葡萄环保肥料及其制备方法.pdf

《葡萄环保肥料及其制备方法.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《葡萄环保肥料及其制备方法.pdf（18页珍藏版）》请在专利查询网上搜索。

1、10申请公布号CN104211506A43申请公布日20141217CN104211506A21申请号201410427705122申请日20140827C05G3/0020060171申请人武汉瑞泽园生物环保科技有限公司地址430345湖北省武汉市黄陂区武湖农场生态农业园中心路2号72发明人周世同梁运祥74专利代理机构武汉开元知识产权代理有限公司42104代理人陈家安54发明名称葡萄环保肥料及其制备方法57摘要本发明公开了一种葡萄环保肥料及其制备方法，所述环保肥料按原料的重量份数比计由7585份的有机肥、515份的无机肥、310份的微量元素、0105份的发酵复合菌、12份的酵素菌、26份的腐。

2、植酸、15份的氨基酸和12份的假单胞菌HN103组成，该方法将发酵复合菌与水混合均匀，得到稀释菌液；将稀释菌液加入有机肥中，混合均匀，堆积成堆，循环翻转，得到一级发酵物；再加入酵素菌，发酵至完全腐熟，低温干燥，粉碎得到二级发酵物；最后加入无机肥、微量元素、腐植酸、壳寡糖和生物菌，分拣得到葡萄环保肥料。本发明以农牧业废弃物为主要原料，制备得到葡萄环保肥料，从而解决葡萄养分供给问题同时、解决葡萄生产过程中的重金属和有机物污染问题。51INTCL权利要求书1页说明书10页附图6页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书10页附图6页10申请公布号CN104211506AC。

3、N104211506A1/1页21一种葡萄环保肥料，其特征在于所述环保肥料按原料的重量份数比计由7585份的有机肥、515份的无机肥、310份的微量元素、0105份的发酵复合菌、12份的酵素菌、26份的腐植酸、15份的氨基酸和12份的假单胞菌HN103组成。2根据权利要求1所述的葡萄环保肥料，其特征在于所述发酵复合菌为枯草芽孢杆菌、酵母菌、里氏木霉和黑曲霉的混合菌，其中，所述枯草芽孢杆菌、酵母菌、黑曲霉和里氏木霉重量比为2041212。3根据权利要求1或2所述的葡萄环保肥料，其特征在于发酵复合菌为枯草芽孢杆菌、酵母菌、里氏木霉和黑曲霉的混合菌，其中，所述枯草芽孢杆菌、黑曲霉和里氏木霉的重量比为。

4、323。4根据权利要求1或2所述的葡萄环保肥料，其特征在于所述有机肥为禽畜粪便、麸皮和豆饼的混合物，其中，所述禽畜粪便为牛粪、猪粪和猪粪中任意一种或几种，所述有机肥中禽畜粪便、麸皮和豆饼的重量比101313。5根据权利要求1或2所述的葡萄环保肥料，其特征在于所述无机肥为氮肥、磷肥和钾肥的混合肥，所述无机肥中氮、磷和钾的重量比为21212。6根据权利要求1或2所述的葡萄环保肥料，其特征在于所述微量元素包括钙、镁、硫、硼、锌、硒和钼，其中，钙、镁、硫、硼、锌、硒和钼的重量比为21305135127914。7一种权利要求1所述的葡萄环保肥料制备方法，其特征在于包括以下步骤1按上述的重量份数比计称取有。

5、机肥、无机肥、微量元素、发酵复合菌、酵素菌、腐植酸、壳寡糖和生物菌；2将发酵复合菌与水按重量比1550混合均匀，得到稀释菌液；3将步骤2中的稀释菌液加入有机肥中，混合均匀，堆积成堆，循环翻转，发酵1015天，即可达到基本腐熟状态，得到一级发酵物；4向步骤3中得到的一级发酵物中加入酵素菌，发酵至完全腐熟，低温干燥，粉碎得到二级发酵物；5向步骤4中二级发酵物中加入无机肥、微量元素、腐植酸、壳寡糖和生物菌，混合均匀造粒成球，分拣得到葡萄环保肥料。权利要求书CN104211506A1/10页3葡萄环保肥料及其制备方法技术领域0001本发明涉及有机肥料领域，具体地指一种葡萄环保肥料及其制备方法。背景技术。

