技术领域
本发明涉及食品加工技术领域，特别地，涉及一种软枣猕猴桃发酵乳及其制备方法。
背景技术
发酵乳制品营养全面、风味独特，比牛乳更容易被人体吸收利用，具体有以下功效：发酵过程中乳酸菌产生抗诱变化合物活性物质，具有抑制肿瘤发生的可能，可提高人体的免疫力；酸乳可降低血清胆固醇，预防心血管疾病；抑制肠道病菌的生长繁殖，对便秘和细菌性腹泻具有预防治疗作用；酸乳中产生的有机酸可促进胃肠蠕动和胃液的分泌；饮用酸乳可克服乳糖不耐症；对预防和治疗糖尿病、肝病也有一定疗效。但目前市场上销售的发酵乳制品维生素C含量很低，况且，随着生活节奏的快和生活压力的增大，营养不良和亚健康状态越来越多。迫切的需要多种原料复合而成的新型产品。
软枣猕猴桃味道独特鲜美，保健功效多，被誉为是野生果之王。富含多种活性成分，如维生素C，人体必需的8种氨基酸，黄酮类合物等。其中软枣猕猴桃中的维生素C含量非常高，每20g的软枣猕猴桃中的维生素C，相当一个成人一天的维生素需求量。但成熟的软枣猕猴桃不利于储存和运输，果实利用率很低。因此，制备出软枣猕猴桃发酵乳制品可以合理地解决上述问题。
发明内容
本发明目的在于提供一种维生素C含量较高，并可以提高菌体体内抗胃肠环境能力，有益于人体健康的软枣猕猴桃发酵乳制品，以解决技术问题。
为实现上述目的，本发明提供了一种软枣猕猴桃发酵乳及其制备方法。
一种软枣猕猴桃发酵乳，包括以下体积百分比含量的成分：
植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum WW) 1.5-3％
软枣猕猴桃汁 10-40％
脱脂乳培养基 余量。
所述的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum WW)的保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号；保藏日期为2016年8月29日；保藏编号为：CGMCC No.12852。
优选的，所述的软枣猕猴桃发酵乳，包括以下体积百分比含量的成分：
植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum WW) 2％
软枣猕猴桃汁 30％
脱脂乳培养基 余量。
一种软枣猕猴桃发酵乳的制备方法，包括以下步骤：
A、将软枣猕猴桃果用清水冲洗，加水将果子榨汁，再用纱布将得到的汁液过三遍，滤液在2000-3500rpm离心8-15min，移取果汁的上清液，用真空抽滤泵抽滤三遍，将滤液再2000-3500rpm离心8-15min，取上清液即软枣猕猴桃汁；然后用无菌滤膜在超净工作台内过滤除菌，放入冰箱内速冻备用；
B、将脱脂乳粉按150g/L的比例加水放入培养基中，混匀，115℃高压灭菌8-12min，得到脱脂乳粉培养基备用；
C、将软枣猕猴桃汁调至pH值7.0，过滤除菌后，加入灭菌的脱脂乳培养基中，混匀，备用；
D、将活化好的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum WW)菌体悬液，调节浓度107cfu/mL，然后在超净工作台下，接种于软枣猕猴桃汁脱脂乳培养基中，于培养箱中37-40℃培养5-8h，包装，灭菌。
优选的，所述的步骤A中，软枣猕猴桃果和水的加入量的质量比为(3-5)∶1。
优选的，所述的无菌滤膜的孔径为0.22μm。
本发明具有以下有益效果：本发明的软枣猕猴桃发酵乳，克服了成熟的软枣猕猴桃不利于储存和运输，果实利用率很低的缺点；制备出的软枣猕猴桃发酵乳制品主要成分为软枣猕猴桃发酵乳、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum WW)和脱脂乳粉，富含多种活性成分而具有抗氧化，防衰老，调节免疫，抗癌等重要的生理功能，可以提高益生菌的抗胃肠环境能力。
除了上面所描述的目的、特征和优点之外，本发明还有其它的目的、特征和优点。下面将对本发明作进一步详细的说明。
附图说明
图1：添加10％-30％软枣猕猴桃汁对菌株的生长影响图。
图2：添加30％-60％软枣猕猴桃汁对菌株的生长影响图。
图3：30％软枣猕猴桃汁对菌株耐受人工胃液能力的影响图。
