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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201711450730.1 (22)申请日 2017.12.27 (71)申请人 湖北工业大学 地址 430068 湖北省武汉市洪山区南李路 28号 (72)发明人 刘明星 王瑜 (74)专利代理机构 武汉开元知识产权代理有限 公司 42104 代理人 王和平 (51)Int.Cl. A61K 47/04(2006.01) A61K 47/10(2006.01) A61K 47/36(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61K 49/00(2006.01。
2、) (54)发明名称 二硫键功能化的荧光介孔二氧化硅纳米颗 粒的制备方法及其用途 (57)摘要 本发明公开了一种二硫键功能化的荧光介 孔二氧化硅纳米颗粒的制备方法及其用途， 属于 医药技术领域。 该制备方法包括首先制备巯基修 饰的介孔二氧化硅纳米颗粒， 然后以喹啉锌和氨 基作为修饰基团， 避光下室温反应制备得到了二 硫键功能化的荧光介孔二氧化硅纳米粒， 其粒径 为80150nm， 且荧光性质稳定， 可以作为输送抗 肿瘤药物的纳米载体材料， 可有效提高载药量控 制药物释放， 降低药物副作用， 从而有效治疗相 关的癌症。 权利要求书2页 说明书5页 附图4页 CN 108310388 A 2018。
3、.07.24 CN 108310388 A 1.一种二硫键功能化的荧光介孔二氧化硅纳米颗粒的制备方法， 其特征在于： 它包括 如下步骤： 1)制备巯基修饰的介孔二氧化硅纳米粒子， 分散于乙醇中保存； 2)制备荧光介孔二氧化硅纳米粒子： 取步骤1)制备的巯基修饰的介孔二氧化硅纳米粒 子的乙醇分散液， 离心后分散于醋酸锌溶液中， 再与8-羟基喹啉在避光下反应， 制备得到荧 光介孔二氧化硅纳米粒， 分散于乙醇中保存； 3)制备羧基功能化的荧光介孔二氧化硅纳米粒的水分散液： 向酸酐中加入硅烷偶联 剂， 搅拌反应得到羧基功能化的硅烷偶联剂， 取步骤2)得到的所述荧光介孔二氧化硅纳米 粒的乙醇分散液， 依。
4、次加入碱溶液、 羧基功能化的硅烷偶联剂， 避光反应得到羧基功能化的 荧光介孔二氧化硅纳米粒， 分散于水中， 得到羧基功能化的荧光介孔二氧化硅纳米粒的水 分散液； 4)制备二硫键功能化的荧光介孔二氧化硅纳米粒的水分散液： 取步骤3)制备得到的羧 基功能化的荧光介孔二氧化硅纳米粒的水分散液， 依次加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基) 碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺， 再滴加胱胺二盐酸盐的水溶液避光反应制备得到二 硫键功能化的荧光介孔二氧化硅纳米， 分散于水中保存。 2.根据权利要求1所述二硫键功能化的荧光介孔二氧化硅纳米颗粒的制备方法， 其特 征在于： 所述步骤2)中， 取步骤1)制备的巯基修。
5、饰的介孔二氧化硅纳米粒分散于醋酸锌溶 液中， 搅拌反应1014h， 再离心、 乙醇洗涤后分散至水中制备成待反应液， 取8-羟基喹啉的 乙醇溶液在搅拌状态下， 滴加到所述待反应液中， 室温下避光反应4056h， 反应结束后经 离心、 乙醇洗涤至上清液为无色， 得到荧光介孔二氧化硅纳米粒， 分散至乙醇中得到荧光介 孔二氧化硅纳米粒的乙醇分散液。 3.根据权利要求2所述二硫键功能化的荧光介孔二氧化硅纳米颗粒的制备方法， 其特 征在于： 所述步骤2)中， 每0.1g的巯基修饰的介孔二氧化硅纳米粒中加入0.40.5mmoL的 8-羟基喹啉、 0.0470.095mmoL的醋酸锌， 所述醋酸锌溶液的浓度为。
