金蝉花美白保湿药妆品及其制备方法.pdf

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摘要
申请专利号:

CN201610082170.8

申请日:

20160205

公开号:

CN105726439B

公开日:

20180821

当前法律状态:

有效性:

有效

法律详情:

IPC分类号:

A61K8/98,A61K8/9728,A61K8/92,A61K8/44,A61K8/73,A61K8/81,A61Q19/00,A61Q19/02

主分类号:

A61K8/98,A61K8/9728,A61K8/92,A61K8/44,A61K8/73,A61K8/81,A61Q19/00,A61Q19/02

申请人:

浙江理工大学

发明人:

孙延芳,孙杨,梁宗锁,刘洪涛,吕洪飞,李春如,张忠亮,李静

地址:

310018 浙江省杭州市下沙高教园区2号大街5号

优先权:

CN201610082170A

专利代理机构:

杭州中成专利事务所有限公司

代理人:

金祺

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内容摘要

本发明公开了一种金蝉花美白保湿药妆品,该金蝉花药妆品由以下质量含量的成分组成:金蝉花提取液8%,天然植物性油脂6%,螯合剂0.05~0.1%,保湿剂3%,助乳化剂5%,增稠剂0.5%,香气调节剂0~1%,甘油5.0%,去离子水余量。本发明还同时公开了上述金蝉花美白保湿药妆品的制备方法。采用本发明的方法能尽可能的保留金蝉花有效成分、充分发挥金蝉花的价值。

权利要求书

1.金蝉花美白保湿药妆品,其特征是该金蝉花药妆品由以下质量含量的成分组成:金蝉花提取液8%、杏仁油4%、茶籽油2%、质量浓度为0.1%的EDTA溶液0.05%、燕麦β-葡聚糖3.0%、Sepigel3055%、卡波9400.5%、玫瑰油1%、甘油5.0%,去离子水,余量;金蝉花提取液的制备方法为包括以下步骤:1)、前处理:a.金蝉花原料要求:每年六七月份,采收带有孢子粉的金蝉花全株;b.杀菌:先把金蝉花洗干净,紫外线杀菌,低温烘干直至含水率≤10%,得干燥金蝉花原料;c.粉碎:先将干燥金蝉花原料粉碎至过60目筛,然后采用超微粉碎技术进行精细粉碎至过500目筛,得精细粉料;2)、萃取:将体积浓度50%酒精和精细粉料,按照固液比为1g/6~8ml,于室温下采用超声提取0.5~1小时,得到金蝉花萃取液;3)、过滤:对金蝉花萃取液进行真空抽滤,旋转蒸发仪浓缩至为原体积的1/3,得到金蝉花浸提液;4)、精滤:将步骤3)所得的金蝉花浸提液,进一步经过微孔过滤器进行精细过滤,得金蝉花提取液。 2.如权利要求1所述的金蝉花美白保湿药妆品的的制备方法,其特征是包括如下步骤:一、乳化:由去离子水、甘油、质量浓度为0.1%的EDTA溶液、燕麦β-葡聚糖组成了A相原料,以杏仁油、茶籽油为B相原料,以Sepigel305为C相原料,由金蝉花提取液、卡波940组成了D相原料,以玫瑰油为E相原料;将A相原料加热到80~90℃,搅拌至均匀混合;将B相原料加热到80~90℃,中速搅拌至均匀混合,然后迅速加入到上述均匀混合的A相原料中,均质机保温搅拌10~20min后,冷却至55~65℃;继续加入C相原料,均质机高速保温搅拌至均匀混合;待温度降至30~40℃加入E相原料,均匀搅拌混合;二、灌装包装:将步骤一所得的乳化物调节pH值为5.5~6.2,真空灌装,得到金蝉花美白保湿药妆品。

说明书

技术领域

本发明涉及一种药妆品及其制备方法,尤其是涉及一种金蝉花药妆品及其制备方法,属于药用植物加工领域。

背景技术

药妆品(Cosmeceutical)英文名称是由Cosmetics及药品(Pharmaceuticals)二词组合而成,意思是具有药物性质的化妆品。1961年美国美容化学家协会的创始人Albert Kligman提出了“药妆”的概念,认为药妆品是“介于药物和化妆品之间的制品”。与普通化妆品的区别主要有:药妆品以医学药理理论为指导,其配方依据医学思想,尽力精简,不含或尽量少含色素、香料、防腐剂甚至表面活性剂,而有效成分的含量较高、针对性强,功效显著;化妆品仅仅是对皮肤的基础护理,具有保护和清洁皮肤等作用,而药妆品是针对皮肤问题和皮肤健康需求而设计的,具有修复皮肤屏障、清除自由基、抑制酪氨酸激酶活性,降低刺激原等作用。药妆品是介于药品和化妆品之间,具有修复、辅助药品的效果,刺激性小于药品,安全性高,产生过敏和刺激反应的概率比较低,所以药妆品的主要用途是美容、护肤和促进皮肤健康,解决轻微的肌肤问题。

金蝉花(Vegetable cicada)简称蝉花、大虫草等,在生物学分类中属于虫生真菌;在目前全世界发现的530多种虫草中,金蝉花、冬虫夏草仅仅是其中的两种;我国药食两用的虫生真菌最为常见的有冬虫夏草、金蝉花、僵蚕等,它们是一种外形具有“动物”和“植物”形态特征。蝉花的形成过程是蝉的幼虫在蝉羽化前被虫草菌感染、寄生,当气候环境适宜时,吸收虫体的营养转化成菌丝体,最终虫体被菌丝体完全占具而只剩下一个躯壳。万物复苏时节,菌丝体又从营养阶段逐渐转化为有性阶段具有繁殖功能的蝉花孢子粉,渐从顶端分枝发芽,形似花朵,故而称为蝉花。蝉花是麦角菌科真菌蝉拟青霉寄生竹蝉若虫后的复合体,是与冬虫夏草相类似的虫草。早在3000年前,古籍就记载了金蝉花,也是我国发现最早的虫生真菌,在我国三大虫生真菌(金蝉花、冬虫夏草及僵蚕)中,金蝉花的记载较冬虫夏草早800年。《本草图经》、《雷公炮炙论》、《证类本草》、《中药大辞典》等医药书籍均有记载,南北朝时期雷斅其经典论著《雷公炮灸论》中记载“蝉花,凡使,要白花全者。收得后于屋下东角悬干,去甲土后,用浆水煮一日,至夜焙干,研细用之,有奇效。”,这也是关于金蝉花最早的文字记载。它是我国最为古老的名贵稀有虫生真菌中药材,药用价值很高,由于其无毒且具有上乘的滋补强身、延年益寿、养颜美容功效,一直作为皇家贡品由帝王之家享用。

金蝉花的功效作用,历代名医各有论述,具体如下:

南北朝(公元五世纪)雷斆《雷公炮炙论》记载:凡使,要白花全者。收得后于屋下东角悬干,去甲土后,用浆水煮一日,至夜,焙干,碾细用之。

隋唐甄权的《药性论》记载:其蜕壳,头上有一角,如冠状,谓之蝉花,最佳。味甘寒,无毒。主小儿天吊,惊痫瘈,夜啼心悸。

宋朝苏颂《图经本草》中告知:今蜀中有一种蝉,其蜕壳头上有一角,如花冠状,谓之蝉花。

宋代唐慎微《经史证类备急本草》记载:蝉花,所在皆有,七月采,生苦竹者良,花出土上。

明朝李时珍《本草纲目》记载:蝉花可治疗惊痫,夜啼心悸,功同蝉蜕。

除上述经典医药论著外,还有不少古代医学家专著记载了蝉花的复方,如宋代《圣济总录》《小儿药证直诀》等。

金蝉花作为美容养颜的药方很早就有记载,《神农本草经》记载“减黑黚,令人面色好”。中医药书介绍说,蝉花含有大量甲壳质和氮等,其功能有降低横纹肌紧张度,并对神经节有阻断作用。金蝉花具有养颜美容的功效,现代科学研究表明,金蝉花富含碱性多糖,蛋白质、氨基酸、虫草素,核苷类、虫草酸、超氧化物歧化酶SOD、维生素类及钙、铁、磷、硒等微量元素等,可以通过口服吸收,金蝉花还能促进伤口愈合,可外用于修复受损皮肤。

具体而言,金蝉花具有如下功效:

A、金蝉花多糖对皮肤的功效:

金蝉花碱性多糖具有抗菌、消炎功效、增强细胞免疫活性的功能。首先,多糖具有较强的保湿功能,其原理是多糖分子中的羟基、羧基等多种极性基团与水分子形成氢键而结合大量水分子,同时多糖分子链相互交织成网状,与水氢键结合,起到强保水作用。此外,在胞外基质中,金蝉花多糖与皮肤中的多糖组分及纤维状蛋白质共同组成富含水分的胞外胶状基质,为皮肤提供水分,且多糖具有良好的成膜性能,可在皮肤表面形成一层均匀的薄膜,减少皮肤表面的水分蒸发,使得水分从皮肤基底组织弥散到角质层,诱导角质层进一步水化,达到深层润肤作用。此外,金蝉花多糖具有抑菌、消炎、增强细胞免疫活性,外用可抵御细菌对皮肤的侵害和抗干燥综合症等作用,并促进皮肤表皮损伤的修复。可见,金蝉花多糖对皮肤具有保水、修复、抗炎等多种功效。蝉拟青霉总多糖有杀虫和较强的抗紫外辐射作用。蝉拟青霉总多糖是一种良好的自由基清除剂或自由基反应抑制剂。中医理论认为,金蝉花为寒性,适合特热人群,是滋阴圣品,而皮肤滋长暗疮、粉刺、痘痘等多为阴虚火旺所致,故金蝉花可用于解决上述皮肤问题。

