤中获得式(F)溶液加入到醇，例如甲醇和催化量的，优选基于所用的式(F)化合物的量的从约0.05eq.至约0.4eq.，更优选基于所用的式(F)化合物的量的约0.2eq.的氢化催化剂，例如，任何形式的载于活性炭上的Pd金属和Ru中，使式(F)化合物转化为式(FA)化合物。在一些实施方案中，优选使用披钯炭(Pd/C)和更优选10％干的Pd/C，并在氢气压下、于从约20℃至约100℃温度，优选在约60℃温度下实施氢化反应。氢化反应完成后，通过使它与对-甲苯磺酸一水合物(优选基于存在的式(FA)化合物的量的约1-1.3eq和更优选约1.2eq)反应，将如此制备的式(FA)化合物转化为对-甲苯磺酸盐(或者，作为选择，通过使用适当的酸试剂，转化为HCl或乙酸盐)，再通过使所述盐与醇一起回流而转化为相应的酯，例如，与甲醇、乙醇、异丙醇、丁醇、叔-丁醇和其它具有最多至10个碳原子的醇一起回流，获得相应的酯，例如用甲醇回流获得甲基酯，如在流程1的方法中阐述的式(FF)化合物。优选用EtOAc、2-甲基-四氢呋喃和MTBE从反应溶液中析出后，优选回收作为固体的在该步骤中如此获得的酯。
如在流程1中所示，通过将固体式(FF)化合物加至冷的(优选低于约5℃)的包含溶解于甲醇中的最高至约30当量的氨的溶液中，然后任选加入最高至约5当量(基于所用的式(FF)化合物的量计)的氢氧化铵，优选地，当加入氢氧化铵时，约为2.5当量的氢氧化铵，并搅拌该混合物，同时维持其温度于从约(-5)℃至约70℃，优选温度为从约(0)℃至约(-5)℃，将式(FF)化合物从酯转化为相应的式(G)酰胺。胺化反应完成后，浓缩该溶液并将其再溶解于水和醇，优选甲醇中。然后通过用碱，例如，K₂CO₃处理该溶液，保护式(G)化合物中的氨基。在使用K₂CO₃的一些实施方案中，优选使用从约0.5当量的K₂CO₃至约2当量的K₂CO₃，优选约0.67当量的K₂CO₃，然后加入(Boc)₂O(优选约1eq.至约3eq.，更优选约1.4eq)。在使用K₂CO₃的一些实施方案中，优选维持混合物的温度在从约(0)℃至约(40)℃的温度，更优选在从约(15)℃至约(25)℃的温度。应该认识到，通过使用本领域已知的方法，可用其它酸不稳定保护基团代替Boc以保护氨基官能团。如以上提及的，式(G)的酰胺化合物是两个对映体的外消旋混合物。
在一些实施方案中，通过在HCl的醇溶液中加热式(G)化合物的溶液，将如此获得的保护的式(G)的酰胺化合物转化为以盐形式呈现的式I化合物(在流程1中的H-cmpd)。在一些实施方案中，优选使用异丙醇HCl溶液使式(G)化合物去保护。
在使用流程1的一些实施方案中，优选实施采用在流程1A中的每一步骤中指出的方法的多个步骤，每个步骤已经在以上详细地分别讨论过。
流程1A

如反应流程2中所示，当采用该制备式(G)化合物的方法时，优选采用以下反应流程，实施将式(C)化合物转化为式(E)化合物：

因此，用溶剂，例如，甲苯(约3-5X，优选约4X)稀释如上指出而制备的包含式(C)化合物的溶液。向反应混合物中，缓慢加入从基于存在的式(C)化合物的量的约0.9当量至基于存在的式(C)化合物的量的约2当量，优选1.2当量的甲磺酰氯(MsCl，CH₃SO₂Cl)，以在温和地发生发热反应期间维持反应混合物的温度。缓慢加入优选从约1当量至约3当量，更优选约2.2eq的三乙胺(TEA)，同时维持反应混合物温度低于约(-25)℃。加入TEA后搅拌混合物，同时维持该混合物的温度在从约(-78)℃至约(0)℃，优选维持该混合物的温度在从约(-30)℃至约(-25)℃。在一些实施方案中，优选回收如此制备的以甲苯溶液形式呈现的式(D)化合物，其可在下一步骤中用于制备式(E)化合物。
通过加入催化量的氢化催化剂，例如，载于活性炭上的Pd或Ru的形式至包含式(D)化合物的溶液中，并使该混合物氢化，可制备式(E)化合物。在一些实施方案中，优选使用作为氢化催化剂的Pd/C，更优选10％干的Pd/C，和于从约0℃至约40℃的温度，更优选在约25℃温度下实施氢化反应。氢化后，通过Kugelrhor蒸馏纯化反应混合物，以获得纯的(E)。在该反应步骤的一些实施方案中，优选用醇，优选异丙醇(IPA)，优选用等于约2X至约5X的量的IPA，更优选约3X IPA和如上描述的催化量的氢化催化剂，稀释包含式(D)化合物的溶液。在一些实施方案中，优选使用作为氢化催化剂的10％Pd/C，例如，得自Degussa的E101R，并且于从约0℃至约40℃的温度下实施氢化反应，更优选于约25℃的温度下氢化。在一些实施方案中，优选在后续步骤中使用得到的(E)溶液而不用进一步纯化。
