技术领域
本发明涉及医疗器械和材料领域，具体涉及一种在体实时光敏感血液pH传 感器及其制备方法。
背景技术
现代医学的发展，特别是临床危重病人的抢救，需要对人体的各种参数，包 括血液pH值等进行长时间的微创实时检测。目前pH测量仪器主要以电极法为 原理，其与目前所使用检测器械，均存在着传感器和血液接触一定时间后，表面 被血小板等蛋白质粘附而造成失效的问题，在其他领域如生物反应器等应用的传 感器也存在着类似的生物污染的难题。
磷酸胆碱是生物细胞膜外层磷脂头部分的主要成分，含有磷酸胆碱基团的聚 合物已经被应用于生物医用材料和器械表面，可以有效地降低与体液如血液、泪 膜和尿液等接触时产生的异物反应。磷酸胆碱基团是极性的，它分子内部既有正 电荷也带有负电荷，而分子总体上是电中性的。它具有强烈的亲水性，可以有效 地降低蛋白质在其表面的可逆粘附。目前所报道的含有磷酸胆碱基团的聚合物主 要是由2-甲基丙烯酰氧乙基-2′-三甲胺乙基磷酸酯·内盐(MPC)与其他单 体共聚而形成的，MPC共聚物已经被应用于心脏支架、介入导管以及血液透析 膜等与人体血液直接接触的医疗器械表面，改善器械的血液相容性，减少凝血和 血液中蛋白质的粘附。但目前还没有这类聚合物应用于体内植入式电化学发光材 料的报道。
发明内容
本发明的目的是克服目前pH检测器械的缺陷，提供一种在体实时光敏感血 液pH传感器及其制备方法。
本发明在体实时光敏感血液pH传感器，由普通光纤1和涂布在光纤末端的 pH感受膜2构成。将此传感器，连接光源，使用荧光滤片，光电管接受装置， 可以装配小型的荧光pH测定仪。
所述的pH感受膜由高灵敏度的pH电化学发光物质和含有磷脂基团的聚合 物组成。
本发明将磷酸胆碱聚合物的高度生物相容性和抗蛋白质粘附性能与高灵敏 度电化学发光物质结合起来，制成具有抗生物污染效能的电化学发光传感器，用 于生物体内实时分析检测血液pH。
本发明在体实时光敏感血液pH传感器由电化学反应激发的化学发光，具有 高灵敏度，可用于血液pH的分析检测。将这种高灵敏度的电化学发光材料固定 到电极或光纤表面，可节约大量的昂贵试剂，简化操作和仪器结构，有利于扩大 仪器的应用范围。本发明与传统的pH仪器相比，具有在体实时连续测量，使用 寿命长，测量范围广，反应迅速，重复性好，性能稳定等优点。
本发明通过如下的制备方法和步骤实现：
1)将pH电化学发光物质在一定的溶剂中溶解
将BCECF溶解在甲醇中，BCECF/甲醛为3～5毫克/毫升；
2)在上述溶液中加入含有磷脂基团的聚合物溶液，混合均匀，每毫克BCECF 与10毫克共聚物溶于同一溶液中，过滤后，向所得溶液中加入水，搅拌均 匀，1.5～3微升水/10毫克共聚物；
3)将溶液涂布在光纤的端部，在70度烘箱中热处理5小时，将溶剂挥发， 形成2～3毫米厚的pH感受膜，制成在体实时光敏感血液pH传感器。
本发明适用于可在溶剂中溶解的pH电化学发光物质和磷脂聚合物。其中所 述的高灵敏度的电化学发光物质选自BCECF(2’，7’-双羧乙基-5(6)羧基荧光素葡 聚糖，2’，7’-Bis(carboxyethyl)-5(6)-carboxy-fluorescein-dextran)，HPTS(8-羟基芘 -1，3，6三磺酸三钠盐，8-hydroxypyrene 1，3，6，trisulfonic acid trisodium salt)，铕(III) 化合物或氯荧光素十八烷基醇酯。本发明优选BCECF。