6、0002目前，食品安全事故频发，农民在已受到污染的土地上，按照常规的种植方法也可能出现重金属超标的事件，如近期发生的葡萄重金属超标和有机物污染现象，而土壤重金属超标是其主要诱因。另外，由于农药和化肥的长期使用，使得土壤中人工有机污染物的含量越来越高，我国农业环境污染和生态失衡现象日趋严重，葡萄的产量和质量受到严重影响，进而威胁到人类的生存环境，由此而引发的葡萄污染、葡萄质量与安全问题越来越受到人们的关注，成为制约葡萄生产持续高效发展的瓶颈。0003然而，传统的有机肥料产品并不能较好地解决各种污染问题，因此利用现代生物技术手段，加快新型生物环保肥料的研制迫在眉睫。发明内容0004本发明所要解决的。

7、技术问题就是提供一种葡萄环保肥料及其制备方法。本发明以农牧业废弃物为主要原料，制备得到葡萄环保肥料，从而解决葡萄养分供给问题同时、解决葡萄生产过程中的重金属和有机物污染问题。0005为解决上述技术问题，本发明提供的一种葡萄环保肥料，所述环保肥料按原料的重量份数比计由7585份的有机肥、515份的无机肥、310份的微量元素、0105份的发酵复合菌、12份的酵素菌、26份的腐植酸、15份的氨基酸和12份的假单胞菌HN103组成；0006假单胞菌HN103购于华中农业大学，分类命名为PSEUDOMONASPUTIDAHN103，保藏日期为2011年5月26日，保藏单位为CCTCC，保藏编号为CCTC。

8、CM2011184，假单胞菌HN103公开于公布号为CN102286405A的中国发明专利一种假单胞菌及其用途和去除环境中镉污染的方法。0007假单胞菌HN103对重金属CD2具有较好的钝化效果；考察该菌与枯草芽孢杆菌混合使用钝化镉的影响，发现混合菌钝化镉的效果优于单独使用该菌的效果，重金属镉的去除率达到8673；对该菌钝化其他重金属CU2、HG2、ZN2、NI2、MN2的性能进行研究，发现该菌对不同重金属的耐受能力不同，对ZN2、CU2、MN2、NI2的钝化能力较强，对HG2较弱。0008通过在肥料中添加该重金属钝化菌与枯草芽孢杆菌，对钝化土壤中多种重金属有较好效果，能将土壤中重金属转变为低。

9、毒或无毒的形态。0009进一步地，所述发酵复合菌为枯草芽孢杆菌、酵母菌、里氏木霉和黑曲霉的混合菌，其中，所述枯草芽孢杆菌、酵母菌、黑曲霉和里氏木霉重量比为2041212。0010优选地，所述枯草芽孢杆菌、黑曲霉和里氏木霉的重量比为323。0011以畜禽粪便如牛粪为处理对象，选择枯草芽孢杆菌、酵母菌、里氏木霉、黑曲霉说明书CN104211506A2/10页44种菌剂，以堆肥过程中升温和起温的速度、堆肥温度、堆肥时间等为指标，分别考察这四种菌剂对堆肥发酵过程的影响及不同菌剂添加量对堆肥升温效果的影响，确定发酵复合菌的最佳配比为枯草芽抱杆菌黑曲霉里氏木霉323。0012研究表明，采用发酵复合菌，可以。

10、令堆肥在10天左右完全腐熟，且使得牛粪堆肥产品的种子发芽指数提高217。0013再进一步地，所述有机肥为禽畜粪便、麸皮和豆饼的混合物，其中，所述禽畜粪便为牛粪、猪粪和猪粪中任意一种或几种，所述有机肥中禽畜粪便、麸皮和豆饼的重量比101313。0014再进一步地，所述无机肥为氮肥、磷肥和钾肥的混合肥，所述无机肥中氮、磷和钾的重量比为21212。0015再进一步地，所述微量元素包括钙、镁、硫、硼、锌、硒和钼，其中，钙、镁、硫、硼、锌、硒和钼的重量比为21305135127914。0016本发明提供了一种葡萄环保肥料制备方法，包括以下步骤00171按上述的重量份数比计称取有机肥、无机肥、微量元素、发。