参考以上呈现的流程2，在一些实施方案中，优选实施所呈现的、采用在流程2A中的每一步骤中指出的方法的多个步骤，每个步骤已经在以上详细地分别讨论。
反应流程2A

本发明人惊奇地发现，可在硝基-羟基酸合成阶段实现将非对映异构体良好地分离为对映体对，参考以上呈现的或者流程1或者流程2，于形成式(F)化合物中，通过用或者二环己基胺(DCHA)或者苄胺(BnNH₂)处理混合物(如以上提及的式F”和F’化合物的化合物对映体对的混合物)，以使需要的对映体析出。

本发明人惊奇地发现，通过在析出和过滤以回收沉淀物前改变搅拌溶液与选择的胺的时间的量，析出的主要与次要非对映异构体的比率可有变化。而且，本发明人惊奇地发现，为了用非对映异构体富集形式的式F’或F”硝基-羟基酸化合物获得式I化合物，实施在流程1或2的任何一个流程中提出的反应顺序，导致出现在分离的产物中的次要异构体的量额外地减少。因此，例如，作为苄胺盐的、异构体的F’对映体对的析出，典型地导致异构体的F’对映体对，相对于存在于沉淀物中的异构体的F”对映体对的比率从约20∶1至约13∶1。使含在混合物中作为主要非对映异构体的F’对映体对和作为存在于混合物中的次要非对映异构体的F”对映体对的羟基酸溶液还原，随后将还原的化合物转化为相应的F’F-HCl化合物，导致存在于F’F-HCl产物中的F”F异构体的对映体对处于少于约1％的水平。
本发明人惊奇地发现，苄胺盐沉淀可提供一定量的SR和RS盐形式的式F’硝基-羟基酸化合物，其以SS和RR异构体过量存在于所有非对映异构体的平衡溶液中。因而，可从非对映异构体混合物中析出SR和RS异构体的量，可超过存在于平衡混合物中的量。不想受限于理论，相信存在于混合物中的SS和RR非对映异构体通过平衡在原位互换为SR或RS形式，然后在苄胺的存在下以SR和RS形式选择性地析出(动态析出)，如此提供增加量的沉淀的对映体对。

本发明人发现对于二环己基胺盐而言类似的结果，其中非对映异构体的F”对映体对选择性地析出为DCHA盐，典型地，析出非对映异构体的对映体对的次要：主要比率从约1∶9至约1∶14。不想受限于理论，依据本文之前提出的原则，相信长时间搅拌和/或多级沉淀(multipleprecipitations)将以选择主要非对映异构体对的非常高度的非对映异构体富集的方式，提供作为沉淀物的非对映异构体的主要对映体对。因此，通过采用析出的非对映异构体富集的对映体对实施之前描述的合成步骤，可以高的非对映异构体过量选择性制备式IA对映体对、
式IA，
或式IB对映体对，
式IB。
因此，通过使式F化合物(或者F’或F”)的硝基-羟基-酸的非对映异构体的对映体对分离，可依据以上描述的反应流程，以高度非对映选择性制备式I化合物。为了制备硝基-羟基酸(F’-BA或F”-BA)的非对映异构体的对映体对，使纯化的式(E)化合物与乙醛酸(基于存在的式(E)化合物的量的约0.95-1.25eq，优选约1.0eq)和TEA(约1-2eq，优选约1.5eq)在溶剂，例如，甲苯和IPA的混合物中反应。在一些实施方案中，在加入TEA期间，优选维持反应混合物温度于从约0℃至约40℃的范围，优选在约25℃的温度。加入TEA后，搅拌混合物。在一些实施方案中，优选搅拌混合物，同时维持混合物的温度从约0℃至约40℃，优选温度从约20℃至约30℃。加入苄胺(约1-2eq，优选约1.5eq)和使盐选择性沉淀，得到1∶13的(F’-BA)异构体混合物。
或者，向在溶剂，例如，甲苯和醇，例如甲醇、乙醇和异丙醇的混合物中的式(E)化合物粗溶液中，填充乙醛酸(50％的水溶液，约1-2eq，优选1.5eq)和加入TEA(约1.5-2eq，优选约2eq)。于从约0℃至约40℃温度范围，优选于约20℃搅拌后，浓缩溶剂，并将混合物再溶解于溶剂，例如，甲基叔-丁基醚(MTBE)中。加入稀HCl并提取混合物，并再溶解于溶剂，诸如甲苯中。加入TEA(约1-2eq，优选约1.5eq)，随后加入苄胺(约1-2.5eq，优选约2eq)。使盐析出，得到1∶16的(F’-BA)异构体混合物。
从本说明书应该认识到，可通过改变搅拌时间的量和用选择的胺实施的沉淀的数量，获得其它比率的异构体。
用稀HCl水溶液使(F’-BA)酸化，和将游离的氨基-酸化合物萃取入有机溶剂，例如，MTBE中。除去该溶剂，并将残余物再溶解于醇，例如，甲醇、乙醇和异丙醇中，和通过用Pd/C，优选10％Pd/C(50％湿重)氢化使式(F’-BA)化合物还原，获得对映体(F’A)对。用盐酸的甲醇溶液处理(F’A)，获得式(F’F-HCl)对映体对。
