链阳性菌素衍生物、其制备方法及其组合物.pdf

下述通式(I)的A类链阳性菌素衍生物，式中：R1代表卤素原子或叠氮基或氰硫基；R2代表氢原子或甲基或乙基；R3代表氢原子或可以取代的脂族、脂环族、芳族、芳脂族、杂环或杂环基脂族酯基；键∴代表单键(立体化学27R)或双键，及其可能存在的盐。

1、一种药物组合物，含有下述通式所示的A类链阳性菌素衍生物，式中：-R代表卤素原子或叠氮基或氰硫基，-R代表氢原子或甲基或乙基，-R代表氢原子或基团R′-CO-，其中R′是在苯基上未被取代或被取代的苯基或苯基烷基[被选自烷基的基团取代，它们任选地带有基团NR′R″，其中基团R′和R″相同或不同，是氢原子或烷基，或者该烷基与它们连接的氮原子一起形成具有3-8节链的饱和或不饱和杂环基，任选地含有选自氧、硫或氮的其他杂原子，所述杂环本身未被取代或者被基团(烷基、羟基烷基)取代，或R′和/或R″是羟基烷基、具有3-8节链的饱和或不饱和的杂环基烷基]，或R′是被基团[选自烷基，它未被取代或者被任选地本身带有羧基或如前面所定义的NR′R″基团的烷氧基或烷基硫取代，或选自被如前面所定义的NR′R″取代的酸基]取代的苯基或苯基烷基，或R′选自任选地[被羧基、羧基烷基二硫烷基或被基团NR′R″、-CH-NR′R″、-CO-NR′R″，或被任选地被NR′R″、-CO-NR′R″取代的烷氧基羰基、烷氧基或烷基二硫烷基(其中基团R′和R″相同或不同，是氢原子或烷基，或者该烷基与它们连接的氮原子一起形成具有3-8节链的饱和或不饱和杂环基，任选地含有选自氧、硫或氮的其他杂原子，所述杂环本身未被取代或者被基团(烷基、羟基烷基、烷氧基烷基、烷氧基羰基烷基、芳基、杂环基、具有3-8节链的饱和或不饱和杂环烷基或-CH-CO-NR′R″)取代，或R′和/或R″是羟基烷基、具有3-8节链的饱和或不饱和的杂环基烷基，其中NR′R″如前面所定义的-CO-NR′R″，或用如前面定义的NR′R″取代的烷基或酰基)]取代的烷基，或R′选自任选地被[其本身任选地由NR′R″取代的烷基或酰基]取代的具有3-8节链的饱和或不饱和杂环基，-键....代表单键(立体化学27R)或双键，其中，上述未限定碳原子数的烷基、烷氧基、烷基硫或酰基具有1-12个碳原子，杂环基选自吡咯烷基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、吡啶基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基和咪唑烷基，其中该衍生物为纯态或呈与至少一种B类链阳性菌素衍生物组合形式，或呈盐形式和/或呈与一种或多种相容的和药学可接受的稀释剂或添加剂组合形式。 2、根据权利要求1的药物组合物，其特征在于所述B类链阳性菌素衍生物选自天然组分：原始霉素IA、原始霉素IB、原始霉素IC、原始霉素ID、原始霉素IE、原始霉素IF、原始霉素IG、威里霉素S1、S3或S4、春霉素B或C，宜他霉素，或选自下述通式所示半合成衍生物：式中：1)Rb、Rc、Re和Rf是氢原子，Rd是氢原子或二甲基氨基，而Ra是结构-CHR′a基团，其中R′a是3-吡咯烷基硫、3-(或4-)哌啶基硫，它们未被取代或者被烷基或烷基硫取代，烷基硫被1或2个羟基磺酰基、烷基氨基、二烷基氨基(它本身任选地被巯基或二烷基氨基取代)取代、或被1或2个任选地被取代的哌嗪环、吗啉代、硫代吗啉代、哌啶子基、1-吡咯烷基、2-、3-或4-哌啶基或(未被取代或者被烷基取代的)2-、3-吡咯烷基取代，或Ra是结构＝CHR′a基团，其中R′a是3-吡咯烷基氨基、3-(或4-)哌啶基氨基、3-吡咯烷氧基、3-(或4-)哌啶氧基、3-吡咯烷基硫、未被取代或者被烷基取代的3-(或4-)哌啶基硫，或R′a是烷基氨基、烷氧基或烷基硫代基，它们未被取代或者被1或2个羟基磺酰基、烷基氨基、二烷基氨基(它本身任选地被二烷基氨基取代)取代，或被三烷基铵基、4-或5-咪唑基取代，或被1或2个任选地被取代的哌嗪环、吗啉代、硫代吗啉代、哌啶子基、1-吡咯烷基、2-、3-或4-哌啶基或2-、3-吡咯烷基(未被取代或者被烷基取代)取代，或Ra是3-(或4-)奎宁环基硫代甲基或2)Ra是氢原子以及a)或者Rb、Re和Rf是氢原子，Rd是基团-NHCH或-N(CH)，而Rc是氯或溴原子，或代表具有3-5个碳原子的链烯基[如果Rd是-N(CH)]，b)或者Rb、Rd、Re和Rf代表氢原子，而Rc是卤素，或氨基一烷基、氨基二烷基、烷氧基、三氟甲氧基、硫代烷基、C-C烷基或三卤代甲基，c)或者Rb、Rc、Re和Rf代表氢原子，而Rd是卤素，或乙基氨基、二乙基氨基或甲基乙基氨基、烷氧基或三氟甲氧基、硫代烷基、C-C烷基、芳基或三卤代甲基，d)或者Rb、Re和Rf代表氢原子，而Rc是卤素或氨基一烷基或氨基二烷基、烷氧基或三氟甲氧基、硫代烷基、C-C烷基，和Rd是卤素或氨基、氨基一烷基或氨基二烷基、烷氧基或三氟甲氧基、硫代烷基、C-C烷基或三卤代甲基，e)或者Rc、Re和Rf代表氢原子，而Rb和Rd代表甲基；或选自下述通式所示半合成衍生物：式中：Y是氮原子或＝CR-基团，R是氢原子、C烷基、C链烯基、C环烷基、3-8节环饱和或不饱和杂环基、苯基、[被一个或多个卤素原子或羟基、烷基、烷氧基、烷基硫、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、氨基、烷基氨基或二烷基氨基]取代的苯基或基团NR′R″，其中R′和R″相同或不同，它们是氢原子或C烷基，或与它们连接的氮原子一起形成具有3-8节链的杂环，该环任选地含有选自氧、硫或氮的任选地[被烷基、C链烯基、C环烷基、4-6节链饱和或I饱和杂环基、苯甲基、苯基或如上面R所定义被取代的苯基]取代的杂原子，或Y是＝CR-基团时，R是卤代甲基、羟基甲基、烷氧基甲基、其烷基部分任选地被NR′R″取代的烷基硫代甲基、烷基亚磺酰基甲基、烷基磺酰基甲基、酸基甲基、苯甲酸基甲基、环丙基氨基甲基或-(CH)NR′R″(n是1-4的整数，R′和R″如前面所定义)，或R是氢原子，R是甲酰基、羧基、烷氧基羰基，或其中R′和R″如前面所定义的-CONR′R″，或Y是氮原子时，R是-XR°基团，其中X是氧原子或硫原子、亚磺酰基或磺酰基，或NH基团，而R°是C烷基、C环烷基、3-8节环饱和或不饱和杂环、其杂环基部分通过碳原子与甲基连接的3～8节环杂环基甲基、苯基、[被一个或多个卤素原子或羟基、烷基、烷氧基、烷基硫、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、氨基、烷基氨基或二烷基氨基]取代的苯基，或其中R′和R″如前面所定义、n是2-4的整数的-(CH)NR′R″基团，或如果X代表NH，R°代表氢原子，R是氢原子或C烷基，R是氢原子或烷基、羧基、烷氧基羰基或结构-CO-NR′R″所示其中R′和R″如前面所定义的氨基甲酰基，Ra是甲基或乙基，以及Rb、Rc和Rd具有下述意义：1)Rb和Rc是氢原子，而Rd是氢原子或甲基氨基或二甲基氨基，2)Rb是氢原子，Rc是氢原子，氯原子或溴原子，或代表C链烯基，而Rd是-NMe-R基团，其中R代表烷基、羟基C羟基烷基，或任选地被苯基取代的C链烯基、C环烷基甲基、苯甲基、[被一个或多个卤素原子或羟基、烷基、烷氧基、烷基硫、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、氨基、烷基氨基或二烷基氨基]取代的苯甲基、其杂环部分是饱和或不饱和的含有5-6节链以及1或2个选自任选地[被烷基、C链烯基、C环烷基、4-6节链饱和或不饱和杂环、苯基、如前面R定义的取代苯基或苯甲基]取代的硫、氧或氮的杂原子的杂环基甲基或杂环基乙基，或R代表氰基甲基或-CHCORe，其中Re是-OR′e，R′e是氢，C烷基、C链烯基、苯甲基或其杂环基部分含有5-6节链以及1或2个选自硫、氧或氮的杂原子的杂环基甲基，或者Re是烷基氨基、烷基甲基氨基、杂环基氨基或杂环基甲基氨基，其杂环基部分是饱和的并且含有5-6节链以及1或2个选自硫、氧或氮的杂原子，该杂原子任选地被烷基、苯甲基或烷氧基羰基取代，3)Rb是氢原子，Rd是-NHCH或-N(CH)基团，Rc是氯或溴原子，或代表C链烯基，[如果Rd是-N(CH)]，4)Rb和Rd是氢原子，Rc是卤素原子，或烷基氨基或二烷基氨基，烷氧基、三氟甲氧基、硫代烷基、C烷基或三卤代甲基，5)Rb和Rc是氢原子，Rd是卤素原子，或乙基氨基、二乙基氨基或甲基乙基氨基、烷氧基或三氟甲氧基、烷基硫、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、C烷基、苯基或三卤代甲基，6)Rb是氢原子，Rc是卤素原子，或烷基氨基或二烷基氨基，烷氧基、三氟甲氧基、硫代烷基、C烷基，Rd是卤素原子，或氨基、烷基氨基或二烷基氨基，烷氧基或三氟甲氧基、硫代烷基、C烷基或三卤代甲基，7)Rc是氢原子，Rb和Rd代表甲基，以及它们的盐。

链阳性菌素衍生物、其制备方法及其组合物

本申请是申请日为2000年6月29日、申请号为00809596.5的中 国专利申请的分案申请。

本发明涉及具有下述通式的链阳性菌素A类衍生物及其盐：

它们具有特别令人感兴趣的抗菌活性。

在已知的链阳性菌素中，原始霉素(RP 7293)，即由始旋链霉菌 (Streptomyces pristinaespiralis)产生的天然来源的抗菌药，于 1955年首次分离得到。以Pyostacine商品名销售的原始霉素主要由 与原始霉素IA结合的原始霉素IIA组成。

链阳性菌素类的其他抗菌药：曾由弗吉尼亚链霉菌(streptomces virginiae)，ATCC13161分离出威里霉素[抗生素与化学治疗 (Antibiotics and Chemotherapy)，5，632(1955)]。威里霉素 (Staphylomycine)主要由与因子S(VS)结合的因子M1(VM1)组成。

曾在专利EP135410和EP191662中描述过具有下述结构的链阳性 菌素的半合成衍生物：

其中n是0-2。与链阳性菌素B类半合成组分结合，它们显示出协同 作用，并且可通过注射方法使用。

在国际专利申请WO 99/05165中，曾描述过具有下述通式的作为 抗微生物剂的链阳性菌素A类衍生物：

式中R1是基团-NR’R”或-NR’OR，R2是氢、甲基或乙基，键 ....是单键或双键。

但是，这些衍生物没有达到特别高的活性水平，另外，仍然不具 有人们所希望的广谱性。

现已发现，通式(I)所示A类链阳性菌素衍生物及其可能存在的盐， 式中：

-R1代表卤素原子或叠氮基或氰硫基，

-R2代表氢原子或甲基或乙基，

-R3代表氢原子或可被取代的脂族、脂环族、芳族、芳脂族、杂环 或杂环基脂族酯基，

-键 ....代表单键(立体化学27R)或双键，

单独或与B类链阳性菌素衍生物结合时具有特别强的抗菌活性， 与通常的链阳性菌素光谱相比，它们还显示出更宽的光谱。

根据本发明，R1代表卤素原子时，它可以选自氟，氯，溴或碘；

当基团R3代表可被取代的脂族、脂环族、芳族、芳脂族、杂环或 杂环脂族酯基时，作为实例，其可以选自基团R’3-CO-，其中R’3是在 苯基上未被取代或被取代的苯基或苯基烷基[被一个或多个选自烷基 的基团取代，它们任选地带有基团NR’R”，其中基团R’和R”相同或 不同，可以是氢原子或烷基，该烷基可以与它们连接的氮原子一起形 成具有3-8节链的饱和或不饱和的杂环基，任选地含有选自氧、硫或 氮的其他杂原子，所述杂环本身可以被一个或多个基团(烷基、羟基烷 基、烷氧基烷基、烷氧基羰基烷基、芳基、杂环基、具有3-8节链的 饱和或不饱和杂环烷基或-CH2-CO-NR′R″)取代，或R′和/或R″可以 是羟基烷基、苯基、具有3-8节链的饱和或不饱和杂环基烷基，其中 NR′R″如前面所定义的-CO-NR′R″，或用如前面定义的NR′R″取代的 烷基或酰基]，或R′3可以选自在苯基上被一个或多个基团取代的苯基 或苯基烷基[选自可以用任选地本身带有羧基的烷氧基或烷硫基或如 前面定义的基团-NR′R″取代的烷基或选自可以用如前面定义的 NR′R″取代的酸基]，或R′3可以选自任选地[被羧基、羧基烷基二硫 烷基(disulfanyl)或被基团NR′R″、-CH2-NR′R″、-CO-NR/R″， 或被任选地被NR′R″、-CO-NR′R″取代的烷氧基羰基、烷氧基或烷 基二硫烷基(其中NR′R″如前面所定义)]取代的烷基或环烷基，或 R′3可以选自任选地被[其本身任选地由NR′R″取代的烷基或酰基]取 代的具有3-8节链的饱和或不饱和杂环基。

在通式(I)中，在无特别说明情况下，烷基或酰基或烷基或酰基部 分是直链或支链，含有1-12个碳原子，杂环基可以特别地选自吡咯烷 基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、吡啶基、哌啶基、哌嗪基、 吗啉基、硫代吗啉基、吡嗪基(pyrizanyle)、嘧啶基、哒嗪基、咪唑 烷基，芳基特别地可以选自任选地被取代的苯基，更特别地被烷基、 烷氧基、卤素取代的苯基，或被基团-CH2OH、-(CH2)n-NH2、-(CH2)n-NH 烷基或-(CH2)n-N(烷基)2取代的苯基。

下述通式的链阳性菌素衍生物通过卤化、转化成叠氮化物或转化 成硫氰酸酯，可以制备通式(I)的链阳性菌素衍生物：

式中R2如前面所定义，键 ....代表单键(立体化学27R)或双键，其 14位上的羟基官能团预先得到保护，接着除去保护基，必要时，为了 得到其中R3是除氢之外其它基团的通式(I)衍生物，根据不改变分子 中其余部分的常规方法，加入可被取代的脂族、脂环族、芳族、芳脂 族、杂环或杂环脂族酯基(R3)。

在氨基三氟化硫(例如二乙基氨基三氟化硫、双(2-甲氧基乙基)氨 基三氟化硫(Deoxofluor)，吗啉代三氟化硫)存在下或作为可供选择 替代的方式在四氟化硫存在下使用如四烷基铵、三烷基苯甲基铵或三 烷基苯基铵的卤化物、叠氮化物或硫氰酸盐的反应剂或使用任选地被 加入冠醚的碱金属卤化物、叠氮化物或硫氰酸盐的反应剂，可以进行 卤化反应、转化成叠氮化物或转化成硫氰酸盐的反应。通过如氟化硫 [例如吗啉代三氟化硫、四氟化硫(《有机化学杂志》(J，Org，Chem，)，40， 3808(1975))，二乙基氨基三氟化硫(《四面体》(Tetradron)，44， 2875(1988))，双(2-甲氧基乙基)氨基三氟化硫(Deoxofluor)]之类 氟化剂的作用也可以实施这些氟化反应。作为可供选择的替代方式， 这些氟化反应还可以使用氟化剂如六氟丙基二乙基胺(JP 2 039 546) 或N-(2-氯-1，1，2-三氟乙基)二乙胺进行。

使用四烷基铵的卤化物、叠氮化物或硫氰酸盐时，作为实例，它 们可以选自四甲基铵、四乙基铵、四丙基铵、四丁基铵(例如四-正- 丁基铵)、四戊基铵、四环己基铵、三乙基甲基铵、三丁基甲基铵或三 甲基丙基铵的卤化物、叠氮化物或硫氰酸盐。

在如含氯溶剂(例如二氯甲烷、二氯乙烷、氯仿)的有机溶剂中或 在醚(例如四氢呋喃)中，在温度-78℃至40℃(优选地0-30℃)下操作。 有利地在氩气或氮气下操作。利用(16S)构型羟基衍生物显然可以形 成(16R)构型衍生物。

根据不影响分子中其余部分的通常方法对14位羟基进行保护和去 保护，特别地采用T，W，Green和P，G，M，Wuts《有机合成中的 保护基团》(Protective Group in Organic Synthesis)(第二版)，A， Wiley-Interscience Publication(1991)，或Mc Omie，《有机化学 中的保护基团》，Plenum Press(1973)中描述的方法进行。例如使用 三烷基甲硅烷基、烷基二苯基甲硅烷基(例如叔-丁基二苯基甲硅烷基 与叔-丁基二甲基甲硅烷基)或处于应有位置的烯丙基进行保护操作， 并且如下面实施例所述进行去保护。

在必要情况下，希望制备其中R3是可以取代的脂族、脂环族、芳 族、芳脂族、杂环或杂环脂族酯的通式(I)产品时，根据不改变分子中 其余部分的通常方法进行后续的酯化操作。更特别地，在有或没有偶 合剂如碳化二亚胺(例如二环己基碳化二亚胺)和有或没有叔胺(三烷 基胺如三乙胺或二异丙基乙胺，或吡啶或一种衍生物)以及任选地一种 催化剂如4-N-二甲基氨基吡啶存在下，在温度-40℃至+80℃下，在有 机溶剂中如酰胺(例如二甲基甲酰胺或N-甲基-2-吡咯烷酮)、吡啶、 含卤素溶剂(例如二氯甲烷、二氯乙烷或氯仿)或醚(四氢呋喃、二烷、 二甲氧基乙烷)中，通过酸或酸的活性衍生物(例如酰基氯，反应性酯， 酸酐)的反应进行酯化。合适的是预先保护可能干扰该反应的官能团， 然后在反应后去保护。

如在下面实施例中描述的方法或采用与描述方法类似的方法制备 使用的酸或酸的活性衍生物。

通过选择性还原下述通式所示天然原始霉素组分可以得到通式 (II)的A类链阳性菌素二羟基化衍生物：

式中R2如前面定义，键 ....代表单键(立体化学27R)或双键，接着 分离16S差向立体异构体形态。

有利地，在还原剂如碱金属硼氢化物例如硼氢化钠或三乙酸基硼 氢化钠存在下，在选自含氯溶剂(例如二氯甲烷、二氯乙烷、氯仿)、 四氢呋喃、醋酸和如甲醇、乙醇或2-丙醇之类醇的有机溶剂中，在温 度-78℃至40℃下进行还原。

16R差向立体异构体形态与16S差向立体异构体形态可按照一般 方法进行分离：例如通过色谱法、闪式色谱法、用手性相或非手性相 高效液相色谱法(CLHP)，或离心分配色谱法(CPC)，分离16R与16S 差向立体异构体混合物，或采用结晶法进行分离。

特别地，根据F.Le Goffic及其同事在《Eur，J，Med，-Chimica Therapeutica》；1-2月， 16，(1)，69-72(1981)制备(16S)-16-羟基 原始霉素IIA。

通式(III)原始霉素衍生物分别相应于原始霉素IIA(PIIA)，原 始霉素IIB(PIIB)，原始霉素IIC(PIIC)，原始霉素IID(PIID)，原始 霉素IIF(PIIF)和原始霉素IIG(PIIG)，它们是天然原始霉素的已知组 分。在欧洲专利EP 614910中描述过组分PIIF和PIIG。

如J，C，Barrière及其同事在《Expert，Opin，Invest，Drugs》， 3(2)，115-31(1994)中描述的，可以得到原始霉素IIC(PIIC)和原始 霉素IID(PIID)。

根据J，Preud’homme及其同事在《Bull，Soc，Chim，Fr，》， 第2卷，585(1968)中或在欧洲专利EP 614 910中描述的方法或采用 与其类似的方法，通过发酵和分离发酵液中的组分，可以制备和分离 (通式(III)链阳性菌素)A类天然链阳性菌素组分。作为可供选择替代 的方式，可以采用如在专利申请FR 2 689 518中描述的特定发酵方法， 制备A类天然链阳性菌素组分。

必要时，采用物理方法例如结晶法、色谱法或CPC可以纯化通式 (I)的链阳性菌素衍生物。

可以采用已知方法，将通式(I)所示链阳性菌素的某些衍生物转化 成与酸的加成盐形态。当然，这些盐若存在时也属于本发明的范围。

作为与药学上可接受酸的加成盐的实例，可以列举与无机酸生成 的盐(盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐)或与有机酸生成 的盐(琥珀酸盐、富马酸盐、酒石酸盐、醋酸盐、丙酸盐、马来酸盐、 柠檬酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、羟乙基 磺酸盐、萘磺酸盐或樟脑磺酸盐或与这些化合物的取代衍生物生成的 盐)。

本发明的链阳菌素衍生物具有抗菌性质与B类链阳性菌素衍生物 抗菌活性的协同性质。由于它们在单独或组合使用时呈现高活性，所 以它们特别令人感兴趣。

在与链阳性菌素B类的一种组分或一种衍生物组合时，根据要求 得到口服或肠胃外用药形式，它们可以选自天然组分：原始霉素IA、 原始霉素IB、原始霉素IC、原始霉素ID、原始霉素IE、原始霉素IF、 原始霉素IG、威里霉素S1、S3或S4、春霉素B或C、宜他霉素、或 选自半合成衍生物例如在专利或专利申请US 4 618 599、US 4 798 827、 US 5 326 782、EP 772 630或EP 770 132中描述的半合成衍生物， 特别是下述通式的链阳性菌素衍生物：

式中：

1.Rb、Rc、Re和Rf是氢原子，Rd是氢原子或二甲基氨基，而Ra 是结构-CH2R’a所示基团，其中R’a是3-吡咯烷基硫、3-(或4-)哌啶 基硫，它们可以被烷基或烷基硫取代，该烷基硫被1或2个羟基磺酰 基、烷基氨基、二烷基氨基(它本身任选地被巯基或二烷基氨基取代) 取代、或被1或2个任选地被取代的哌嗪环、吗啉代、硫代吗啉代、 哌啶子基、1-吡咯烷基、2-、3-、4-哌啶基或2-或3-吡咯烷基(可以 用烷基取代)取代，或Ra是结构＝CHR’a所示基团，其中R’a是可以被 烷基取代的3-吡咯烷基氨基、3-(或4-)哌啶基氨基、3-吡咯烷氧基、 3-(或4-)哌啶氧基、3-吡咯烷基硫、可以被烷基取代的3-(或4-)哌 啶基硫，或R’a是烷基氨基、烷氧基或烷基硫，它们可以被1或2个 羟基磺酰基、烷基氨基、二烷基氨基(它本身任选地被二烷基氨基取代) 取代，或被三烷基铵基、4-或5-咪唑基取代，或被1或2个任选地被 取代的哌嗪环、吗啉代、硫代吗啉代、哌啶子基、1-吡咯烷基、2-、 3-或4-哌啶基或2-或3-吡咯烷基(可以用烷基取代)取代，或 Ra是3-(或4-)奎宁环基硫代甲基或

2.Ra是氢原子以及

a)或者Rb、Re和Rf是氢原子，Rd是基团-NHCH3或-N(CH3)2，而 Rc是氯或溴原子，或代表含有3-5个碳原子的链烯基[如果Rd是 -N(CH3)2]，

b)或者Rb、Rd、Re和Rf代表氢原子，而Rc是卤素或氨基一烷 基、氨基二烷基、烷氧基、三氟甲氧基、硫代烷基、C1-C3烷基或三卤 代甲基，

c)或者Rb、Rc、Re和Rf代表氢原子，而Rd是卤素或乙基氨基、 二乙基氨基或甲基乙基氨基、烷氧基或三氟甲氧基、硫代烷基、C1-C6烷基、芳基或三卤代甲基，

d)或者Rb、Re和Rf代表氢原子，而Rc是卤素或氨基一烷基或 氨基二烷基、烷氧基或三氟甲氧基、硫代烷基、C1-C3烷基，和Rd是卤 素或氨基、氨基一烷基或氨基二烷基、烷氧基或三氟甲氧基、硫代烷 基、C1-C6烷基或三卤代甲基，

e)或者Rc、Re和Rf代表氢原子，而Rb和Rd代表甲基；

或选自下述通式所示链阳性菌素B类的半合成衍生物：

式中：

Y是氮原子或＝CR3-基团，

R1是氢原子、烷基(1-8个碳原子)、链烯基(2-8个碳原子)、环烷 基(3-8个碳原子)、饱和或不饱和杂环(3-8节环)、苯基、被[一个或 多个卤素原子或羟基、烷基、烷氧基、烷基硫、烷基亚磺酰基、烷基 磺酰基、氨基、烷基氨基或二烷基氨基]取代的苯基或NR’R”基团， R’和R”相同或不同，可以是氢原子或烷基(1-3个碳原子)，或可以与 它们连接的氮原子一起形成有3-8节链的杂环，该环任选地含有选自 氧、硫或氮的任选地被[烷基、链烯基(2-8个碳原子)、环烷基(3-6个 碳原子)、饱和或不饱和杂环(4-6节链)、苯甲基、苯基、如上面R1所限定的被取代苯基]取代的杂原子，

或Y是＝CR3-基团时，R1还可以是卤代甲基、羟基甲基、其烷基部 分任选地被NR’R”取代的烷氧基甲基、烷基硫代甲基、烷基亚磺酰基 甲基、烷基磺酰基甲基、酸基甲基、苯甲酸基甲基、环丙基氨基甲基 或-(CH2)nNR’R”(n是1-4的整数，R’和R”如前面所定义)，或如果 R3是氢原子，R1还可以是甲酰基、羧基、烷氧基羰基、其中R’和R” 如前面所定义的或-CONR’R”，

或Y是氮原子时，R1还可以是-XR°基团，其中X是氧原子或硫原 子、亚磺酰基或磺酰基或NH基团，而R°是烷基(1-8个碳原子)、环 烷基(3-6个碳原子)、饱和或不饱和杂环(3-8节环)、其中杂环部分通 过碳原子与甲基连接的杂环甲基(3-8节环)、苯基、[被一个或多个卤 素原子或羟基、烷基、烷氧基、烷基硫、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、 氨基、烷基氨基或二烷基氨基]取代的苯基或-(CH2)nNR’R”基团，其 中R’和R”如前面所定义，n是2-4的整数，或如果X代表NH，R°也 可以代表氢原子，

R2是氢原子或烷基(1-3个碳原子)，

R3是氢原子或烷基、羧基、烷氧基羰基或其中R’和R”如前面所 定义的结构-CO-NR’R”所示氨基甲酰基，

Ra是甲基或乙基，以及

Rb、Rc和Rd具有下述定义：

1)Rb和Rc是氢原子，而Rd是氢原子或甲基氨基或二甲基氨基，

2)Rb是氢原子，Rc是氢原子，氯原子或溴原子，或代表C3～5链 烯基，而Rd是-NMe-R基团，其中R代表烷基、羟基C2～4烷基或 任选地被苯基取代的C2～8链烯基、C3～6环烷基甲基、苯甲基、[被一个 或多个卤素原子或羟基、烷基、烷氧基、烷基硫、烷基亚磺酰基、烷 基磺酰基、氨基、烷基氨基或二烷基氨基]取代的苯甲基、杂环基甲 基或杂环基乙基，其杂环基部分是饱和或不饱和的并且含有5-6节链 以及1或2个选自任选地被[烷基、C2～8链烯基、C3～6环烷基、饱和或 不饱和(4-6节链)杂环基、苯基、如前面R1定义的取代苯基或苯甲基] 取代的硫、氧或氮的杂原子，或R代表氰基甲基或基团-CH2CORe， 其中Re是-OR’e，R’e是氢、C1～6烷基、C2～6链烯基、苯甲基或其杂环 基部分含有5-6节链以及1或2个选自硫、氧或氮的杂原子的杂环基 甲基，或者Re是烷基氨基、烷基甲基氨基、杂环基氨基或杂环基甲基 氨基，其杂环基部分是饱和的并且含有5-6节链以及1或2个选自硫、 氧或氮的任选地被烷基、苯甲基或烷氧基羰基取代的杂原子，

3)Rb是氢原子，Rd是-NHCH3或-N(CH3)2基团，Rc是氯或溴原子， 或代表C3～5链烯基，[如果Rd是-N(CH3)2]，

4)Rb和Rd是氢原子，Rc是卤素原子或烷基氨基或二烷基氨基、 烷氧基、三氟甲氧基、硫代烷基、C1～6烷基或三卤代甲基，

5)Rb和Rc是氢原子，Rd是卤素原子，或乙基氨基、二乙基氨基 或甲基乙基氨基、烷氧基或三氟甲氧基、烷基硫、烷基亚磺酰基、烷 基磺酰基、C1～6烷基、苯基或三卤代甲基，

6)Rb是氢原子，Rc是卤素原子或烷基氨基或二烷基氨基、烷氧 基、三氟甲氧基、硫代烷基、C1～3烷基，Rd是卤素原子或氨基、烷基 氨基或二烷基氨基、烷氧基或三氟甲氧基、硫代烷基、C1～6烷基或三卤 代甲基，

7)Rc是氢原子，Rb和Rd代表甲基，

以及它们的盐。

应当理解，本发明的衍生物与B类链阳性菌素组合也属于本发明 范围。

结构(B)的链阳性菌素的B类衍生物可以根据国际申请WO9943699 中描述的方法制备。

在活体外，本发明链阳性菌素衍生物在0.015-32微克/毫升浓度 单独地或与像原始霉素IB之类的B类衍生物组合都显示出对金黄色葡 萄球菌209P的活性，在浓度0.015-32微克/毫升下，单独地或与原始 霉素IB组合都显示出对金黄色葡萄球菌Schiclia(耐甲氧苯青霉素) 的活性；在活体内，对用金黄色葡萄球菌IP8203试验感染的鼠通过皮 下注射剂量5-150毫克/千克(DC50)并且其中大部分还通过口服剂量 30-150毫克/千克(DC50)，本发明链阳性菌素与原始霉素IB产生抗菌 协同作用。

最后，本发明的产物由于它们的低毒性而特别有意义。对金黄色 葡萄球菌IP8203，采用皮下或口服在鼠体内用药剂量150毫克/千克， 每天2次，任何产品均未显示出毒性。

通式(I)产品具有特别的意义，其中：

-R1代表氟、氯、溴或碘原子或叠氮基或氰硫基，

-R2代表甲基，

-R3代表氢原子，或R3’-CO-基团，其中R3’是对苯基未进行取代或 取代的苯基或苯基烷基[被一个或多个选自烷基取代，该烷基任选地带 有NR’R”基团，其中R’和R”基团相同或不同，可以是氢原子或烷基， 这些烷基可以与它们连接的氮原子一起形成具有3-8节链的饱和或不 饱和杂环基，该杂环基任选地含有选自氧、硫或氮的其他杂原子，所 述杂环本身可被一个或多个基团(烷基、羟基烷基、烷氧基烷基、烷氧 基羰基烷基、芳基、具有3-8节链的饱和或不饱和杂环基、杂环基烷 基或-CH2-CO-NR’R”)取代，或R’和/或R”可以是羟基烷基、苯基、 具有3-8节链的饱和或不饱和杂环基烷基、-CO-NR’R”，其中NR’R” 如前面所定义，或用如前面所定义的NR’R”取代的烷基或酰基]，或 R3’可以是被一个或多个基团[选自烷基，它可以被任选地本身带有羧 基或如前面所定义的NR’R”基团的烷氧基或烷基硫取代，或选自可以 被如前面所定义的NR’R”取代的酸基]取代的苯基，或R3’可以选自任 选地[被一个羧基、羧基烷基二硫烷基取代，或被基团NR’R”、 -CH2-NR’R”、-CO-NR’R”、或被任选地被其中NR’R”如前面所定义 的NR’R”或-CO-NR’R”取代的烷氧基羰基、烷氧基或烷基二硫烷基] 取代的烷基或环烷基，或R3’可以选自具有3-8节链的饱和或不饱和任 选地[被其本身任选地被NR’R”取代的烷基或酰基]取代的杂环基， 条件是所述杂环选自吡咯烷基、咪唑基、吡啶基、哌啶基、哌嗪基或 吗啉基，以及

-键 ....代表单键(立体化学27R)或双键，

以及它们的可能存在的盐；

其中，更特别地选自下述产品：

-(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB；

-(16R)-16-脱氧-16-硫氰基原始霉素IIB；

-(16R)-16-脱氧-16-氯原始霉素IIB；

-(16R)-16-叠氮基-16-脱氧原始霉素IIB；

-(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIA。

下面给出的非限制性实施例说明本发明。

在下面实施例中，术语16-脱氧原始霉素IIA(或IIB)表示用2个 氢原子取代16位的酮官能团。根据色谱法，所有馏分都采用Merck 60F254硅胶板的薄层色谱(CCM)分析。在CCM中对应于相同斑点的馏 分合并，然后在减压(30℃；2.7千帕)下浓缩至干。这样得到的残留 物采用常规光谱技术(NMR、IR、SM)分析，这样能够鉴定出期望的产品。

实施例1

(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB

往1.12克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-(叔-丁基二苯基甲硅烷基) 原始霉素IIB在10毫升四氢呋喃中的溶液，在20℃在氩气氛下加入 0.2毫升醋酸和0.6克四正-丁基氟化铵四水合物。在搅拌168小时后， 反应混合物在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到1克栗色油，它再用 闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇/乙腈(以体积计，90/5/5)]。 得到0.3克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB，呈浅米色固体状，约 125℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.55- 2.05(mt：5H)；1.83(s：3H)；2.10-2.30(mt：2H)；2.76(mt：1H)； 2.98(mt：1H)；3.21(mt：1H)；3.48(mt：1H)；3.87(mt：1H)；4.07 (mt：1H)；4.55(mt：1H)；4.75-4.90(mt：3H)；5.14(减速的双 重线，JHF＝48Hz：1H)；5.39(d，J＝9Hz：1H)；5.71(mt：1H)； 5.82(dd，J＝17和2Hz：1H)；6.00(mt：1H)；6.21(d，J＝16Hz： 1H)；6.52(dd，J＝17和5Hz：1H)；8.12(s：1H)。

可以按照下述方式制备(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-(叔丁基二苯 基甲硅烷基)原始霉素IIB：