11、酵复合菌、酵素菌、腐植酸、壳寡糖和生物菌；00182将发酵复合菌与水按重量比1550混合均匀，得到稀释菌液；00193将步骤2中的稀释菌液加入有机肥，混合均匀，堆积成堆，循环翻转，发酵1015天，即可达到基本腐熟状态，得到一级发酵物；00204向步骤3中得到的一级发酵物中加入酵素菌，发酵至完全腐熟，低温干燥，粉碎得到二级发酵物；00215向步骤4中二级发酵物中加入无机肥、微量元素、腐植酸、壳寡糖和生物菌，混合均匀造粒成球，分拣得到葡萄环保肥料。0022本发明的有益效果在于00231本发明的使用效果0024本发明的葡萄环保肥料对于作物解磷、解钾作用较明显，促苗、促根生长效果好，平均能够提高作物产。

12、量58；并且在施用该款环保肥料的作物时，土传病害发生率明显降低，农药用量降低了20。00252经济效益0026本发明的葡萄环保肥料制备工艺简单，具有较好的经济效益。00273社会与生态效益0028本发明充分利用畜禽粪便和植物秸秆等农牧业废弃物，并将其转化为生物环保肥料产品，能够实现资源的循环利用，并减少粪便对养殖环境的危害，减轻养殖厂的不良气味，并消耗周边堆积的植物秸秆等农业废弃物，使养殖厂周边环境得到改善，而且变废为宝，将对社会经济发展起到较大的推动作用。0029本发明解决了长期困扰农作物生产过程中重金属和人工有机物污染等问题，通过重金属钝化菌将土壤中重金属转变低毒或无毒的形态，也通过人工有。

13、机物降解菌将不同来源的人工有机物降解成为无毒的物质，给环境污染治理方面带来了新的思路。0030本发明采用生物工程技术进行生物环保肥料的生产，降低化肥和农药使用量，倡导了生态型的种植新模式，寻求综合解决无机化肥和高毒农药引起的农业生产环境污染问说明书CN104211506A3/10页5题，为生产出高产、安全、优质、高效的农产品提供了有力的保障。0031图1为30下不同镉浓度中的假单胞菌HN103生长情况图；0032图2为添加假单胞菌HN103和空白对照能降低CD2的最低值图；0033图3A为只加假单胞菌HN103与空白对照的OD600对比图；0034图3B为镉浓度降低对比图；0035图4A为假单。

14、胞菌HN103在15MG/LHG2中的生长图0036图4B为假单胞菌HN103在500MG/LZN2中的生长图；0037图4C为假单胞菌HN103在200MG/LNI2中的生长；0038图4D为假单胞菌HN103在400MG/LCU2中的生长；0039图4E为假单胞菌HN103在400MG/LMN2中的生长；0040图5为不同菌剂对猪粪发酵升温的效果图；0041图6为枯草芽孢杆菌不同添加量对升温效果的影响图；0042图7为黑曲霉不同添加量对升温效果的影响图；0043图8为里氏木霉不同添加量对升温效果的影响图；0044图9为酵母不同添加量对升温效果的影响图；0045图10为中试试验的单因素分析图。

15、；0046图11为发酵剂升温效果试验图。具体实施方式0047为了更好地解释本发明，以下结合具体实施例进一步阐明本发明的主要内容，但本发明的内容不仅仅局限于以下实施例。0048一、本发明中理论基础验证00491假单胞菌HN103钝化研究005011假单胞菌HN103钝化镉的性能研究0051111假单胞菌HN103在不同镉浓度下的生长状况0052如图1所示在抗CD2实验中，发现假单胞菌HN103在液体LB培养基中最大抗镉浓度为500MG/L。随着CD2浓度的再增高，菌体的延迟期逐渐增长，代时逐渐变大，达到1000GM/L时，已明显受到抑制。0053112添加假单胞菌HN103和空白对照能降低CD2。