通过两种方法中的一种将(F’F-HCl)转化为式(G’)对映体对。将固体(F’F-HCl)溶解于醇，优选甲醇中，并与NH₄OH(最多至5X，优选3X)反应，同时维持温度在约(-5)℃和约70℃之间，优选于约10℃。将得到的产物用碱，例如，K₂CO₃处理，然后用酸不稳定保护基团，例如，Boc保护产物的氨基-基团。在一些实施方案中，优选通过用(Boc)₂O(约1-3eq，优选约1.1eq)处理该化合物引入保护基团。或者，在压力罐中，使固体(F’F-HCl)与甲醇中的氨溶液反应，然后用碱和如上描述的保护基团处理。
通过将醇(4-10X，优选8X)加至式(G’)化合物中，然后使该混合物与HCl的醇溶液(1-4X，优选2X，5-6N)反应，获得式IA化合物的对映体对。在一些实施方案中，优选使用IPA作为醇。或者，可使用HCl气体。
在另一个备选方案中，如上描述的，用NH₄OH处理(F’F-HCl)，产物经萃取(优选用THF、2-甲基-THF和盐水)，以及如上描述的，用HCl处理有机溶液，以获得式(IA)化合物。
通过将式(E)化合物溶解于溶剂，例如，甲苯和乙醇的混合物中，并加入乙醛酸或乙醛酸一水合物(约1-2eq，优选约1.2eq)，随后加入二环己基胺(约1-2eq，优选约1.5eq)，制备包含式(F”)、(F”-DCHA)对映体对的二环己基胺盐。回收的得到的沉淀物是非对映异构体的对映体对的14∶1的混合物，SS和RR异构体为主，式(F”-DCHA)对映体对。用类似于描述用于式(F’-BA)的非对映异构体的对映体对的方式处理获得的式(F”-DCHA)的非对映异构体的对映体对，以获得式(IB)非对映异构体的对映体对，
式IB。
本领域技术人员认识到，如需要时，在以上描述的各步骤中，熟悉的萃取程序可用于纯化中间体。
下列为详细的实施例，显示典型的制备式I化合物和用于该方法中的中间体的程序。
实施例1
(B的制备)
向于CH₂Cl₂(1L)中的化合物A(环丁烷甲醇)(100g)溶液中，加入于水(62.5ml)中的24％KBr溶液。向该混合物中加入于水(150ml)中的NaHCO₃溶液，并将该混合物冷却至-5℃。向该溶液中加入TEMPO试剂(1.8g)并搅拌该混合物20min。将5％NaOCl(约1900ml)缓慢填充至混合物中，同时维持温度在-5℃至0℃之间。然后搅拌该混合物约30min。然后加入KH₂PO₄的水(8.25％，400ml)溶液并在边温热至RT时，再搅拌该混合物约30min。然后分离各层并将它们分开。有机层经无水MgSO₄干燥和过滤。在浴液温度约0℃、部分真空(约110Torr)下小心蒸馏干的有机层，以除去大部分溶剂。于大气压下进一步蒸馏浓缩液，获得无色流体样化合物B(环丁烷甲醛)(70.6g；70.4％，96％纯)：¹H NMR(400MHz，CD₃OD)9.65(1H，s)，3.05(1H，m)，2.13(2H，m)，2.03(2H，m)，1.95(1H，m)，1.80(1H，m)。
实施例2
(C的制备)
在氮气氛、约15℃的温度下，将硝基甲烷(39ml)、TEA(25ml)和甲苯(200ml)的混合物搅拌约10min。于15-25℃，向该混合物中缓慢加入化合物B(50g)，并于20-25℃搅拌该混合物16.5hrs。得到的化合物C溶液原位用于下一步骤.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ4.40-4.33(1H，m)，4.32-4.24(2H，m)，2.47-2.37(1H，m)，2.14-1.80(6H，m)。
实施例3
(CC/D的制备)
将得自实施例2的C溶液冷却至0-5℃并加入固体DMAP(3.6g)。于约15℃搅拌反应混合物约10min以溶解所有固体物，然后缓慢加入乙酸酐(75.5ml，1.35eq.)。于15-20℃搅拌2hr后，得到的化合物CC/D溶液原位用于下一步骤。
实施例4
(E的制备，方法I)
用5％Pd/C(50％湿重，2.0g，得自Degussa的E101R)、CH₃OH(10ml)和TEA(5ml)加入到从化合物B(实施例3，5.0g)制备的CC/D溶液中，并于约0℃、氢气压(～5psi)下搅拌混合物。反应进行超过16h(用HPLC分析确定)。在反应混合物中填充C盐(0.3g)，搅拌30min，然后过滤，并用甲苯(30mL)洗涤。用aq.1N HCl(10mL)、aq.饱和NaHCO₃(10mL)和盐水(10mL)洗涤得到的有机层。得到的有机溶液含化合物E(5.23g，67.9％收率)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.36(1H，dd，J＝7.4，13.4)，6.93(1H，dd，J＝13.4，1.4)，3.18(1H，m)，2.31-2.25(2H，m)，2.09-1.93(4H，m)。