6、0.050.08mol/L。 4.根据权利要求1或2或3所述二硫键功能化的荧光介孔二氧化硅纳米颗粒的制备方 法， 其特征在于： 所述步骤3)中， 在冰浴条件下， 向酸酐中加入硅烷偶联剂， 搅拌反应至变成 白色膏状固体， 得到羧基功能化的硅烷偶联剂， 冷藏保存， 取步骤2)得到的所述荧光介孔二 氧化硅纳米粒的乙醇溶液， 依次加入碱溶液、 羧基功能化的硅烷偶联剂， 室温下避光反应10 14h， 反应完全后离心， 乙醇洗涤， 得到羧基功能化的荧光介孔二氧化硅纳米粒， 分散至水 中， 得到羧基功能化的荧光介孔二氧化硅纳米粒的水溶液。 5.根据权利要求4所述二硫键功能化的荧光介孔二氧化硅纳米颗粒的制备方。
7、法， 其特 征在于： 所述步骤3)中， 所述碱溶液为氨水、 三乙醇胺中的至少一种， 所述硅烷偶联剂为3- 氨丙基三乙氧基硅烷， 所述酸酐为马来酸酐或琥珀酸酐中的至少一种。 6.根据权利要求5所述二硫键功能化的荧光介孔二氧化硅纳米颗粒的制备方法， 其特 征在于： 所述步骤4)中， 所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰 亚胺的物质的量比为110:1。 7.根据权利要求1所述二硫键功能化的荧光介孔二氧化硅纳米颗粒的制备方法， 其特 征在于： 所述步骤1)中， 取乙醇、 水与表面活性剂混合后加入三乙醇胺中， 搅拌至溶解， 再在 氮气保护作用下， 控制温度为4090， 滴加。
8、二氧化硅前驱体和巯基硅烷偶联剂的混合溶 权 利 要 求 书 1/2 页 2 CN 108310388 A 2 液， 搅拌2h， 然后冷却至室温、 第一次离心分离后采用乙醇洗涤23次， 再在体积比为9:1的 乙醇与37wt盐酸的混合溶液体系中， 控制温度为60， 回流23次， 回流结束后采用乙醇 和水交替洗涤56次， 第二次离心分离， 再分散至乙醇中即制备得到巯基修饰的介孔二氧 化硅纳米粒的乙醇分散液。 8.根据权利要求7所述二硫键功能化的荧光介孔二氧化硅纳米颗粒的制备方法， 其特 征在于： 所述步骤1)中， 所述表面活性剂为十六烷基三甲基氯化铵、 十六烷基三甲基溴化 铵、 十六烷基三乙基溴化铵。
9、、 三辛基甲基氯化铵、 十二烷基三甲基氯化铵或十四烷基三甲基 氯化铵中的一种或一种以上的混合物； 所述二氧化硅前驱体为正硅酸四乙酯、 正硅酸四甲酯、 正硅酸四丙酯、 正硅酸四丁酯中 的一种或一种以上的混合物； 所述巯基硅烷偶联剂为巯丙基三甲氧基硅烷， 巯丙基三乙氧基硅烷， -巯丙基三甲氧 基硅烷中的至少一种。 9.根据权利要求18中任意一项所述的制备方法制备得到的二硫键功能化的荧光介 孔二氧化硅纳米颗粒， 其特征在于： 所述介孔二氧化硅纳米颗粒的粒径为80150nm。 10.一种权利要求9所述的二硫键功能化的荧光介孔二氧化硅纳米颗粒在药物载体中 的应用。 权 利 要 求 书 2/2 页 3 C。