往2克(16S)-16-羟基-14-O-(叔丁基二苯基甲硅烷基)原始霉素 IIB在50毫升二氯甲烷中的溶液，在20℃氩气氛下缓慢加入0.464毫 升二乙基氨基三氟化硫。在搅拌2小时后，把反应混合物倒入100毫 升饱和碳酸氢钠水溶液中。有机相经倾析后每次用100毫升水洗涤2 次，用硫酸镁干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓缩至于，得到 2.1克赭石色固体，它再用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/乙腈/ 甲醇梯度(以体积计，100/0/0；99/0.5/0.5，然后98/1/1)]。得到 1.35克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-(叔丁基二苯基甲硅烷基)原始霉 素IIB，呈白色固体状，约116℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400 MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；0.99(d，J＝6.5Hz：3H)；1.00-1.15(mt：12H)；1.29(s： 3H)；1.55-1.95(mt：4H)；1.96(mt：1H)；2.13(mt：1H)；2.24(mt： 1H)；2.76(mt：1H)；2.85(mt：1H)；3.03(mt：1H)；3.39(mt：1H)； 3.80(mt：1H)；4.01(mt：1H)；4.57(mt：1H)；4.72(mt：1H)； 4.75-4.85(mt：2H)；5.01(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.38 (d，J＝9Hz：1H)；5.50(mt：1H)；5.81(dd，J＝17和1.5Hz： 1H)；5.97(mt：1H)；6.10(d，J＝15.5Hz：1H)；6.49(dd，J＝ 17和5Hz：1H)；7.30-7.50(mt；6H)；7.63(宽d，J＝7Hz：2H)； 7.68(宽d，J＝7Hz：2H)；8.08(s：1H)。

可以按照下述方式制备(16S)-16-羟基-14-O-(叔丁基二苯基甲硅 烷基)原始霉素IIB：

往22克(16S)-16-羟基原始霉素IIB在200毫升二氯甲烷中的溶 液，在20℃氩气氛下滴加29毫升二异丙基乙基胺、43.2毫升叔丁基 二苯基氯硅烷和1.01克4-二甲基氨基吡啶。在搅拌22小时后，把反 应混合物倒入600毫升饱和碳酸氢钠水溶液中。有机相经倾析后每次 用100毫升二氯甲烷提取两次。有机相合并，用400毫升饱和氯化钠 水溶液洗涤，用硫酸镁干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓缩至 干，得到70.6克橙色粘稠的油，在600毫升异丙醚中搅拌16小时。 在过滤与20℃减压(2.7千帕)下干燥后，得到28克(16S)-16-羟基 -14-O-(叔丁基二苯基甲硅烷基)原始霉素IIB，呈玫瑰色固体状，约 133℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.95(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00-1.05(mt：9H)；1.08(s：9H)；1.40-1.80(mt； 3H)；1.90-2.15(mt：3H)；2.23(宽d，J＝14Hz：1H)；2.75(mt： 1H)；2.83(dd，J＝17和11Hz：1H)；3.10(dd，J＝17和2.5Hz： 1H)；3.25(mt：1H)；3.60-3.75(mt：2H)；4.49(mt；1H)；4.56(mt： 1H)；4.60-4.70(mt：2H)；4.87(mt：1H)；5.49(mt：1H)；5.74(dd， J＝17和2Hz：1H)；5.78(d，J＝9Hz：1H)；5.95(mt：1H)；6.04 (d，J＝16Hz：1H)；6.41(dd，J＝17和4Hz：1H)；7.30-7.50(mt： 6H)；7.64(dd，J＝7和1.5Hz：2H)；7.69(dd，J＝7和1.5Hz： 2H)；8.11(s：1H)。

按照下述方式可以制备(16S)-16-羟基原始霉素IIB：

11.35克硼氢化钠在550毫升二氯甲烷中的悬浮液加热回流20分 钟。这时在约30分钟内滴加68.6毫升醋酸，然后在约45分钟内滴加 52.75克原始霉素IIB在230毫升二氯甲烷中的溶液(预先用硫酸钠干 燥)。反应混合物回流搅拌4.5小时，然后在20℃搅拌16小时。这时 往反应混合物加入500毫升二氯甲烷和1500毫升水。有机相经倾析后， 水相用500毫升二氯甲烷提取。合并有机相，通过缓慢加入1000毫升 饱和碳酸氢钠水溶液将其pH调节到8。得到的有机相相继地用1000 毫升水和1000毫升饱和氯化钠水溶液洗涤，然后用3S植物炭处理， 用硫酸钠干燥，过滤，在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到50克浅黄 色固体。在20℃往上述固体在900毫升二氯甲烷中的溶液中加入378 毫升0.5M氢氧化铵水溶液。在20℃搅拌16小时后，有机相经倾析后， 先用1000毫升水，然后用1000毫升饱和氯化钠水溶液洗涤，用硫酸 钠干燥，过滤，再在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到46克微黄色固 体，再用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇梯度(以体积计，98/2 和97/3)]。得到31.68克(16S)-16-羟基原始霉素IIB，呈白色固体粉 末状，约131℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.02(d，J＝6.5Hz：3H)；1.07(d，J＝6.5Hz：3H)；1.70-1.90 (mt：3H)；1.76(s：3H)；1.97(mt：2H)；2.12(mt：1H)；2.26(宽 d：14.5Hz：1H)；2.56(d，J＝3Hz：1H)；2.76(mt：1H)；2.90 (dd，J＝16和10Hz：1H)；3.08(dd，J＝16和3Hz：1H)；3.35 (mt：1H)；3.82(mt：2H)；3.99(d，J＝2.5Hz：1H)；4.40-4.55(mt： 2H)；4.65-4.75(mt：2H)；5.03(mt：1H)；5.65-5.85(mt：3H)； 6.01(mt：1H)；6.21(d，J＝16Hz：1H)；6.46(dd，J＝17和5Hz： 1H)；8.13(s：1H)。

实施例2

(16R)-16-脱氧-16氟原始霉素IIB

往257克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-(叔-丁基二甲基甲硅烷基) 原始霉素IIB在2500毫升二氯甲烷中的溶液中在40分钟内在40℃氩 气氛下缓慢加入970毫升三乙胺三氟水合物。在40℃下搅拌2小时后， 将该反应混合物冷却到8℃，然后通过在25分钟内缓慢加入1940毫 升水进行水解。在搅拌10分钟后，倾析有机相和水相，用4000毫升 水和1000毫升二氯甲烷恢复乳状界面。搅拌两相，倾析有机相，合并 水相，然后用1000毫升二氯甲烷提取。合并有机相，加入1500毫 升水。通过在10℃下在15分钟内缓慢加入400毫升饱和碳酸氢钠水 溶液，将其水相pH调节到7。倾析有机相，用1500毫升醋酸乙酯稀 释，然后用1000毫升水洗涤。倾析有机相后，水相每次用1500毫升 醋酸乙酯提取两次，然后用在烧结玻璃上的Célite过滤。Célite用 400毫升醋酸乙酯清洗3次。有机相合并后，用硫酸钠干燥，然后用 在烧结玻璃上的Célite过滤。Célite用800毫升醋酸乙酯清洗4次。 滤液在减压(2.7千帕)下浓缩至干，在25℃下干燥至恒重后得到218.5 克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB，呈白色结晶粉末状，约133℃ 熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5 Hz：3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.55-2.05(mt：5H)；1.83(s：3H)；2.10-2.30(mt：2H)；2.76 (mt：1H)；2.98(mt：1H)；3.21(mt：1H)；3.48(mt：1H)；3.87(mt： 1H)；4.07(mt：1H)；4.55(mt：1H)；4.75-4.90(mt：3H)；5.14(减 速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.39(d，J＝9Hz：1H)；5.71(mt： 1H)；5.82(dd，J＝17和2Hz：1H)；6.00(mt：1H)；6.21(d，J ＝16Hz：1H)；6.52(dd，J＝17和5Hz：1H)；8.12(s：1H)。

按照下述方式可以制备(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-(叔-丁基二 甲基甲硅烷基)原始霉素IIB：

按照与实施例1中描述的类似方式操作，但使用22克(16S)-16- 羟基-14-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)原始霉素IIB在500毫升二氯甲 烷中的溶液为原料，在20℃氩气氛下缓慢加入6.7毫升二乙基氨基三 氟化硫。在搅拌4小时和以与实施例1类似方式进行处理后，得到25 克橙色油，它再用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇/乙腈梯度 (以体积计100/0/0；99/0.5/0.5至96/2/2)]。得到6.6克(16R)-16- 脱氧-16-氟-14-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)原始霉素IIB，呈浅黄色固 体状，约128℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400 MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.04(s：3H)；0.07 (s：3H)；0.89(s：9H)；0.96(d，J＝6.5Hz：3H)；0.99(d，J＝ 6.5Hz：3H)；1.09(d，J＝6.5Hz：3H)；1.50-2.05(mt：5H)；1.79 (s：3H)；2.10-2.25(mt：2H)；2.76(mt：1H)；2.90(mt：1H)；3.15 (mt：1H)；3.43(mt：1H)；3.88(mt：1H)；4.09(mt：1H)；4.59(mt： 1H)；4.75(mt：1H)；4.79(dd，J＝10和1.5Hz：1H)；4.84(dd， J＝9和3Hz：1H)；5.12(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.34(d， J＝9Hz：1H)；5.64(mt：1H)；5.82(dd，J＝17和2Hz：1H)；5.99 (mt：1H)；6.20(d，J＝16Hz：1H)；6.50(dd，J＝17和5Hz：1H)； 8.09(s：1H)。

按照下述方式制备(16S)-16-羟基-14-O-(叔丁基二甲基甲硅烷 基)原始霉素IIB：

往27克(16S)-16-羟基原始霉素IIB(如实施例1所述制备)在270 毫升二氯甲烷中的溶液，在20℃氩气氛下加入44.4毫升二异丙基乙 基胺和39.6克叔-丁基二甲基氯硅烷在140毫升二氯甲烷中的溶液。 在搅拌17小时后，用300毫升水洗涤反应混合物3次。有机相用硫酸 镁干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到橙色油，它 再用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇/乙腈梯度(以体积计 100/0/0；99/0，5/0.5至96/2/2)]。得到24克(16S)-16-羟基 -14-O-(叔丁基二甲基甲硅烷基)原始霉素IIB，呈浅黄色固体状，约 139℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.05(s：3H)；0.10 (s：3H)；0.91(s：9H)；0.96(d，J＝6.5Hz：3H)；1.02(d，J＝ 6.5Hz：3H)；1.06(d，J＝6.5Hz：3H)；1.70-2.05(mt：5H)；1.71 (s：3H)；2.12(mt：1H)；2.31(宽d，J＝14Hz：1H)；2.70-2.80 (mt：1H)；2.80(dd，J＝17和11Hz：1H)；3.06(dd，J＝17和 2.5Hz：1H)；3.30(mt：1H)；3.79(mt：2H)；4.47(宽t，J＝10 Hz：1H)；4.52(s：1H)；4.54(mt：1H)；4.65-4.75(mt：2H)；4.99 (mt：1H)；5.69(mt：1H)；5.76(dd，J＝17和2Hz：1H)；5.78(d， J＝9Hz：1H)；6.00(mt：1H)；6.20(d，J＝16Hz：1H)；6.43(dd， J＝17和4Hz：1H)；8.12(s：1H)。

实施例3

(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB

往0.09克对-甲苯亚磺酸钠在6毫升二氯甲烷中的悬浮液，在0 ℃氩气氛下加入0.5毫升1N盐酸水溶液。在20℃搅拌15分钟后，倾 析有机相，用硫酸镁干燥，再过滤。在20℃氩气氛下，往滤液中添加 0.26克(16R)-14-O-烯丙基-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB和0.04克四 (三苯基膦)钯。在搅拌2小时后，加入0.01克三乙胺。在接着搅拌 30分钟后，浓缩反应混合物至干，再用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二 氯甲烷/甲醇/乙腈(以体积计，90/5/5)]，得到0.2克(16R)-16-脱氧 -16氟原始霉素IIB。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.50-2.05 (mt：5H)；1.62(d，J＝4Hz：1H)；1.83(s：3H)；2.10-2.30(mt： 2H)；2.77(mt：1H)；2.98(mt：1H)；3.21(mt：1H)；3.48(mt：1H)； 3.87(mt：1H)；4.06(mt：1H)；4.55(mt：1H)；4.75-4.85(mt：3H)； 5.14(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.39(d，J＝9Hz：1H)；5.72 (mt：1H)；5.82(dd，J＝16和2Hz：1H)；5.98(mt：1H)；6.21(d， J＝16Hz：1H)；6.51(dd，J＝16和5Hz：1H)；8.11(s：1H)。

按照下述方法可以制备(16R)-14-O-烯丙基-16-脱氧-16-氟原始 霉素IIB：

往0.8克(16S)-14-O-烯丙基-16-羟基原始霉素IIB在25毫升二 氯甲烷中的溶液，在0℃氩气氛下滴加0.28毫升二乙基氨基三氟化硫 在5毫升二氯甲烷中的溶液。先在0℃、然后返回到20℃搅拌45分钟 后，该反应混合物倒入70毫升0℃饱和碳酸氢钠水溶液中。得到的混 合物用100毫升二氯甲烷提取。有机相相继地用70毫升饱和碳酸氢钠 水溶液和70毫升饱和氯化钠水溶液洗涤，然后用硫酸镁干燥。在过滤 和在20℃减压(2.7千帕)下浓缩至干后，得到0.8克(16R)-14-O-烯丙 基-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB，呈奶油色固体状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.09(d，J＝6.5Hz：3H)；1.50-2.05 (mt：5H)；1.81(s：3H)；2.16(mt；1H)；2.29(mt：1H)；2.76(mt： 1H)；2.93(mt：1H)；3.18(dt，J＝17和7Hz：1H)；3.45(mt： 1H)；3.80-3.95(mt：2H)；4.00-4.15(mt：2H)；4.47(dt，J＝9.5 和4Hz：1H)；4.59(mt：1H)；4.78(dd，J＝10和1.5Hz：1H)；4.83 (dd，J＝9和3Hz：1H)；5.05-5.35(mt：4H)；5.69(mt：1H)；5.82 (dd，J＝16和2Hz：1H)；5.90(mt：1H)；6.00(mt：1H)；6.25(d， J＝16Hz：1H)；6.51(dd，J＝16和4Hz：1H)；8.11(s：1H)。

按照下述方法可以制备(16S)-14-O-烯丙基-16-羟基原始霉素 IIB：

往10.6克(16S)-16-羟基原始霉素IIB(如实施例1所述制备)在 500毫升2-丁酮中的溶液，加入19克碳酸钾和31.5毫升烯丙基溴。 加热回流反应混合物90小时。在冷却到20℃和过滤后，反应混合物 在减压(2.7千帕)下浓缩。残留物用100毫升蒸馏水和300毫升二氯 甲烷溶解。倾析有机相后，用100毫升蒸馏水洗涤，用硫酸镁干燥， 过滤和在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到12.5克残留物，它用闪式 色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇(以体积计，95/5)]。得到的固体 在乙醚中搅拌，过滤和在20℃干燥(2.7千帕)，得到1.4克(16S)-14-O- 烯丙基-16-羟基原始霉素IIB，呈白色粉末状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.97(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.04(d，J＝6.5Hz：3H)；1.07(d，J＝6.5Hz：3H)；1.70-2.05 (mt：5H)；1.75(s：3H)；2.12(mt：1H)；2.34(宽d，J＝16Hz： 1H)；2.77(mt：1H)；2.85(dd，J＝16和10Hz：1H)；3.09(dd， J＝16和3Hz：1H)；3.32(mt：1H)；3.75-3.90(mt：3H)；4.05-4.15 (mt：2H)；4.42(mt：1H)；4.53(mt：1H)；4.65-4.75(mt： 3H)；5.15-5.30(mt：2H)；5.65-5.80(mt：1H)；5.70(宽d，J＝9 Hz：1H)；5.80(dd，J＝16和1.5Hz：1H)；5.79(mt：1H)；5.98 (mt：1H)；6.25(d，J＝16Hz：1H)；6.45(dd，J＝16和4Hz：1H)； 8.14(s：1H)。

实施例4

(16R)-16-脱氧-16-硫氰基原始霉素IIB

往0.85克(16R)-16-脱氧-16-硫氰基-14-O-(叔-丁基二苯基甲硅 烷基)原始霉素IIB在40毫升二氯甲烷中的溶液，在20℃下加入5毫 升三乙胺三氟水合物。在回流搅拌20小时后，加入3毫升三乙胺三氟 水合物，再保持回流3小时。这时反应混合物被倒入80毫升水中，然 后通过缓慢加入碳酸氢钠被中和。倾析有机相后，用硫酸镁干燥，过 滤，在减压(2.7千帕)下浓缩至于，得到0.61克固体，它用闪式色谱 法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇(以体积计，96/4)]。得到0.36克 (16R)-16-脱氧-16-硫氰基原始霉素IIB，呈白色固体状，约140℃熔 化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.09(d，J＝6.5Hz：3H)；1.75-2.05 (mt：5H)；1.85(s：3H)；2.10-2.30(mt：2H)；2.77(mt：1H)；3.15 (dd，J＝17和7Hz：1H)；3.40(dd，J＝17和7Hz：1H)；3.52(mt： 1H)；3.62(mt：1H)；3.83(mt：1H)；4.02(mt：1H)；4.52(mt： 1H)；4.75-4.85(mt：2H)；4.77(dd，J＝10和2Hz：1H)；5.36(d， J＝9Hz：1H)；5.77(mt：1H)；5.81(dd，J＝16和2Hz：1H)；6.05 (mt：1H)；6.21(d，J＝16Hz：1H)；6.52(dd，J＝16和5Hz： 1H)；8.14(s：1H)。

按照下述方法可以制备(16R)-16-脱氧-16-硫氰基-14-O-(叔-丁 基二苯基甲硅烷基)原始霉素IIB：

往5.85克硫氰酸四正-丁基铵在70毫升二氯甲烷中的溶液，在 20℃氩气氛下加入2.6克(16S)-16-羟基-14-O-(叔-丁基二苯基甲硅 烷基)原始霉素IIB(如实施例1中所述制备)，然后滴加1.56毫升二乙 基氨基三氟化硫。在搅拌10分钟后，反应混合物用100毫升二氯甲烷 稀释。得到的溶液相继地每次用100毫升水和100毫升饱和氯化钠水 溶液洗涤2次，然后用硫酸镁干燥，过滤，在减压(2.7千帕)下浓缩 至干，得到7.6克深黄色油，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：环己烷/ 醋酸乙酯(以体积计，6/4)]。得到0.87克(16R)-16-脱氧-16-硫氰基 -14-O-(叔-丁基二苯基甲硅烷基)原始霉素IIB，呈白色固体状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.05-1.10(mt：3H)；1.06(s：9H)；1.28 (s：3H)；1.70-1.95(mt：4H)；1.96(mt：1H)；2.10-2.25(mt：2H)； 2.77(mt：1H)；3.04(dd，J＝17和6Hz：1H)；3.27(dd，J＝17 和8Hz：1H)；3.40-3.50(mt：2H)；3.75(mt：1H)；3.95(mt：1H)； 4.53(mt：1H)；4.67(mt：1H)；4.75-4.85(mt：2H)；5.35(d，J＝ 9Hz：1H)；5.56(mt：1H)；5.81(dd，J＝16和1.5Hz：1H)；6.04 (mt：1H)；6.11(d，J＝16Hz：1H)；6.49(dd，J＝16和5Hz： 1H)；7.30-7.50(mt：6H)；7.63(宽d，J＝7Hz：2H)；7.69(mt： 2H)；8.12(s：1H)。

实施例5

(16R)-16-脱氧-16-溴原始霉素IIB

以与实施例4所述类似方式操作，但使用1.2克(16R)-16-脱氧 -16-溴-14-O-(叔-丁基二苯基甲硅烷基)原始霉素IIB在30毫升二氯 甲烷中的溶液为原料，在20℃下加入7.5毫升三乙胺三氟水合物。在 回流搅拌25小时与按照实施例4类似方式进行处理后，得到橙色固体， 它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇(以体积计，97/3)]。得 到0.78克白色固体，它在5毫升乙腈中重结晶，得到0.48克(16R)-16- 脱氧-16-溴原始霉素IIB，呈白色碎晶体状，约146℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.01(d，J＝6.5Hz：3H)；1.09(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.75-2.05(mt：5H)；1.90(s：3H)；2.15(mt：1H)；2.32 (mt：1H)；2.77(mt：1H)；3.22(dd，J＝17和7Hz：1H)； 3.44(dd，J＝17和7Hz：1H)；3.52(mt：1H)；3.83(mt：1H)； 4.09(mt：1H)；4.37(mt：1H)；4.52(mt：1H)；4.75-4.90 (mt：2H)；4.79(dd，J＝10和1.5 Hz：1H)；5.34(d，J＝9Hz： 1H)；5.75(mt：1H)；5.82(dd，J＝17和1.5Hz：1H)；6.03(mt： 1H)；6.22(d，J＝16Hz：1H)；6.52(dd，J＝17和5Hz：1H)；8.11 (s：1H)。

按照下述方法可以制备(16R)-16-脱氧-16-溴-14-O-(叔-丁基二 苯基甲硅烷基)原始霉素IIB：

以与实施例4所述类似的方式操作，但是使用5.25克四正-丁基 溴化铵在60毫升二氯甲烷中的溶液为原料，在20℃氩气氛下加入2.5 克(16S)-16-羟基-14-O-(叔-丁基二苯基甲硅烷基)原始霉素IIB(如实 施例1所述制备)，然后缓慢加入1.5毫升二乙基氨基三氟化硫。在搅 拌10分钟与按照实施例4类似方式进行处理后，得到4.6克黄色固体， 它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：环己烷/醋酸乙酯(以体积计，6/4)]。 得到1.38克(16R)-16-脱氧-16-溴-14-O-(叔-丁基二苯基甲硅烷基) 原始霉素IIB，呈白色固体状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.07(s：9H)；1.10(d，J＝6.5 Hz；3H)；1.37(s：3H)；1.70-2.05(mt：5H)；2.14(mt：1H)；2.31 (mt：1H)；2.77(mt：1H)；3.12(dd，J＝17和5.5Hz：1H)；3.30 (dd，J＝17和8Hz：1H)；3.45(mt：1H)；3.77(mt：1H)；4.03(mt： 1H)；4.23(mt：1H)；4.55(mt：1H)；4.75-4.85(mt：3H)；5.33(d， J＝9Hz：1H)；5.54(mt：1H)；5.82(宽d，J＝16Hz：1H)；6.00 (mt：1H)；6.12(d，J＝16Hz：1H)；6.50(dd，J＝16和5Hz： 1H)；7.30-7.45(mt：6H)；7.63(宽d，J＝7Hz：2H)；7.69(宽 d，J＝7Hz：2H)；8.08(s：1H)。

实施例6

(16R)-16-脱氧-16-氯原始霉素IIB

以与实施例4所述类似的方式操作，但使用1.4克(16R)-16-脱氧 -16-氯-14-O-(叔-丁基二苯基甲硅烷基)原始霉素IIB在35毫升二氯 甲烷中的溶液为原料，在20℃下加入11毫升三乙胺三氟水合物。在 回流搅拌20小时与按照实施例4类似处理后，得到橙色固体，它用闪 式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇(以体积计，97/3)]。得到1 克白色固体，往其中加入0.5克由同样试验所得到的物质。在10毫升 乙腈中重结晶后，得到1.12克(16R)-16-脱氧-16-氯原始霉素IIB，呈 白色晶体状，约142℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5 Hz：3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.75-2.05(mt：5H)；1.88(s：3H)；2.10-2.25(mt：2H)；2.75 (mt：1H)；3.10(dd，J＝17和7Hz：1H)；3.30(dd，J＝17和6.5 Hz：1H)；3.53(mt：1H)；3.84(mt：1H)；4.06(mt：1H)；4.37(mt： 1H)；4.49(mt：1H)；4.75-4.90(mt：3H)；5.35(d，J＝9Hz：1H)； 5.76(mt：1H)；5.83(dd，J＝17和2Hz：1H)；5.99(mt：1H)；6.22 (d，J＝15.5Hz：1H)；6.51(dd，l＝17和5Hz：1H)；8.09(s： 1H)。

按照下述方法可以制备(16R)-16-脱氧-16-氯-14-O-(叔-丁基二 苯基甲硅烷基)原始霉素IIB：

以与实施例4所述类似的方式操作，但是使用7.27克四正-丁基 氯化铵在50毫升二氯甲烷中的溶液为原料，在20℃氩气氛下加入4 克(16S)-16-羟基-14-O-(叔-丁基二苯基甲硅烷基)原始霉素IIB(如实 施例1所述制备)，然后滴加2.44毫升二乙基氨基三氟化硫。在搅拌 10分钟与按照实施例4类似地处理后，得到4.45克黄色固体，它用 闪式色谱法纯化[洗脱剂：环己烷/醋酸乙酯(以体积计，55/45)]。得 到0.51克(16R)-16-脱氧-16-氯-14-O-(叔-丁基二苯基甲硅烷基)原 始霉素IIB，呈白色固体状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.07(s：9H)；1.10(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.33(s：3H)；1.70-1.90(mt：4H)；1.96(mt：1H)；2.05-2.25 (mt：2H)；2.77(mt：1H)；2.98(dd，J＝17和5.5Hz：1H)；3.16 (dd，J＝17和8Hz：1H)；3.45(mt：1H)；3.76(mt：1H)；4.03(mt： 1H)；4.25(mt：1H)；4.55(mt：1H)；4.75-4.85(mt：3H)；5.34(d， J＝9Hz：1H)；5.54(mt：1H)；5.82(dd，J＝16和2Hz：1H)；5.99 (mt：1H)；6.11(d，J＝16Hz：1H)；6.50(dd，J＝16和5Hz； 1H)；7.30-7.45(mt：6H)；7.63(dd，J＝7和1.5Hz：2H)；7.68(dd， J＝7和1.5Hz：2H)；8.08(s：1H)。

实施例7

(16R)-16-脱氧-16-碘原始霉素IIB

以与实施例4所述类似方式操作，但使用0.83克(16R)-16-脱氧 -16-碘-14-O-(叔-丁基二苯基甲硅烷基)原始霉素IIB在15毫升二氯 甲烷中的溶液为原料，在20℃下加入6.2毫升三乙胺三氟水合物。在 回流搅拌23小时与按照实施例4类似处理后，得到0.9克白色固体粉 末，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇/乙腈(以体积计， 98/1/1)]。得到0.41克黄色固体，它用5微米C18硅胶Kromasil 柱高效液相色谱纯化(柱直径＝2厘米，柱长＝25厘米)[洗脱剂：水/ 乙腈梯度，(以体积计，80/20至60/40)]。得到0.18克白色固体，往 其中加入0.12克由等同试验得到的物质，得到0.3克(16R)-16-脱氧 -16-碘原始霉素IIB，呈浅褐色固体状，约140℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz：3H)； 1.01(d，J＝6.5Hz：3H)；1.09(d，J＝6.5Hz：3H)；1.67(d，J ＝3Hz：1H)；1.73(mt：1H)；1.80-2.05(mt：4H)；1.94(s：3H)； 2.17(mt：1H)；2.36(mt：1H)；2.77(mt：1H)；3.31(dd，J＝17和 7Hz：1H)；3.45-3.60(mt：1H)；3.53(dd，J＝17和7Hz：1H)； 3.85(mt：1H)；4.10(mt：1H)；4.32(mt：1H)；4.53(mt： 1H)；4.75-4.85(mt：3H)；5.31(d，J＝9Hz：1H)；5.76(mt：1H)； 5.82(dd，J＝17和1.5Hz：1H)；6.00(mt：1H)；6.21(d，J＝16 Hz：1H)；6.51(dd，J＝17和5Hz：1H)；8.11(s：1H)。

按照下述方法可以制备(16R)-16-脱氧-16-碘-14-O-(叔-丁基二 苯基甲硅烷基)原始霉素IIB：

以与实施例4所描类似方式操作，但是使用7.2克四正-丁基碘化 铵在60毫升二氯甲烷中的溶液为原料，在20℃氩气氛下加入3克 (16S)-16-羟基-14-O-(叔-丁基二苯基甲硅烷基)原始霉素IIB(如实施 例1所述制备)，然后在0℃滴加1.8毫升二乙基氨基三氟化硫。在0 ℃搅拌20分钟与按照实施例4类似地处理后，得到10.5克橙色油， 它在30毫升环己烷/醋酸乙酯混合物(60/40)中搅拌15分钟。在过滤 和减压(2.7千帕)下浓缩滤液后，得到5.5克黄色固体，它用闪式色 谱法纯化[洗脱剂：环己烷/醋酸乙酯(以体积计，60/40)]。得到1.81 克(16R)-16-脱氧-16-碘-14-O-(叔-丁基二苯基甲硅烷基)原始霉素 IIB，呈白色固体状，到105℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCI3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5 Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.05(s：9H)；1.09(d，J＝6.5 Hz：3H)；1.41(s：3H)；1.70-1.95(mt：4H)；1.96(mt：1H)；2.14 (mt：1H)；2.33(mt：1H)；2.77(mt：1H)；3.20(dd，J＝17和6 Hz：1H)；3.38(dd，J＝17和8Hz：1H)；3.45(mt：1H)；3.79(mt： 1H)；4.03(mt；1H)；4.17(mt：1H)；4.54(mt：1H)；4.71(dt，J ＝9和3Hz；1H)；4.78(dd，J＝10和2.5Hz：1H)；4.75-4.85(mt： 1H)；5.30(d，J＝9Hz：1H)；5.55(mt：1H)；5.81(dd，J＝17 和2Hz：1H)；5.99(mt：1H)；6.11(d，J＝16Hz：1H)；6.49(dd， J＝17和5Hz：1H)；7.30-7.45(mt：6H)；7.63(dd，J＝7和1.5 Hz：2H)；7.69(dd，J＝7和1.5Hz：2H)；8.08(s：1H)。

实施例8

(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIA

往0.97克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-(叔-丁基二苯基甲硅烷基) 原始霉素IIB在8毫升四氢呋喃中的溶液，在20℃氩气氛下加入0.2 毫升醋酸和0.6克四正-丁基氟化铵三水合物。在搅拌168小时后，把 反应混合物倒入50毫升饱和碳酸氢钠水溶液中。倾析有机相后，水相 用30毫升二氯甲烷提取。合并有机相，再用硫酸镁干燥，过滤，然后 在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到的残留物用闪式色谱法纯化[洗脱 剂：二氯甲烷/甲醇/乙腈(以体积计，95/2.5/2.5)]。得到0.38克黄 色固体，往其中加入0.21克由相同试验得到的固体。在乙醚中搅拌、 过滤和在20℃减压(2.7千帕)下干燥，得到0.58克(16R)-16-脱氧-16- 氟原始霉素IIB，呈浅黄色固体状，约110℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.99(mt：6H)；1.14 (d，J＝6.5Hz：3H)；1.77(s：3H)；1.85-2.10(mt：2H)；2.28(mt： 1H)；2.65-2.90(mt：3H)；3.08(mt：1H)；3.25(mt：1H)；3.98(宽 d，J＝17Hz：1H)；4.10-4.25(mt：2H)；4.31(mt：1H)；4.55-4.80 (mt：2H)；4.90-5.00(mt：2H)；5.69(mt：1H)；5.96(d，J＝16Hz： 1H)；5.99(d，J＝16Hz：1H)；6.17(宽t，J＝3Hz：1H)；6.61 (dd，J＝16和7Hz：1H)；7.06(mt：1H)；7.93(s：1H)。

按照下述方式可以制备(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-(叔-丁基二 苯基甲硅烷基)原始霉素IIA：

往65克(16S)-16-羟基-14-O-(叔-丁基二苯基甲硅烷基)原始霉 素IIA在700毫升二氯甲烷中的溶液，在20℃氩气氛下缓慢加入20.5 毫升二乙基氨基三氟化硫。在搅拌3小时后，反应混合物缓慢倒入1000 毫升饱和碳酸氢钠水溶液中。倾析有机相，水相每次用500毫升二氯 甲烷提取2次。合并有机相后，用硫酸镁干燥，过滤，然后在减压(2.7 千帕)下浓缩至干，得到67.62克橙色固体。在戊烷中搅拌该固体，过 滤和在20℃减压(2.7千帕)下干燥后，得到65.55克(16R)-16-脱氧 -16-氟-14-O-(叔-丁基二苯基甲硅烷基)原始霉素IIA，呈橘黄色固体 状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.95-1.05(mt：6H)； 1.05(s：9H)；1.13(d，J＝6.5Hz：3H)；1.28(s：3H)；1.80-2.10 (mt：2H)；2.10-2.30(mt：1H)；2.65-2.85(mt：3H)；2.90-3.15(mt： 2H)；3.95-4.10(mt：2H)；4.16(mt：1H)；4.28(mt：1H)；4.40-4.60 (mt：2H)；4.99(dd，J＝10和1.5Hz：1H)；5.05(d，J＝9Hz： 1H)；5.50(mt：1H)；5.90(d，J＝16Hz：1H)；6.00(宽d，J＝ 17Hz：1H)；6.16(t，J＝3Hz；1H)；6.61(dd，J＝17和7Hz： 1H)；7.02(t，J＝5.5Hz：1H)；7.25-7.50(mt：6H)；7.58(宽 d，J＝7Hz：2H)；7.67(宽d，J＝7Hz：2H)；7.89(s：1H)。

按照下述方式可以制备(16S)-16-羟基-14-O-(叔-丁基二苯基甲 硅烷基)原始霉素IIA：

以与实施例1所述类似的方式操作，但是使用10克(16S)-16-羟 基原始霉素IIA在100毫升二氯甲烷中的溶液为原料，在20℃氩气氛 下滴加13.2毫升二异丙基乙基胺、19.7毫升叔-丁基二苯基氯硅烷以 及0.46克4-二甲基氨基吡啶。在搅拌20小时和按照实施例1类似地 处理后，得到35克栗色油，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/ 甲醇/乙腈(以体积计，96/2/2)]。得到10.5克(16S)-16-羟基 -14-O-(叔-丁基二苯基甲硅烷基)原始霉素IIA，呈浅褐色固体状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.90-1.05(mt： 6H)；1.05-1.15(mt：15H)；1.90-2.05(mt：3H)；2.54(mt：1H)；2.66 (mt：1H)；2.76(mt：1H)；2.82(dd，J＝16和11Hz：1H)；3.11 (dd，J＝16和3Hz：1H)；3.28(mt：1H)；3.83(宽s：1H)；4.00-4.15 (mt：2H)；4.50(mt：1H)；4.57(mt：1H)；4.81(mt：1H)；4.94(dd， J＝10和2Hz：1H)；5.38(mt：1H)；5.63(d，J＝9Hz：1H)；5.88 (dd，J＝16和1.5Hz：1H)；5.94(d，J＝16Hz：1H)；6.01(t， J＝3Hz：1H)；6.34(mt：1H)；6.47(dd，J＝16和5Hz： 1H)；7.25-7.50(mt：6H)；7.62(dd，J＝7和1.5Hz：2H)；7.68(dd， J＝7和1.5Hz：2H)；8.06(s：1H)。

(16S)-16-羟基原始霉素IIA可以根据F.Le Goffic及其同事的 《Eur.J.Med.-Chimica Therapeutica》，1-2月，16(1)，69-72(1981) 制备。