实施例5
(E的制备，方法II)
向得自实施例3的CC/D溶液(10g)中加入PEG-400(10ml)和水(6ml)，并使之冷却至约0℃。于5-20℃使用固体装填装置缓慢填充固体NaBH₄(8.6g)和于约20℃搅拌该混合物40min。使得到的浆状物冷却至0-5℃，并于0-10℃用冷水(40ml)缓慢猝灭。分离有机层和水层经用甲苯(120ml)反萃取。有机溶液含化合物E(11.1g，72％收率)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.36(1H，dd，J＝7.4，13.4)，6.93(1H，dd，J＝13.4，1.4)，3.18(1H，m)，2.31-2.25(2H，m)，2.09-1.93(4H，m)。
实施例6
(E的制备，方法II)
向在实施例3制备的CC/D溶液(50g)中填充PEG-400(50ml)和水(32ml)，并使之冷却至约0-5℃。使反应混合物冷却至低于5℃。在另一个反应器中，填充NaBH₄(固体，53.75g，2.5eq.)和甲苯(200ml)，并将该浆状物冷却至低于5℃。用1hr将CC/D溶液转移至NaBH₄悬浮液中，同时维持浴液温度低于20℃。将温度调节至20℃，搅拌该混合物1hr，并取少量样品用于HPLC分析。一旦经HPLC确定反应完成，将反应混合物冷却至低于5℃。浴套中缓慢填充入冷水(250ml)，同时维持温度低于20℃。浴液温度调节至20℃和搅拌该混合物30min，然后分离有机层。水层再经甲苯(300ml)反萃取。用1N的HCl(250ml)，然后用饱和的NaHCO₃(250ml)，然后用盐水(250ml)洗涤合并的有机相。于温度低于30℃、真空下将产物溶液浓缩至275ml。得到的溶液用于下一步骤。有机溶液含化合物E(50.7g，66％收率)。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ7.36(1H，dd，J＝7.4，13.4)，6.93(1H，dd，J＝13.4，1.4)，3.18(1H，m)，2.31-2.25(2H，m)，2.09-1.93(4H，m)。
实施例7
(E的制备，方法III)
向在实施例3中制备的CC/D溶液(50g)中填充t-BuOH(95ml)，同时维持温度在5和15℃之间。将反应混合物冷却至0和10℃之间的温度。在另一个反应器(用于50g规模的3L反应器)中填充NaBH₄(固体，32.25g，1.5eq.)和甲苯(200ml)。使浆状物冷却至0和10℃之间的温度。用1-3hr将CC/D混合物转移至NaBH₄悬浮液中，同时维持浴液温度在15和25℃之间。将将温度调节至15和25℃之间，并搅拌该混合物4-6hr。取少量样品(IPC)用于HPLC分析。一旦经HPLC确定反应完成(spec＜1％)，将反应混合物冷却至0℃和10℃之间的温度。将该混合物缓慢加入至冷水(250ml)中，同时维持温度在15℃和25℃之间。调节温度至15℃和25℃之间和搅拌该混合物30min。分离有机层，并用甲苯(200ml)反萃取水层。用1N的HCl(150ml)、饱和的NaHCO₃(150ml)，然后用盐水(150ml)洗涤合并的有机相。有机溶液含化合物E(52g，68％收率)。得到的溶液用于下一步骤。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.36(1H，dd，J＝7.4，13.4)，6.93(1H，dd，J＝13.4，1.4)，3.18(1H，m)，2.31-2.25(2H，m)，2.09-1.93(4H，m)。
实施例8
(从B经由MsCl制备D)
于RT，向于甲苯(48ml)中的硝基甲烷(16.8g)溶液中，缓慢加入TEA(4.2g)，并搅拌该混合物约10min。向该混合物中缓慢加入化合物B(11.6g)。于RT搅拌反应混合物约6h，其后，通过NMR监测反应是否完成。再用甲苯(50ml)稀释该溶液。使得到的溶液冷却至低于-25℃。于-30至-25℃下，用约10min缓慢加入CH₃SO₂Cl(18.9g)。缓慢填充TEA(30.7g)；调节加入速度以维持放热低于-25℃。于-30至-25℃将反应混合物搅拌约10min。将反应混合物温热至约-5至0℃和缓慢填充水(100ml)。