10、N 108310388 A 3 二硫键功能化的荧光介孔二氧化硅纳米颗粒的制备方法及其 用途 技术领域 0001 本发明涉及介孔二氧化硅纳米粒子， 属于医药技术领域， 具体地涉及一种二硫键 功能化的荧光介孔二氧化硅纳米颗粒的制备方法及其用途。 背景技术 0002 药物控制释放系统可以实现药物在病灶部位的靶向释放， 提高药效,降低药物的 毒副作用。 理想的药物控制释放系统要求负载的药物在到达目标病灶部位之前零释放， 到 达目标靶向以后才释放出来。 0003 介孔二氧化硅纳米粒子(MSNs)在药物传递系统、 催化与吸附、 蛋白质分离等方面 具有广泛的应用， 尤其在药物传递系统中显示出不可比拟的优点：。
11、 具有大的比表面积( 900m2/g)和比孔容(0.9 cm3/g)， 可调节的孔径(210nm)， 可控制的形态和可修饰的表 面， 可以在介孔通道内或在介孔表面负载各种药物， 并可对药物进行可控的载药与药物释 放， 最终可以实现对组织的靶向。 目前已经报道了一系列基于MSNs的刺激响应性系统， 即药 物释放可由包括温度， 电， 磁场， 光等物理信号和pH， 氧化还原， 酶活性等化学信号这些环境 刺激触发， 为实现MSNs在药物控释递送系统的应用提供了广阔前景。 0004 其中， 孔壁荧光功能化的介孔二氧化硅材料由于其具备稳定的荧光性能可作为荧 光探针， 正日益引起广泛关注， 然而， 一些荧光。
12、介孔材料由于本身的毒性或者暴露在材料表 面导致正常细胞的非正常死亡， 都会影响治疗效果； 因此， 设计和制备具有毒性较小的高稳 定性的新型荧光功能化的介孔二氧化硅纳米粒子， 对实现其在药物递送领域中的应用至关 重要。 发明内容 0005 为解决上述技术问题， 本发明公开了具备毒性较小和高稳定性的二硫键功能化的 荧光介孔二氧化硅纳米颗粒的制备方法及其用途。 0006 为实现上述目的， 本发明公开了一种二硫键功能化的荧光介孔二氧化硅纳米颗粒 的制备方法， 它包括如下步骤： 0007 1)制备巯基修饰的介孔二氧化硅纳米粒的乙醇分散液； 0008 2)制备荧光介孔二氧化硅纳米粒的乙醇分散液： 取步骤1。
13、)制备的巯基修饰的介孔 二氧化硅纳米粒的乙醇分散液， 离心分散于醋酸锌溶液中， 再与8-羟基喹啉在避光下反应， 制备得到荧光介孔二氧化硅纳米粒， 分散于乙醇中得到荧光介孔二氧化硅纳米粒的乙醇分 散液； 0009 3)制备羧基功能化的荧光介孔二氧化硅纳米粒的水分散液： 向酸酐中加入硅烷偶 联剂， 搅拌反应得到羧基功能化的硅烷偶联剂， 取步骤2)得到的所述荧光介孔二氧化硅纳 米粒的乙醇溶液， 依次加入碱溶液、 羧基功能化的硅烷偶联剂， 避光反应得到羧基功能化的 荧光介孔二氧化硅纳米粒， 分散于水中， 得到羧基功能化的荧光介孔二氧化硅纳米粒的水 说 明 书 1/5 页 4 CN 108310388 。
14、A 4 分散液； 0010 4)制备二硫键功能化的荧光介孔二氧化硅纳米粒的水分散液： 取步骤3)制备得到 的羧基功能化的荧光介孔二氧化硅纳米粒的水分散液， 依次加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙 基)碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺， 再滴加胱胺二盐酸盐的水溶液避光反应制备得 到二硫键功能化的荧光介孔二氧化硅纳米粒， 分散于水中保存。 0011 进一步地， 所述步骤2)中， 取步骤1)制备的巯基修饰的介孔二氧化硅纳米粒的乙 醇分散液， 离心分散于醋酸锌溶液中， 搅拌反应 1014h， 再离心、 乙醇洗涤后分散至水中 制备成待反应液， 取8-羟基喹啉的乙醇溶液在搅拌状态下， 滴加到所述待反应液中。