16、的最低值0054如图2所示在假单胞菌HN103对CD2的抗性小试试验中，与自然环境接触，发现当CD2的浓度为09MG/L左右时，加了假单胞菌HN103能将CD2的浓度降低到0572MG/L，而空白对照水样CD2的浓度降低到了0684MG/L，这说明空气中有能在低浓度CD2环境下生长的菌，而加了假单胞菌HN103效果相对较好。0055113小试中假单胞菌HN103与空白对照对于降低CD2浓度的研究结果0056在CD2浓度为80MG/L左右时，加了假单胞菌HN103比空白对照，菌种生长要多，OD600达到08，空白只有062；加了假单胞菌HN103能将CD2浓度从842MG/L降低到1648MG/。

17、L，去除率达到8043，而什么都不加凭借实验室空气中的菌去除率只有5125。0057由上可知，假单胞菌HN103能将088MG/L的CD2降低到0572MG/L，在CD2浓度说明书CN104211506A4/10页6较高时，能将CD2浓度从842MG/L降低到1648MG/L。005812对其他金属的钝化实验0059表1不同ZN2浓度下细胞的生物量00600061表2不同MN2浓度下细胞的的最大生物量00620063如图4和表12所示在假单胞菌HN103对其他金属的耐性研究中，发现其对不同金属的耐受能力不同，对HG2的耐受性较弱，只有15MG/L；对NI2，菌体可以在200MG/L的金属浓度下。

18、生长；CU2和MN2的浓度在400MG/L下时，菌体可以生长；对ZN2可以在500MG/L下生长。说明该菌可能能在复杂的金属环境中生长。0064研究表明；该菌能够较好的钝化多种有毒的重金属，进而很好地将土壤中重金属转变低毒或无毒的形态。00652发酵复合菌最佳菌剂组合的研究006621实验材料与方法0067211试验菌株0068枯草芽孢杆菌BACILLUSSUBTILIS，酵母菌SACCHAROMYCESCEREVISIAE，里氏木霉TRICHODERMAREESEI，黑曲霉ASPERGILLUSNIGER，以上菌株均由华中农业大学农业微生物学国家重点实验室提供。0069212畜禽粪便0070。

19、牛粪由武汉瑞泽园生物环保科技有限公司提供。0071213不同菌剂对牛粪发酵升温效果的研究0072将牛粪170G及玉米秸秆粉80G装入罐头瓶中混合均匀，调节含水量60左右，封口，115灭菌15MIN，自然冷却后放入冰箱中使其温度降到8后接种，分别接入枯草芽孢杆菌、黑曲霉、里氏木霉和酵母，接种量4。酵母在2蔗糖溶液中用40复水15MIN，然后降温到30活化2H后接入。对照组以蒸馏水代替。置于保温杯中于8冰箱中培养，每隔12H记录温度。0073214功能菌剂不同添加量对牛粪发酵升温效果的影响0074共准备28个罐头瓶。每个罐头瓶内装畜禽粪便170G，玉米秸秆粉80G，混合均匀，封口后于115灭菌15。

20、MIN。0075取其中17号瓶，各加入黑曲霉10G、里氏木霉10G、酵母10G，再分别加入芽孢杆菌0G、05G、10G、15G、20G、25G、30G。0076取其中814号瓶，各加入芽孢杆菌10G、里氏木霉10G、酵母10G，再分别加入黑曲霉0G、05G、10G、15G、20G、25G、30G。说明书CN104211506A5/10页70077取其中1521号瓶，各加入黑曲霉10G、芽孢杆菌10G、酵母10G，再分别加入里氏木霉0G、05G、10G、15G、20G、25G、30G。0078取其中2228号瓶，各加入黑曲霉10G、里氏木霉10G、芽孢杆菌10G，再分别加入酵母0G、05G、10。