图4：30％软枣猕猴桃汁对菌株耐受人工肠液能力的影响图。
具体实施方式
以下对本发明的实施例进行详细说明，但是本发明可以根据权利要求限定和覆盖的多种不同方式实施。
实施例1
一种软枣猕猴桃发酵乳，包括以下体积百分比含量的成分：
植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum WW) 2％
软枣猕猴桃汁 30％
脱脂乳培养基 余量。
一种软枣猕猴桃发酵乳的制备方法，包括以下步骤：
A、将软枣猕猴桃果用清水冲洗，加水将果子榨汁，再用纱布将得到的汁液过三遍，滤液在3000rpm离心10min，移取果汁的上清液，用真空抽滤泵抽滤三遍，将滤液再3000rpm离心10min，取上清液即软枣猕猴桃汁；然后用无菌滤膜在超净工作台内过滤除菌，放入冰箱内速冻备用；
B、将脱脂乳粉按150g/L的比例加水放入培养基中，混匀，115℃高压灭菌10min，得到脱脂乳粉培养基备用；
C、将软枣猕猴桃汁调至pH值7.0，过滤除菌后，加入灭菌的脱脂乳培养基中，混匀，备用；
D、将活化好的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum WW)菌体悬液，调节浓度107cfu/mL，然后在超净工作台下，接种于软枣猕猴桃汁脱脂乳培养基中，于培养箱中37℃培养8h，包装，灭菌。
所述的步骤A中，软枣猕猴桃果和水的加入量的质量比为4∶1。
所述的无菌滤膜的孔径为0.22μm。
实施例2
一种软枣猕猴桃发酵乳，包括以下体积百分比含量的成分：
植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum WW) 1.5％
软枣猕猴桃汁 10％
脱脂乳培养基 余量。
一种软枣猕猴桃发酵乳的制备方法，包括以下步骤：
A、将软枣猕猴桃果用清水冲洗，加水将果子榨汁，再用纱布将得到的汁液过三遍，滤液在3500rpm离心8min，移取果汁的上清液，用真空抽滤泵抽滤三遍，将滤液再3500rpm离心8min，取上清液即软枣猕猴桃汁；然后用无菌滤膜在超净工作台内过滤除菌，放入冰箱内速冻备用；
B、将脱脂乳粉按150g/L的比例加水放入培养基中，混匀，115℃高压灭菌12min，得到脱脂乳粉培养基备用；
C、将软枣猕猴桃汁调至pH值7.0，过滤除菌后，加入灭菌的脱脂乳培养基中，混匀，备用；
D、将活化好的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum WW)菌体悬液，调节浓度107cfu/mL，然后在超净工作台下，接种于软枣猕猴桃汁脱脂乳培养基中，于培养箱中38℃培养6h，包装，灭菌。
所述的步骤A中，软枣猕猴桃果和水的加入量的质量比为3∶1。
所述的无菌滤膜的孔径为0.22μm。
实施例3
一种软枣猕猴桃发酵乳，包括以下体积百分比含量的成分：
Lactobacillus plantarum WW(CGMCC No.12852) 3％
软枣猕猴桃汁 40％
脱脂乳培养基 余量。
一种软枣猕猴桃发酵乳的制备方法，包括以下步骤：
A、将软枣猕猴桃果用清水冲洗，加水将果子榨汁，再用纱布将得到的汁液过三遍，滤液在2000rpm离心15min，移取果汁的上清液，用真空抽滤泵抽滤三遍，将滤液再2000rpm离心15min，取上清液即软枣猕猴桃汁；然后用无菌滤膜在超净工作台内过滤除菌，放入冰箱内速冻备用；
B、将脱脂乳粉按150g/L的比例加水放入培养基中，混匀，115℃高压灭菌8min，得到脱脂乳粉培养基备用；
C、将软枣猕猴桃汁调至pH值7.0，过滤除菌后，加入灭菌的脱脂乳培养基中，混匀，备用；
D、将活化好的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum WW)菌体悬液，调节浓度107cfu/mL，然后在超净工作台下，接种于软枣猕猴桃汁脱脂乳培养基中，于培养箱中40℃培养5h，包装，灭菌。
所述的步骤A中，软枣猕猴桃果和水的加入量的质量比为5∶1。
所述的无菌滤膜的孔径为0.22μm。
以下为对比实施例，对本发明的各种制备条件进一步分析：
对比实施例1：凝乳试验