15、， 室温下 避光反应4056h， 反应结束后经离心、 乙醇洗涤至上清液为无色， 得到荧光介孔二氧化硅 纳米粒， 分散至乙醇中得到荧光介孔二氧化硅纳米粒的乙醇分散液。 0012 再进一步地， 所述步骤2)中， 每0.1g的巯基修饰的介孔二氧化硅纳米粒中加入0.4 0.5mmoL的8-羟基喹啉、 0.0470.095mmoL的醋酸锌， 醋酸锌溶液的浓度为0.05 0.08mol/L。 0013 更进一步地， 所述步骤3)中， 在冰浴条件下， 向酸酐中加入硅烷偶联剂， 搅拌反应 至变成白色膏状固体， 得到羧基功能化的硅烷偶联剂， 冷藏保存， 取步骤2)得到的所述荧光 介孔二氧化硅纳米粒的乙醇溶液， 。
16、依次加入碱溶液、 羧基功能化的硅烷偶联剂， 室温下避光 反应1014h， 反应完全后离心， 乙醇洗涤， 得到羧基功能化的荧光介孔二氧化硅纳米粒， 分 散至水中保存。 0014 更进一步地， 所述步骤3)中， 所述碱溶液为氨水、 三乙醇胺中的至少一种， 所述硅 烷偶联剂为3-氨丙基三乙氧基硅烷， 所述酸酐为马来酸酐或琥珀酸酐中的至少一种。 0015 更进一步优选的， 所述步骤4)中， 所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸 盐和N-羟基琥珀酰亚胺的物质的量比为110:1。 0016 更进一步优选的， 所述步骤4)中， 每0 .1g的荧光介孔二氧化硅纳米粒中加入 0.326mmol的羧基。
17、功能化的硅烷偶联剂、 0.6256.25 mmol的1-乙基-(3-二甲基氨基丙基) 碳二亚胺盐酸盐、 0.625mmol的 N-羟基琥珀酰亚胺和0.3243.24mmol的胱胺二盐酸盐。 0017 更进一步地， 所述步骤1)中， 取乙醇、 水与表面活性剂混合后加入三乙醇胺中， 搅 拌至溶解， 再在氮气保护作用下， 控制温度为 4090， 滴加二氧化硅前驱体和巯基硅烷 偶联剂的混合溶液， 搅拌 2h， 然后冷却至室温、 第一次离心分离后采用乙醇洗涤23次， 再 在体积比为9:1的乙醇与37wt盐酸的混合溶液体系中， 控制温度为 60， 回流23次， 回 流结束后采用乙醇和水交替洗涤56次， 第。
18、二次离心分离， 再分散至乙醇中即制备得到巯 基修饰的介孔二氧化硅纳米粒的乙醇分散液。 0018 更进一步优选的， 所述步骤1)中， 所述表面活性剂为十六烷基三甲基氯化铵、 十六 烷基三甲基溴化铵、 十六烷基三乙基溴化铵、 三辛基甲基氯化铵、 十二烷基三甲基氯化铵或 十四烷基三甲基氯化铵中的一种或一种以上的混合物； 0019 所述二氧化硅前驱体为正硅酸四乙酯、 正硅酸四甲酯、 正硅酸四丙酯、 正硅酸四丁 酯中的一种或一种以上的混合物； 0020 所述巯基硅烷偶联剂为巯丙基三甲氧基硅烷， 巯丙基三乙氧基硅烷， -巯丙基三 甲氧基硅烷中的至少一种。 0021 为了更好的实现本发明的技术方案， 本发明。
19、还公开了采用上述制备方法制备得到 说 明 书 2/5 页 5 CN 108310388 A 5 的二硫键功能化的荧光介孔二氧化硅纳米颗粒， 所述介孔二氧化硅纳米颗粒的粒径为80 150nm。 0022 此外， 本发明还公开了上述制备的二硫键功能化的荧光介孔二氧化硅纳米粒在药 物载体中的应用。 0023 作为本发明技术方案的优选： 0024 每0.1g的巯基修饰的介孔二氧化硅纳米粒中加入0.475mmoL 的8-羟基喹啉、 0.067mmoL的醋酸锌； 0025 每0.1g的荧光介孔二氧化硅纳米粒中加入0.326mmol的羧基功能化的硅烷偶联 剂、 0.625mmol的1-乙基-(3-二甲基氨基。
