技术领域
本发明属于有机物质提取技术领域,尤其涉及一种新颖的千里光中总黄酮类物质的提取方法。
背景技术
目前,业内常用的现有技术是这样的:
千里光是一种菊科草本植物,生于山坡、疏林下、林边、路旁、沟边草丛中,其性寒,味苦,具有清热解毒,明目,止痒等功效。多用于风热感冒、目赤肿痛、泄泻痢疾、皮肤湿疹疮疖。千里光多含肝毒吡咯双烷生物碱,其急、慢性中毒可引起肝脏的肝窦阻塞综合症、肝巨红细胞症或肝纤维化。千里光中含有大量的总黄酮类物质,黄酮类化合物具有抗自由基、抗氧化、抗癌、抗菌、抗病毒、抗炎症、抗过敏、抗糖尿病并发症等多种生理活性及药理作用,并具有降低血管透性及脆性的作用,对人类的肿瘤、衰老、血管病等疾病的治疗和预防有重要的意义,但是目前对总黄酮类物质的提取工艺比较繁琐,提取率较低。
综上所述,现有技术存在的问题是:
(1)目前对总黄酮类物质的提取工艺比较繁琐,提取率较低。
(2)传统的粉碎机电机在进行极度的粉碎时容易引起温度过高,破坏千里光的有效成分;此外易造成因温度过高而烧坏粉碎机的情况,降低工作效率。
发明内容
针对现有技术存在的问题,本发明提供了一种新颖的千里光中总黄酮类物质的提取方法。
本发明是这样实现的,一种新颖的千里光中总黄酮类物质的提取方法为:
步骤一:将新鲜千里光根部以上部分,清洗、烘干、消毒,利用粉碎机粉碎后用20目筛子过筛,得到千里光粉;
步骤二:将千里光粉放入60%乙醇溶液中浸泡1h,期间每个20min搅拌一次,然后在350W80℃条件下超声萃取40min;
步骤三:超声完毕后将溶液取出,进行真空抽滤,保留滤液,将滤渣再次用70%乙醇浸泡1h后进行真空抽滤,获得滤液;
步骤四:将两次滤液合并后,离心取上清液,利用旋转蒸发仪对滤液进行浓缩处理,通风橱中挥发掉剩余的乙醇,获得黄酮提取浓缩液;
步骤五:利用冻干机对黄酮提取浓缩液进行冻干处理,-80℃,12~16h,获得冻干粉,制得千里光中总黄酮类物质。
进一步,步骤一中,清洗为蒸馏水清洗1~2min,避免有效成分流失。
进一步,步骤一中,烘干为68~75℃烘箱中,烘干至水分含量低于8%。
进一步,步骤二中,60%乙醇溶液中浸泡1h,期间每个20min搅拌一次,有利于有效成分的溶出。
进一步,步骤四中,离心取上清液,选用高速离心机转速为10000r/min。
进一步,步骤五中,冻干之前要在-20℃的冰箱中进行预冻12~18h。
本发明的另一目的在于提供黄酮类物质的测定方法,该方法为:
步骤一:准确吸取以上提取的黄酮类物质提取液3mL,加入体积分数为50%的乙醇100mL,质量分数为5%的亚硝酸钠1mL,放入25mL容量瓶中,摇匀;
步骤二:再向以上容量瓶中加入质量分数为10%的硝酸铝溶液1mL,浓度为1mol/L的氢氧化钠溶液5mL,摇匀;
步骤三:用30%乙醇稀释至刻线,采用紫外可见分光光度计测定吸光度,以相同体积的纯净水代替提取液作为空白,得出黄酮类物质的含量。
进一步,所述采用紫外可见分光光度计的检测波长为510nm。
综上所述,本发明的优点及积极效果为:
本发明采用超声萃取法提取千里光中的总黄酮类物质,检测工艺简单,提取率较高,提取速度较快,避免了传统提取工艺中需长时间回流提取的问题。
本发明采用改进的热模型算法,所述粉碎机的动机采用改进后的热模型算法,有效保护千里光的有效成分不因高温而破坏,避免了粉碎机的过载情况,对电动机进行了更好的保护,提高了工作效率。
附图说明
图1是本发明实施例提供的千里光中总黄酮类物质的提取方法流程图。
图2是本发明实施例提供的黄酮类物质的测定方法流程图。
图3是本发明实施例提供的采用紫外分光光度计进行测量含量检测结果示意图。