B、金蝉花氨基酸对皮肤的功效:

金蝉花性味甘淡微咸,与其氨基酸组成特性有关,其含有18种氨基酸,其中人体必需的8种氨基酸所占比例高达43.2%。金蝉花所含游离氨基酸可促进皮肤营养和免疫活性,调节水分酸碱平衡,可改善敏感性皮肤的抗敏能力,防止皱纹发生,激活皮肤细胞超氧化物岐化酶活性,祛除皮肤细胞过剩的自由基,有效延缓皮肤衰老;激活巨噬细胞的吞噬功能。增强淋巴系统的排毒、解毒功能,有效阻断外界有害物质对皮肤的侵害;提高皮肤抗过敏能力,并对体内有害物质及老化细胞分解排泄。

C、金蝉花虫草酸的主要功能:

虫草酸是金蝉花的主要活性之一,虫草酸能抑制各种病菌的成长,抗组织纤维化,抗脂质过氧化,能够有效保护细胞。虫草酸含量的高低是衡量虫草质量的主要标准之一,一般认为虫草酸含量高的虫草的药用价值高,金蝉花中的的虫草酸为70.6mg/g,比冬虫夏草35.4mg/g高1.99倍。

D、金蝉花叶酸的主要功能:

叶酸是多种B族维生素的复合体,是人体新陈代谢的重要中间传递体,参与遗传基质去氧核糖核酸(DNA)及核糖核酸(RNA)的合成,参与氨基酸的代谢,参与血红蛋白及甲基化合物的合成。金蝉花叶酸的含量为210ug/100g,比冬虫夏草23.0ug/100g高9.13倍。

E、金蝉花维生素E的主要功能:

金蝉花维生素E的含量为5300ug/100g,比冬虫夏草37ug/100g高143.24倍。

维生素E具有抗氧化作用,从而保护了皮脂和细胞膜蛋白质及皮肤中的水分;它还能促进人体细胞的再生与活力,推迟细胞的老化过程。此外,还能促进人体对维生素A的利用;可与维生素C起协同作用,保护皮肤的健康,减少皮肤发生感染;对皮肤中的胶原纤维和弹力纤维有“滋润”作用,从而改善和维护皮肤的弹性;能促进皮肤内的血液循环,使皮肤得到充分的营养与水分,以维持皮肤的柔嫩与光泽;还可抑制色素斑、老年斑的形成,减少面部皱纹及洁白皮肤,防治痤疮。

F、金蝉花硒的主要功能:

金蝉花孢子粉中富含硒,高达377ug/100g,而冬虫夏草未检测出硒。现代药理证明,硒抗氧化抗衰老,其抗氧化能力是维生素的500倍,硒在整个细胞中对肌体代谢活动中产生的过氧化物进行还原作用,保护细胞膜结构免受过氧化物损害。

硒被称为“天然解毒剂”,原理是硒作为带负电荷的非金属离子,在生物体内可以与带正电荷的有害金属离子相结合,形成金属-硒-蛋白质复合物,把能诱发癌变的金属离子排除体外,降低金属离子的毒性,从而发挥排毒和解毒的作用。

目前也有将金蝉花应用到护肤品上的报道,如公开日为2015年07月15日,公开号为CN104771349A的中国专利中,公开了一种含有植物提取物的护肤品及其制备方法,该护肤品原料为金蝉花提取物(1-4份),铁皮石斛提取物(1-5份),绞股蓝提取物(2-7份),薰衣草提取物(2-6份),迷迭香提取物(2-6份),霍霍巴提取物(2-8份),护肤品膏体90-97份,把植物提取物加入到乳化后的原料中搅拌均匀即可。该方法所述的提取物成分不明确,而且提取物之间的作用也无法了解,究竟是哪种提取物发挥作用也无法得知,金蝉花提取物发挥什么作用也不明确,而且得到的护肤品没有对其效果和质量进行检测,无法将后期产品进行产业化生产。

目前通常采用超声醇提的方法可对金蝉花有效成分进行高效提取,传统的煎煮提取方法会导致金蝉花中多糖、维生素、氨基酸、活性酶等有效成分的破坏,所得产品中的多糖、维生素、叶绿素、游离氨基酸等含量较低,大大降低了金蝉花的利用率。现在还没有一种能够保留金蝉花中有效成分的金蝉花药妆品及其制备方法。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种尽可能的保留金蝉花有效成分、充分发挥金蝉花价值的金蝉花美白保湿药妆品及其制备方法。

为了解决上述技术问题,本发明提供一种金蝉花美白保湿药妆品,该金蝉花药妆品由以下质量含量的成分组成:

金蝉花提取液(金蝉花有效活性成分) 8%

天然植物性油脂 6%

螯合剂 0.05~0.1%

保湿剂 3%

助乳化剂为 5%

增稠剂为 0.5%

香气调节剂 0~1%

甘油 5.0%

去离子水,余量。

作为本发明的金蝉花美白保湿药妆品的改进:

金蝉花提取液的制备方法为:将干燥(含水率≤10%)金蝉花原料(野生金蝉花原料)粉碎后;采用超声(60kHz的超声频率)醇提工艺,于室温下醇提0.5~1小时;所述醇是体积浓度为50%的乙醇,料液比1g/6~8ml;

醇提所得物经过滤、浓缩,得到金蝉花提取液。

作为本发明的金蝉花美白保湿药妆品的进一步改进:

6%的天然植物性油脂由4%杏仁油和2%茶籽油组成;

螯合剂为质量浓度为0.1%的EDTA溶液、或质量浓度为0.1%的EDTA-2Na溶液;

保湿剂为燕麦β-葡聚糖;

助乳化剂为Sepigel305;

增稠剂为Carbolpol 940;

香气调节剂为玫瑰油(玫瑰精油)。

本发明还同时提供了上述金蝉花美白保湿药妆品的的制备方法,其特征是包括如下步骤:

一、金蝉花提取液的制备:

1)、前处理:

a.金蝉花原料要求:

每年六七月份(是金蝉花出土的季节,也是采收金蝉花的最佳时间),采收带有孢子粉的金蝉花全株;

b.杀菌:

先把金蝉花洗干净(最好把上面的壳剥掉),紫外线杀菌(10min),低温烘干(45℃低温热风干燥约24h)直至含水率≤10%,得干燥金蝉花原料;

c.粉碎:

先将干燥金蝉花原料粉碎至过60目筛(即,得到粒度为60目的粗粉),然后采用超微粉碎技术进行精细粉碎至过500目筛,得精细粉料(过筛得到粒径≤25微米的粉料);

2)、萃取:

将体积浓度50%酒精和精细粉料(即,精细粉碎的金蝉花粉末),按照固液比为1g/6~8ml,于室温下采用超声(60kHz的频率)提取0.5~1小时,得到金蝉花萃取液(醇提所得物);

3)、过滤:

对金蝉花萃取液进行真空抽滤,旋转蒸发仪浓缩(50℃)至为原体积的1/3,得到金蝉花浸提液;

4)、精滤:

将步骤3)所得的金蝉花浸提液,进一步经过微孔过滤器(过滤孔径为0.22微米)进行精细过滤,得金蝉花提取液(金蝉花有效活性成分)。

二、乳化(配方如上所述):

由去离子水、甘油、螯合剂、保湿剂组成了A相原料,以天然植物性油脂为B相原料,以助乳化剂为C相原料,由金蝉花提取液(金蝉花有效活性成分)、增稠剂组成了D相原料,以香气调节剂为E相原料;

将A相原料加热到80~90℃,搅拌至均匀混合(至完全溶解);

将B相原料加热到80~90℃,中速搅拌至均匀混合(约10~20min),然后迅速加入到上述均匀混合的A相原料中,均质机保温(80~90℃)搅拌10~20min后,冷却至55~65℃;继续加入C相原料,均质机高速保温(55~65℃)搅拌至均匀混合(约10~20min);待温度降至30~40℃加入E相原料,均匀搅拌混合(搅拌均质);

在本发明中,高速搅拌的转速为550~650r/min,中速搅拌的转速为80~120r/min,其余的没有明确告知的搅拌是指40~60r/min的转速。

三、灌装包装:

将步骤二所得的乳化物调节pH值为5.5~6.2(可用柠檬酸或者苹果酸进行调节),真空灌装,得到金蝉花美白保湿药妆品。

在本发明中,作为较佳案例的金蝉花面霜药妆品基本配方如表1所述。

表1、金蝉花面霜药妆品基本配方(W/W,%)

在本发明中,步骤4)的精滤具体可为:

将进料管放至粗滤液(金蝉花浸提液)内,启动高速管式离心机(转速为15000r/min)和蠕动泵,设定蠕动泵的转速为150~250r/min,开始离心过滤至新的药液储存罐;过滤器采用全密闭式过滤,整个过程都在机体内完成,对环境无无污染,过滤采用微孔滤芯(过滤孔径为0.22微米),滤芯可重复使用,过滤器可以实现滤渣的干排渣,整个过滤过程可实现全自动化操作;经过精滤后得到的滤液为金蝉花提取液(金蝉花有效活性成分)该金蝉花提取液中含有多糖,蛋白质、氨基酸、虫草素,核苷类、虫草酸、超氧化物歧化酶SOD、维生素类及钙、铁、磷、硒等微量元素等有效活性成分。

因此,在本发明中,金蝉花有效活性成分含有多糖,蛋白质、氨基酸、虫草素,核苷类、虫草酸、超氧化物歧化酶SOD、维生素类及钙、铁、磷、硒等微量元素等;金蝉花药妆品乳化体系选择了水包油(O/W)型乳化体,经验证明O/W型乳化体与人体皮肤亲和力好,有利于有效成分的吸收,对活性物质保持稳定有一定的作用。采用天然植物性油脂4%杏仁油和2%茶籽油为油相体系。水相主要为灭菌的去离子水。EDTA(0.1%EDTA-2Na)作为螯合剂;保湿剂为燕麦β-葡聚糖,使皮肤细胞保持丰润,有利于有效成分渗透吸收。为保持乳化体的稳定性,助乳化剂为Sepigel305;为调节药妆品的黏度和流动性,以保证其稳定性、增加产品质感以及保持好的视觉和触觉感受,增稠剂为Carbolpol 940;对金蝉花药妆品香气进行调配,加入0-1%玫瑰油作为其药妆的感官修饰剂等。

本发明的产品完全采用天然无毒副作用的原料。试验批量1kg/批,真空灌装,灌装过程控制产品的装量,正偏差在5%以内。包装采用独特的野生的金蝉花设计,给人一种亲近自然的视觉享受。后期对金蝉花药妆品的功效和质量进行了严格的检验,金蝉花美白保湿药妆品流变学检测,结果得出在热冷循环过程中,显示很好的物理和化学稳定性,膏体细腻、均匀一致、无变色发生。离心无分层、泛粗现象出现。使用该金蝉花药妆6个月后,色差计检测使用前后皮肤变化,结果发现与对照相比,使用金蝉花药妆使皱纹舒展,皮肤美白效果提高。

在本发明中,金蝉花药妆品的各项评价方法如下:

一、功效性评价:

a.美白效果测定

采用国际照明委员会(CIE)规定的色度系统(Lab色度系统)来测量药妆作用前后皮肤颜色的改变,评价金蝉花药妆品的美白效果。

b.金蝉花药妆品对酪氨酸酶抑制活性

酪氨酸酶是皮肤黑色素形成的关键限速酶,通过测定抑制剂对酪氨酸酶的抑制率来评价美白效果,其原理为:酪氨酸酶可催化机体内酪氨酸生成多巴色素,其在紫外分光光度计475nm处有最大吸收,可通过测定生成多巴色素的量来计算酪氨酸酶抑制剂活性。该方法以酪氨酸为底物,通过化学方法检验天然活性成分对酪氨酸酶活性抑制作用,操作简便、直观,适用于最初的美白效果检测。

表2、酪氨酸酶活性抑制率反应体系

溶剂 A B C D L-酪氨酸 0.5 0.5 0.5 0.5 金蝉花药妆 0 0 0.5 0.5 酪氨酸酶 0.5 0 0.5 0 PBS 1.0 1.5 0.5 1.0 总量 2.0 2.0 2.0 2.0

上面四组反应体系摇匀后分别在紫外分光光度计475nm处测定吸光度值,其抑制率T%计算公式为:T%={[(B-A)-(D-C)]/(B-A)}×100

c.金蝉花药妆品保水保湿特性评价

考察金蝉花药妆对人永生化表皮细胞(HaCat)的作用,用免疫印迹法分析金蝉花药妆作用前后皮肤水通道蛋白-3(AQP3)变化,分析金蝉花药妆品对水通道蛋白的调节作用,从分子生物学角度阐述金蝉花药妆品的保湿效果及机制。

二、金蝉花药妆品安全性评价

a.皮肤过敏性试验

Draize大白兔模型:将大白兔背部脊柱两侧毛剪掉,不损伤表皮,去毛范围左、右各约5cm×5cm。将受试物0.5g直接涂在左侧皮肤上,用纱布覆盖,最后用胶布加以固定,右侧皮肤作为对照,敷用时间72h,分别观察皮肤1h,24h,48h,72h反应。按《欧盟化妆品安全性评价方法》进行皮肤敏感性评价,检验是否有红斑和水肿出现。

人体皮肤斑贴试验:在进行动物皮肤刺激性试验后,继续进行人体皮肤斑贴试验。选取志愿者10人,将受试物0.5g均匀涂在外用胶贴上,敷于志愿者洗净的右前臂弯处,观察24h内皮肤反应情况。

b.蝉花药妆品作用后人体皮肤纹理度及弹性测试

采用多功能皮肤图像分析系统、皮肤弹性测试仪、国际照明委员会(CIE)规定的色度系统(Lab色度系统)分别检测药妆品对皮肤纹理度、弹性、保湿性的影响,评价药妆品对皮肤的抗皱、弹性、美白、延缓衰老等多种功效。

女性志愿者16名,平均年龄25-40周岁,每天使用2次,按规定连续使用金蝉花药妆品6周。Skin visiometer SV 600在恒温恒湿(温度25±2℃,湿度50±2%)的环境下,每次测5个点,每周一次,以卡波姆(Placebo)做对照,检测皮肤弹性参数、纹理参数、粗糙度参数以及美白效果。

三、金蝉花面霜药妆品的质量检测

a.流变学检测

膏霜以3000rpm速度离心15min,观察是否有分散情况。药物稳定性试验箱进行耐寒(-5~0℃)、耐热(40-60℃)以及光照测验。一个月后观察,考察金蝉花药妆稳定性、耐热、耐温和光照。

b.微生物污染检测

按照欧盟药妆管理委员会规定的方法检验微生物,具体规定为:药妆品菌落总数不得超过1000cfu/mL,霉菌和酵母菌不得超过100cfu/mL,大肠菌群、绿脓杆菌,金黄色葡萄球菌等有害菌群不得检出。

试验菌株:大肠杆菌;绿脓杆菌;白色念珠菌;金黄色葡萄球菌;霉菌和酵母菌等6种指示菌。

具体步骤:将培养24h的指示细菌和培养5天的指示酵母菌用50mmol/L PBS配制成106cfu/mL菌悬液。取待测样品1g,加入上述菌悬液1mL均匀混合20min。随后50mmol/L PBS进行梯度稀释,分别接种于不同试验菌株的培养基平板上,37℃培养24h后观察结果,以无菌水代替样品作为空白对照。

抑菌率=(对照样品平均菌落数-试验样品平均菌落数)/对照样品平均菌落数×100%;

90%≥抑菌率≥50%,表明产品有抑菌作用;

抑菌率≥90%,表明产品有较强抑菌作用。

本发明的技术优势为:

1、由于目前金蝉花产品多以内服为主,而本发明结合金蝉花的历史记载和科学研究理论基础,来研发金蝉花药妆品,本发明中的金蝉花药妆品拓展了金蝉花的应用领域,更为充分地发挥其价值。

2、本发明能尽可能的保留金蝉花有效成分,拓展金蝉花应用领域,充分发挥金蝉花价值,该金蝉花药妆品及其制备方法以野生金蝉花为原料进行超声醇提,有效成分不易被破坏,所得产品中很好的保持了金蝉花的有效活性成分,并且药妆品制作完全采用天然原料,后期对药妆品的功效和质量检测进行了研究,使之符合欧美药妆品的标准,从而开发对人体健康适合国人的药妆品。

综上所述,本发明研发的以金蝉花为基本活性成分的药妆品,分析皮肤问题产生的原因和机理来设计符合国人肤质的化妆品,同时结合体内外药理实验、人体功效评价和产品安全性检测,保证产品安全性的同时,具有功效显著的特点。因此,开展金蝉花药妆品研究,充分地发挥其市场应用价值,对金蝉花产业的发展具有重要意义。即,本发明作用于面部皮肤深层,滋润保湿美白,具有显著抗皱功效,可广泛应用于润肤霜、膏霜、乳液、面膜及精华液等护肤药妆中。

本发明的金蝉花美白保湿药妆品的用法和用量可参照常规美白保湿化妆品的用法和用量。

附图说明

下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细说明。

图1金蝉花有效成分提取工艺图;

图2为金蝉花药妆品研发工艺图;

图3为金蝉花药妆品对人永生化表皮细胞水通道蛋白-3的调节作用图;

图4是本发明实施例中金蝉花药妆品皮肤敏感性检测结果对比图(对大白兔进行敏感性检测);

图5是金蝉花药妆品对人体皮肤敏感性斑贴测验示意图。

具体实施方式

实施例1、一种金蝉花美白保湿药妆品,依次进行以下步骤:

一、金蝉花提取液的制备:

1)、前处理:

a.金蝉花原料要求:

每年六七月份是金蝉花出土的季节,也是采收金蝉花的最佳时间,采收带有孢子粉的金蝉花全株;

b.杀菌:

先要把金蝉花洗干净,最好把上面的壳剥掉,紫外线杀菌10min,低温烘干(45℃低温热风干燥约24h);得干燥金蝉花原料(含水率≤10%);

c.粉碎:

在常温下将干燥金蝉花原料粉碎,得到粒度为60目的粗粉;然后采用超微粉碎技术进行精细粉碎至过500目筛,过筛得到粒径≤25微米的精细粉料。

2)、萃取:

将50%(体积%)酒精和精细粉料(精细粉碎的金蝉花粉末),固液比为1g/6~8ml,采用绿色超声(60kHz的频率)于室温下提取30分钟,得到金蝉花萃取液。

3)、过滤:

对金蝉花萃取液进行真空抽滤,旋转蒸发仪浓缩(50℃,浓缩至为原体积的1/3)得到金蝉花浸提液。

4)、精滤:

将步骤3)所得的金蝉花浸提液,进一步经过微孔过滤器(过滤孔径为0.22微米)进行精细过滤,得金蝉花提取液(金蝉花有效活性成分)。

具体为:将进料管放至粗滤液内,启动高速管式离心机(转速为15000r/min)和蠕动泵,设定蠕动泵的转速为150~250r/min,开始离心过滤至新的药液储存罐;过滤器采用全密闭式过滤,整个过程都在机体内完成,对环境无无污染,过滤采用微孔滤芯,滤芯可重复使用,过滤器可以实现滤渣的干排渣,整个过滤过程可实现全自动化操作;经过精滤后得到的滤液为金蝉花提取液(金蝉花有效活性成分)该金蝉花提取液中含有多糖,蛋白质、氨基酸、虫草素,核苷类、虫草酸、超氧化物歧化酶SOD、维生素类及钙、铁、磷、硒等微量元素等有效活性成分。

二、乳化:

配方如表3所述。

表3、金蝉花面霜药妆品基本配方(W/W,%)

按照表3的金蝉花药妆品基本配方,将A相原料加热到85℃,搅拌至均匀混合(至完全溶解);将B相原料加热到85℃,中速均匀搅拌(100r/min,20min),然后迅速加入到上述A相原料中,均质机保温搅拌15min,冷却至60℃,继续加入C相原料,立即均质机高速保温搅拌(600r/min)10min至均匀;待温度降至35℃加入E相原料,搅拌均质。

本发明中没有明确告知的搅拌是指的50r/min转速。

三、灌装包装:

将步骤二所得的乳化物用苹果酸调pH值为5.5~6.2,试验批量1Kg/批,真空灌装,得到金蝉花药妆品(金蝉花美白保湿药妆品)。

该金蝉花药妆品的各项检测效果如下:

1.美白效果

使用该膏霜6个月后,色差计检测使用前后皮肤变化,结果发现与对照相比,使用膏霜使皱纹舒展,皮肤美白效果提高。

2.酪氨酸酶抑制活性

当金蝉花药妆浓度为5.0mg/mL,对酪氨酸酶抑制率为53.7%;当金蝉花药妆浓度为10mg/mL,对酪氨酸酶抑制率为72.5%;当金蝉花药妆浓度为20mg/mL,对酪氨酸酶抑制率为84.2%,从以上结果可以看出,随着金蝉花药妆浓度的加大,其抑制酪氨酸酶的活性越强。

备注说明:金蝉花药妆浓度为5.0mg/mL,即指将5.0mg金蝉花美白保湿药妆品(实施例1制备而得)加入1mL去离子水进行稀释所得;其余以此类推。

3.保水保湿特性研究

考察金蝉花药妆对人永生化表皮细胞(HaCat)的作用,用免疫印迹法分析金蝉花药妆作用前后皮肤水通道蛋白-3(AQP-3)变化。人体永生化表皮形成细胞Hacat用于研究人体皮肤水通道蛋白的表达,水通道蛋白大小约为28kDa,对表皮细胞的水通道蛋白AQP-3进行Western blotting分析,以β-actin为内参(对照),通过SDS-PAGE聚丙烯凝胶电泳,分析金蝉花药妆品对水通道蛋白的调节作用。

从图3可以看出,不同浓度的金蝉花药妆作用人永生化表皮细胞(HaCat)结果表明金蝉花药妆可很好的促进水通道蛋白-3(AQP-3)水平的表达,从而从分子生物学角度说明金蝉花药妆具有保水保湿作用。

4、将上述实施例1所得的金蝉花药妆品按照上述安全性评价进行检测,所得结果如下:

图4,5是本发明实施例中金蝉花药妆品皮肤敏感性检测,对其进行大白兔和人体皮肤斑贴测验,结果表明均未引起任何刺激反应。通过此试验结果可以得出该金蝉花药妆品的安全性都很高,对人体皮肤未引起不良反应。具体数据如表4所述。

表4、金蝉花药妆品对大白兔皮肤敏感性测验

PDII(皮肤刺激指数)=红斑平均分+3只兔子平均分

人体皮肤斑贴结果表明膏霜作用后,均未引起任何刺激反应。通过此试验结果可以得出该药妆品的安全性都很高,对人体皮肤未引起不良反应。

5、将上述实施例1所得的金蝉花药妆品进行如下质量检测:

(1)微生物检验

对金蝉花药妆品进行琼脂糖培养基检验微生物污染,结果显示细菌、霉菌和酵母菌总数为<103cfu/mL,没有检出大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌,证明膏霜有较好的防腐效果,可安全使用,不会对人体造成微生物感染。

(2)流变学检测

在热冷循环过程中,显示很好的物理和化学稳定性,膏体细腻、均匀一致、无变色发生。离心无分层、泛粗现象出现。

本发明的产品根据上述检测方法得知:本发明美白、保水保湿效果明显,本发明严格按照国际药妆品标准规定的各项检测指标的要求,对金蝉花药妆品进行安全性评价和质量检测,微生物污染检测符合国际药妆品标准。

实施例2~实施例7、改变实施例1中各项成分的含量(如下表5所述),其余等同于实施例1。

表5

当金蝉花药妆浓度为20mg/mL,实施例1~实施例7的对酪氨酸酶抑制率如下表6所述。

表6

对酪氨酸酶抑制率 对酪氨酸酶抑制率 实施例1 84.2% 实施例5 72.5% 实施例2 43.8% 实施例6 76.6% 实施例3 54.9% 实施例7 84.1% 实施例4 61.4%

对比例1-1、将实施例1中的将B相原料加热到“85℃”改成“100℃”,其余等同于实施例1。

对比例1-2、将实施例1中的将B相原料加热到“85℃”改成“70℃”,其余等同于实施例1。

对比例2、将实施例1步骤二的“乳化”改成如下内容:将表3中的所有成分混合后,用均质机高速(600r/min)搅拌30min。其余等同于实施例1。

对比例3、以实施例1“过滤步骤所得的金蝉花浸提液”替代“精滤步骤所得的金蝉花提取液”作为金蝉花活性成分;其余等同于实施例1。

当金蝉花药妆浓度为20mg/mL,上述对比例的对酪氨酸酶抑制率如下表7所述。

表7

对酪氨酸酶抑制率 对比例1-1 76.5% 对比例1-2 81.7% 对比例2 78.4% 对比例3 76.7%

最后,还需要注意的是,以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例。显然,本发明不限于以上实施例,还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形,均应认为是本发明的保护范围。

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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 (10)授权公告号 (45)授权公告日 (21)申请号 201610082170.8 (22)申请日 2016.02.05 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 105726439 A (43)申请公布日 2016.07.06 (73)专利权人 浙江理工大学 地址 310018 浙江省杭州市下沙高教园区2 号大街5号 (72)发明人 孙延芳 孙杨 梁宗锁 刘洪涛 吕洪飞 李春如 张忠亮 李静 (74)专利代理机构 杭州中成专利事务所有限公 司 33212 代理人 金祺 (51)Int.Cl. A61K 8/98(2006.0。

2、1) A61K 8/9728(2017.01) A61K 8/92(2006.01) A61K 8/44(2006.01) A61K 8/73(2006.01) A61K 8/81(2006.01) A61Q 19/00(2006.01) A61Q 19/02(2006.01) (56)对比文件 CN 102240259 A,2011.11.16,全文 CN 104771349 A,2015.07.15,全文 CN 105078876 A,2015.11.25,说明书第7段 以及第11段,第3段 审查员 张溢 (54)发明名称 金蝉花美白保湿药妆品及其制备方法 (57)摘要 本发明公开了一种金。

3、蝉花美白保湿药妆品, 该金蝉花药妆品由以下质量含量的成分组成: 金 蝉花提取液8, 天然植物性油脂6, 螯合剂 0.050.1, 保湿剂3, 助乳化剂5, 增稠剂 0.5, 香气调节剂01, 甘油5.0, 去离子水 余量。 本发明还同时公开了上述金蝉花美白保湿 药妆品的制备方法。 采用本发明的方法能尽可能 的保留金蝉花有效成分、 充分发挥金蝉花的价 值。 权利要求书1页 说明书13页 附图2页 CN 105726439 B 2018.08.21 CN 105726439 B 1.金蝉花美白保湿药妆品, 其特征是该金蝉花药妆品由以下质量含量的成分组成: 金蝉花提取液8、 杏仁油4、 茶籽油2、 。