20、丙基)碳二亚胺盐酸盐、 0.625mmol的N-羟基琥珀酰 亚胺和3.24mmol的胱胺二盐酸盐。 0026 有益效果： 0027 1、 本发明制备的二硫键功能化的荧光介孔二氧化硅纳米粒子的粒径为80 150nm， 且粒径分散均匀； 0028 2、 本发明制备的二硫键功能化的荧光介孔二氧化硅纳米粒子由于在孔内壁修饰 有喹啉锌， 使纳米粒子在380nm激发下具有发绿色荧光的特性， 且在pH(59)的缓冲溶液 中， 荧光性质稳定； 0029 3、 本发明制备的二硫键功能化的荧光介孔二氧化硅纳米粒子表面修饰有含二硫 键的氨基官能团， 使该纳米粒子具有还原响应的特性， 纳米粒子可利用表面的氨基官能团 。
21、可以进一步修饰高分子聚合物提高纳米粒的生物相容性的分子聚乙二醇、 具有靶向性的分 子如透明质酸或叶酸以及具有与喹啉锌发生荧光共振能量转移的分子如罗丹明等； 可作为 输送抗肿瘤药物的纳米载体材料， 该载药体系具有实时监测的作用， 可有效提高载药量控 制药物释放， 降低药物副作用， 从而有效治疗相关的癌症。 附图说明 0030 图1为本发明实施例CMS-SH的透射电镜图； 0031 图2为本发明实施例Znq-CMS的透射电镜图； 0032 图3为本发明实施例Znq-CMS样品在380nm波长下的荧光光谱图； 0033 图4为图3的Znq-CMS样品在不同时间下的荧光光谱图； 0034 图5为图3的。
22、Znq-CMS样品在不同pH缓冲液下的荧光光谱图； 0035 图6为图5的荧光照片； 0036 图7为本发明实施例Znq-CMS、 Znq-CMS-COOH和 Znq-CMS-SS-NH2的归一化荧光光 谱； 0037 图8为图7的荧光照片。 具体实施方式 0038 为了更好的解释本发明， 以下结合具体实施例进一步阐明本发明的主要内容， 但 本发明的内容不仅仅局限于以下实施例。 0039 本发明公开了一种二硫键功能化的荧光介孔二氧化硅纳米颗粒的制备方法， 它包 括如下步骤： 说 明 书 3/5 页 6 CN 108310388 A 6 0040 1)制备巯基修饰的介孔二氧化硅纳米粒(CMS-S。
23、H)的乙醇分散液： 25wt(质量百 分比)十六烷基三甲基氯化铵(CTAC)水溶液的制备： 取3.5gCTAC溶于10.5mL水中， 在室温下 剧烈搅拌20 min， 直至澄清； 0041 取64mL水、 10.5mL乙醇、 10.4mL25wtCTAC水溶液室温下剧烈搅拌10min， 加入三 乙醇胺4.125mL， 继续剧烈搅拌15min， 直至澄清用做储备液； 取20mL储备液置于三口烧瓶 中， 在N2保护下油浴至60待温度稳定后， 随后在搅拌下23min内逐滴加入 1.454mL正硅 酸四乙酯(TEOS)和0.1625mL巯丙基三乙氧基硅烷 (MPTES)的混合液， 继续搅拌反应2h， 。
24、离 心， 用乙醇洗涤2次； 将上述溶液再分散于含有5mL盐酸(37wt)与45mL的乙醇溶液中， 60 回流提取2h， 重复两次， 乙醇洗涤6次， 最后分散于乙醇溶液中配制成5mg/mL的溶液保存。 0042 2)制备荧光介孔二氧化硅纳米粒(Znq-CMS)的乙醇分散液： 所述步骤2)中， 取20mL 5mg/mL的步骤1)制备的CMS-SH乙醇分散液， 离心后分散于9.5mL浓度为0.05mol/L的醋酸锌 溶液中， 超声分散均匀， 室温下搅拌反应12h， 再离心、 乙醇洗涤3次后分散至水中制备成浓 度为5mg/mL的待反应液， 取待反应液20mL， 超声分散均匀， 将25mL含有9.7mg。
