一种土沉香半木质化嫩枝扦插育苗的方法 【技术领域】
本发明涉及一种土沉香半木质化嫩枝扦插育苗的方法， 属于植物无性繁殖技术领域。 背景技术 土沉香 (Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg) 为瑞香科沉香属植物， 多年生热带和 亚热带常绿乔木。 土沉香为我国特有的珍贵药用植物， 是我国生产沉香的重要植物资源， 被 列为国家濒危三级保护植物、 国家二级重点野生保护植物。 近年来， 由于土沉香自然繁殖率 低、 虫害和人为的乱砍滥伐等， 致使野生资源严重匮乏， 现仅零星分布于海南、 广东、 广西、 福建以及台湾等省区。土沉香野生优树结实率低， 不易获得大量优质种子， 且种子不宜保 存， 易丧失活力， 使得通过有性繁殖经营及发展人工林的进程变得缓慢和困难。
通过扦插繁殖， 能够解决种子不足和遗传分化大的问题， 为白木香资源保存和开 发利用开辟新的途径。 国内， 在土沉香扦插繁殖技术研究上报道很少， 仅云南省林科院和海
南省林科所开展了初步研究， 结果表明土沉香可进行扦插， 但生根率很低， 而对其进行深入 系统研究未见报道。近几年， 中国林业科学研究院热带林业研究所在国家 “十一五” 科技支 撑项目的资助下， 实地考察了云南省林科院， 海南省林科所及一些苗木经营企业开展土沉 香扦插育苗情况， 开展了相关研究， 发表了研究简报 ( 不同植物生长调节剂对白木香扦插 生根的影响， 林业科学研究， 2010， 23(2) ： 278 ～ 282)， 但仍然面临生根率低、 成苗质量不高 的问题。申请号为 200810100568.5、 名称为 “白木香扦插繁殖方法” 的国家专利申请书中所 用材料及扦插时间 ( 全年均可 )， 经多次反复实践， 其扦插生根率较低， 不同月份扦插的生 根率差异大 ； 所要求扦插基质以苔藓为主， 成本较高， 此外要求扦插后一个月内需喷施生根 促进剂， 使成本明显增加 ； 在扦插苗成活上， 仅以生根率指标评定， 受到很大限制， 不能全面 衡量扦插苗的生根质量。 发明内容 本发明的目的在于克服现有技术的缺点与不足， 提供一种成本低、 成活率高、 苗木 质量好、 所需时间短、 稳定可靠、 容易推广且能保持母株优良性状的土沉香半木质化嫩枝扦 插育苗的方法。
本发明的发明目的通过下述技术方案实现 ： 一种土沉香半木质化嫩枝扦插育苗的 方法， 包含以下步骤 ：
(1) 穗苗的准备 ： 采集野生优树的白木香种子， 进行播种育苗， 然后选择优良幼 苗， 营建采穗圃 ； 笠年， 对采穗圃中的苗木， 在距离地面不小于 15cm 处进行修剪， 在修剪的 苗茎处涂抹 6-BA(6- 苄氨基嘌呤 ) 以促萌发嫩枝 ； 待嫩枝生长呈半木质化时可进行取材 ；
(2) 基质的准备 ： 将黄心土、 泥炭土、 蛭石按体积比 3 ∶ 2 ∶ (1 ～ 2) 充分混合均 匀， 得到基质 ；
(3) 插穗的制备 ： 选择上午 (7:00 ～ 9:00)、 光照较低 ( ≤ 10000lux) 时， 取步骤
(1) 得到的半木质化的嫩枝， 将其剪成长为 10 ～ 15cm， 保留最顶部 3 个叶片， 每片叶保留 2/5 叶面积 ； 插穗上切口为平口， 以减少水分散失， 下端斜切并尽量靠近叶节处 ； 接着清洗 插穗， 进行消毒， 再将插穗下部放入配制好的植物生长调节剂处理液中， 然后再扦插于基质 中；
(4) 扦插后管理 ： 扦插完毕后， 扦插环境保持温度为 15 ～ 30℃、 相对湿度不小于 75％ ； 同时， 对扦插环境进行消毒 ； 得到土沉香扦插苗。
所述土沉香半木质化嫩枝扦插育苗的方法， 更优选为包含以下步骤 ： 得到土沉香 扦插苗后再通过隶属函数法对土沉香插穗的生根率、 发根数量、 最长根长以及偏根率进行 综合评价， 得到质量优良的土沉香扦插苗 ； 用于综合评价的隶属函数值 [X(u1)， X(u2)] 计 算方程为 ：
X(u 1) ＝ [X-Xmin]/[Xmax-Xmin] (1)
X(u2) ＝ 1-[X-Xmin]/[Xmax-Xmin] (2)
其中， X 为某个评价指标的测定值 ； Xmax 为某个评价指标得到的所有数据的最大 值； Xmin 为某个评价指标得到的所有数据的最小值 ； 所述的评价指标包括生根率、 发根数 量、 最长根长和偏根率 ； 最后将所有评价指标的隶属函数累加起来 ；