图4是本发明实施例提供的抽滤浓缩后分别采用紫外分光光度计进行测量含量检测结果示意图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合实施例,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。
下面结合附图对本发明的应用原理做详细描述。
如图1所示,本发明实施例提供的新颖的千里光中总黄酮类物质的提取方法为:
S101:将新鲜千里光根部以上部分,清洗、烘干、消毒,利用粉碎机粉碎后用20目筛子过筛,得到千里光粉;
S102:将千里光粉放入60%乙醇溶液中浸泡1h,期间每个20min搅拌一次,然后在350W80℃条件下超声萃取40min;
S103:超声完毕后将溶液取出,进行真空抽滤,保留滤液,将滤渣再次用70%乙醇浸泡1h后进行真空抽滤,获得滤液;
S104:将两次滤液合并后,离心取上清液,利用旋转蒸发仪对滤液进行浓缩处理,通风橱中挥发掉剩余的乙醇,获得黄酮提取浓缩液;
S105:利用冻干机对黄酮提取浓缩液进行冻干处理,-80℃,12~16h,获得冻干粉,制得千里光中总黄酮类物质。
步骤S101中,清洗为蒸馏水清洗1~2min,避免有效成分流失。
步骤S101中,烘干为68~75℃烘箱中,烘干至水分含量低于8%。
步骤S102中,60%乙醇溶液中浸泡1h,期间每个20min搅拌一次,有利于有效成分的溶出。
步骤S104中,离心取上清液,选用高速离心机转速为10000r/min。
步骤S105中,冻干之前要在-20℃的冰箱中进行预冻12~18h。
如图2所示,本发明实施例提供的黄酮类物质的测定方法为:
S201:准确吸取以上提取的黄酮类物质提取液3mL,加入体积分数为50%的乙醇100mL,质量分数为5%的亚硝酸钠1mL,放入25mL容量瓶中,摇匀;
S202:再向以上容量瓶中加入质量分数为10%的硝酸铝溶液1mL,浓度为1mol/L的氢氧化钠溶液5mL,摇匀;
S203:用30%乙醇稀释至刻线,采用紫外可见分光光度计测定吸光度,以相同体积的纯净水代替提取液作为空白,得出黄酮类物质的含量。
本发明实施例提供的采用紫外可见分光光度计的检测波长为510nm。
本发明实施例提供的粉碎机的动机采用改进后的热模型算法,具体为:
一阶电动机热模型方程为:
式中:T′(t)为电动机的温升;I′(t)为电动机的电流;C为电动机的热容量系数;H为电动机的散热系数;R为电动机的定子电阻;
将其离散化,并设微增量ΔT、Δt,其含义是在极短的Δt时间内,电动机的温度由T上升到T+ΔT:
当电动机过载时,则温度T慢慢增加;当电动机不再过载时,T值慢慢降低,与电动机的散热及其相似。
下面结合具体实施例对本发明作进一步的描述。
实施例1
乙醇浓度对提取率的影响
将千里光粉平均分为5份,分别放入浓度为50%、60%、70%、80%、90%的乙醇溶液中进行浸泡,之后在350W90℃条件下超声萃取40min,抽滤浓缩后分别采用紫外分光光度计进行测量含量,检测结果如图3所示,本发明采用的乙醇浓度为最佳提取浓度。
实施例2
温度对提取率的影响
将千里光粉平均分为5份,放入60%乙醇溶液中浸泡1h后,分别在350W40℃、50℃、60℃、70℃、80℃条件下超声萃取40min,抽滤浓缩后分别采用紫外分光光度计进行测量含量,检测结果如图4所示,随着温度的升高,黄酮类化合物的提取率逐渐升高,80℃时达到最高水平,因此,本发明选择的提取温度为最佳提取温度,温度过高时,大量醇溶性杂质溶解速度显著加快,干扰黄酮类物质的提取,导致换同类提取率的下降。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。