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1、10申请公布号CN102461463A43申请公布日20120523CN102461463ACN102461463A21申请号201010553897222申请日20101117A01H4/0020060171申请人湖北国力生物技术开发有限公司地址430074湖北省武汉市东湖新技术开发区珞瑜东路慧谷时空402室72发明人张云峰陈晓炜谢明利胡伶俐54发明名称一种适用于大规模种植的构树种苗组织培养方法57摘要属于植物繁殖领域。本发明公开了一种适用于大规模种植构树的组织培养方法，是将顶端胚芽在萌发培养基上长出幼芽后，接种在芽诱导培养基上繁殖，长出腋芽和不定芽后得到无根苗，然后将生长健壮的无根苗转接到。
2、生根培养基上进行不定根诱导。所述的培养基组分分别为萌发培养基DCR；芽诱导培养基在萌发培养基上加入6BA和NAA，根诱导培养基在萌发培养基上加入6苄氨基嘌呤6BA、萘乙酸NAA和吲哚丁酸IBA。经过诱导增殖，大多数不定芽叶片肥厚，茎干膨大，经过数轮继代培养后，芽生长正常。本发明具有变异率低，增殖系数高的优点，炼苗成活率达到90以上，适用于大规模种植构树的种苗提供，具有良好的经济效益和社会效益。51INTCL权利要求书1页说明书3页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书3页1/1页21一种适用于大规模种植的构树种苗组织培养方法，特征在于包括胚芽预处理，芽的诱导培养，。
3、根的诱导培养以及移栽培植等步骤。2根据权利要求1所述的组织培养方法，其特征在于将构树顶芽在萌发培养基中培养，萌发培养基为DCR培养基。3根据权利要求1所述的组织培养方法，其特征在于将萌发培养基中培养得到的幼芽在芽诱导培养基上进行不定芽诱导和继代培养，得到无根苗。4根据权利要求3所述的组织培养方法，所述的芽诱导培养基是在萌发培养基中添加6BA和NAA得到的培养基。所述6BA的浓度为0120MG/L，NAA的浓度为0105MG/L。5根据权利要求1所述的组织培养方法，其特征在于芽诱导培养之后进行不定根诱导培养。不定根诱导培养基是在萌发培养基中添加6BA、NAA和IBA得到的培养基。所述6BA的浓度。
4、为0225MG/L，NAA的浓度为0110MG/L，IBA的浓度为0103MG/L。6根据权利要求1所述的组织培养方法，其特征在于所述萌发培养的条件为温度252，光照时间1214H/D，光照强度15002000LX；芽诱导培养的条件为温度252，光照时间1416H/D，光照强度15002000LX；根诱导培养条件为温度252，光照时间1012H/D，光照强度20002500LX。权利要求书CN102461463A1/3页3一种适用于大规模种植的构树种苗组织培养方法技术领域0001本发明主要是涉及一种适用于大规模种植的构树种苗组织培养方法，属于植物繁殖领域。背景技术0002构树是我国特有的含纤维。
5、树种，属特种经济林，其韧皮纤维和树叶等利用价值极高，市场开发前景广阔。它分布广，适应性极强，繁殖容易，耐干旱瘠薄，又是很好的生态和薪材树种。构树的叶片中蛋白质含量非常高，可达到2030，远高于大米、玉米、小麦，仅次于大豆；另外氨基酸、维生素、碳水化合物以及微量元素含量都非常丰富，是生产加工畜类饲料的纯天然原料，用该饲料喂养的猪，瘦肉率高，肉质纯正，味道鲜美，堪称为真正的畜类绿色食品。加速培育构树，扩大构树资源是保证宣纸制造和饲料加工业持续发展的重要基础，也是增加农民收益的重要途径。0003当前，国内外学者对构树的研究主要集中于造纸原料和药理成分等方面，远未发挥其应有的生态效益和经济效益，构树优。
6、良种源的引进与选育、应用研究等方面急需加强科研开发力度。所以，开展构树良种选育和组培快繁研究，利用现代生物技术手段，在建立组培再生和遗传转化的基础上，选育出适合在全国范围内推广种植的优良新品种是目前研究的重要方面。发明内容0004本发明的目的在于提供一种适用于大规模种植构树的组织培养方法，该培养方法包括芽诱导培养和不定根诱导培养。经过数轮继代培养后，芽生长正常，炼苗成活率达到90以上，可以显著提高构树叶的产量。0005本发明的方法，采用如下步骤00061材料的处理。采来的构树顶端胚芽，要经过无菌处理，才能进行诱导试验。00072芽的诱导。经表面灭菌处理好的材料接种在空白萌发培养基上，然后转入诱。