25、(0.067mmol)8- 羟基喹啉(8-Hq)的乙醇溶液在搅拌状态下， 逐滴滴加到所述待反应液中， 室温下避光反应 48h， 反应结束后经离心、 采用乙醇洗涤35次至上清液为无色， 得到荧光介孔二氧化硅纳 米粒(Znq-CMS)， 分散至乙醇中得到浓度为 5mg/mL溶液保存。 0043 3)制备羧基功能化的荧光介孔二氧化硅纳米粒 (Znq-CMS-COOH)的水分散液： 0044 取2.5g(25.5mmol)马来酸酐置于配有转子的25mL圆底烧瓶中， 在冰浴条件下， 逐 滴加入5.5mL(23.5mmol)3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)， 快速搅拌反应， 可见马来酸酐溶 解并放出大。
26、量热量， 搅拌至反应物变成白色膏状固体后停止反应， 得到羧基功能化的硅烷 偶联剂(APTES-COOH)， 将其置于冰箱中冷藏保存， 取20mL 步骤2)得到的所述Znq-CMS乙醇 溶液(5mg/mL)， 超声分散均匀， 然后在搅拌状态下加入10uL氨水， 取104mg APTES-COOH溶于 2 mL乙醇， 逐滴加入到上述反应液中， 室温下避光反应12h， 反应完全后离心， 乙醇洗涤3次， 得到羧基功能化的荧光介孔二氧化硅纳米粒(Znq-CMS-COOH)， 分散至20mL水中， 得到羧基 功能化的荧光介孔二氧化硅纳米粒的水分散液。 0045 4)制备二硫键功能化的荧光介孔二氧化硅纳米粒。
27、(Znq-CMS-SS- NH2)的水分散 液： 取步骤3)制备得到的Znq-CMS-COOH水分散液， 加入120mg 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基) 碳二亚胺盐酸盐 (EDCHCl)， 室温搅拌反应10min， 然后再加入80mg N-羟基琥珀酰亚胺 (NHS)反应活化1h， 再取0.5g胱胺二盐酸盐溶于5mL水中， 并滴加至上述反应液中， 室温避光 搅拌12h， 得到的产物以10000 r/min离心15min分离， 超纯水重悬洗涤三次， 得到含有二硫 键的氨基末端的荧光介孔二氧化硅纳米粒子(Znq-CMS-SS-NH2)， 将其再分散于水中配制成 5mg/mL的溶液保存。 0046 。
28、对上述实施例1制备的中间物及产物进行动态光散射粒度(DLS) 分析， 得到了表 1； 0047 表1CMS-SH、 Znq-CMS、 Znq-CMS-COOH和Znq-CMS-SS-NH2的DLS分析数据列表 0048 Sample Size PDI Z-电位 CMS-SH 113.2 0.088 -27.8 Znq-CMS 123.9 0.094 -16.5 说 明 书 4/5 页 7 CN 108310388 A 7 Znq-CMS-COOH 171.5 0.073 -43.4 Znq-CMS-SS-NH2134.1 0.108 +30.6 0049 由上述表1可知， 巯基功能化的介孔二氧。
29、化硅纳米粒子粒径为113.2nm， PDI为 0.088， 具有良好的分散性， 电位为-27.8mV， 其带负电主要是由于介孔二氧化硅表面存在大 量的硅醇羟基； 当孔道中引入Zn2+与8-羟基喹啉后， Znq-CMS电位升高， 这可能是Zn2+与部分 纳米粒表面的羟基作用的结果， 然而粒径为123.9nm相较于CMS-SH 变化不明显， PDI为 0.094呈现了良好的分散性， Znq-CMS经过羧基修饰后， 水合粒径为171.5nm， 相较于Znq-CMS 增加了近50nm,其原因可能是由于羧基是亲水基团， 经过羧基修饰后增加了纳米粒子的亲 水性， 水化层因此变大从而导致粒径的增加； 进一步。