21、G、15G、20G、25G、30G。0079将28个罐头瓶置冰箱中8条件下发酵，间隔12小时记录温度，考察功能菌剂不同添加量对升温效果的影响。0080215不同菌剂对牛粪发酵升温效果的工厂化验证试验0081工厂化验证试验在武汉瑞泽园生物环保科技有限公司进行。以新鲜牛粪为主要原料，添加玉米秸秆粉作为堆肥发酵的辅料，调节含水量60左右，采用机械方式混合及翻堆。堆高1M，圆锥状。当温度升高到30以上开始翻堆，每天1400翻堆一次。堆肥量为10吨，共设5个试验组，分别添加酵母、枯草芽孢杆菌、木霉和黑曲霉，接种量1，对照组用玉米秸秆粉代替菌剂。翻堆前测量堆体温度，每隔24小时测定表层下15CM温度，分别。

22、取锥状堆肥每边中部及顶部5点测定。在堆肥起始和终止时取样，取样点在表层下25CM，分别为锥状堆肥每边中部及顶部5点，样品量200G左右，存于4冰箱中保存。当无明显恶臭时终止发酵。0082216最佳菌剂组合的工厂化验证试验0083以武汉瑞泽园生物环保科技有限公司的新鲜牛粪为主要原料，添加玉米秸秆粉为辅料，调节含水量60左右，采用机械方式混合、人工翻堆。堆肥量05吨/堆，共设4个处理，2个重复，分别为A组为接种最佳菌剂组合发酵剂；B组为空白对照；C组为接种平均配方发酵剂；D组为接种无酵母的发酵剂。具体配方如表1。堆高05M，圆锥状。当温度升高到30以上开始翻堆，每天1400翻堆一次，接种量1，对照。

23、组用玉米秸秆粉代替菌剂。0084表3最佳菌剂组合的效果验证试验设计00850086217种子发芽率的测定0087样品浸出液的制备150ML的三角瓶中取10G堆肥试验样品，加入90ML的蒸馏水，加入大约1020颗玻璃珠，120R/MIN的摇床上震荡30MIN，沉淀30MIN，取上清液。0088培育白菜种子在洁净培养皿中铺上一层滤纸，滤纸大小与平皿大小相吻合。平皿中注入5ML的样品浸出液，使滤纸充分湿润。然后在滤纸上均匀的放置10粒颗粒完整的白菜种子，放入25培养箱箱中培养3D后取出检测。采用蒸馏水代替样品浸出液作为对照组。0089种子发芽指数的测定使用直尺分别测量并记录种子发芽后的根长和茎长，并。

24、且说明书CN104211506A6/10页8记录没有发芽的种子数。计算公式种子发芽指数GIGERMINATIONINDEX浸提液种子发芽率发芽根长/空白液种子发芽率发芽根长100。0090218含水量的测定0091将玻璃平皿105烘干05H，冷却后记录质量M0。取待测样品10G左右加入上述烘干的玻璃平皿中，称重M1。在105烘干4H6H称量M2。含水量按照以下公式计算WM1M2/M1M0100。009222结果与分析0093221不同菌剂对牛粪发酵升温效果的小试研究0094在供试的4种功能菌剂中，对牛粪发酵升温效果的顺序依次是芽孢杆菌、黑曲霉、木霉、酵母。0095从图5中可以看出，升温效果最好。

25、的是枯草芽孢杆菌，升温可达5，可能是因为芽孢在萌发时产生大量的生物热，使系统快速升温，而酵母菌在8下活性不高，与空白对照的升温差别不大。0096222枯草芽孢杆菌不同添加量对堆肥升温的效果0097枯草芽孢杆菌在固体发酵的过程中，产生大量的芽孢。芽孢在适宜条件下萌发，能产生大量的热量使得系统升温。而且枯草芽孢杆菌能产生大量的蛋白酶和淀粉酶，分解牛粪中的粗蛋白和淀粉。0098从图6中可以看出，混菌培养中芽孢杆菌的添加量为15G时，发酵剂表现的活性最强。0099223黑曲霉不同添加量对堆肥升温的效果0100黑曲霉属于霉菌，在固体发酵生产黑曲霉菌剂的过程中形成大量黑色孢子，孢子在适宜温度和湿度条件下萌。

