技术领域
本发明涉及兽药制剂领域，特别涉及一种复方氧氟沙星注射液。
背景技术
猪气喘病，又称猪支原体肺炎、猪地方流行性肺炎。是猪的一种慢性 、接触传染病，多呈慢性经过。病原为猪肺炎支原体，是一种无细胞 壁、呈多形性、不易着色，能在无细胞的人工培养基生长的微生物。 不同品种、年龄、性别的猪均易感，但地方品种猪易感性更高。疾病 虽无季节性，但在气候剧变、阴湿寒冷时易发生，饲养管理和卫生条 件差、饲料品质不良、猪舍拥挤、通风不良等因素均可诱发本病。主 要症状为咳嗽和气喘。根据病情，可分三种类型。急性型：常见于新 发病的猪群，多发生于本地品种猪，尤其是仔猪、怀孕母猪和哺乳母 猪更为多见。病猪常突然发病，呼吸次数剧增，严重者张口喘气，口 鼻流沫，发出哮鸣声似拉风箱，呈犬坐式，咳嗽低沉或痉挛性阵咳。 若无继发感染，则体温一般不高。食欲减少。慢性型：常见于老疫群 的猪或急性转为慢性。长期咳嗽，特别在清晨及晚间更为明显，或进 食及运动时咳嗽。初为单咳，严重时呈痉挛性咳嗽。呼吸次数增加， 呈腹式呼吸，显示呼吸困难。咳嗽及气喘症状，时而明显，时而缓和 。病猪常流鼻涕，有眼屎，咳喘重时，可视教膜发钳，食欲减退，被 毛无光泽，瘦弱。隐性型：症状不明显，偶见咳嗽和气喘，以外来猪 、杂交猪及老疫区猪多见。
目前猪气喘病主要以抗生素治疗为主，通常认为猪支原体对青霉素和 磺胺类药物，不敏感，但对壮观霉素、土霉素、卡那霉素敏感。故治 疗猪气喘病，现主要以土霉素、卡那霉素等药物为主，但治疗效周期 长，口服药物治疗周期短则2周，长则数月，效果并不理想。目前尚无 有效特效的复方注射类药物，现有治疗方法为多种药物配合注射，综 合治疗，保存及使用上具有诸多不便。
氧氟沙星是第三代喹诺酮类抗菌药。喹诺酮类抗菌药具有抗菌谱广， 抗菌活性强，给药方便，与常用抗菌药物无交叉耐药性，生产不需粮 食，价格比疗效相当的抗生素低廉，对轻、中、重各类感染均有良好 疗效等特点。氧氟沙星具有第三代喹诺酮类抗菌药物的特性，对多数 肠杆菌科的细菌如肺炎克雷白杆菌、变形杆菌属、伤寒沙门氏菌属、 志贺杆菌、部分绿脓杆菌、淋球菌、大肠杆菌等具有较强的抗菌活性 ，对部分葡萄球菌、肺炎链球菌、衣原体等也有良好的抗菌作用。
氧氟沙星作临床上常用胶囊、片剂等经口服给药的剂型，生物利用度 较低。市场 和临床上使用的氧氟沙星注射液剂型以大容量注射剂（即大输液）为 主，小容量注射剂（即水针）制备存在着氧氟沙星溶解度低，产品结 晶的问题。文献报道的工艺采用大量的盐酸、醋酸等酸性溶剂做为氧 氟沙星的助溶剂，但是在存放和临床使用中易发生产品结晶、可见异 物等问题，影响产品质量。同时由于大量强酸性物质的引入，注射时 往往造成剧烈的刺激和疼痛，给临床使用造成极大的不便。
磺胺间甲氧嘧啶钠（Sulfamonomethoxime Sodium）属磺胺类合成抗 菌药，是体内外抗菌作用最强的磺胺药，具有抗菌谱广、性质稳定、 不易变质、使用方便、能大量生产等优点。对大多数革兰氏阳性菌和 阴性菌都有较强抑制作用，细菌对此药产生耐药性较慢。主要用于各 种敏感菌所引起的各种疾病，如呼吸道、消化道、泌尿道感染，对猪 弓形虫病、猪水肿病，禽、兔球虫病有较好的疗效，局部灌注可治疗 乳腺炎和子宫内膜炎等。其抗菌机制是通过抑制叶酸的合成而抑制细 菌的生长繁殖。本品肌注后吸收良好，血中浓度高，乙酰化率低，且 乙酰化物在尿中溶解度大，不易发生结晶尿。
发明内容
本发明的目的在于提供一种见效快，治疗疗程短，不复发，治愈率高 的治疗猪气喘病的复方注射制剂。
为实现本发明的目的，本发明所采用的技术方案如下：一种复方氧氟 沙星注射液，每100ml注射液的复方氧氟沙星注射液含：
优选的上述复方复方氧氟沙星注射液，每100ml注射液含：