所采用的含有磷脂基团的聚合物为2-甲基丙烯酰氧乙基-2′-三甲胺乙基 磷酸酯·内盐(MPC)与其他含有可聚合基团的单体的共聚物，该共聚物系2-甲 基丙烯酰氧乙基-2′-三甲胺乙基磷酸酯·内盐(MPC)与如下单体中的一种或 一种以上进行自由基共聚得到：丙烯酸或甲基丙烯酸烷基(甲基、乙基、丙基、 丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十二烷基、十六烷基、十八烷基) 酯，丙烯酸或甲基丙烯酸羟基乙酯，丙烯酸或甲基丙烯酸羟基丙酯，丙烯酸或甲 基丙烯酸乙二醇酯，丙烯酸或甲基丙烯酸乙二醇甲醚酯，丙烯酸或甲基丙烯酸聚 乙二醇酯，丙烯酸或甲基丙烯酸聚乙二醇甲醚酯，乙烯基吡咯烷酮，醋酸乙烯酯， 含有双键的硅烷偶联剂如γ-(甲基丙烯酰氧基)丙基三甲氧基硅烷，γ-(甲基 丙烯酰氧基)丙基三乙氧基硅烷等等。
附图说明
图1是pH传感器示意图，
其中1：光纤，2：pH感受膜。
图2是pH传感器的敏感性和重复性，
其中可以看出对pH敏感。
具体实施方式
实施例1
将30克MPC、68克甲基丙烯酸丁酯、2克γ-(甲基丙烯酰氧基)丙基三甲 氧基硅烷和0.1克引发剂AIBN溶入无水乙醇中，缓慢通入氩气1小时除氧。然 后置于70℃恒温水浴中，搅拌下反应24小时。反应完毕后，将溶液冷却至室温， 用大量正己烷沉淀提纯2次；在室温下将收集的沉淀物真空干燥24小时。得到 含有磷脂基团的共聚物90克。
将50毫克BCECF溶解在10毫升甲醇中，取0.4克上述含有磷脂基团的共 聚物溶于同一溶液中，过滤后，向所得溶液中加入20微升水，搅拌均匀后将溶 液涂布在光纤的端部，在70度烘箱中热处理5小时，将溶剂挥发，形成薄层的 pH感受膜，即得可用于测定血液或富含蛋白质溶液中溶解氧的抗生物污染光纤 传感器。
实施例2
将15克MPC、10克甲基丙烯酸聚乙二醇(分子量360)甲醚酯、10克甲基 丙烯酸乙二醇甲醚酯、63克甲基丙烯酸十二烷基酯、2克γ-(甲基丙烯酰氧基) 丙基三甲氧基硅烷和0.1克引发剂AIBN溶入无水乙醇/四氢呋喃(体积比50/50) 溶液中，缓慢通入氩气1小时除氧。然后置于70℃恒温水浴中，搅拌下反应24 小时。反应完毕后，将溶液冷却至室温，用大量正己烷沉淀提纯2次；在室温下 将收集的沉淀物真空干燥24小时。得到含有磷脂基团的共聚物92克。
将30毫克BCECF溶解在5毫升甲醇中，取0.2克上述含有磷脂基团的共聚 物溶于同一溶液中，过滤后，向所得溶液中加入10微升水，搅拌均匀后将溶液 涂布在光纤的端部，在70度烘箱中热处理5小时，将溶剂挥发，即得可用于测 定血液或富含蛋白质溶液pH值的抗生物污染光纤传感器。
本说明书中所说明和讨论的实施方案仅仅是用于向本领域的技术人员演示 发明人已知的使用本发明的最佳方式。说明书中的任何内容均不能认为是对本发 明范围的限定。可以对以上实施方案进行修改而不超出本发明的范围，通过以上 说明，这对于本领域的技术人员是显而易见的。因此应当理解，在权利要求书及 其等同物的范围内，可以与以上具体描述不同的方式实施本发明。