30、经过胱胺修饰后 Znq-CMS-SS-NH2的粒 径为134.1nm， 与Znq-CMS相近， 修饰后的纳米粒子的PDI均在0.1左右， 表明了其良好的分散 性。 然而， 值得注意的是， 经过官能团修饰后Znq-CMS-COOH和Znq-CMS-SS-NH2的电位均发生 了明显的变化。 0050 结合图1和图2可知， CMS-SH呈现出球形形貌并且分布均匀， 粒子大小相对均一， 平 均粒径约为85nm， 此外， 可观察到明显的蠕虫状的介孔孔道， 这是胶体介孔二氧化硅纳米粒 子的特征。 值得注意的是， Znq-CMS也呈现球形形貌并且分布均匀， 平均粒径为85nm， 介孔结 构仍然明显， 表明金。
31、属配位化合物的掺杂对介孔结构和粒径影响较小。 0051 Znq-CMS的乙醇分散液在紫外灯照射下具有强烈的绿色荧光， 如图3所示， 当激发 波长为380nm， 狭缝为10nm时， 其荧光发射波长在 510nm； 结合图4可知， 将Znq-CMS样品在乙 醇溶液中保存1个月和2 个月后， 其荧光发射波长和荧光强度均未发生明显变化， 说明 Znq-CMS在一定时间内荧光性质相对保持稳定。 0052 为了进一步的考察不同pH对Znq-CMS荧光性质的影响， 将 Znq-CMS置于不同pH的 磷酸缓冲盐溶液(PBS)中， 并在紫外灯下照射下， 当激发波长为365nm， 狭缝为10nm时， 结果 如图5。
32、所示， 由图5 可知， 当在pH大于等于5的PBS中时， Znq-CMS的荧光强度保持相对稳定， 然而当pH小于5时， 荧光强度大大减弱， 甚至在pH降到3时几乎完全淬灭； 而文献报道肿瘤组 织微环境中内涵体或溶酶体的pH最小达到5.0左右， 因此， Znq-CMS在生理条件和肿瘤微环 境中的荧光强度不会受很大影响， 可应用于载体材料， 具体的荧光照片如图6所示， 图6也再 次证明pH大于等于5时， Znq-CMS的荧光强度呈绿色， 且保持相对稳定， 而在pH降到3时荧光 几乎完全淬灭。 0053 此外， 为了证实每一步的修饰， 如喹啉锌和氨基等对介孔二氧化硅纳米粒子的荧 光光谱是否发生变化，。
33、 测定了每一步修饰后所得物质的荧光光谱， 如图7所示， 其中Znq-CMS 经过羧基和含二硫键的氨基修饰后， 荧光发射峰最大位置由之前的510nm蓝移到了495nm 处， 但是其荧光光谱仍然与FRET的受体罗丹明B的吸收光谱有重叠， 不影响荧光共振能量转 移纳米粒子FRET-CMS的构建。 此外， 该荧光光谱为归一化处理的图谱， 随着修饰次数增加， 荧光强度也相应有所降低， 与图8紫外灯照射下荧光照片的结果保持一致， 从照片看出修饰 前后均呈现绿色荧光且荧光强度有所降低。 0054 以上实施例仅为最佳举例， 而并非是对本发明的实施方式的限定。 除上述实施例 外， 本发明还有其他实施方式。 凡采用等同替换或等效变换形成的技术方案， 均落在本发明 要求的保护范围。 说 明 书 5/5 页 8 CN 108310388 A 8 图1 图2 说 明 书 附 图 1/4 页 9 CN 108310388 A 9 图3 图4 说 明 书 附 图 2/4 页 10 CN 108310388 A 10 图5 图6 说 明 书 附 图 3/4 页 11 CN 108310388 A 11 图7 图8 说 明 书 附 图 4/4 页 12 CN 108310388 A 12 。