技术领域
本发明涉及一种药物组合物，具体涉及一种治疗外阴和/或阴道疾病的药物组合 物，其以普罗雌烯和咪康唑为活性成分。
背景技术
由念珠菌引起的外阴和阴道疾病是一种条件致病菌感染，80％-90％由白色念珠 菌引起，10％-20％为其他念珠菌及球拟酵母菌属感染。在国内，念珠菌感染在女性 生殖感染中，患病情况相当普遍，而在美国，患患者数占女性下生殖道感染的第二 位；通过性交可使男女双方患病，妇女患者其配偶或性伴的5％-20％可出现念珠菌 性龟头炎。
本病最突出的症状为白带增多和外阴阴道瘙痒。白带并不一定均具有典型的物征， 可有各种性质的白带。其中约一半患者的白带为大量水样液体(清沏浆液性渗出物) 或脓性而无典型的白色片状物，阴道检查可见阴道粘膜呈中度发红和水肿，患者仅 感久阴潮湿而无严重的瘙痒或灼热感；另半数患者则有本病典型的白色或黄色凝乳 状、软膏样、糊状、白色颗粒样或片状粘稠性白带，无味或略带臭味，阴道粘膜可 因分泌物的刺激而出现明显红肿，有成片或灰白色的伪膜(类似口腔鹅口疮)，易剥 离，若除去薄膜其下为红斑、糜烂或浅溃疡。本病外阴部的损害可呈轻度红斑的湿 疹样改变至严重的脓疱、糜烂和剥蚀，严重时可发生溃疡(此时有疼痛)，也可覆有 白色伪膜，在急性期小阴唇肿胀、阴道前庭红肿；有时病损可扩展至会阴及肛门周 围，甚至到达生殖腔皱壁，淋巴结肿大、压痛；如病程较长时则皮肤可变得肥厚、 干燥、角化和皲裂。
念珠菌性外阴炎往往与阴道炎并存，故外阴和阴道口部瘙痒是该病患者另一突出 的表现，有时可十分剧烈，影响睡眠，患者常不自觉地搔抓，剧痒往往是促使患者 就诊的一个重要原因。本病严重时，也可出现尿道口疼痛、排尿困难和性交痛，而 瘙痒症状在妊娠患者中往往更为严重。
咪康唑是一种广谱抗菌药，对多种真菌、尤其是念珠真菌有抗菌作用，对某些 革兰氏阳性菌也有抗菌力。其作用机制是抑制真菌细胞膜的合成以影响代谢的过程， 目前在临床上的使用量为咪康唑100mg/次/天，阴道内用，连用3日。但副作用较明 显，表现为局部刺激和红肿。
普罗雌烯通过发挥雌激素功能促进女性阴道上皮粘膜细胞的分化和成熟，同时 具有合成及分泌糖原的功效，并可促进Doderlein氏杆菌(阴道嗜酸乳杆菌)的再生， 产生乳酸，刺激改变阴道内的酸性环境。普罗雌烯在临床上应用广泛，主要为乳膏、 软胶囊、栓剂，用以治疗外阴阴道疾病，如痿缩性阴道炎、外阴痿缩、阴道口萎缩 等，亦可用于皮脂溢性皮炎。普罗雌烯目前在临床上的使用量一般为10mg/次/天。
目前存在普罗雌烯、咪康唑分别和其他药物组合的用药方式，在普罗雌烯联合 制剂中，其用量仍为10mg/次/天；在咪康唑联合制剂中，其用量为120mg/次/天。虽 然效果较单剂量有所提高，但仍不很理想，且副作用依然存在，表现为局部刺激和 红肿。目前尚没有咪康唑和普罗雌烯联合使用治疗外阴和阴道疾病的报道或相应的 技术启示。
发明内容
本发明人首次发现：普罗雌烯和咪康唑按一定比例制成复方制剂使用时，在治 疗念珠菌引起的疾病方面，除了通过各自的作用机制发挥疗效之外，普罗雌烯对咪 康唑的抗菌作用还有协同作用，提高妇女生殖感染的治愈率，缩短治疗疗程，降低 毒性，减少药物局部刺激作用。这是因为普罗雌烯不能通过扩散穿过阴道壁及富水 的组织间隙，不能到毛细血管而被吸收，实验证实局部应用普罗雌烯吸收率小于1％， 因此局部引用普罗雌烯没有刺激全身的不良反应。另外，普罗雌烯除了发挥自身的 抗炎症的作用之外，更重要的是普罗雌烯提高患者自身的免疫力，激发患者机体自 身的修复功能，而这一功能可以降低咪康唑的不良反应，同时加速患者自身的康复 治疗，表现为不良反应的症状消失，治疗效果提高，康复的疗程缩短。而简单的普 罗雌烯和咪康唑联合用药的情况下，药物到达靶点的量或多或少，药效不稳定，难 以控制，药效效果不明显。
