一种生产高活性真菌Α淀粉酶的方法.pdf

本发明公开了一种利用花生四烯酸工业废弃菌丝体生产高活性真菌α-淀粉酶的方法，是以花生四烯酸工业废弃菌丝粉代替价格昂贵的蛋白胨等氮源作为培养基基质，利用米曲霉菌株固态发酵生产高活性真菌α-淀粉酶。本发明操作简单易行，生产条件温和，能耗低，无二次污染，实现了工业废弃物的无害化、减量化、资源再生利用化。

1.  一种利用花生四烯酸工业废弃菌丝体生产高活性真菌α-淀粉酶的方法，是将发酵生产花生四烯酸后的废弃发酵菌丝体作为发酵培养基基质生产高活性真菌α-淀粉酶，其特征在于：具体包括以下步骤：
(1)、对发酵生产花生四烯酸后的废弃发酵菌丝体进行干燥处理，得到菌丝体粉；
(2)、以菌丝体粉为氮源，按1∶0.5-10的重量份比与麸皮混合得混合料，然后将混合料按1∶1-3的重量份比与表面活性剂溶液充分混匀得培养基，然后在120-125℃灭菌25-35分钟；
(3)、将真菌α-淀粉酶的米曲霉菌株接种于灭菌后的培养基上，接种量为10-50％，发酵温度28-34℃，发酵时间3-6天，然后浸提α-淀粉酶，得到粗酶液；
(4)、将粗酶液经醇提、过滤、冷冻干燥得酶饼。

2.  根据权利要求1所述的利用花生四烯酸工业废弃菌丝体生产高活性真菌α-淀粉酶的方法，其特征在于：所述的表面活性剂溶液选用吐温-80，质量浓度为0.5-1.5％；所述的醇提是将粗酶液按酶与乙醇的重量份比为1∶1.5-2.5的比例进行醇提。

一种生产高活性真菌α-淀粉酶的方法
技术领域
本发明涉及废弃资源再生利用技术领域，具体是一种利用花生四烯酸工业废弃菌丝体生产高活性真菌α-淀粉酶的方法。
背景技术
真菌α-淀粉酶是一种广泛地应用于淀粉糖浆、低聚糖、啤酒、烘焙食品、面制品工业生产的重要酶制剂，销售额占酶制剂市场的20％以上。目前，真菌α-淀粉酶的生产技术为少数几个国际大公司所垄断，我国自主生产能力较弱，每年都要大量进口，且价格昂贵。
而目前国内真菌α-淀粉酶研发生产的瓶颈是高产菌株的获得和昂贵的工业化生产成本。国内报道的真菌α-淀粉酶的酶活水平仅为200～600μ/g，而世界上处于领先地位的几家酶制剂公司真菌α-淀粉酶的酶活水平已达到1500～2000μ/g。并且由于真菌α-淀粉酶固体发酵过程中所必须添加的氮源多为价值较高的蛋白胨，酵母粉等，限制了工业化生产。
因此，研制开发生产高活性真菌α-淀粉，降低产业成本，尽快实现大规模国产化生产，对于满足市场需求，调整我国酶制剂工业的产业结构，节约外汇支出等都具有十分重要的意义。
食品工业废弃物是一类特殊垃圾，含有大量的营养物质，但因为其营养丰富，容易成为各种病菌的温床，并且容易腐烂变质造成环境污染。如果不对这些废弃物进行综合利用，势必造成资源的浪费和环境的严重污染。
花生四烯酸是人体必备不饱和脂肪酸，但由于人体不能自身合成，主要依赖于从饮食中摄取。在食品市场上有很大的需求量。而工业化发酵生产花生四烯酸的同时，也造成了大量的发酵废弃物的产生。对这些废弃发酵菌丝体进行妥善处理、开发和再生利用，不但可以消除环境污染，还可以减少蛋白胨，酵母膏的用量，降低生产成本。因此，加强对废弃发酵菌丝体的开发、利用，具有很大的经济效益和社会效益。
发明内容
本发明提供了一种利用花生四烯酸工业废弃菌丝体生产高活性真菌α-淀粉酶的方法，降低了生产成本，且操作简单易行，生产条件温和，能耗低，无二次污染。
本发明的技术方案为：
一种利用花生四烯酸工业废弃菌丝体生产高活性真菌α-淀粉酶的方法，是将发酵生产花生四烯酸后的废弃发酵菌丝体作为发酵培养基基质生产高活性真菌α-淀粉酶，其特征在于：具体包括以下步骤：
(1)、对发酵生产花生四烯酸后的废弃发酵菌丝体进行干燥处理，得到菌丝体粉；
(2)、以菌丝体粉为氮源，按1∶0.5-10的重量份比与麸皮混合得混合料，然后将混合料按1∶1-3的重量份比与表面活性剂溶液充分混匀得培养基，然后在120-125℃灭菌25-35分钟；
(3)、将真菌α-淀粉酶的米曲霉菌株接种于灭菌后的培养基上，接种量为10-50％，发酵温度28-34℃，发酵时间3-6天，然后浸提α-淀粉酶，得到粗酶液；
(4)、将粗酶液经醇提、过滤、冷冻干燥得酶饼。
所述的利用花生四烯酸工业废弃菌丝体生产高活性真菌α-淀粉酶的方法，其特征在于：所述的表面活性剂溶液选用吐温-80，质量浓度为0.5-1.5％；所述的醇提是将粗酶液按酶与乙醇的重量份比为1∶1.5-2.5的比例进行醇提。
本发明所述的菌丝粉中含有粗蛋白含量15-45％，水分含量5-10％，总糖含量20-40％，氨基氮含量1-5％，并且还富含氮、磷、钾、钙以及各种微量元素，且均为天然营养物，较易被微生物吸收利用，具有营养元素齐全、再利用价值高的特点。
本发明不仅成功解决了花生四烯酸工业废弃物的处理问题，降低了生产成本和环境污染，而且成功地利用花生四烯酸工业废弃菌丝体粉，代替了造价昂贵的工业营养物质作为生产高活性真菌α-淀粉酶的原料，利用高活性米曲霉菌株生产出真菌α-淀粉酶。
本发明利用米曲霉菌株，生产出高活性的真菌α-淀粉酶，已达到国际先进水平，而且成功实现了生产成本的降低，为我国淀粉酶工业化生产奠定了基础。具有很大的经济效益和社会效益。
本发明操作简单易行，生产条件温和，能耗低，无二次污染，实现了工业废弃物的无害化、减量化、资源再生利用化。
附图说明
图1是本发明的工艺流程图。
具体实施方式
本发明所用花生四烯酸工业废弃菌丝体粉为武汉烯王生物工程有限公司提供。
一种利用花生四烯酸工业废弃菌丝体生产高活性真菌α一淀粉酶的方法：
(1)、对发酵生产花生四烯酸后的废弃发酵菌丝体进行干燥处理，得到菌丝体粉；
(2)、以菌丝体粉为氮源，按1∶0.5-10的重量份比与麸皮混合得混合料，然后将混合料按1∶1-3的重量份比与质量浓度为1％的表面活性剂溶液(吐温-80)充分混匀得培养基，然后在121℃灭菌30分钟；
(3)、将真菌α-淀粉酶的米曲霉菌株接种于灭菌后的培养基上，接种量为10-30％，发酵温度28-34℃，发酵时间3-6天，然后浸提α-淀粉酶，得到粗酶液；
(4)、将粗酶液按酶与乙醇的重量份比为1∶2的比例进行醇提、过滤、冷冻干燥得酶饼。