于RT搅拌反应混合物约5-15min，沉淀和分离。用甲苯(50ml)反萃取水层。用1N HCl(72ml)洗涤合并的有机相。分离各层并分开。然后用饱和的NaHCO₃(72ml)洗涤有机层。分离各层并分开。然后用饱和的盐水(2X72ml)洗涤有机相。分离各层并分开，得到化合物D的溶液。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.36(1H，dd，J＝7.4，13.4)，6.93(1H，dd，J＝13.4，1.4)，3.18(1H，m)，2.31-2.25(2H，m)，2.09-1.93(4H，m)。
实施例9
(E的制备)
向得自实施例8的、于甲苯中的化合物D溶液中，加入干的披钯碳催化剂(2.1g，10％活性)，和用气球使得到的混合物氢化6-8h。反应进程经HPLC监测。反应完成后，过滤催化剂并用甲苯(18ml)洗涤。将产物溶液浓缩至纯液体。浓缩液再经Kugelrohr蒸馏纯化，以获得清洁、无色的化合物E(18.9g，75％从醛B)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ4.31(2H，t，J＝7.2)，2.39-2.30(1H，m)，2.15-2.07(4H，m)，1.98-1.82(2H，m)，1.73-1.64(2H，m)。
实施例10
(E的制备)
用IPA(32ml)稀释得自实施例8的化合物D溶液。将得到的溶液加至50％湿重披钯碳催化剂(1.8g，10％活性)中，并用气球使得到的混合物氢化18h。反应进程经HPLC监测。反应完成后，过滤催化剂并用甲苯(35ml)洗涤。该溶液含10.6g的化合物E。于低于30℃温度、真空下，将该溶液浓缩至85mL。加入甲苯(35ml)和再将混合物浓缩至85mL。加入甲苯以制成106ml的溶液并加入IPA(10.6ml)。该溶液含9.8g的化合物E(55％收率，得自B)和在原位用于下一步骤。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.36(1H，dd，J  ＝7.4，13.4)，6.93(1H，dd，J＝13.4，1.4)，3.18(1H，m)，2.31-2.25(2H，m)，2.09-1.93(4H，m)。
实施例11
(F的制备)
向的自实施例7的化合物E溶液(111.5g，0.155mol，于甲苯和16-20％硝基甲烷中)中填充CH₃OH(335ml)。将混合物冷却至0和10℃之间的温度。加入乙醛酸(256g，2.0eq.，50％的水溶液)，同时维持温度在0和20℃之间。搅拌该混合物10min。缓慢加入TEA(327ml，2.7eq.)，同时维持温度在15至25℃之间。于25和35℃之间的温度搅拌该混合物15-20hrs，且经HPLC监测反应完成(spec＜2％，以面积计)。一旦反应完成，将反应混合物冷却至0和10℃之间的温度。加入Aq.K₂CO₃(558ml的2.5％重量的K₂CO₃水溶液)，同时维持温度在0和10℃之间，并于5和15℃之间的温度搅拌该混合物15min。使含化合物F的水层分离，并冷却至0和10℃之间的温度。加入浓HCl(175ml)直至pH为1.5-2，同时维持温度在0和10℃之间。加入MTBE(223ml)和于10和20℃之间的温度搅拌该混合物10min。分离各层和用MTBE(167ml)反萃取水层。用1N HCl(112ml)、盐水(112ml，10％NaCl的水溶液)和另一份盐水(56ml，10％NaCl的水溶液)洗涤合并的有机相。得到的化合物F的有机溶液无需浓缩/蒸馏用于下一步骤。¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ4.64(1H，m)，4.46(0.5H，d，J＝4.0)，4.24(0.5H，d，J＝6.2)，2.24(2H，m)，1.99(2H，m)，1.83(3H，m)，1.60(2H，m)。
实施例12
(FF的制备)