因此本发明的目的是提供一种外用药物组合物，为女性阴道感染，尤其是念珠 真菌、革兰氏阳性菌的感染的快速治疗提供了一个更好的选择。
因此，本发明提供了一种治疗外阴和/或阴道疾病的药物组合物，其含有普罗雌 烯和咪康唑作为活性成分，二者的重量比为1∶5～1∶8。
在一个实施方案中，本发明的药物组合物中普罗雌烯的日剂量为6～10mg，咪康 唑的日剂量为30～80mg。
在一个优选的实施方案中，本发明的药物组合物中普罗雌烯的日剂量为 6.5mg～8mg。在一个更优选的实施方案中，普罗雌烯的日剂量为7mg。
在另一个优选的实施方案中，本发明的药物组合物中咪康唑的日剂量为 40～60mg。在一个更优选的实施方案中，咪康唑的日剂量为50mg。
本发明的药物组合物可以包括药学上可接受的载体，可以配制成适于阴道内给 药的剂型，例如但不限于栓剂、胶囊、片剂、乳膏和洗液。
本发明的药物组合物用于治疗由念珠菌引起的外阴和/或阴道疾病，优选阴道给 药，每日一次。该组合物携带和使用方便，有利于增强患者对治疗方案的依从性。
具体实施方式
以下通过优选实施例具体说明本发明的各个方面和特征。本领域的技术人员应该 理解，这些实施例只是用于说明目的，而不限制本发明的范围。本发明的保护范围 只受权利要求书的限制。在不背离权利要求书范围的条件下。本领域的技术人员可 以对本发明的各个方面进行各种修改和改进，这些修改和改进也属于本发明的保护 范围。举例来说，虽然本发明实施例中将本发明的药物组合物制成胶囊，但本领域 的技术人员在阅读本申请文件后，将易于根据本发明的描述制备栓剂、片剂、乳膏、 洗液等其他形式的本发明药物组合物，因此这些剂型位于本发明的保护范围之内。
另外，需要注意的是，除非特别指明，下面实施例中所用的各种材料和试剂都 是本领域中常用的材料和试剂，可以通过常规的商业途径获得；所用方法均为本领 域技术人员公知的常规方法。
实施例1
按照下列配方，以胶囊的生产工艺制得符合质量标准的软胶囊：
配方1
组分 含量(mg/粒)
普罗雌烯 10
咪康唑 50
白凡士林 500
角沙烷 900
尼泊金乙酯 200
失水山梨醇倍半油酸酯 加至2000mg，制成1000粒
配方2
组分 含量(mg/粒)
普罗雌烯 8
咪康唑 60
白凡士林 500
角沙烷 900
尼泊金乙酯 200
失水山梨醇倍半油酸酯 加至2000mg，制成1000粒
配方3
组分 含量(mg/粒)
普罗雌烯 8
咪康唑 55
白凡士林 400
角沙烷 900
尼泊金乙酯 200
失水山梨醇倍半油酸酯 加至2000mg，制成1000粒
配方4
组分 含量(mg/粒)
普罗雌烯 7
咪康唑 35
白凡士林 300
角沙烷 800
尼泊金乙酯 200
失水山梨醇倍半油酸酯 加至2000mg，制成1000粒
配方5
组分 含量(mg/粒)
普罗雌烯 7
咪康唑 50
白凡士林 400
角沙烷 800
尼泊金乙酯 200
失水山梨醇倍半油酸酯 加至2000mg，制成1000粒
以上配方制剂的制备方法如下：
(1)分别称取白凡士林和适量角沙烷放在一起加热溶解，保温60℃左右，备用， 为1液；