若所测评价指标与扦插苗质量呈正相关， 则采用 (1) 式计算隶属值， 反之则用 (2) 式； 累加各处理各评价指标的具体隶属值， 累加值越大， 得到的土沉香扦插苗的质量越好。
步骤 (1) 中所述野生优树优选为胸径不小于 60cm、 树高不小于 20m 的野生树木 ；
步骤 (1) 中所述优良幼苗优选地径不小于 0.6cm、 苗高不小于 60cm 的 10 ～ 12 个 月的幼苗 ；
步骤 (1) 中所述 6-BA(6- 苄氨基嘌呤 ) 的浓度优选为 100mg·L-1 ；
步骤 (2) 中所述的基质优选将其置于长 540mm、 宽 280mm、 深 110mm 规格 50 穴苗盘， 扦插前 2 天用质量百分比 0.3％的高锰酸钾溶液对基质进行淋灌消毒， 以淋透基质为准 ； 长 540mm、 宽 280mm、 深 110mm 规格 50 穴苗盘的优点在于容易装基质， 节省空间， 成苗后根系团 在一起， 方便造林， 提高成活率 ；
步骤 (3) 所述插穗的制备月份优选为 4 月份 ；
步骤 (3) 中所述清洗的方式优选为在流水中冲洗 5min ；
步骤 (3) 中所述的消毒优选为是用质量百分比 0.1％的高锰酸钾溶液消毒 1min， 再用蒸馏水冲洗干净 ；
步骤 (3) 中所述的植物生长调节剂处理液优选为 IAA( 吲哚乙酸 ) 或 IBA( 吲哚丁 酸)； 更优选为浓度为 2500mg·L-1 的 IAA 或浓度为 1500mg·L-1 的 IBA ；
步骤 (3) 中所述将插穗下部放入配制好的植物生长调节剂处理液中的时间优选 为速蘸 8 ～ 15s ；
步骤 (3) 中所述扦插的方式优选为直插法， 即将插穗竖直插入穴盘基质中， 每穴 扦插 1 株插穗 ；
步骤 (3) 中所述扦插的方式更优选为扦插前先用竹条在基质上打一引导洞， 深度 为 3 ～ 4cm， 再将插穗竖直插入穴盘基质中， 每穴扦插 1 株插穗 ； 插后将其周围基质稍加压 实并浇透水 ；
步骤 (4) 中所述消毒的具体方法为每隔 3 ～ 4 天分别用质量百分比为 0.1％的高锰酸钾溶液和 1000 倍多菌灵进行交替消毒 ； 20 天以后， 按此浓度交替消毒， 每周 1 次。
本发明具有如下的优点及效果 ：
本发明成本低、 成活率高、 苗木质量好、 繁殖速度快， 能够解决种子不足问题， 另外 所选材料均为野生优树实生苗， 此法能够保持母株的优良性状。总体而言， 本发明容易推 广， 具有广阔的发展前景。 具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述， 但本发明的实施方式不限于此。
实施例 1
(1) 穗苗的准备 ： 采集野生优树 ( 胸径≥ 60cm， 树高≥ 20m) 的土沉香种子 ( 来源 为海南省 )， 进行种子育苗， 再选择优良幼苗 ( 地径≥ 0.6cm， 苗高≥ 60cm) 营建采穗圃 ； 当 幼苗生长到第二年时， 在距离地面≥ 15cm 处进行修剪， 在修剪的苗茎处涂抹 6-BA 以促萌发 嫩枝 ； 待嫩枝生长呈半木质化时可进行取材。
(2) 插穗的选取与处理 ： 4 月份， 选择上午 (7:00 ～ 9:00)、 光照较低 ( ≤ 10000lux) 时， 取步骤 (1) 得到的采穗圃 2 年生实生苗当年萌发的半木质化枝条， 将其剪成 10 ～ 15cm 长， 保留最顶部 2 ～ 3 个叶片， 每片叶保留 2/5 叶面积 ； 插穗上切口为平口， 以减少水分散 失， 下端斜切并尽量靠近叶节处。 (3) 基质处理与容器选择 ： 将黄心土、 泥炭土、 蛭石按体积比 3 ∶ 2 ∶ 1 充分混合均 匀， 得到基质 ； 接着将基质装入容器， 扦插前 2 天用质量百分比 0.3％的高锰酸钾溶液进行 淋灌消毒， 以淋透基质为准。本操作扦插容器采用长 540mm、 宽 280mm、 深 110mm 规格 50 穴 苗盘， 其优点在于容易装基质， 节省空间， 成苗后根系团在一起， 方便造林， 提高成活率。