7、导培养基上进行诱导试验，每瓶接种一个腋芽，3周后记录并计算诱导率，确定繁殖系数。00083根的诱导。芽诱导培养之后进行不定根诱导培养。在萌发培养基中添加6BA、NAA和IBA得到不定根诱导培养基。试验选用IBA为诱导生根激素，浓度为01MG/L。3周后记录并计算诱导率。00094移栽。诱导出根的小苗，需移栽到泥炭细沙混合培养基质中，栽培炼苗，然后移栽到室外大田上。四周后统计移栽成活率。0010在上述方法中，步骤1材料要用棉花团醮加入了少量洗洁精的水液轻擦枝条及其液芽处，自来水冲洗12H，在超净工作台上，70酒精灭菌30S，无菌水冲洗34次，01升汞灭菌34MIN，无菌水冲洗34次。0011在上。
8、述方法中，步骤2培养条件温度252，光照时间14H/D，光照强度1500LX，培养基PH58，蔗糖30G/L，卡拉胶64G/L，灭菌温度121，灭菌时间1820MIN。说明书CN102461463A2/3页40012在上述方法中，步骤3培养条件为温度252，光照时间10H/D，光照强度2000LX，灭菌温度121，灭菌时间1820MIN。0013在上述方法中，步骤4根必须长05CM时才能移栽，培养条件为温度252，湿度65。0014本发明以构树的顶端胚芽为外植体，经过培养基的筛选，制成了诱导的专用培养基，成功的建立了构树组织培养育苗的全套体系，为构树大量组织培养快速繁殖提供了一条可靠的技术和方。
9、法。0015本发明的积极效果是采用组织培养方法，繁殖系数达67倍，在短期内能提供大量的优质种苗，加快了构树推广应用的速度。与同类方法相比具有很大优势。如根插育苗虽然比较容易操作，但是会严重损害母株，枝插繁殖生根困难，成活率低；种籽育苗方法中由于构树种子较小，种皮坚硬，常规田间发芽率不足4，造成种子的大量浪费和造林中构树种苗的缺乏。所以本发明具有很强的实用意义，采用组织培养法繁育种苗，实现矮、密、早、丰栽种管理技术，可实现一年种树，第二年见成效，为大规模构树育种提供了快速有效途径。具体实施方式0016下面通过具体实施例对本发明作进一步的说明0017实施例10018取采来的健康饱满的构树顶端胚芽材。
10、料，用棉花团醮加入了少量洗洁精的水液轻擦枝条及其液芽处，自来水冲洗15H，在超净工作台上，70酒精灭菌30S，无菌水冲洗3次，01升汞灭菌3MIN，无菌水冲洗3次。经表面灭菌处理好的材料接种在空白DCR萌发培养基上，置于光照培养箱中培养。实验分别取50个顶端胚芽，设3组重复进行实验，在温度252，光照时间12H/D，光照强度1500LX条件下培养3周，以长出幼叶为萌发标准统计萌芽率。然后取苗高1030CM的萌发小苗50株，剪成510MM长度的带叶茎段，转入诱导培养基上进行诱导试验，每瓶接种一个腋芽，培养条件为温度252，光照时间14H/D，光照强度1800LX，培养基PH58，6BA20MG/。
11、L，NAA05MG/L，蔗糖30G/L，卡拉胶64G/L，灭菌温度121，灭菌时间20MIN。3周后记录并计算诱导率。芽诱导培养之后进行不定根诱导培养。在萌发培养基中添加6BA02MG/L，NAA01MG/L，IBA01MG/L得到不定根诱导培养基。在温度252，光照时间10H/D，光照强度2200LX，培养6周。当诱导出得根长05CM时移栽到泥炭细沙混合培养基质中，在温度252，湿度65的条件下培养4周，之后逐渐加大光照强度，植株成活率可达91。待植株发育成熟后，将其植入室外大田上种植。0019实施例20020取采来的健康饱满的构树顶端胚芽材料，用棉花团醮加入了少量洗洁精的水液轻擦枝条及其液。
12、芽处，自来水冲洗15H，在超净工作台上，70酒精灭菌30S，无菌水冲洗3次，01升汞灭菌3MIN，无菌水冲洗3次。经表面灭菌处理好的材料接种在空白DCR萌发培养基上，置于光照培养箱中培养。实验分别取50个顶端胚芽，设3组重复进行实验，在温度252，光照时间14H/D，光照强度1800LX条件下培养3周，以长出幼叶为萌发标准统计萌芽率。然后取苗高1030CM的萌发小苗50株，剪成510MM长度的带叶茎段，说明书CN102461463A3/3页5转入诱导培养基上进行诱导试验，每瓶接种一个腋芽，培养条件为温度252，光照时间16H/D，光照强度2000LX，培养基PH58，6BA10MG/L，NAA03MG/L，蔗糖20G/L，卡拉胶64G/L，灭菌温度121，灭菌时间20MIN。3周后记录并计算诱导率。芽诱导培养之后进行不定根诱导培养。在萌发培养基中添加6BA03MG/L，NAA02MG/L，IBA02MG/L得到不定根诱导培养基。在温度252，光照时间12H/D，光照强度2400LX，培养6周。当诱导出得根长05CM时移栽到泥炭细沙混合培养基质中，在温度252，湿度65的条件下培养4周，之后逐渐加大光照强度，植株成活率可达94。待植株发育成熟后，将其植入室外大田上种植。说明书CN102461463A。