实施例9

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(吗啉-4-基甲基)苯甲酰基]原 始霉素IIB甲磺酸盐

往0.15克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(吗啉-4-基甲基)苯甲 酰基]原始霉素IIB在5毫升甲醇中的溶液，在20℃加入2毫升0.1N 甲磺酸乙醇溶液。在搅拌10分钟后，反应混合物在减压(2.7千帕)下 浓缩至干，得到白色残留物，在10毫升醚中对其进行搅拌。在过滤、 用10毫升乙醚清洗固体与在20℃减压(2.7千帕)干燥后，得到0.15  克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(吗啉-4-基甲基)苯甲酰基]原始 霉素IIB甲磺酸盐，呈白色固体状，约150℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，(CD3)2SO d6，δ，以ppm计)：0.85(d，J＝ 6.5Hz：3H)；0.95(d，J＝6.5Hz：3H)；1.05(d，J＝6.5Hz：3H)； 1.54(mt：1H)；1.75-2.00(mt：3H)；1.86(s：3H)；2.05-2.25(mt： 2H)；2.30-2.45(mt：1H)；2.32(s：3H)；2.78(mt：1H)；3.05-3.45 (mt：6H)；3.55-3.70(mt：3H)；3.72(mt：1H)；3.84(mt： 1H)；3.90-4.05(mt：3H)；4.47(mf：2H)；4.70-4.80(mt：2H)；5.18 (减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.55(d，J＝9.5Hz：1H)；5.66 (mt：1H)；5.81(宽d，J＝16Hz：1H)；6.00(mt：1H)；6.21(d， J＝16Hz：1H)；6.64(dd，J＝16和5Hz：1H)；7.68(宽d，J＝7.5 Hz：2H)；8.08(宽d，J＝7.5Hz：2H)；8.16(mt：1H)；8.55(s： 1H)；9.95(mf：1H)。

按照下述方式制备(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(吗啉-4-基 甲基)苯甲酰基]原始霉素IIB：

往2克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(氯甲基)苯甲酰基]原始 霉素IIB在50毫升四氢氟喃喃中的溶液，在20℃加入0.44克碘化钠 和0.5毫升吗啉。在回流搅拌17小时后，把反应混合物倒入50毫升 水中，然后每次用50毫升二氯甲烷提取2次。有机相合并，每次用 100毫升水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓缩 至干，得到2.5克残留物，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/ 甲醇梯度(以体积计，100/0.99/1和98/2)]。在戊烷中搅拌得到的固 体，过滤，在30℃(90帕)干燥，得到1.69克(16R)-16-脱氧-16-氟 -14-O-[4-(吗啉-4-基甲基)苯甲酰基]原始霉素IIB，呈碎固体状，约 120℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.01(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.75-2.05 (mt：5H)；1.95(s：3H)；2.16(mt：1H)；2.30-2.50(mt：1H)；2.44 (mt：4H)；2.76(mt：1H)；3.05(dt，J＝17和6Hz：1H)；3.29(mt： 1H)；3.49(mt：1H)；3.55(s：2H)；3.71(mt：4H)；3.89(mt：1H)； 4.09(mt：1H)；4.52(mt：1H)；4.79(宽d，J＝10Hz：1H)；4.83 (dd，J＝9和3Hz：1H)；5.18(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.45 (d，J＝9.5Hz：1H)；5.70-5.85(mt：1H)；5.82(宽d，J＝17Hz： 1H)；5.94(mt：1H)；6.06(dt，J＝9.5和5Hz：1H)；6.22(d，J ＝16Hz：1H)；6.52(dd，J＝17和5Hz：1H)；7.41(d，J＝8Hz： 2H)；7.98(d，J＝8Hz：2H)；8.14(s：1H)。

按照下述方式可以制备(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(氯甲基) 苯甲酰基]原始霉素IIB：

往5.32克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施例1中描述 的方法制备)在150毫升二氯甲烷和2.1毫升三乙胺中的溶液，在10 ℃加入2.84克4-(氯甲基)苯甲酰氯和0.095克4-二甲基氨基吡啶。 在20℃搅拌20小时后，反应混合物相继地用50毫升水、50毫升5％ 碳酸氢钠水溶液、30毫升水和30毫升饱和氯化钠水溶液洗涤。有机 相用硫酸镁干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓缩至干。得到7.2 克浅褐色残留物，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇/乙腈 梯度(以体积计99/0.5/0.5和98/1/1)]。得到4.5克(16R)-16-脱氧 -16-氟-14-O-[4-(氯甲基)苯甲酰基]原始霉素IIB，呈浅黄色固体。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.01(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.75-2.05 (mt：5H)；1.95(s：3H)；2.16(mt：1H)；2.40(mt：1H)；2.76(mt： 1H)；3.04(dt，J＝17和6Hz：1H)；3.29(mt：1H)；3.49(mt：1H)； 3.88(mt：1H)；4.09(mt：1H)；4.53(mt：1H)；4.62(s：2H)；4.78 (dd，J＝10和2Hz：1H)；4.83(dd，J＝9和3Hz：1H)；5.18(减 速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.44(d，J＝9.5Hz：1H)；5.75-5.85 (mt：1H)；5.82(dd，J＝17和2Hz：1H)；5.94(mt：1H)；6.06(dt， J＝9.5和5Hz：1H)；6.22(d，J＝16Hz：1H)；6.52(dd，J＝17 和5Hz：1H)；7.47(d，J＝8Hz：2H)；8.02(d，J＝8Hz：2H)； 8.14(s：1H)。

实施例10

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(咪唑-1-基甲基)苯甲酰基]原 始霉素IIB

以与实施例9所述类似的方式操作，但是使用0.499克(16R)-16- 脱氧-16-氟-14-O-[4-(氯甲基)苯甲酰基]原始霉素IIB(如实施例9所 述制备)在30毫升四氢呋喃中的溶液为原料，在20℃加入0.11克碘 化钠和0.099克咪唑。在回流搅拌17小时和按照实施例9类似处理后， 得到0.5克黄色固体，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇， (以体积计，97/3)]。在醚中搅拌得到的固体，过滤与在20℃(90帕) 下干燥后，得到0.289克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(咪唑-1-基 甲基)苯甲酰基]原始霉素IIB，呈黄色固体状，到136℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.01(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.75-2.05 (mt：5H)；1.95(s：3H)；2.16(mt：1H)；2.39(mt：1H)；2.76(mt： 1H)；3.04(td，J＝17和6Hz：1H)；3.28(mt：1H)；3.49(mt：1H)； 3.87(mt：1H)；4.08(mt：1H)；4.53(mt：1H)；4.78(宽d，J＝ 10Hz：1H)；4.83(dd，J＝9和3Hz：1H)；5.17(减速的双重线， JHF＝48Hz：1H)；5.19(s；2H)；5.43(d，J＝9Hz：1H)；5.78(mt： 1H)；5.82(dd，J＝17和1.5Hz：1H)；5.94(mt：1H)；6.05(mt： 1H)；6.22(d，J＝16Hz：1H)；6.52(dd，J＝17和5Hz：1H)；6.90 (s：1H)；7.13(s：1H)；7.20(d，J＝8Hz：2H)；7.58(s：1H)； 8.01(d，J＝8Hz：2H)；8.14(s：1H)。

实施例11

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(4-甲基哌嗪-1-基甲基)苯甲酰 基]原始霉素IIB

以与实施例9所述类似的方式操作，但是使用2克(16R)-16-脱氧 -16-氟-14-O-[4-(氯甲基)苯甲酰基]原始霉素IIB(如实施例9所述制 备)在90毫升四氢呋喃中的溶液为原料，在20℃加入0.44克碘化钠 和0.65毫升甲基哌嗪在10毫升四氢呋喃中的溶液。在回流搅拌20小 时和按照实施例9类似处理后，得到2.4克残留物，它用闪式色谱法 纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇(以体积计，99/1)]。在15毫升醚中搅 拌得到的固体，过滤与在20℃(90帕)下干燥，得到1克(16R)-16-脱 氧-16-氟-14-O-[4-(4-甲基哌嗪-1-基甲基)苯甲酰基]原始霉素IIB， 呈微黄色固体状，约160℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.01(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.75-2.25 (mt：6H)；1.95(s：3H)；2.30-2.50(mt：1H)；2.40(s：3H)；2.62 (mf：8H)；2.76(mt：1H)；3.04(dt，J＝17和6Hz：1H)；3.29(mt： 1H)；3.49(mt：1H)；3.59(s；2H)；3.88(mt：1H)；4.08(mt：1H)； 4.52(mt：1H)；4.79(宽d，J＝10Hz：1H)；4.83(dd，J＝9和 3Hz：1H)；5.18(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.44(d，J＝9.5 Hz：1H)；5.70-5.85(mt：1H)；5.82(dd，J＝17和1.5Hz：1H)；5.95 (mt：1H)；6.05(dt，J＝9.5和6Hz：1H)；6.22(d，J＝16Hz： 1H)；6.52(dd，J＝17和5Hz：1H)；7.40(d，J＝8.5Hz：2H)；7.97 (d，J＝8.5Hz：2H)；8.14(s：1H)。

实施例12

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(二乙基氨基甲基)苯甲酰基]原 始霉素IIB

以与实施例9所述类似的方式操作，但是使用0.55克(16R)-16- 脱氧-16-氟-14-O-[4-(氯甲基)苯甲酰基]原始霉素IIB(如实施例9所 述制备)在30毫升四氢呋喃中的溶液为原料，在20℃加入0.12克碘 化钠和0.17毫升二乙基胺。在回流搅拌15.5小时和按照实施例9类 似处理后，得到残留物，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲 醇(以体积计，95/5)]。在20毫升戊烷中搅拌得到的固体，过滤与在 20℃(90帕)下干燥后，得到0.14克(16R)-16-脱氧-16-氟 -14-O-[4-(二乙基氨基甲基)苯甲酰基]原始霉素IIB，呈微黄色固体 状，约150℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.03(mt：9H)；1.09(d，J＝6.5Hz：3H)；1.75-2.05(mt：5H)； 1.95(s：3H)；2.16(mt：1H)；2.40(mt：1H)；2.52(q，J＝7Hz： 4H)；2.77(mt：1H)；3.05(td，J＝17和6Hz：1H)；3.28(mt：1H)； 3.48(mt：1H)；3.61(s：2H)；3.89(mt：1H)；4.09(mt：1H)；4.53 (mt：1H)；4.79(宽d，J＝10Hz：1H)；4.82(dd，J＝9和3Hz： 1H)；5.17(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.44(d，J＝9Hz： 1H)；5.77(mt：1H)；5.82(dd，J＝17和1.5Hz：1H)；5.92(mt： 1H)；6.05(mt：1H)；6.21(d，J＝6Hz：1H)；6.50(dd，J＝16 和5Hz：1H)；7.42(d，J＝8Hz：2H)；7.96(d，J＝8Hz：2H)；8.14 (s：1H)。

实施例13

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{4-[((2S)-2-羟基甲基)吡咯烷-1- 基甲基]苯甲酰基}原始霉素IIB

以与实施例9所述类似的方式操作，但是使用1克(16R)-16-脱氧 -16-氟-14-O-[4-(氯甲基)苯甲酰基]原始霉素IIB(如实施例9所述制备) 在45毫升四氢呋喃中的溶液为原料，在20℃加入0.22克碘化钠和0.29 毫升L-脯氨醇(prolinol)在5毫升四氢呋喃中的溶液。在回流搅拌 12小时和按照实施例9类似处理后，得到1.25克残留物，它用闪式色 谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇(以体积计98/2)]。在10毫升醚中搅 拌得到的固体，过滤与在20℃(90帕)下干燥后，得到0.4克(16R)-16- 脱氧-16-氟-14-O-{4-[((2S)-2-羟基甲基)吡咯烷-1-基甲基]苯甲酰 基}原始霉素IIB，呈白色固体状，约158℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.01(d，J＝6.5Hz：3H)，1，10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.55-2.05 (mt：8H)；1.96(s：3H)；2.17(mt：1H)；2.29(mt：1H)；2.41(mt： 1H)；2.77(mt：2H)；2.96(mt：1H)；3.05(td，J＝17和6Hz：1H)； 3.29(mt：1H)；3.40-3.55(mt：3H)；3.66(dd，J＝11和4Hz：1H)； 3.88(mt：1H)；4.02(d，J＝13Hz：1H)；4.09(mt：1H)；4.53(mt： 1H)；4.79(dd，J＝10和2Hz：1H)；4.83(dd，J＝9和3Hz：1H)； 5.18(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.45(d，J＝9.5Hz：1H)；5.78 (mt：1H)；5.82(dd，J＝16和2Hz：1H)；5.95(mt：1H)；6.05(mt： 1H)；6.22(d，J＝16Hz：1H)；6.52(dd，J＝16和5Hz：1H)；7.38 (d，J＝8Hz：2H)；7.98(d，J＝8Hz：2H)；8.14(s：1H)。

实施例14

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(2-吡啶甲基氨基甲基)苯甲酰 基]原始霉素IIB

以与实施例9所述类似的方式操作，但是使用2克(16R)-16-脱氧 -16-氟-14-O-[4-(氯甲基)苯甲酰基]原始霉素IIB(如实施例9所述制 备)在20毫升四氢呋喃中的溶液为原料，在20℃加入0.44克碘化钠 和1.2毫升2-(氨基甲基)吡啶。在回流搅拌17小时和按照实施例9 类似处理后，得到2.1克深黄色固体，它相继用闪式色谱法纯化两次 [洗脱剂：分别为二氯甲烷/甲醇/乙腈(以体积计92/4/4和 95/2.5/2.5)]。得到的固体在醚中搅拌，过滤与在20℃(90帕)下干燥 后，得到1.59克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(2-吡啶甲基氨基甲 基)苯甲酰基]原始霉素IIB，呈白色固体状，约106℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.01(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.75-2.05 (mt：5H)；1.95(s：3H)；2.16(mt：1H)；2.40(mt：1H)；2.77(mt： 1H)；3.05(dt，J＝17和6Hz：1H)；3.29(mt：1H)；3.49(mt：1H)； 3.90(mt：1H)；3.92(s：2H)；3.93(s：2H)；4.10(mt：1H)；4.53 (mt：1H)；4.79(dd，J＝10和2Hz：1H)；4.83(dd，J＝9和3.5 Hz：1H)；5.18(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.45(d，J＝9Hz： 1H)；5.79(mt：1H)；5.82(dd，J＝16和2Hz：1H)；5.92(mt：1H)； 6.06(mt：1H)；6.22(d，J＝16Hz：1H)；6.51(dd，J＝16和5 Hz：1H)；7.18(dd，J＝8和5Hz：1H)；7.30(d，J＝8Hz：1H)；7.45 (d，J＝9Hz：2H)；7.65(dt，J＝8和2Hz：1H)；7.99(d，J＝8 Hz：2H)；8.14(s：1H)；8.58(宽d，J＝5Hz：1H)。

实施例15

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(吡咯烷-1-基)苯甲酰基]原始 霉素IIB

以与实施例9所述类似的方式操作，但是使用1克(16R)-16-脱氧 -16-氟-14-O-[4-(氯甲基)苯甲酰基]原始霉素IIB(如实施例9所述制 备)在50毫升四氢呋喃中的溶液为原料，在20℃加入0.22克碘化钠 和0.24毫升吡咯烷。在回流搅拌7小时和按照实施例9类似处理后， 得到残留物，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇(以体积计， 99/1)]。于是在10毫升戊烷中搅拌、过滤与在20℃(90帕)下干燥后， 得到0.4克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(吡咯烷-1-基)苯甲酰基] 原始霉素IIB，呈黄色固体状，约170℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.01(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.70-2.05 (mt：5H)；1.81(mt：4H)；1.95(s：3H)；2.16(mt：1H)；2.40(mt： 1H)；2.53(mt：4H)；2.76(mt；1H)；3.04(td，J＝17和6Hz：1H)； 3.28(mt：1H)；3.48(mt：1H)；3.68(s：2H)；3.88(mt：1H)；4.09 (mt：1H)；4.53(mt；1H)；4.79(dd，J＝10和1Hz：1H)；4.83(dd， J＝9和3Hz：1H)；5.17(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.45(d， J＝9.5Hz：1H)；5.77(mt：1H)；5.81(dd，J＝17和1.5Hz：1H)； 5.95(mt：1H)；6.05(mt：1H)；6.22(d，J＝16Hz：1H)；6.51(dd， J＝17和5Hz：1H)；7.42(d，J＝8Hz：2H)；7.97(d，J＝8Hz： 2H)；8.14(s：1H)。

实施例16

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(哌啶-1-基)苯甲酰基]原始霉 素IIB

以与实施例9所述类似的方式操作，但是使用0.75克(16R)-16- 脱氧-16-氟-14-O-[4-(氯甲基)苯甲酰基]原始霉素IIB(如实施例9所 述制备)在20毫升四氢呋喃中的溶液为原料，在20℃加入0.16克碘 化钠和0.22毫升哌啶。在66℃搅拌15小时和按照实施例9类似处理 后，得到1克黄色固体，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲 醇(以体积计，97/3)]。于是在乙醚中搅拌，然后在戊烷中搅拌，过滤 与在20℃(90帕)下干燥后，得到0.33克(16R)-16-脱氧-16-氟 -14-O-[4-(哌啶-1-基)苯甲酰基]原始霉素IIB，呈白色固体状，约110 ℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.01(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.35-1.70 (mt：6H)；1.75-2.05(mt：5H)；1.95(s：3H)；2.16(mt： 1H)：2.30-2.50(mt：5H)；2.76(mt：1H)；3.05(td，J＝17和6Hz： 1H)；3.29(mt：1H)；3.49(mt：1H)；3.52(s：2H)；3.89(mt：1H)； 4.09(mt：1H)；4.53(mt：1H)；4.79(dd，J＝10和1.5Hz：1H)；4.83 (dd，J＝9和3Hz：1H)；5.18(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.45 (d，J＝9.5Hz：1H)；5.77(mt：1H)；5.82(dd，J＝16和2Hz： 1H)；5.93(mt：1H)；6.05(mt：1H)；6.22(d，J＝16Hz：1H)；6.51(dd， J＝16和5Hz：1H)；7.40(d，J＝8Hz：2H)；7.97(d，J＝8Hz：2H)；8.14 (s：1H)。

实施例17

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{4-[(2-羟基乙基)氨基甲基]苯甲 酰基}原始霉素IIB

以与实施例9所述类似的方式操作，但是使用0.8克(16R)-16- 脱氧-16-氟-14-O-[4-(氯甲基)苯甲酰基]原始霉素IIB(如实施例9述 制备)在20毫升四氢呋喃中的溶液、0.17克碘化钠和0.14毫升乙醇 胺为原料，在回流搅拌16小时与按照实施例9类似处理后，得到0.8 克浅褐色固体，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇梯度(以 体积计95/5和90/10)]。在醚中搅拌，过滤与(90帕)干燥后，得到 0.36克白色固体，它再用5微米Hypersil柱高效液相色谱纯化(柱 直径＝2厘米，柱长＝25厘米)[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇梯度(以体积计， 97/3)]。得到0.129克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{4-[(2-羟基乙 基)氨基甲基]苯甲酰基}原始霉素IIB，呈白色固体状，约194℃熔化 (分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz；3H)；1.09(d，J＝6.5Hz：3H)；1.70-2.05 (mt：5H)；1.95(s：3H)；2.16(mt：1H)；2.39(mt：1H)；2.76(mt： 1H)；2.81(t，J＝5.5Hz：2H)；3.04(td，J＝17和6Hz：1H)； 3.28(mt；1H)；3.48(mt：1H)；3.67(t，J＝5.5Hz：2H)；3.85-3.95 (mt：1H)；3.88(s：2H)；4.09(mt：1H)；4.52(mt：1H)；4.78(宽 d，J＝10Hz：1H)；4.82(dd，J＝9和3Hz：1H)；5.17(减速的 双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.44(d，J＝9.5Hz：1H)；5.78(mt： 1H)；5.81(宽d，J＝16Hz：1H)；5.93(mt：1H)；6.05(mt：1H)； 6.22(d，J＝16Hz：1H)；6.51(dd，J＝16和5Hz：1H)；7.40(d，J＝ 8Hz：2H)；7.99(d，J＝8Hz：2H)；8.13(s：1H)。

实施例18

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{4-[(2-二乙基氨基)乙基硫代甲基] 苯甲酰基}原始霉素IIB

往0.46毫升2-二乙基氨基乙硫醇在10毫升四氢呋喃中的溶液， 在0℃加入0.82毫升丁基锂溶液(在己烷中，2.5M)。在搅拌15分钟 后，在15分钟内滴加1.4克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(氯甲基) 苯甲酰基]原始霉素IIB(如实施例9所述制备)在15毫升四氢呋喃中的 溶液。在0℃搅拌6.5小时和20℃搅拌15小时后，滴加如前面预先制 备的溶液，但使用0.153毫升2-二乙基氨基乙硫醇和0.205毫升丁基 锂溶液(在己烷中，2.5M)在0.5毫升四氢呋喃中的溶液为原料。在20 ℃搅拌3.5小时后，反应混合物在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到 的残留物溶于20毫升二氯甲烷中。这种溶液用50毫升水洗涤，然后 倾析。水相用20毫升二氯甲烷提取。合并有机相，再每次用70毫升 水洗涤2次，用硫酸镁干燥，过滤，在减压(2.7千帕)下浓缩至干， 得到1.6克黄色固体，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇/ 乙腈(以体积计，92/4/4)]。在戊烷中搅拌，过滤和于20℃干燥(2.7 千帕)后，于是得到0.926克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{4-[(2-二 乙基氨基)乙基硫代甲基]苯甲酰基}原始霉素IIB，呈浅褐色固体，约 84℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.90-1.05(mt：12H)； 1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.75-2.05(mt：5H)：1.96(s：3H)；2.16 (mt：1H)；2.40(mt：1H)；2.50(mt：6H)；2.62(mt：2H)；2.76(mt： 1H)；3.05(dt，J＝17和6Hz：1H)；3.29(mt：1H)；3.49(mt：1H)； 3.77(s：2H)；3.89(mt：1H)；4.09(mt：1H)；4.53(mt：1H)；4.78 (dd，J＝10和1.5Hz：1H)；4.83(dd，J＝9和3Hz：1H)；5.17 (减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.45(d，J＝9Hz：1H)；5.78(mt： 1H)；5.82(dd，J＝17和1.5Hz：1H)；5.92(mt：1H)；6.05(mt： 1H)；6.22(d，J＝16Hz：1H)；6.52(dd，J＝17和5Hz：1H)；7.40 (d，J＝8.5Hz：2H)；7.97(d，J＝8.5Hz：2H)；8.14(s：1H)。

实施例19

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(羧甲基硫代甲基)苯甲酰基]原 始霉素IIB

往0.4毫升巯基乙酸在10毫升四氢呋喃中的溶液，在0℃加入 4.64毫升丁基锂溶液(在己烷中，2.5M)。在搅拌15分钟后，将反应 混合物的温度降低到-50℃，缓慢滴加2克(16R)-16-脱氧-16-氟 -14-O-[4-(氯甲基)苯甲酰基]原始霉素IIB(如实施例9所述制备)在 10毫升四氢呋喃中的溶液。在-50℃搅拌3小时和20℃搅拌15小时后， 重新将反应混合物的温度降低到-50℃，滴加如前面于-50℃预先制备 的溶液，但使用0.2毫升巯基乙酸和2.32毫升丁基锂溶液(在己烷中， 2.5M)在5毫升四氢呋喃中的溶液为原料。在-50℃搅拌5小时后，反 应混合物被倒入100毫升水中，通过加入0.1N盐酸水溶液将pH调节 到3-4。在加入20毫升二氯甲烷和20毫升氯化钠饱和水溶液后，倾 析有机相，水相用20毫升二氯甲烷提取。合并有机相，用硫酸镁干燥， 过滤，在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到2.1克黄色固体，它用闪 式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇/乙腈(以体积计，90/5/5)]。 在醚中搅拌，过滤和于20℃干燥(90帕)后，于是得到0.21克(16R)-16- 脱氧-16-氟-14-O-[4-(羧甲基硫代甲基)苯甲酰基]原始霉素IIB，呈黄 色固体，约142℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.75-2.05 (mt：5H)；1.95(s：3H)；2.17(mt：1H)；2.39(mt：1H)；2.76(mt： 1H)；3.05(dt，J＝17和6Hz：1H)；3.08(s：2H)；3.28(mt：1H)； 3.50(mt：1H)；3.88(mt：1H)；3.88(s：2H)；4.10(mt：1H)；4.52 (mt：1H)；4.78(dd，J＝10和2Hz：1H)；4.83(dd，J＝9和3.5 Hz：1H)；5.19(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.44(d，J＝9Hz： 1H)；5.78(mt：1H)；5.83(dd，J＝16和2Hz：1H)；6.00(mt：1H)； 6.05(mt：1H)；6.22(d，s＝16Hz：1H)；6.52(dd，J＝16和5 Hz：1H)；7.41(d，J＝8Hz：2H)；7.97(d，J＝8Hz：2H)；8.16 (s：1H)。

实施例20

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{4-[(2-二乙基氨基)乙氧基甲基] 苯甲酰基}原始霉素IIB

往1克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施例1所述制备) 在15毫升二氯甲烷中的溶液，在20℃加入0.6克4-((2-二乙基氨基) 乙氧基甲基)苯甲酸、0.05克4-二甲基氨基吡啶、0.43克N，N’-二环 己基碳化二亚胺和2克硫酸镁。在20℃搅拌40小时后，加入0.24克 4-((2-二乙基氨基)乙氧基甲基)苯甲酸、0.025克4-二甲基氨基吡啶 和0.2克N，N’-二环己基碳化二亚胺。在20℃再搅拌3小时后，过滤 反应混合物，不溶物用20毫升二氯甲烷清洗。滤液每次用100毫升水 洗涤3次，用硫酸镁干燥，过滤，再在减压(2.7千帕)下浓缩至干， 得到1.5克浅褐色固体，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲 醇/乙腈梯度(以体积计，90/5/5和84/8/8)]。在20毫升醚中搅拌， 过滤和干燥后，于是得到0.86克白色固体，它在20毫升二氯甲烷中 制成溶液。得到的溶液每次用50毫升饱和碳酸氢钠水溶液洗涤两次， 用硫酸镁干燥，过滤，然后在20℃减压(2.7千帕)下浓缩，得到0.67 克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{4-[(2-二乙基氨基)乙氧基甲基]苯 甲酰基}原始霉素IIB，呈白色固体状，约76℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.01(d，J＝6.5Hz：3H)；1.05(t，J＝7Hz：6H)；1.10(d， J＝6.5Hz：3H)；1.75-2.05(mt：5H)；1.95(s：3H)；2.16(mt：1H)； 2.40(mt：1H)；2.60(q，J＝7Hz：4H)；2.72(t，J＝6.5Hz：2H)； 2.77(mt：1H)；3.04(dt，J＝17.5和6Hz：1H)；3.29(mt：1H)； 3.49(mt：1H)；3.59(t，J＝6.5Hz：2H)；3.89(mt：1H)；4.09 (mt：1H)；4.53(mt：1H)；4.59(s：2H)；4.79(dd，J＝10和2Hz： 1H)；4.83(dd，J＝9和3.5Hz：1H)；5.18(减速的双重线，JHF＝ 48Hz：1H)；5.45(d，J＝9Hz：1H)；5.78(mt：1H)；5.82(dd， J＝17和2Hz：1H)；5.92(mt：1H)；6.05(mt：1H)；6.22(d，J＝ 16Hz：1H)；6.51(dd，J＝17和5Hz：1H)；7.41(d，J＝8Hz：2H)；7.99(d， J＝8Hz：2H)；8.14(s：1H)。

按照下述方式可以制备4-[(2-二乙基氨基)乙氧基甲基]苯甲酸：

往3.67克4-[(2-二乙基氨基)乙氧基甲基]苯甲酸甲酯在50毫升 甲醇中的溶液，在20℃加入28毫升1N氢氧化钠水溶液。在20℃搅拌 2.5小时后，通过加入29毫升1N盐酸水溶液将反应混合物的pH调节 到5。反应混合物在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到的残留物在50 毫升甲醇中进行搅拌。在过滤掉不溶物后，滤液在减压(2.7千帕)下 浓缩至干，得到的残留物在50毫升二氯甲烷中进行搅拌。在过滤掉不 溶物后，滤液在20℃减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到3.5克4-((2- 二乙基氨基)乙氧基甲基)苯甲酸，呈黄色油状。

1H NMR谱(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，以ppm计)：1.07(t，J＝ 7.5Hz：6H)；2.79(q，J＝7.5Hz：4H)；2.93(t，J＝6.5Hz：2H)； 3.66(t，J＝6.5Hz：2H)；4.57(s：2H)；7.42(d，J＝8Hz：2H)； 7.92(d，J＝8Hz：2H)。

按照下述方式可以制备4-[(2-二乙基氨基)乙氧基甲基]苯甲酸 甲酯：

往5.8毫升N，N-二乙基乙醇胺在15毫升二甲基甲酰胺中的溶液， 在0℃加入2.64克氢化钠(在凡士林油中，60重量％)。在0℃搅拌1 小时后，在20分钟内滴加10克4-(溴甲基)苯甲酸甲酯在10毫升二 甲基甲酰胺中的溶液，然后加入50毫升二甲基甲酰胺。在20℃搅拌 17小时后，加入100毫升甲醇，然后反应混合物在减压(2.7千帕)下 浓缩至干，得到的黄色油被稀释在200毫升醋酸乙酯中。得到的溶液 用300毫升水洗涤。倾析水相后，用100毫升醋酸乙酯提取。合并有 机相，每次用500毫升水洗涤两次，用硫酸镁干燥，过滤，再在减压 (2.7千帕)下浓缩至干，得到10克黄色油，它用闪式色谱法纯化[洗 脱剂：二氯甲烷/甲醇梯度(以体积计，96/4和90/10)]。于是得到3.67 克4-[(2-二乙基氨基)乙氧基甲基]苯甲酸甲酯，呈黄色油状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)；1.02(t，J＝7.5Hz： 6H)；2.58(q，J＝7.5Hz：4H)；2.70(t，J＝6Hz：2H)；3.57(t， J＝6Hz：2H)；3.88(s：3H)；4.56(s：2H)；7.38(d，J＝8Hz； 2H)；7.99(d，J＝8Hz：2H)。

实施例21

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[3-(吗啉-4-基甲基)苯甲酰基]原 始霉素IIB

以与实施例9所述类似的方式操作，但是使用1克(16R)-16-脱氧 -16-氟-14-O-[3-(氯甲基)苯甲酰基]原始霉素IIB在25毫升四氢呋喃 中的溶液为原料，在20℃加入0.212克碘化钠和0.253克吗啉。在回 流搅拌16小时和按照实施例9类似处理后，得到1克黄色固体，它用 闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇/乙腈梯度(以体积计 100/0/0，然后98/1/1)]。于是得到0.8克黄色固体，它在10毫升醚 中搅拌，过滤与在20℃(90帕)下干燥后，得到0.68克(16R)-16-脱氧 -16-氟-14-O-[3-(吗啉-4-基甲基)苯甲酰基]原始霉素IIB，呈白色固 体状，约198℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.01(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.75-2.05 (mt：5H)；1.96(s：3H)；2.17(mt：1H)；2.35-2.50(mt：1H)；2.46 (mt：4H)；2.76(mt：1H)；3.05(td，J＝17和6Hz：1H)；3.29(mt： 1H)；3.45-3.60(mt：1H)；3.54(s：2H)；3.72(mt：4H)；3.88(mt： 1H)；4.10(mt：1H)；4.53(mt：1H)；4.79(dd，J＝10和1.5Hz： 1H)；4.83(dd，J＝9和3Hz：1H)；5.18(减速的双重线，JHF＝48Hz： 1H)；5.45(d，J＝9Hz：1H)；5.79(mt：1H)；5.82(dd，J＝17 和2Hz：1H)；5.93(mt：1H)；6.06(mt：1H)；6.22(d，J＝16Hz： 1H)；6.52(dd，J＝17和5Hz：1H)；7.40(t，J＝8Hz：1H)；7.56 (宽d，J＝8Hz：1H)；7.92(宽d，J＝8Hz：1H)；7.96(宽s：1H)； 8.14(s：1H)。

按照下述方式可以制备(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[3-(氯甲基) 苯甲酰基]原始霉素IIB

往5克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施例1所述制备) 在250毫升二氯甲烷中的溶液，在20℃加入2毫升三乙胺、2毫升3-(氯 甲基)苯甲酰氯和0.23克4-二甲基氨基吡啶。在20℃搅拌24小时后， 反应混合物每次用120毫升水洗涤3次，用硫酸镁干燥，过滤，然后 在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到的黄色固体在50毫升醚中搅拌。 过滤固体，每次用10毫升乙醚清洗2次与在20℃减压(2.7千帕)下干 燥后，得到5.56克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[3-(氯甲基)苯甲酰 基]原始霉素IIB，呈白色固体状，约190℃熔化(分解)。    

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.01(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.80-2.05 (mt：5H)；1.96(s：3H)；2.17(mt：1H)；2.40(mt：1H)；2.76(mt： 1H)；3.05(dt，J＝17和6Hz：1H)；3.29(mt：1H)；3.50(mt：1H)； 3.88(mt：1H)；4.10(mt：1H)；4.53(mt：1H)；4.63(s：2H)；4.79 (dd，J＝10和2Hz：1H)；4.84(dd，J＝9和3Hz：1H)；5.18(减 速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.45(d，J＝9.5Hz：1H)；5.75-5.85 (mt：1H)；5.82(dd，J＝16和1.5Hz：1H)；5.92(mt：1H)；6.07 (dt，J＝9.5和5Hz：1H)；6.23(d，J＝16Hz：1H)；6.52(dd， J＝16和5Hz：1H)；7.46(t，J＝8Hz：1H)；7.61(宽d，J＝8 Hz：1H)；7.99(宽d，J＝8Hz：1H)；8.04(宽s：1H)；8.14(s： 1H)。

实施例22

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[3-(咪唑-1-基甲基)苯甲酰基]原 始霉素IIB甲磺酸盐

往0.450克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[3-(咪唑-1-基甲基)苯 甲酰基]原始霉素IIB在10毫升乙醇中的溶液，在20℃加入6.28毫升 0.1N甲磺酸乙醇溶液。在搅拌10分钟后，反应混合物在减压(2.7千 帕)下浓缩至干，得到残留物，它在7毫升醚中搅拌。过滤，每次用2 毫升乙醚洗涤固体2次与在减压(2.7千帕)下干燥后，得到0.479克 (16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[3-(咪唑-1-基甲基)苯甲酰基]原始霉 素IIB甲磺酸盐，呈白色固体状，约160℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.11(d，J＝6.5Hz：3H)；1.75-2.05 (mt：5H)；1.96(s：3H)；2.17(mt：1H)；2.37(mt：1H)；2.77(mt： 1H)；2.86(s：3H)；3.05(mt：1H)；3.29(mt：1H)；3.53(mt：1H)； 3.85(mt：1H)；4.11(mt：1H)；4.53(mt：1H)；4.80(宽d，J＝ 10Hz：1H)；4.84(dd，J＝9和3Hz：1H)；5.18(减速的双重线， JHF＝48Hz：1H)；5.35-5.50(mt：3H)；5.82(mt：1H)；5.86(宽 d，J＝17Hz：1H)；6.07(mt：1H)；6.11(mt：1H)；6.22(d，J＝16 Hz：1H)；6.55(dd，J＝17和5Hz：1H)；7.10(宽s：1H)；7.43(宽 s：1H)；7.54(mt：2H)；7.95(宽s：1H)；8.09(mt：1H)；8.12(s： 1H)；9.11(宽s：1H)。

按照下述方式可以制备(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[3-(咪唑 -1-基甲基)苯甲酰基]原始霉素IIB：