(2)称取普罗雌烯和剩余量的角沙烷在一起，搅拌，使普罗雌烯完全溶解，再加 入咪康唑使其搅拌均匀后，然后加入已称重的失水山梨醇倍半油酸酯、尼泊金乙酯， 搅拌溶解后，与1液混合，用高速乳匀机充分混合，即制得内容物；
(3)根据配方加入预定量的明胶、甘油、水、尼泊金乙酯，于60℃左右化胶，并 对胶液真空脱气处理，供胶丸压制机器上使用；
(4)将药液和胶液引入到制备胶囊的机器中，调节该机器使每个软胶囊中诸如配 方量的药液，制备在明胶壳内含有普罗雌烯和咪康唑的软胶囊。
实施例2：局部刺激性以及急毒研究，
受试药物：普罗雌烯/咪康唑复方软胶囊，每粒内容物(2g)含普罗雌烯7mg， 咪康唑50mg的软胶囊，每克内容物含药物成分0.0285g。
高剂量：每只家兔每天给药1.0g，一次给药0.5g，每日两次，药物成分0.0285g， 平均11.9mg/kg，是人用量的20倍。每只大白鼠一次给药0.2g，每日一次(约0.2g) 药物成分5.7mg，平均23mg/kg，是人用量的40倍。
中剂量：每只家兔每天给药0.5g，一次给药0.25g，每日两次，药物成分0.0143g， 平均5.95mg/kg，是人用量的9.5倍。每只大白鼠一次给药0.1g，每日一次(约0.1g) 药物成分2.85mg，平均11.5mg/kg，是人用量的20倍。
低剂量：每只家兔每天给药0.2g，一次给药0.1g，每日两次，药物成分0.0057g， 平均2.38mg/kg，是人用量的3.8倍。每只大白鼠一次给药0.05g，每日一次(约0.05g) 药物成分1.43mg，平均5.75mg/kg，是人用量的10倍。
阴性对照：复方软胶囊的赋形剂，其内不含药物成分。
雌性家兔，体重2.25～2.55kg；大白鼠雌性0.235～0.260kg，均由中国医科大学临 床动物试验室提供。20只雌性家兔，30只雌性大白鼠，随机分为上述5组，每组4 只家兔，6只大白鼠。受试组和阴性对照组用1ml注射器向阴道内注入药物，家兔给 药两次/天，观察7天。主要观察指标为动物的活动、进食、排便、毛皮、阴道外观、 有无水肿、充血、破溃及分泌物有无异常等。
末次给药后放血处死家兔，颈椎脱臼处死大白鼠。①解剖盆腔肉眼观察生殖系 统及周围组织器官有无水肿、充血、糜烂等异常现象；②解剖阴道肉眼观察阴道内 壁颜色、水肿、充血、糜烂、溃疡等异常变化；③摘取部分动物阴道进行病理切片， 并观察、照相。
结果发现给药和观察期间，受试组和阴性对照组动物活动、进食、排便、皮毛 等均无异常，体重、呼吸、心率、无明显异常。阴道解剖肉眼观察显示受试组和阴 性对照组都无充血、肿胀及周围组织粘连等异常现象。随机选择受试动物阴道作病 理切片，进行组织学检查，其结果无异常病理改变。
受试组和阴性对照组的动物的活动情况一切正常，无其它异常情况，在生殖器 用药处没有红肿现象，无局部刺激。解剖观察肾脏，肝脏，一切正常，不存在异常 或损伤。
实施例3：局部用药的长期毒性研究
受试药物：同上
高剂量：每只大白鼠一次给药0.2g，每日一次(约0.2g)药物成分5.7mg，平 均23mg/kg，是人用量的40
中剂量：每只大白鼠一次给药0.1g，每日一次(约0.1g)药物成分2.85mg，平 均11.5mg/kg，是人用量的20倍
低剂量：每只大白鼠一次给药0.05g，每日一次(约0.05g)药物成分1.43mg， 平均5.75mg/kg，是人用量的10倍