4、质量浓度为0.1的EDTA溶液0.05、 燕麦 -葡聚糖3.0、 Sepigel 305 5、 卡波940 0.5、 玫瑰油1、 甘油5.0, 去离子水, 余 量; 金蝉花提取液的制备方法为包括以下步骤: 1)、 前处理: a.金蝉花原料要求: 每年六七月份, 采收带有孢子粉的金蝉花全株; b.杀菌: 先把金蝉花洗干净, 紫外线杀菌, 低温烘干直至含水率10, 得干燥金蝉花原料; c.粉碎: 先将干燥金蝉花原料粉碎至过60目筛, 然后采用超微粉碎技术进行精细粉碎至过500 目筛, 得精细粉料; 2)、 萃取: 将体积浓度50酒精和精细粉料, 按照固液比为1g/68ml, 于室温下采用超声提取 。

5、0.51小时, 得到金蝉花萃取液; 3)、 过滤: 对金蝉花萃取液进行真空抽滤, 旋转蒸发仪浓缩至为原体积的1/3, 得到金蝉花浸提 液; 4)、 精滤: 将步骤3)所得的金蝉花浸提液, 进一步经过微孔过滤器进行精细过滤, 得金蝉花提取 液。 2.如权利要求1所述的金蝉花美白保湿药妆品的的制备方法, 其特征是包括如下步骤: 一、 乳化: 由去离子水、 甘油、 质量浓度为0.1的EDTA溶液、 燕 麦 -葡聚糖组成了A相原料, 以杏 仁油、 茶籽油为B相原料, 以Sepigel 305为C相原料, 由金蝉花提取液、 卡波940组成了D相原 料, 以玫瑰油为E相原料; 将A相原料加热到8090, 。

6、搅拌至均匀混合; 将B相原料加热到8090, 中速搅拌至均匀混合, 然后迅速加入到上述均匀混合的A 相原料中, 均质机保温搅拌1020min后, 冷却至5565; 继续加入C相原料, 均质机高速 保温搅拌至均匀混合; 待温度降至3040加入E相原料, 均匀搅拌混合; 二、 灌装包装: 将步骤一所得的乳化物调节pH值为5.56.2, 真空灌装, 得到金蝉花美白保湿药妆品。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 105726439 B 2 金蝉花美白保湿药妆品及其制备方法 技术领域 0001 本发明涉及一种药妆品及其制备方法, 尤其是涉及一种金蝉花药妆品及其制备方 法, 属于药用植物加工领域。。

7、 背景技术 0002 药妆品(Cosmeceutical)英文名称是由Cosmetics及药品(Pharmaceuticals)二词 组合而成, 意思是具有药物性质的化妆品。 1961年美国美容化学家协会的创始人Albert Kligman提出了 “药妆” 的概念, 认为药妆品是 “介于药物和化妆品之间的制品” 。 与普通化妆 品的区别主要有: 药妆品以医学药理理论为指导, 其配方依据医学思想, 尽力精简, 不含或 尽量少含色素、 香料、 防腐剂甚至表面活性剂, 而有效成分的含量较高、 针对性强, 功效显 著; 化妆品仅仅是对皮肤的基础护理, 具有保护和清洁皮肤等作用, 而药妆品是针对皮肤问 。

8、题和皮肤健康需求而设计的, 具有修复皮肤屏障、 清除自由基、 抑制酪氨酸激酶活性, 降低 刺激原等作用。 药妆品是介于药品和化妆品之间, 具有修复、 辅助药品的效果, 刺激性小于 药品, 安全性高, 产生过敏和刺激反应的概率比较低, 所以药妆品的主要用途是美容、 护肤 和促进皮肤健康, 解决轻微的肌肤问题。 0003 金蝉花(Vegetable cicada)简称蝉花、 大虫草等, 在生物学分类中属于虫生真菌; 在目前全世界发现的530多种虫草中, 金蝉花、 冬虫夏草仅仅是其中的两种; 我国药食两用 的虫生真菌最为常见的有冬虫夏草、 金蝉花、 僵蚕等, 它们是一种外形具有 “动物” 和 “植物。

9、” 形态特征。 蝉花的形成过程是蝉的幼虫在蝉羽化前被虫草菌感染、 寄生, 当气候环境适宜 时, 吸收虫体的营养转化成菌丝体, 最终虫体被菌丝体完全占具而只剩下一个躯壳。 万物复 苏时节, 菌丝体又从营养阶段逐渐转化为有性阶段具有繁殖功能的蝉花孢子粉, 渐从顶端 分枝发芽, 形似花朵, 故而称为蝉花。 蝉花是麦角菌科真菌蝉拟青霉寄生竹蝉若虫后的复合 体, 是与冬虫夏草相类似的虫草。 早在3000年前, 古籍就记载了金蝉花, 也是我国发现最早 的虫生真菌, 在我国三大虫生真菌(金蝉花、 冬虫夏草及僵蚕)中, 金蝉花的记载较冬虫夏草 早800年。本草图经 、雷公炮炙论 、证类本草 、中药大辞典 等医。

10、药书籍均有记载, 南 北朝时期雷斅其经典论著 雷公炮灸论 中记载 “蝉花, 凡使, 要白花全者。 收得后于屋下东 角悬干, 去甲土后, 用浆水煮一日, 至夜焙干, 研细用之, 有奇效。 ” , 这也是关于金蝉花最早 的文字记载。 它是我国最为古老的名贵稀有虫生真菌中药材, 药用价值很高, 由于其无毒且 具有上乘的滋补强身、 延年益寿、 养颜美容功效, 一直作为皇家贡品由帝王之家享用。 0004 金蝉花的功效作用, 历代名医各有论述, 具体如下: 0005 南北朝(公元五世纪)雷斆 雷公炮炙论 记载: 凡使, 要白花全者。 收得后于屋下东 角悬干, 去甲土后, 用浆水煮一日, 至夜, 焙干, 碾。

11、细用之。 0006 隋唐甄权的 药性论 记载: 其蜕壳, 头上有一角, 如冠状, 谓之蝉花, 最佳。 味甘寒, 无毒。 主小儿天吊, 惊痫瘈, 夜啼心悸。 0007 宋朝苏颂 图经本草 中告知: 今蜀中有一种蝉, 其蜕壳头上有一角, 如花冠状, 谓 之蝉花。 说 明 书 1/13 页 3 CN 105726439 B 3 0008 宋代唐慎微 经史证类备急本草 记载: 蝉花, 所在皆有, 七月采, 生苦竹者良, 花出 土上。 0009 明朝李时珍 本草纲目 记载: 蝉花可治疗惊痫, 夜啼心悸, 功同蝉蜕。 0010 除上述经典医药论著外, 还有不少古代医学家专著记载了蝉花的复方, 如宋代 圣 。

12、济总录小儿药证直诀 等。 0011 金蝉花作为美容养颜的药方很早就有记载,神农本草经 记载 “减黑黚, 令人面色 好” 。 中医药书介绍说, 蝉花含有大量甲壳质和氮等, 其功能有降低横纹肌紧张度, 并对神经 节有阻断作用。 金蝉花具有养颜美容的功效, 现代科学研究表明, 金蝉花富含碱性多糖, 蛋 白质、 氨基酸、 虫草素, 核苷类、 虫草酸、 超氧化物歧化酶SOD、 维生素类及钙、 铁、 磷、 硒等微 量元素等, 可以通过口服吸收, 金蝉花还能促进伤口愈合, 可外用于修复受损皮肤。 0012 具体而言, 金蝉花具有如下功效: 0013 A、 金蝉花多糖对皮肤的功效: 0014 金蝉花碱性多糖具。

13、有抗菌、 消炎功效、 增强细胞免疫活性的功能。 首先, 多糖具有 较强的保湿功能, 其原理是多糖分子中的羟基、 羧基等多种极性基团与水分子形成氢键而 结合大量水分子, 同时多糖分子链相互交织成网状, 与水氢键结合, 起到强保水作用。 此外, 在胞外基质中, 金蝉花多糖与皮肤中的多糖组分及纤维状蛋白质共同组成富含水分的胞外 胶状基质, 为皮肤提供水分, 且多糖具有良好的成膜性能, 可在皮肤表面形成一层均匀的薄 膜, 减少皮肤表面的水分蒸发, 使得水分从皮肤基底组织弥散到角质层, 诱导角质层进一步 水化, 达到深层润肤作用。 此外, 金蝉花多糖具有抑菌、 消炎、 增强细胞免疫活性, 外用可抵 御细。

14、菌对皮肤的侵害和抗干燥综合症等作用, 并促进皮肤表皮损伤的修复。 可见, 金蝉花多 糖对皮肤具有保水、 修复、 抗炎等多种功效。 蝉拟青霉总多糖有杀虫和较强的抗紫外辐射作 用。 蝉拟青霉总多糖是一种良好的自由基清除剂或自由基反应抑制剂。 中医理论认为, 金蝉 花为寒性, 适合特热人群, 是滋阴圣品, 而皮肤滋长暗疮、 粉刺、 痘痘等多为阴虚火旺所致, 故金蝉花可用于解决上述皮肤问题。 0015 B、 金蝉花氨基酸对皮肤的功效: 0016 金蝉花性味甘淡微咸, 与其氨基酸组成特性有关, 其含有18种氨基酸, 其中人体必 需的8种氨基酸所占比例高达43.2。 金蝉花所含游离氨基酸可促进皮肤营养和免。