本发明的另一个目的是提供一种复方氧氟沙星注射液的制备方法，具 体制备步骤 如下：
步骤1：将适量的注射用水加热至95-100摄氏度，加入处方量的EDTA搅 拌溶解15-30分钟。
步骤2：降温至40-60摄氏度加入处方量的氧氟沙星和磺胺间甲氧嘧啶 钠搅拌溶解10-20分钟。
步骤3：降温至常温，加入处方量的维生素C，搅拌10-20分钟。
步骤4：在步骤3）获得的溶液中加入0.05-0.5%（w/v）的针用活性炭 ，40-60℃保温搅拌吸附10-30分钟，滤过脱炭后备用。
步骤5：将步骤4）滤液加注射用水至全量。
步骤6：将步骤5）制得的滤液用0.22或0. 45μm的微孔滤膜滤过，得 滤液。
步骤7：将步骤6）制得的滤液在120-122℃、0.15mpa灭菌15-20分钟， 分装，即得复方氧氟沙星注射液。
优选地，上述复方氧氟沙星注射液的制备方法为：
步骤1：将适量的注射用水加热至95摄氏度，加入处方量的EDTA搅拌溶 解30分钟。
步骤2：降温至50摄氏度加入处方量的氧氟沙星和磺胺间甲氧嘧啶钠搅 拌溶解20分钟。
步骤3：降温至常温，加入处方量的维生素C，搅拌10分钟。
步骤4：在步骤3）获得的溶液中加入0.1%（w/v）的针用活性炭，40℃ 保温搅拌吸附15分钟，滤过脱炭后备用。
步骤5：将步骤4）滤液加注射用水至全量。
步骤6：将步骤5）制得的滤液用0.22μm的微孔滤膜滤过，得滤液。
步骤7：将步骤6）制得的滤液在120℃、0.15mpa灭菌15分钟，分装， 即得复方氧氟沙星注射液。
本发明人在实验研究中惊奇的发现，在现有的氧氟沙星注射液中加入 适量的磺胺间甲氧嘧啶钠和维生素C，可以有效的治疗猪气喘病，在本 发明注射液处方中氧氟沙星和磺胺间甲氧嘧啶钠可以相互协同，治愈 率为60%左右，而维生素C的加入又可以增强这种协同作用，三者相互 作用，相互协同，猪气喘病的治愈率可达90%以上，总有效率可达96% 以上。本发明中三种有效成分相互协同，针对目前常见的猪气喘病， 一针起效，3-5针即可治愈。
此外，经本发明制备方法制备的复方氧氟沙星注射液制剂，易于存放 ，发明人对本发明注射液产品进行了6个月加速试验和长期试验，结果 表明，本发明产品保质期可达3年，保质期内无可见异物，无沉淀产生 ，产品质量稳定可靠。可见本发明复方制剂及其制备方法，很好地解 决了现有技术氧氟沙星小容量注射剂（即水针）制备存在的氧氟沙星 溶解度低，产品易结晶的问题。
具体的本发明与现有技术相比具有如下优点：
1）对猪气喘病，起效快，用药量小，用药次数少，治愈率高。
2）本发明制剂稳定性好，易于存放。
具体实施方式
现通过以下制剂实施例和试验实施例更详细的说明本发明，但不以任 何形式限制本发明。
制剂实施例1 制备复方氧氟沙星注射液100L
处方：
制备方法：
步骤1：将适量的注射用水加热至95摄氏度，加入处方量的EDTA搅拌溶 解30分钟。
步骤2：降温至60摄氏度加入处方量的氧氟沙星和磺胺间甲氧嘧啶钠搅 拌溶解20分钟。
步骤3：降温至常温，加入处方量的维生素C，搅拌10分钟。
步骤4：在步骤3）获得的溶液中加入0.05%（w/v）的针用活性炭，40 ℃保温搅拌吸附10分钟，滤过脱炭后备用。
步骤5：将步骤4）滤液加注射用水至100L。
步骤6：将步骤5）制得的滤液用0.22μm的微孔滤膜滤过，得滤液。
步骤7：将步骤6）制得的滤液在120℃、0.15mpa灭菌15分钟，分装， 即得复方氧氟沙星注射液。
制剂实施例2制备复方氧氟沙星注射液100L
处方：
制备方法：
步骤1：将适量的注射用水加热至98摄氏度，加入处方量的EDTA搅拌溶 解18分钟。
步骤2：降温至40摄氏度加入处方量的氧氟沙星和磺胺间甲氧嘧啶钠搅 拌溶解20分钟。