以与实施例9所述类似的方式操作，但是使用1.2克(16R)-16- 脱氧-16-氟-14-O-[3-(氯甲基)苯甲酰基]原始霉素IIB(如实施例21 所述制备)在30毫升四氢呋喃中的溶液为原料，在20℃加入0.263克 碘化钠和0.238克咪唑。在回流搅拌16小时和按照实施例9类似处理 后，得到0.9克黄色固体，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/ 甲醇/乙腈梯度(以体积计98/1/1、96/2/2然后95/5/5)]。于是得到 0.53克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[3-(咪唑-1-基甲基)苯甲酰基] 原始霉素IIB，呈黄色固体状，约125℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.75-2.05 (mt：5H)；1.95(s：3H)；2.16(mt：1H)；2.38(mt：1H)；2.76(mt： 1H)；3.04(dt，J＝17和6Hz：1H)；3.28(mt：1H)；3.50(mt：1H)； 3.86(mt：1H)；4.10(mt：1H)；4.53(mt：1H)；4.79(dd，J＝10 和2Hz：1H)；4.83(dd，J＝9和4Hz：1H)；5.17(s：2H)；5.17 (减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.43(d，J＝9Hz：1H)；5.79 (mt：1H)；5.82(dd，J＝16和2Hz：1H)；5.97(mt：1H)；6.06(mt： 1H)；6.22(d，J＝16Hz：1H)；6.52(dd，J＝16和5Hz：1H)；6.91 (mf：1H)；7.11(宽s：1H)；7.32(宽d，J＝8Hz：1H)；7.44(t， J＝8Hz：1H)；7.57(宽s：1H)；7.88(宽s：1H)；7.99(宽d，J ＝8Hz：1H)；8.14(s：1H)。

实施例23

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[3-(二乙基氨基甲基)苯甲酰基]原 始霉素IIB

以与实施例9所述类似的方式操作，但是使用1克(16R)-16-脱氧 -16-氟-14-O-[3-(氯甲基)苯甲酰基]原始霉素IIB(如实施例21所述 制备)在25毫升四氢呋喃中的溶液为原料，在20℃加入0.217克碘化 钠和0.3毫升二乙基胺。在回流搅拌16小时和按照实施例9类似处理 后，得到1克黄色固体，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲 醇/乙腈梯度(以体积计100/0/0，然后98/1/1)]。在戊烷中搅拌得到 的固体，过滤与在20℃(2.7千帕)下干燥后，得到0.313克(16R)-16- 脱氧-16-氟-14-O-[3-(二乙基氨基甲基)苯甲酰基]原始霉素IIB，呈黄 色固体状，约115℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.01(d，J＝6.5Hz：3H)；1.05-1.15(mt：9H)；1.75-2.05(mt： 5H)；1.97(s：3H)；2.16(mt：1H)；2.41(mt：1H)；2.56(mt：4H)； 2.77(mt：1H)；3.05(td，J＝17和6Hz：1H)；3.29(mt：1H)； 3.49(mt：1H)；3.64(宽s：2H)；3.89(mt：1H)；4.10(mt：1H)； 4.53(mt：1H)；4.79(dd，J＝10和1.5Hz：1H)；4.83(dd，J＝ 9和3Hz：1H)；5.19(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.46(d，J＝ 9.5Hz：1H)；5.78(mt：1H)；5.82(dd，J＝16和2Hz：1H)；5.94 (mt：1H)；6.06(mt：1H)；6.23(d，J＝16Hz：1H)；6.52(dd，J ＝16和5Hz：1H)；7.40(t，J＝8Hz；1H)；7.62(mt：1H)；7.91 (d，J＝8Hz：1H)；7.97(宽s：1H)；8.14(s：1H)。

实施例24

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(吗啉-4-基甲基)苯乙酰基]原 始霉素IIB

往0.87克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(卤代甲基)苯乙酰基] 原始霉素IIB(含氯和含溴衍生物的混合物)在5毫升二甲基甲酰胺中 的溶液，在20℃加入0.25毫升吗啉和少许碘化钠晶体。在85℃搅拌 15分钟后，把反应混合物倒入90毫升水中。倾析水相，然后每次用 50毫升醋酸乙酯提取2次。合并有机相，相继地用30毫升水和30毫 升饱和氯化钠水溶液洗涤，然后用硫酸镁干燥，过滤，然后在减压(2.7 千帕)下浓缩至干。于是得到0.91克棕橙色固体，它用闪式色谱法纯 化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇/乙腈(以体积计92/4/4)]，得到的0.46 克黄色固体溶于5毫升二氯甲烷中。用Célite过滤，Célite用二 氯甲烷洗涤。滤液在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到0.42克黄色固 体，它在5毫升水中搅拌15分钟。在过滤与在20℃减压(2.7千帕) 下干燥后，得到0.38克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(吗啉-4-基 甲基)苯乙酰基]原始霉素IIB，呈黄色固体状，约100℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.01(d，J＝6.5Hz：3H)；1.09(d，J＝6.5Hz：3H)；1.60-2.05 (mt：5H)；1.85(s：3H)；2.10-2.30(mt：2H)；2.44(mt：4H)；2.76 (mt：1H)；2.97(dt，J＝17和6Hz：1H)；3.22(mt：1H)；3.40-3.55 (mt：1H)；3.48(s：2H)；3.59(s：2H)；3.71(mt：4H)；3.85(mt： 1H)；4.04(mt：1H)；4.52(mt：1H)；4.78(宽d，J＝10Hz：1H)； 4.82(dd，J＝9和3Hz：1H)；5.06(减速的双重线JHF＝48Hz：1H)； 5.31(d，J＝9Hz：1H)；5.75-5.85(mt：1H)；5.75(mt：1H)；5.81 (宽d，J＝17Hz：1H)；5.93(mt：1H)；6.18(d，J＝16Hz：1H)；6.51 (dd，J＝17和4Hz：1H)；7.22(d，J＝8Hz：2H)；7.29(d，J＝8 Hz：2H)；8.12(s：1H)。

按照下述方式可以制备(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(卤代甲 基)苯乙酰基]原始霉素IIB(含氯和含溴衍生物的混合物)：

往2克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施例1所述制备) 在60毫升二氯甲烷中的溶液，在20℃氩气氛下，在5分钟内加入1.3 毫升二异丙基乙基胺和1.75克4-(溴甲基)苯基乙酰氯。在20℃搅拌 16小时后，反应混合物相继地每次用25毫升水和25毫升饱和氯化钠 水溶液洗涤两次，然后用硫酸镁干燥，过滤，再在减压(2.7千帕)下 浓缩至干。于是得到2.79克橙色固体，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂： 二氯甲烷/甲醇(以体积计，97/3)]，得到1.3克黄色固体，它溶于50 毫升醋酸乙酯中。得到的溶液每次用25毫升碳酸氢钠饱和水溶液洗涤 两次，然后用硫酸镁干燥，过滤，再在20℃减压(2.7千帕)下浓缩至 干，得到1.04克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(卤代甲基)苯乙酰 基]原始霉素IIB(含氯和含溴衍生物的混合物)，呈黄色固体状。

根据专利申请EP274999可以制备4-(溴甲基)苯乙酰氯。

实施例25

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[(2-咪唑-1-基乙氧基)乙酰基]原 始霉素IIB甲磺酸盐

往0.19克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[(2-咪唑-1-基乙氧基)乙 酰基]原始霉素IIB在8毫升乙醇中的溶液，在20℃加入0.26毫升 1.09N甲磺酸乙醇溶液。在搅拌10分钟后，反应混合物在减压(2.7 千帕)下浓缩至干，得到油状残留物，它在5毫升乙醚中搅拌。然后， 在减压(2.7千帕)下除去溶剂。这样得到的固体在5毫升乙醚中搅拌， 然后过滤，用乙醚洗涤，再在减压(2.7千帕)下干燥，得到0.189克 (16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[(2-咪唑-1-基乙氧基)乙酰基]原始霉 素IIB甲磺酸盐，呈浅褐色粉末状，约115℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.95(mt：6H)；1.12 (d，J＝6.5Hz：3H)；1.50-2.25(mt：7H)；1.86(s：3H)；2.79(mt： 1H)；2.83(s：3H)；3.02(mt：1H)；3.26(mt：1H)；3.58(mt： 1H)；3.72(mt：1H)；3.80-3.90(mt：2H)；4.00-4.15(mt：3H)； 4.34(mt：1H)；4.50-4.60(mt：2H)；4.80-4.90(mt：2H)；4.90-5.00 (mt：1H)；4.94(宽d，J＝10Hz：1H)；5.75-5.95(mt：2H)；6.06 (宽d，J＝16Hz：1H)；6.12(d，J＝16Hz：1H)；6.65(dd，J＝16 和5Hz：1H)；6.95(mt：1H)；7.30(宽s：1H)；7.36(宽s：1H)； 8.12(s：1H)；9.18(宽s：1H)；14.73(宽mf：1H)。

按照下述方式可以制备(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[(2-咪唑 -1-基乙氧基)乙酰基]原始霉素IIB：

往1.3克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[2-氯乙氧基乙酰基]原始 霉素IIB在6.5毫升二甲亚砜中的溶液，在20℃加入0.41克咪唑和少 许碘化钠晶体。在60℃搅拌4小时后，加入0.3克碘化钠。再在60 ℃搅拌4小时，85℃搅拌72小时，然后在20℃搅拌60小时，其后将 反应混合物倒入35毫升水和冰的混合物中，然后另加0.17克碳酸氢 钠。在过滤、用水洗涤固体与在空气中干燥后，得到油状残留物，它 被稀释在30毫升二氯甲烷中。在减压(2.7千帕)下浓缩后，得到1.23 克黄色固体，它用Amicon-20-40硅胶的闪式色谱法纯化[洗脱剂： 二氯甲烷/甲醇/乙腈(以体积计88/6/6)]。于是得到0.64克(16R)-16- 脱氧-16-氟-14-O-[(2-咪唑-1-基乙氧基)乙酰基]原始霉素IIB，呈淡 黄色固体状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.65-2.05 (mt：5H)；1.89(s：3H)；2.10-2.30(mt：2H)；2.76(mt：1H)；2.99 (dt，J＝17和6.5Hz：1H)；3.24(mt：1H)；3.51(mt：1H)；3.75-3.90 (mt：3H)；4.03(AB限：2H)；4.07(mt：1H)；4.17(t，J＝5Hz：2H)； 4.55(mt：1H)；4.75-4.85(mt：2H)；5.10(减速的双重线，JHF＝48Hz： 1H)；5.24(d，J＝9Hz：1H)；5.78(mt：1H)；5.80-5.95(mt：1H)； 5.87(dd，J＝16和2Hz：1H)；6.18(d，J＝16Hz：1H)；6.31(mt： 1H)；6.56(dd，J＝16和5Hz：1H)；7.01(s：1H)；7.08(s：1H)； 7.59(s：1H)；8.12(s：1H)。

按照下述方式可以制备(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[2-氯乙氧 基乙酰基]原始霉素IIB：

往5.32克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施例1所述制 备)在130毫升二氯甲烷中的溶液，在20℃下加入3.1克N，N’-二环己 基碳化二亚胺、0.61克4-二甲基氨基吡啶和2.08克2-氯乙氧基醋酸 在20毫升二氯甲烷中的溶液。在20℃搅拌1小时后，过滤反应混合 物，残留物用二氯甲烷洗涤。滤液在减压(2.7千帕)下浓缩至干。得 到7.68克橙色固体，它用Amicon-20-40硅胶闪式色谱法纯化[洗 脱剂：二氯甲烷/醋酸乙酯(以体积计，50/50)]，得到4.68克(16R)-16- 脱氧-16-氟-14-O-[2-氯乙氧基乙酰基]原始霉素IIB，呈白色粉末状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.09(d，J＝6.5Hz：3H)；1.70-2.05 (mt：5H)；1.90(s：3H)；2.15(mt：1H)；2.26(mt：1H)；2.76(mt： 1H)；2.99(dt，J＝17和6Hz：1H)；3.24(mt：1H)；3.50(mt：1H)； 3.67(t，J＝6Hz：2H)；3.80-3.90(mt：1H)；3.83(t，J＝6Hz：2H)； 4.05(mt：1H)；4.14(AB限，J＝13Hz；2H)；4.52(mt：1H)；4.78 (dd，J＝10和1.5Hz：1H)；4.82(dd，J＝9和3Hz：1H)；5.12(减 速的双重线.JHF＝48Hz：1H)；5.31(宽d，J＝9Hz：1H)；5.78(mt： 1H)；5.82(dd，J＝16和2Hz：1H)；5.85-5.95(mt：2H)；6.19(d，J＝ 16Hz：1H)；6.52(dd，J＝16和5Hz：1H)；8.12(s：1H)。

根据E.J.Corey和Christopher J.Helal，《四面体通讯》， 第37卷，第28期，第4837-4840页，1996年可以制备2-氯乙氧基醋 酸。

实施例26

(16R)-14-O-{3，3-二甲基-3-[4，6-二甲基-2-(4-吗啉-4-基丁酸 基)苯基]丙酰基}-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB

往1.6克(16R)-14-0-{3-[2-(4-溴丁酸基)-4，6-二甲基苯 基]-3，3-二甲基丙酰基}-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB在8毫升二甲 亚砜中的溶液，在20℃氩气氛下加入0.48毫升吗啉。在60℃搅拌30 分钟后，将反应混合物倒入300毫升水-冰混合物中。通过过滤分离沉 淀，每次用20毫升蒸馏水洗涤两次，然后溶于150毫升二氯甲烷。得 到的溶液每次用20毫升蒸馏水洗涤三次，用硫酸镁干燥，过滤，然后 在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到1.7克残留物，它用闪式色谱法 纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇(以体积计，94/6)]。得到的固体在异丙 醚中搅拌后，过滤和在20℃干燥(2.7千帕)，得到0.52克(16R)-14-O- {3，3-二甲基-3-[4，6-二甲基-2-(4-吗啉-4-基丁酸基)苯基]丙酰 基}-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB，呈白色固体，约88℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.01(d，J＝6.5Hz：3H)；1.09(d，J＝6.5Hz：3H)；1.40-1.60 (mt：1H)；1.56(s：3H)；1.58(s：3H)；1.75-2.05(mt：7H)；1.80 (s：3H)；2.14(mt：1H)；2.25(s：3H)；2.40-2.50(mt：6H)；2.54 (s：3H)；2.63(t，J＝7.5Hz：2H)；2.70-2.80(mt：1H)；2.75(d，J＝ 15Hz：1H)；2.85(d，J＝15Hz：1H)；2.91(mt：1H)；3.15(mt：1H)； 3.45(mt：1H)；3.73(t，J＝5Hz：4H)；3.86(mt：1H)；4.01(mt：1H)； 4.53(mt：1H)；4.70-4.95(mt：1H)；4.77(dd，J＝10和1.5Hz：1H)； 4.80(dd，J＝9和3Hz：1H)；5.11(d，J＝9Hz：1H)；5.66(mt：1H)； 5.71(mt：1H)；5.81(dd，J＝17和2Hz：1H)；5.93(mt：1H)；6.12 (d，J＝16Hz：1H)；6.50(dd，J＝17和5Hz：1H)；6.61(d，J＝1.5 Hz：1H)；6.81(宽s：1H)；8.12(s：1H)。

按照下述方式可以制备(16R)-14-O-{3-[2-(4-溴丁酸基)-4，6- 二甲基苯基]-3，3-二甲基丙酰基}-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB：

往2.7克3-[2-(4-溴丁酸基)-4，6-二甲基苯基]-3，3-二甲基丙酸 在150毫升二氯甲烷中的溶液，在20℃氩气氛下加入1.2克N，N’-二 环己基碳化亚二胺、2.06(16R)-16-脱氧-16-氟-原始霉素IIB(如实施 例1所述制备)和0.07克4-二甲基氨基吡啶。在搅拌18小时后，反 应混合物经过滤除去不溶物。滤液每次用25毫升蒸馏水洗涤四次，用 硫酸镁干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到4.6克 残留物，它相继用闪式色谱法纯化两次[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇(以体 积计96/4，然后97/3)]。得到1.6克(16R)-14-O-{3-[2-(4-溴丁酸 基)-4，6-二甲基苯基]-3，3-二甲基丙酰基}-16-脱氧-16-氟原始霉素 IIB，呈奶油固体状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.09(d，J＝6.5Hz：3H)；1.45-2.05 (mt：12H)；1.79(s：3H)；2.13(mt：1H)；2.24(s：3H)；2.29(mt： 2H)；2.54(s：3H)；2.70-2.90(mt：5H)；2.91(mt：1H)；3.15(mt： 1H)；3.45(mt：1H)；3.56(t，J＝6.5Hz：2H)；3.86(mt：1H)；4.01 (mt：1H)；4.53(mt：1H)；4.75-4.95(mt：1H)；4.77(dd，J＝10 和2Hz：1H)；4.80(dd，J＝9和3Hz：1H)；5.12(d，J＝9Hz： 1H)；5.60-5.75(mt：2H)；5.81(dd，J＝16和2Hz：1H)；5.92(mt： 1H)；6.13(d，J＝16Hz：1H)；6.50(dd，J＝16和5Hz：1H)；6.59 (d，J＝1.5Hz：1H)；6.82(d，J＝1.5Hz：1H)；8.12(s：1H)。

按照下述方式可以制备3-[2-(4-溴丁酸基)-4，6-二甲基苯 基]-3，3-二甲基丙酸：

往2.3克3-[2-(4-溴丁酸基)-4，6-二甲基苯基]-3，3-二甲基丙醛 在200毫升丙酮中的溶液，在20℃滴加1克高锰酸钾在46毫升蒸馏 水和30毫升丙酮混合物中的溶液。在搅拌24小时后，向反应混合物 中添加100毫升蒸馏水，通过加入1N盐酸水溶液将其pH酸化到1-2， 然后每次用100毫升二氯甲烷提取五次。合并有机相，用硫酸镁干燥， 过滤，再减压(2.7千帕)浓缩至干。得到2.7克3-[2-(4-溴丁酸 基)-4，6-二甲基苯基]-3，3-二甲基丙酸，呈无色油状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)；(2种形态，比例为 80-20)：1.58和1.59(2s：全部6H)；2.23和2.24(2s：全部3H)； 2.29(mt：2H)；2.54和2.55(2s：全部3H)；2.78(t，J＝7Hz： 2H)；2.84和2.87(2s：全部2H)；3.55(t，J＝6.5Hz：2H)；6.57 和6.59(2s宽：全部1H)；6.81和6.83(2s宽：全部1H)。

按照下述方式可以制备3-[2-(4-溴丁酸基)-4，6-二甲基苯 基]-3，3-二甲基丙醛：

往3.1克氯铬酸吡啶在900毫升二氯甲烷中的悬浮液，在24℃ 滴加2.5克3-[2-(4-溴丁酸基)-4，6-二甲基苯基]-3，3-二甲基丙-1- 醇在160毫升二氯甲烷中的溶液。在24℃搅拌2小时后，反应混合物 用630克硅胶(粒度0.063-0.2毫米)过滤，同时相继地用纯二氯甲烷， 然后用二氯甲烷/醋酸乙酯混合物(以体积计80/20)洗脱。于是得到 2.4克3-[2-(4-溴丁酸基)-4，6-二甲基苯基]-3，3-二甲基丙醛，呈无 色粘稠油状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)；(2种形态，比例为 80-20)：1.57(s：6H)；2.25(s：3H)；2.29(mt：2H)；2.55(s：3H)； 2.78(t，J＝7Hz：2H)；2.80-2.90(mt：2H)；3.56(t，J＝6Hz：2H)； 6.59和6.61(2s宽：全部1H)；6.85和6.87(2s宽：全部1H)；9.55 (宽s：1H)。

按照下述方式可以制备3-[2-(4-溴丁酸基)-4，6-二甲基苯 基]-3，3-二甲基丙-1-醇：

往5.4克4-溴丁酸2-{3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-1，1-二甲基 丙基}-3，5-二甲基苯酚酯在60毫升二氯甲烷中的溶液，在0℃氩气 氛下滴加2.24毫升三乙胺三氟水合物。在20℃搅拌42小时后，反应 混合物用750克硅胶(粒度0.063-0.2毫米)过滤，同时相继地用二氯 甲烷，然后用二氯甲烷/醋酸乙酯混合物(以体积计90/10)洗脱。于是 得到2.6克3-[2-(4-溴丁酸基)-4，6-二甲基苯基]-3，3-二甲基丙-1- 醇，呈无色粘稠油状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)；(2种形态，比例为 80-20)：1.50和1.52(2s：全部6H)；2.00-2.10(mt：2H)；2.23 和2.24(2s：全部3H)；2.30(mt：2H)；2.54(s：3H)；2.78(t，J ＝7Hz：2H)；3.50-3.60(mt：4H)；6.55和6.56(2s宽：全部1H)； 6.82和6.84(2s宽：全部1H)。

按照下述方式可以制备4-溴丁酸2-{3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧 基)-1，1-二甲基丙基}-3，5-二甲基苯酚酯：

往3.22克2-{3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-1，1-二甲基丙基} -3，5-二甲基苯酚在60毫升四氢呋喃中的溶液，在20℃氩气氛下分小 份加入0.32克氢化钠(在矿物油中，75％)，15分钟后再加入1.16毫 升4-溴丁酰氯。在搅拌40分钟后，加入100毫升醚、10毫升蒸馏水 和10毫升饱和氯化钠水溶液。在搅拌后，倾析有机相，用硫酸镁干燥， 过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到残留物，它用75克硅 胶(粒度0.063-0.2毫米)过滤，同时相继地用环己烷，然后用环己烷/ 醋酸乙酯混合物(以体积计90/10)洗脱。于是得到2克4-溴丁酸 2-{3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-1，1-二甲基丙基}-3，5-二甲基苯 酚酯，呈无色油状。

1H NMR谱(300NHz，CDCl3，δ，以ppm计)；(2种形态，比例为 80-20)：0.00和0.03(2s：全部6H)；0.87和0.89(2s：全部 9H)；1.45-1.55(mt：6H)；2.05(t，J＝7.5Hz：2H)；2.24和2.25 (2s：全部3H)；2.31(mt：2H)；2.54(s：3H)；2.77(t，J＝7.5 Hz：2H)；3.40-3.65(mt：4H)；6.56和6.58(2宽s：全部1H)；6.81 和6.83(2宽s：全部1H)。

根据Amsberry K.L.，Gerstenberger A.E.，Borchardt R.T.， 《Pharm.Res.》，1991，8(4)，455-61可以制备2-{3-(叔丁基二甲基 甲硅烷氧基)-1，1-二甲基丙基}-3，5-二甲基苯酚。

实施例27

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(吗啉-4-基)丁酰基]原始霉素 IIB甲磺酸盐

往0.453克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(吗啉-4-基)丁酰基] 原始霉素IIB在10毫升乙醇中的溶液，在20℃加入6.58毫升0.1N甲 磺酸乙醇溶液。在搅拌10分钟后，反应混合物在减压(2.7千帕)下浓 缩至干，得到残留物，它在10毫升醚中被搅拌。在过滤，用4毫升乙 醚清洗固体与在20℃减压(2.7千帕)下干燥后，得到0.506克 (16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(吗啉-4-基)丁酰基]原始霉素IIB甲 磺酸盐，呈白色固体状，约122℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；0.99(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.60-2.00 (mt：5H)；1.89(s：3H)；2.10-2.30(mt：4H)；2.48(t，J＝7Hz：2H)； 2.77(mt：1H)；2.82(s：3H)；2.88(mt：2H)；2.99(dt，J＝17 和6Hz：1H)；3.13(mt：2H)；3.23(dt，J＝17和6Hz：1H)；3.45-3.60 (mt：3H)；3.82(mt：1H)；3.95-4.20(mt：5H)；4.53(mt：1H)；4.79 (dd，J＝10和2Hz：1H)；4.83(dd，J＝9和3.5Hz：1H)；5.11(减 速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.28(d，J＝10Hz：1H)；5.75-5.85(mt： 2H)；5.84(dd，J＝17和2Hz：1H)；6.09(mt：1H)；6.19(d，J＝ 16Hz：1H)；6.53(dd，J＝17和5Hz：1H)；8.11(s：1H)。

按照下述方式可以制备(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(吗啉 -4-基)丁酰基]原始霉素IIB：

往1.3克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施例1所述制 备)在35毫升二氯甲烷中的溶液，在20℃加入0.512克4-(吗啉-4- 基)丁酸盐酸盐和0.343毫升三乙胺在35毫升二氯甲烷中的溶液， 0.503克N，N’-二环己基碳化二亚胺和0.03克4-二甲基氨基吡啶。在 20℃搅拌16小时后，反应混合物在减压(2.7千帕)下浓缩至干。得到 的残留物溶于10毫升二氯甲烷中，然后过滤。滤液用40毫升二氯甲 烷稀释，再用50毫升水洗涤，然后用硫酸镁干燥，过滤，然后在减压 (2.7千帕)下浓缩至干，得到1克黄色固体，它用闪式色谱法纯化[洗 脱剂：二氯甲烷/甲醇/乙腈梯度(以体积计98/1/1，然后96/2/2，然 后94/3/3)]。于是得到0.584克白色固体，它溶于20毫升二氯甲烷。 得到的溶液用20毫升水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤，在减压(2.7千 帕)下浓缩至干，在戊烷中搅拌、过滤和在20℃干燥(2.7千帕)后，得 到0.524克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(吗啉-4-基)丁酰基]原始 霉素IIB，呈白色固体状，约100℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.60-2.05 (mt：7H)；1.89(s：3H)；2.16(mt：1H)；2.23(mt：1H)；2.35(mt： 4H)；2.43(mt：4H)；2.76(mt：1H)；2.99(dt，J＝17和6Hz：1H)； 3.24(mt：1H)；3.49(mt：1H)；3.71(mt：4H)；3.85(mt：1H)；4.07 (mt：1H)；4.54(mt：1H)；4.78(dd，J＝10和1.5Hz：1H)；4.82 (dd，J＝9和3 Hz：1H)；5.11(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.30 (d，J＝9Hz：1H)；5.75-5.85(mt：1H)；5.76(mt：1H)；5.81(dd，J ＝17和1.5Hz：1H)；5.95(mt：1H)；6.19(d，J＝16Hz：1H)；6.51 (dd，J＝17和5Hz：1H)；8.12(s：1H)。

根据Rdj K.Razdan，Barbara Zitko Terris，Harry G.Pars，《J. Med.Chem.》，1976，19(4)，454-461可以制备4-(吗啉-4-基)丁酸 盐酸盐。

实施例28

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-(4-咪唑-1-基丁酰基)原始霉素IIB，

往600毫克(16R)-14-O-(4-溴丁酰基)-16-脱氧-16-氟原始霉素 IIB在2.5毫升二甲基甲酰胺中的溶液，加入150毫克咪唑。在60℃ 搅拌4小时后，另外加入0.5克咪唑，接着在65℃搅拌2小时。该混 合物在减压(2.7千帕)下浓缩，得到的残留物溶于20毫升蒸馏水和25 毫升二氯甲烷中。倾析有机相后，每次用20毫升蒸馏水洗涤2次。有 机相用硫酸镁干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到 1.13克固体，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷-甲醇混合物(以 体积计98-2，然后95-5)]。于是得到325毫克产物，它在乙醚中被搅 拌，过滤，然后在20℃(90帕)下干燥，得到248毫克(16R)-16-脱氧 -16-氟-14-O-(4-咪唑-1-基丁酰基)原始霉素IIB，呈浅褐色固体状， 125℃熔化。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.60-2.05 (mt：5H)；1.90(s：3H)；2.00-2.35(mt：2H)；2.08(mt：2H)；2.26 (mt：2H)；2.76(mt：1H)；2.99(dt，J＝17和6.5Hz；1H)；3.24 (mt：1H)；3.50(mt：1H)；3.94(mt：1H)；4.01(t，J＝7Hz：2H)； 4.06(mt：1H)；4.54(mt：1H)；4.79(dd，J＝10和2Hz：1H)；4.82 (dd，J＝9和3Hz：1H)；5.11(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.28 (d，J＝9Hz：1H)；5.75-5.90(mt：1H)；5.78(mt：1H)；5.84(dd，J ＝16和1.5Hz：1H)；6.09(mt：1H)；6.20(d，J＝16Hz：1H)；6.53 (dd，J＝16和5Hz：1H)；6.91(s：1H)；7.07(s：1H)；7.44(s： 1H)；8.12(s：1H)。

按照下述方式可以制备(16R)-14-O-(4-溴丁酰基)-16-脱氧-16- 氟原始霉素IIB：

往5克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施例1所述制备) 在150毫升二氯甲烷中的溶液，加入2.64毫升三乙胺，然后加入2.3 毫升4-溴丁酸盐酸盐。在25℃搅拌18小时后，加入1.32毫升三乙胺 和另外1.15毫升4-溴丁酸盐酸盐。反应混合物在25℃搅拌2小时， 然后每次用100毫升蒸馏水洗涤两次。有机相用硫酸镁干燥，过滤， 然后在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到8.19克褐色油，它用闪式色 谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷-甲醇混合物(以体积计97-3)]。于是得 到3.4克产物，在异丙醚中被搅拌，过滤，干燥，然后用闪式色谱法 再纯化[洗脱剂：二氯甲烷-甲醇混合物(以体积计98-2)]。在异丙醚 中搅拌，过滤，于20℃(90帕)下干燥后，于是得到1.32克 (16R)-14-O-(4-溴丁酰基)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB，呈可直接被 使用的白色碎固体状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.65-2.05 (mt：5H)；1.89(s：3H)；2.10-2.35(mt：2H)；2.17(mt：2H)；2.49 (mt：2H)；2.77(mt：1H)；2.99(mt：1H)；3.24(mt：1H)；3.45-3.55 (mt：1H)；3.47(t，J＝6.5Hz：2H)；3.86(mt：1H)；4.06(mt：1H)； 4.54(mt：1H)；4.78(dd，J＝10和1.5Hz：1H)；4.82(dd，J＝9 和3Hz：1H)；5.13(减速的双重线.JHF＝48Hz：1H)；5.31(d，J＝ 9Hz：1H)；5.75-5.90(mt：1H)；5.77(mt：1H)；5.82(dd，J＝16 和2Hz：1H)；5.93(mt：1H)；6.20(d，J＝15Hz：1H)；6.52(dd，J ＝16和5Hz：1H)；8.12(s：1H)。

实施例29

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{4-[4-(吡咯烷-1-基羰基甲基)哌 嗪-1-基]丁酰基}原始霉素IIB

往680毫克(16R)-14-O-(4-溴丁酰基)-16-脱氧-16-氟原始霉素 IIB(如实施例28所述制备)在3毫升二甲基甲酰胺中的溶液，加入590 毫克1-(吡咯烷基羰基甲基)哌嗪。在60℃搅拌4小时后，该混合物在 减压(2.7千帕)下浓缩，得到的残留物溶于40毫升蒸馏水和20毫升 二氯甲烷中。加氯化钠后，倾析水相，每次用20毫升二氯甲烷洗涤2 次。合并有机相，用硫酸镁干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓 缩至干，得到1克栗色固体，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷 -甲醇混合物(以体积计95-5)]。于是得到650毫克产物，它在乙醚中 搅拌1小时，过滤，然后在20℃(90帕)下干燥，得到413毫克(16R)-16- 脱氧-16-氟-14-O-{4-[4-(吡咯烷-1-基羰基甲基)哌嗪-1-基]丁酰基} 原始霉素IIB，呈碎白色固体状，在128℃熔化。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.60-2.05 (mt：11H)；1.88(s：3H)；2.10-2.35(mt：2H)；2.32(t，J＝7.5Hz： 2H)；2.40(mf：2H)；2.50-2.70(mf：8H)；2.75(mt：1H)；2.99 (dt，J＝17和6Hz：1H)；3.12(s：2H)；3.24(mt：1H)；3.40-3.55 (mt：5H)；3.86(mt：1H)；4.06(mt：1H)；4.53(mt：1H)；4.78(dd，J ＝10和1.5Hz：1H)；4.82(dd，J＝9和3Hz：1H)；5.09(减速的 双重线.JHF＝48 Hz：1H)；5.29(d，J＝9Hz：1H)；5.75-5.85(mt：1H)； 5.75(mt：1H)；5.83(dd，J＝17和1.5Hz：1H)；6.05(mt：1H)； 6.18(d，J＝16Hz：1H)；6.52(dd，J＝17和5Hz：1H)；8.12(s： 1H)。

实施例30

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[5-(吗啉-4-基)戊酰基]原始霉素 IIB甲磺酸盐

往0.79克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[5-(吗啉-4-基)戊酰基] 原始霉素IIB在15毫升乙醇中的溶液，在20℃加入11毫升0.1N甲磺 酸乙醇溶液。在搅拌20分钟后，反应混合物在减压(2.7千帕)下浓缩 至干，得到残留物，它在10毫升醚中搅拌。在过滤，用5毫升乙醚清 洗固体与在20℃减压(2.7千帕)下干燥后得到0.89克(16R)-16-脱氧 -16-氟-14-O-[5-(吗啉-4-基)戊酰基]原始霉素IIB甲磺酸盐，呈碎白 色固体状，约120℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，(CD3)2SO d6，δ，以ppm计)：0.85(d，J＝ 6.5Hz：3H)；0.94(d，J＝6.5Hz：3H)；1.03(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.45-1.70(mt：5H)；1.70-2.25(mt：6H)；1.77(s：3H)；2.32 (s：3H)；2.39(t，J＝7Hz：2H)；2.77(mt：1H)；2.95-3.50(mt： 8H)；3.50-3.70(mt：4H)；3.80(mt：1H)；3.90-4.05(mt： 3H)；4.70-4.80(mt：2H)；5.09(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.42 (d，J＝9.5Hz：1H)；5.62(mt：1H)；5.75(mt：1H)；5.80(宽d，J ＝16Hz：1H)；6.18(d，J＝16Hz：1H)；6.62(dd，J＝16和4Hz： 1H)；8.15(mt：1H)；8.52(s：1H)；9.46(宽mf：1H)。

按照下述方式可以制备(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[5-(吗啉 -4-基)戊酰基]原始霉素IIB：

往2克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-(5-氯戊酰基)原始霉素IIB在 30毫升四氢呋喃中的溶液，在20℃加入0.46克碘化钠和0.54毫升吗 啉。在回流搅拌27小时后，补加0.54毫升吗啉。再回流搅拌16小时 后，加入1毫升二甲基甲酰胺和0.54毫升吗啉。在再回流搅拌24小 时后，反应混合物用20毫升二氯甲烷稀释，再用50毫升水洗涤。倾 析有机相后，水相用50毫升二氯甲烷提取。合并有机相，每次用150 毫升水洗涤3次，用硫酸镁干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓 缩至干，得到2克残留物，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/ 甲醇/乙腈(以体积计，92/4/4)]。在戊烷中搅拌，过滤，在20℃(2.7 千帕)干燥后，得到0.81克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[5-(吗啉-4- 基)戊酰基]原始霉素IIB，呈浅褐色固体状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz；3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.52(mt： 2H)；1.55-2.05(mt：7H)；1.89(s：3H)；2.10-2.35(mt：2H)；2.32 (mt：4H)；2.42(mf：4H)；2.76(mt：1H)；2.99(dt，J＝17和6Hz： 1H)；3.24(mt：1H)；3.48(mt：1H)；3.72(t，J＝5Hz：4H)；3.86 (mt：1H)；4.07(mt：1H)；4.53(mt：1H)；4.78(dd，J＝10和2Hz： 1H)；4.82(dd，J＝9和3Hz：1H)；5.11(减速的双重线，JHF＝48 Hz：1H)；5.30(d，J＝9Hz：1H)；5.70-5.85(mt：2H)；5.82(dd，J ＝16.5和2Hz：1H)；5.96(mt：1H)；6.19(d，J＝16Hz：1H)；6.51 (dd，J＝16.5和5Hz：1H)；8.12(s：1H)。