15、疫活性, 调节水分酸碱平衡, 可改善敏感性皮肤的抗敏能力, 防止皱纹发生, 激活皮肤细胞超氧化物 岐化酶活性, 祛除皮肤细胞过剩的自由基, 有效延缓皮肤衰老; 激活巨噬细胞的吞噬功能。 增强淋巴系统的排毒、 解毒功能, 有效阻断外界有害物质对皮肤的侵害; 提高皮肤抗过敏能 力, 并对体内有害物质及老化细胞分解排泄。 0017 C、 金蝉花虫草酸的主要功能: 0018 虫草酸是金蝉花的主要活性之一, 虫草酸能抑制各种病菌的成长, 抗组织纤维化, 抗脂质过氧化, 能够有效保护细胞。 虫草酸含量的高低是衡量虫草质量的主要标准之一, 一 般认为虫草酸含量高的虫草的药用价值高, 金蝉花中的的虫草酸为70。

16、.6mg/g, 比冬虫夏草 35.4mg/g高1.99倍。 0019 D、 金蝉花叶酸的主要功能: 0020 叶酸是多种B族维生素的复合体, 是人体新陈代谢的重要中间传递体, 参与遗传基 质去氧核糖核酸(DNA)及核糖核酸(RNA)的合成, 参与氨基酸的代谢, 参与血红蛋白及甲基 说 明 书 2/13 页 4 CN 105726439 B 4 化合物的合成。 金蝉花叶酸的含量为210ug/100g, 比冬虫夏草23.0ug/100g高9.13倍。 0021 E、 金蝉花维生素E的主要功能: 0022 金蝉花维生素E的含量为5300ug/100g, 比冬虫夏草37ug/100g高143.24倍。。

17、 0023 维生素E具有抗氧化作用, 从而保护了皮脂和细胞膜蛋白质及皮肤中的水分; 它还 能促进人体细胞的再生与活力, 推迟细胞的老化过程。 此外, 还能促进人体对维生素A的利 用; 可与维生素C起协同作用, 保护皮肤的健康, 减少皮肤发生感染; 对皮肤中的胶原纤维和 弹力纤维有 “滋润” 作用, 从而改善和维护皮肤的弹性; 能促进皮肤内的血液循环, 使皮肤得 到充分的营养与水分, 以维持皮肤的柔嫩与光泽; 还可抑制色素斑、 老年斑的形成, 减少面 部皱纹及洁白皮肤, 防治痤疮。 0024 F、 金蝉花硒的主要功能: 0025 金蝉花孢子粉中富含硒, 高达377ug/100g, 而冬虫夏草未检。

18、测出硒。 现代药理证 明, 硒抗氧化抗衰老, 其抗氧化能力是维生素的500倍, 硒在整个细胞中对肌体代谢活动中 产生的过氧化物进行还原作用, 保护细胞膜结构免受过氧化物损害。 0026 硒被称为 “天然解毒剂” , 原理是硒作为带负电荷的非金属离子, 在生物体内可以 与带正电荷的有害金属离子相结合, 形成金属-硒-蛋白质复合物, 把能诱发癌变的金属离 子排除体外, 降低金属离子的毒性, 从而发挥排毒和解毒的作用。 0027 目前也有将金蝉花应用到护肤品上的报道, 如公开日为2015年07月15日, 公开号 为CN104771349A的中国专利中, 公开了一种含有植物提取物的护肤品及其制备方法,。

19、 该护 肤品原料为金蝉花提取物(1-4份), 铁皮石斛提取物(1-5份), 绞股蓝提取物(2-7份), 薰衣 草提取物(2-6份), 迷迭香提取物(2-6份), 霍霍巴提取物(2-8份), 护肤品膏体90-97份, 把 植物提取物加入到乳化后的原料中搅拌均匀即可。 该方法所述的提取物成分不明确, 而且 提取物之间的作用也无法了解, 究竟是哪种提取物发挥作用也无法得知, 金蝉花提取物发 挥什么作用也不明确, 而且得到的护肤品没有对其效果和质量进行检测, 无法将后期产品 进行产业化生产。 0028 目前通常采用超声醇提的方法可对金蝉花有效成分进行高效提取, 传统的煎煮提 取方法会导致金蝉花中多糖、。

20、 维生素、 氨基酸、 活性酶等有效成分的破坏, 所得产品中的多 糖、 维生素、 叶绿素、 游离氨基酸等含量较低, 大大降低了金蝉花的利用率。 现在还没有一种 能够保留金蝉花中有效成分的金蝉花药妆品及其制备方法。 发明内容 0029 本发明要解决的技术问题是提供一种尽可能的保留金蝉花有效成分、 充分发挥金 蝉花价值的金蝉花美白保湿药妆品及其制备方法。 0030 为了解决上述技术问题, 本发明提供一种金蝉花美白保湿药妆品, 该金蝉花药妆 品由以下质量含量的成分组成: 0031 金蝉花提取液(金蝉花有效活性成分) 8 0032 天然植物性油脂 6 0033 螯合剂 0.050.1 0034 保湿剂 。

21、3 0035 助乳化剂为 5 说 明 书 3/13 页 5 CN 105726439 B 5 0036 增稠剂为 0.5 0037 香气调节剂 01 0038 甘油 5.0 0039 去离子水, 余量。 0040 作为本发明的金蝉花美白保湿药妆品的改进: 0041 金蝉花提取液的制备方法为: 将干燥(含水率10)金蝉花原料(野生金蝉花原 料)粉碎后; 采用超声(60kHz的超声频率)醇提工艺, 于室温下醇提0.51小时; 所述醇是体 积浓度为50的乙醇, 料液比1g/68ml; 0042 醇提所得物经过滤、 浓缩, 得到金蝉花提取液。 0043 作为本发明的金蝉花美白保湿药妆品的进一步改进: 。

22、0044 6的天然植物性油脂由4杏仁油和2茶籽油组成; 0045 螯合剂为质量浓度为0.1的EDTA溶液、 或质量浓度为0.1的EDTA-2Na溶液; 0046 保湿剂为燕麦 -葡聚糖; 0047 助乳化剂为Sepigel305; 0048 增稠剂为Carbolpol 940; 0049 香气调节剂为玫瑰油(玫瑰精油)。 0050 本发明还同时提供了上述金蝉花美白保湿药妆品的的制备方法, 其特征是包括如 下步骤: 0051 一、 金蝉花提取液的制备: 0052 1)、 前处理: 0053 a.金蝉花原料要求: 0054 每年六七月份(是金蝉花出土的季节, 也是采收金蝉花的最佳时间), 采收带有。

23、孢 子粉的金蝉花全株; 0055 b.杀菌: 0056 先把金蝉花洗干净(最好把上面的壳剥掉), 紫外线杀菌(10min), 低温烘干(45 低温热风干燥约24h)直至含水率10, 得干燥金蝉花原料; 0057 c.粉碎: 0058 先将干燥金蝉花原料粉碎至过60目筛(即, 得到粒度为60目的粗粉), 然后采用超 微粉碎技术进行精细粉碎至过500目筛, 得精细粉料(过筛得到粒径25微米的粉料); 0059 2)、 萃取: 0060 将体积浓度50酒精和精细粉料(即, 精细粉碎的金蝉花粉末), 按照固液比为1g/ 68ml, 于室温下采用超声(60kHz的频率)提取0.51小时, 得到金蝉花萃取。

24、液(醇提所得 物); 0061 3)、 过滤: 0062 对金蝉花萃取液进行真空抽滤, 旋转蒸发仪浓缩(50)至为原体积的1/3, 得到金 蝉花浸提液; 0063 4)、 精滤: 0064 将步骤3)所得的金蝉花浸提液, 进一步经过微孔过滤器(过滤孔径为0.22微米)进 行精细过滤, 得金蝉花提取液(金蝉花有效活性成分)。 说 明 书 4/13 页 6 CN 105726439 B 6 0065 二、 乳化(配方如上所述): 0066 由去离子水、 甘油、 螯合剂、 保湿剂组成了A相原料, 以天然植物性油脂为B相原料, 以助乳化剂为C相原料, 由金蝉花提取液(金蝉花有效活性成分)、 增稠剂组成。

25、了D相原料, 以 香气调节剂为E相原料; 0067 将A相原料加热到8090, 搅拌至均匀混合(至完全溶解); 0068 将B相原料加热到8090, 中速搅拌至均匀混合(约1020min), 然后迅速加入 到上述均匀混合的A相原料中, 均质机保温(8090)搅拌1020min后, 冷却至5565; 继续加入C相原料, 均质机高速保温(5565)搅拌至均匀混合(约1020min); 待温度降 至3040加入E相原料, 均匀搅拌混合(搅拌均质); 0069 在本发明中, 高速搅拌的转速为550650r/min, 中速搅拌的转速为80120r/ min, 其余的没有明确告知的搅拌是指4060r/mi。