步骤3：降温至常温，加入处方量的维生素C，搅拌20分钟。
步骤4：在步骤3）获得的溶液中加入0. 5%（w/v）的针用活性炭，5 0℃保温搅拌吸附15分钟，滤过脱炭后备用。
步骤5：将步骤4）滤液加注射用水至100L。
步骤6：将步骤5）制得的滤液用0.45μm的微孔滤膜滤过，得滤液。
步骤7：将步骤6）制得的滤液在122℃、0.15mpa灭菌20分钟，分装， 即得复方氧氟沙星注射液。
制剂实施例3制备复方氧氟沙星注射液100L
处方：
制备方法：
步骤1：将适量的注射用水加热至95摄氏度，加入处方量的EDTA搅拌溶 解30分钟。
步骤2：降温至50摄氏度加入处方量的氧氟沙星和磺胺间甲氧嘧啶钠搅 拌溶解20分钟。
步骤3：降温至常温，加入处方量的维生素C，搅拌10分钟。
步骤4：在步骤3）获得的溶液中加入0.1%（w/v）的针用活性炭，40℃ 保温搅拌吸附15分钟，滤过脱炭后备用。
步骤5：将步骤4）滤液加注射用水至100L。
步骤6：将步骤5）制得的滤液用0.22μm的微孔滤膜滤过，得滤液。
步骤7：将步骤6）制得的滤液在120℃、0.15mpa灭菌15分钟，分装， 即得复方氧氟沙星注射液。
制剂实施例4制备复方氧氟沙星注射液100L
制备方法：
步骤1：将适量的注射用水加热至95摄氏度，加入处方量的EDTA搅拌溶 解30分钟。
步骤2：降温至50摄氏度加入处方量的氧氟沙星和磺胺间甲氧嘧啶钠搅 拌溶解20分钟。
步骤3：降温至常温，加入处方量的维生素C，搅拌10分钟。
步骤4：在步骤3）获得的溶液中加入0.1%（w/v）的针用活性炭，40℃ 保温搅拌吸附15分钟，滤过脱炭后备用。
步骤5：将步骤4）滤液加注射用水至100L。
步骤6：将步骤5）制得的滤液用0.22μm的微孔滤膜滤过，得滤液。
步骤7：将步骤6）制得的滤液在120℃、0.15mpa灭菌15分钟，分装， 即得复方氧氟沙星注射液。
制剂实施例5制备复方氧氟沙星注射液100L
处方：
制备方法：
步骤1：将适量的注射用水加热至95摄氏度，加入处方量的EDTA搅拌溶 解30分钟。
步骤2：降温至50摄氏度加入处方量的氧氟沙星和磺胺间甲氧嘧啶钠搅 拌溶解20分钟。
步骤3：降温至常温，加入处方量的维生素C，搅拌10分钟。
步骤4：在步骤3）获得的溶液中加入0.1%（w/v）的针用活性炭，40℃ 保温搅拌吸附15分钟，滤过脱炭后备用。
步骤5：将步骤4）滤液加注射用水至100L。
步骤6：将步骤5）制得的滤液用0.22μm的微孔滤膜滤过，得滤液。
步骤7：将步骤6）制得的滤液在120℃、0.15mpa灭菌15分钟，分装， 即得复方氧氟沙星注射液。
药理学实施例6
实验药物
①本发明复方氧氟沙星注射液，规格10ml（氧氟沙星0.4g、磺胺间甲 氧嘧啶钠0.1g、维生素C 0.2g)；辅料及制备方法同实施例3；
②氧氟沙星和磺胺间甲氧嘧啶钠注射液，规格10ml（氧氟沙星0.4g、 磺胺间甲氧嘧啶钠0.1g）；辅料及制备方法同实施例3；
③氧氟沙星注射液，规格10ml（氧氟沙星0.4g），辅料及制备方法同 实施例3；
④磺胺间甲氧嘧啶钠注射液，规格10ml（磺胺间甲氧嘧啶钠1g）；辅 料及制备方法同实施例3；
⑤维生素C注射液，规格10ml（维生素C 0.2g)；辅料及制备方法同实 施例3；
⑥本发明实施例1制备的复方氧氟沙星注射液；规格10ml；
⑦本发明实施例2制备的复方氧氟沙星注射液；规格10ml；
⑧本发明实施例4制备的复方氧氟沙星注射液；规格10ml；
⑨本发明实施例5制备的复方氧氟沙星注射液；规格10ml。
试验动物
试验所采用患病猪的品种为土三元杂，体重40-50kg，3月龄。临床症 状为痉挛性咳嗽、 气喘、呼吸加快、伴喘鸣声或腹肋扇动、精神沉郁、食欲减退。试验 前未经任何药物治疗。