向于氢化器中的10％Pd/C(10.4g，50％湿重)加入无水CH₃OH(155ml)。将于实施例11制备的化合物F的游离酸溶液(51.8g)转移至氢化器中。于氢气压(90psi)、60度下，使得到的浆状物氢化。15h后，加入对-甲苯磺酸一水合物(58.1g)并搅拌30min以溶解固体产物。加入C盐(5.2g)和搅拌该混合物15min。过滤浆状物并用CH₃OH(78ml)洗涤。将得到的溶液蒸馏至约140ml的体积。加入CH₃OH(518ml)并将得到的溶液蒸馏至最小体积，得到浆状物。加入CH₃OH(518ml，KF spec＜3％)并加热该混合物至回流16hr。在大气压下，将该混合物浓缩至207ml的体积。加入EtOAc(518ml)，并在大气压下，将该混合物浓缩至414ml的体积。将得到的浆状物冷却至0-5℃。加入MTBE(259ml)和将得到的浆状物冷却至-13至-10℃并搅拌1hr。过滤产物并用EtOAc和MTBE(104ml)的1∶1混合物洗涤和干燥，得到76.8g的固体(两个非对映异构体的比率为54∶46，84％收率)。¹H NMR(400MHz，DMSO d₆)7.91(1.62H，br s)，7.82(1.38H，br s)，7.48(2H，m)，7.12(2H，d，J＝7.8)，6.52(0.46H，d，J＝5.2)，6.33(0.54H，d，J＝5.2)，6.33(0.54H，d，J＝5.2)，4.38(0.54H，dd，J＝2.9，5.1)，4.16(0.46H，m)，3.71(1.5H，s)，3.70(1.5H，s)，3.27(0.54H，m)，3.21(0.46H，m)，2.39-2.30(1H，m)，2.30(3H，s)，2.02(2H，m)，1.78(2H，m)，1.60(3H，m)，1.50(1H，m)。
实施例13
(G的制备)
向化合物FF(30.0g)中加入预冷至低于5℃的7N NH₃/CH₃OH(93.8ml)。使得到的浆状物冷却至-5和5℃之间的温度。加入预冷至低于5℃的NH₄OH(75.0ml)，同时维持温度在-2和5℃之间。搅拌该混合物1.5天，同时维持温度在0和5℃之间。真空下、低于40℃，将混合物浓缩至最小体积。加入CH₃OH(60ml)和水(60ml)，同时维持温度在15和25℃之间。加入K₂CO₃(7.7g，0.67eq.)和搅拌该混合物10min，然后加入(Boc)₂O(25.6ml，1.4eq.)，同时维持温度在15和25℃之间。于15和25℃之间的温度下，搅拌该混合物15hr。加入水(240ml)，同时维持温度低于20℃，将得到的浆状物冷却至5℃，并搅拌该混合物17hr。过滤产物并用水(25ml)洗涤和干燥，得到19.5g的固体(86％收率)，两个非对映异构体(SS/RR∶SR/RS＝55∶45)的混合物。¹H NMR(400MHz，DMSO d₆)7.19(2H，m)，6.28(0.55H，d，J＝9.2)，5.93(0.45H，d，J＝9.4)，5.44(1H，m)，3.82(0.55H，m)，3.74-3.61(1.45H，m)，2.27(1H，m)，1.97(2H，m)，1.76(2H，m)，1.61-1.24(4H，m)，1.38(4.95H，s)，1.36(4.05H，s)。
实施例14
(制备F’-BA，非对映异构体的对映体对，)
将化合物E(50.0g)溶解于甲苯(450ml)和IPA(50ml)的混合物中。加入乙醛酸一水合物(1.0eq.，35.65g)和搅拌该混合物10min。填充TEA(1.5eq.，81.5ml)，同时维持温度在15至20℃之间。当反应完成时(6-12hr)，加入苄胺(1.5eq.，63.4ml)。加入MTBE(500ml)和搅拌该混合物24h。过滤沉淀物并用MTBE(100ml)洗涤和于室温、真空下干燥过夜。以82％收率获得作为部分1和部分2异构体(1∶13)的混合物的苄胺盐(98g)。¹H NMR(400MHz，DMSO d₆)δ7.45(5H，m)，6.65(2H，宽峰)，4.25和4.5(1H，宽dd，比率＝13∶1)，4.0(2H，s)，3.75(1H，m)，2.4(2H，m)，2.1(2.5H，m)，1.9(2.5H，m)，1.7(2H，m)。
实施例15
(制备F’-BA，非对映异构体的对映体对)
向得自实施例6的、于甲苯中的粗化合物E溶液(55.0g，426mmol)中加入乙醇(275ml)。使得到的混合物冷却至低于10℃。于低于20℃的温度下缓慢加入50％乙醛酸的水溶液(94.6g，1.5eq.)。于15-20℃加入TEA(119.35ml，2eq.)，于约20℃搅拌4h后，于温度低于30℃下将反应混合物浓缩至约275ml。加入MTBE(550ml)并将得到的混合物冷却至约10℃。于低于20℃温度下加入稀HCl溶液(从110ml的浓HCl和440ml的水制备)。分离有机层并用盐水(165ml)洗涤。加入甲苯(550ml)和将得到的混合物冷却至约10℃。于10-20℃加入TEA(89.65ml，1.5eq.)。于15-20℃加入苄胺(92.95ml，2eq.)。于约20℃搅拌得到的浆状物19.5h。过滤沉淀物，用MTBE(约300ml)洗涤，并于RT、真空下干燥过夜。以84％收率获得作为部分1/部分2异构体(1/16)的混合物的苄胺盐(111.2g)。¹H NMR(400MHz，DMSOd₆)δ7.45(5H，m)，6.65(2H，宽峰)，4.25和4.5(1H，宽dd，比率＝16∶1)，4.0(2H，s)，3.75(1H，m)，2.4(2H，m)，2.1(2.5H，m)，1.9(2.5H，m)，1.7(2H，m)。