26、n的转速。 0070 三、 灌装包装: 0071 将步骤二所得的乳化物调节pH值为5.56.2(可用柠檬酸或者苹果酸进行调节), 真空灌装, 得到金蝉花美白保湿药妆品。 0072 在本发明中, 作为较佳案例的金蝉花面霜药妆品基本配方如表1所述。 0073 表1、 金蝉花面霜药妆品基本配方(W/W, ) 0074 0075 0076 在本发明中, 步骤4)的精滤具体可为: 0077 将进料管放至粗滤液(金蝉花浸提液)内, 启动高速管式离心机(转速为15000r/ 说 明 书 5/13 页 7 CN 105726439 B 7 min)和蠕动泵, 设定蠕动泵的转速为150250r/min, 开始离。

27、心过滤至新的药液储存罐; 过 滤器采用全密闭式过滤, 整个过程都在机体内完成, 对环境无无污染, 过滤采用微孔滤芯 (过滤孔径为0.22微米), 滤芯可重复使用, 过滤器可以实现滤渣的干排渣, 整个过滤过程可 实现全自动化操作; 经过精滤后得到的滤液为金蝉花提取液(金蝉花有效活性成分)该金蝉 花提取液中含有多糖, 蛋白质、 氨基酸、 虫草素, 核苷类、 虫草酸、 超氧化物歧化酶SOD、 维生 素类及钙、 铁、 磷、 硒等微量元素等有效活性成分。 0078 因此, 在本发明中, 金蝉花有效活性成分含有多糖, 蛋白质、 氨基酸、 虫草素, 核苷 类、 虫草酸、 超氧化物歧化酶SOD、 维生素类及钙。

28、、 铁、 磷、 硒等微量元素等; 金蝉花药妆品乳 化体系选择了水包油(O/W)型乳化体, 经验证明O/W型乳化体与人体皮肤亲和力好, 有利于 有效成分的吸收, 对活性物质保持稳定有一定的作用。 采用天然植物性油脂4杏仁油和 2茶籽油为油相体系。 水相主要为灭菌的去离子水。 EDTA(0.1EDTA-2Na)作为螯合剂; 保 湿剂为燕麦 -葡聚糖, 使皮肤细胞保持丰润, 有利于有效成分渗透吸收。 为保持乳化体的稳 定性, 助乳化剂为Sepigel305; 为调节药妆品的黏度和流动性, 以保证其稳定性、 增加产品 质感以及保持好的视觉和触觉感受, 增稠剂为Carbolpol 940; 对金蝉花药妆。

29、品香气进行调 配, 加入0-1玫瑰油作为其药妆的感官修饰剂等。 0079 本发明的产品完全采用天然无毒副作用的原料。 试验批量1kg/批, 真空灌装, 灌装 过程控制产品的装量, 正偏差在5以内。 包装采用独特的野生的金蝉花设计, 给人一种亲 近自然的视觉享受。 后期对金蝉花药妆品的功效和质量进行了严格的检验, 金蝉花美白保 湿药妆品流变学检测, 结果得出在热冷循环过程中, 显示很好的物理和化学稳定性, 膏体细 腻、 均匀一致、 无变色发生。 离心无分层、 泛粗现象出现。 使用该金蝉花药妆6个月后, 色差计 检测使用前后皮肤变化, 结果发现与对照相比, 使用金蝉花药妆使皱纹舒展, 皮肤美白效果。

30、 提高。 0080 在本发明中, 金蝉花药妆品的各项评价方法如下: 0081 一、 功效性评价: 0082 a.美白效果测定 0083 采用国际照明委员会(CIE)规定的色度系统(Lab色度系统)来测量药妆作用前后 皮肤颜色的改变, 评价金蝉花药妆品的美白效果。 0084 b.金蝉花药妆品对酪氨酸酶抑制活性 0085 酪氨酸酶是皮肤黑色素形成的关键限速酶, 通过测定抑制剂对酪氨酸酶的抑制率 来评价美白效果, 其原理为: 酪氨酸酶可催化机体内酪氨酸生成多巴色素, 其在紫外分光光 度计475nm处有最大吸收, 可通过测定生成多巴色素的量来计算酪氨酸酶抑制剂活性。 该方 法以酪氨酸为底物, 通过化学。

31、方法检验天然活性成分对酪氨酸酶活性抑制作用, 操作简便、 直观, 适用于最初的美白效果检测。 0086 表2、 酪氨酸酶活性抑制率反应体系 0087 溶剂ABCD L-酪氨酸0.50.50.50.5 金蝉花药妆000.50.5 酪氨酸酶0.500.50 说 明 书 6/13 页 8 CN 105726439 B 8 PBS1.01.50.51.0 总量2.02.02.02.0 0088 上面四组反应体系摇匀后分别在紫外分光光度计475nm处测定吸光度值, 其抑制 率T计算公式为: T(B-A)-(D-C)/(B-A)100 0089 c.金蝉花药妆品保水保湿特性评价 0090 考察金蝉花药妆对。

32、人永生化表皮细胞(HaCat)的作用, 用免疫印迹法分析金蝉花 药妆作用前后皮肤水通道蛋白-3(AQP3)变化, 分析金蝉花药妆品对水通道蛋白的调节作 用, 从分子生物学角度阐述金蝉花药妆品的保湿效果及机制。 0091 二、 金蝉花药妆品安全性评价 0092 a.皮肤过敏性试验 0093 Draize大白兔模型: 将大白兔背部脊柱两侧毛剪掉, 不损伤表皮, 去毛范围左、 右 各约5cm5cm。 将受试物0.5g直接涂在左侧皮肤上, 用纱布覆盖, 最后用胶布加以固定, 右 侧皮肤作为对照, 敷用时间72h, 分别观察皮肤1h, 24h, 48h, 72h反应。 按 欧盟化妆品安全性 评价方法 进。

33、行皮肤敏感性评价, 检验是否有红斑和水肿出现。 0094 人体皮肤斑贴试验: 在进行动物皮肤刺激性试验后, 继续进行人体皮肤斑贴试验。 选取志愿者10人, 将受试物0.5g均匀涂在外用胶贴上, 敷于志愿者洗净的右前臂弯处, 观察 24h内皮肤反应情况。 0095 b.蝉花药妆品作用后人体皮肤纹理度及弹性测试 0096 采用多功能皮肤图像分析系统、 皮肤弹性测试仪、 国际照明委员会(CIE)规定的色 度系统(Lab色度系统)分别检测药妆品对皮肤纹理度、 弹性、 保湿性的影响, 评价药妆品对 皮肤的抗皱、 弹性、 美白、 延缓衰老等多种功效。 0097 女性志愿者16名, 平均年龄25-40周岁,。

34、 每天使用2次, 按规定连续使用金蝉花药妆 品6周。 Skin visiometer SV 600在恒温恒湿(温度252, 湿度502)的环境下, 每次 测5个点, 每周一次, 以卡波姆(Placebo)做对照, 检测皮肤弹性参数、 纹理参数、 粗糙度参数 以及美白效果。 0098 三、 金蝉花面霜药妆品的质量检测 0099 a.流变学检测 0100 膏霜以3000rpm速度离心15min, 观察是否有分散情况。 药物稳定性试验箱进行耐 寒(-50)、 耐热(40-60)以及光照测验。 一个月后观察, 考察金蝉花药妆稳定性、 耐热、 耐温和光照。 0101 b.微生物污染检测 0102 按照欧。

35、盟药妆管理委员会规定的方法检验微生物, 具体规定为: 药妆品菌落总数 不得超过1000cfu/mL, 霉菌和酵母菌不得超过100cfu/mL, 大肠菌群、 绿脓杆菌, 金黄色葡萄 球菌等有害菌群不得检出。 0103 试验菌株: 大肠杆菌; 绿脓杆菌; 白色念珠菌; 金黄色葡萄球菌; 霉菌和酵母菌等6 种指示菌。 0104 具体步骤: 将培养24h的指示细菌和培养5天的指示酵母菌用50mmol/L PBS配制成 106cfu/mL菌悬液。 取待测样品1g,加入上述菌悬液1mL均匀混合20min。 随后50mmol/L PBS 进行梯度稀释, 分别接种于不同试验菌株的培养基平板上, 37培养24h。

36、后观察结果, 以无 说 明 书 7/13 页 9 CN 105726439 B 9 菌水代替样品作为空白对照。 0105 抑菌率(对照样品平均菌落数-试验样品平均菌落数)/对照样品平均菌落数 100; 0106 90抑菌率50, 表明产品有抑菌作用; 0107 抑菌率90, 表明产品有较强抑菌作用。 0108 本发明的技术优势为: 0109 1、 由于目前金蝉花产品多以内服为主, 而本发明结合金蝉花的历史记载和科学研 究理论基础, 来研发金蝉花药妆品, 本发明中的金蝉花药妆品拓展了金蝉花的应用领域, 更 为充分地发挥其价值。 0110 2、 本发明能尽可能的保留金蝉花有效成分, 拓展金蝉花应用。