将活化好的菌悬液，调节浓度107cfu/mL。向脱脂乳培养基中，加入10％(v/v)的灭菌水。然后以2％(v/v)接种量分别接种于5mL脱脂乳培养基、5mL的10％(v/v)软枣猕猴桃汁脱脂乳培养基中，于培养箱中37℃培养，记录凝乳时间，观察凝乳效果。凝乳完全后取样，分别测定凝乳中pH。以此来初步判断软枣猕猴桃汁是否对菌株生长有影响。
表1：添加10％(v/v)软枣猕猴桃汁的凝乳效果
加入软枣猕猴桃汁后，凝乳时间大大缩短，凝乳效果也有明显改善。
对比实施例2：软枣猕猴桃汁添加量对菌株生长的影响
将活化好的菌悬液，以2％(v/v)接种量分别接种于基础MRS液体培养基中，3％(v/v)低聚果糖改良培养基，以及10％(v/v)、20％(v/v)、30％(v/v)、40％(v/v)、50％(v/v)、60％(v/v)软枣猕猴桃汁改良培养基中，混匀后于培养箱中37℃培养，并于6h，12h，18h，24h，30h，倾注法菌落计数。以此来探究不同添加量的软枣猕猴桃汁对菌株生长的作用，并确定最佳软枣猕猴桃汁促生长添加量。
基础MRS液体培养基(g/L)：葡萄糖20；蛋白胨10；牛肉浸膏8；无水乙酸钠5；磷酸氢二钾2；酵母浸粉4；柠檬酸钠2；七水硫酸镁0.58；四水硫酸锰0.25；吐温1。pH值6.2-6.4，121℃高压灭菌20min备用。
软枣猕猴桃汁改良培养基：将软枣猕猴桃汁调至pH值为6.4，过滤除菌后，加入灭菌的MRS液体培养基中，混匀，备用。
由添加10％-30％软枣猕猴桃汁对菌株的生长影响图(图1)可以知道，菌种接种于培养基中后，通过菌落计数将基础培养基与改良培养基的对比，我们发现改良培养基中的活菌数明显高于基础培养基。而且在10％-30％(v/v)范围内，随着添加软枣猕猴桃汁比例的增加，活菌数也一直在相应提高。说明软枣猕猴桃汁对菌体生长有一定的促进作用，提高了菌株的存活率。
确定10-30％(v/v)的软枣猕猴桃汁对菌体的生长有促进作用后，继续对比软枣猕猴桃汁添加量30％(v/v)，40％(v/v)，50％(v/v)，60％(v/v)对菌体生长的影响。
由添加30％-60％软枣猕猴桃汁对菌株的生长影响图(图2)数据显示，添加30％(v/v)，40％(v/v)软枣猕猴桃汁浓度后，作用效果相近，而当浓度添加至60％(v/v)时，活菌数开始有所下降。乳酸菌菌株在增殖过程中会消耗大量碳源氮源等营养物质，并产生乳酸，降低了培养体系中的酸度，酸度过低会抑制菌体的生长。当猕猴桃汁添加量过多，可能导致改良培养基中缺乏微生物繁殖所需氮源，调节pH的缓冲盐等必要成分，满足不了菌体的增殖所需。果汁浓度过大，也可能使培养基渗透压增加，细胞为维持内外渗透压而失水，也会抑制菌体的正常生长。最终确定，软枣猕猴桃汁促进菌体生长的最佳浓度为30％(v/v)。
对比实施例3：软枣猕猴桃汁对菌株耐酸和耐受人工胃肠液能力的影响
由30％软枣猕猴桃汁对菌株耐受人工胃液能力的影响图(图3)和30％软枣猕猴桃汁对菌株耐受人工肠液能力的影响图(图4)可以看出，软枣猕猴桃的加入可以提高益生菌菌体耐人工胃肠环境的能力。
软枣猕猴桃汁的添加，能够促进试验菌株分解利用糖类，从而产生更多的酸性代谢产物，降低pH，所以乳酸菌对酸度有着不同程度的固有耐受性。当乳酸菌暴露在酸性环境中，菌体逐渐适应酸度的期间，会伴随着一系列由外到内的调节机制。
关于乳酸菌的耐酸机制尚不完全明了，但目前主要提出了以下几种理论：在酸环境压力下，细胞膜最先暴露在酸环境中，在抗酸作用中发挥着重要的作用。乳酸菌细胞膜中不同脂肪酸含量会随外界酸度变化而改变，因而影响细胞膜的渗透性，阻断外界酸进入胞内来保护菌体；乳酸菌还可以通过促进自身酶作用来维持内外酸碱平衡，保护菌体不受酸环境压力的抑制。遇到酸胁迫时，菌体内的F0F1-ATP酶会变得更活跃，使分子跨膜动力增强，乳酸菌细胞质中的氢离子会经过跨膜运输作用，而被排除胞外；即便若菌体蛋白因为酸抑制而受到损伤，其自动修复功能会将蛋白及DNA进行部分复原，降低菌体的死亡率。而人体的胃肠环境呈酸性，软枣猕猴桃汁的添加，对菌体起到了一定的保护作用，增加了菌体的活性。所以，菌株对人工胃肠液的耐受力也随之增强。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。