施例16
(制备二环己基胺盐，非对映异构体的对映体对，(F”-DCHA))
将化合物E(6.46g，50mmol)溶解于甲苯(58ml)和乙醇(6.5ml)的混合物中。于RT加入乙醛酸一水合物(5.52g，1.2eq.)。于温度低于25℃下缓慢加入二环己基胺(13.6g，1.5eq.)。于RT搅拌3h后，于RT下，向得到的浆状物中加入MTBE(65ml)。2h后，过滤沉淀物，用MTBE洗涤并在真空下干燥。以50％收率获得作为部分1/部分2异构体(1/9)的混合物的二环己基胺盐(9.63g)。¹H NMR(400MHz，DMSOd₆)δ4.34-4.61(1H，ddd和dt，比率＝1∶9)，3.73和4.01(1H，d，比率＝1∶9)，3.05(2H，m)，2.10-2.23(2H，m)，1.65-1.84(6H，m)，1.90-2.04(5H，m)，1.45-1.65(5H，m)，1.20-1.33(8H，m)，1.03-1.15(2H，m)。
实施例17
(制备二环己基胺盐，非对映异构体的对映体对，(F”-DCHA))
将化合物E(1.0g，7.7mmol)溶解于甲苯(9ml)和乙醇(1ml)的混合物中。于RT加入乙醛酸一水合物(0.71g，1eq.)。于低于25℃温度下缓慢加入二环己基胺(2.31ml，1.5eq.)。于RT搅拌16h后，于RT，向得到的浆状物中加入甲苯(10ml)。24h后，过滤沉淀物，用甲苯洗涤和真空下干燥。以43％收率获得作为部分1/部分2异构体(14/1)的混合物的二环己基胺盐(1.29g)。¹H NMR(400MHz，DMSO d₆)δ4.34-4.61(1H，ddd和dt，比率＝1∶14)，3.73和4.01(1H，d，比率＝1∶14)，3.05(2H，m)，2.10-2.23(2H，m)，1.65-1.84(6H，m)，1.90-2.04(5H，m)，1.45-1.65(5H，m)，1.20-1.33(8H，m)，1.03-1.15(2H，m)。
实施例18
(制备F’F-HCl盐，单一的非对映异构体，
(RS和SR对映体的1∶1的混合物))
于15-20℃，向稀HCl水溶液(438ml，1N)中，加入一个非对映异构体为主的实施例15的化合物(100g)，并搅拌该混合物直至全部溶解。加入MTBE(300ml)并搅拌该混合物。使各层沉积并分离。用MTBE(200ml)提取水层两次。用10％NaCl水溶液(50ml)洗涤合并的有机相。使各层沉积并分离，并在减压下将有机层浓缩至最小体积。将MTBE(300ml)加至得到的油中，和再于减压下浓缩至最小体积。将得到的油溶解于CH₃OH(200ml)中，并在减压下将该溶液浓缩至约150ml。用CH₃OH(500ml)稀释得到的残余物，并向该溶液中加入10％Pd-C(50％湿重)(6.5g)和保持温度在约50至60℃、于90psi的氢气压下。反应完成后，加入于CH₃OH中的无水HCl和搅拌该混合物约30min。过滤催化剂并用CH₃OH(65ml)洗涤，得到化合物FF-HCl的溶液。¹H NMR(400MHz，DMSO d₆)δ8.12(3H，br s)，6.48(1H，d，J＝5.5)，4.19(1H，m)，3.69(3H，s)，3.15(1H，m)，2.42(1H，m)，2.02(2H，m)，1.80(2H，m)，1.71(2H，m)，1.59(2H，m)。
实施例19
(制备化合物G’(SR和RS对映体对))
向固体FF-HCl(5g)中加入CH₃OH(10ml)。将得到的溶液冷却至低于10℃和加入NH₄OH(15ml)，同时维持温度低于10℃。于10℃搅拌15h后，于温度低于30℃、真空下将反应混合物浓缩至最小体积。加入CH₃OH(25ml)，同时维持温度在15和25℃之间。加入水(5ml)，随后是K₂CO₃(2.2g)，同时维持温度在15和25℃之间。搅拌10min后，加入(Boc)₂O(5.5ml)，同时维持温度在15和25℃之间。于15和25℃之间的温度搅拌该混合物4hr。经HPLC-2监测反应完成(spec＜3％)。加入水(40ml)，同时维持温度低于25℃，并将得到的浆状物冷却至10℃和搅拌1hr。过滤产物并用CH₃OH和水(25ml)的1∶3混合物洗涤和干燥，得到5.3g的固体(87％收率)。¹H NMR(400MHz，DMSO d₆)δ7.21(2H，br s)，5.94(1H，d，J＝9.5)，5.44(1H，d，J＝6.3)，3.73(1H，dd，J＝3.1，6.2)，3.63(1H，m)，2.27(1H，m)，2.00(2H，m)，1.77(2H，m)，1.60(3H，m)，1.43(1H，m)，1.36(9H，s)。