按照下述方式制备(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-(5-氯戊酰基)原 始霉素IIB：

往4克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施例1所述制备) 在100毫升二氯甲烷中的溶液，在28℃加入2.1毫升三乙胺、2毫升 5-氯戊酰氯和0.18克4-二甲基氨基吡啶。在28℃搅拌2小时后，反 应混合物被倒入100毫升水中。倾析有机相，水相用100毫升二氯甲 烷提取。合并有机相，每次用200毫升水洗涤两次，用硫酸镁干燥， 过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到6克栗色固体，它用 闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇(以体积计98/2)]。在戊烷 中搅拌，过滤，20℃(2.7千帕)干燥后，于是得到3.77克(16R)-16- 脱氧-16-氟-14-O-(5-氯戊酰基)原始霉素IIB，呈白色固体状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.65-2.05 (mt：9H)；1.89(s：3H)；2.15(mt：1H)；2.24(mt：1H)；2.33(t，J ＝7Hz：2H)；2.76(mt：1H)；2.99(mt：1H)；3.24(mt：1H)；3.49 (mt：1H)；3.55(t，J＝7Hz：2H)；3.86(mt：1H)；4.06(mt：1H)； 4.52(mt：1H)；4.78(dd，J＝10和2Hz：1H)；4.82(dd，J＝9 和3Hz：1H)；5.11(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.30(d，J＝9 Hz：1H)；5.75-5.85(mt：1H)；5.76(mt：1H)；5.82(dd，J＝17 和2Hz：1H)；5.96(mt：1H)；6.19(d，J＝16Hz：1H)；6.51(dd，J ＝17和5Hz：1H)；8.13(s：1H)。

实施例31

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[5-(咪唑-1-基)戊酰基]原始霉素 IIB甲磺酸盐

往0.66克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[5-(咪唑-1-基)戊酰基] 原始霉素IIB在10毫升乙醇中的溶液，在20℃加入10.2毫升0.095N 甲磺酸乙醇溶液。在搅拌10分钟后，反应混合物在减压(2.7千帕)下 浓缩至千，得到残留物，它在20毫升醚中搅拌。在过滤，用5毫升乙 醚洗涤固体与在减压(2.7千帕)下于燥后，得到0.712克(16R)-16-脱 氧-16-氟-14-O-[5-(咪唑-1-基)戊酰基]原始霉素IIB甲磺酸盐，呈黄 色固体状，约126℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，(CD3)2SO d6，δ，以ppm计)：0.85(d，J＝6.5 Hz：3H)；0.94(d，J＝6.5Hz：3H)；1.03(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.40-1.60(mt：3H)；1.70-2.30(mt：8H)；1.76(s：3H)；2.32 (s：3H)；2.37(t，J＝7 Hz：2H)；2.77(mt：1H)；3.10-3.40(mt： 2H)；3.58(mt：1H)；3.67(mt：1H)；3.80(mt：1H)；3.97(mt：1H)； 4.21(t，J＝7Hz：2H)；4.65-4.80(mt：2H)；5.08(减速的双重线， JHF＝48Hz：1H)；5.40(d，J＝9Hz：1H)；5.61(mt：1H)；5.73(mt：1H)； 5.80(宽d，J＝16Hz：1H)；6.18(d，J＝16Hz：1H)；6.63(dd，J ＝16和4Hz：1H)；7.72(宽s：1H)；7.80(宽s：1H)；8.15(t，J ＝6Hz：1H)；8.52(s：1H)；9.14(宽s：1H)。

按照下述方式制备(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[5-(咪唑-1-基) 戊酰基]原始霉素IIB：

往1.4克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-(5-氯戊酰基)原始霉素 IIB(如实施例30所述制备)在20毫升四氢呋喃中的溶液，在20℃加入 0.29克咪唑和0.32克碘化钠。在回流搅拌20小时后，加入1毫升二 甲基甲酰胺和0.29克咪唑。在再回流搅拌8.5小时后，加入0.29克 咪唑。在再回流搅拌15.5小时后，反应混合物用50毫升二氯甲烷稀 释，再用100毫升水洗涤。倾析有机相后，水相用50毫升二氯甲烷提 取。合并有机相，用硫酸镁干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓 缩至干，得到1.6克橙色固体，它相继用闪式色谱法纯化两次[洗脱剂： 二氯甲烷/甲醇(以体积计97/3)]。在乙醚中搅拌，过滤，在20℃(2.7 千帕)干燥后，于是得到0.66克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[5-(咪 唑-1-基)戊酰基]原始霉素IIB，呈黄色固体状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.11(d，J＝6.5Hz：3H)；1.60-2.05 (mt：9H)；1.90(s：3H)；2.10-2.25(mt：2H)；2.31(t，J＝7Hz：2H)； 2.76(mt：1H)；3.00(mt：1H)；3.25(dt，J＝17和5.5Hz：1H)；3.51 (mt：1H)；3.84(mt：1H)；3.94(t，J＝7Hz：2H)；4.06(mt：1H)； 4.56(mt：1H)；4.75-4.90(mt：2H)；5.06(减速的双重线，JHF＝48 Hz：1H)；5.24(d，J＝9Hz：1H)；5.75-5.90(mt：2H)；5.90(dd，J＝ 16和1.5Hz：1H)；6.17(d，J＝15Hz：1H)；6.52(mt：1H)；6.57 (dd，J＝16和5Hz：1H)；6.89(s：1H)；7.06(s：1H)；7.45(s： 1H)；8.10(s：1H)。

实施例32

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{5-[4-(吡咯烷-1-基羰基甲基)哌 嗪-1-基]戊酰基}原始霉素IIB

往1.8克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-(5-氯戊酰基)原始霉素 IIB(如实施例30所述制备)在20毫升二甲基甲酰胺中的溶液，在20 ℃加入1.1克(吡咯烷-1-基羰基甲基)哌嗪和0.42克碘化钠。在50℃ 搅拌27.5小时后，加入0.55克(吡咯烷-1-基羰基甲基)哌嗪。在54 ℃再搅拌27.5小时后，反应混合物在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得 到的残留物稀释在100毫升二氯甲烷中。得到的溶液每次用300毫升 水洗涤四次。有机相用硫酸镁干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕)下 浓缩至干，得到1.61克黄色固体，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二 氯甲烷/甲醇(以体积计95/5)]。在戊烷中搅拌，过滤与在(2.7千帕) 下干燥后，于是得到0.726克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{5-[4-(吡 咯烷-1-基羰基甲基)哌嗪-1-基]戊酰基}原始霉素IIB，呈浅褐色固体 状，约100℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz：3H)； 1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.09(d，J＝6.5Hz：3H)；1.51(mt： 2H)；1.55-1.80(mt：3H)；1.75-2.05(mt：8H)；1.88(s：3H)；2.15 (mt：1H)；2.23(mt：1H)；2.25-2.40(mt：4H)；2.50(mf：4H)；2.58 (mf：4H)；2.76(mt：1H)；2.99(dt，J＝17和6Hz：1H)；3.11(s： 2H)；3.24(mt：1H)；3.45-3.55(mt：5H)；3.86(mt：1H)；4.06(mt： 1H)；4.53(mt：1H)；4.78(dd，J＝10和2Hz：1H)；4.82(dd，J＝ 9和3Hz：1H)；5.09(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.30(d，J ＝9Hz：1H)；5.75-5.90(mt：1H)；5.75(mt：1H)；5.83(dd，J＝ 17和1.5Hz：1H)；6.04(mt：1H)；6.19(d，J＝16Hz：1H)；6.53 (dd，J＝17和5Hz：1H)；8.12(s：1H)。

实施例33

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[(RR，SS)-反-2-(吗啉代甲基)-1- 环丙烷羰基]原始霉素IIB，两种非对映异构体的混合物，比例为50/50

往2.1克(16R)-16-脱氧-16-氟-原始霉素IIB(如实施例1所述制 备)在80毫升二氯甲烷中的溶液，在20℃氩气氛下加入1.1克 (RR，SS)-反-2-(吗啉代甲基)-1-环丙烷羧酸，1.24克N，N’-二环己基 碳化二亚胺和0.73克4-二甲基氨基吡啶。在搅拌16小时后，反应混 合物经过滤除去不溶物，然后在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到4.2 克残留物，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇梯度(以体积 计98/2至95/5)]。得到的固体在异丙醚中搅拌，过滤与在20℃(2.7 千帕)下干燥后，得到1.5克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[(RR，SS)- 反-2-(吗啉代甲基)-1-环丙烷羰基]原始霉素IIB，两种非对映异构体 的混合物，比例为50/50，呈微白色粉末状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)。我们观察到有两种非 对映异构体存在，比例为50/50：0.77(mt：1H)；0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.09(d，J＝6.5Hz：3H)；1.24(mt： 1H)；1.41(mt：1H)；1.52(mt：1H)；1.60-2.05(mt：5H)；1.87(s： 3H)；2.05-2.45(mt：4H)；2.50(mf：4H)；2.76(mt：1H)；2.99(mt： 1H)；3.24(mt：1H)；3.49(mt：1H)；3.73(t，J＝5Hz：4H)；3.84 (mt：1H)；4.06(mt：1H)；4.53(mt：1H)；4.75-4.85(mt：2H)；5.09 (减速的双重线，JHF＝48 Hz：1H)；5.30(mt：1H)；5.70-5.85(mt：3H)； 5.96和6.03(2mts：全部1H)；6.19(d，J＝16Hz：1H)；6.51(mt： 1H)；8.12(s：1H)。

按照下述方式可以制备(RR，SS)-反-2-(吗啉代甲基)-1-环丙烷羧 酸：

往1.0克(RR，SS)-反-2-(吗啉代甲基)-1-环丙烷羧酸乙酯在50 毫升乙醇中的溶液，在20℃加入10毫升1N氢氧化钠水溶液。在80 ℃搅拌2小时后，在减压(2.7千帕)下浓缩乙醇，残留水相用50毫升 醋酸乙酯洗涤。通过加入1N盐酸水溶液将水相pH调节到6，然后在 减压(2.7千帕)下浓缩至干。用50毫升甲苯两次回收残留物，并在减 压(2.7千帕)下浓缩至干。残留物用50毫升50℃乙醇溶解，过滤除去 不溶物，滤液在减压(2.7千帕)下浓缩。于是得到0.9克(RR，SS)-反 -2-(吗啉代甲基)-1-环丙烷羧酸，呈黄色油状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.68(mt：1H)；1.20 (mt：1H)；1.46(mt：1H)；1.56(mt：1H)；2.28(dd，J＝13和8Hz： 1H)；2.60(dd，J＝13和5Hz：1H)；2.66(mf；2H)；2.77(mf：2H)； 3.78(t，J＝5Hz：4H)。

按照下述方式可以制备(RR，SS)-反-2-(吗啉代甲基)-1-环丙烷羧 酸乙酯：

往2.82克(RR，SS)-反-2-甲酰基-1-环丙烷羧酸乙酯在100毫升二 氯甲烷中的溶液，在20℃氩气氛下加入1.74毫升吗啉和6.36克三(醋 酸根-O)氢化硼酸钠。在搅拌4小时后，加入100毫升蒸馏水。在搅拌 后倾析有机相，然后用100毫升蒸馏水洗涤。有机相用硫酸镁干燥， 过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓缩至干。于是得到1.1克(RR，SS)- 反-2-(吗啉代甲基)-1-环丙烷羧酸乙酯，呈黄色油状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.76(mt：1H)；1.20-1.35 (mt：4H)；1.44(mt：1H)；1.54(mt：1H)；2.31(dd，J＝13和7Hz： 1H)；2.36(dd，J＝13和7Hz：1H)；2.50(宽t，J＝5Hz：4H)；3.73 (t，J＝5Hz：4H)；4.13(mt：2H)。

实施例34

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[6-(咪唑-1-基)己酰基]原始霉素 IIB

往1.42克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-(6-溴己酰基)原始霉素 IIB在7毫升二甲基亚砜中的溶液，在20℃加入0.34克咪唑和少许碘 化钠晶体。在53℃搅拌2小时，然后在20℃搅拌16小时后，反应混 合物倒入35毫升水中，用烧结玻璃过滤。不溶物用水洗涤，并溶于 70毫升醋酸乙酯中。得到的溶液用25毫升0.1N盐酸水溶液提取。倾 析水相，用10毫升醋酸乙酯提取，然后用0.5毫升5N氢氧化钠水溶 液中和。这时水相每次用25毫升醋酸乙酯提取两次。合并有机相，用 硫酸镁干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到1克微 黄色固体，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇/乙腈(以体 积计88/6/6)]。得到0.59克白色固体，它被溶于5毫升二氯甲烷中。 用Célite过滤有机相。Célite用二氯甲烷洗涤。滤液在20℃减压 (2.7千帕)下浓缩至干，得到0.58克(16R)-16-脱氧-16-氟 -14-O-[6-(咪唑-1-基)己酰基]原始霉素IIB，呈白色固体状，约90℃ 熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.95(d，J＝6.5Hz： 3H)；0.99(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.27(mt： 2H)；1.60-2.10(mt：5H)；1.63(mt：2H)；1.78(mt：2H)；1.88(s： 3H)；2.10-2.25(mt：2H)；2.27(t，J＝7Hz：2H)；2.75(mt：1H)； 3.00(mt：1H)；3.25(dt，J＝17和5Hz：1H)；3.51(mt：1H)；3.82 (mt：1H)；3.94(t，J＝7Hz：2H)；4.08(mt：1H)；4.58 (mt：1H)；4.75-4.85(mt：2H)；5.07(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)； 5.20(d，J＝9Hz：1H)；5.75-5.85(mt：2H)；5.90(dd，J＝16和 1.5Hz；1H)；6.18(d，J＝16Hz：1H)；6.56(dd，J＝16和5Hz： 1H)；6.77(mt：1H)；6.90(s：1H)；7.10(s：1H)；7.45(s：1H)； 8.12(s：1H)。

按照下述方式可以制备(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-(6-溴己酰 基)原始霉素IIB：

往5.32克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施例1所述制 备)在150毫升二氯甲烷中的溶液，在28℃加入1.7毫升三乙胺和1.8 毫升6-溴己酰氯。在23℃搅拌21.5小时后，加入0.43毫升三乙胺和 0.45毫升6-溴己酰氯。在28℃再搅拌21小时后，反应混合物倒入50 毫升水中。倾析有机相，用硫酸镁干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕) 下浓缩至干，得到8.05克褐色固体，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂： 二氯甲烷/甲醇/乙腈(以体积计96/2/2)]。于是得到5.6克(16R)-16- 脱氧-16-氟-14-O-(6-溴己酰基)原始霉素IIB，呈微黄色固体状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.09(d，J＝6.5Hz：3H)；1.48(mt： 2H)；1.60-2.05(mt：9H)；1.88(s：3H)；2.15(mt：1H)；2.24(mt： 1H)；2.31(t，J＝7.5Hz：2H)；2.76(mt：1H)；2.99(mt：1H)；3.24 (mt：1H)；3.41(t，J＝7Hz：2H)；3.49(mt：1H)；3.86(mt：1H)； 4.06(mt：1H)；4.53(mt：1H)；4.78(dd，J＝10和2Hz：1H)；4.82 (dd，J＝9和3Hz：1H)；5.11(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.31 (d，J＝9Hz：1H)；5.75-5.85(mt：1H)；5.75(mt：1H)；5.82(dd，J ＝17和2Hz：1H)；5.95(mt：1H)；6.19(d，J＝16Hz：1H)；6.51 (dd，J＝17和4Hz：1H)；8.13(s：1H)。

实施例35

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)己酰基]原 始霉素IIB

往1.42克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-(6-溴己酰基)原始霉素 IIB(如实施例34所述制备)在7毫升二甲亚砜中的溶液，在20℃加入 0.67毫升N-甲基哌嗪。在60℃搅拌0.5小时后，反应混合物倒入35 毫升冰水中，再用50毫升二氯甲烷提取。有机相用25毫升饱和氯化 钠水溶液洗涤，用硫酸镁干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓缩 至干，得到1.2克橙色固体，它溶于30毫升醋酸乙酯中。得到的溶液 相继地用20毫升0.1N盐酸水溶液和10毫升水提取。合并水相，再用 0.4毫升5N氢氧化钠水溶液中和。水相每次用25毫升二氯甲烷提取 两次。有机相合并后，用硫酸镁干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕) 下浓缩至干，得到0.94克黄色固体，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂： 二氯甲烷/甲醇(以体积计90/10)]。于是得到0.27克白色固体，它溶 于5毫升二氯甲烷中。用Célite过滤有机相。Célite用二氯甲烷洗 涤。滤液在20℃减压(2.7千帕)下浓缩至于，得到0.26克(16R)-16- 脱氧-16-氟-14-O-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)己酰基]原始霉素IIB，呈白 色固体状，约95℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.09(d，J＝6.5Hz：3H)；1.33(mt： 2H)；1.51(mt：2H)；1.55-2.05(mt：7H)；1.88(s：3H)；2.10-2.65 (mt：14H)；2.29(s：3H)；2.76(mt：1H)；2.99(mt：1H)；3.24(mt： 1H)；3.48(mt：1H)；3.86(mt：1H)；4.06(mt：1H)；4.53(mt：1H)； 4.78(dd，J＝10和2Hz：1H)；4.82(dd，J＝9和3Hz：1H)；5.10 (减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.30(d，J＝9Hz：1H)；5.75-5.85(mt： 1H)；5.75(mt：1H)；5.82(dd，J＝17和2Hz：1H)；5.98(mt：1H)； 6.19(d，J＝16Hz：1H)；6.52(dd，J＝17和5Hz：1H)；8.13(s： 1H)。

实施例36

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{6-[4-(吡咯烷-1-基羰基甲基)哌 嗪-1-基]己酰基}原始霉素IIB

往1.35克(16R)-脱氧-16-氟-14-O-(6-溴己酰基)原始霉素 IIB(如实施例34所述制备)在7毫升二甲亚砜中的溶液，在20℃加入 1.18克(吡咯烷-1-基羰基甲基)哌嗪。在60℃搅拌3小时后，该反应 混合物倒入35毫升冰水中，然后每次用25毫升醋酸乙酯提取2次。 合并有机相，用硫酸镁干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓缩至 干，得到1.53克粘性残留物，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲 烷/甲醇(以体积计，90/10)]。得到0.96克粘性胶，它溶于10毫升二 氯甲烷中。这种溶液用Célite过滤。Célite用二氯甲烷洗涤。滤液 在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到一种胶，它相继地在乙醚和戊烷 中搅拌。在过滤后，然后在减压(2.7千帕)下干燥，得到0.78克 (16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{6-[4-(吡咯烷-1-基羰基甲基)哌嗪-1- 基]己酰基}原始霉素IIB，呈黄色固体状，约80℃熔化。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.09(d，J＝6.5Hz：3H)；1.32(mt： 2H)；1.50(mt：2H)；1.60-2.05(mt：11H)；1.88(s：3H)；2.10-2.40 (mt：6H)；2.50(mf：4H)；2.59(mf：4H)；2.76(mt：1H)；2.99(mt： 1H)；3.12(s：2H)；3.24(mt：1H)；3.40-3.55(mt：5H)；3.86(mt： 1H)；4.05(mt：1H)；4.52(mt：1H)；4.78(dd，J＝10和2Hz：1H)； 4.82(dd，J＝9和3Hz：1H)；5.10(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)； 5.30(d，J＝9Hz：1H)；5.75-5.90(mt：1H)；5.75(mt：1H)；5.82 (dd，J＝17和2Hz：1H)；6.02(mt：1H)；6.19(d，J＝16Hz：1H)； 6.52(dd，J＝17和5Hz：1H)；8.13(s：1H)。

实施例37

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[7-(咪唑-1-基)庚酰基]原始霉素 IIB甲磺酸盐

往1.96克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[7-(咪唑-1-基)庚酰基] 原始霉素IIB在10毫升乙醇中的溶液，在20℃加入2.7毫升1N甲磺 酸乙醇溶液。在搅拌10分钟后，反应混合物在减压(2.7千帕)下浓缩 至于，得到残留物，它在10毫升醚中搅拌。在过滤，用5毫升乙醚洗 涤固体与在减压(2.7千帕)下干燥后，得到2.13克(16R)-16-脱氧-16- 氟-14-O-[7-(咪唑-1-基)庚酰基]原始霉素IIB甲磺酸盐，呈奶油固体 状，约110℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.95(d，J＝6.5Hz： 3H)；0.98(d，J＝6.5Hz：3H)；1.09(d，J＝6.5Hz：3H)；1.25-1.45 (mt：4H)；1.55-2.05(mt：9H)；1.88(s：3H)；2.10-2.30(mt：2H)； 2.28(t，J＝7.5Hz：2H)；2.76(mt：1H)；2.85(s：3H)；3.00(dt，J ＝17和6Hz：1H)；3.24(mt：1H)；3.51(mt：1H)；3.84(mt：1H)； 4.05(mt：1H)；4.18(t，J＝7.5Hz：2H)；4.49(mt：1H)；4.78(dd，J ＝10和2Hz：1H)；4.82(dd，J＝9和3Hz：1H)；5.09(减速的双 重线，JHF＝48Hz：1H)；5.28(d，J＝9.5Hz：1H)；5.70-5.85(mt： 2H)；5.84(dd，J＝16和2Hz：1H)；6.13(mt：1H)；6.18(d，J＝16 Hz：1H)；6.53(dd，J＝16和5Hz：1H)；7.13(s：1H)；7.41(s：1H)； 8.12(s：1H)；8.92(s：1H)。

按照下述方式可以制备(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[7-(咪唑 -1-基)庚酰基]原始霉素IIB：

往3.2克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施例1所述制 备)在100毫升二氯甲烷中的溶液，在23℃加入1.49克N，N’-二环己 基碳化亚二胺、0.075克4-二甲基氨基吡啶、1.68克7-(咪唑-1-基) 庚酸盐酸盐和1毫升三乙胺。在23℃搅拌84小时后，反应混合物经 过滤后，不溶物用二氯甲烷洗涤。滤液在减压(2.7千帕)下浓缩至干， 得到油状残留物，它被稀释在100毫升醋酸乙酯中。得到的溶液相继 地每次用40毫升水和40毫升饱和氯化钠水溶液洗涤两次，然后用60 毫升0.1N盐酸水溶液提取。这时酸性水相用20毫升醋酸乙酯提取， 通过加入6毫升1N氢氧化钠水溶液将其pH调节到8，然后每次用40 毫升醋酸乙酯提取两次。合并有机相，用饱和氯化钠水溶液洗涤，用 硫酸镁干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到3.05克 微黄色固体，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇/乙腈(以 体积计，86/7/7)]。于是得到2.58克固体，它溶于10毫升二氯甲烷 中。这种溶液用Célite过滤。Célite用二氯甲烷洗涤。滤液在20 ℃减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到2.58克(16R)-16-脱氧-16-氟 -14-O-[7-(咪唑-1-基)庚酰基]原始霉素IIB，呈白色固体状，约80℃ 熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.95(d，J＝6.5Hz： 3H)；0.99(d，J＝6.5Hz：3H)；1.09(d，J＝6.5Hz：3H)；1.25-1.40 (mt：4H)；1.55-2.05(mt：9H)；1.88(s：3H)；2.10-2.30(mt：2H)； 2.27(t，J＝7.5Hz：2H)；2.76(mt：1H)；2.99(dt，J＝17和6Hz： 1H)；3.24(mt：1H)；3.48(mt：1H)；3.85(mt：1H)；3.93(t，J＝ 7.5Hz；2H)；4.06(mt：1H)；4.53(mt：1H)；4.78(dd，J＝10 和2Hz；1H)；4.82(dd，J＝9和3Hz：1H)；5.09(减速的双重线， JHF＝48Hz：1H)；5.29(d，J＝9Hz：1H)；5.70-5.85(mt：2H)；5.83 (dd，J＝16.5和2Hz：1H)；6.17(mt：1H)；6.19(d，J＝15Hz：1H)； 6.52(dd，J＝16.5和5Hz：1H)；6.90(s：1H)；7.06(s：1H)；7.45 (s：1H)；8.12(s：1H)。

根据Kinji Iizuka等人，《J.Med.Chem.》，第24卷，第10 期，第1139-1148页(1981)可以制备7-(咪唑-1-基)庚酸盐酸盐。

实施例38

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-(4-甲基哌嗪-1-基)羰基乙酰基原 始霉素IIB

往2.5克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施例1所述制 备)在100毫升二氯甲烷中的溶液，在20℃氩气氛下加入1.74克4- 甲基哌嗪-1-基羰基乙酸、1.44克N，N’-二环己基碳化二亚胺和0.09 克4-二甲基氨基吡啶。在搅拌18小时后，向反应混合物加入50毫升 二氯甲烷，滤除不溶物，然后每次用50毫升蒸馏水洗涤四次。倾析有 机相，用硫酸镁干燥，在减压(2.7千帕)下浓缩至干。残留物(3.4克) 用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇梯度(以体积计，97/3和 92/8)]。得到白色固体，在乙醚中搅拌，过滤和干燥(2.7千帕)后， 于是得到1.3克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-(4-甲基哌嗪-1-基)羰基 乙酰基原始霉素IIB，呈白色固体状。

1H NMR谱(500MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.01(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.70-2.00 (mt：5H)；1.89(s：3H)；2.15(mt：1H)；2.25-2.35(mt：1H)；2.31 (s：3H)；2.40(mt：4H)；2.76(mt：1H)；3.01(dt，J＝16和6Hz： 1H)；3.23(mt：1H)；3.40-3.55(mt：5H)；3.66(mt：2H)；3.87(mt： 1H)；4.05(mt：1H)；4.53(mt：1H)；4.78(宽d，J＝10Hz：1H)； 4.82(dd，J＝9和3Hz：1H)；5.14(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)； 5.34(d，J＝9.5Hz：1H)；5.77(mt：1H)；5.82(dd，J＝16和2Hz： 1H)；5.88(dt，J＝9.5和5Hz：1H)；5.95(mt：1H)；6.20(d，J＝ 16Hz：1H)；6.51(dd，J＝16和4Hz：1H)；8.12(s：1H)。

按照下述方式可以制备4-甲基哌嗪-1-基羰基乙酸：

往4.5克4-甲基哌嗪-1-基羰基醋酸乙酯在100毫升乙醇中的溶 液，在20℃加入23毫升0.1N氢氧化钠水溶液。在搅拌24小时后， 反应混合物在减压(2.7千帕)下浓缩至干。得到的残留物用50毫升蒸 馏水溶解，该溶液每次用50毫升二氯甲烷洗涤四次。通过加入1N盐 酸水溶液将水相的pH调节到5-6，再每次用50毫升二氯甲烷提取两 次，然后在减压(2.7千帕)下浓缩至干。用100毫升甲苯分三次回收 残留物，在相同条件下将其残留物浓缩至干。得到4.6克黄色膏状残 留物，它在50毫升乙醇中被搅拌到60℃。过滤除去不溶物，滤液在 减压(2.7千帕)下浓缩至干。于是得到3.5克4-甲基哌嗪-1-基羰基乙 酸，呈可直接使用的吸湿粘块状。

1H NMR谱(300MHz，(CD3)2SO，d6，δ，以ppm计)：2.21(s：3H)； 2.29(t，J＝5Hz：2H)；2.34(t，J＝5Hz：2H)；3.30-3.50(mt：4H)； 3.39(s：2H)。

根据Morren H.，Trolin S.，Denayer R.，Grivsky E.，《Bull. Soc.Chim.Belg.》，1950，59，228-232可以制备4-甲基-哌嗪-1- 基羰基醋酸乙酯。

实施例39

(16R)-14-O-[4-羧基丁酰基]-16-脱氧-16-氟-原始霉素IIB

往400毫克(16R)-16-脱氧-16-氟-原始霉素IIB(如实施例1所述 制备)在2毫升吡啶中的溶液，在20℃加入258毫克戊二酸酐和84.5 毫克4-二甲基氨基吡啶。在搅拌20小时后，在减压(2.7千帕)下蒸去 吡啶，得到的油溶于20毫升醋酸乙酯中。得到的溶液每次先用10毫 升蒸馏水，然后0.1N盐酸水溶液洗涤两次。水相用醋酸乙酯提取，再 倾析。有机相用蒸馏水洗涤，然后每次用2毫升氯化钠水溶液洗涤两 次。倾析有机相，用硫酸镁干燥，过滤，再在减压(2.7千帕)下浓缩 至干，得到浅黄色固体，它在20毫升乙醚中搅拌，过滤，然后在减压 (2.7千帕)下干燥。于是得到363毫克固体，它用闪式色谱法纯化[洗 脱剂：二氯甲烷/甲醇(以体积计，97/3)]，得到100毫克 (16R)-14-O-[4-羧基丁酰基]-16-脱氧-16-氟-原始霉素IIB，呈白色 固体状，在98℃熔化。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz：3H)； 1.01(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.55-2.05(mt： 7H)；1.89(s：3H)；2.17(mt：1H)；2.25(mt：1H)；2.37(t，J＝7 Hz：2H)；2.42(t，J＝7Hz：2H)；2.77(mt：1H)；3.00(td，J＝17 和6Hz：1H)；3.25(mt：1H)；3.50(mt：1H)；3.86(mt：1H)；4.08 (mt：1H)；4.53(mt：1H)；4.79(dd，J＝10和1.5Hz：1H)；4.82(dd，J ＝9和3Hz；1H)；5.13(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.31(d，J ＝9.5Hz：1H)；5.75-5.90(mt：1H)；5.77(mt：1H)；5.83(dd，J＝ 17和2Hz：1H)；5.97(mt：1H)；6.19(d，J＝16Hz：1H)；6.53(dd，J ＝17和5Hz：1H)；8.14(s：1H)。

实施例40

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[3-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)丙酰基] 原始霉素IIB盐酸盐

往溶于6毫升甲基异丁基酮中的615毫克(16R)-16-脱氧-16-氟 -14-O-[3-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)丙酰基]原始霉素IIB，加入3N氯 乙烷溶液，直到得到大量的沉淀为止。沉淀经过滤后，每次用2毫升 甲基异丁基酮洗涤两次，然后每次用10毫升乙醚洗涤三次。在50℃ (90帕)干燥后，得到600毫克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[3-(4-甲 基哌嗪-1-基羰基)丙酰基]原始霉素IIB盐酸盐，呈白色粉末状，在160 ℃熔化。

按照下述方式可以制备(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[3-(4-甲基哌 嗪-1-基羰基)丙酰基]原始霉素IIB：

在置于氮气下的三口瓶中，加入450毫克4-(4-甲基哌嗪-1- 基)-4-氧代丁酸、1克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施例1 所述制备)、470毫克N，N’-二环己基碳化二亚胺、140毫克4-二甲基 氨基吡啶，然后20毫升二氯甲烷。该反应在20℃搅拌48小时，反应 混合物这时用10毫升二氯甲烷稀释，然后倒入50毫升蒸馏水中。得 到的混合物用棉布过滤。倾析有机相，水相每次用5毫升二氯甲烷提 取2次。合并有机相，用硫酸钠干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕) 下浓缩至干，得到1.66克混合物，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二 氯甲烷/甲醇(以体积计，95/5)]。于是得到975毫克产物，它在10 毫升乙醚中搅拌，过滤与干燥，然后用闪式色谱法再纯化[洗脱剂：醋 酸乙酯-甲醇(以体积计，93/7)]。浓缩这些馏分，得到的固体用10 毫升乙醚溶解，并搅拌30分钟。得到的白色固体经过滤后，用乙醚洗 涤，然后在50℃(90帕)下于燥，得到500毫克(16R)-16-脱氧-16-氟 -14-O-[3-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)丙酰基]原始霉素IIB，呈白色粉末 状，在130℃熔化。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)；0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.65-2.05 (mt：5H)；1.88(s：3H)；2.15(mt：1H)；2.20-2.45(mt：5H)；2.31 (s：3H)；2.50-2.75(mt：4H)；2.76(mt：1H)；3.00(mt：1H)；3.23 (mt：1H)；3.40-3.55(mt：1H)；3.50(mt：2H)；3.63(mt：2H)；3.87 (mt：1H)；4.06(mt：1H)；4.53(mt：1H)；4.78(宽d，J＝10Hz： 1H)；4.82(dd，J＝9和3Hz：1H)；5.14(减速的双重线，JHF＝48Hz： 1H)；5.33(d，J＝9.5Hz：1H)；5.75-5.90(mt：1H)；5.75(mt：1H)； 5.81(宽d，J＝16Hz：1H)；5.96(mt：1H)；6.20(d，J＝16Hz：1H)； 6.51(dd，J＝16和5Hz：1H)；8.12(s：1H)。

按照下述方式可以制备4-(4-甲基哌嗪-1-基)-4-氧代丁酸：

往20毫升二烷中加入1.17克琥珀酸酐，然后加入1.19毫升 N-甲基哌嗪。在室温下搅拌18小时后，过滤得到的沉淀，相继地用少 量二烷洗涤，用10毫升丙酮洗涤2次和用10毫升乙醚洗涤。在20 ℃减压(2.7千帕)下干燥后，得到1.09克4-(4-甲基哌嗪-1-基)-4- 氧代丁酸，呈白色固体状，在114℃熔化。

实施例41

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{3-[4-(吡啶-2-基)哌嗪-1-基羰基] 丙酰基}原始霉素IIB

如实施例40操作，但是使用240毫克4-氧代-4-[4-(吡啶-2-基) 哌嗪-1-基]丁酸、400毫克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施 例1所述制备)、190毫克N，N’-二环己基碳化二亚胺、46毫克4-二甲 基氨基吡啶、然后6毫升二氯甲烷为原料。在搅拌66小时和按照实施 例40类似处理后，得到655毫克固体，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂： 二氯甲烷-甲醇(以体积计，95/5)]。分离的固体在4毫升乙醚中搅拌 20分钟。得到的白色固体经过滤，用乙醚洗涤和在50℃(90帕)干燥， 得到308毫克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{3-[4-(吡啶-2-基)哌嗪 -1-基羰基]丙酰基}原始霉素IIB，呈白色粉末状，约140℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.01(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.65-2.05 (mt：5H)；1.88(s：3H)；2.15(mt：1H)；2.30(mt：1H)；2.55-2.80 (mt：4H)；2.76(mt：1H)；3.00(mt：1H)；3.23(mt：1H)；3.46(mt： 1H)；3.51(mt：2H)；3.63(mt：4H)；3.75(mt：2H)；3.87(mt：1H)； 4.06(mt：1H)；4.53(mt：1H)；4.78(dd，J＝10和1.5Hz：1H)； 4.82(dd，J＝9和3Hz：1H)；5.14(减速的双重线JHF＝48Hz：1H)； 5.34(d，J＝9.5Hz：1H)；5.75-5.90(mt：1H)；5.75(mt：1H)；5.81 (dd，J＝16和1.5Hz：1H)；5.96(mt：1H)；6.20(d，J＝16Hz：1H)； 6.51(dd，J＝16和5Hz：1H)；6.60-6.70(mt：2H)；7.52(mt：1H)； 8.12(s：1H)；8.21(dd，J＝5和1.5Hz：1H)。