26、发。在试验材料中加入的辅料秸秆粉含有大量难以被其它类型的微生物分解和利用的纤维素与半纤维素，却可作为黑曲霉孢子萌发及菌丝生长的碳源物质。黑曲霉在利用原辅料中纤维素和半纤维素的过程中产生大量的热。0101从图7中可以看出，混菌中添加10G黑曲霉时，发酵剂表现的活性最强。0102224里氏木霉不同添加量对堆肥升温的效果0103从图8中可以看出，混菌中木霉的最佳剂量为15G，即添加15G木霉时，发酵剂表现的活性最强。试验所用里氏木霉为纤维素酶高产菌株，固体发酵的菌剂中含有大量的纤维素酶，能够分解原辅料中的纤维素作为碳源。0104225酵母不同添加量对堆肥升温的效果0105从图9中可以看出，酵母的添加。

27、量与升温关系不大，进一步验证了单因素试验的结果酵母的添加对堆肥升温效果不明显。试验所用酵母为高温型酿酒酵母。一般的酵母只能利用单糖或低聚糖作为碳源，而不能利用淀粉。测得试验所用牛粪中还原糖的含量为2413MG/G，不能够为酵母的生长提供足够的碳源，所以升温缓慢。0106综合上述的单因素实验结果可知，牛粪堆肥中四种试验菌株的最佳比例为枯草芽孢杆菌黑曲霉木霉323。0107226不同菌剂对牛粪发酵升温效果的工厂化中试结果0108堆肥中嗜热微生物的最适温度为5560，在此温度下能大量降解有机质并且快速分解纤维素。堆肥过高的温度会快速消耗有机质，降低堆肥产品的质量。然而温度过说明书CN10421150。

28、6A7/10页9低也不利于堆肥的腐熟，堆肥中的微生物在40左右时的活性只有最适温度的2/3左右，这会使得有害物质分解缓慢，堆肥时间延长，并且不利于堆肥的腐熟。所以在提高堆肥温度的同时，采用翻堆的方式对堆肥进行通气和降温，使其温度在5560，达到最高的生物降解活性。0109由图10可见，堆肥开始一天内，各组升温效果差别不大。但一天以后添加菌剂的试验组温度加速上升，而未添加任何菌剂的空白对照组升温持续平缓。并且，添加黑曲霉和木霉对升温效果最明显，黑曲霉在早期升温效果显著，而添加木霉在升温中后期有明显的加速升温作用。这可能由于黑曲霉和木霉菌剂中有大量未萌发的孢子，孢子在堆肥系统中萌发产生热量导致升温。

29、加速。试验中枯草芽孢杆菌升温效果低于其他三种菌剂，这与实验室小试的结果存在差异。可能是由于小试的起始温度为8，而中试的起始温度在14，此时更加利于真菌孢子的萌发，从而使得黑曲霉和木霉的升温效果好于枯草芽孢杆菌。酵母在升温过程中也体现出了一定的活性，可能是因为堆肥中的土著微生物将淀粉等分解为单糖或低聚糖，作为酵母生长的碳源。0110227最佳菌剂组合的效果验证01114种发酵剂配比对堆肥的升温效果试验如图11所示，在A组中最佳菌剂组合之后，在堆肥的第二天温度可以达到60的高温，而B、C、D三组均在第四天达到60高温。由此可见使用优化配方的发酵接种剂可以缩短堆肥初期升温时间，令堆肥快速进入高温期。。

30、0112到目前为止学者们从堆肥的物理、化学、生物学变化提出了多种评价堆肥腐熟度的指标。用生物学方法测定堆肥的植物毒性是检验堆肥腐熟度的有效方法。发芽指数GI是通过检验堆肥对植物发芽是否产生抑制作用来评价堆肥无害化程度的指标，它不但能检测堆肥样品的植物毒性水平，而且能预测堆肥植物毒性的变化。0113有机肥是应用于作物生产的。种子发芽指数作为生物学指标，能够很客观的反映出堆肥产品的应用安全性，是比较可靠的腐熟度评价指标。有研究者认为，在试验中，如果GI50，表明堆肥已腐熟并达到了可接受的程度，即基本没有毒性。本试验中试产品的种子发芽指数见表2。0114表4最佳菌剂组合的效果验证试验的发芽指数测定0。