实施例20
(制备G’(RS和SR对映体的1∶1的混合物))
在压力罐中，向固体F’F-HCl(10g)中填充冷的、于CH₃OH(200ml)中的7N NH₃。在压力罐中，于60℃下搅拌得到的溶液5h。于温度低于30℃、真空下将反应混合物浓缩至最小体积。加入CH₃OH(60ml)和水(20ml)，随后加入K₂CO₃(6.6g，1eq.)，同时维持温度在15和25℃之间。搅拌10min后，填充(Boc)₂O(11ml，1.1eq.)，同时维持温度在15和25℃之间。于15℃和25℃之间的温度搅拌该混合物4-15hr。通过HPLC-2监测反应是否完成(spec＜2％)。加入水(50ml)，同时维持温度低于25℃，并将得到的浆状物冷却至5℃和搅拌2hr。过滤产物并用CH₃OH和水(50ml)的1∶2混合物洗涤和干燥，得到11.2g的固体化合物G(92％收率)。¹H NMR(400MHz，DMSO d₆)δ7.21(2H，br s)，5.94(1H，d，J＝9.5)，5.44(1H，d，J＝6.3)，3.73(1H，dd，J＝3.1，6.2)，3.63(1H，m)，2.27(1H，m)，2.00(2H，m)，1.77(2H，m)，1.60(3H，m)，1.43(1H，m)，1.36(9H，s)。
实施例21
(制备式IA化合物-(RS和SR对映体的1∶1的混合物))
向实施例20的化合物(5.0g)中加入IPA(40ml)，随后加入于IPA(10ml)中的5-6N HCl。将得到的浆状物加热至50℃和搅拌4hr。将浆状物冷却至RT和搅拌1hr。过滤产物并用MTBE(25ml)洗涤和干燥，得到3.72g的固体(97％收率)。¹H NMR(400MHz，DMSO d₆)δ3.98(1H，d，J＝3.7)，3.1(1H，m)，2.4(1H，m)，2.02(2H，m)，1.77(2H，m)，1.6(4H，m)。
实施例22
(制备式IA化合物-(RS和SR对映体的1∶1的混合物))
向化合物F’-BA(实施例14，15)(60g)中加入由240ml的水和22.8ml的浓HCl制备的、预-冷却的HCl水溶液。加入MTBE(180ml)和将得到的双相混合物搅拌10min。分离水层和用MTBE(120ml)反萃取。用盐水(30ml)洗涤合并的有机相，分离有机层和浓缩至最小体积。用MTBE(180ml)稀释得到的油和浓缩至最小体积。用CH₃OH(600ml)稀释得到的油，并在含10％Pd/C(50％湿重)(2g)的氢化器中氢化。然后在氢气压(90psi)于50度下使溶液氢化。15hr后，取样用于HPLC(硝基化合物消失)。当反应完成时，加入于CH₃OH中的无水HCl(1.2eq.，由16.5ml的AcCl在120ml的CH₃OH中制备)。加入C盐(2.0g)和搅拌该混合物30min。过滤得到的混合物并用CH₃OH(39ml)洗涤，然后加热至60度计16hr。通过NMR监测反应是否完成：spec为＜2％。
将得到的溶液浓缩至80ml的体积并将其冷却至低于20℃。加入CH₃OH(40ml)，THF(110ml)和NH₄OH(29％，于水中)(80ml)。于0℃至RT搅拌15h后，加入THF(118ml)、2-甲基四氢呋喃(118ml)和盐水(79ml)。搅拌该混合物30min。分离比较低的水层并用THF(118ml)和2-甲基四氢呋喃(59ml)的混合物反萃取两次。将合并的有机物浓缩至120ml的体积。用IPA(393ml)稀释得到的混合物并冷却至10℃。向得到的浆状物中加入于IPA(53ml)中的5N HCl。搅拌1hr后，过滤产物并用MTBE(197ml)洗涤和干燥，得到26.2g的固体式I化合物(69％收率))。¹H NMR(400MHz，DMSO d₆)δ3.98(1H，d，J＝3.7)，3.1(1H，m)，2.4(1H，m)，2.02(2H，m)，1.77(2H，m)，1.6(4H，m)。
尽管已经结合以上所列的具体实施方案对本发明进行描述，但是这些实施例意为阐述性的而并不是限制性的。许多变更、修订和其它变化将对于本领域的普通技术人员是显而易见的。所有这样的变更、修订和变化意欲纳入本发明的精神和范畴之内。