试验方法
将患病猪450 头，随机分成9个实验组，每组50头，分栏圈养。
各实验组对应的治疗药物如下：
实验1组：本发明复方氧氟沙星注射液；
实验2组：氧氟沙星和磺胺间甲氧嘧啶钠注射液；
实验3组：氧氟沙星注射液；
实验4组：磺胺间甲氧嘧啶钠注射液；
实验5组：维生素C注射液；
实验6组：本发明制剂实施例1制得复方磺胺间甲氧嘧啶钠注射液；
实验7组：本发明制剂实施例2制得复方磺胺间甲氧嘧啶钠注射液；
实验8组：本发明制剂实施例4制得复方磺胺间甲氧嘧啶钠注射液；
实验9组：本发明制剂实施例5制得复方磺胺间甲氧嘧啶钠注射液；
以上各组实验猪，按0.1ml/kg体重肌肉注射，每天1次，连续3天。用 药后密切观测疗效情况，并为每头猪建立个体档案，用药疗程为3天， 停药后观察7天。
试验在同一栋猪舍进行，采用半敞开式饲养，定时自由采食，自由饮 水，饲料为猪场饲料车间自行配制的不含任何药物的全价中猪料。
临床疗效的差异性分析用生物统计卡方检验。
疗效判断标准
治愈：治疗后患猪咳嗽、气喘症状完全消失，体重、精神、食欲恢复 正常，观察期不复发，判为治愈，计算治愈率。
有效：治疗后患猪咳嗽、气喘症状次数明显减少，症状明显减轻，精 神、食欲好转，观察期内症状不再加重，判断为有效。根据治愈率和 有效率，计算总有效率。
无效：治疗后患猪咳嗽、气喘症状没有减轻甚至加重或者死亡，或者 在观察期内复发，判为无效，计算无效率。
停药一周后即停药第7天计算复发率：复发率=复发头数/(治愈头数+有 效头数)。
安全性试验
选用体重约50kg土三元杂健康猪5头，用本发明复方氧氟沙星注射液剂 量的10倍量即 1mL/kg体重肌肉注射，每天1次，连用3d，观察猪的体温、呼吸等生理 指标，以评价药物的安全性。
结果与分析
经过三天的治疗试验后，对各组试验猪进行气喘、咳嗽等主症疗效观 察结果见表1
表1各组试验猪治疗效果
注：*表示与实验2345组相比具有显著性差异；&表示与实验2345组相 比具有显著性差异；#表示与实验2345组相比具有显著性差异。
从表1可以看出，本发明复方氧氟沙星注射液实验1、6、7、8、9组总 有效率和治愈率均优于氧氟沙星和磺胺间甲氧嘧啶钠注射液复方用药 的疗效。经卡方检验，实验1、6、7、8、9组的总有效率和治愈率显著 高于实验2组(P<0.05)，即本发明复方各组与氧氟沙星和磺胺间甲氧嘧 啶钠注射液复方组相比具有显著性差异。
本发明复方氧氟沙星注射液实验1、6、7、8、9组总有效率和治愈率显 著优于各单方用药组实验3、4、5组，经卡方检验，实验1、6、7、8、 9组的总有效率和治愈率与实验3、4、5组相比p<0.05，具有显著性差 异。
本发明复方氧氟沙星注射液实验1、6、7、8、9组复发率显著低于氧氟 沙星和磺胺间甲氧嘧啶钠注射液复方用药2组以及各单方实验3、4、5 组，卡方检验P<0.05，具有显著性差异。
此外，本发明复方氧氟沙星注射液实验1、6、7、8、9组，治疗期间无 一例死亡，而氧氟沙星和磺胺间甲氧嘧啶钠注射液复方用药2组以及各 单方实验3、4、5组均有不同数量的实验猪死亡，以维生素C注射液实 验组死亡最严重，多达6头，死亡率达到12%。
在安全性试验中，每天对5头猪进行体温和呼吸观测3次（上午、午后 、下午），共观测10天（给药3天+停药后7天），结果发现，所观测猪 的体温(39.2-40.0℃)和呼吸均在正常范围内，未见不良反应，表明该 药可在临床中安全使用。
综上，本发明复方氧氟沙星注射液，可以有效的治疗的猪气喘病，治 愈率高，治愈后不易复发，有效减少病猪的死亡，为病猪的进一步医 治争取了宝贵的时间。可见本发明创造对确保畜牧业的可持续发展有 着重要意义。