按照下述方式可以制备4-氧代-4-[4-(吡啶-2-基)哌嗪-1-基]丁 酸：

往15毫升二烷中加入0.97克琥珀酸酐，然后加入1.5毫升 1-(2-吡啶基)哌嗪。在20℃搅拌4.5小时后，在20℃减压(2.7千帕) 下蒸去溶剂，得到的固体在33毫升丙酮中趁热重结晶。过滤后，相继 地用少量丙酮和乙醚洗涤，再在20℃减压(2.7千帕)下干燥，得到986 毫克4-氧代-4-[4-(吡啶-2-基)哌嗪-1-基]丁酸，呈白色固体状，在 134℃熔化。

实施例42

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{3-[4-(吡咯烷-1-基羰基甲基)哌 嗪-1-基羰基]丙酰基}原始霉素IIB

如实施例40操作，但是使用750毫克4-氧代-4-[4-(2-氧代-2- 吡咯烷-1-基乙基)哌嗪-1-基]丁酸、1克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉 素IIB(如实施例1所述制备)、190毫克N，N’-二环己基碳化二亚胺、 60毫克4-二甲基氨基吡啶、然后20毫升二氯甲烷为原料。在搅拌25 小时后，再加入95毫克N，N’-二环己基碳化二亚胺和95毫克4-二甲 基氨基吡啶，然后继续搅拌19小时。在处理后，得到1.54克固体， 它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷-甲醇(以体积计，95/5)]。这 些馏分浓缩得到530毫克固体，该固体用5毫升乙醚溶解。得到的白 色固体经过滤，用乙醚洗涤，然后在50℃(90帕)干燥，得到480毫克 (16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{3-[4-(吡咯烷-1-基羰基甲基)哌嗪-1- 基羰基]丙酰基}原始霉素IIB，呈白色粉末状，在132℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.95(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.09(d，J＝6.5Hz：3H)；1.65-2.05 (mt：9H)；1.88(s：3H)；2.14(mt：1H)；2.28(mt：1H)；2.45-2.75 (mt：8H)；2.76(mt：1H)；3.00(td，J＝17和6Hz：1H)；3.14(s： 2H)；3.25(mt：1H)；3.40-3.55(mt：7H)；3.66(mt：2H)；3.87(mt： 1H)；4.05(mt：1H)；4.52(mt：1H)；4.78(dd，J＝10和1.5Hz： 1H)；4.81(dd，J＝9和3Hz：1H)；5.12(减速的双重线，JHF＝48 Hz：1H)；5.33(d，J＝9.5Hz：1H)；5.74(mt：1H)；5.75-5.85(mt： 1H)；5.81(dd，J＝17和1.5Hz：1H)；6.00(mt：1H)；6.19(d，J ＝16Hz：1H)；6.51(dd，J＝17和5Hz：1H)；8.12(s：1H)。

按照下述方式可以制备4-氧代-4-[4-(2-氧代-2-吡咯烷-1-基乙 基)哌嗪-1-基]丁酸：

在保持在氮气氛下的园底瓶中，加入20毫升二烷、0.72克琥 珀酸酐、然后加入1.5毫升95％1-(吡咯烷基羰基甲基)哌嗪。在室温 下搅拌4.75小时后，在20℃减压(2.7千帕)蒸去溶剂，得到2.4克 4-氧代-4-[4-(2-氧代-2-吡咯烷-1-基乙基)哌嗪-1-基]丁酸，呈可直 接使用的浅黄色膏状。

实施例43

(16R)-16-脱氧-14-O-[3-(2-二甲基氨基乙基氨基甲酰基)丙酰 基]-16-氟原始霉素IIB

如实施例40操作，但是使用170毫克N-(2-二甲基氨基乙基)琥 珀酰胺酸、400毫克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施例1所 述制备)、190毫克N，N’-二环己基碳化二亚胺、46毫克4-二甲基氨基 吡啶，然后6毫升二氯甲烷。在搅拌18小时与按照实施例40类似处 理后，得到580毫克固体，它用15毫升二氯甲烷和100毫升蒸馏水溶 解。加入0.1M盐酸，以便将其pH调节到4。水相每次用5毫升二氯 甲烷提取两次，然后通过加入碳酸氢钠溶液将其pH调节到7。在倾析 后，水相每次用10毫升二氯甲烷提取三次。合并有机相，用硫酸钠干 燥，再在20℃减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到固体，它在5毫升乙 醚中搅拌，过滤，然后在50℃(90帕)下干燥。得到112毫克(16R)-16- 脱氧-14-O-[3-(2-二甲基氨基乙基氨基甲酰基)丙酰基]-16-氟原始霉 素IIB，呈白色粉末状，在114℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.97(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.65-2.05 (mt：5H)；1.88(s：3H)；2.10-2.35(mt：2H)；2.24(s： 6H)；2.35-2.75(mt：4H)；2.41(t，J＝6Hz：2H)；2.77(mt：1H)； 3.00(td，J＝17和6Hz：1H)；3.23(mt：1H)；3.33(q，J＝6Hz： 2H)；3.47(mt：1H)；3.87(mt：1H)；4.07(mt：1H)；4.54(mt：1H)； 4.78(宽d，J＝10Hz：1H)；4.82(dd，J＝9和3Hz：1H)；5.13(减 速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.32(d，J＝9.5Hz：1H)；5.75-5.90 (mt：1H)；5.75(mt：1H)；5.82(宽d，J＝17Hz：1H)；5.98(mt： 1H)；6.10-6.25(mt：1H)；6.20(d，J＝16Hz：1H)；6.51(dd，J＝17 和5Hz：1H)；8.13(s：1H)。

按照下述方式可以制备N-(2-二甲基氨基乙基)琥珀酰胺酸：

在15毫升二烷中加入1.4克琥珀酸酐，然后加入1.5毫升2- 二甲基氨基乙基胺。在室温下搅拌18小时后，在20℃减压(2.7千帕) 下蒸去溶剂，得到的残留物趁热溶于40毫升甲基乙基酮中。在冷却后， 除去溶解的部分。残留的胶趁热在15毫升丙酮中结晶。过滤后，固体 用少量丙酮洗涤，然后用乙醚洗涤，在20℃减压(2.7千帕)下干燥， 得到2.03克N-(2-二甲基氨基乙基)琥珀酰胺酸，呈白色固体状，在 155℃熔化。

实施例44

(16R)-14-O-(3-羧基丙酰基)-16-脱氧-16-氟-原始霉素IIB

如实施例39操作，但是使用5克(16R)-16-脱氧-16-氟-原始霉素 IIB(如实施例1所述制备)、2.82克琥珀酸酐、1.15克4-二甲基氨基 吡啶和25毫升吡啶为原料，在搅拌4小时50分钟后，得到橙黄色油， 它在乙醚中搅拌18小时，得到碎白色粉末。这种固体过滤后，在乙醚 中搅拌，过滤，然后在30℃(90帕)下干燥，得到4.96克固体。一克 这种固体在10毫升二氯甲烷中被搅拌1小时，过滤，然后用乙醚洗涤。 得到的固体每次用蒸馏水、然后用乙醚洗涤3次，得到820毫克 (16R)-14-O-(3-羧基丙酰基)-16-脱氧-16-氟-原始霉素IIB，呈白色 固体状，在192℃熔化。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.97(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.01(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.55-2.05 (mt：5H)；1.89(s：3H)；2.16(mt：1H)；2.27(mt：1H)；2.55-2.70 (mt：4H)；2.77(mt：1H)；3.00(td，J＝17和6Hz；1H)；3.25(mt： 1H)；3.50(mt：1H)；3.87(mt：1H)；4.07(mt：1H)；4.52(mt：1H)； 4.79(dd，J＝10和1.5Hz：1H)；4.83(dd，J＝9和3Hz：1H)；5.12 (减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.33(d，J＝9.5Hz：1H)；5.75-5.90 (mt：1H)；5.77(mt：1H)；5.83(宽d，J＝17Hz：1H)；5.96(mt： 1H)；6.20(d，J＝16Hz：1H)；6.53(dd，J＝17和5Hz：1H)；8.13 (s：1H)。

实施例45

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(2-吗啉代乙基氨基甲酰基)丁 酰基]-原始霉素IIB盐酸盐

往280毫克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(2-吗啉代乙基氨基 甲酰基)丁酰基]-原始霉素IIB在3毫升甲基异丁基酮中的溶液，在4 ℃加入0.2毫升3M氯乙烷。生成的沉淀用4号烧结玻璃过滤，用甲基 异丁基酮，然后用乙醚洗涤多次。得到的白色粉末在20℃(90帕)下 干燥，得到268毫克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(2-吗啉代乙基 氨基甲酰基)丁酰基]-原始霉素IIB盐酸盐，呈白色固体状，在134℃ 熔化。

按照下述方式可以制备(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(2-吗啉 代乙基氨基甲酰基)丁酰基]-原始霉素IIB：

往1克5-(2-吗啉代乙基氨基)-5-氧代戊酸在40毫升二氯甲烷中 的溶液，加入459毫克(16R)-16-脱氧-16-氟-原始霉素IIB(如实施例 1所述制备)、388毫克N，N’-二环己基碳化二亚胺、然后23毫克4- 二甲基氨基吡啶。该反应在20℃搅拌48小时。生成的二环己基脲这 时用4号烧结玻璃过滤，然后用醋酸乙酯洗涤。滤液在减压(2.7千帕) 下浓缩至干，得到1.35克固体，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯 甲烷-甲醇(以体积计，95/5)]。于是得到490毫克产物，再次使用氧 化铝柱闪式色谱法纯化[洗脱剂：醋酸乙酯-甲醇(以体积计，98/2)]。 这些馏分在减压(2.7千帕)下浓缩，得到的固体用乙醚溶解，再搅拌 18小时。过滤得到的白色固体，用乙醚洗涤两次，然后在20℃(90帕) 下干燥，得到294毫克(16R)-14-O-[4-(2-吗啉代乙基氨基甲酰基) 丁酰基]-16-脱氧-16-氟-原始霉素IIB，呈白色粉末状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)；0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.65-2.05 (mt：5H)；1.90(s：3H)；1.95(mt：2H)；2.10-2.30(mt：2H)；2.25 (t，J＝7Hz：2H)；2.37(mt：2H)；2.47(mt：6H)；2.76(mt：1H)； 2.99(dt，J＝17和6Hz：1H)；3.24(mt：1H)；3.36(dt，J＝7和 6Hz：1H)；3.48(mt：1H)；3.71(t，J＝5Hz：4H)；3.85(mt：1H)； 4.07(mt：1H)；4.54(mt：1H)；4.79(宽d，J＝10Hz：1H)；4.82 (dd，J＝9和3Hz：1H)；5.12(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.30 (d，J＝9Hz：1H)；5.70-5.85(mt：2H)；5.82(宽d，J＝17Hz：1H)； 6.00(mt：2H)；6.19(d，J＝16Hz：1H)；6.52(dd，J＝17和5Hz： 1H)；8.12(s：1H)。

按照下述方式可以制备5-(2-吗啉代乙基氨基)-5-氧代戊酸：

在10毫升二烷中加入1.517克戊二酸酐，然后滴加1.75毫升 N-(2-氨基乙基)吗啉。在20℃下继续搅拌0.75小时。过滤生成的白 色固体，相继地用二烷和乙醚洗涤，然后在20℃(90帕)下干燥， 得到1.94克5-(2-吗啉代乙基氨基)-5-氧代戊酸，呈白色固体状，在 96℃熔化。

实施例46

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{(3RS)-3-甲基-4-[4-(吡咯烷-1- 基羰基甲基)哌嗪-1-基羰基]丁酰基}-原始霉素IIB盐酸盐

在置于氮气下的园底烧瓶中，加入1克(16R)-16-脱氧-16-氟原始 霉素IIB(如实施例1所述制备)和40毫升二氯甲烷。该混合物加热直 到溶解，然后在20℃加入620毫克3-甲基-5-氧代-5-[4-(2-氧代-2- 吡咯烷-1-基乙基)哌嗪-1-基]戊酸、389毫克N，N’-二环己基碳化二亚 胺，然后45毫克4-二甲基氨基吡啶。在20℃搅拌24小时后，加入 124毫克3-甲基-5-氧代-5-[4-(2-氧代-2-吡咯烷-1-基乙基)哌嗪-1- 基]戊酸、78毫克N，N’-二环己基碳化二亚胺和9毫克4-二甲基氨基 吡啶。该反应在20℃搅拌24小时，然后过滤反应混合物，用醋酸乙 酯洗涤，在减压(2.7千帕)下浓缩至于。残留物在30毫升醋酸乙酯和 6毫升二氯甲烷混合物中搅拌1小时，然后过滤。过滤不溶物，用醋 酸乙酯洗涤。合并滤液，相继地每次用5毫升5％碳酸氢钠水溶液和10 毫升饱和氯化钠水溶液洗涤两次。得到的有机相用硫酸镁干燥，过滤， 再在减压(2.7千帕)下浓缩至干。得到的黄色固体在40毫升乙醚中搅 拌18小时，过滤，然后用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷-甲醇(以 体积计，95/5)]。得到的产物在乙醚中搅拌，过滤，然后在30℃(90 帕)下干燥，得到610毫克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{(3RS)-3-甲 基-4-[4-(吡咯烷-1-基羰基甲基)哌嗪-1-基羰基]丁酰基}原始霉素 IIB，呈白色粉末状。

往溶于3毫升无水乙醇的这种固体中加入0.25毫升3M氯乙烷， 然后加入10毫升乙醚。在减压下除去溶剂，得到的固体在20毫升乙 醚中凝固。在过滤与在25℃(90帕)下干燥后，得到610毫克(16R)-16- 脱氧-16-氟-14-O-{(3RS)-3-甲基-4-[4-(吡咯烷-1-基羰基甲基)哌 嗪-1-基羰基]丁酰基}-原始霉素IIB盐酸盐，呈白色固体状，在180 ℃熔化。

1H NMR谱(400MHz，(CD3)2SO，d6，δ，以ppm计)：0.88(d，J＝ 6.5Hz：3H)；0.90-1.00(mt：6H)；1.06(d，J＝6.5Hz：3H)；1.58 (mt：1H)；1.70-2.50(mt：15H)；1.80(s：3H)；2.78(mt： 1H)；3.00-3.50(mt：10H)；3.40(mt：4H)；3.65(mt：1H)；3.72(mt： 1H)；3.81(mt：1H)；3.95(mt：1H)；4.15(mf：2H)；4.70-4.80(mt： 2H)；5.10(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.43(d，J＝9Hz：1H)； 5.66(mt：1H)；5.76(mt：1H)；5.83(dd，J＝16和1.5Hz：1H)； 6.20(d，J＝16Hz：1H)；6.63(dd，J＝16和4Hz：1H)；8.04(t，J＝6Hz：1H)； 8.48(s：1H)；9.85-10.50(非常展宽的mf：1H)。

按照下述方式可以制备(3RS)-3-甲基-5-氧代-5-[4-(2-氧代-2- 吡咯烷-1-基乙基)哌嗪-1-基]戊酸：

在10毫升二烷中加入1.6克3-甲基戊二酸酐，然后加入2.62 克吡咯烷基羰基甲基哌嗪。在搅拌8小时后，再加入320毫克3-甲基 戊二酸酐，然后在20℃继续搅拌18小时。这时，在减压下蒸去溶剂， 然后得到的油在45℃(90帕)下干燥，得到4.5克(3RS)-3-甲基-5-氧 代-5-[4-(2-氧代-2-吡咯烷-1-基乙基)哌嗪-1-基]戊酸，呈可直接使 用的橙色油状。

实施例47

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)丁酰基] 原始霉素IIB盐酸盐

如实施例45操作，但是使用580毫克5-(4-甲基哌嗪-1-基)-5- 氧代戊酸、1.21克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施例1所 述制备)，700毫克N，N’-二环己基碳化二亚胺、170毫克4-二甲基氨 基吡啶在25毫升二氯甲烷中的溶液，得到固体，它用闪式色谱法纯化 [洗脱剂：二氯甲烷/甲醇(以体积计，95/5)]。这些馏分在20℃减压 (2.7千帕)下浓缩至干后，于是得到1.45克(16R)-16-脱氧-16-氟 -14-O-[4-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)丁酰基]-原始霉素IIB。往溶于8 毫升甲基异丁基酮的这种固体中，加入3N氯乙烷，直到完全沉淀为止。 过滤得到的固体，相继地每次用2毫升甲基异丁基酮洗涤3次和每次 用10毫升乙醚洗涤3次，然后在50℃(90帕)下干燥，得到1.24克 (16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)丁酰基]原 始霉素IIB盐酸盐，呈白色固体状，到165℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，(CD3)2SO d6，δ，以ppm计)：0.86(mt：3H)； 0.94(d，J＝6.5Hz：3H)；1.04(d，J＝6.5Hz：3H)；1.52(mt： 1H)；1.65-2.15(mt：7H)；1.77(s：3H)；2.20(mt：1H)；2.25-2.45 (mt：4H)；2.70-2.80(mt：1H)；2.76(s：3H)；2.80-3.10(mt： 3H)；3.10-3.50(mt：5H)；3.60(宽d，J＝14Hz：1H)；3.68(mt：1H)； 3.81(mt：1H)；3.90-4.10(mt：2H)；4.43(mf：1H)；4.70-4.80(mt： 2H)；5.10(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.43(d，J＝9Hz：1H)； 5.61(mt：1H)；5.74(mt：1H)；5.80(宽d，J＝16Hz：1H)；6.19 (d，J＝16Hz：1H)；6.62(dd，J＝16和4Hz：1H)；8.17(mt：1H)； 8.52(s：1H)；10.91(mf：1H)。

按照下述方式可以制备5-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-氧代戊酸：

往20毫升二烷加入1.6克3-甲基戊二酸酐，然后加入2.62克 哌嗪-1-基羧基甲基吡咯烷。在搅拌8小时后，再加入320毫克3-甲 基戊二酸酐，然后在20℃继续搅拌18小时。这时，在减压下蒸去溶 剂，然后得到的油在45℃(90帕)下干燥，得到4.5克5-(4-甲基哌嗪 -1-基)-5-氧代戊酸，呈可直接使用的橙色油状。

实施例48

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(4-乙基哌嗪-1-基羰基)丁酰基] 原始霉素IIB盐酸盐

往390毫克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(4-乙基哌嗪-1-基羰 基)丁酰基]原始霉素IIB在5毫升甲基异丁基酮中的溶液，在20℃加 入0.35毫升3M氯乙烷。过滤生成的沉淀，相继地用少量甲基异丁基 酮和乙醚洗涤，然后在20℃(90帕)下干燥，得到340毫克(16R)-16- 脱氧-16-氟-14-O-[4-(4-乙基哌嗪-1-基羰基)丁酰基]原始霉素IIB盐 酸盐，呈白色固体状，约150℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，(CD3)2SO d6，δ，以ppm计)：0.87(mt：3H)； 0.95(d，J＝6.5Hz：3H)；1.05(d，J＝6.5Hz：3H)；1.25(宽 t，J＝7Hz：3H)；1.53(mt：1H)；1.65-2.15(mt：7H)；1.79(s：3H)； 2.20(mt：1H)；2.30-2.45(mt：4H)；2.77(mt：1H)；2.80-3.55(mt： 10H)；3.61(宽d，J＝15Hz：1H)；3.69(mt：1H)；3.82(mt：1H)； 3.96(mt：1H)；4.04(宽d，J＝13.5Hz：1H)；4.48(宽d，J＝13.5 Hz：1H)；4.70-4.80(mt：2H)；5.10(减速的双重线，JHF＝48Hz： 1H)；5.43(d，J＝9Hz：1H)；5.62(mt：1H)；5.75(mt：1H)；5.81 (dd，J＝16和1.5Hz：1H)；6.19(d，J＝16Hz：1H)；6.63(dd，J＝ 16和4Hz：1H)；8.15(mt：1H)；8.51(s：1H)；10.16(宽mf：1H)。

按照下述方式可以制备(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(4-乙基 哌嗪-1-基羰基)丁酰基]原始霉素IIB：

如实施例45操作，但是使用430毫克5-(4-乙基哌嗪-1-基)-5- 氧代戊酸、1克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施例1所述制 备)、390毫克N，N’-二环己基碳化二亚胺、23毫克4-二甲基氨基吡啶 在40毫升二氯甲烷中的溶液为原料，在加入50毫克硫酸镁后，在搅 拌27小时后，补加43毫克5-(4-乙基哌嗪-1-基)-5-氧代戊酸、39 毫克N，N’-二环己基碳化二亚胺和2.3毫克4-二甲基氨基吡啶。反应 4小时和处理后，得到1.16克固体，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂： 二氯甲烷-甲醇(以体积计，95/5)]。各馏分在20℃减压(2.7千帕)下 浓缩至干后，于是得到260毫克纯产物和420毫克固体，它再通过2 次半制备CLHP色谱纯化[Hypersil 5uM硅胶，洗脱剂：二氯甲烷/甲 醇(以体积计，95/5)，然后用二氯甲烷/甲醇梯度(以体积计，97/3， 然后95/5)]。合并如此得到的两批物料，得到390毫克(16R)-16-脱 氧-16-氟-14-O-[4-(4-乙基哌嗪-1-基羰基)丁酰基]原始霉素IIB，呈 白色固体。

按照下述方式可以制备5-(4-乙基哌嗪-1-基)-5-氧代戊酸：

在氩气下往10毫升二烷加入1.5克1-乙基哌嗪，然后加入1.5 克戊二酸酐在5毫升二烷中的溶液。在25℃继续搅拌19小时。在 减压(2.7千帕)下蒸去溶剂，得到的褐色油在乙醚中搅拌。得到的固 体经过滤，用乙醚洗涤，然后在20℃(90帕)下干燥，得到1.95克 5-(4-乙基哌嗪-1-基)-5-氧代戊酸，呈可直接使用的玫瑰色吸湿固体 状。

实施例49

(1 6R)-16-脱氧-14-O-[4-(4-乙氧基羰基甲基哌嗪-1-基羰基)丁 酰基]-16-氟原始霉素IIB

在置于氮气下的圆底烧瓶中，加入1克(16R)-16-脱氧1 6-氟原始 霉素IIB(如实施例1所述制备)和30毫升二氯甲烷。该混合物加热直 到溶解为止，然后冷却。在20℃加入540毫克5-[4-(乙氧基羰基甲 基哌嗪-1-基)]-5-氧代戊酸在10毫升二氯甲烷中的溶液、23毫克4- 二甲基氨基吡啶、然后390毫克N，N’-二环己基碳化二亚胺。在20℃ 搅拌18小时后，加入54毫克5-[4-(乙氧基羰基甲基哌嗪-1-基)]-5- 氧代戊酸、39毫克N，N’-二环己基碳化二亚胺和2.3毫克4-二甲基氨 基吡啶。该反应在20℃搅拌2天，然后过滤反应混合物，用二氯甲烷 洗涤，再在在减压(2.7千帕)下浓缩至于。得到的固体在40毫升乙醚 中搅拌20小时，过滤，在20℃(90帕)下干燥，然后用闪式色谱法纯 化[洗脱剂：二氯甲烷-甲醇(以体积计，98/2)]。于是得到一种产物， 它在乙醚中搅拌，过滤，在20℃(90帕)下干燥，得到640毫克 (16R)-16-脱氧-14-O-[4-(4-乙氧基羰基甲基哌嗪-1-基羰基)丁酰基] -16-氟-原始霉素IIB，呈白色粉末状。

往溶于7毫升甲基乙基酮的这种固体中加入0.35毫升3M氯乙烷。 得到的沉淀用3号烧结玻璃过滤，每次用10毫升甲基乙基酮洗涤3次， 然后每次用15毫升乙醚洗涤3次。在20℃(90帕)下干燥后，得到450 毫克(16R)-16-脱氧-14-O-[4-(4-乙氧基羰基甲基哌嗪-1-基羰基)丁 酰基]-16-氟原始霉素IIB盐酸盐，呈白色固体状，在156℃熔化。

1H NMR谱(400MHz，(CD3)2SO d6，δ，以ppm计)：0.88(d，J＝ 6.5Hz：3H)；0.96(d，J＝6.5Hz：3H)；1.06(d，J＝6.5Hz：3H)； 1.27(t，J＝7Hz：3H)；1.57(mt：1H)；1.70-2.35(mt：8H)；1.79 (s：3H)；2.37(mt：4H)；2.78(mt：1H)；2.90-3.50(mt：12H)；3.65 (mt：1H)；3.72(mt：1H)；3.81(mt：1H)；3.95(mt：1H)；4.23(q， J＝7Hz：2H)；4.70-4.80(mt：2H)；5.10(减速的双重线，JHF＝48 Hz：1H)；5.42(d，J＝9Hz：1H)；5.66(mt：1H)；5.76(mt：1H)； 5.82(dd，J＝16和1.5Hz：1H)；6.19(d，J＝16Hz：1H)；6.63(dd，J ＝16和4Hz：1H)；8.03(t，J＝6Hz：1H)；8.48(s：1H)。

按照下述方式可以制备5-[4-(乙氧基羰基甲基哌嗪-1-基)]-5- 氧代戊酸：

在保持在氩气氛下的圆底烧瓶中，往10毫升二烷中加入1.5克 戊二酸酐，然后加入2.26克N-乙氧基羰基甲基哌嗪在5毫升二烷 中的溶液。在室温下搅拌2小时后，在减压下蒸去溶剂，得到3.66克 5-[4-(乙氧基羰基甲基哌嗪-1-基)]-5-氧代戊酸，呈可直接使用的橙 色油状。

实施例50

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{4-[4-(吡咯烷-1-基羰基甲基)哌 嗪-1-基羰基]丁酰基}-原始霉素IIB

如实施例46操作，使用1.75克5-氧代-5-[4-(2-氧代-2-吡咯烷 -1-基乙基)哌嗪-1-基]戊酸、2.5克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素 IIB(如实施例1所述制备)、1.16克N，N’-二环己基碳化二亚胺和113 毫克4-二甲基氨基吡啶在100毫升二氯甲烷中的溶液为原料。在20 ℃搅拌4小时后，在按照实施例46类似处理之后，得到一种固体，它 用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷-甲醇(以体积计，95/5)]。在 20℃减压(2.7千帕)下浓缩各馏分至于，然后在乙醚中搅拌所得到的 固体18小时，过滤，再在20℃(90帕)下干燥后得到2.46克(16R)-16- 脱氧-16-氟-14-O-{4-[4-(吡咯烷-1-基羰基甲基)哌嗪-1-基羰基]丁 酰基}原始霉素IIB，呈微黄色粉末状，在135℃熔化。

1H NMR谱(500MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.65-2.05 (mt：11H)；1.89(s：3H)；2.10-2.30(mt：2H)；2.37(mt：4H)；2.54 (t，J＝5Hz：2H)；2.57(t，J＝5Hz：2H)；2.76(mt：1H)；2.99(dt，J ＝17和6Hz；1H)；3.14(s：2H)；3.23(mt：1H)；3.48(mt：7H)； 3.66(t，J＝5Hz：2H)；3.86(mt：1H)；4.06(mt：1H)；4.53(mt： 1H)；4.79(dd，J＝10和2Hz：1H)；4.82(dd，J＝9和3Hz：1H)； 5.10(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.30(d，J＝9Hz： 1H)；5.70-5.85(mt：3H)；6.06(mt：1H)；6.18(d，J＝16Hz：1H)； 6.52(dd，J＝16.5和5Hz：1H)；8.12(s：1H)。

按照下述方式可以制备5-氧代-5-[4-(2-氧代-2-吡咯烷-1-基乙 基)哌嗪-1-基]戊酸：

往10毫升无水二烷中加入1.52克戊二酸酐，然后加入2.62 克吡咯烷基羰基甲基哌嗪。在搅拌4小时后，生成的沉淀用10毫升二 烷稀释，然后搅拌1小时。用4号烧结玻璃过滤不溶物，用乙醚洗 涤多次，然后在20℃(90帕)下干燥，得到3.36克5-氧代-5-[4-(2- 氧代-2-吡咯烷-1-基乙基)哌嗪-1-基]戊酸，呈白色固体状。

实施例51

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(顺-3，5-二甲基哌嗪-1-基羰基) 丁酰基]原始霉素IIB盐酸盐

往680毫克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(顺-3，5-二甲基哌嗪 -1-基羰基)丁酰基]原始霉素IIB在12毫升甲基异丁基酮和其数量足 以用于趁热溶解该化合物的乙醇中的溶液，在20℃加入0.58毫升3M 氯乙烷。该混合物在20℃减压(2.7千帕)下浓缩至于，得到的固体在 10毫升乙醚中搅拌1.5小时。用4号烧结玻璃过滤固体，然后在20 ℃(90帕)下干燥，得到650毫克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(顺 -3，5-二甲基哌嗪-1-基羰基)丁酰基]原始霉素IIB盐酸盐，呈白色固 体状，在205℃熔化。

1H NMR谱(600MHz，(CD3)2SO d6，δ，以ppm计)：0.87(mt：3H)； 0.95(d，J＝6.5Hz：3H)；1.05(d，J＝6.5Hz：3H)；1.27(d，J＝6.5 Hz：6H)；1.53(mt：1H)；1.65-1.85(mt：3H)；1.78(s： 3H)；1.85-2.00(mt：3H)；2.11(mt：1H)；2.21(mt：1H)；2.25-2.50 (mt：5H)；2.61(mt：1H)；2.78(mt：1H)；3.05-3.30(mt：4H)；3.61 (宽d，J＝15Hz：1H)；3.69(mt：1H)；3.82(mt：1H)；3.90-4.05 (mt：2H)；4.50(宽d，J＝13.5 Hz：1H)；4.70-4.80(mt：2H)；5.11 (减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.44(d，J＝9Hz：1H)；5.62(mt： 1H)；5.75(mt：1H)；5.81(宽d，J＝15.5Hz：1H)；6.20(d，J＝15 Hz：1H)；6.63(dd，J＝15.5和4Hz：1H)；8.17(t，J＝6Hz：1H)； 8.52(s：1H)；9.14(mt：1H)；9.56(mt：1H)。

按照下述方式可以制备(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(3，5-二 甲基哌嗪-1-基氨基甲酰基)丁酰基]原始霉素IIB

如实施例45操作，但是使用470毫克5-(3，5-二甲基哌嗪-1- 基)-5-氧代-戊酸、1克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施例1 所述制备)、430毫克N，N’-二环己基碳化二亚胺和23毫克4-二甲基 氨基吡啶在40毫升二氯甲烷和5毫升二甲基甲酰胺混合物中的溶液为 原料，在搅拌60小时后，分离出2.5克褐色油，它用闪式色谱法纯化 [洗脱剂：二氯甲烷-甲醇(以体积计，97/3)]。在20℃减压(2.7千帕) 下浓缩至干，然后在10毫升乙醚中搅拌所得到的固体，过滤，再在 50℃(90帕)下干燥后，于是得到680毫克(16R)-16-脱氧-16-氟 -14-O-[4-(3，5-二甲基哌嗪-1-基羰基)丁酰基]原始霉素IIB，呈白色 固体状。

按照下述方式可以制备5-(3，5-二甲基哌嗪-1-基)-5-氧代-戊 酸：

在氩气氛下往30毫升二烷和5毫升二氯甲烷混合物中加入1.5 克2，6-二甲基哌嗪。在搅拌后，过滤残留的不溶物，将滤液放入三口 瓶中。滴加1.5克戊二酸酐在10毫升二烷中的溶液，然后在25℃ 继续搅拌2小时。在减压(2.7千帕)下蒸去溶剂，得到的固体用100 毫升乙醚溶解，过滤，用乙醚洗涤，在20℃(90帕)下干燥，得到2.19 克5-(3，5-二甲基哌嗪-1-基)-5-氧代-戊酸，呈可直接使用的白色固 体状。

实施例52

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{4-[4-(甲基苯基氨基甲酰基甲基) 哌嗪-1-基羰基]丁酰基}-原始霉素IIB盐酸盐

往470毫克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{4-[4-(甲基苯基氨基甲 酰基甲基)哌嗪-1-基羰基]丁酰基}-原始霉素IIB在5毫升甲基异丁基 酮中的溶液，在4℃加入0.3毫升3M氯乙烷。在搅拌一小时后，生成 的沉淀用4号烧结玻璃过滤，然后相继地用少量甲基异丁基酮和乙醚 洗涤。得到的固体在20℃(90帕)下干燥，得到463毫克(16R)-16-脱 氧-16-氟-14-O-{4-[4-(甲基苯基氨基甲酰基甲基)哌嗪-1-基羰基] 丁酰基}原始霉素IIB盐酸盐，呈白色固体状，约155℃熔化。

1H NMR谱(500MHz，(CD3)2SO d6，δ，以ppm计)：0.87(mt：3H)； 0.95(d，J＝6.5Hz：3H)；1.05(d，J＝6.5Hz：3H)；10.53(mt： 1H)；1.65-1.85(mt：3H)；1.77(s：3H)；1.85-2.05(mt：3H)；2.11 (mt：1H)；2.19(mt：1H)；2.34(mt：4H)；2.78(mt：1H)；2.85-3.55 和3.80-4.05(mt：全部11H)；3.26(s：3H)；3.60(宽d，J＝15Hz： 1H)；3.69(mt：1H)；3.81(mt：1H)；3.95(mt：1H)；4.25-4.60(mf： 1H)；4.70-4.80(mt：2H)；5.09(减速的双重线JHF＝48Hz：1H)；5.42 (d，J＝9.5Hz；1H)；5.62(mt：1H)；5.74(mt：1H)；5.81(dd，J ＝16和2Hz：1H)；6.19(d，J＝15.5Hz：1H)：6.63(dd，J＝16 和4Hz：1H)；7.25-7.60(mt：5H)；8.14(mt：1H)；8.52(s：1H)； 10.13(展宽的mf)。

按照下述方式可以制备(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{4-[4-(甲 基苯基氨基甲酰基甲基)哌嗪-1-基羰基]丁酰基}原始霉素IIB：

如实施例45操作，但是使用653毫克5-[4-(甲基苯基氨基甲酰 基甲基)哌嗪-1-基]-5-氧代-戊酸、1克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉 素IIB(如实施例1所述制备)、388毫克N，N’-二环己基碳化二亚胺在 10毫升二氯甲烷中的溶液为原料，在3小时内滴加23毫克4-二甲基 氨基吡啶在50毫升二氯甲烷中的溶液，在搅拌22小时后，得到1.49 克固体，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷-甲醇(以体积计， 97/3)]。在20℃减压(2.7千帕)将各馏分浓缩至于，然后在乙醚中 搅拌所得到的固体，过滤，再在50℃(90帕)下干燥后，于是得到470 毫克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{4-[4-(甲基苯基氨基甲酰基甲基) 哌嗪-1-基羰基]丁酰基}原始霉素IIB，呈白色固体状。

按照下述方式可以制备5-[4-(甲基苯基氨基甲酰基甲基)哌嗪 -1-基]-5-氧代-戊酸：

往15毫升二烷中加入1.517克戊二酸酐，然后加入1.715克 N-[2-(哌嗪-1-基)乙酰基]-N-甲基苯胺。在25℃搅拌19小时后，生 成的白色沉淀用4号烧结玻璃过滤，然后用二烷洗涤，再用乙醚洗 涤，在20℃(90帕)下干燥，得到2克5-[4-(甲基苯基氨基甲酰基甲 基)哌嗪-1-基]-5-氧代-戊酸，呈可直接使用的白色固体状。