31、1150116试验结果显示，所有实验组的种子发芽指数均大于50，基本腐熟。A组接种最佳菌剂组合种子发芽指数889，腐熟最完全，基本上消除了由于腐熟不完全对植物发芽的抑制作用。这是因为A组升温快，高温期时间相对较长，腐熟更加完全。所以，添加优化配方的发酵接种剂对堆肥的成熟起到了良好的促进作用。在实际生产中，可以缩短生产时间，降低生产成本，提高堆肥场地利用率，降低堆肥场的建设费用。0117分别研究了酵母、枯草芽孢杆菌、木霉与黑曲霉四种微生物对牛粪堆肥发酵的促进作用，并探讨几种微生物在堆肥发酵时的相互作用，同时得到一组能令牛粪堆肥快速升温腐熟的高效微生物组合。试验结果显示，此高效微生物组合的配比为枯。

32、草芽孢杆菌黑说明书CN104211506A8/10页10曲霉里氏木霉323，酵母在升温过程中所起作用不明显。中试结果显示，用此微生物组合，可以令堆肥在10天左右腐熟，并且使得牛粪堆肥产品的种子发芽指数分别提高217。0118实施例10119葡萄环保肥料的制备方法，包括以下步骤01201按上述的重量份数比计称取75份的有机肥、15份的无机肥、10份的微量元素、05份的发酵复合菌、1份的酵素菌、6份的腐植酸、5份的氨基酸和2份的假单胞菌HN103；0121枯草芽孢杆菌、酵母菌、黑曲霉和里氏木霉重量比为2211；有机肥中牛粪、麸皮和豆饼的重量比1011；无机肥中氮、磷和钾的重量比为111；微量元素中。

33、钙、镁、硫、硼、锌、硒和钼的重量比为2215274；01222将发酵复合菌与水按重量比15混合均匀，得到稀释菌液；01233将步骤2中的稀释菌液加入有机肥，混合均匀，堆积成堆，循环翻转，发酵1015天，即可达到基本腐熟状态，得到一级发酵物；01244向步骤3中得到的一级发酵物中加入酵素菌，发酵至完全腐熟，低温干燥，粉碎得到二级发酵物；01255向步骤4中二级发酵物中加入无机肥、微量元素、腐植酸、氨基酸和假单胞菌，混合均匀造粒成球，分拣得到葡萄环保肥料。0126实施例20127葡萄环保肥料的制备方法，包括以下步骤01281按上述的重量份数比计称取85份的有机肥、5份的无机肥、3份的微量元素、01。

34、份的发酵复合菌、1份的酵素菌、2份的腐植酸、1份的氨基酸和2份的假单胞菌HN103；0129枯草芽孢杆菌、酵母菌、黑曲霉和里氏木霉重量比为2422；有机肥中牛粪、麸皮和豆饼的重量比1033；无机肥中氮、磷和钾的重量比为211；微量元素中钙、镁、硫、硼、锌、硒和钼的重量比为21053191；01302将发酵复合菌与水按重量比150混合均匀，得到稀释菌液；01313将步骤2中的稀释菌液加入有机肥，混合均匀，堆积成堆，循环翻转，发酵1015天，即可达到基本腐熟状态，得到一级发酵物；01324向步骤3中得到的一级发酵物中加入酵素菌，发酵至完全腐熟，低温干燥，粉碎得到二级发酵物；01335向步骤4中二级。

35、发酵物中加入无机肥、微量元素、腐植酸、氨基酸和假单胞菌，混合均匀造粒成球，分拣得到葡萄环保肥料。0134实施例30135葡萄环保肥料的制备方法，包括以下步骤01361按上述的重量份数比计称取70份的有机肥、10份的无机肥、7份的微量元素、03份的发酵复合菌、2份的酵素菌、5份的腐植酸、4份的氨基酸和2份的假单胞菌HN103；0137枯草芽孢杆菌、黑曲霉和里氏木霉的重量比为323；有机肥中牛粪、麸皮和豆饼的重量比1022；无机肥中氮、磷和钾的重量比为111；微量元素中钙、镁、硫、硼、锌、硒和钼的重量比为22084183；01382将发酵复合菌与水按重量比150混合均匀，得到稀释菌液；说明书CN1。