(4) 扦插与插后管理 ： 将 IAA 或 IBA 用 20mL 无水乙醇溶解， 然后配制成 200mL -1 -1 IAA(2500mg·L ) 或 IBA(1500mg·L ) 处理用溶液。将步骤 (2) 制备好的插穗放入流水中 冲洗 5min， 取出放入质量百分比 0.1％的高锰酸钾溶液中消毒 1min 后用蒸馏水冲洗干净， 然后将插穗下部放入前述配制置好的 IAA 或 IBA 处理用溶液中， 速蘸 10s， 待酒精挥发后进 行扦插。采用直插法， 即将插穗竖直插入穴盘基质中， 每穴扦插 1 株插穗。为防止扦插时损 伤插穗， 扦插前先用竹条在基质上打一引导洞， 深度为 3 ～ 4cm， 插后将其周围基质稍加压 实并浇透水。 本操作在温室中扦插， 扦插完毕后， 苗床上搭盖小拱棚， 其上盖塑料薄膜， 保持 扦插环境湿度。温室中大部分强光已被温室遮荫网滤掉， 但在阳光充足的中午仍需用透光 率为 35％的遮荫网进行遮荫， 以防插穗叶片蒸腾过大， 插穗失水而干枯。扦插后， 每隔 3 ～ 4 天分别用质量百分比 0.1％的高锰酸钾溶液和 1000 倍多菌灵进行交替消毒 ； 20 天以后， 按此浓度交替消毒， 每周 1 次 ； 同时每天进行喷雾， 控制空气湿度在 80％以上， 以插穗上部 湿润鲜活为度。进行三次重复试验。
(5) 同时， 设置对照试验 ( 各进行三次重复试验 ) ：
A 组对照为采用非 2 年生实生苗当年萌发的半木质化嫩枝枝条， 其他步骤同实施 例1；
B 组对照为不同的育苗容器， 其他步骤同实施例 1 ；
C 组对照为不同的扦插部位， 其他步骤同实施例 1 ；
D 组对照为不同配方的基质， 其他步骤同实施例 1 ；
E 组对照为不同的扦插季节， ， 其他步骤同实施例 1 ；
其中 B 组～ E 组对照的材料均为 2 年生当年萌发的半木质化嫩枝， 具体实验设计 如表 1 所示 ：
表1
(6) 结果 ： 经过本发明所述方法扦插， 在插后第 7 天， 插穗下切口处皮孔膨大并伴 有白色絮状愈伤组织产生 ； 14 天后大部分插穗下切口处皮孔膨大开裂， 同时出现较多愈伤 组织， 将切口韧皮部与木质部连接起来 ； 扦插第 20 天， 插穗愈伤组织增至最多， 有些甚至覆 盖整个切口 ； 在插后第 35 天， 插穗离其切口上部 0.1cm ～ 0.5cm 区域内有白色芽状不定根 产生 ； 插后第 50 天， 插穗陆续生根。各对照组在扦插 10 天后， 插穗下切口陆续产生愈伤组 织， 且在 40 天以后有不定根的产生， 有些在调查时仍未发根， 生根周期较长。
扦插 6 个月时， 对扦插植株生根质量指标 ( 生根率、 发根数量、 最长根长、 偏根率 ) 进行调查， 并利用隶属函数法对生根率、 发根数量、 最长根长以及偏根率进行扦插苗综合评 价。采用本发明的技术措施扦插苗的综合评定值即隶属函数值高达 3.04， 其生根率可达 -1 75％以上， 发根数量大于 10 条· 穗 ， 最长根长 12.3cm 以上， 且偏根率小于 25％， 苗木质量
显著高于各对照组处理， 各对照试验组结果如表 2 所示。
表2
注： 隶属函数法， 用于分析的隶属函数值 [X(u1)， X(u2)] 计算方程为 ：
X(u1) ＝ [X-Xmin]/[Xmax-Xmin] (1)
X(u2) ＝ 1-[X-Xmin]/[Xmax-Xmin] (2)
其中， X 为某个评价指标的测定值 ； Xmax 为某个评价指标得到的所有数据的最大 值； Xmin 为某个评价指标得到的所有数据的最小值 ； 所述的评价指标包括生根率、 发根数 量、 最长根长和偏根率 ； 最后将所有评价指标的隶属函数累加起来 ； 若所测指标与扦插苗 质量呈正相关， 则采用 (1) 式计算隶属值， 反之则用 (2) 式 ； 累加各处理各指标的具体隶属 值， 累加值越大， 得到的土沉香幼苗的质量越好。
通过隶属函数法对插穗生根质量进行综合评价， 本发明所采用的方法隶属函数值 高， 对其扦插苗进行移栽， 成活率高达 95％以上， 且后期生长健壮。
本发明以常见的黄心土、 泥炭土、 蛭石为扦插基质， 成本低廉， 且扦插容器可重复 利用， 节约大量成本。经过本方法进行土沉香的扦插， 插穗生根质量好， 在插后 35 天即可生 根， 6 个月即可移栽， 所需时间短， 能够保持优良性状， 稳定可靠， 容易推广。
上述实施例为本发明较佳的实施方式， 但本发明的实施方式并不受上述实施例的 限制， 其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、 修饰、 替代、 组合、 简化， 均应为等效的置换方式， 都包含在本发明的保护范围之内。
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