实施例53

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{4-[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1- 基羰基]丁酰基}原始霉素IIB盐酸盐

在置于氮气下的圆底烧瓶中，加入1克(16R)-16-脱氧-16-氟原始 霉素IIB(如实施例1所述制备)和40毫升二氯甲烷。加热混合物直到 溶解为止，然后冷却。在20℃加入485毫克5-[4-(2-甲氧基乙基)哌 嗪-1-基]-5-氧代戊酸，然后加入45毫克4-二甲基氨基吡啶。然后在 3小时内滴加388毫克N，N’-二环己基碳化二亚胺在10毫升二氯甲烷 中的溶液。在20℃搅拌18小时后，再加入48毫克5-[4-(2-甲氧基乙 基)哌嗪-1-基1-5-氧代戊酸和38毫克N，N’-二环己基碳化二亚胺在5 毫升二氯甲烷中的溶液。该反应在20℃搅拌3小时，然后过滤反应混 合物，用醋酸乙酯洗涤，滤液再在减压(2.7千帕)下浓缩至干。得到 的残留物在40毫升醋酸乙酯中搅拌0.5小时，然后过滤。不溶物用醋 酸乙酯洗涤。合并滤液，然后用10毫升饱和氯化钠水溶液洗涤，用硫 酸镁干燥，过滤和在减压(2.7千帕)下浓缩至于。得到的固体首先在 40毫升异丙醚中搅拌18小时，然后过滤，重新在40毫升异丙醚和10 毫升乙醚混合物中搅拌。过滤得到的固体，然后用闪式色谱法纯化[洗 脱剂：二氯甲烷-甲醇(以体积计，97/3)]。这样得到一种产物，它在 40毫升异丙醚中搅拌，过滤，然后在30℃(90帕)下干燥，得到815 毫克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{4-[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基 羰基]丁酰基}原始霉素IIB，呈白色粉末状。

往溶于4毫升无水乙醇的这种固体中加入0.35毫升3M氯乙烷， 然后缓慢加入20毫升乙醚。在减压下蒸去溶剂，得到的固体在20毫 升乙醚中搅拌。在过滤与在20℃(90帕)下干燥后，得到800毫克 (16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{4-[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基羰基] 丁酰基}原始霉素IIB盐酸盐，呈白色固体状，在170℃熔化。

1H NMR谱(400MHz，(CD3)2SO d6，δ，以ppm计)：0.86(d，J＝6.5 Hz：3H)；0.95(d，J＝6.5Hz：3H)；1.04(d，J＝6.5Hz：3H)；1.52 (mt：1H)；1.65-2.05(mt：6H)；1.77(s：3H)；2.05-2.30(mt：2H)； 2.37(mt：4H)；2.78(mt：1H)；2.85-3.55(mt：13H)；3.59(mt： 1H)；3.65-3.75(mt：3H)；3.81(mt：1H)；3.90-4.10(mt：2H)；4.42 (宽d，J＝13Hz：1H)；4.70-4.80(mt：2H)；5.10(减速的双重线，JHF＝ 48Hz：1H)；5.43(d，J＝9Hz：1H)；5.61(mt：1H)；5.74(mt：1H)； 5.81(dd，J＝16和1.5Hz：1H)；6.20(d，J＝16Hz：1H)；6.64(dd，J ＝16和4Hz：1H)；8.18(t，J＝6Hz：1H)；8.52(s：1H)；10.46 (宽mf：1H)。

按照下述方式可以制备5-[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基]-5-氧 代戊酸：

往13毫升二烷中加入1.52克戊二酸酐，然后加入1.92克1-(2- 甲氧基乙基)哌嗪在3毫升二烷中的溶液。在室温下搅拌5小时后， 加入300毫克补充的戊二酸酐，然后在20℃继续搅拌18小时。在减 压下蒸去溶剂，得到的油在20℃(90帕)下干燥，得到3.4克5-[4-(2- 甲氧基乙基)哌嗪-1-基]-5-氧代戊酸，呈可直接使用的橙色漆状。

实施例54

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(4-丙基哌嗪-1-基羰基)丁酰基] 原始霉素IIB盐酸盐

如实施例46操作，使用0.5克5-氧代-5-(4-丙基哌嗪-1-基)戊 酸、1克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施例1所述制备)、 430毫克N，N’-二环己基碳化二亚胺和23毫克4-二甲基氨基吡啶在50 毫升二氯甲烷中的溶液为原料。在20℃搅拌4小时后，在过滤和在20 ℃减压(2.7千帕)下蒸除溶剂至干后，得到一种固体，它用闪式色谱 法纯化[洗脱剂：二氯甲烷-甲醇(以体积计，97/3)]。这些馏分在20 ℃减压(2.7千帕)下浓缩至干，然后在乙醚中搅拌所得到的固体，过 滤，再在20℃(90帕)下干燥后得到960毫克(16R)-16-脱氧-16-氟 -14-O-[4-(4-丙基哌嗪-1-基羰基)丁酰基]原始霉素IIB，呈白色粉末 状。

往溶于10毫升甲乙酮的这种固体中加入0.75毫升3M氯乙烷。得 到的沉淀用3号烧结玻璃过滤，然后每次用10毫升甲乙酮洗涤2次， 再每次用15毫升乙醚洗涤2次。在过滤与在20℃(90帕)下干燥后， 得到700毫克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(4-丙基哌嗪-1-基羰基) 丁酰基]原始霉素IIB盐酸盐，呈白色固体状，在145℃熔化。

1H NMR谱(400MHz，(CD3)2SO d6，δ，以ppm计)：0.86(d，J＝ 6.5Hz：3H)；0.90-1.00(mt：6H)；1.04(d，J＝6.5Hz：3H)；1.54 (mt：1H)；1.60-2.25(mt：10H)；1.78(s：3H)；2.30-2.45(mt：4H)； 2.76(mt：1H)；2.80-3.10(mt：6H)；3.21(mt：1H)；3.40-3.55(mt： 3H)；3.60(mt：1H)；3.68(mt：1H)；3.82(mt：1H)；3.90-4.10(mt： 2H)；4.45(宽d，J＝14Hz：1H)；4.70-4.80(mt：2H)；5.09(减速 的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.41(d，J＝9Hz：1H)；5.61(mt： 1H)；5.74(mt：1H)；5.80(宽d，J＝16Hz：1H)；6.19(d，J＝15.5 Hz：1H)；6.62(dd，J＝16和4Hz：1H)；8.14(宽t，J＝5.5Hz：1H)； 8.48(s：1H)；10.41(宽mf：1H)。

按照下述方式可以制备5-氧代-5-(4-丙基哌嗪-1-基)戊酸：

在保持在氩气氛下的圆底烧瓶中，往10毫升二烷中加入1.5克 戊二酸酐，然后加入1.66克N-丙基哌嗪在5毫升二烷中的溶液。 在室温下搅拌2.5小时后，在减压下蒸去溶剂，然后在得到的油中加 入100毫升乙醚。在搅拌一小时后，过滤得到的固体，在20℃(90帕) 下干燥，得到2.47克5-氧代-5-(4-丙基哌嗪-1-基)戊酸，呈可直接 使用的白色固体状。

实施例55

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{4-[4-(3-咪唑-1-基丙基)哌嗪-1- 基羰基]丁酰基}原始霉素IIB

在置于氮气下的圆底烧瓶中，加入1.42克(16R)-14-O-{4-[4-(3- 氯丙基)哌嗪-1-基羰基]丁酰基}-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB、6毫升 二甲基甲酰胺、0.24克咪唑和10毫克碘化钠。混合物在75℃加热5 小时，然后在20℃搅拌60小时。这时在20℃再加入0.12克补充咪唑 在2毫升DMF中的溶液，在75℃继续搅拌4小时，然后在20℃搅拌 18小时。这时得到的混合物在减压(2.7千帕)下浓缩至干。得到的固 体用50毫升二氯甲烷溶解，得到的溶液每次用40毫升蒸馏水洗涤两 次。倾析有机相，用硫酸镁干燥，过滤，然后在减压下浓缩至干，得 到1.14克固体，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷-甲醇梯度(以 体积计，95/5，然后90/10)]。这样得到的固体在乙醚中搅拌40小时， 过滤，然后在20℃(90帕)下干燥，得到290毫克(16R)-16-脱氧-16- 氟-14-O-{4-[4-(3-咪唑-1-基丙基)哌嗪-1-基羰基]丁酰基}原始霉 素IIB，呈碎白色固体状，在122℃熔化。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.09(d，J＝6.5Hz：3H)；1.45-2.05 (mt：9H)；1.88(s：3H)；2.10-2.30(mt：2H)；2.29(t，J＝7Hz： 2H)；2.37(mt：8H)；2.76(mt：1H)；2.99(mt：1H)；3.23(mt： 1H)；3.40-3.55(mt：3H)；3.62(mt：2H)；3.86(mt：1H)；4.00-4.10 (mt：1H)；4.05(t，J＝7Hz：2H)；4.53(mt：1H)；4.78(dd，J＝10 和2Hz：1H)；4.82(dd，J＝9和3Hz：1H)；5.12(减速的双重线， JHF＝48Hz：1H)；5.31(d，J＝9Hz：1H)；5.75(mt：1H)；5.75-5.85 (mt：1H)；5.82(dd，J＝16和2Hz：1H)；6.00(mt：1H)；6.19(d，J ＝16Hz：1H)；6.52(dd，J＝16和5Hz：1H)；6.93(mf：1H)；7.08 (宽s：1H)；7.50(宽s：1H)；8.12(s：1H)。

按照下述方式可以制备(16R)-14-O-{4-[4-(3-氯丙基)哌嗪-1- 基羰基]丁酰基}-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB，如实施例46操作，但 是使用0.94克5-[4-(3-氯丙基)哌嗪-1-基]-5-氧代戊酸、1.5克 (16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施例1所述制备)、460毫克 N，N’-二环己基碳化二亚胺和23毫克4-二甲基氨基吡啶在40毫升二 氯甲烷中的溶液为原料。在20℃搅拌23小时后，得到悬浮液，过滤 后，滤液在20℃减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到固体，它在异丙醚 中搅拌，过滤，然后溶于50毫升二氯甲烷中。得到的溶液用30毫升 蒸馏水洗涤，倾析，再用硫酸镁干燥，过滤，在20℃减压(2.7千帕) 下浓缩至干，得到1.42克(16R)-14-O-{4-[4-(3-氯丙基)哌嗪-1-基 羰基]丁酰基}-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB，呈可直接使用的黄色固体 状。

按照下述方式可以制备5-[4-(3-氯丙基)哌嗪-1-基]-5-氧代戊 酸：

在保持在氩气氛下的圆底烧瓶中，往15毫升二烷中加入1.5克 戊二酸酐，然后加入2.13克N-(氯丙基)哌嗪在5毫升二烷和1毫 升二氯甲烷中的溶液。在20℃搅拌2小时后，在20℃减压(2.7千帕) 下蒸去溶剂，得到3.75克5-[4-(3-氯丙基)哌嗪-1-基]-5-氧代戊酸， 呈可直接使用的黄色油状。

实施例56

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(2-吗啉代乙氧基羰基)丁酰基] 原始霉素IIB盐酸盐

往550毫克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(2-吗啉代乙氧基羰 基)丁酰基]原始霉素IIB在5.5毫升甲基异丁基酮中的溶液，在4℃加 入0.42毫升3M氯乙烷。在搅拌一小时后，生成的沉淀用4号烧结玻 璃过滤，相继地用甲基异丁基酮和乙醚洗涤，然后在20℃(90帕)下干 燥，得到458毫克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(2-吗啉代乙氧基 羰基)丁酰基]原始霉素IIB盐酸盐，呈白色固体状，在168℃熔化。

1H NMR谱(500MHz，(CD3)2SO d6，δ，以ppm计)：0.85(mt：3H)； 0.94(d，J＝6.5Hz：3H)；1.03(d，J＝6.5Hz：3H)；1.50(mt： 1H)；1.70-1.85(mt：3H)；1.77(s：3H)；1.85-2.05(mt：3H)；2.09 (mt：1H)；2.19(mt：1H)；2.38(mt：2H)；2.42(t，J＝7Hz：2H)； 2.77(mt：1H)；3.10-3.50(mt：8H)；3.58(宽d，J＝15Hz：1H)； 3.68(mt：1H)；3.70-3.85(mt：3H)；3.90-4.00(mt：3H)；4.39(mt： 2H)；4.70-4.80(mt：2H)；5.09(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.42 (d，J＝9Hz：1H)；5.60(mt：1H)；5.74(mt：1H)；5.80(宽d，J ＝16Hz：1H)；6.19(d，J＝16Hz：1H)；6.62(dd，J＝16和4Hz： 1H)；8.17(mt：1H)；8.52(s：1H)；10.50(展宽的mf：1H)。

按照下述方式可以制备(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(2-吗啉 代乙氧基羰基)丁酰基]原始霉素IIB：

如实施例45操作，但是使用461毫克戊二酸(2-吗啉代乙基)单酯、 1克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施例1所述制备)、388 毫克N，N’-二环己基碳化二亚胺、23毫克4-二甲基氨基吡啶在40毫 升二氯甲烷中的溶液为原料，在搅拌22小时后，得到1.33克固体， 它相继用闪式色谱法纯化两次[洗脱剂分别为二氯甲烷/甲醇(以体积 计，97/3)和二氯甲烷/甲醇(以体积计，98/2)]。这些馏分在减压(2.7 千帕)下浓缩至干后，在乙醚中搅拌所得到的固体，过滤，再在20℃ (90帕)下干燥后，得到550毫克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(2- 吗啉代乙氧基羰基)丁酰基]原始霉素IIB，呈白色固体状。

按照下述方式可以制备戊二酸(2-吗啉代乙基)单酯：

往10毫升二烷中加入1.517克戊二酸酐，然后加入1.61毫升 N-2-羟基乙基吗啉。在25℃搅拌19小时后，在减压(2.7千帕)下蒸去 溶剂，得到的产物在55℃(90帕)下干燥，得到3.18克戊二酸(2-吗啉 -4-基乙基)单酯，呈可直接使用的褐色油状。

实施例57

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{4-[4-(2-吗啉代乙基)哌嗪-1-基 羰基]丁酰基}原始霉素IIB

如实施例46操作，但是使用0.7克5-[4-(2-吗啉代乙氧基哌嗪 -1-基)]5-氧代-戊酸、1克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施 例1所述制备)、460毫克N，N’-二环己基碳化二亚胺和23毫克4-二 甲基氨基吡啶在40毫升二氯甲烷中的溶液为原料。在20℃搅拌4小 时后得到悬浮液，过滤悬浮液。滤液在20℃减压(2.7千帕)下浓缩至 干后，得到一种浅褐色粉末，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷 -甲醇(以体积计，96/4)]。这些馏分在20℃减压(2.7千帕)下浓缩至 干，然后在异丙醚中搅拌所得到的固体36小时，过滤，再在20℃(90 帕)下干燥后，得到750毫克固体。这种固体再在20毫升异丙醚和10 毫升乙醚混合物中搅拌60小时。在过滤和在20℃(90帕)下干燥后， 得到的固体在60毫升异丙醚中在60℃搅拌1.5小时，然后过滤与在 20℃(90帕)下干燥，得到0.55克(16R)-16-脱氧-16-氟 -14-O-{4-[4-(2-吗啉代乙基)哌嗪-1-基羰基]丁酰基}原始霉素IIB， 呈浅黄色粉末状，在116℃熔化。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)；0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.55-2.05 (mt：7H)；1.89(s：3H)；2.10-2.30(mt：2H)；2.38(mt： 4H)；2.40-2.60(mt：12H)；2.76(mt：1H)；2.98(mt：1H)；3.23(mt： 1H)；3.40-3.55(mt：3H)；3.61(mt：2H)；3.72(t，J＝5Hz：4H)； 3.86(mt：1H)；4.06(mt：1H)；4.54(mt：1H)；4.79(dd，J＝10 和1.5Hz：1H)；4.82(dd，J＝9和3Hz：1H)；5.12(减速的双重 线，JHF＝48Hz：1H)；5.30(d，J＝9Hz：1H)；5.75(mt： 1H)；5.75-5.85(mt：1H)；5.82(dd，J＝17和1.5Hz：1H)；5.96(mt： 1H)；6.19(d，J＝16Hz：1H)；6.51(dd，J＝17和5Hz：1H)；8.12 (s：1H)。

按照下述方式可以制备5-[4-(2-吗啉代乙氧基哌嗪-1-基)]-5- 氧代戊酸：

在保持在氩气氛下的圆底烧瓶中，往10毫升二烷中加入1.5克 戊二酸酐，然后加入2.62克1-(2-吗啉代乙基)哌嗪在10毫升二烷 中的溶液。在室温下搅拌60小时后，在减压下蒸去溶剂。在得到的油 中加入100毫升乙醚。在冷却到-40℃后，产物凝固。这时在20℃继 续搅拌1小时。过滤得到的固体，用乙醚洗涤，然后在20℃(90帕) 下干燥，得到3.57克5-[4-(2-吗啉代乙氧基哌嗪-1-基)]-5-氧代戊 酸，呈可直接使用的白色固体状。

实施例58

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[(3RS)-3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1- 基羰基)丁酰基]原始霉素IIB盐酸盐

如实施例46操作，但是使用516毫克3-甲基-5-(4-甲基哌嗪-1- 基)-5-氧代戊酸、1克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施例1 所述制备)、467毫克N，N’-二环己基碳化二亚胺和54毫克4-二甲基 氨基吡啶在40毫升二氯甲烷中的溶液为原料，得到1.25克固体，它 用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇(以体积计，95/5)]。这些 馏分在20℃减压(2.7千帕)下浓缩至干，然后在异丙醚中搅拌所得到 的固体达18小时，过滤，再在20℃(90帕)下干燥后。得到730毫克 (16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[(3RS)-3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基羰 基)丁酰基]原始霉素IIB，呈白色固体状。这种固体溶于3.5毫升无水 乙醇中，其中添加了0.34毫升3M氯乙烷。然后加入35毫升乙醚，得 到的悬浮液在20℃搅拌2小时。固体经过滤，用乙醚洗涤，然后在45 ℃(90帕)下干燥，得到645毫克(16R)-16-脱氧-16-氟 -14-O-[(3RS)-3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)丁酰基]原始霉素 IIB盐酸盐，呈白色固体状，在185℃熔化。

1H NMR谱(400MHz，(CD3)2SO d6，δ，以ppm计)：0.85(d，J＝6.5 Hz：3H)；0.90-1.00(mt：6H)；1.03(d，J＝6.5Hz：3H)；1.51(mt： 1H)；1.70-2.45(mt：11H)；1.77(s：3H)；2.70-3.50(mt：9H)；2.77 (宽s：3H)；3.59(mt：1H)；3.68(mt：1H)；3.80(mt：1H)；3.90-4.20 (展宽的mf：1H)；3.97(mt：1H)；4.44(展宽的mf：1H)；4.70-4.80 (mt：2H)；5.09(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.43(d，J＝9Hz： 1H)；5.61(mt：1H)；5.75(mt：1H)；5.80(宽d，J＝16Hz：1H)； 6.19(d，J＝16Hz：1H)；6.62(dd，J＝16和4Hz：1H)；8.17(t，J ＝5.5Hz：1H)；8.52(s：1H)；10.49(宽mf：1H)。

按照下述方式可以制备(3RS)-3-甲基-5-(4-甲基哌嗪-1-基)-5- 氧代-戊酸：

往20毫升二烷中加入1.6克3-甲基戊二酸酐，然后加入1.48 毫升N-甲基哌嗪。在搅拌4小时后，再加入320毫克3-甲基戊二酸酐。 在20℃继续搅拌18小时。在50℃减压(2.7千帕)下蒸去溶剂。得到 的油在50℃(90帕)下干燥，得到3.1克(3RS)-3-甲基-5-(4-甲基哌嗪 -1-基)-5-氧代-戊酸，呈可直接使用的黄色漆状。

实施例59

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[(RR，SS)-反-2-(4-甲基哌嗪-1-基 羰基)-1-环丁烷羰基]原始霉素IIB(两种非对映异构体的50/50混合 物)

往2.1克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施例1所述制 备)在100毫升二氯甲烷中的溶液，在20℃氩气氛下加入2.0克 (RR，SS)-反-2-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)-1-环丁烷羧酸、1.24克N，N’- 二环己基碳化二亚胺和0.49克4-二甲基氨基吡啶。在搅拌24小时后， 过滤反应混合物以除去不溶物。滤液在减压(2.7千帕)下浓缩至干， 得到5.2克残留物，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇梯 度(以体积计，97/3，然后95/5)]。在异丙醚中搅拌后，得到0.26克 (16R)-16-脱氧-16-氟-14-0-[(RR，SS)-反-2-(4-甲基哌嗪-1-基羰 基)-1-环丁烷羰基]原始霉素IIB(两种非对映异构体50/50混合物)， 呈微白色粉末状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)；(两种非对映异构体 混合物，比例50/50)：0.96(d，J＝6.5Hz：3H)；1.00(d，J＝6.5 Hz：3H)；1.11(d，J＝6.5Hz：3H)；1.55-2.45(mt：15H)；1.90(s： 3H)；2.29和2.30(2s：全部3H)；2.77(mt：1H)；2.98(dt，J＝17 和6Hz；1H)；3.23(mt：1H)；3.30-3.75(mt：7H)；3.86(mt：1H)； 4.06(mt：1H)；4.55(mt：1H)；4.75-4.85(mt：2H)；5.11(减速的 双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.30(d，J＝9Hz：1H)；5.70-5.85(mt：3H)； 5.96和6.02(2mts：全部1H)；6.20(d，J＝16Hz：1H)；6.52(mt： 1H)；8.12(s：1H)。

按照下述方式可以制备(RR，SS)-反-2-(4-甲基哌嗪-1-基羰 基)-1-环丁烷羧酸：

往1.8克(RR，SS)-反-1，2-环丁烷二羧酸二盐酸盐在50毫升二氯 甲烷中的溶液，在25℃氩气氛下滴加1.1毫升1-甲基哌嗪。在搅拌4 小时后，加入10毫升蒸馏水。在搅拌1小时后，反应混合物在减压(2.7 千帕)下浓缩至干，得到的残留物用20毫升蒸馏水溶解。通过加入1N 氢氧化钠水溶液将这种溶液的pH调节到10。得到的溶液用50毫升醋 酸乙酯提取，通过加入1N盐酸水溶液将其pH调节到5-6，然后在减 压(2.7千帕)下浓缩至干。分两次用50毫升甲苯回收残留物，再在减 压(2.7千帕)下浓缩至干。残留物在50℃用50毫升乙醇溶解，滤除不 溶物，滤液在减压(2.7千帕)下浓缩至干。这样得到2.4克(RR，SS)- 反-2-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)-1-环丁烷羧酸，呈黄色油状。

按照下述方式可以制备(RR，SS)-反-1，2-环丁烷二羧酸二盐酸盐：

往1.5克(RR，SS)-反-1，2-环丁烷二羧酸，在20℃加入2.2毫升 磺酰氯，然后加热回流2小时。然后，在减压(2.7千帕)下浓缩反应 混合物。分两次用50毫升二氯甲烷回收残留物，再在减压(2.7千帕) 下浓缩至干。这样得到1.8克(RR，SS)-反-1，2-环丁烷二羧酸二盐酸 盐，呈黄色油状。

实施例60

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-(1-甲基哌啶-4-基羰基)原始霉素 IIA甲磺酸盐

往1.06克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIA(如实施例8所述制 备)、0.23克1-甲基-4-哌啶羧酸、0.123克4-二甲基氨基吡啶在40 毫升二氯甲烷中的溶液，在20℃加入0.516克N，N’-二环己基碳化二 亚胺。在搅拌24小时后，反应混合物用50毫升水洗涤，用硫酸镁干 燥，过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到残留物，它用闪 式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇(以体积计，95/5)]。得到的产 物用35毫升乙醇和13.4毫升0.1N甲磺酸水溶液溶解，然后在减压 (2.7千帕)下浓缩至干，在乙醚中搅拌，过滤，浓缩得到残留物，它 在25毫升二氯甲烷和10毫升5％碳酸氢钠水溶液中搅拌。分离有机 相后，在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到的残留物用20毫升乙醇和 10毫升0.1N甲磺酸水溶液溶解。该溶液在20℃减压(2.7千帕)下浓 缩至干后，得到0.65克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-(1-甲基哌啶-4- 基羰基)原始霉素IIB甲磺酸盐，呈奶油固体状。

1H NMR谱(400MHz，(CD3)2SO d6，在温度383K，δ，以ppm计)： 0.93(d，J＝6.5Hz：3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.13(d，J＝ 6.5Hz：3H)；1.75-2.30(mt：7H)；1.84(s：3H)；2.40(s： 3H)；2.55-2.85(mt：4H)；2.81(s：3H)；2.90-3.55(mt：6H)；3.79 (宽d，J＝16.5Hz：1H)；3.94(dt，J＝16.5和6.5Hz：1H)；4.05-4.25 (mt：2H)；4.81(dd，J＝9和3Hz：1H)；4.99(减速的双重线，JHF＝ 48Hz：1H)；5.33(d，J＝9.5Hz：1H)；5.75(dt，J＝9.5和5Hz： 1H)；5.81(mt：1H)；5.92(dd，J＝16和1.5Hz：1H)；6.10(d，J＝ 16Hz：1H)；6.28(t，J＝3Hz：1H)；6.63(dd，J＝16和6.5Hz：1H)； 7.43(mf：1H)；8.45(s：1H)；8.85-9.45(非常展宽的mf：1H)。

按照下述方式可以制备1-甲基-4-哌啶羧酸：

往7.60克1-甲基-4-哌啶羧酸乙酯在35毫升乙醇中的溶液，在 20℃加入12.5毫升4N氢氧化钠水溶液。在搅拌20小时后，浓缩反应 混合物减少体积，然后用12.5毫升4N盐酸水溶液中和，最后在减压 (2.7千帕)下浓缩至干。残留物在60毫升无水乙醇中搅拌，然后过滤。 滤液在20℃减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到6.3克1-甲基-4-哌啶 羧酸，呈白色固体状。

1H NMR谱(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，以ppm计)：1.56(mt：2H)； 1.78(mt：2H)；1.98(dt，J＝11.5和2.5Hz：2H)；2.13(mt：1H)； 2.18(s：3H)；2.74(宽d，J＝11.5Hz：2H)。

按照下述方式可以制备1-甲基-4-哌啶羧酸乙酯：

往9.2克4-哌啶羧酸乙酯盐酸盐在80毫升二氯甲烷中的溶液， 在20℃加入12.5毫升4N氢氧化钠水溶液。在搅拌5分钟后，有机相 用硫酸镁干燥，过滤，然后冷却到5℃。这时在氩气氛下加入7.0毫 升甲醛和14.2克(分两次加入)三乙酸基硼氢化钠。在20℃强烈搅拌1 小时后，反应混合物用50毫升水稀释，再用4N氢氧化钠水溶液碱化， 然后倾析。有机相用硫酸镁干燥，过滤与在20℃减压(2.7千帕)下浓 缩至干，得到7.6克1-甲基-4-哌啶羧酸乙酯，呈无色油状。

1H NMR谱(250MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：1.24(t，J＝7Hz： 3H)；1.65-2.05(mt：6H)；2.15-2.30(mt：1H)；2.25(s：3H)；2.81 (宽d，J＝11.5 Hz：2H)；4.13(q，J＝7Hz：2H)。

实施例61

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[1-(二甲基氨基乙酰基)哌啶-4-羰 基]原始霉素IIB

往1.1克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施例1所述制 备)在50毫升二氯甲烷中的溶液，在20℃氩气氛下加入0.51克1-(二 甲基氨基乙酰基)哌啶-4-羧酸、0.5克N，N’-二环己基碳化二亚胺和 0.15克4-二甲基氨基吡啶。在搅拌48小时后，再加入0.5克N，N’- 二环己基碳化二亚胺和0.1克4-二甲基氨基吡啶。在搅拌48小时后， 过滤反应混合物以除去不溶物。滤液在减压(2.7千帕)下浓缩至干， 得到的1.8克残留物用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇梯度 (以体积计，97/3，然后95/5)]。在乙醚中搅拌后得到0.38克(16R)-16- 脱氧-16-氟-14-O-[1-(二甲基氨基乙酰基)哌啶-4-羰基]原始霉素 IIB，呈白色固体状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.50-2.05 (mt：9H)；1.89(s：3H)；2.10-2.35(mt：2H)；2.28(s：6H)；2.52 (mt：1H)；2.77(mt：1H)；2.80(mt：1H)；3.00(dt，J＝17和6Hz： 1H)；3.05-3.20(mt：1H)；3.10(AB，J＝14Hz：2H)；3.25(mt：1H)； 3.50(mt：1H)；3.85(mt：1H)；4.00-4.10(mt：2H)；4.38(mt：1H)； 4.53(mt：1H)；4.78(宽d，J＝10Hz：1H)；4.82(dd，J＝9和3Hz： 1H)；5.10(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.29(d，J＝9Hz：1H)； 5.70-5.90(mt：3H)；5.93(mt：1H)；6.19(d，J＝16Hz：1H)；6.52 (dd，J＝16和4Hz：1H)；8.12(s：1H)。

按照下述方式可以制备1-(二甲基氨基乙酰基)哌啶-4-羧酸：

往4.5克1-(二甲基氨基乙酰基)哌啶-4-羧酸乙酯在50毫升乙 醇中的溶液，在20℃加入25毫升1N氢氧化钠水溶液。在50℃搅拌 16小时后，在减压(2.7千帕)下除去乙醇，残留的水相用50毫升醋酸 乙酯提取。通过加入1N盐酸将水相的pH调节到6，然后在减压(2.7 千帕)下浓缩至干。用50毫升甲苯分两次回收残留物，然后在减压(2.7 千帕)下浓缩至干。残留物用50毫升50℃乙醇溶解，滤除不溶物。在 减压(2.7千帕)下浓缩滤液，得到4.2克1-(二甲基氨基乙酰基)哌啶 -4-羧酸，呈黄色油状。

1H NMR谱(300MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：1.50-1.80(mt：2H)； 1.93(mt：2H)；2.40-2.60(mt：1H)；2.51(s：6H)；2.78(mt：1H)； 3.07(mt：1H)；3.25(d，J＝14.5Hz：1H)；3.55(d，J＝14.5Hz：1H)； 3.84(宽d，J＝14Hz：1H)；4.39(宽d，J＝14Hz：1H)。

按照下述方式可以制备1-(二甲基氨基乙酰基)哌啶-4-羧酸乙 酯：

往2.3克N，N-二甲基甘氨酸、3.2毫升哌啶-4-羧酸乙酯、3.4毫 升三乙胺和0.27克羟基苯并三唑水合物在100毫升二氯甲烷中的溶 液，在20℃氩气氛下加入4.6克N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳化 二亚胺盐酸盐。在搅拌18小时后，反应混合物每次用100毫升蒸馏水 洗涤两次。有机相用硫酸镁干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓 缩至干。得到4.6克1-(二甲基氨基乙酰基)哌啶-4-羧酸乙酯，呈黄 色油状。

1H NMR谱(250MHz，(CD3)2SO d6，加几滴CD3COOD d4，δ，以ppm 计)：1.22(t，J＝7Hz：3H)；1.55(mt：2H)；1.88(mt：2H)；2.37 (s：6H)；2.60(mt：1H)；2.90-3.15(mt：2H)；3.34(s： 2H)；3.90-4.15(mt：2H)；4.11(q，J＝7Hz：2H)。

实施例62

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[1-(咪唑-1-基乙酰基)哌啶-4-羰 基]原始霉素IIB

往0.8克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-(1-氯乙酰基哌啶-4-羰基) 原始霉素IIB在20毫升二甲基甲酰胺中的溶液，在20℃氩气氛下加入 0.15克咪唑和0.18克碘化钾。在搅拌16小时后，加入100毫升二氯 甲烷。得到的混合物每次用50毫升0.1N氢氧化钠水溶液洗涤两次。 倾析有机相，用硫酸镁干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓缩至 干，得到0.9克残留物，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲 醇(以体积计，95/5)]。在异丙醚中搅拌，过滤和在20℃(2.7千帕) 下干燥后得到0.38克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[1-(咪唑-1-基乙 酰基)哌啶-4-羰基]原始霉素IIB，呈白色粉末状。

1H NMR谱(400MHz，(CD3)2SO d6，δ，以ppm计)：0.86(d，J＝ 6.5Hz：3H)；0.95(d，J＝6.5Hz：3H)；1.04(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.35-2.30(mt：11H)；1.78(s：3H)；2.67(mt：1H)；2.75-2.85 (mt：2H)；3.10-3.35(mt：3H)；3.61(宽d，J＝15Hz：1H)；3.70(mt： 1H)；3.81(mt：2H)；3.97(mt：1H)；4.18(mt：1H)；4.70-4.80(mt： 2H)；4.95-5.20(mt：1H)；5.00(AB限：2H)；5.43(d，J＝9Hz：1H)； 5.62(mt：1H)；5.70-5.80(mt：1H)；5.80(dd，J＝16和2Hz：1H)； 6.19(d，J＝16Hz：1H)；6.63(dd，J＝16和4Hz：1H)；6.86(s： 1H)；7.05(s：1H)；7.52(s：1H)；8.13(mt：1H)；8.52(s：1H)。

按照下述方式可以制备(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-(1-氯乙酰 基哌啶-4-羰基)原始霉素IIB

往1.1克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施例1所述制 备)在50毫升二氯甲烷中的溶液，在20℃氩气氛下加入0.62克1- 氯乙酰基哌啶-4-羧酸、0.62克N，N’-二环己基碳化二亚胺和0.24 克4-二甲基氨基吡啶。在20℃下搅拌16小时后，过滤反应混合物以 除去不溶物。滤液在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到的1.8克残留 物用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇(以体积计，97/3)]。于 是得到0.25克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-(1-氯乙酰基哌啶-4-羰基) 原始霉素IIB，呈白色固体状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.01(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.70-2.05 (mt：9H)；1.89(s：3H)；2.10-2.30(mt：2H)；2.55(mt：1H)；2.77 (mt：1H)；2.90-3.05(mt：2H)；3.15-3.35(mt：2H)；3.51(mt： 1H)；3.75-3.90(mt：2H)；4.00-4.15(mt：1H)；4.07(s：2H)；4.31 (mt：1H)；4.52(mt：1H)；4.78(宽d，J＝10Hz：1H)；4.82(dd，J ＝9和3Hz：1H)；5.10(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.29(d，J＝ 9Hz：1H)；5.75-5.90(mt：3H)；5.92(mt：1H)；6.19(d，J＝16Hz： 1H)；6.52(dd，J＝17和5Hz：1H)；8.12(s：1H)。

按照下述方式可以制备1-氯乙酰基哌啶-4-羧酸：

往2.3克1-氯乙酰基哌啶-4-羧酸乙酯在25毫升乙醇中的溶液， 在20℃氩气氛下加入10毫升1N氢氧化钠水溶液。在搅拌16小时后， 在减压(2.7千帕)下除去乙醇。这时往残留物中加入30毫升蒸馏水和 1N盐酸直到pH＝4为止。得到的溶液在减压(2.7千帕)下浓缩至干。残 留物用甲苯分两次回收，并在减压(2.7千帕)下浓缩至干。于是得到3 克1-氯乙酰基哌啶-4-羧酸，呈白色膏状。