37、领域, 充分发挥金蝉 花价值, 该金蝉花药妆品及其制备方法以野生金蝉花为原料进行超声醇提, 有效成分不易 被破坏, 所得产品中很好的保持了金蝉花的有效活性成分, 并且药妆品制作完全采用天然 原料, 后期对药妆品的功效和质量检测进行了研究, 使之符合欧美药妆品的标准, 从而开发 对人体健康适合国人的药妆品。 0111 综上所述, 本发明研发的以金蝉花为基本活性成分的药妆品, 分析皮肤问题产生 的原因和机理来设计符合国人肤质的化妆品, 同时结合体内外药理实验、 人体功效评价和 产品安全性检测, 保证产品安全性的同时, 具有功效显著的特点。 因此, 开展金蝉花药妆品 研究, 充分地发挥其市场应用价值。

38、, 对金蝉花产业的发展具有重要意义。 即, 本发明作用于 面部皮肤深层, 滋润保湿美白, 具有显著抗皱功效, 可广泛应用于润肤霜、 膏霜、 乳液、 面膜 及精华液等护肤药妆中。 0112 本发明的金蝉花美白保湿药妆品的用法和用量可参照常规美白保湿化妆品的用 法和用量。 附图说明 0113 下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细说明。 0114 图1金蝉花有效成分提取工艺图; 0115 图2为金蝉花药妆品研发工艺图; 0116 图3为金蝉花药妆品对人永生化表皮细胞水通道蛋白-3的调节作用图; 0117 图4是本发明实施例中金蝉花药妆品皮肤敏感性检测结果对比图(对大白兔进行 敏感性检测);。

39、 0118 图5是金蝉花药妆品对人体皮肤敏感性斑贴测验示意图。 具体实施方式 0119 实施例1、 一种金蝉花美白保湿药妆品, 依次进行以下步骤: 0120 一、 金蝉花提取液的制备: 0121 1)、 前处理: 0122 a.金蝉花原料要求: 0123 每年六七月份是金蝉花出土的季节, 也是采收金蝉花的最佳时间, 采收带有孢子 粉的金蝉花全株; 说 明 书 8/13 页 10 CN 105726439 B 10 0124 b.杀菌: 0125 先要把金蝉花洗干净, 最好把上面的壳剥掉, 紫外线杀菌10min, 低温烘干(45低 温热风干燥约24h); 得干燥金蝉花原料(含水率10); 012。

40、6 c.粉碎: 0127 在常温下将干燥金蝉花原料粉碎, 得到粒度为60目的粗粉; 然后采用超微粉碎技 术进行精细粉碎至过500目筛, 过筛得到粒径25微米的精细粉料。 0128 2)、 萃取: 0129 将50(体积)酒精和精细粉料(精细粉碎的金蝉花粉末), 固液比为1g/68ml, 采用绿色超声(60kHz的频率)于室温下提取30分钟, 得到金蝉花萃取液。 0130 3)、 过滤: 0131 对金蝉花萃取液进行真空抽滤, 旋转蒸发仪浓缩(50, 浓缩至为原体积的1/3)得 到金蝉花浸提液。 0132 4)、 精滤: 0133 将步骤3)所得的金蝉花浸提液, 进一步经过微孔过滤器(过滤孔径为。

41、0.22微米)进 行精细过滤, 得金蝉花提取液(金蝉花有效活性成分)。 0134 具体为: 将进料管放至粗滤液内, 启动高速管式离心机(转速为15000r/min)和蠕 动泵, 设定蠕动泵的转速为150250r/min, 开始离心过滤至新的药液储存罐; 过滤器采用 全密闭式过滤, 整个过程都在机体内完成, 对环境无无污染, 过滤采用微孔滤芯, 滤芯可重 复使用, 过滤器可以实现滤渣的干排渣, 整个过滤过程可实现全自动化操作; 经过精滤后得 到的滤液为金蝉花提取液(金蝉花有效活性成分)该金蝉花提取液中含有多糖, 蛋白质、 氨 基酸、 虫草素, 核苷类、 虫草酸、 超氧化物歧化酶SOD、 维生素类。

42、及钙、 铁、 磷、 硒等微量元素等 有效活性成分。 0135 二、 乳化: 0136 配方如表3所述。 0137 表3、 金蝉花面霜药妆品基本配方(W/W, ) 0138 说 明 书 9/13 页 11 CN 105726439 B 11 0139 0140 按照表3的金蝉花药妆品基本配方, 将A相原料加热到85, 搅拌至均匀混合(至完 全溶解); 将B相原料加热到85, 中速均匀搅拌(100r/min,20min), 然后迅速加入到上述A 相原料中, 均质机保温搅拌15min, 冷却至60, 继续加入C相原料, 立即均质机高速保温搅 拌(600r/min)10min至均匀; 待温度降至35加。

43、入E相原料, 搅拌均质。 0141 本发明中没有明确告知的搅拌是指的50r/min转速。 0142 三、 灌装包装: 0143 将步骤二所得的乳化物用苹果酸调pH值为5.56.2, 试验批量1Kg/批, 真空灌装, 得到金蝉花药妆品(金蝉花美白保湿药妆品)。 0144 该金蝉花药妆品的各项检测效果如下: 0145 1.美白效果 0146 使用该膏霜6个月后, 色差计检测使用前后皮肤变化, 结果发现与对照相比, 使用 膏霜使皱纹舒展, 皮肤美白效果提高。 0147 2.酪氨酸酶抑制活性 0148 当金蝉花药妆浓度为5.0mg/mL, 对酪氨酸酶抑制率为53.7; 当金蝉花药妆浓度 为10mg/m。

44、L, 对酪氨酸酶抑制率为72.5; 当金蝉花药妆浓度为20mg/mL, 对酪氨酸酶抑制率 为84.2, 从以上结果可以看出, 随着金蝉花药妆浓度的加大, 其抑制酪氨酸酶的活性越 强。 0149 备注说明: 金蝉花药妆浓度为5.0mg/mL, 即指将5.0mg金蝉花美白保湿药妆品(实 施例1制备而得)加入1mL去离子水进行稀释所得; 其余以此类推。 0150 3.保水保湿特性研究 0151 考察金蝉花药妆对人永生化表皮细胞(HaCat)的作用, 用免疫印迹法分析金蝉花 药妆作用前后皮肤水通道蛋白-3(AQP-3)变化。 人体永生化表皮形成细胞Hacat用于研究人 体皮肤水通道蛋白的表达, 水通道。

45、蛋白大小约为28kDa, 对表皮细胞的水通道蛋白AQP-3进 行Western blotting分析, 以 -actin为内参(对照), 通过SDS-PAGE聚丙烯凝胶电泳, 分析 金蝉花药妆品对水通道蛋白的调节作用。 0152 从图3可以看出, 不同浓度的金蝉花药妆作用人永生化表皮细胞(HaCat)结果表明 金蝉花药妆可很好的促进水通道蛋白-3(AQP-3)水平的表达, 从而从分子生物学角度说明 金蝉花药妆具有保水保湿作用。 0153 4、 将上述实施例1所得的金蝉花药妆品按照上述安全性评价进行检测, 所得结果 如下: 0154 图4, 5是本发明实施例中金蝉花药妆品皮肤敏感性检测, 对其进。

46、行大白兔和人体 皮肤斑贴测验, 结果表明均未引起任何刺激反应。 通过此试验结果可以得出该金蝉花药妆 说 明 书 10/13 页 12 CN 105726439 B 12 品的安全性都很高, 对人体皮肤未引起不良反应。 具体数据如表4所述。 0155 表4、 金蝉花药妆品对大白兔皮肤敏感性测验 0156 0157 PDII(皮肤刺激指数)红斑平均分+3只兔子平均分 0158 人体皮肤斑贴结果表明膏霜作用后, 均未引起任何刺激反应。 通过此试验结果可 以得出该药妆品的安全性都很高, 对人体皮肤未引起不良反应。 0159 5、 将上述实施例1所得的金蝉花药妆品进行如下质量检测: 0160 (1)微生。

47、物检验 0161 对金蝉花药妆品进行琼脂糖培养基检验微生物污染, 结果显示细菌、 霉菌和酵母 菌总数为103cfu/mL, 没有检出大肠杆菌、 金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌, 证明膏霜有较好 的防腐效果, 可安全使用, 不会对人体造成微生物感染。 0162 (2)流变学检测 0163 在热冷循环过程中, 显示很好的物理和化学稳定性, 膏体细腻、 均匀一致、 无变色 发生。 离心无分层、 泛粗现象出现。 0164 本发明的产品根据上述检测方法得知: 本发明美白、 保水保湿效果明显, 本发明严 格按照国际药妆品标准规定的各项检测指标的要求, 对金蝉花药妆品进行安全性评价和质 量检测, 微生物污染检测符。

48、合国际药妆品标准。 0165 实施例2实施例7、 改变实施例1中各项成分的含量(如下表5所述), 其余等同于 实施例1。 0166 表5 说 明 书 11/13 页 13 CN 105726439 B 13 0167 0168 当金蝉花药妆浓度为20mg/mL, 实施例1实施例7的对酪氨酸酶抑制率如下表6所 述。 0169 表6 0170 对酪氨酸酶抑制率 对酪氨酸酶抑制率 实施例184.2实施例572.5 实施例243.8实施例676.6 实施例354.9实施例784.1 实施例461.4 0171 对比例1-1、 将实施例1中的将B相原料加热到 “85” 改成 “100” , 其余等同于实 施例1。 0172 对比例1-2、 将实施例1中的将B相原料加热到 “85” 改成 “70。

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