36、04211506A109/10页1101393将步骤2中的稀释菌液加入有机肥，混合均匀，堆积成堆，循环翻转，发酵1015天，即可达到基本腐熟状态，得到一级发酵物；01404向步骤3中得到的一级发酵物中加入酵素菌，发酵至完全腐熟，低温干燥，粉碎得到二级发酵物；01415向步骤4中二级发酵物中加入无机肥、微量元素、腐植酸、氨基酸和假单胞菌，混合均匀造粒成球，分拣得到葡萄环保肥料。0142二、实施例3制备得到葡萄环保肥料进行大田实验01431、材料与方法014411试验地点；新洲区潘塘舒祠村。014512供试土壤0146试验地土壤属潮土田，肥力中等。土壤理化基本形状如下PH635水提取、有机质241。

37、G/KG、碱解氮142MG/KG、有效磷108MG/KG、速效钾84MG/KG、CD034MG/KG、PB704MG/KG、AS138MG/KGHG051MG/KG。0147土壤测试方法有机质重络酸钾容量法，碱解氮1N氢氧化钠扩散法，速效磷05M碳酸氢钠浸提、钼锑抗比色法，速效钾1N醋酸铵浸提、火焰光度法，PH值电位法，铅、砷、镉、汞火焰光度法014813供试肥料0149葡萄环保肥料中粉剂，N、P、K含量5，有机质50，有效活菌数1亿/克，壳寡糖含量01，PH71，015014供试作物0151葡萄015215试验方法0153采用随机区排列，共设4个处理，四次重复，计15个小区，小区面积20M2。

38、。处理如下0154处理1常规施肥施药2次0155处理2常规施肥等量细沙200KG/667M2施药2次0156处理3常规施肥葡萄环保肥料200KG/667M2施药2次0157处理4常规施肥葡萄环保肥料200KG/667M2施药1次0158葡萄环保肥料在葡萄移栽前基施，等量细沙用量相同。015916栽培管理0160常规施肥为每亩基施早稻配方肥总养分25，1267，返青期追尿素5KG。，用量为大量元素水溶肥料6G兑水18KG。处理2喷等量清水。其他田间管理相同。早稻于4月25日移栽，每亩18万穴，5月6日追施尿素，7月22日收割。01612、结果与分析016221产量分析与讨论01637月20日取样。

39、考种，每小区随机取5穴，。处理3比处理2增产22KG/667M2，增幅为574，处理间差异达显著水平；处理4产量略低于处理3，但差异不显著，未达到005水平。0164试验表明施用葡萄环保肥料，每株固有一定的增产作用；处理3与处理4的试验说明书CN104211506A1110/10页12结果表明，减少1次施药对葡萄产量影响不明显，说明葡萄环保肥料具有一定的抗病虫害的能力。016522葡萄重金属分析与讨论0166种植试验结束后，对不同处理后的土壤中PB、AS、CD、HG有效态重金属含量进行了检测，从处理1来看，土壤中的重金属污染物符合土壤环境标准GB156181995中的二级标准，符合维护人体健康。

40、的土壤限制值；处理3、4与处理1相比，施用葡萄环保肥料后，能降低土壤中PB含量89，降低土壤中CD含量88，对AS和HG作用不明显。0167本次试验还对不同处理下对葡萄中的PB、AS、CD、HG重金属含量进行了检测，试验发现各处理组的葡萄均未超过但各处理PB、AS和CD都处于比较高的水平，存在着超标的风险；试验还发现，施用葡萄环保肥料后，能降低葡萄中PB和CD含量12左右，对AS和HG作用不明显。0168葡萄环保肥料，对葡萄有明显的增产作用。每667M2增产22KG，增产率574。0169其它未详细说明的部分均为现有技术。尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述，但它仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部实施例，人们还可以根据本实施例在不经创造性前提下获得其他实施例，这些实施例都属于本发明保护范围。说明书CN104211506A121/6页13图1图2图3A说明书附图CN104211506A132/6页14图3B图4A图4B说明书附图CN104211506A143/6页15图4C图4D图4E说明书附图CN104211506A154/6页16图5图6说明书附图CN104211506A165/6页17图7图8图9说明书附图CN104211506A176/6页18图10图11说明书附图CN104211506A18。