1H NMR谱(250MHz，(CD3)2SO d6，δ，以ppm计)：1.25-1.65(mt： 2H)；1.70-1.95(mt：2H)；2.40(mt：1H)；2.79(mt：1H)；3.11(mt： 1H)；3.75(宽d，J＝14Hz：1H)；4.05-4.25(mt：1H)；4.36(AB 限，J＝13Hz：2H)。

按照下述方式可以制备1-氯乙酰基哌啶-4-羧酸乙酯：

往15.7克哌啶-4-羧酸乙酯在200毫升二氯甲烷和14毫升三乙胺 中的溶液，在0℃氩气氛下在10分钟内滴加8毫升氯乙酰氯。在20 ℃搅拌18小时后，反应混合物相继地用100毫升蒸馏水、100毫升饱 和碳酸氢钠水溶液和100毫升饱和氯化钠水溶液洗涤。有机相用硫酸 镁干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓缩，得到22克1-氯乙酰基 哌啶-4-羧酸乙酯，呈黄色油状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：1.29(t，J＝7Hz： 3H)；1.60-1.85(mt：2H)；1.95(mt：2H)；2.54(mt：1H)；2.89(mt： 1H)；3.19(mt：1H)；3.81(宽d，J＝14Hz：1H)；4.05(AB限，J ＝12Hz：2H)；4.13(q，J＝7Hz：2H)；4.31(宽d，J＝14Hz：1H)。

实施例63

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[1-(4-吗啉-4-基丁酰基)哌啶-4- 羰基]原始霉素IIB

以与实施例60描述类似的方式操作，但是使用1.80克(16R)-16- 脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施例1所述制备)、1.20克1-(4-吗啉-4- 基丁酰基)哌啶-4-羧酸、0.24克4-二甲基氨基吡啶、30毫升二甲基 甲酰胺和0.82克N，N’-二环己基碳化二亚胺为原料。在处理后，粗产 物用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇(以体积计，97/3)]，然 后两次用CBT1氧化铝柱色谱纯化[洗脱剂分别为醋酸乙酯/甲醇(以体 积计，98/2)，与乙腈/异丙醚(以体积计，50/50)]。得到0.12克 (16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[1-(4-吗啉-4-基丁酰基)哌啶-4-羰基] 原始霉素IIB，呈白色固体状。

1H NMR谱(500MHz，(CD3)2SO d6，δ，以ppm计)。我们观察到旋 转异构体存在，其比例为60/40：0.87(mt：3H)；0.95(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.04(mt：3H)；1.20-2.30(mt：13H)；1.70和1.78(2s：全 部3H)；2.27(t，J＝7.5Hz：2H)；2.33(mt：6H)；2.62(mt： 1H)；2.70-2.80(mt：2H)；3.10(mt：1H)；3.24(mt：1H)；3.50-4.00 (mt：6H)；3.57(mt：4H)；4.22(mt：1H)；4.70-4.90(mt：2H)；5.09 和5.40-5.55(分别减速的双重线，JHF＝48Hz和mt：全部 1H)；5.40-5.70(mt：2H)；5.70-5.85(mt：2H)；6.19和6.24(2d，J ＝16Hz：全部1H)；6.63(dd，J＝16和4.5Hz：1H)；8.12和8.22 (分别mt和t，J＝6Hz：全部1H)；8.47和8.51(2s：全部1H)。

按照下述方式可以制备1-(4-吗啉-4-基丁酰基)哌啶-4-羧酸：

往1.30克1-(4-吗啉-4-基丁酰基)哌啶-4-羧酸乙酯在20毫升乙 醇中的溶液，加入6.0毫升1N氢氧化钠水溶液。在50℃搅拌1.5小 时后，反应混合物几乎被浓缩至干，稀释在20毫升水中，通过加入 1N盐酸水溶液将其pH调节到5。在减压(2.7千帕)下浓缩至于后，得 到1.6克1-(4-吗啉-4-基丁酰基)哌啶-4-羧酸，呈微白色膏状。

1H NMR谱(400MHz，(CD3)2SO d6，δ，以ppm计)：1.33(mt：1H)； 1.46(mt：1H)；1.64(mt：2H)；1.80(mt：2H)；2.20-2.40(mt：8H)； 2.43(mt：1H)；2.69(mt：1H)；3.05(mt：1H)；3.55(t，J＝4.5 Hz；4H)；3.79(宽d，J＝13.5 Hz：1H)；4.20(宽d，J＝13.5Hz： 1H)。

按照下述方式可以制备1-(4-吗啉-4-基丁酰基)哌啶-4-羧酸乙 酯：

往1.0克4-吗啉代丁酸、0.78克4-哌啶羧酸乙酯、2.1毫升三 乙胺和20毫克羟基苯并三唑水合物在80毫升二氯甲烷中的溶液，在 20℃加入0.95克N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳化二亚胺盐酸盐 在20毫升二氯甲烷中的溶液。在20℃搅拌20小时后，反应混合物用 20毫升水洗涤。有机相用硫酸镁干燥，过滤和在减压(2.7千帕)下浓 缩至于，得到淡黄色油，它用CBT1氧化铝柱色谱纯化[洗脱剂：二氯 甲烷/甲醇(以体积计，97/3)]。于是得到1.30克1-(4-吗啉-4-基丁 酰基)-4-哌啶羧酸乙酯，呈淡黄色油状。

1H NMR谱(300MHz，(CD3)2SO d6，δ，以ppm计)：1.20(t，J＝7 Hz：3H)；de 1.25-1.60(mt：2H)；1.65(mt：2H)；1.84(mt： 2H)；2.20-2.40(mt：8H)；2.59(mt：1H)；2.70(mt：1H)；3.08(mt： 1H)；3.57(t，J＝5Hz：4H)；3.82(宽d，J＝14Hz：1H)；4.08(q，J ＝7Hz：2H)；4.24(宽d，J＝14Hz：1H)。

根据P.A.Cruickshank及其同事《J.Amer.Chem.Soc.》，83， 2891(1961)可以制备4-吗啉代丁酸。

实施例64

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[顺-4-(4-吗啉代丁酰氨基)-1-环 己烷羰基]原始霉素IIB：

以与实施例60所述类似的方式操作，但是使用3.2克(16R)-16- 脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施例1所述制备)、2.0克顺-4-(4-吗啉 代丁酰基氨基)-1-环己烷羧酸、0.40克4-二甲基氨基吡啶、75毫升 二甲基甲酰胺和1.50克N，N’-二环己基碳化二亚胺为原料。在处理后， 粗产物用CBT1氧化铝柱色谱纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇梯度(以体 积计，100/0，然后98/2)]，然后用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲 烷/甲醇梯度(以体积计，100/0；98/2；95/5，然后90/10)]，再采用 CBT1氧化铝柱色谱纯化[洗脱剂：醋酸乙酯/甲醇(以体积计，99/1)]。 于是得到0.40克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[顺-4-(4-吗啉代丁酰 氨基)-1-环己烷羰基]原始霉素IIB，呈白色固体状。

1H NMR谱(500MHz，(CD3)2SO d6，δ，以ppm计)：0.86(d，J＝6.5 Hz：3H)；0.94(d，J＝6.5Hz：3H)；1.04(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.35-1.70(mt：8H)；1.75-2.25(mt：9H)；1.78(s：3H)；2.08 (t，J＝7.5Hz：2H)；2.22(t，J＝7.5Hz：2H)；2.31(mf：4H)；2.48 (mt：1H)；2.77(mt；1H)；3.15-3.30(mt：2H)；3.56(t，J＝5Hz： 4H)；3.62(宽d，J＝15Hz：1H)；3.65-3.75(mt：2H)；3.82(mt： 1H)；3.95(mt：1H)；4.70-4.80(mt：2H)；5.09(减速的双重线， JHF＝48Hz：1H)；5.42(d，J＝9.5Hz：1H)；5.62(mt：1H)；5.75(mt： 1H)；5.80(宽d，J＝16Hz：1H)；6.19(d，J＝16Hz：1H)；6.62 (dd，J＝16和5Hz：1H)；7.65(d，J＝7.5Hz：1H)；8.12(t，J＝6 Hz：1H)；8.51(s：1H)。

按照下述方式可以制备顺-4-(4-吗啉代丁酰氨基)-1-环己烷羧 酸：

往1.30克顺-4-(4-吗啉代丁酰基氨基)-1-环己烷羧酸甲酯在20 毫升乙醇中的溶液，加入6.0毫升1N氢氧化钠水溶液。在50℃搅拌 1.5小时后，反应混合物几乎被浓缩至干，然后稀释在20毫升水中， 通过加入1N盐酸水溶液将其pH调节到5。在减压(2.7千帕)下浓缩至 干后，得到1.5克顺-4-(4-吗啉代丁酰基氨基)-1-环己烷羧酸，呈微 白色膏状，在下述步骤中可直接使用。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：1.50-1.75(mt：6H)； 1.85-2.00(mt：4H)；2.25(t，J＝7.5Hz：2H)；2.44(mt：1H)；2.61 (t，J＝7.5Hz：2H)；2.72(mf：4H)；3.80(mt：4H)；3.96(mt：1H)； 6.72(d，J＝8Hz：1H)。

按照下述方式可以制备顺-4-(4-吗啉代丁酰基氨基)-1-环己烷羧 酸甲酯：

以与实施例63所述类似的方式操作，但是使用4.20克顺-4-氨基 环己烷-1-羧酸甲酯盐酸盐、4.0克4-吗啉代丁酸、50毫克羟基苯并 三唑水合物、11.2毫升三乙胺、200毫升二氯甲烷和4.2克N-(3-二 甲基氨基丙基)-N’-乙基碳化二亚胺盐酸盐为原料。在按照实施例60 类似处理后，粗产物用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇(以体 积计，95/5)]，得到5.0克顺-4-(4-吗啉代丁酰基氨基)-1-环己烷羧 酸甲酯，呈黄色油状。

1H NMR谱(400MHz，(CD3)2SO d6，δ，以ppm计)；1.40-2.00(mt： 10H)；2.10(t，J＝7.5Hz：2H)；2.25(t，J＝7.5Hz：2H)；2.34 (mf：4H)；2.45-2.60(mt：1H)；3.59(t，J＝5Hz：4H)；3.65(s： 3H)；3.72(mt：1H)；7.68(d，J＝7Hz：1H)。

按照下述方式可以制备顺-4-氨基环己烷-1-羧酸甲酯盐酸盐：

往50毫升冷却到-10℃的甲醇，滴加5毫升磺酰氯。在20℃搅拌 10分钟后，缓慢分份加入5.0克顺-4-氨基环己烷-1-羧酸。在20℃搅 拌2小时后，反应混合物在20℃减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到7.5 克顺-4-氨基环己烷-1-羧酸甲酯盐酸盐，呈白色粉末状。

1H NMR谱(500MHz，(CD3)2SO d6，在温度373K，δ，以ppm计)。 我们观察到非对映异构体，其比例80/20：1.46和1.60-1.70(2mts： 全部4H)；1.85和1.95-2.15(2mts：全部4H)；2.30和2.60(2mts： 全部1H)；3.00和3.13(2mts：全部1H)；3.64和3.67(2s：全 部3H)；8.12(mf：3H)。

实施例65

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[N-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)甘氨酸 基]原始霉素IIB

往3克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施倒1所述制备) 在100毫升二氯甲烷中的溶液，在20℃加入1.21克N，N’-二环己基碳 化二亚胺、1.07克N-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)甘氨酸和0.13克4-二 甲基氨基吡啶。在20℃搅拌24小时后，加入0.6克N，N’-二环己基碳 化二亚胺和0.065克4-二甲基氨基吡啶。再在20℃搅拌24小时后， 过滤反应混合物，用70毫升二氯甲烷洗涤不溶物。在经过洗涤/过滤 另外两个循环后，滤液在减压(2.7千帕)下浓缩至干。残留物溶于50 毫升乙醇中，通过加入甲磺酸将其pH调节到2。在减压(2.7千帕)下 浓缩后，残留物用50毫升水溶解，再每次用50毫升醋酸乙酯提取两 次。倾析水相，通过加入1N氢氧化钠水溶液将其pH调节到8/9，然 后每次用60毫升二氯甲烷提取3次。合并有机相，用50毫升水洗涤， 用硫酸镁干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓缩至干。得到2克 红色油，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇/乙腈梯度(以 体积计，90/5/5至80/10/10)]。于是得到0.222克黄色固体，它在 20毫升乙醚中搅拌2小时，在过滤，每次用10毫升乙醚洗涤两次与 在减压(2.7千帕)下干燥后，得到0.181克(16R)-16-脱氧-16-氟 -14-O-[N-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)甘氨酸基]原始霉素IIB，呈白色固 体状，约140℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz； 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.09(d，J＝6.5Hz：3H)；1.60-2.05 (mt：5H)；1.89(s：3H)；2.15(mt：1H)；2.20-2.35(mt：1H)；2.31 (s：3H)；2.40(mt：4H)；2.76(mt：1H)；2.99(dt，J＝17和6Hz： 1H)；3.23(mt：1H)；3.43(mt：4H)；3.49(mt：1H)；3.85(mt：1H)； 3.94(dd，J＝18和5Hz：1H)；4.00-4.10(mt：2H)；4.54(mt：1H)； 4.78(宽d，J＝10Hz：1H)；4.82(dd，J＝9和3Hz：1H)；4.91(mt：1H)； 5.13(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.32(d，J＝9Hz：1H)；5.77 (mt：1H)；5.82(宽d，J＝17Hz：1H)；5.86(mt：1H)；5.95(mt： 1H)；6.19(d，J＝16Hz：1H)；6.51(dd，J＝17和4Hz：1H)；8.12 (s：1H)。

按照下述方式可以制备N-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)甘氨酸：

往0.15克悬浮于100毫升甲醇中的5％炭载钯，在20℃氩气氛下 加入2.36克N-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)甘氨酸苯甲酯。在22℃搅拌 2.5小时后，在1.6巴氢气下，加入50毫升水，用Clarcel过滤。滤 饼每次用70毫升60℃水洗涤3次。然后，滤液在50℃减压(2.7千帕) 下浓缩至干。残余物在50℃减压(2.7千帕)下被干燥，得到1.5克 N-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)甘氨酸。

1H NMR谱(400MHz，(CD3)2SO d6，其中加入几滴CD3COOD d4，δ， 以ppm计)：2.65(s：3H)；2.98(mt：4H)；3.51(mt：4H)；3.68 (s：2H)。

按照下述方式可以制备N-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)甘氨酸苯甲 酯：

往3克4-甲基哌嗪-1-基羰基氯盐酸盐在150毫升四氢呋喃中的 溶液，在20℃加入4.2毫升三乙胺和3.02克甘氨酸苯甲酯盐酸盐。 在60℃搅拌16小时后，反应混合物在减压(2.7千帕)下浓缩至干，残 留物溶于70毫升二氯甲烷中。有机相相继地每次用100毫升饱和碳酸 氢钠水溶液和70毫升水洗涤两次，然后用硫酸镁干燥，过滤，然后在 减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到1.9克N-(4-甲基哌嗪-1-基羰基) 甘氨酸苯甲酯，呈白色固体状。

1H NMR谱(400MHz，(CD3)2SO d6，δ，以ppm计)：2.18(s：3H)； 2.25(t，J＝5Hz：4H)；3.30(t，J＝5Hz：4H)；3.80(d，J＝6Hz： 2H)；5.13(s：2H)；7.02(t，J＝6Hz：1H)；7.30-7.45(mt：5H)。

实施例66

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{4-[(3-羧基)丙基二硫烷基]丁酰 基}原始霉素IIB

往1.75克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施例1所述制 备)在50毫升二氯甲烷中的溶液，在20℃氩气氛下加入1.25克4，4’- 二硫代二丁酸、1.03克N，N’-二环己基碳化二亚胺和0.06克4-二甲 基氨基吡啶。在搅拌18小时后，向反应混合物中补加70毫升二氯甲 烷，然后滤除不溶物。滤液在减压(2.7千帕)下浓缩至于，得到3.3 克残留物，它相继两次用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇(以 体积计，96/4和97.5/2.5)]。得到的残留物用25毫升蒸馏水溶解， 然后通过添加饱和碳酸氢钠水溶液将其溶解。水相(pH7-8)每次用50 毫升醋酸乙酯洗涤四次，然后用1N盐酸水溶液酸化直到pH2-3为止。 出现了糊状沉淀，通过加入250毫升二氯甲烷溶解沉淀。分离有机相， 用硫酸镁干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到0.7 克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{4-[(3-羧基)丙基二硫烷基]丁酰基} 原始霉素IIB，呈白色固体状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；0.99(d，J＝6.5Hz：3H)；1.11(d，J＝6.5Hz：3H)；1.50-2.30 (mt：11H)；1.90(s：3H)；2.35-2.55(mt：4H)；2.65-2.85(mt：5H)； 3.04(mt：1H)；3.26(dt，J＝17和5Hz：1H)；3.56(mt：1H)；3.85 (mt：1H)；4.07(mt：1H)；4.53(mt：1H)；4.75-4.85(mt：2H)；5.08 (减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.29(d，J＝9Hz：1H)；5.75-5.90 (mt：1H)；5.79(mt：1H)；5.88(dd，J＝16和1.5Hz：1H)；6.10-6.25 (mt：1H)；6.17(d，J＝15.5Hz：1H)；6.58(dd，J＝16和5Hz：1H)； 8.13(s：1H)。

实施例67

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{4-[3-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)丙 基二硫烷基]丁酰基}原始霉素IIB

往1克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{4-[(3-羧基)丙基二硫烷基] 丁酰基}原始霉素IIB(如实施例70所述制备)在93毫升二氯甲烷中的 溶液，在20℃氩气氛下加入0.97克N，N’-二环己基碳化二亚胺、0.5 毫升1-甲基-哌嗪和0.08克4-二甲基氨基吡啶。在搅拌96小时后， 过滤反应混合物以除去不溶物。滤液在减压(2.7千帕)下浓缩至干， 得到2克残留物，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇(以体 积计，96/4)]。得到0.5克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{4-[3-(4-甲 基哌嗪-1-基羰基)丙基二硫烷基]丁酰基}原始霉素IIB，呈白色固体 状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.00(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.65-2.10 (mt：9H)；1.88(s：3H)；2.15(mt：1H)；2.24(mt：1H)；2.32(s： 3H)；2.35-2.50(mt：8H)；2.70-2.80(mt：1H)；2.71(t，J＝7.5Hz： 2H)；2.75(t，J＝7Hz：2H)；3.00(mt：1H)；3.24(mt： 1H)；3.40-3.55(mt：3H)；3.64(t，J＝5Hz：2H)；3.86(mt：1H)； 4.06(mt：1H)；4.55(mt：1H)；4.78(dd，J＝10和2Hz：1H)；4.82 (dd，J＝9和3Hz：1H)；5.11(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.30 (d，J＝9.5Hz：1H)；5.75-5.85(mt：1H)；5.76(mt：1H)；5.81(dd，J ＝16和2Hz：1H)；6.01(mt：1H)；6.19(d，J＝16Hz：1H)；6.52 (dd，J＝16和5Hz：1H)；8.12(s：1H)。

实施例68

(16R)-14-O-(3-羧基丙酰基)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIA

在三口瓶中放入560毫克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIA(如 实施例8所述制备)在3毫升吡啶中的溶液，然后在20℃加入286毫 克琥珀酸酐，然后120毫克4-二甲基氨基吡啶。在搅拌18小时后， 反应混合物倒入50毫升蒸馏水和10毫升二氯甲烷中。然后加入足够 量的0.1N盐酸，将pH调节到4。用棉布过滤混合物，除去不溶物， 然后倾析。水相每次用10毫升二氯甲烷洗涤两次。合并有机相，补加 甲醇，以便溶解完全，用硫酸镁干燥与在减压(2.7千帕)下浓缩至干， 得到670毫克固体，它用闪式色谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇(以 体积计，97/3)]。这样得到530毫克产物，它再用闪式色谱法纯化[洗 脱剂：二氯甲烷/甲醇(以体积计，95/5)]。得到白色固体，它在5毫 升乙醚中搅拌15分钟，过滤，然后在50℃(90帕)下干燥。得到147 毫克(16R)-14-O-(3-羧基丙酰基)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIA，呈白 色固体状，约156℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)；0.99(mt：6H)；1.13 (d，J＝6.5Hz：3H)；1.83(s：3H)；1.90-2.10(mt：2H)；2.27(mt： 1H)；2.50-2.90(mt：7H)；3.08(mt：1H)；3.28(mt：1H)；4.00(宽 d，J＝18Hz：1H)；4.12(mt：1H)；4.20(mt：1H)；4.30(mt：1H)； 4.72(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；4.85-5.00(mt：2H)；5.67 (mt：1H)；5.71(mt：1H)；5.96(d，J＝16Hz：1H)；5.98(d，J＝17 Hz：1H)；6.18(宽t，J＝2Hz：1H)；6.61(dd，J＝17和7Hz：1H)； 7.02(mt：1H)；7.96(s：1H)。

实施例69

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[3-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)丙酰基] 原始霉素IIA盐酸盐

往355毫克溶于3.5毫升无水乙醇中的(16R)-16-脱氧-16-氟 -14-O-[3-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)丙酰基]原始霉素IIA，加入0.167 毫升3M氯乙烷，然后缓慢加入7毫升乙醚直到产物沉淀为止。在搅拌 15分钟后，过滤产物，用少量乙醇-醚(1/2)混合物洗涤，然后在20 ℃(90帕)下干燥，得到305毫克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[3-(4- 甲基哌嗪-1-基羰基)丙酰基]原始霉素IIA盐酸盐，呈白色固体状，约 192℃熔化。

1H NMR谱(400MHz，(CD3)2SO d6，δ，以ppm计)：0.87(d，J＝ 6.5Hz：3H)；0.96(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)； 1.78(s：3H)；1.93(mt：1H)；2.02(mt：1H)；2.18(mt： 1H)；2.50-2.80(mt：7H)；2.78(s：3H)；2.80-3.55(mt：8H)；3.66 (宽d，J＝16Hz：1H)；3.90-4.25(mt：3H)；4.14(mt：1H)；4.25-4.55 (mf：1H)；4.77(dd，J＝9和1.5Hz：1H)；5.05(减速的双重线， JHF＝48Hz：1H)；5.38(d，J＝9.5Hz：1H)；5.71(mt：2H)；5.88 (d，J＝16Hz：1H)；6.12(d，J＝16Hz：1H)；6.36(宽t，J＝2Hz： 1H)；6.62(dd，J＝16和5.5Hz：1H)；8.03(mt：1H)；8.61(s：1H)； 10.58(mf：1H)。

按照下述方式可以制备(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[3-(4-甲基 哌嗪-1-基羰基)丙酰基]原始霉素IIA：

在置于氮气下的圆底烧瓶中，加入848毫克(16R)-16-脱氧-16- 氟原始霉素IIA(如实施例8所述制备)、24毫升二氯甲烷和352毫克 4-(4-甲基哌嗪-1-基)-4-氧代丁酸。得到的混合物被加热直到溶解为 止，然后在室温下加入360毫克N，N’-二环己基碳化二亚胺，然后加 入20毫克4-二甲基氨基吡啶。在20℃搅拌18小时后，再加入36毫 克N，N’-二环己基碳化二亚胺和20毫克4-二甲基氨基吡啶。这时反应 介质在20℃搅拌1星期，然后过滤，用醋酸乙酯洗涤，在减压(2.7千 帕)下浓缩至干。得到的稠厚油用15毫升醋酸乙酯和30毫升二氯甲烷 溶解。有机相每次用30毫升蒸馏水洗涤3次，倾析，用硫酸镁干燥， 在20℃减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到1.05克黄色油，它用闪式色 谱法纯化[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇(以体积计，95/5)]。这样得到840 毫克产物，它在16毫升乙醚中搅拌18小时，过滤，在20℃(90帕) 下干燥，得到640毫克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[3-(4-甲基哌嗪 -1-基羰基)丙酰基]原始霉素IIA，呈白色固体状，在130℃熔化。

按照下述方式可以制备4-(4-甲基哌嗪-1-基)-4-氧代丁酸：

往20毫升二烷中加入1.17克琥珀酸酐，然后加入1.19毫升 N-甲基哌嗪。在室温下搅拌18小时后，过滤得到的沉淀，用少量二 烷洗涤，然后相继地每次用10毫升丙酮和10毫升乙醚洗涤两次。在 20℃减压(2.7千帕)下干燥后，得到1.09克4-(4-甲基哌嗪-1-基)-4- 氧代丁酸，呈白色固体状，在114℃熔化。

实施例70

(16R)-14-O-(4-羧基丁酰基)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIA

往1.05克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIA(如实施例8所述制 备)在5.5毫升吡啶中的溶液，在20℃氩气氛下加入0.68克戊二酸酐 和0.24克4-二甲基氨基吡啶。在搅拌24小时后，反应混合物在减压 (2.7千帕)下浓缩至干，得到的残留物用110毫升醋酸乙酯和55毫升 蒸馏水溶解。倾析有机相，相继地每次用55毫升蒸馏水、55毫升0.1N 盐酸水溶液洗涤两次，两次用55毫升蒸馏水和两次用55毫升饱和氯 化钠水溶液洗涤。在用硫酸镁干燥与过滤后，有机相在减压(2.7千帕) 下浓缩至干。得到的0.95克残留物被溶于100毫升二氯甲烷中，再用 100毫升1％碳酸氢钠水溶液提取。向得到的乳液中加入500毫升醋酸 乙酯，以便使其倾析。这时分离水相，再每次用100毫升醋酸乙酯洗 涤三次，用1N盐酸水溶液酸化，直到pH达到接近2为止，然后用(200、 100和100毫升)二氯甲烷提取三次。合并有机相，用硫酸镁干燥， 过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓缩至干。于是得到0.33克 (16R)-14-O-(4-羧基丁酰基)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIA，呈浅褐色 固体状，在116℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.98(mt：6H)；1.12 (d，J＝6.5Hz：3H)；1.80-2.10(mt：4H)；1.82(s：3H)；2.15-2.45 (mt：5H)；2.65-2.90(mt：3H)；3.08(mt：1H)；3.26(dt，J＝16 和3.5Hz：1H)；3.99(宽d，J＝18Hz：1H)；4.05-4.35(mt：3H)； 4.71(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；4.85-5.00(mt：2H)；5.60-5.75 (mt：2H)；5.96(d，J＝16Hz：1H)；5.98(宽d，J＝16Hz：1H)；6.18 (t，J＝3Hz：1H)；6.61(dd，J＝16和7Hz：1H)；7.09(t，J＝5.5 Hz：1H)；7.95(s：1H)。

实施例71

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)丁酰基] 原始霉素IIA

往1克(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIA(如实施例8所述制备) 在30毫升二氯甲烷中的溶液，在20℃氩气氛下加入0.48克4-(4-甲 基哌嗪-1-基羰基)丁酸、0.48克N，N’-二环己基碳化二亚胺和0.14 克4-二甲基氨基吡啶。在20℃搅拌20小时后，反应混合物倒入50毫 升蒸馏水和10毫升二氯甲烷中。过滤得到的混合物以除去不溶物。倾 析有机相后，水相每次用10毫升二氯甲烷提取两次。合并有机相，用 硫酸镁干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到1.6克 残留物，它相继用闪式色谱法纯化两次[洗脱剂：二氯甲烷/甲醇(以体 积计，95/5)]。在乙醚中搅拌、过滤与(2.7千帕)下干燥后，得到0.6 克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-[4-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)丁酰基] 原始霉素IIA，呈膏状固体，约120℃熔化。

1H NMR谱(500MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.99(mt：6H)；1.13 (d，J＝6.5Hz：3H)；1.84(s：3H)；1.90-2.10(mt：2H)；1.92(mt： 2H)；2.15-2.45(mt：9H)；2.30(s：3H)；2.65-2.90(mt：3H)；3.07 (mt：1H)；3.27(dt，J＝15和3.5Hz：1H)；3.46(mt：2H)；3.63 (mt：2H)；3.99(宽d，J＝17.5Hz：1H)；4.10-4.25(mt：2H)；4.30 (mt：1H)；4.71(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；4.90(d，J＝9.5Hz： 1H)；4.95(dd，J＝10和2Hz：1H)；5.65(dt，J＝9.5和4Hz：1H)； 5.72(mt：1H)；5.96(d，J＝16Hz：1H)；5.98(宽d，J＝16.5Hz： 1H)；6.17(t，J＝3Hz：1H)；6.60(dd，J＝16.5和7Hz：1H)；7.02 (t，J＝5.5Hz：1H)；7.94(s：1H)。

根据DE 78-2851953可以制备4-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)丁酸。

实施例72

(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{(1R，2R)-[2-(4-甲基哌嗪-1-基) 羰基]-1-环己烷羰基}原始霉素IIB

以与实施例60所述类似的方式操作，但是使用0.83克(16R)-16- 脱氧-16-氟原始霉素IIB(如实施例1所述制备)、0.40克 (1R，2R)-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)羰基]-1-环己烷羧酸、0.10克4-二 甲基氨基吡啶、30毫升二氯甲烷和0.40克N，N’-二环己基碳化二亚胺 为原料。在按照实施例60类似地处理后，粗产物用闪式色谱法纯化[洗 脱剂：二氯甲烷/乙腈/甲醇(以体积计，90/5/5)]，然后用CBT1氧化 铝柱色谱纯化[洗脱剂：醋酸乙酯/甲醇(以体积计，98/2)]，得到0.40 克(16R)-16-脱氧-16-氟-14-O-{(1R，2R)-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)羰 基]-1-环己烷羰基}原始霉素IIB，呈白色固体状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.95(d，J＝6.5Hz： 3H)；0.99(d，J＝6.5Hz：3H)；1.09(d，J＝6.5Hz：3H)；1.20-1.45 (mt：4H)；1.55-2.45(mt：17H)；1.83(s：3H)；2.50(mt： 1H)；2.70-2.85(mt：3H)；3.00(mt：1H)；3.22(mt：1H)；3.44(mt： 1H)；3.45-3.65(mt：4H)；3.88(mt：1H)；4.04(mt：1H)；4.53(mt： 1H)；4.70-4.85(mt：2H)；5.10(减速的双重线，JHF＝48Hz：1H)；5.29 (d，J＝10Hz：1H)；5.65-5.80(mt：2H)；5.81(宽d，J＝16Hz：1H)； 6.02(mt：1H)；6.18(d，J＝16Hz：1H)；6.50(dd，J＝16和4Hz： 1H)；8.12(s：1H)。

按照下述方式可以制备(1R，2R)-2-[(4-甲基哌嗪-1-基)羰 基]-1-环己烷羧酸：

往0.50克(-)-反-1，2-环己烷二羧酸酐在20毫升二烷中的-15 ℃溶液，在氩气氛下加入0.37毫升N-甲基哌嗪在5毫升二烷中的 溶液。在20℃1.25小时后，过滤反应混合物，用20毫升乙醚洗涤固 体，脱水，然后在20℃减压(2.7千帕)下干燥，得到0.65克 (1R，2R)-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)羰基]-1-环己烷羧酸，呈白色固体 状。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：1.20-1.60(mt： 4H)；1.65-1.90(mt：3H)；2.05-2.35(mt：3H)；2.37(s： 3H)；2.70-2.95(mt：5H)；3.43(mt：1H)；3.84(宽d，J＝13.5Hz： 1H)；4.30(d，J＝12.5Hz：1H)。

实施例73

(16R)-16-叠氮基-16-脱氧原始霉素IIB

以与实施例4类似方式操作，但是使用四正丁基铵叠氮化物为原 料，得到(16R)-16-叠氮基-16-脱氧原始霉素IIB，呈白色固体状，约 135℃熔化(分解)。

1H NMR谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)：0.96(d，J＝6.5Hz： 3H)；1.01(d，J＝6.5Hz：3H)；1.10(d，J＝6.5Hz：3H)；1.50-1.65 (mt：1H)；1.75-2.05(mt：5H)；1.88(s：3H)；2.15(mt：1H)；2.77 (mt：1H)；2.90(dd，J＝17和6Hz：1H)；3.15(dd，J＝17和7Hz： 1H)；3.49(mt：1H)；3.88(mt：1H)；3.95-4.15(mt：2H)；4.54(mt： 1H)；4.70-4.80(mt：2H)；4.83(dd，J＝9和3Hz：1H)；5.37(d，J ＝9.5Hz：1H)；5.75(mt：1H)；5.82(dd，J＝17和1.5Hz：1H)；5.97 (mt：1H)；6.22(d，J＝16Hz：1H)；6.52(dd，J＝17和5Hz：1H)； 8.15(s：1H)。

本发明还涉及含有至少一种本发明链阳性菌素衍生物的药物组合 物，该衍生物为纯状态的，与至少一种B类链阳性菌素衍生物组合的， 必要时，呈盐形式和/或与一种或多种相容的和药学可接受的稀释剂或 添加剂组合形式。

本发明的组合物可以通过口服、非肠胃道、局部、直肠或气雾剂 方式使用。

作为口服给药固体组合物，可以使用片剂、丸剂、胶囊剂、粉剂 或颗粒剂。在这些组合物中，本发明的活性化合物一般呈组合形式， 该化合物与一种或或多种稀释剂或添加剂例如蔗糖、乳糖或淀粉混合。 这些组合物可以含有除稀释剂之外的物质例如润滑剂如硬脂酸镁，或 用于控制释放的包衣。

作为口服给药液体组合物，可以使用含有如水或石蜡油之类惰性 稀释剂的药学可接受的溶液、悬液、乳液、糖浆和酏剂。这些组合物 还可以含有除稀释剂之外的物质例如润湿剂、甜味剂或芳香剂。

非肠道给药组合物可以是灭菌溶液或乳液。作为溶剂或载体，可 以使用丙二醇、聚乙二醇、植物油，特别是橄榄油、可注射用有机酯 例如油酸乙酯。这些组合物还可以含有添加剂，特别是润湿剂、等渗 剂、乳化剂、分散剂和稳定剂。

灭菌可以多种方式例如采用细菌滤器、辐照、或加热进行。它们 还可以被制成灭菌固体组合物形式，这些组合物可以在使用时溶于灭 菌的水中或任何其他可注射乳油灭菌介质中。

局部给药组合物例如可以是乳油、软膏、洗剂或气雾剂。

直肠给药组合物是栓剂或直肠用胶囊，除活性组分外，它们还含 有赋形剂例如椰子脂、半合成甘油酯或聚乙二醇。

这些组合物还可以是气雾剂。以液体气雾剂形式使用时，这些组 合物可以是稳定的灭菌溶液或在使用时溶于不致热的灭菌水、血清或 任何其他药学可接受载体中的固体组合物。以供直接吸入的干气雾剂 形式使用时，活性组分被细分并与粒度30-80微米的水溶性稀释剂或 载体例如含吡喃葡糖的葡聚糖、甘露糖醇或乳糖组合。

在进行人体治疗时，本发明的新链阳性菌素衍生物对治疗细菌源 感染是特别有效的。剂量取决于所要求的效果和治疗时间。医生将根 据治疗情况、患者年龄、体重、感染程度和其他固有因素最适当地通 过估算确定剂量。一般地，成人口服或非肠胃道用药剂量是每天2或 3次，为0.5-3克活性组分。

下述实施例说明本发明组合物：

实施例

根据一般的技术制备片剂，剂量为250毫克活性化合物，具有下 述组成：

-(16R)-16-脱氧-16-氟原始霉素IIB    175毫克

-原始霉素IB                        75毫克

-赋形剂：淀粉、水合硅胶、糊精、

明胶、硬脂酸镁：适量至              500毫克