雌性大白鼠的体重为0.235～0.260kg。三个剂量每日给药一次，连续观察30天， 重复试验三次，其结果显示动物全身及阴道局部均未见毒性反应和局部刺激症状； 切片制片显微镜观察也未见病理变化，表明三个剂量组药物对阴道各层未有致病作 用。
实施例4：药效学研究
为了研究普罗雌烯/咪康唑的软胶囊的药效学，我们设计了体外药效学研究，将 常见的阴道感染病菌培养后，用软胶囊内的内容物进行抗菌研究，结果表明，软胶 囊对念珠真菌、革兰氏阳性菌显示出有效抗菌作用。
实施例5：临床研究
在3家医院对96例患者进行了临床研究，其中对照组为两组，试验组一组，每 组各32例患者，患者满足念珠菌感染患者的要求，试验组与对照组在治疗前，症状、 体征及实验室检查均无统计学差异，治疗期间以及治疗后均以症状、体征及实验室 检查为判定的指标；
疗效判定：
治愈：症状完全消失，实验室检查阴性。
有效：症状完全消失，但实验室检查阳性或症状明显缓解，实验室检查阴性。
无效：症状无改善，实验室检查阳性。
试验药物：普罗雌烯/咪康唑复方软胶囊(按照上述配方5制备)
含普罗雌烯7mg+咪康唑50mg
药物用法：晚上睡前由受试者用手指将药物软胶囊送入阴道深部，每日一次，连续 六天为一疗程。
对照药物：1、咪康唑栓剂100mg
2、普罗雌烯软膏7mg+咪康唑栓剂50mg
药物用法：1、咪康唑栓剂的用法同试验药物
2、先将普罗雌烯软膏的用法将足量的乳膏涂满阴道内需要治疗的部位 的表面，然后在将咪康唑栓剂用手指将药物软胶囊送入阴道深部，每日 一次，连续六天为一疗程。
统计方法：试验组和对照组的临床疗效、总疗效用Ridit分析进行比较；用SAS6.12 软件进行统计。
对一组96例外阴阴道念珠菌病患者，随机分为咪康唑组、普罗雌烯软膏+咪康 唑栓剂组，普罗雌烯(7mg)/咪康唑(50mg)复方软胶囊组，进行为期20天的观察，结 果见下表1。
表1普罗雌烯+咪康唑复方软胶囊组和对照组对外阴阴道念珠菌病疗效的比较 组别 痊愈 显效 有效 无效 总有效率 无效率 普罗雌烯软膏+咪康唑栓剂 (N＝32) 15 8 8 1 97％ 3％ 咪康唑(N＝32) 12 12 5 3 90.6％ 9.4％ 普罗雌烯/咪康唑复方软胶囊 (N＝32) 18 10 2 0 100.0％ 0％
从以上实验结果可以看出，试验组痊愈+显效+有效共32例，总有效率为100％， 对照组中，咪康唑组总有效率为90.6％，两组之间统计学差异显著(p＜0.05)。而试 验组与对照组(普罗雌烯软膏+咪康唑栓剂)之间在总有效率上无统计学差异，但痊 愈率上有明显的差异，试验组56％，对照组46％，两者统计有显著的统计学差异 (P＜0.05)。
在治疗过程中，试验组与对照组在对患者的治疗疗程上显示出不同的总有效率， 见下表2。
表2
以上数据显示，试验组在治疗疗效所需的时间上，显示很好的优势；减短了用 药的量和时间，显示出了成本优势。
实施例6：安全性评价：
在实验的过程中，对照组咪康唑栓剂组有3例患者显示出轻微的红肿现象，有 局部刺激作用，对照组(普罗雌烯软膏7mg+咪康唑栓剂50mg)和试验组(普罗雌 烯/咪康唑复方软胶囊)没有红肿刺激现象和其他不良反应。表明普罗雌烯/咪康唑复 方软胶囊有较好的安全性。
综上所述，普罗雌烯/咪康唑软胶囊在治疗念珠真菌感染疾病上比单独使用普罗 雌烯软膏或单独使用咪康唑栓剂或简单联合普罗雌烯软膏与咪康唑栓剂的疗效要显 著，疗程短且更安全可靠。